Bộ khoa học cộng nghệ Viện Dợc Liệu dự án sản xuất thử nghiệm cấp nhà nớc Hoàn thiện qui trình sản xuất Thuốc nhỏ mũi từ ngũ sắc M số KC10.DA07 Chủ nhiệm dự án: PGS TS Nguyễn Thợng Dong Sản phẩm khoa học công nghệ dự án KC10.DA07 5917-1 28/6/2006 Hà Nội, 2006 Trang /5 Số 01/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Quy trình chiết SP3 từ viện Dợc Liệu KHOa Công nghệ chiết xuất ngũ sắc (Bột khô SP3) Dạng dùng: Qui cách: Hạn dùng: Túi PE 10kg11 36 tháng Ngời biên soạn Ngày 15/10/2003 Ngời kiểm tra Ngày 15/10/2003 Ngời phê duyệt Ngày 15/10/2003 Viện Trởng KS Trơng Vĩnh Phúc DS Lã Thị Kim Oanh PGS.TS Nguyễn Thợng Dong Máy móc thiết bị: TT Tên máy Ký hiệu Số lợng Đặc điểm Công suất VN inox KW Máy xay Máy chiết đa Tour inox 2000 lít Máy cô màng mỏng Tour inox 500 lít Nồi phản ứng Tour inox 50 lít Tủ sấy chân không Tour inox 3000 lít Thùng Inox VN inox 300 lít Thùng nhựa TQ Máy nguấy Tour Cân 30, 50, 100 kg VN 10 Máy ly tâm Đức 11 Phễu lọc 12 Nồi 200 lít inox KW inox KW VN inox HQ Chạy dầu DO 300 kg Quy trình chiết SP3 từ viện Dợc Liệu KHOa Công nghệ chiết xuất ngũ sắc (Bột khô SP3) Dạng dùng: Qui cách: Hạn dùng: Trang /5 Số 01/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Túi PE 10kg22 36 tháng Sơ đồ giai đoạn sản xuất SP3 Nguyên phụ liệu Bột dợc liệu nớc trao đổi ion cồn 960 Các giai đoạn Nội dung kiểm tra Chiết lần với nớc nhiệt độ sôi Kiểm tra nguyên liệu Cất thu hồi áp suất giảm Kiểm tra an toàn Tủa loại tạp cồn Lọc lấy dịch chiết cồn Cô thu hồi cồn áp suất giảm methanol Kiểm tra an toàn cháy nổ Tinh chế methanol Lọc lấy dịch chiết methanol Cô dới áp suất giảm axeton Kiểm tra an toàn cháy nổ Tủa axeton Gạn, lọc lấy tủa Sấy 600C Kiểm tra an toàn Bột khô SP3 Kiểm tra theo t/c sở Đóng gói, nhập kho Quy trình chiết SP3 từ viện Dợc Liệu KHOa Công nghệ chiết xuất ngũ sắc (Bột khô SP3) Dạng dùng: Qui cách: Hạn dùng: Trang /5 Số 01/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Túi PE 10kg33 36 tháng Mô tả quy trình sản xuất - Chuẩn bị nguyên liệu: Cây ngũ sắc đạt tiêu chuẩn sở (TCCS-VDL08TCL1) loại bỏ tạp chất, xay thành bột thô chặt nhỏ 0,5 cm - Nguyên liệu cho mẻ chiết: Bột thô ngũ sắc: 200 kg Nớc trao đổi ion: 3600 lít Cồn 96OC 260 lít Methanol 320 lít Axeton 100 lít - Tiến hành: + Công đoạn chiết nớc: Cho 200 kg dợc liệu ngũ sắc vào nồi chiết có dung tích 2000 lít Chiết lần với nớc trao đổi ion Lần thứ với 2200 lít nớc (tỷ lệ 1:11), lần thứ hai với 1400 lít nớc (tỷ lệ 1:7) Thời gian chiết lần thứ tính từ khối dợc liệu chiết đạt nhiệt độ sôi, lần thứ 1/2 Trong thời gian chiết cần giữ nhiệt mà không cần cấp thêm nhiệt Dịch chiết lần chiết đợc gộp lại, cô máy cô màng mỏng đến khối lợng 300 lít (tỷ lệ 1:1,5) + Công đoạn loại nhựa, tạp cồn: Cao nớc đợc hoà tan cồn 96o theo tỷ lệ khối lợng (dợc liệu : cao nớc: cồn = : 1,5 : 1,3), tơng đơng với cồn 40o Khuấy liên tục thấy xuất nhiều tủa Để lắng, gạn, lọc lấy dịch nớc/cồn Thu hồi dới áp suất giảm đến thu hồi đợc lợng cồn có tỷ lệ khối lợng (dợc liệu : cồn = 1: 1,5) tơng đơng với cồn 70o, tiếp tục cô loại dung môi dới áp suất giảm tới thu đợc cao đặc, màu sẫm có tỷ lệ dợc liệu : cao chiết cồn = 1: 0,35 Quy trình chiết SP3 từ viện Dợc Liệu KHOa Công nghệ chiết xuất ngũ sắc (Bột khô SP3) Dạng dùng: Qui cách: Hạn dùng: Trang /5 Số 01/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Túi PE 10kg44 36 tháng + Công đoạn tinh chế methanol: Cao đặc ethanol đợc hoà tan methanol với tỷ lệ khối lợng (dợc liệu : cao chiết cồn : methanol = 1: 0,35: 1,6) thấy xuất tủa mầu vàng nhạt, phần tạp bị tủa tiếp Hỗn hợp đợc khuấy liên tục Để lắng, gạn, lọc lấy phần dịch chiết methanol có mầu vàng đậm Dịch lọc methanol đợc thu hồi máy Tournaire đến thu đợc dịch đặc, có tỷ lệ khối lợng (dợc liệu : dịch đặc = 1: 0,2) + Công đoạn loại tạp axeton: Cao đặc methanol đợc đa dần vào khối axeton với tỷ lệ khối lợng (dợc liệu : cao methanol : axeton = 1: 0,2 : 0,5) Nguấy lúc xuất tủa mầu nâu nhạt Để lắng 30 phút, gạn lấy phần tủa, rửa tủa vài lần với lợng nhỏ axeton + Công đoạn sấy khô bán thành phẩm: Bột bán thành phẩm SP3 đợc sấy máy sấy chân không nhiệt độ 60oC khô, xay thành bột có mầu vàng nhạt, độ ẩm dới 9% + Đóng gói, ghi nhãn nhập kho: Chế phẩm đợc đóng lần túi PE, túi 10kg, ghi nhãn nhập kho - Nhận xét: Với quy trình chiết nh từ 200kg dợc liệu thu đợc trung bình 8kg bột khô SP3 màu vàng nhạt Hiệu suất 4% Vệ sinh an toàn lao động: + Phòng sản xuất có nội quy an toàn lao động dụng cụ phòng chống cháy nổ + Có nội quy chống cháy nổ nơi cất thu hồi cồn, methanol axeton + Đảm bảo điều kiện vệ sinh nơi sản xuất, dụng cụ sản xuất, ngời sản xuất, chống nhiễm khuẩn nấm mốc Quy trình chiết SP3 từ viện Dợc Liệu KHOa Công nghệ chiết xuất ngũ sắc (Bột khô SP3) Dạng dùng: Qui cách: Hạn dùng: Trang /5 Số 01/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Túi PE 10kg55 36 tháng Phơng pháp kiểm tra, kiểm nghiệm: Giai đoạn sản xuất Nguyên phụ liệu Cân Chiết xuất Cất thu hồi dung môi Tinh chế Sấy Đóng gói Nội dung kiểm tra Số lần kiểm tra Độ ẩm, kiểm tra chất lợng Yêu cầu Ngời kiểm tra kiểm tra Theo tiêu Đúng quy cách Ds, tổ trởng sản xuất, chuẩn nguyên Từng lô, mẻ tạp cán đảm bảo chất liệu, xuất xứ chất lợng Đúng công Ngời cân, Ds, tổ Công thức, Từng mẻ thức trởng sản xuất, cán khối lợng khối lợng ĐBCL An toàn cháy Thờng Công nhân sản xuất Chống cháy nổ xuyên Cán ĐBCL An toàn cháy Công nhân sản xuất Chống cháy nổ thể tích Cán ĐBCL Đúng thể tích dịch chiết Ds, tổ trởng sản xuất Công nhân sản xuất Thời gian, Từng lô Đúng quy định Cán ĐBCL nhiệt độ Ds, tổ trởng sản xuất Nhiệt độ, độ Công nhân sản xuất Đúng quy định, Từng lô ẩm, an toàn Cán ĐBCL chống cháy cháy nổ Ds, tổ trởng sản xuất Độ ẩm 9% theo TCCS Ds Kiểm nghiệm Quy trình chiết SP3 từ viện Dợc Liệu KHOa Công nghệ chiết xuất ngũ sắc (Bột khô SP3) Dạng dùng: Qui cách: Hạn dùng: Túi PE 10kg66 36 tháng Trang /5 Số 01/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Quy trình sản xuất viện Dợc Liệu Khoa bào chế chế biến thuốc xịt mũi agerhinin 15ml Dạng dùng: Qui cách: Hộp 100 lọ Hạn dùng: 18 tháng Trang /7 Số 02/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Ngời biên soạn Ngày 15/10/2003 Ngời kiểm tra Ngày 15/10/2003 Ngời phê duyệt Ngày 15/10/2003 Viện Trởng DS Hồ Thị Xuyến TS Lê Kim Loan PGS.TS Nguyễn Thợng Dong Công thức pha chế đơn vị thành phẩm Bột SP3 750mg Natriborat 90mg Nipagin 11,25mg Nipazol 3,75mg Nớc cất vừa đủ 15ml Công thức pha chế cho mẻ sản xuất 30.000 lọ 15ml Bột SP3 22,5kg Natriborat 2,7kg Nipagin 0,3375kg Nipazol 0,1125kg Nớc cất vừa đủ 450lít Đặc điểm nguyên, phụ liệu Bột SP3 Đạt tiêu chuẩn sở Natriborat Đạt tiêu chuẩn BP 2001 Nipagin Đạt tiêu chuẩn BP 2001 Nipazol Đạt tiêu chuẩn BP 2001 Nớc cất vừa đủ Đạt tiêu chuẩn DĐVNIII Quy trình sản xuất viện Dợc Liệu Khoa bào chế chế biến thuốc xịt mũi agerhinin 15ml Dạng dùng: Qui cách: Hộp 100 lọ Hạn dùng: 18 tháng Trang /7 Số 02/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Sơ đồ giai đoạn pha chế thuốc xịt mũi Agerhinin (Sơ đồ 3) Nớc cất Bột khô SP3 Dung dich SP3 Lắng, lọc CK Dung dịch thuốc Natriborat Tiệt trùng Nipagin, nipazol HCl NaOH dợc dụng Điều chỉnh PH Kiểm tra độ PH Lắng, lọc CK Kiểm nghiệm BTP Đóng gói Kiểm nghiệm TP Nhập kho Trang /7 Số 02/QTSX Ngày ban hành: 15/10/2003 Quy trình sản xuất viện Dợc Liệu Khoa bào chế chế biến thuốc xịt mũi agerhinin 15ml Dạng dùng: Qui cách: Hộp 100 lọ Hạn dùng: 18 tháng Thiết bị dùng pha chế thuốc xịt mũi Agerhinin (Bảng 7) TT Tên máy Ký hiệu Số lợng Đặc điểm Công suất Máy xay VN Inox 3KW Máy chiết chai KBF-2 Inox 25l/h Máy lọc dịch Satorius Lọc màng 50l/h Máy đo PH Metler Để bàn Nồi nấu vỏ LX Inox 500lít Máy nguấy Tour Inox 1KW Thùng Inox VN Inox 250lít Tỷ trọng kế Tour Máy dán màng co VN Dùng nhiệt 1000 lọ/h 10 Cân điện tử Japan 11 Cân đồng hồ TQ 12 Cân đĩa 200g TQ 13 Cân 20kg VN Mô tả quy trình sản xuất 6.1 Chuẩn bị nguyên liệu - Tính nguyên liệu theo định mức kỹ thuật, lĩnh nguyên liệu phải có ngời : ngời cán kỹ thuật, kiểm tra chất lợng số lợng nguyên liệu Đối chiếu với phiếu xuất kho, phiếu kiểm nghiệm nguyên liệu Trong thời gian thí nghiệm, hoạt động thỏ thí nghiệm khác thờng, ăn uống bình thờng nh trớc thí nghiệm Kết hợp kết xét nghiệm mô học với kết sinh hoá huyết học, kết luận : Bột SP3 cho thỏ uống với liều 0.25g/ kg/ ngày 0.5g/ kg/ ngày ( tơng đơng 5g dợc liệu/ kg/ngày 10g dợc liệu/kg/ngày ) uống kéo dài 30 ngày biểu độc chức gan, thận, tạo máu tế bào gan, thận, thợng thận Kết luận : Kết hợp kết nghiên cứu dợc lý giai đoạn kết nghiên cứu dợc lý giai đoạn 2, có kết luận nh sau: + Bột SP3 chiết từ Ngũ sắc có tác dụng chống viêm có tác dụng kháng Histamin rõ rệt + Khi xịt thuốc nhỏ mũi Agerhinin thuốc đặc gấp lần thuốc xịt mũi Agerhinin, niêm mạc mũi thỏ lô bình thờng, không bị xung huyết, không thấy dị ứng mẩn đỏ, khác mũi không nhỏ thuốc mũi nhỏ thuốc + Bột SP3 cho thỏ uống với liều 0.25g SP3 / kg/ ngày 0.5 g SP3 / kg / ngày kéo dài liên tục 30 ngày, biểu nhiễm độc sinh hoáhuyết học mô học Kết luận: Thuốc nhỏ mũi Agerhinin có tác dụng chống viêm, chống dị ứng có độ an toàn cao độc tính, đủ điều kiện để sử dụng làm thuốc nhỏ mũi trờng hợp viêm mũi viêm mũi dị ứng Hà nội, ngày tháng năm 2005 Phụ trách khoa Dợc lý Sinh hoá DS Nguyễn Kim Phợng 17 Tiêu chuẩn sở bao bì Ký hiệu: TCI1-BB-02-04 Bộ y Tế Bao bì thuốc viện Dợc Liệu xịt mũi Agerhinin Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Yêu cầu kỹ thuật: - Chai nhựa trắng đục chất dẻo có dung tích 20ml - Đầu xịt chất dẻo Chất lợng: *) Phần đựng thuốc: - Chất liệu: Lọ nhựa PE mềm, màu trắng đục đạt tiêu chuẩn DĐVNIII, phụ lục 2.7 - Hình thức kích thớc: + Hình thức: Lọ có độ dày đồng đều, không thủng, ren lọ phải khớp với ren nút đầu xịt + Kích thớc dung tích: - Chiều cao lọ (không kể nút): 5,9 cm 0,3 mm - Chiều cao thân lọ: 4,2 cm 0,3 mm - Đờng kính thân lọ: 2,46 cm 0,3 mm - Đờng kính miệng lọ (cả ren): 1,67 cm mm - Dung tích lọ: 20-21,1 ml *) Đầu xịt: - Đầu van: Cao 3,3 3,4 cm, có nút bấm phía dới, phía mặt đầu van có lỗ nhỏ đợc tráng lớp nhựa mỏng bảo vệ để thuốc khỏi cha sử dụng - Nắp van: Nhựa cứng, không màu có chiều dài 24,5 0,3 mm, dới nắp van có hai khấc phía để gài chặt vào đầu van Tiêu chuẩn sở bao bì Bộ y Tế Bao bì thuốc viện Dợc Liệu xịt mũi Agerhinin - Thân van: Ký hiệu: TCI1-BB-02-04 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Nhựa PE mềm màu trắng đục, phần thân van có ren vặn khớp với ren lọ đựng, thân van có lỗ nhỏ đợc thông với nắp van ống nhúng - ống nhúng: Nhựa PE mềm không màu, dài 2,98 0,2 cm Đờng kính phủ bì 2,1 mm đợc nối với lỗ nhỏ thân van để hút thuốc lên đầu xịt Phơng pháp thử: - Cảm quan: Lọ đầu xịt phải sạch, kích thớc, chất lợng đạt hình thức cảm quan - Thử độ kín: Thử độ khớp ren lọ với đầu xịt độ kín lọ theo phơng pháp sau: Khi đóng thuốc vào lọ vặn chặt đầu xịt Để lọ vặn đầu xịt dán nhãn nằm ngang bàn theo dõi thuốc bị chảy tức ren đầu xịt không khớp không kín - Độ nớc chiết bao bì: Thử theo phụ lục 207 mục 12.4.1 DĐVN III - Cắn không bay bao bì: Thử theo phụ lục 207 mục 12.4.1 DĐVN III Bao bì ngoài: - Hộp đựng lọ thuốc: Theo qui chế, kích thớc đăng ký - Hộp đựng 100 lọ: Hộp carton cứng, có dán nhãn, kích thớc 12,5ì33ì33cm Tiêu chuẩn sở bột SP3 Bộ y Tế viện Dợc Liệu Bột SP3 Extractum Agerati TCCS 04 TCI1 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Yêu cầu kỹ thuật: Bào chế: Bột khô SP3 sản phẩm đợc chiết tinh chế từ ngũ sắc (Ageratum conyzoides L.) họ cúc (Asteraceae) Nguyên liệu Cây ngũ sắc Đạt TCCS Nớc trao đổi ion Đạt TC DĐ VNIII Ethanol 960 Đạt TC DĐ VNIII Methanol Đạt TC DĐ VNIII Axeton Đạt TC DĐ VNIII Chất lợng thành phẩm: Tính chất: Bột màu nâu nhạt, mùi thơm đặc trng ngũ sắc, vị chua Mất khối lợng làm khô: Không 5% Kim loại nặng: Không 20ppm Độ nhiễm khuẩn: Đạt 52 - TCN - 361- 81 Định tính: *) Bằng phơng pháp SKLM - Chuẩn bị mẫu: Mẫu thử 1: Lấy 0,5g chế phẩm, tiến hành chiết cách lắc với 20ml n-butanol đợc bão hoà nớc, để lắng, gạn lấy phần dịch chiết n-butanol cô cách thuỷ đến cạn Hoà cắn thu đợc 1ml methanol, đợc dung dịch chấm sắc ký đồ Mẫu thử 2: Lấy 0,05g chế phẩm, hoà tan 5ml hỗn hợp methanol nớc tỷ lệ : 1, lắc để hoà tan, thu đợc chấm sắc ký sắc ký đồ Mẫu đối chiếu 1: Lấy 10g hoa ngũ sắc đối chiếu đợc tán nhỏ cho vào bình cầu dung tích 100ml, thêm 50ml nớc, đun hồi lu bếp cách thuỷ 30phút, để Tiêu chuẩn sở bột SP3 Bộ y Tế viện Dợc Liệu Bột SP3 Extractum Agerati TCCS 04 TCI1 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 nguội, lọc Cô dịch lọc cách thuỷ đến khoảng 10ml tiến hành chiết cách lắc với 20ml n-butanol bão hoà nớc Để lắng, gạn lấy phần dịch chiết n-butanol cô cách thuỷ đến cạn Hoà cắn thu đợc 1ml methanol, đợc dung dịch chấm sắc ký đồ Mẫu đối chiếu 2: Lấy 1g hoa ngũ sắc tán nhỏ, chiết cách đun hồi lu bếp cách thuỷ với 20ml hỗn hợp methanol nớc tỷ lệ : 1, gạn lọc lấy phần dịch chiết cô bếp cách thuỷ đến cạn Hoà cắn 5ml hỗn hợp methanol nớc tỷ lệ : 1, thu đợc dung dịch chấm sắc ký - Tiến hành sắc ký Sắc ký đồ 1: Trên mỏng silicagel G Merck chấm vết gồm 10àl dung dịch mẫu thử 10àl dung dịch mẫu đối chiếu 1, tiến hành sắc ký theo DĐVNIII phụ lục 4.4 với hệ dung môi cloroforrm: methanol (90:10) Quan sát dới UV 366nm sắc ký đồ dung dịch mẫu thử phải có vết phát quang màu sắc giá trị Rf với vết sắc ký đồ dung dịch mẫu đối chiếu Sắc ký đồ 2: Trên mỏng silicagel G Merch chấm hai vết gồm 10àl dung dịch mẫu thử 10àl dung dịch mẫu đối chiếu 2, tiến hành sắc ký theo DĐVNIII phụ lục 4.4 với hệ dung môi n - butanol : ethanol : nớc(50: 25 : 20) Sau triển khai sắc ký cao khoảng 8cm, lấy kính ra, để bay hết dung môi phun thuốc thử 0,2% naphthnol dung dịch acid sulphuric 10% cồn, sấy kính nhiệt độ 1000C đến xuất vết Sắc ký đồ mẫu thử phải có vết màu sắc giá trị Rf so với mẫu dợc liệu đối chiếu *) Bằng phản ứng tạo bọt: Cho vào ống nghiệm, ống 0,75ml (ở mục 3.5.1.6), ống thứ thêm 1ml dung dịch acid hydrocloric 0,5N, ống thứ hai thêm 1ml dung dịch natri hydroxyd 0,5N Lắc mạnh ống 30 giây, để yên nhiệt độ phòng quan sát Cả ống tạo bọt ống phải có cột bọt bền vững Tiêu chuẩn sở bột SP3 Bộ y Tế viện Dợc Liệu Bột SP3 Extractum Agerati TCCS 04 TCI1 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Định lợng chất tan hỗn hợp methanol : nớc tỷ lệ : không đợc thấp 95% tính theo chế phẩm khô tuyệt đối Phơng pháp thử: Tính chất: Kiểm tra cảm quan, chế phẩm phải đạt yêu cầu nêu Mất khối lợng làm khô: Theo phơng pháp DĐVNIII, phụ lục 5.16 Dùng 1g mẫu thử (đã nghiền mịn cân xác) sấy tủ sấy 1050C, áp suất thờng, đến khối lợng không đổi Kim loại nặng: Lấy 1g chế phẩm tiến hành theo phơng pháp 3, phụ lục 7.4.7, DĐVNIII Độ nhiễm khuẩn: Cân xác 5g chế phẩm vào bình nón nút mài 200ml tiệt trùng cân bì, thêm vào lợng dung dịch natriclorid 0,9% vừa đủ để thu đợc dung dịch có nồng độ 10-1, lắc Từ dung dịch pha loãng thành dung dịch có nồng độ 10-2, 10-3, tiến hành theo DĐVNIII, Phụ lục 10.7 Định tính: Tiến hành nh mục định tính ghi Định lợng chất tan hỗn hợp methanol : nớc (4 : ): Cân xác 0,5g chế phẩm, hoà tan 25ml hỗn hợp methanol nớc, tỷ lệ : 1, khuấy để hoà tan, lọc qua giấy lọc lấy phần dịch cho vào cốc cân đợc sấy đến khối lợng không đổi 105oC, tráng phễu giấy lọc 5ml hỗn hợp methanol : nớc (4 : 1) làm bay dịch chiết, thu đợc cắn Sấy cốc cắn 105oC giờ, để nguội bình hút ẩm 15 phút cân tính kết theo công thức: Tiêu chuẩn sở bột SP3 Bộ y Tế Bột SP3 Extractum Agerati viện Dợc Liệu X Trong đó: = TCCS 04 TCI1 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 P ì 10.000 m (100 - B) X: Là hàm lợng chất tan hỗn hợp methanol : nớc (%) P: Là cắn thu đợc (g) m: Là khối lợng Sp3 đem thử (g) B: Là độ ẩm mẫu thử (%) Đóng gói, bảo quản - Chế phẩm đợc đóng gói lần túi PE - Nhãn trình bày rõ ràng, quy chế - Bảo quản nơi khô ráo, thoáng mát Tiêu chuẩn sở ngũ sắc Bộ y Tế viện Dợc Liệu ngũ sắc Ageratum conyzoidesl 08 TCI1 04/99 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Dợc liệu phần mặt đất chế biến phơi hay sấy khô ngũ sắc (Ageratum conyzoides L.) họ cúc (Asteraceae) Mô tả: Thân mang dài không 40 cm, mầu nâu sẫm đến nâu nhạt, có nhiều lông ngắn xít nhau, mọc đối có cuống, hình trứng hay cạnh, mép có ca tròn, mặt có lông tơ, mặt dới có mầu nhạt Hoa nhỏ, mọc thành đầu ngũ đầu cành Vi phẫu: + Phần thân: Mặt cắt ngang thân hình gần tròn, biểu bì cấu tạo từ tế bào chữ nhật Lông che chở gồm tế bào xếp thành dãy, tế bào phía lông dài phía chân lông Mô dày gồm khoảng lớp tế bào mô mềm, vỏ cấu tạo từ 4-5 lớp tế bào hình đa giác Các lớp libe gỗ xếp liên tục thành vòng, bó gỗ có đám mô cứng Tầng phát sinh libe gỗ gồm 1-2 lớp tế bào thành vòng liên tục + Phần gân lá: Gân lồi dới, biểu bì biểu bì dới cấu tạo nh tế bào tròn nhỏ xếp hàng, mang nhiều lông che chở, đa bào to, nhỏ không đều, sát biểu bì mô dày gồm 2-3 lớp tế bào Mô mềm tế bào hình trứng, thành mỏng, xếp lộn xộn Bó libe gỗ gân gồm có cung libe bao phía cung gỗ + Phần phiến lá: Biểu bì biểu bì dới cấu tạo từ tế bào hình chữ nhật, không tạo thành lớp màng lông che chở đa bào Sát biểu bì mô dầu gồm 1-2 lớp tế bào Các tế bào phần phiến có chứa giọt dầu Soi bột: Soi bột dợc liệu dới kính hiển vi thấy nhiều lông che chở đa bào (5-10 tế bào) nguyên gãy thành mảnh Các tế bào phía chân lông ngắn phần đầu lông, phía đầu thờng có chỗ thắt Hạt phấn hình cầu có nhiều gai Mảnh biểu bì mang lỗ khí, mảnh vạch xoắn Các mảnh phiến mang lông che chở lỗ khí, mạch dẫn Tiêu chuẩn sở ngũ sắc Bộ y Tế viện Dợc Liệu ngũ sắc Ageratum conyzoidesl 08 TCI1 04/99 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Độ ẩm: Không 13% theo phơng pháp DĐVN III phụ lục 5.16 phụ lục 9.6 Tro toàn phần: Không 11% theo phơng pháp DĐVN III phụ lục 7.6 phơng pháp 2, cân xác khoảng 1g bột dợc liệu Tạp chất: Không 1% theo phơng pháp DĐVN III phụ lục 9.4 Kim loại nặng: Không 20ppm, thử theo DĐVN III phụ lục 7.4.7, dùng 1g mẫu thử Tỷ lệ vụn nát: Không 5% Tỷ lệ lá: Không 40% Định tính: *) Định tính phản ứng tạo bọt: Lấy 1g bột dợc liệu, cho vào bình nón, thêm 10 ml nớc sôi, giữ cho sôi nhẹ 30 phút Lọc qua giấy lọc vào ống nghiệm mối ống 5ml ống cho thêm 1ml dung dịch HCl 0,5N, ống cho thêm 1ml dung dịch NaOH 0,5N Lắc mạnh ống 30 giây, ống tạo bọt, ống phải có cột bọt bền vững *) Phơng pháp SKLM Chuẩn bị mẫu: - Lấy 1g dợc liệu đợc tán nhỏ, tiến hành chiết cách đun hồi lu cách thuỷ với 20ml hỗn hợp methanol nớc tỷ lệ : 1, gạn lọc lấy phần dịch chiết cô cách thuỷ đến cạn Hoà cắn 5ml hỗn hợp methanol nớc, thu đợc dung dịch chấm sắc ký - Dung dịch đờng saccharosa 1% methanol nớc tỷ lệ : Tiến hành sắc ký: Trên mỏng silicagel G Merck chấm 10àl dịch chiết dợc liệu 10 àl dung dịch saccharosa, tiến hành sắc ký theo DĐVNIII phụ lục 4.4 với hệ dung môi n.propanol : ethylacetat : nớc : acid axetic (4 : : : 1) Sau triển khai sắc ký cao Tiêu chuẩn sở ngũ sắc Bộ y Tế viện Dợc Liệu ngũ sắc Ageratum conyzoidesl 08 TCI1 04/99 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 khoảng 8cm, lấy kính ra, để bay hết dung môi phun thuốc thử 0,2% -naphthol dung dịch acid sulfuric 10% cồn, sấy kính nhiệt độ 1000C đến xuất vết Sắc ký đồ mẫu thử phải có vết màu xanh tím vị chí Rf 0,4 0,5, có màu sắc với đờng saccharosa có giá trị Rx 1,1 1,2 so với vết saccharosa đối chiếu Chế biến, bảo quản: Thu hái dợc liệu, loại bỏ sâu, già úa, phơi khô Bảo quản nơi khô ráo, thoáng mát Tiêu chuẩn sở ngũ sắc Bộ y Tế viện Dợc Liệu ngũ sắc Ageratum conyzoidesl 08 TCI1 04/99 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Tiêu chuẩn sở thuốc xịt mũi Agerhinin 15ml Bộ y Tế Thuốc xịt mũi viện Dợc Liệu Agerhinin 15ML Kí hiệu: 04TCI1 03-02 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Yêu cầu kỹ thuật: Công thức thành phẩm (1 lọ xịt) Bột SP3 750,0 mg Natri borat 90,0 mg Nipagin 11,25 mg Nipazol 3,75 mg Nớc cất vđ 15,0 ml Nguyên liệu: Bột Sp3 Đạt TCCS Natri borat Natri tetraborat Đạt BP 2001 Nipagin Methyl hydroxy benzoat Đạt BP 2001 Nipazol Propyl hydroxy benzoat Đạt BP 2001 Nớc cất Aqua destillata Đạt DĐVN III Chất lợng thành phẩm: - Tính chất: Chất lỏng suốt, màu nâu cánh dán, mùi đặc trng dợc liệu - Độ trong: Trong, không đợc có vẩn đục, váng mốc, cặn bẩn hay vật lạ - Chỉ số pH: 5,0 7,0 - Sai số thể tích: 15 ml + 10% (15 16,5 ml) - Tỷ trọng 20oC: 1,020 1,030 - Định tính: Cây hoa ngũ sắc - Định lợng: Hàm lợng chất tan hỗn hợp methanol : nớc (4 : 1) không đợc thấp 5% (KL/TT) - Độ nhiễm khuẩn: Giới hạn nhiễm khuẩn đạt yêu cầu mức phụ lục 10.7 DĐVNIII Tiêu chuẩn sở thuốc xịt mũi Agerhinin 15ml Bộ y Tế Thuốc xịt mũi viện Dợc Liệu Agerhinin 15ML Kí hiệu: 04TCI1 03-02 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 Phơng pháp thử Tính chất: Kiểm tra cảm quan, thuốc phải đạt yêu cầu nêu Độ trong: Lấy 10 lọ thuốc lô sản xuất, lần lợt soi độ lọ cách tháo đầu xịt, gạn bỏ nhẹ nhàng dung dịch phía lọ, lấy khoảng ml lại, lắc chuyển sang ống nghiệm thuỷ tinh không màu, pha loãng nớc cất gấp lần thể tích ban đầu Dùng tay bịt chặt miệng ống, lắc nhẹ nhàng theo chiều thẳng đứng (tránh tạo bọt) Để yên phút đem soi dới ánh sáng đèn Quan sát lần, 20 giây vị trí đứng yên Không đợc ống có tạp chất nh tạp học, tủa đục hay vật lạ Chỉ số pH: Thử theo DĐVNIII, phụ lục 5.6 Sai số thể tích: Thử theo DĐVN III, phụ lục 8.1 Tỷ trọng: Thử theo DĐVN III, phụ lục 5.15 (phơng pháp dùng tỷ trọng kế) Định tính: *) Chuẩn bị mẫu: Mẫu thử 1: Lấy 10ml chế phẩm, tiến hành chiết cách lắc với 20ml n-butanol đợc bão hoà nớc, để lắng, gạn lấy phần dịch chiết n-butanol cô cách thuỷ đến cạn Hoà cắn thu đợc 1ml methanol, đợc dung dịch chấm sắc ký đồ Mẫu thử 2: Lấy 1ml chế phẩm, thêm vào 4ml methanol, lắc để hoà tan, thu đợc chấm sắc ký sắc ký đồ Mẫu đối chiếu 1: Lấy 10g dợc liệu hoa ngũ sắc đối chiếu, đợc tán nhỏ cho vào bình cầu dung tích 100ml, thêm 50ml nớc, đun hồi lu bếp cách thuỷ 30phút, để nguội, lọc Cô dịch lọc cách thuỷ đến khoảng 10ml tiến hành chiết cách lắc với 20ml n-butanol bão hoà nớc Để lắng, gạn lấy phần dịch chiết Tiêu chuẩn sở thuốc xịt mũi Agerhinin 15ml Bộ y Tế Thuốc xịt mũi viện Dợc Liệu Agerhinin 15ML Kí hiệu: 04TCI1 03-02 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 n-butanol cô cách thuỷ đến cạn Hoà cắn thu đợc 5ml hỗn hợp methanol nớc tỷ lệ 4:1, thu đợc dung dịch chấm sắc ký Mẫu đối chiếu 2: Lấy g dợc liệu đối chiếu, đợc tán nhỏ, tiến hành chiết cách đun hồi lu bếp cách thuỷ với 20ml hỗn hợp methanol nớc, tỷ lệ 4: 1, gạn lấy phần dịch chiết, cô bếp cách thuỷ đến cạn Hoà cắn thu đợc 5ml hỗn hợp methanol nớc, tỷ lệ 4:1, thu đợc dung dịch chấm sắc ký *) Tiến hành sắc ký Sắc ký đồ 1: Trên mỏng silicagel G Merck chấm vết gồm 10àl dung dịch mẫu thử 10àl dung dịch mẫu đối chiếu 1, tiến hành sắc ký theo DĐVNIII phụ lục 4.4 với hệ dung môi chloroform: methanol(90:10) Quan sát dới UV 366nm sắc ký đồ dung dịch mẫu thử phải có vết phát quang màu sắc giá trị Rf với vết sắc ký đồ dung dịch mẫu đối chiếu Sắc ký đồ 2: Trên mỏng silicagel G Merch chấm hai vết gồm 10àl dung dịch mẫu thử 10àl dung dịch mẫu đối chiếu 2, tiến hành sắc ký theo DĐVNIII phụ lục 4.4 với hệ dung môi n- Butanol: Ethanol; nớc(50:25:20) Sau triển khai sắc ký cao khoảng cm, lấy kính ra, để bay hết dung môi phun thuốc thử 0,2% naphthol dung dịch acid sunphuric 10% cồn, sấy kính nhiệt độ 1000C đến xuất vết Sắc ký đồ mẫu thử phải có vết màu sắc giá trị Rf so với mẫu dợc liệu đối chiếu *) Định lợng: Lấy lọ thành phẩm, hút xác 5ml dịch cho vào bình định mức 25ml, thêm methanol vừa đủ đến vạch, lắc đều, lọc lấy dịch cho vào cốc cân sấy đến khối lợng không đổi 100-1050C, tráng phễu giấy lọc 5ml hỗn hợp methanol : nớc (4 : 1), bốc cách thuỷ đến khô Sấy cốc cắn nhiệt độ 100-1050C giờ, để nguội bình hút ẩm 15phút cân Hàm lợng % (KL/TT) cắn sau bay chế phẩm đợc tính theo công thức: Tiêu chuẩn sở thuốc xịt mũi Agerhinin 15ml Bộ y Tế Thuốc xịt mũi viện Dợc Liệu Agerhinin 15ML X% = Kí hiệu: 04TCI1 03-02 Có hiệu lực từ: 01/10/2004 a x 100 v Trong đó: X%: Lợng % chất tan có thành phẩm a: Lợng cắn sau sấy khô cân đợc (g) v: Lợng thuốc lấy thử (ml) *) Độ nhiễm khuẩn: Thử theo DĐVN III phụ lục 10.7 Đóng gói, bảo quản: Thuốc đựng lọ nhựa dung tích 15 ml, khô, sạch, kín có lắp đầu xịt Có nhãn ghi rõ ràng quy chế Bảo quản nơi khô ráo, thoáng mát, tránh ánh sáng Hạn dùng: 18 tháng kể từ sản xuất