BYT-BKHCN ĐHDHN BYT-BKHCN ĐHDHN BYT-BKHCN ĐHDHN Bộ khoa học công nghệ Bộ y tế trờng đại học dợc hà nội 13-15 lê thánh tông, hà nội Báo cáo tổng kết khoa học kỹ thuật Dự án: hoàn thiện qui trình sản xuất thuốc tiêm aslem điều hoà miễn dịch pgs.ts.đào kim chi 5889 21/6/2006 Bản quyền thuộc Trờng Đại học Dợc Hà nội Đơn xin chép toàn phần tài liệu phải gửi tới Hiệu trởng Trờng Đại học Dợc Hà nội trừ trờng hợp sử dụng với mục đích nghiên cứu Hà Nội, 12 - 2005 Bộ khoa học công nghệ Bộ y tế trờng đại học dợc hà nội 13-15 lê thánh tông, hà nội Báo cáo tổng kết khoa học kỹ thuật Dự án: hoàn thiện qui trình sản xuất thuốc tiêm aslem điều hoà miễn dịch pgs.ts.đào kim chi Hà Nội, 12 - 2005 báo cáo đợc chuẩn bị sở kết thực dự án Kc.10- da13 Dự án KC10-DA13 Lời cảm ơn Chúng xin trân trọng gửi lời cám ơn tới: - Bộ Khoa học Công nghệ - Ban lãnh đạo Văn phòng Chơng trình KC10 - Ban Giám hiệu trờng Đại học Dợc Hà nội - Trung tâm Khoa học Công nghệ Dợc - Phòng Quản lý Khoa học trờng Đại học Dợc Hà nội quan tâm đạo, giúp đỡ suốt trình thực dự án Chúng xin chân thành cảm ơn: - Bộ môn Hoá sinh, Bộ môn Bào chế, Phòng TN GMP, Bộ môn Phân tích - Độc chất, Công ty Dợc khoa, Phòng Tài Kế toán, Phòng Giáo tài trờng Đại học Dợc Hà nội - Viện Kiểm nghiệm Quốc gia - Viện Hoá học, Trung tâm KHCN Quốc gia - Công ty cổ phần Dợc phẩm Vĩnh phúc (VINPHACO) phối hợp thực giúp đỡ nhiệt tình để hoàn thành đợc dự án Hà nội, ngày 31 tháng 12 năm 2005 Chủ nhiệm dự án PGS.TS Đào Kim Chi Báo cáo tóm tắt tổng kết khoa học kỹ thuật Dự án KC10-DA13 danh sách ngời thực Chủ nhiệm dự án: PGS.TS Đào Kim Chi Các cán tham gia: TS Nguyễn Quốc Bình, ĐH Dợc Hà Nội Ths Đỗ Hồng Quảng, ĐH Dợc Hà Nội Ths Đào Mai Anh, ĐH Dợc Hà Nội CN Nguyễn Thuý Minh, ĐH Dợc Hà Nội DS Nguyễn Duy Thiệp, ĐH Dợc Hà Nội PGS.TS Đỗ Hữu Nghị, ĐH Dợc Hà Nội ThS Nguyễn Kiều Anh, ĐH Dợc Hà Nội PGS.TS Nguyễn Văn Long, ĐH Dợc Hà Nội Ths.Nguyễn Thanh Hơng, Công ty Dợc phẩm Đông Đô PGS.TS Chu Đình Kính, Viện Hoá học Trung tâm KHCN Quốc gia Ths Nguyễn Thị Kim Thanh, Viện Kiểm nghiệm Quốc gia DS Đỗ Văn Doanh, Công ty cổ phần Dợc phẩm Vĩnh phúc Cơ quan tham gia: Trờng Đại học Dợc Hà nội Viện Kiểm nghiệm Quốc gia Viện Hoá học, Trung tâm KHCN Quốc gia Công ty cổ phần Dợc phẩm Vĩnh phúc (VINPHACO) Mục lục Trang Mở đầu Phần I Tổng Quan 1.1 Những hiểu biết điều hoà miễn dịch KTMD 1.2 Tổng quan chất KTMD 1.2.1.Phân loại, nguồn gốc chất KTMD 1.2.2 Vị trí tác động chế tác dụng chất KTMD 10 1.2.3 Phơng thức sử dụng thuốc KTMD 12 1.2.4 Tác dụng phụ thuốc KTMD 14 1.2.5 ứng dụng thuốc KTMD lâm sàng 15 1.3 Tình hình nghiên cứu thuốc KTMD thị trờng Việt Nam 18 1.4 Thuốc KTMD Aslem 20 1.4.1 Xuất xứ 21 1.4.2 Tác dụng dợc lý chế tác dụng 22 1.4.3 Các nghiên cứu thử nghiệm 22 1.4.4 Chỉ định chống định 25 1.4.5 Tác dụng phụ-Độc tính 26 1.4.6 Tơng tác thuốc 26 1.4.7 Liều lợng cách dùng 26 1.4.8 Đóng gói, bảo quản hạn dùng 27 1.4.9 Tiêu chuẩn 27 Phần II Vật liệu, thiết bị phơng pháp 2.1 Cho hoàn thiện qui trình tổng hợp GF 28 28 2.1.1 Hoá chất dung môi 28 2.1.2 Các thiết bị phơng pháp 28 2.2 Cho hoàn thiện qui trình bào chế thuốc 31 2.2.1 qui mô bán công nghiệp 31 2.2.2 qui mô công nghiệp 35 2.3 Cho hoàn thiện tiêu chuẩn nguyên liệu GF 41 2.3.1 Tinh chế GF 41 2.3.2 Xác định cấu trúc GF 41 2.3.3 Định lợng GF HPLC 41 2.3.4 Định lợng GF theo tiêu chuẩn sở 45 2.3.5 Xác định tạp chất GF 45 2.3.6 Phân tích số liệu thực nghiệm 45 Phần III Kết bàn luận 47 3.1 Kết hoàn thiện qui trình tổng hợp GF 47 Kết hoàn thiện qui trình bào chế thuốc tiêm Aslem 55 3.2.1 Kết sản lợng thuốc 55 3.2.2 Đánh giá quy trình sản xuất Aslem 56 3.3 Kết hoàn thiện tiêu chuẩn nguyên liệu GF 62 3.3.1 Chế tạo chất chuẩn GF 62 3.3.2 Kết phân tích GF 62 3.3.3 Kết nghiên cứu định lợng GF HPLC 78 Phần IV Kết luận đề xuất Lời cảm ơn Tài liệu tham khảo Phụ lục 93 Các chữ viết tắt ADCC CDC COSY CSF DEA DEAD DEPT DIPAD ĐTB ĐMD G-CSF GF GM-CSF GMP HMBC HMQC HSQC HTMD IBCF IFN IL KN KT KTCL KTMD LAF LAK LC-MS LIF LPS Lym MA MAb M-CSF MD MDP NK NMM PDGF Ph3P (3P) Antibody dependent cellular cytotoxicity Complement dependent cytotoxicity Correlated spectroscopy Colony Stimulating Factor Diethyl amin Diethyl azodicarboxylate Distortion Enhancement by Polarization Transfer Diisopropyl azodicarboxylate Đại thực bào Đáp ứng miễn dịch Granulo Colony Stimulating Factor Glycyl Funtumin Granulo-Macrophage Colony Stimulating Factor Good Manufactureing Practice Heteronuclear Multiple Bond Correlation Heteronuclear Multiple Quantum Coherence Heteronuclear Single Quantum Coherence Hệ thống miễn dịch Isobutyl chloroformiat Interferon Interleukin Kháng nguyên Kháng thể Kỹ thuật chất lợng Kích thích miễn dịch Laminer Air Flow Lymphokine Activated Killer cell Liquid Chrormatography-Mass Spectroscopy Leukemia Inhibiting Factor LIpopolysaccharid Lympho bào Mixed Anhydrid Monoclonal Antibody Macrophage Colony Stimulating Factor Miễn dịch Muramyl DiPeptid Natural Killer Cell N-methylmorpholin Platelet Derivative Growth Factor Triphenyl phosphine SCF SGMD SKLM SOP t-BOC-Gly Tc TCCS TF TIL TGF Th TNF Ts VINPHACO Stem Cell Factor Suy giảm miễn dịch Sắc ký lớp mỏng Standard operating practice Tert butyl oxycarbonyl Glyclyl T cytotoxic Tiêu chuẩn sở Transfer Factor Transformation Growth Factor T helper Tumor Necrosis Factor T suppressor Công ty cổ phần Dợc phẩm Vĩnh phúc Danh Mục Bảng TT Tên bảng Trang Bảng 2.1 Thiết bị sử dụng cho sản xuất Aslem quy mô bán công 31 nghiệp Bảng 2.Thiết bị sử dụng cho sản xuất Aslem quy mô công 35 nghiệp Bảng 2.3 Nguyên vật liệu Nguồn gốc Tiêu chuẩn 42 Bảng So sánh quy trình tổng hợp GF đợc hoàn thiện với 47 quy trình tổng hợp quy mô phòng thí nghiệm Bảng 3.2 Kết tổng hợp GF.HCl theo qui trình hoàn thiện 52 Bảng 3.3 Kết sản xuất thuốc Aslem năm làm dự án 55 Bảng 3.4 So sánh tóm tắt qui trình sản xuất Aslem quy mô bán 56 công nghiệp với qui trình công nghiệp theo tiêu chuẩn GMP Bảng3.5 So sánh phổ phơng pháp tinh chế GF 76 Bảng 3.6 Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống HPLC 80 10 Bảng 3.7 Kết xác định LOQ (n = 3) 82 11 Bảng 3.8 Kết biểu thị phụ thuộc diện tích pic nồng 82 độ GF 12 Bảng 3.9 Kết xác định độ tìm lại 83 13 Bảng 3.10 Kết xác định độ xác phơng pháp 84 14 Bảng 3.11 Kết xác định hàm lợng GF theo hai phơng pháp 85 phân tích 15 Bảng 3.12 Kết xác định khả tách GF khỏi tạp 87 16 Bảng 3.13 Kết so sánh hai phơng pháp phân tích 91 Danh Mục Hình STT Tên hình Trang Hình1.1 Công thức cấu tạo Aslem 20 Hình2.1 Sơ đồ qui trình tổng hợp Glycyl Funtumin HCl 29 (Nguyên liệu sản xuất thuốc tiêm Aslem) Hình 2.2 Sơ đồ quy trình bào chế Aslem quy mô bán công 34 nghiệp Hình 2.3 Sơ đồ quy trình bào chế Aslem quy mô công nghiệp 40 Hình3.1 Biểu đồ sản xuất Aslem 61 Hình3 Phổ IR GF -KT 64 Hình3 Phổ IR GF -CC 65 Hình3.4 Phổ IR GF chuẩn -1999 66 Hình3.5 Phổ MS GF -KT 67 10 Hình3.6 Phổ MS GF -CC 68 11 Hình3.7 Phổ 13C GF -KT 72 12 Hình3.8 Phổ 13C GF -CC 73 13 Hình3.9 Phổ 1H GF -KT 74 14 Hình3.10 Phổ 1H GF -CC 75 15 Hình 3.11 Sắc ký đồ GF (A) phổ hấp thụ UV pic GF 79 sắc đồ (B) 16 Hình 3.12 Sắc ký đồ dung dịch xác định độ phân giải 80 17 Hình 3.13 Sắc ký đồ A) Glycin Funtumin hydroclorid chuẩn; 81 B) Mẫu trắng 18 Hình 3.14 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc diện tích pic 83 Dự án KC10-DA13 GF.HCl 2,3 0,115 1310,9 1312,0 5,32 5,383 Pregnenolon 2,0 0,10 1500,99 1504,01 5,92 5,94 5,946 Pregnanolon 2,0 0,10 276,50 271,89 6,73 6,77 6,775 Phtalimido - 2,0 0,10 297,33 1633,6 7,40 7,44 7,446 0,115 346,74 345,43 4,29 4,27 4,27 Funtumin Funtumin 2,3 Nhận xét: Kết hình 2.4A, 2.4B bảng 2.8 cho thấy pic tạp (có thể có GF) đợc tách hoàn toàn khỏi tách riêng biệt so với pic GF Pic chất sắc nét, cân đối So sánh phơng pháp xác định tạp chất GF HPLC sắc ký lớp mỏng Phơng pháp xác định tạp chất GF TCCS (số 52 TC 01B-02-03) SKLM với chất hấp phụ silicagel GF254 hệ dung môi cyclohexan - ethyl acetat diethylamin (1 : : 1) Sau triển khai sắc ký, phát GF tạp thuốc thử Dragendorff Phơng pháp HPLC đợc tiến hành theo dẫn mục.2.3.5.2 2.3.3.2 Với SKLM làm mẫu GF M1Refcc; GF1; GFcc Các kết đợc trình bày hình 3.17 3.16 89 Dự án KC10-DA13 M1Refcc GF1 Chuẩn Chuẩn pha loãng Hình 3.16 Sắc ký đồ GF tách sắc ký lớp mỏng M1Refcc, GF1, Chuẩn, GFcc : Dung dịch GF 15mg/ ml; Chuẩn pha loãng : Dung dịch GF 0,15mg/ ml A B Hình 3.17 Sắc ký đồ GF tách HPLC : A) Dung dịch GF 0,01mg/ ml; B) Dung dịch GF 1mg/ ml 90 GFcc Dự án KC10-DA13 Kết hình 2.5 cho thấy vết ứng với GF đợc tách rõ, tròn Khi nồng độ dung dịch chuẩn tăng lên 100 lần (15 mg/ ml so với 0,15mg/ ml) không thấy xuất vết tạp Nhng kiểm tra HPLC với mẫu chuẩn có tạp chất đợc tách nồng độ tăng gấp 100 lần (1mg/ ml so với 0,01mg/ ml) Mặt khác, nồng độ dung dịch xác định tạp HPLC giảm 15 lần so với SKLM Điều chứng tỏ phơng pháp HPLC nhạy hiệu để xác định tạp chất GF Tuy nhiên sắc đồ GF-KT không tìm thấy số tạp chất có liên quan nói Bàn luận Nghiên cứu tiến hành xây dựng phơng pháp định tính, định lợng thử tạp chất GF nguyên liệu sản xuất Aslem HPLC - Về xây dựng phơng pháp phân tích Phơng pháp HPLC phơng pháp phân tích đại, mẫu thử đợc tách cột sắc ký với chất nhồi silica đợc silan hóa với octadecyl (C18) đợc rửa giải hệ dung môi pha động hỗn hợp MeOH dung dịch KH2PO4 20 mM pH 7,0 (80 : 20) Các chất tách đợc phát detector UV đặt bớc sóng 204 nm đợc phận xử lý kết (Integrator) cho kết pic sắc ký đồ với thông tin thời gian lu, diện tích pic, độ cân xứng, độ phân giải pic liền kề Có thể định tính đợc GF dựa vào thời gian lu sắc đồ, đồng thời định lợng GF dựa vào diện tích pic Hơn nữa, điều kiện sắc ký cho phép tách riêng GF với tạp chất có liên quan nên sử dụng để kiểm tra độ tinh khiết chế phẩm Điều kiện sắc ký: đợc lựa chọn sau khảo sát thông số ảnh hởng tới trình phân tích nh: pha tĩnh, pha động, lu lợng dung môi pha động, bớc sóng, thể tích mẫu tiêm xác định đợc điều kiện tách, định tính định lợng nh sau: - Cột sắc ký: RP 18 (150 ì 4,6 mm; àm) - Pha động: MeOH dung dịch KH2PO4 20 mM pH 7,0 (80 : 20), trộn đều, lọc qua màng lọc có đờng kính lỗ lọc 0,45 àm, loại bọt khí - Bớc sóng : 204 nm - Lu lợng dòng : 1,0 ml/phút - Thể tích mẫu tiêm : 20 àl 91 Dự án KC10-DA13 Hiệu lực cột sắc ký phải đạt yêu cầu giới hạn số đĩa lý thuyết (phải không dới 1500), khả tách với chất dùng để kiểm tra độ phân giải (phải không dới 2,0) Thẩm định phơng pháp: phơng pháp HPLC đợc thẩm định tiêu theo yêu cầu tùy theo phép phân tích: - Đối với định lợng: tính chọn lọc, độ đúng, độ xác, khoảng nồng độ tuyến tính, giới hạn định lợng Kết thẩm định cho phép khẳng định phơng pháp phân tích hoàn toàn phù hợp kiểm nghiệm GF - Đối với thử giới hạn tạp chất: khả tách GF với tạp có trình tổng hợp đợc xác định cách sắc ký riêng chuẩn tạp, hỗn hợp dung dịch chuẩn tạp hỗn hợp dung dịch chuẩn tạp + GF Kết cho thấy phơng pháp phân tích tách riêng tạp với độ phân giải tốt, pic gọn, sắc nét - Đánh giá phơng pháp HPLC quang phổ UV TCCS So sánh phơng pháp HPLC với phơng pháp UV (trong TCCS )để định tính, định lợng xác định tạp chất GF đợc trình bày bảng 3.13 Bảng 3.13 Kết so sánh hai phơng pháp phân tích Tiêu chí đánh giá HPLC UV Trang thiết bị Đắt tiền, đại Rẻ, đơn giản Phơng pháp phân tích Trực tiếp Làm thí Trực tiếp (định tính, thử nghiệm cho đồng thời kết giới hạn tạp chất), gián phép thử tiếp (định lợng) Làm (định tính, thử giới hạn riêng phép thử: a) định tạp chất, định lợng) tính thử giới hạn tạp chất; b) định lợng Thời gian phân tích nhanh, đơn giản, khoảng lâu, qua nhiều giai đoạn, 30 phút khoảng (định tính, thử giới hạn tạp chất); (định lợng) 92 Dự án KC10-DA13 Độ nhạy Cao, phát tạp Trung bình, phát chất nồng độ GF 0,01mg/ ml Kết định lợng (cùng mẫu) cỡ tạp chất nồng độ GF cỡ 0,15mg/ ml Hàm lợng = 97,64% Hàm lợng =99,86% RSD = 0,354% RSD = 0,520% Số lần phân tích = Số lần phân tích = Test F: Ftn = 2,249 < F lt = 4,09 với P = 0,95 Test t: | X1 X | = 2,22 > = 0,5238 với P = 0,95 Phân tích phơng sai test F cho thấy độ xác phơng pháp khác ý nghĩa thống kê với P = 0,95 chứng tỏ lặp lại trình phân tích cao Kết định lợng hai phơng pháp: khác có ý nghĩa thống kê với P = 0,95; điều giải thích phơng pháp HPLC có khả tách riêng GF khỏi tạp khác, phơng pháp quang phổ đo độ hấp thụ hỗn hợp bao gồm GF tạp chất lẫn vào GF 93 Dự án KC10-DA13 Phần IV Kết luận Sau năm thực dự án, hoàn thành nội dung sau: Hoàn thiện hệ thống thiết bị qui trình tổng hợp nguyên liệu GF 1.1 Bổ xung thiết bị cho tổng hợp GF (300g/năm) 1.2 Đã hoàn thiện mở rộng qui mô tổng hợp GF từ Pregnenolon: tối u hoá thông số kỹ thuật giai đoạn phản ứng để nâng cao hiệu xuất so với qui mô phòng thí nghiệm: giai đoạn (90% so với 75%), giai đoạn (80% / 60%), giai đoạn (72% / 65%), giai đoạn (95% / 90%), giai đoạn5 (75% / 65%) Do làm tăng hiệu xuất tổng hợp GF từ 58,5% lên 71,25% từ Funtumin hiệu xuất toàn từ 17,11% lên 36,94% từ Pregnenolon 1.3 Đã tổng hợp đợc 311,7g GF đạt TCCS, đủ để pha 800L thuốc tiêm (tơng ứng với 800.000 ống Aslem) theo kế hoạch dự án Hoàn thiện công nghệ sản xuất thuốc tiêm Aslem: 2.1 Bổ xung thêm trang thiết bị máy móc cho sản xuất (200.000-300.000 ống /lô mẻ) 2.2 Đã hoàn thiện công nghệ bào chế thuốc tiêm Aslem: sản xuất 547.704 ống Aslem (từ 625L dung dịch) đạt TCCS, có 44.500 ống (từ 50L) đợc sản xuất thử nghiệm thành công xởng thuốc tiêm GMP VINPHACO Số lại (175L) với nguyên liệu có sẵn đợc tiếp tục sản xuất tuỳ theo nhu cầu tiêu thụ thuốc Kết sở đảm bảo cho khả sản xuất 400.000 ống Aslem /năm đạt điều kiện GMP Hoàn thiện tiêu chuẩn chất lợng cho nguyên liệu GF 3.1 Đã chế tạo đợc 13g GF chuẩn có 6,34g GF-KT (tinh chế phơng pháp kết tinh nhiều lần) 6,68 g GF-CC (tinh chế sắc ký cột) 94 Dự án KC10-DA13 3.2 Kết phân tích cấu trúc phổ IR, MS, NMR nh tơng quan COSY, HSQC, HMBC mô phỏng: - Đã chứng minh cấu trúc phân tử nh mong muốn GF-KT C23H38N2O2 GF-CC C24H38N2O2 có thêm nhóm -CHCl2 liên kết cấu trúc phân tử N cho H -NH- vị trí C3) ; - Đã khảng định GF-KT mẫu chuẩn có độ tinh cao so với mẫu GF-CC Dự đoán hoàn toàn phù hợp với kết định lợng GF quang phổ hấp thụ UV (GF-KT có hàm lợng 99,86% hàm lợng GF-CC đạt 95,64%) 3.3 Xây dựng đợc phơng pháp phân tích GF HPLC Kết phân tích GF-KT nằm giới hạn cho phép TCCS cho phép đề xuất bổ xung phơng pháp định tính, định lợng GF thử tạp chất có liên quan GF HPLC vào " Dự thảo TCCS cho nguyên liệu GF" 3.4 Mẫu chuẩn GF-KT đạt tất tiêu chí TCCS, đợc chọn làm chất chuẩn chính, đợc Viện Kiểm nghiệm Quốc gia cấp chứng phân tích, đóng thuốc chuẩn lu giữ Viện Tóm lại : - Dự án hoàn thành khối lợng công việc theo kế hoạch tiêu sản phẩm KHCN đăng ký "Thuyết minh dự án" Hợp đồng với Bộ KH&CN Ban Chủ nhiệm Chơng trình KC-10 TT Sản phẩm đăng ký 01 Quy trình tổng hợp GF Sản phẩm đạt đợc 01 Quy trình tổng hợp GF (Hiệu xuất từ Funtumin: (Hiệu xuất từ Funtumin: 60%) 71%) 10g chất chuẩn 13g chất chuẩn (GF-KT GF-CC) (Có chứng phân tích) (Có chứng phân tích) 95 Dự án KC10-DA13 01 Tiêu chuẩn nguyên liệu - 01 Tiêu chuẩn nguyên liệu GF (Viện KNQG kiểm định) GF (Viện KNQG kiểm định) - 01 Dự thảo tiêu chuẩn 01 Quy trình bào chế Aslem 01 Quy trình sản xuất Aslem 0,3mg/mL 0,3mg/mL sở đạt GMP 400.000 ống/năm, đạt TCCS Sản xuất đợc 547.704 ống, đạt TCCS: - Năm 2004: 503.204 ống - Năm 2005: 44.500 ống - Đã thực tiến độ đăng ký - Chi tiêu tài phù hợp với dự toán - Sẽ đảm bảo nộp kinh phí thu hồi cho nhà nớc thời hạn - Qui trình sản xuất Aslem có giá trị mặt thực tiễn, cho hiệu kinh tế cao so với thuốc nhập ngoại Giá bán đến tay ngời tiêu dùng 10.000đ/ống - Thuốc điều hoà MD Aslem đợc BYT đa vào Danh mục thuốc thiết yếu theo định số 4809/2002/QĐ-BYT, ngày 03-12-2002, đợc lu hành với số đăng ký NC03-H06-06, theo định số 101/QĐ-QLD Cục Quản lý Dợc Việt nam; đợc Cục Sở hữu Công nghiệp cấp "Bằng độc quyền giải pháp hữu ích" số 320 theo định số 767/QĐ-ĐK ngày 26-12-2002 giấy "Chứng nhận đăng ký hàng hoá số 45734 ngày 27-03-2003 - Hiện thuốc đợc chuẩn bị chuyển giao công nghệ cho xí nghiệp Dợc phẩm đạt điều kiện GMP thuốc tiêm 96 Tài liệu tham khảo Tiếng Việt Đào Thị Mai Anh Nghiên cứu ảnh hởng ASLEM hệ thống enzym Cyt-P450 gan động vật thí nghiệm Luận văn thạc sỹ Dợc học, 2003 Nguyễn Hồng Anh, Nguyễn Xuân Thắng, Đào Kim Chi, Đặng Hanh Phức Tác dụng LH1 dẫn chất tơng tự màng hồng cầu lysozom Y học, 1985, 6-85, 16-21 Nguyễn Hoàng Anh, Nguyễn Tiến Thành, Đào Kim Chi, Đỗ Mai Lâm, Đỗ Đức Vân, Bạch Khánh Hoà, Phan thị Phi Phi Tình trạng suy giảm miễn dịch bệnh nhân ung th vùng tâm vị kết bớc đầu phác đồ điều trị Aslem bổ trợ sau phẫu thuật Dợc học (319):, 2002, 20-23 Nguyễn Hoàng Anh, Nguyễn Tiến Thành, Nguyễn Quốc Bình, Nguyễn Quang Nghĩa, Đào Thanh Chơng, Trịnh Hồng Sơn, Nguyễn văn Tuân, Đỗ Đức Vân, Đào Kim Chi Hiệu điều trị miễn dịch bổ trợ Aslem ung th gan (tại Bệnh viện Việt Đức giai đoạn 1991-2000) Dợc học 11/2004, 12-15 Nguyễn Quốc Bình, Nguyễn Thuý Minh, Đào Kim Chi Nghiên cứu tổng hợp Glycyl Funtumin qui mô bán công nghiệp Báo cáo hội nghị hoá học toàn quốc lần thứ 3, 1998 Nguyễn Yến Bình, Hoàng Thị Lan, Phạm Hoàng Phiệt, Nguyễn Hữu Hồng, Nguyễn Thị Mai Tác dụng BCG Pasteur (CWP) LH1 mẫu viêm phúc mạc thực nghiệm trực khuẩn mủ xanh kháng kháng sinh chuột nhắt Tiểu luận sinh viên y khoa, 1979 Trịnh Văn Bảo, Đào Kim Chi Khả gây đột biến nhiễm sắc thể Aslem Dợc học (6): , 2001, 912 Hoàng Đình Cầu, Nguyễn Đình Kim, Nguyễn Việt Cồ, Nguyễn Duy Linh, Lê Trang Thanh, Lê Ngọc Vân, Tạ Chí Phơng Điều trị miễn dịch sau mổ ung th phế quản nguyên phát LH1 kết hợp với vitamin C liều cao phối hợp với Tam thất Y học thực hành tháng 1-2 số (261), 1986, 18-28 Nguyễn Gia Chấn, Đào Kim Chi, Nguyễn thị Dung Nghiên cứu bán tổng hợp Funtumin nguyên liệu nớc (Solasodin) Kỷ yếu công trình 1978 Đại học Dợc khoa, 1978 10 Đào Kim Chi, A VanDergen Tổng hợp Funtumin qua trung gian Phtalimid Hoá học, 1984, No4, 27-29 11 Đào Kim Chi Tổng hợp Funtumin, số peptidyl funtumin thăm dò tác dụng kích thích miễn dịch không đặc hiệu chúng Luận án PTS Dợc Học, 1984 12 Vũ Thuý Dần, Đặng Hanh Phức, Phạm Hoàng Phiệt, Nguyễn Lân Dũng Góp phần nghiên cứu tác dụng KTMD BCG, LH1 hoạt chất toàn phần Lấu (P Reevesii wall.) Luận văn tốt nghiệp đại học chức, 1978 13 Tạ Ngọc Diệp, Phạm Hoàng Phiệt ảnh hởng LH1 lên chuyển dạng bạch cầu lympho Tập san ngoại khoa Việt nam, số 6, 1979, tr.163 14 Vũ BằngĐình, Nguyễn Trọng Chính, Nguyễn Ngọc Quang Một số đặc điểm miễn dịch tế bào ảnh hởng Thymogen số lợng chất lợng T lympho diễn biến lâm sàng bệnh nhân viêm gan mạn hoạt động, HBsAg(+) Báo cáo khoa học hội nghị hàng năm giảng dạy nghiên cứu miễn dịch học Học viện Quân Y, 1994 15 Mai Văn Điển, Lê Văn Đông, Nguyễn Dơng Quý, Phạm Mạnh Hùng Nghiên cứu tác dụng flavonoid chiết xuất từ vỏ đỗ xanh chức đại thực bào ổ bụng chuột nhắt trắng sau chiếu xạ liều Gy Cobalt 60 Thông tin Y học ĐH Y Hà nội Tập 2, số 10: , 1996, 12-15 16 Nguyễn Giang, Phan Thị Phi Phi Thay đổi chức thực bào đại thực bào số bệnh nhiệt đới dới tác dụng số chất KTMD Luận văn tốt nghiệp bác sĩ nội trú, 1980 17 Nguyễn Thị Hoà Chiết xuất phân lập Tomatin từ cà chua để làm nguyên liệu tổng hợp Funtumin Khoá luận tốt nghiệp Đại học Dợc Hà nội, 1977 18 Hoàng Kim Huyền, Đào Kim Chi Khảo sát ảnh hởng Aslem lên thay đổi thể trọng chức sinh sản Dợc Học, số 1, 1993, 25-27 19 Hoàng Kim Huyền, Đào Kim Chi Khảo sát ảnh hởng chế phẩm Aslem lên chức hệ tạo máu, gan, thận huyết áp Dợc học, số 1, 1992, 2830 20 Nguyễn Đình Kim Điều trị miễn dịch bổ trợ sau mổ ung th phế quản nguyên phát LH1 phối hợp với vitamin liều cao tam thất Luận án tiến sĩ Y học ĐH Y Hà nội, 1986 21 Tôn Đức Lang, Phạm Lộng Chơng, Đỗ Nguyên Ngọc Minh, Bùi Tuấn Thịnh Điều trị nhiễm trùng ngoại khoa kích thích miễn dịch không đặc hiệu kết hợp với kháng sinh Tập san ngoại khoa Việt nam, số 6, 1979, 167 22 Nguyễn Kim Minh, Đào Kim Chi, Vũ Triệu An Sử dụng test phục hồi tạo rosette E bị ức chế Theophyllin để đánh giá khả KTMD tế bào số peptidyl steroid tổng hợp Tạp chí Y học Việt nam tập 210, số 11, 1996, 52-54 23 Nguyễn Lệ Phi, Vũ Thuý Dần, Nguyễn thị Khanh, Đặng Hanh Phức Tác dụng tăng sức đề kháng chống nhiễm khuẩn LH1 Thông báo khoa học ĐH Dợc HN 1986 (30): 1986, Revue pharmaceutique 76, 1983 24 Phan Thị Phi Phi, Nguyễn Giang, Tạ Thị Mến, Đặng Hanh Phức, Vũ Thuý Dần, Nguyễn Thị An, Nguyễn Thị Khanh Góp phần nghiên cứu LH1, chất KTMD không đặc hiệu Thông báo khoa học ĐHDK, 1980 25 Đặng Hanh Phức, Đào Kim Chi, Nguyễn Thuý Minh Bán tổng hợp Glycyl Funtumin phơng pháp anhydrid hỗn hợp Dợc học 1, 1985 26 Phạm Huy Quyến Tác dụng kích thích miễn dịch dịch chiết toàn phần rễ Nhàu súc vật thí nghiệm Luận án PTS Y Dợc, 1996 27 Phạm Song áp dụng LH1 ung th phế quản kết hợp với tia xạ, hoá chất phẫu thuật Nội khoa số 3, 1981, 20-22 28 Nguyễn Tiến Thành, Nguyễn Hoàng Anh, Nguyễn Quang Nghĩa, Đào Kim Chi, Bạch Khánh Hoà, Phan thị Phi Phi, Đỗ Đức Vân Nghiên cứu tác dụng Aslem lên khả chuyển dạng chế tiết Cytokine tế bào lympho máu ngoại vi bệnh nhân ung th đại trực tràng Ngoại khoa số 6:, 2003 41-46 29 Lê Quý Toản Bớc đầu nghiên cứu tác dụng Aslem lên đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào điều trị ung th đờng tiêu hoá KLTN Dợc sĩ khoá 1999-2004 Tiếng nớc 30 Abul K.A Andrew H.L, Jordan S.P Cellular and Molecular Immunology, 2000 31 Anne C Armstrong, David Eaton, Joanne C Ewing Science, medicine and the future Cellular immunotherapy for cancer BMJ Vol 323 : 2001, 12891293 32 Antonysamy M.A., Motkka E.J., V Ramkumar Adenosine acts as an endogenous modulators of IL-2 dependent prolification of cytotoxic T lymphocytes The journal of immunology Vol 155, No 6, 1995, 2813-2821 33 Antoni Ribas, Lisa H Butterfield, James S Economou Immunotherapy for Cancer The Oncologist 2000; 5: 87-98 Genetic 34 Arnaud J.P., Buyse M., Nordlinger B., Martin F., Pector J.C., Zeitoun P., Adloff A., and Duez N Adjuvant therapy of poor prognosis colon cancer with Levamisole: results of an EORTC double-blind randomized clinical trial Br.J.Surg Vol 76, 1989, 284-289 35 Audibert F.M., Lise L.D Adjuvants: current status, clinical perspectives and future prospects Immunol Today Vol 14, No6, 1993, 281-284 36 Boissonnas R.A Une nouvelle methode de synthese peptidique Helv Chim Acta 34, 1951, 874 37 Bradman J.S., Bluming A., Mayer R.J Levamisole and Fluorouracil for adjuvant therapy of resected colon carcinoma N.Egnl.J.Med 322, 1990, 352-358 38 Creau-Goldberg N., and Salomon J.C Thymo independent antigenic stimulation response to polyvinyl pyrolidone and adjuvant effects of Coryne bacterium parvum and LH1 Int-Asch-Allergy Appl Immunol 57, 1978, 31 39 Dexter TM And Testa N.G Haematopoietic growth factors: review biology and clinical potential Gasdiner-Cadwel Communication Ltd 1993, 7-43 40 Giesen E.M., Beck J.P., Beck J., and N.Đ Tâm The effect of LH1, an aminoacyl steroid on culture hepatome cells Cancer Biochem.Biophys 5, 1981, 233-238 41 Gregory P Adams & Louis M Weiner Monoclonal antibody therapy of Cancer Nature biotechnology Vol.23 Number 9: 2005, 1147-1157 42 Hadden J.W Immunostimulant Immunol.Today Vol.14, No6, 1993, 175280 43 Harman D., et Roger M Les immunostimulants Revue du practicien 24, 1978, 3105-3117 44 Hoàng Đình Cầu, Nguyễn Đình Kim et al Traitement du cancer du poumon au Vietnam Chirurgie 1986 45 Jannik J., Kopp W.C., Smith J.W., et al Dose-related immunologic effects of Levamisole in patients with cancer J.Clin.Oncol Vol 11, No1, 1993,125135 46 Jannot M.M., Khuong Huu Quy et Goutarel R Deux nouveaux alcaloides steroidiques: la funtumin et la funtumidine Compt.Rend Aca Sci 264, 1968, 3076 47 Jin Pok Kim et al The concept of immunochemotherapy in gastric cancer World J.Sur 11, 1987, 465-472 48 Laurie J.A., Moertel C.G., et al Surgical adjuvant therapy of large bowel carcinoma: an evaluation of Levamisole and the combination of Levamisole and Fluorouracil J.Clin.Oncol 7, 19891447-1456 49 Mathe G., Amiel J.L., Schwarzenberg L., et al The immunological approch to cancer treatment J.R.Coll Physicians Lond 5, 1970, 62 50 Mezzaroma I., Avella A., Paganelli R et al Recombinants -2a-IFN treatment in patients with AIDS and AIDS-related complex (ARC) clinical and immunological evaluation Immunologia clinica Vol.7, N0 2, 1998, 93104 51 Morton D.L Cancer immunotherapy: an over view Semi.Oncol 1, 1974, 297 52 Mutchler E., Derendorf H Drug development and Drug trials Drugs Actions Basic principles and therapeutic Aspects, 1995, 91-94 53 Nguyen Thu Phong & A.VanderGen Synthesis of Funtumin from pregnenolon via azid Presented at the meeting of the section for organic chemistry of the K.N.C.V, held at weesp on june 18.1982 54 Nguyễn Đăng Tâm Steroides liés aux aminoacides et aux peptides Comp.Rend.Aca.Sci Paris 260, 717, 1965 55 Nguyễn Đăng Tâm, Janot N, Tôn Thất Tùng The effects of LH1 on Jerne's plaque forming control.VIth Int.Sym.Med.Chem.Pris, 1976 56 Nguyễn Gia Chấn, Đào Kim Chi, Nguyễn Thị Dung Contribution to the study on Medicaments having immunostimulogical properties.I Synthesis of Funtumin from Solasodine Revue pharmaceutique 01 1996 57 Renoux G et Renoux M Influence de l'administration de Levamisole sur la reactivite des lymphocytes T de cancereux avances New Press Med 5: 1976, 67-70 58 Riley C.M., Fell A.F (1996), Development and validation of analytical methods, Elsevier Science Ltd, pp - 71; 247 - 289 59 Roit I., Brostoff M Immunology (fifth edition) Mosby International Ltd, 1998 60 S.V Chiplunkar The immmune system and cancer Current science, Vol.81, NO.5: 2001, 542-548 61 Seo N,Hayakawa S and Tokura Y Mechanisms of immune privilege for tumor cells and regulatory cytokines produce by innate and acquired immune cells Cancer biology, Vol 12: 20022, 91-300 62 Serow B., Rosenfeld C New immunomodulating agents and biological response modifiers Human cancer immunology Vol 3, 1982 63 Siragussa Tif, Miller A.R, Bellculo C et al The role of circulating cytokines in colorectal carcinoma Int J Oncol 5: 2000, 217-228 64 Steven A Rosenberg Shedding Light on Immunotherapy for Cancer The new England Journal of Medicine 350; 14 : 2004, 1461-1463 65 Steven A Rosenberg The immunotherapy and gene therapy of cancer J.Clin.Oncol Vol 10, No2, 1992, 180-189 66 Suzane L.T., et al Immunotherapy of patients with advanced cancer using TIL and recombinant IL-2: a pilot study J.Clin.Oncol Vol 6, No5, 1988, 839-853 67 Tôn Thất Tùng, Nguyễn Nh Bằng, Nguyễn Văn Vân, Tôn Thất Bách, Nguyễn Đăng Tâm et Salomon J.C Première essaie clinique de traitement du cancer primaire du foie par des agents immuno-stimulants administres par voie systematique ou intratumorale Travaux de la clinique chirurgical de l'hopital universitaire Huu nghi Vietduc Chirurgie, 1975, 102-542 68 Tôn Thất Tùng, Trần Thị An, Nguyễn Đăng Tâm, Phạm Hoàng Phiệt, Nguyễn Nh Bằng, Tông Thất Bách, Hoàng Văn Sơn et Đỗ Kim Sơn Le cancer primaire du foie au VN Traitement par des adjuvants stimulateurs Traveaux de la clinique chirurgicale de l'Hopital universitaire Huunghi Vietduc Immunostimulant in primary hepatomas The Lancet, March 1st 1975, 1975, 527 69 Tariq Parvez Cancer treatment: What's ahead? JCPSP 2005, Vol.15 (11), 2005.: 738-745 70 USP XXVIII (2005), pp 2748 - 2751 71 Windle R., Bell P.R.R., and Shaw D Five years results of a randomized trial of adjuvant 5-fluorouracil and levamisole in colorectal cancer Br.J.Surg Vol 74, 1987, 569-571 [...]... dụng quy trình đã hòan thiện, đã tổng hợp đợc 311,7g GF đạt TCCS, đủ dùng để pha 800L thuốc tiêm (tơng ứng với 800.000 ống Aslem) theo kế hoạch của dự án Dự án KC10-DA13 2 Hoàn thiện công nghệ sản xuất thuốc tiêm Aslem: 2.1 Bổ xung thiết bị cho sản xuất (200.000-300.000 ống /lô mẻ) 2.2 Mở rộng và hoàn thiện công nghệ sản xuất thuốc tiêm Aslem: sản xuất đạt TCCS 547.704 ống Aslem (từ 625L dung dịch) trong... thiết bị để mở rộng qui mô sản xuất, đạt tiêu chuẩn GMP về thuốc tiêm, hoàn thiện qui trình tổng hợp và tiêu chuẩn nguyên liệu, đào tạo cán bộ kỹ thuật cho tổng hợp, sản xuất và tổ chức quản lý sản xuất là hết sức cần thiết Do đó, dự án KC10DA13: " Hoàn thiện qui trình sản xuất thuốc tiêm Aslem điều hoà miễn dịch" đã đợc xét duyệt Dự án thuộc chơng trình " Khoa học và Công nghệ phục vụ bảo vệ và chăm sóc... Dự án phải hoàn trả cho NN 595.000.000 đồng (60% từ NSSNKH) vào 2 đợt: đợt 1 (06/2006) và đợt 2 (12/2006) Mục tiêu của Dự án: - Hoàn thiện qui trình tổng hợp Glycyl funtumin hydrochlorid (GF) với số slợng 300g/năm - Hoàn thiện qui trình bào chế thuốc tiêm Aslem 0,3 mg/ml ở qui mô công nghiệp - Hoàn thiện tiêu chuẩn nguyên liệu GF Nội dung chính của DA: 1/ Hoàn thiện hệ thống thiết bị và qui trình tổng... để nâng cao hiệu xuất tổng hợp và đạt chất lợng tinh khiết hoá học theo TCCS 2/ Hoàn thiện công nghệ bào chế thuốc tiêm Aslem đạt tiêu chuẩn GMP : - Lựa chọn trang thiết bị máy móc cho công nghệ sản xuất thuốc - Nghiên cứu biện pháp tối u hoá qui trình sản xuất Aslem ở qui mô 400.000 ống/năm đạt TCCS đã đợc VKN Quốc gia thẩm định 3/ Hoàn thiện tiêu chuẩn chất lợng cho nguyên liệu pha tiêm: - Chế tạo... "Nghiên cứu sản xuất thuốc điều hoà miễn dịch Aslem ứng dụng trong lâm sàng", chế phẩm thuốc tiêm Aslem do Trung tâm khoa học công nghệ Dợc và Công ty Dợc khoa trờng ĐH Dợc Hà nội sản xuất đã đợc Cục Quản lý Dợc VN cấp phép lu 1 Dự án KC10-DA13 hành trên thị trờng ở VN nhằm đáp ứng nhu cầu sử dụng thuốc ngày càng gia tăng trong điều trị bổ trợ ung th Việc bổ xung trang thiết bị để mở rộng qui mô sản xuất, ... Aslem (từ 625L dung dịch) trong đó có 44.500 ống (từ 50L) đợc sản xuất thử nghiệm thành công tại xởng thuốc tiêm GMP của VINPHACO Số còn lại (175L) với nguyên liệu có sẵn sẽ đợc tiếp tục sản xuất tuỳ theo nhu cầu tiêu thụ của thuốc Kết quả này là cơ sở đảm bảo cho khả năng sản xuất 400.000 ống Aslem /năm tại cơ sở đạt tiêu chuẩn GMP 3 Hoàn thiện tiêu chuẩn chất lợng cho nguyên liệu GF: 3.1 Đã chế tạo... chúng tôi đã hoàn thành đầy đủ mọi khối lợng công việc theo đúng kế hoạch và chỉ tiêu các sản phẩm KHCN đã đăng ký trong "Thuyết minh Dự án" và Hợp đồng số 13/2004/HĐ-DA.CTKC10 ký với Bộ KH&CN và Ban Chủ nhiệm Chơng trình KC-10, với những nội dung sau: 1 Hoàn thiện hệ thống thiết bị và quy trình tổng hợp nguyên liệu GF: 1.1 Bổ xung thiết bị cho tổng hợp GF (300g/năm) 1.2 Mở rộng và hoàn thiện quy mô... rãi hơn thuốc KTMD phối hợp với Kháng sinh trong các bệnh nhiễm trùng nhằm cải thiện bệnh cảnh lâm sàng và giảm đợc liều của kháng sinh [40] - Trong các bệnh tự miễn Thuốc KTMD đợc sử dụng trong viêm khớp dạng thấp, chủ yếu là nhằm phục hồi tình trạng suy giảm miễn dịch sau khi điều trị bằng các thuốc chống viêm và thuốc ức chế MD (corticoid, thuốc chống viêm non-steroid) - Trong AIDS: Các thuốc KTMD... chủ yếu cho các bệnh lý suy giảm miễn dịch thứ phát ở Việt nam đã có một số công trình nghiên cứu tìm kiếm các chất KTMD có nguồn gốc từ thực vật nh chế phẩm Phylamin từ bèo hoa dâu, dịch chiết toàn phần rễ cây Nhàu, dịch chiết toàn phần cây Lấu, dịch chiết từ vỏ đỗ xanh ), gần đây còn có chế phẩm Naturen chế từ con tằm, Cadef nhng vẫn cha có chế phẩm nào đợc nghiên cứu hoàn chỉnh dới dạng tinh khiết... liệu cũng nh hiệu xuất tổng hợp Cụ thể là: TT Hiệu xuất Tên giai đoạn phản ứng và sản phẩm Giai đoạn 1 Giai đoạn hydrogen hoá (Pregnanolon) 2 Giai đoạn gắn nhóm phtalimid (Phtalimido- 68-82% đã hoàn thiện 80-90% 87% 99% cũ funtumin) 3 Giai đoạn thuỷ phân nhóm phtaloyl (Funtumin) 68% 75% 4 Giai đoạn ngng tụ t-BOC-Gly-funtumin (BOC- 90% 95% 65% 75% Hiệu xuất từ Funtumin 58,50% 71,25% Hiệu xuất toàn bộ từ