NHỮNG KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG GIẢI PHẪU BỆNH BẠN CẦN BIẾT : I NHẬN BIẾT CÁC LOẠI BỆNH PHẨM : Đối chiếu tên ghi lọ đựng bệnh phẩm với tên ghi phiếu xét nghiệm giải phẫu bệnh lý Kiểm tra phiếu xét nghiệm giải phẫu bệnh lý phải có đủ yêu cầu sau: - Phần bệnh viện: + Hành + Sơ lược bệnh lý + Các xét nghiệm trước ( đặc biệt giải phẫu bệnh) - Phần bệnh phẩm: + Bệnh phẩm mô + Cách sinh thiết + Ngày cố định + Chất cố định - Phần mô tả đại thể Kiểm tra mô tả (hay hình vẽ mô tả) bác sĩ lâm sàng có đủ để người bác sỹ giải phẫu bệnh lý lưu ý đến tổn thương 3 Vào sổ khoa giải phẫu bệnh lý: Lần lượt cho mã số vào phần: - Sổ giải phẫu bệnh lý (sổ giải phẫu bệnh lý gồm: SST, mã số, tên, tuổi, bác sĩ điều trị, bệnh viện, ngày ký nhận) - Lọ, dụng cụ đựng bệnh phẩm - Biên lai thu nhận II CẮT LỌC BỆNH PHẨM Chuẩn bị: a Dụng cụ: - Vòi nước sạch: để rửa bớt dung dịch cố định hay chất cặn bã sót lại bệnh phẩm Chú ý: Túi mật nang buồng trứng không nên rữa nhiều dễ làm trốc lớp biểu mô - Thước mica: Đo kích thước bệnh phẩm - Dao: Phải thật sắc để tránh dập mô + Dao nhỏ: thường dùng dao phẫu thuật + Dao lớn: để xẻ mô lớn (tử cung, buồng trứng, dày) - Kéo: thường dùng kéo mayo để bốc tách mô sâu hay cắt vỏ bọc nang trứng, xẻ dọc ruột - Nhíp có mấu không mấu: để kẹp mô cắt gắp mô vụn - Cassette: để chứa bệnh phẩm sau cắt - Linh tinh: Formol 10%, amoniac để trung hòa bớt formol, thớt, xà phòng, bàn chải, sọt rác, xô vật dụng để lưu bệnh phẩm lại sau cắt lọc, b Người cắt lọc: trang, găng tay, áo … Tiến hành cắt lọc: Bước 1: Đối chiếu mã số, tên tuổi bệnh phẩm phiếu xét nghiệm giải phẫu bệnh lý Lưu ý: trước mô tả đại thể, nên cho bệnh phẩm qua dung dịch amoniac làm trung hòa bớt mùi formol Bước 2: Mô tả đại thể (của người bác sĩ giải phẫu bệnh lý) - Mô bệnh phẩm gì? Bệnh phẩm kèm theo Ví dụ: Dạ dày kèm theo mạc nối lớn - Quan sát đặc điểm hình thái, màu sắc bên - Đo cụ thể kích thước theo không gian chiều bệnh phẩm Lưu ý: + Lấy số đo lớn bệnh phẩm + Nếu bệnh phẩm xẻ phải lại ban đầu đo - Mô tả bệnh phẩm từ vào hay ngược lại Bề mặt trơn láng hay chồi sùi, tính chất dịch nang, màu sắc diện cắt Ví dụ: Nang buồng trứng, bề mặt trơn láng hay sần sùi, xẻ bên có dịch hay nhày kèm theo có tóc Xương răng… Lưu ý: · Ghi ngắn gọn, dễ hiểu, không viết tắt · Mô tả phải xác, rõ ràng, nên tập trung đánh giá vị trí tổn thương mối liên quan với vùng cạnh tổn thương · Tránh mô tả chi tiết cấu trúc giải phẩu bình thường Bước 3: tiến hành cắt: (chỉ nói phần nguyên tắc cắt lọc, cụ thể quan xem phần sau) - Cắt lọc bệnh phẩm phải đủ phần muốn lấy Ví dụ: + Mẫu cắt phải đại diện cho vùng quan mô bệnh phẩm + Vùng ranh giới mô lành mô bệnh hay vùng có hình thái mô học khác + Bổ sung thông tin cần thiết, ví dụ: polyp, xâm lấn,… - Mặt cắt phải sắc phẳng để đúc khối, mặt cắt phải nằm dưới, cắt lát mỏng, mặt tiếp với diện mỏng lấy hết toàn diện Động tác nhẹ nhàng tránh dập mô - Đối với mô bệnh phẩm lớn dùng dao xẻ dọc (mô đặc) dùng dao cắt ( mô tạng rỗng) mô tả phần tổn thương đến phần lành, đo kích thước vùng tổn thương bên hình thái, màu sắc Mỗi mẫu thường lấy với kích thước 3x0.2 cm - Các mẫu thử đặt cassette có mẫu giấy ghi mã số (nếu lấy nhiều phải ghi rõ lấy nơi nào, đánh số la mã để phân biệt) Ghi vào phiếu GPB số cassette mẫu bệnh phẩm, cassette có mô nhỏ - Bệnh phẩm ghi lại ngâm vào formol 10% lưu lại tháng, cần cắt lọc thêm - Sau cắt lọc benh phẩm phải rữa dụng cụ thật để tránh lẫn bệnh phẩm - Đối với tạng đặc cần phải cắt lát để xem tổn thương bên trong, không nên cắt rời để sau cần kiểm tra bệnh phẩm dễ dàng biết cắt vùng để cẩn mô KHỬ NƯỚC – LÀM TRONG SÁNG THẤM MÔ – CẨN MÔ Sau cắt lọc, cho mẫu mô vào cassette (cassette ghi mã số phiếu giải phẫu bệnh lý) KHỬ NƯỚC LÀM TRONG SÁNG MÔ – THẤM MÔ - Được thực máy dọn mô tự động (autotechnicon) theo nguyên tắc sau: Giai đoạn 1: Loại nước khỏi mô tế bào dung dịch Formol 10%, thời gian giai đoạn lâu (4 giờ) Giai đoạn 2: Loại formol 10% khỏi mô tế bào dung dịch alcool Giai đoạn 3: Sau loại Formol ra, mô ngấm Alcool, lúc mô teo ngắt lại, cứng, dễ vỡ Do ta phải loại Alcool Xilen Giai đoạn 4: Xilen mặt loại Alcool ra, mặt khác giúp “dọn đường”, tạo điều kiện dễ dàng cho parafin thấm nhập vào ngóc ngách mô làm cho mô có độ cứng vừa phải, tạo thuận lợi cho việc cắt mỏng sau Máy autotechnicon dọn mô mẫu mô vào dung dịch có sẵn ngăn theo nguyên tắc trên: Các dung dịch thứ tự là: Formol 10% Alcool 70% Alcool 80% Alcool 90% Alcool 95% Alcool 100% Trống Xilen Xilen 10 Parraffin 11 Parraffin Sau ngâm parraffin xong máy tự động ngưng Thời gian tổng cộng 16 Thực tế môn giải phẫu bệnh: Bắt đầu cho máy chạy lúc 15 30 sáng hôm sau máy tự động ngưng lúc 30 Còn ngày thứ sáu cuối tuần phải chỉnh thời gian dài thêm (vì ngày thứ hai tuần sau lấy mẫu mô ra) thời gian dài thêm xảy ngăn formol 10% Máy ngâm mô dd Formol 10% thêm 24 * Điều lại không tốt muốn nhuộm mô phương pháp hóa mô miễn dịch ngâm mô dung dịch formol 10% lâu làm hư hỏng nhiều kháng nguyên Thời gian tối đa cho phép cố định mô dung dịch formol 10% 24 CẨN MÔ (ĐÚC KHỐI) Mục đích Giữ mô khối sáp giúp dễ cắt mỏng mà không bị hỏng mô (cắt khối sáp máy vi thiết) Dụng cụ - Lò hấp Arthus Thomas, điều chỉnh nhiệt độ 400C, mục đích giữ sáp thể lỏng - Hai thỏi nhôm để tạo khung cho việc đúc khối - Đèn, cồn, dao, nhíp, giá nóng … Tiến hành - Lấy mẫu mô với giấy ghi mã số để lên giá nóng cho tan sáp mẫu mô mềm - Kế đến hai thỏi nhôm mặt kính Sắp xếp hai thỏi nhôm thành khung nhỏ hay to tùy theo kích thước mẫu mô - Đổ sáp vào gần đầy khung - Gắp mô vùi nhanh vào đáy khối sáp (mảnh giấy ghi mã số kèm với mô) Chú ý: - Khi vùi ý mặt cắt cho xem kính hiển vi phải thỏa điều kiện + Đại diện cho mẫu mô + Là ranh giới mô bệnh mô bình thường hay hai vùng có hình thái mô học khác - Sau chọn xong ta phải nhanh chóng áp mặt cắt xuống sát đáy khối sáp Nếu làm chậm thực việc cắt mỏng khó khăn - Đặt khối sáp vừa đúc vào tủ lạnh để sáp cứng lại Sau gỡ khung ra, cố định mã số vào khối sáp CẮT MỎNG Dụng cụ: - Máy vi thiết (Microtome) - Chậu nước có nhiệt độ 400C - Dung dịch Alcool ống nhỏ giọt - Lame tráng DD Albumin & Glycerine - Lò sấy - Bút chì Kỹ thuật cắt mỏng: Sau khối sáp đông cứng, ta cắt máy vi thiết lát mỏng từ 2-4 μm Ban đầu ta cắt vài lát toàn khối sáp mô trình diện hết, sau cắt – lát dán lên lame Dán lát cắt lên lame, nhỏ dung dịch alcool vào mép lát c để alcool loang lát cắt lame kính, sau nhúng nước Mục đích hai động tác để lát cắt giãn ra, căng mềm mại Sau ta vớt lên lame kính cho lát cắt nằm cân đối lame Ghi mã số bút chì lame Để lame kính lên lò sấy để sáp tan mẫu mô dán chặt vào lame Cuối cho lame vào khay để chuẩn bị nhuộm PHIẾU GIẢI PHẪU BỆNH Lần lượt cho mã số vào phần: *Số Giải phẫu bệnh *Lọ đựng bệnh phẩm *Biên lai thu bệnh phẩm I MÔ TẢ TỔNG QUÁT A Phần bệnh viện: - Hành - Sơ lược bệnh lý - Các xét nghiệm trước B Phần bệnh phẩm - Mô bệnh phẩm - Các sinh thiết - Chất cố định - Ngày cố định C Phần mô tả đại thể: Kiểm tra mô tả (hay hình vẽ mô tả) Bác sĩ lâm sàng có đủ để Bác sĩ giải phẫu bệnh lý lưu ý đến tổn thương II MÔ TẢ VI THỂ: Do Bác sĩ giải phẫu bệnh mô tả ghi theo mã số định III CHẨN ĐOÁN: Kết hợp chẩn đoán lâm sàng chẩn đoán vi thể [...]...- Hành chính - Sơ lược bệnh lý - Các xét nghiệm trước đó B Phần bệnh phẩm - Mô bệnh phẩm là gì - Các sinh thiết - Chất cố định - Ngày cố định C Phần mô tả đại thể: Kiểm tra sự mô tả (hay hình vẽ mô tả) của Bác sĩ lâm sàng có đủ để Bác sĩ giải phẫu bệnh lý lưu ý đến tổn thương II MÔ TẢ VI THỂ: Do Bác sĩ giải phẫu bệnh mô tả và ghi theo mã số quyết định III CHẨN ĐOÁN: