BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ HOÀI THƢƠNG MÃ SINH VIÊN: 1101511 TRIỂN KHAI MÔ HÌNH GÂY HỘI CHỨNG CAI MORPHIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2016 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI TRẦN THỊ HOÀI THƢƠNG MÃ SINH VIÊN: 1101511 TRIỂN KHAI MÔ HÌNH GÂY HỘI CHỨNG CAI MORPHIN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Ngƣời hƣớng dẫn: TS Nguyễn Thùy Dƣơng DS Phạm Đức Vịnh Nơi thực hiện: Bộ môn Dƣợc lực HÀ NỘI - 2016 LỜI CẢM ƠN Bằng tất chân thành lòng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn tới TS Nguyễn Thùy Dương, DS Phạm Đức Vịnh ThS Nguyễn Thu Hằng, người thầy tận tụy, hết lòng quan tâm, hướng dẫn giúp đỡ suốt trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn DS Đinh Đại Độ KTV Nguyễn Thị Thủy, anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Dược lực trực tiếp tham gia giúp đỡ thời gian nghiên cứu Tôi xin gửi lời cảm ơn Đảng ủy, Ban giám hiệu, phòng Đào tạo môn, phòng ban khác Trường đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện cho thời gian học tập nghiên cứu Trong trình thực đề tài, nhận giúp đỡ, ý kiến đóng góp từ thầy cô anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Dược lực Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu Xin cảm ơn anh chị, bạn bè em nghiên cứu khoa học Bộ môn Dược lực đồng hành, hỗ trợ, động viên để hoàn thành khóa luận Cuối cùng, xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè bên cạnh, ủng hộ chia sẻ khó khăn, động viên thực khóa luận Hà Nội, tháng năm 2016 Sinh viên Trần Thị Hoài Thương MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan opioid 1.1.1 Định nghĩa phân loại opioid 1.1.2 Tác dụng opioid 1.2 Tổng quan hội chứng cai opioid 1.2.1 Dịch tễ 1.2.2 Định nghĩa dung nạp, lệ thuộc, nghiện thuốc hội chứng cai thuốc 1.2.3 Cơ chế dung nạp, lệ thuộc hội chứng cai thuốc 1.2.4 Biểu hội chứng cai opioid 1.2.5 Điều trị hội chứng cai opioid 10 1.3 Các mô hình gây hội chứng cai opioid động vật thực nghiệm 13 1.3.1 Phƣơng pháp gây lệ thuộc opioid 13 1.3.2 Các phƣơng pháp gây hội chứng cai opioid 15 1.3.3 Các phƣơng pháp đánh giá hội chứng cai opioid 15 CHƢƠNG II ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 20 2.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu 20 2.1.2 Phƣơng tiện nghiên cứu 20 2.2 Nội dung nghiên cứu 21 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Phƣơng pháp triển khai mô hình gây hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 22 2.3.2 Phƣơng pháp đánh giá tác dụng hỗ trợ điều trị hội chứng cai morphin thuốc Nhân Chính Khang 28 2.4 Phƣơng pháp xử lý số liệu 30 CHƢƠNG III THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 31 3.1 Triển khai mô hình gây hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 31 3.1.1 Khảo sát ảnh hƣởng thời điểm dùng chế độ liều naloxon lên biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 31 3.1.2 Khảo sát ảnh hƣởng chế độ liều morphin lên biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 34 3.2 Áp dụng mô hình để đánh giá tác dụng hỗ trợ điều trị triệu chứng cai morphin thuốc Nhân Chính Khang chuột nhắt trắng 37 CHƢƠNG IV BÀN LUẬN 45 4.1 Kết triển khai mô hình gây hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 45 4.1.1 Về ảnh hƣởng thời điểm dùng chế độ liều naloxon lên biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 47 4.1.2 Về ảnh hƣởng chế độ liều morphin lên biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng 49 4.2 Kết áp dụng mô hình xây dựng để đánh giá tác dụng hỗ trợ điều trị triệu chứng cai morphin chuột thuốc Nhân Chính Khang 51 4.2.1 Về lựa chọn diazepam dùng nghiên cứu 51 4.2.2 Về tác dụng hỗ trợ điều trị triệu chứng cai morphin thuốc Nhân Chính Khang 53 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT AC : Adenyl cyclase AMPv : Cyclic-AMP (AMP vòng) CREB : Cyclic-AMP response element-binding protein (protein liên kết phần đáp ứng với AMP vòng) GABA : Gamma amino butyric acid i.p : Intraperitoneally (tiêm màng bụng) LC : Locus coeruleus (nhân lục) MHPG : 3-methoxyl-4-hydroxyphenyleneglycol NA : Nucleus accumben (nhân vòng) NaCMC : Natri carboxymethyl cellulose NCK : Nhân Chính Khang PKA : Protein kinase A s.c : Subcutaneous (tiêm dƣới da) VTA : Vetral tegmental area (vùng chỏm não) DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Thang điểm Gellert & Holtzman 16 Bảng 2.1 Thang điểm quy đổi dựa theo thang điểm Gellert & 26 Holtzman Bảng 2.2 Chế độ liều khảo sát để gây lệ thuộc morphin 27 Bảng 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng thời điểm dùng naloxon 31 lên biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng Bảng 3.2 Kết khảo sát ảnh hưởng chế độ liều naloxon lên 32 biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng Bảng 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng chế độ liều morphin lên 35 biểu hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng Bảng 3.4 Ảnh hưởng thuốc NCK đến số lần nhảy chuột 38 gây hội chứng cai morphin Bảng 3.5 Ảnh hưởng thuốc NCK đến phần trăm giảm cân 40 chuột gây hội chứng cai morphin trước tiêm naloxon 2,5 sau tiêm naloxon Bảng 3.6 Ảnh hưởng thuốc NCK đến thời gian chăm sóc 42 thể chuột gây hội chứng cai morphin Bảng 3.7 Ảnh hưởng thuốc NCK đến tổng điểm Gellert & Holtzman chuột gây hội chứng cai morphin 44 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình 1.1 Lượng tiêu thụ morphin số nước giới năm 2008 Hình 1.2 Diễn biến trình cai nghiện opioid 10 Hình 2.1 Dụng cụ thí nghiệm 21 Hình 2.2 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 22 Hình 2.3 Quy trình thí nghiệm khảo sát chế độ liều naloxon 24 Hình 2.4 Quy trình thí nghiệm khảo sát chế độ liều morphin 27 Hình 2.5 Quy trình thí nghiệm đánh giá tác dụng hỗ trợ điều trị hội 29 chứng cai morphin thuốc NCK chuột nhắt trắng Hình 3.1 Ảnh hưởng thuốc NCK đến số lần run chuột 39 gây hội chứng cai morphin Hình 3.2 Ảnh hưởng thuốc NCK đến tỉ lệ xuất triệu chứng 41 tiêu chảy sa mí mắt chuột gây hội chứng cai morphin Hình 3.3 Ảnh hưởng thuốc NCK đến số lần khám phá chuột gây hội chứng cai morphin 43 ĐẶT VẤN ĐỀ Opioid chất đƣợc tìm thấy tự nhiên tổng hợp, có tác dụng giống morphin [2] Trên lâm sàng, opioid đƣợc dùng với mục đích giảm đau Trong năm gần đây, số lƣợng opioid dùng để điều trị đau mạn tính, đau không ung thƣ nhƣ đau lƣng viêm khớp dạng thấp tăng cao, có nguy nghiêm trọng chứng hiệu dài hạn việc dùng opioid không đầy đủ Việc điều trị opioid kéo dài dẫn đến lạm dụng, dung nạp, lệ thuộc nghiện thuốc Ƣớc tính năm 2010 giới có 15,4 triệu ngƣời lệ thuộc vào chất dạng thuốc phiện [22] Khi đột ngột dừng opioid dùng chất đối kháng opioid, hội chứng cai thuốc (drug withdrawal) xuất hiện, gây triệu chứng khiến ngƣời bệnh khó chịu nhƣ: vã mồ hôi, chảy nƣớc mắt, ngáp, cảm giác nóng lạnh, chán ăn, đau bụng, buồn nôn, nôn, tiêu chảy, run, ngủ, bồn chồn, đau, nhịp tim nhanh, tăng huyết áp [57] Các thuốc điều trị hội chứng cai opioid bao gồm: buprenorphin, methadon, naltrexon thuốc điều trị triệu chứng nhƣ diazepam, clonidin [25] Tuy nhiên, hạn chế lớn thuốc tác dụng phụ, khả gây lệ thuộc thuốc hội chứng cai thuốc ngừng điều trị đột ngột [57] Vì vậy, nhiều thuốc đƣợc nghiên cứu để khắc phục hạn chế trên, thảo dƣợc hƣớng tiềm mà nhà khoa học giới quan tâm tới [23], [38], [46] Ở Việt Nam, bên cạnh phƣơng pháp dùng thuốc không dùng thuốc để điều trị hội chứng cai thuốc, số phƣơng pháp y học cổ truyền đƣợc nghiên cứu phát triển Các thuốc Heantos, Bông sen, Cedemex đƣợc đƣa vào sử dụng có hiệu tốt hỗ trợ điều trị triệu chứng cai thuố [4] Để nghiên cứu phát triển thuốc nhƣ dƣợc liệu điều trị triệu chứng cai thuốc, nhiều mô hình gây hội chứng cai thuốc động vật thực nghiệm đƣợc xây dựng [29], [30], [38] Sau thời gian gây lệ thuộc, phƣơng pháp gây hội chứng cai thuốc đƣợc áp dụng bao gồm ngừng thuốc tự nhiên dùng chất đối kháng, sau áp dụng phƣơng pháp để đánh giá mức độ hội chứng cai thuốc Tùy thuộc vào chủng giống động vật điều kiện phòng thí nghiệm, quy trình đƣợc xây dựng với chế độ liều chất gây lệ thuộc, phƣơng pháp gây hội chứng cai thuốc nhƣ phƣơng pháp đánh giá khác Tại Việt Nam, nhóm nghiên cứu chƣa tìm đƣợc công bố xây dựng mô hình gây hội chứng cai thuốc động vật thực nghiệm để ứng dụng vào việc nghiên cứu phát triển thuốc hỗ trợ điều trị hội chứng cai thuốc Xuất phát từ thực tế trên, nhằm phát triển mô hình dƣợc lý nghiên cứu đánh giá lệ thuộc opioid đồng thời tạo điều kiện cho việc ứng dụng thuốc đông dƣợc hỗ trợ điều trị hội chứng cai opioid Việt Nam, đề tài đƣợc thực với mục tiêu sau: Triển khai đƣợc mô hình gây hội chứng cai morphin chuột nhắt trắng Áp dụng mô hình triển khai để đánh giá tác dụng hỗ trợ điều trị triệu chứng cai morphin thuốc đông dƣợc 50 nén morphin cấy dƣới da thời gian dài Một nguyên nhân khác ảnh hƣởng đến chủng giống chuột Đáp ứng hành vi cá thể chuột không giống chủng giống chuột ảnh hƣởng lớn đến triệu chứng nhảy hội chứng cai morphin [40] Đối với thông số tỉ lệ xuất tiêu chảy sa mí mắt nhóm chuột dùng chế độ 2, có tỉ lệ xuất cao hẳn so với chế độ Lý giải cho kết này, nhóm nghiên cứu đƣa giả thuyết ảnh hƣởng mức liều morphin đƣợc dùng trƣớc dùng chất đối kháng naloxon với chế độ 2, 90 mg/kg với chế độ 60 mg/kg Thông số thời gian chăm sóc thể số lần khám phá nhóm chuột dùng chế độ khác biệt Vì lý kết thông số chế độ nên không bàn luận chế độ liều Từ kết nhƣ trình bày trên, hƣớng đến giả thuyết khoảng thời gian gây lệ thuộc morphin không ảnh hƣởng tới biểu chăm sóc thể khám phá chuột Khi chuột đƣợc gây lệ thuộc morphin chế độ lần/ngày, tăng dần ngày liên tiếp (chế độ chế độ 2) cho thấy chế độ mức độ biểu hội chứng cai morphin rõ rệt chế độ Thiết kế cho thấy thời điểm dùng thời gian dùng chế độ giống nhau, có tổng liều chế độ (420 mg/kg) lớn chế độ (330 mg/kg) Nhóm nghiên cứu đƣa giả thuyết tổng liều morphin sử dụng có ảnh hƣởng đến mức độ biểu hội chứng cai chuột Khi so sánh chế độ chế độ 3, kết cho thấy thông số chính, lô chuột đƣợc dùng morphin chế độ có mức độ biểu hội chứng cai nhẹ so với lô chuột dùng chế độ (p