VANCOMYCIN HYDROCLORID Vancomycini hydrochloridum C66H75Cl2N9O24 HCl P.t.l: 1486,0 Vancomycin hydroclorid muối hydroclorid hỗn hợp glycopeptid có liên quan với nhau, chủ yếu dạng mono hydroclorid (3S,6R,7R,22R,23S,26S,aS,36R,38aR)-3-(2-amino-2-oxoethyl)-44-[[2-O(3-amino-2,3,6-trideoxy-3-C-methyl-α-L-lyxo-hexopyranosyl)-β-D-glucopyra-nosyl]oxy]-10,19-dicloro7,22,28,30,32-pentahydroxy-6-[[(2R)-4-methyl-2-(methylamino)penta-noyl]amino]-2,5,24,38,39-pentaoxo2,3,4,5,6,7,23,24,25,26,36,37,38,38a-tetradecahydro-22H-8, 11,18,21-dietheno-23,36-(iminomethano)13,16:31,35-dimetheno-1H,13H-[1,6,9]oxadiazacyclo-hexadecino[4,5-m] [10,2,16]benzoxadiazacyclotetracosin-26-carboxylic acid (vancomycin B) Vancomycin hydroclorid điều chế từ số loài Amycolaptosis orientalis phương cách khác Hoạt lực không 1050 IU/mg, tính theo chế phẩm làm khô Tính chất Bột trắng hoăc gần trắng, dễ hút ẩm Dễ tan nước, khó tan ethanol 96% Đònh tính A Kiểm tra sắc ký đồ thu phép thử giới hạn vancomycin B Thời gian lưu pic sắc ký đồ thu từ dung dòch thử (1) tương đương với thời gian lưu pic sắc ký đồ dung dòch đối chiếu B Chế phẩm phải cho phản ứng A phép thử đònh tính ion clorid (Phụ lục 8.1) Độ màu sắc dung dòch Hòa tan 2,5 g chế phẩm nước pha loãng thành 25 ml với dung môi Dung dòch thu phải (Phụ lục 9.2) Độ hấp thụ (Phụ lục 4.1) dung dòch đo bước sóng 450 nm không lớn 0,10 pH Hòa tan 0,50 g chế phẩm nước carbon dioxyd (TT) pha loãng thành 10 ml với dung môi pH dung dòch phải từ 2,5 đến 4,5 (Phụ lục 6.2) Vancomycin B Không 93,0% Xác đònh phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động A: Thêm 1996 ml nước vào 4,0 ml triethylamin (TT) chỉnh pH đến 3,2 với acid phosphoric (TT) Lấy 920 ml dung dòch vừa pha, thêm 10 ml tetrahydrofuran (TT) 70 ml acetonitril (TT) Pha động B: Thêm 1996 ml nước vào 4,0 ml triethylamin (TT) chỉnh pH đến 3,2 với acid phosphoric (TT) Lấy 700 ml dung dòch vừa pha, thêm 10 ml tetrahydrofuran (TT) 290 ml acetonitril (TT) Dung dòch thử (1): Hòa tan 10,0 mg chế phẩm pha động A pha loãng thành 5,0 ml với dung môi Dung dòch thử (2): Pha loãng 2,0 ml dung dòch thử (1) thành 50,0 ml pha động A Dung dòch thử (3): Pha loãng 0,5 ml dung dòch thử (2) thành 20,0 ml pha động A Dung dòch đối chiếu: Hòa tan 5,0 mg vancomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) ml nước pha loãng thành 10 ml với dung môi Đun nóng 65 oC 24 Để nguội Dùng dung dòch vòng sau pha chế Điều kiện sắc ký: Cột: cột thép không rỉ (0,25m x 4,6 mm), nhồi pha tĩnh C (5 µm) Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút Detector quang phổ hấp thu tử ngoại đặt bước sóng 280 nm Thể tích tiêm mẫu: 20 µl Cách tiến hành: Rửa giải cột khởi đầu với pha động A Sau 13 phút, tiến hành rửa giải gradient tăng dần nồng độ pha động B khoảng 11 % v/v cho phút Cuối cùng, rửa giải cột phút, pha động B Tiêm dung dòch thử (3) Phép thử có giá trò pic sắc ký đồ thu có giá trò tỉ số tín hiệu nhiễu/đường nhỏ Tiêm dung dòch thử (2) Phép thử có giá trò hệ số đối xứng pic vancomycin tối đa 1,6 Tiêm dung dòch đối chiếu Phép thử có giá trò độ phân giải pic 5,0 Tiêm dung dòch thử (1) Tính kết hàm lượng phần trăm vancomycin B hydroclorid theo công thức sau: Ab = diện tích pic vancomycin B sắc ký đồ dung dòch thử (2), At = tổng diện tích tất pic tạp chất sắc ký đồ dung dòch thử (1) Tạp chất liên quan Kiểm tra sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3), mô tả thử nghiệm vancomycin B Tiêm riêng rẽ dung dòch thử (1), dung dòch thử (2) dung dòch thử (3) Tính hàm lượng phần trăm cho tạp chất công thức sau: Ai = Diện tích pic tạp chất sắc ký đồ thu từ dung dòch thử (1), Ab = Diện tích pic vancomycin B sắc ký đồ thu từ dung dòch thử (2), At = Tổng diện tích tất pic tạp chất sắc ký đồ thu từ dung dòch thử (1) Hàm lượng chất tạp chất mô tả phải lớn 4,0 % hàm lượng tạp chất toàn phần không nhiều 7,0 % Không tính đến pic có diện tích nhỏ diện tích pic sắc ký đồ dung dòch thử (3) Kim loại nặng Không 30 phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Dùng 1,0 g chế phẩm thử theo phương pháp Dùng 3,0 ml dung dòch chì mẫu 10 phần triệu (TT) để chuẩn bò mẫu đối chiếu Nước Không 5,0 % (Phụ lục 10.3) Dùng 0,5 g chế phẩm tiến hành thử phương pháp bán vi đònh lượng Tro sulfat Không 1,0 % (Phụ lục 9.9) Dùng 1,0 g chế phẩm Độ vô trùng Nếu chế phẩm dự đònh dùng làm nguyên liệu để bào chế thuốc tiêm mà giai đoạn tiệt trùng qui trình sản xuất, chế phẩm phải đạt tiêu độ vô trùng (Phụ lục 15.4) Nội độc tố vi khuẩn Không 0,25 IU/mg (Phụ lục 13.2) Nếu dự đònh dùng làm nguyên liệu để bào chế thuốc tiêm phân liều mà giai đoạn loại bỏ nội độc tố vi khuẩn thích hợp qui trình sản xuất, chế phẩm phải đạt tiêu nội độc tố vi khuẩn Đònh lượng Tiến hành theo phương pháp xác đònh hoạt lực kháng sinh phương pháp thử vi sinh vật (Phụ lục 13.9) Dùng vancomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) làm chất đối chiếu Bảo quản Bảo quản chai lọ kín, tránh ánh sáng Nếu tiệt trùng trước, phải bảo quản chai lọ kín vô trùng Nhãn Nhãn ghi rõ chế phẩm tiệt trùng, nội độc tố vi khuẩn Tác dụng Kháng khuẩn Chế phẩm Thuốc tiêm, viên nang