Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ NI VỖ THÀNH THỤC VÀ KÍCH THÍCH LƯƠN ĐỒNG (MONOPTERUS ALBUS) SINH SẢN BẰNG HCG (HUMAN CHORIONIC GONADOTROPINE) Đỗ Thị Thanh Hương1, Nguyễn Thị Lệ Hoa2 Nguyễn Anh Tuấn1 ABSTRACT Study examined the effects of pre-injection of hCG and artificial rain on the maturity and spawning of the eel was conducted in three months with four triplicated treatments including without artificial rain-without hormone pre-injection (KPM-KTD), without artificial rain-hormone pre-injection (KPM-TD), artificial rain-hormone pre-injection (PM-TD) and artificial rain-without hormone pre-injection (PM-KTD) The results showed that the gonad somatic index (GSI) of this species was the highest at (PM-TD) There was significantly different (p0,05) nghiệm thức Tháng thứ ba sau ni vỗ hệ số thành thục lươn tăng cao nghiệm thức có tiêm dẫn, đạt 3,10±1,27% nghiệm thức PM-TD khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) so với nghiệm thức KPM-TD (1,81±0,88%) (Hình 1) Kết 260 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ cho thấy việc tiêm dẫn kích thích tố hCG làm gia tăng hệ sô thành thục lươn đáng kể, đặc biệt điều kiện có kết hợp tiêm dẫn kích thích tố phun mưa Q trình tích lũy nỗn hồng hay giai đoạn phát triển tế bào trứng chịu ảnh hưởng hai yếu tố tác động hormon điều kiện môi trường Trong thí nghiệm hai yếu tố sử dụng kết hợp để kích thích q trình tạo nỗn hoàng chuyển sang giai đoạn thành thục hoàn toàn Kết thí nghiệm cho thấy tác dụng hCG thúc đẩy q trình chuyển hóa chất dinh dưỡng vào tế bào trứng hệ số thành thục lươn đồng vào tháng thứ đạt cao Các nghiên cứu kích thích cá chình kích dục tố dẫn đến tạo trứng trứng thụ tinh (Yamamoto Yamauch, 1974; Sugimoto et al., 1976 trích Nguyễn Tường Anh, 2005) Sử dụng hỗn hợp T LHRHa cá đối kích thích nỗn bào phát triển (Keylley et al., 1987); sử dụng clomiphene citrat kích thích rụng trứng cá chạch M anguillicaudatus (Ueda Takahashi, 1977); sử dụng LHRHa thúc đẩy chín trứng cá trích Clupea harengus (Carolsfeld et al., 1988); sử dụng hCG kích thích nỗn bào phát triển thành thục (Huat, 1980) Từ nghiên cứu cho thấy kích thích tố tác dụng mạnh đến phát triển tuyến sinh dục trình sinh sản đa số đối tượng thủy sản nói chung lươn đồng nói riêng Phun mưa yếu tố sinh thái quan trọng kích thích q trình thành thục lươn, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê phun mưa giúp cho nhiệt độ thí nghiệm ổn định Theo lý thuyết yếu tố sinh thái có khả kích thích vùng đồi tiết yếu tố giải phóng kích thích não thùy tiết hormon liên quan đến q trình chuyển hóa protein nỗn hồng vào tế bào trứng Kết thí nghiệm cho thấy yếu tố sinh lý (tiêm dẫn kích thích tố) kết hợp với sinh thái (phun mưa) thúc đẩy thành thục lươn tốt Do đó, thực tế sản xuất thực việc tiêm dẫn kích thích tố để góp phần nâng cao hệ số thành thục cần thiết kết hợp với phun mưa nhằm nâng cao hiệu nuôi vỗ sản xuất giống lươn đồng Bảng 2: Hệ số thành thục lươn đồng sau tháng nuôi vỗ Nghiệm thức KPM-KTD KPM-TD PM-TD PM-KTD GSI bắt đầu TN (%) 0,28±0,21a 0,28±0,21a 0,28±0,21a 0,28±0,21a GSI tháng thứ 1(%) 0,77±0,24a 0,38±0,19a 0,31±0,05a 1,22±0,78a GSI tháng thứ (%) 0,83±0,25a 1,99±1,53a 0,73±0,20a 1,48±1,06a 261 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ 5,0 4,5 4,0 GSI (%) 3,5 KPM-KTD KPM-TD PM-TD PM-KTD b 3,0 2,5 a 2,0 1,5 1,0 a a 0,5 0,0 KPM-KTD KPM-TD PM-TD Nghiệm thức PM-KTD Hình 1: Hệ số thành thục lươn sau tháng nuôi vỗ 3.2 Tỉ lệ thành thục lươn sau ni vỗ Tỷ lệ thành thục trung bình lươn đồng đạt cao nghiệm thức có tiêm dẫn kích thích tố hCG 88,9±19,3% nghiệm thức PM-TD 77,8±19,3% nghiệm thức KPM-TD Hai nghiệm thức khơng tiêm dẫn (KPM-KTD PMKTD) tỷ lệ thành thục 66,7±0,00% thấp hai nghiệm thức có tiêm dẫn Kết cho thấy kích thích tố hCG góp phần gia tăng thành thục tuyến sinh dục (Hình 2) Nghiên cứu ni vỗ cá lăng chấm (Hemibagrus guttatus) cho thấy tỷ lệ thành thục nghiệm thức có dịng chảy – phun mưa nhân tạo đạt cao 91,7% cao nghiệm thức có dịng chảy – khơng phun mưa nhân tạo đạt 82,1% giai đoạn nuôi vỗ thành thục (Nguyễn Đức Tuân et al., 2006) Kết thí nghiệm cho thấy tỷ lệ thành thục lươn đồng tăng lên theo thời gian nuôi vỗ tất nghiệm thức Nuôi vỗ giúp lươn đồng thành thục tốt có chênh lệch nghiệm thức tác động yếu tố khác nhau, yếu tố tiêm dẫn kích dục tố kết hợp với phun mưa góp phần thúc đẩy trình thành thục lươn đồng Kết nghiên cứu cho thấy việc chọn lựa giải pháp tối ưu (tiêm dẫn hCG kết hợp phun mưa) để nâng cao kết nuôi vỗ thành thục nâng cao hiệu kinh tế sản xuất giống nhân tạo lươn đồng cần thiết 262 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ 110 100 90 Tỉ lệ thành thục (%) 80 70 60 50 KPM -KTD 40 KPM -TD PM -TD 30 PM -KTD 20 10 KPM -KTD KPM -TD PM -TD Nghiệm thức PM -KTD Hình 2: Tỷ lệ thành thục lươn đồng sau tháng nuôi vỗ 3.3 Ảnh hưởng mật độ đến khả sinh sản lươn đồng 3.3.1 Tỷ lệ sinh sản Tỷ lệ sinh sản lươn đồng bố trí cặp đạt cao từ 66,7–100% cao nhiều so với nghiệm thức cặp (8,33%) nghiệm thức cặp (0–5,55%) nguồn lươn có tiêm dẫn khơng tiêm dẫn Trong đợt cho đẻ kéo dài tháng nghiệm thức cặp có số lần đẻ lươn cao lần; nghiệm thức cặp lần, nghiệm thức cặp lần Kết thí nghiệm cho thấy trước đẻ lươn phải làm tổ phun bọt (Hình 3), lươn cần nơi yên tỉnh không bị ảnh hưởng yếu tố khác mật độ cặp số lần đẻ lươn nhiều Thời gian lươn bắt đầu đẻ (sau bố trí lươn vào bể đẻ) nguồn lươn có tiêm dẫn kích thích tố hCG ngày, ngắn so với nguồn lươn khơng tiêm dẫn kích thích tố hCG (14 ngày sau bố trí vào bể đẻ) ngắn kết cho sinh sản lươn kích thích tố hCG liều 2.000 UI/kg (khơng có tiêm dẫn hCG phun mưa thời gian nuôi vỗ) với thời gian bắt đầu đẻ 16 ngày (Đỗ Thị Thanh Hương, 2008) Điều cho thấy lươn thành thục tốt có thời gian bắt đầu sinh sản ngắn 263 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 100 Trường Đại học Cần Thơ 100 90 Tỷ lệ sinh sản (%) 80 6,6 70 KT D 60 TD 50 40 30 20 8,3 10 8,33 ,5 0 cặp cặp cặp Ngh i ệ m th ức Hình 3: Tỉ lệ sinh sản lươn đồng thời gian tháng Hình 4: Tổ bọt lươn đồng sau sinh sản 3.3.2 Tỷ lệ thụ tinh Tỷ lệ thụ tinh lươn đồng thí nghiệm trình bày (Bảng 3) Tỉ lệ thụ tinh lươn đồng cao hai thí nghiệm, đạt cao 98,3% thí nghiệm với nguồn lươn khơng tiêm dẫn, cao thí nghiệm với nguồn lươn tiêm dẫn hCG cao 97,5% Kết cao kết nghiên cứu Đỗ Thị Thanh Hương et al (2008) với tỷ lệ thụ tinh đạt 73% tiêm hCG liều 2.000 UI/kg Tỷ lệ thụ tinh lươn đồng từ 96,4–98,3% cao số loài khác cá chạch sông (Macrognathus siamensis) 70,7–80,4% (Nguyễn Quốc Đạt, 2007), cá lăng (Mystus wyckii) 51,5–82,3% (Nguyễn Văn Kiểm, 2008), cá thát lát (Chitala chitala) 71–79% (Phạm Minh Thành, 2008) hay cá trê trắng (Clarias batrachus) 55,4–72,5% (Huỳnh Kim Hường, 2005) Bảng 3: Tỷ lệ thụ tinh trứng lươn đồng từ nguồn lươn bố mẹ khác Tỷ lệ thụ tinh (%) Thí nghiệm với lươn khơng tiêm dẫn hCG Thí nghiệm với lươn tiêm dẫn hCG 264 Nghiệm thức cặp cặp 98,3 96,4 96,8 97,4 cặp 97,5 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ 3.3.3 Tỷ lệ nở Tỷ lệ nở lươn đồng trình bày (Bảng 4) Kết cho thấy tỷ lệ nở lươn đồng cao thí nghiệm từ 79,7–94,8%, tương đương với kết thí nghiệm Nguyễn Thị Hồng Thắm (2007) với tỷ lệ nở đạt cao 95% nghiệm thức tiêm hCG liều 1.500 UI/kg Tuy nhiên, tỷ lệ nở lươn đồng cao so với nhiều loài khác cá chạch sông (Macrognathus siamensis) 53,4– 61,3% (Nguyễn Quốc Đạt, 2007), cá lăng (Mystus wyckii) 72,3–83,4% (Nguyễn Văn Kiểm, 2008), cá thát lát (Chitala chitala) 71–79% (Phạm Minh Thành, 2008), cá trê trắng (Clarias batrachus) 30,4–45,1% (Huỳnh Kim Hường, 2005) Bảng 4: Tỷ lệ nở lươn đồng thí nghiệm Tỷ lệ nở (%) Thí nghiệm với nguồn lươn khơng tiêm dẫn hCG Thí nghiệm với nguồn lươn tiêm dẫn hCG Nghiệm thức cặp cặp 92,5 88,0 92,3 94,8 cặp 79,7 3.3.4 Sự phát triển phôi Sự phát triển phôi lươn trình bày qua (Hình Bảng 5) Kết cho thấy thời gian phát triển phôi lươn dài, đến 96 sau đẻ Hình 5a: Trứng lươn đẻ Hình 5b: Trứng lươn sau ngày ấp Hình 5c: Trứng lươn sau ngày ấp Hình 5d: Trứng lươn nở 265 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ Hình 5e: Nhiều tế bào Hình 5f: Phơi nang cao Hình 5g: Phơi vị Hình 5h: Cuối phơi vị Hình 5i: Hình thành đốt sống Hình 5j: Hình thành mạch máu Hình 5k: Hình thành tim Hình 5l: Hình thành điểm mắt Hình 5m: Trứng lươn nở Hình 5n: Lươn nở Hình 5: Q trình phát triển phơi lươn đồng 266 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 5: Thời gian q trình phát triển phơi hậu phơi lươn điều kiện nhiệt độ 30oC STT Thời gian Giờ 22 28 30 33 35 68 76 82 95 Giai đoạn phát triển Phút 45 Nhiều tế bào Phôi nang cao Phơi vị Cuối phơi vị Đốt sống Hình thành mạch máu Hình thành tim Hình thành điểm mắt Nở 3.3.5 Đặc điểm thành thục sinh dục lươn đồng Buồng trứng lươn đồng sau đẻ to, màu vàng, hạt trứng phát triển to Buồng tinh giai đoạn chín mùi sinh dục có màu phớt hồng, to, căng tròn, vuốt nhẹ tinh dịch màu trắng Kết phân tích mơ học tuyến sinh dục lươn đồng sau sinh sản cho thấy tồn buồng trứng với diện trứng thời kỳ I, II, III, IV V Kết cho thấy tuyến sinh dục lươn đồng đực sau sinh sản tồn tinh sào với diện tinh tử tinh trùng Kết phù hợp với chu kỳ tái phát dục 5–11 ngày buồng trứng chứa phase trứng dự trữ sau thời gian ngắn buồng trứng nhanh chóng chuyển sang giai đoạn chín mùi sinh dục sẵn sàng sinh sản Đặc biệt quan sát đặc điểm bên lươn đồng sau sinh sản ta thấy lươn đồng ln có khoảng 2–3 vết trầy xước đường kính khoảng cm thân Như vậy, q trình sinh sản, hoạt động đẻ trứng có tham gia hỗ trợ đực (ở số lồi sinh sản có tượng đực cắn vào cái) Hiện tượng xảy cá chạch bùn (Misgurnus anguillicaudatus) cá chạch sông (Mastacebelus circumcinctus) đẻ cá chạch đực húc vào bụng chạy theo quấn vào chạch tưới tinh dịch, lúc trứng phóng (Ngơ Trọng Lư, 2002) Trong điều kiện nuôi vỗ tốt điều kiện sinh thái phù hợp giúp cho buồng trứng nhanh chóng tái thành thục sẵn sàng cho lần đẻ Ghi nhận kết quan trọng cho việc mở hướng sinh sản nhân tạo lươn đồng tương lai, góp phần giải vấn đề giống khan KẾT LUẬN 4.1 Kết luận - Tiêm dẫn hCG góp phần gia tăng hệ số thành thục lươn đồng đạt hiệu cao kết hợp với yếu tố phun mưa - Lươn đồng bố trí sinh sản mật độ cặp cho tỷ lệ sinh sản cao từ 66,7–100% (diện tích bể 0.63 m2) - Khoảng thời gian lần đẻ lươn đồng 8-11 ngày, lươn đồng có số lần đẻ đạt cao lần/đợt sinh sản (2 tháng) 267 Tạp chí Khoa học 2010:14 258-268 Trường Đại học Cần Thơ 4.2 Đề xuất Tiến hành cho đẻ lươn với qui mơ nhỏ có hạch toán kinh tế, xác định giá thành lươn bột để hồn chỉnh qui trình sản xuất giống Xác định khả sinh sản lươn không nuôi vỗ có ni vỗ TÀI LIỆU THAM KHẢO Đỗ Thị Thanh Hương, Nguyễn Thị Hồng Thắm Nguyễn Anh Tuấn 2008 Kết bước đầu sản xuất giống nhân tạo lươn đồng (Monopterus albus) Tạp chí khoa học 2008 (Tập 2) Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 50 – 58 Huỳnh Kim Hường 2005 Nghiên cứu thành thục thử nghiệm sinh sản nhân tạo cá trê trắng (Clarias batrachus) LVTN Cao học Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 60 Lý Văn Khánh, Phan Thị Thanh Vân, Nguyễn Hương Thùy Đỗ Thị Thanh Hương 2007 Nghiên cứu đặc điểm sinh học dinh dưỡng sinh sản lươn đồng (Monopterus albus) Tạp chí khoa học 2008 (Tập 1) Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 101 – 112 Nguyễn Tường Anh 2005 Kỹ thuật sản xuất giống số lồi cá ni Nhà xuất Nơng nghiệp TP Hồ Chí Minh Số trang: 103 Nguyễn Quốc Đạt 2007 Thử nghiệm sản xuất giống nhân tạo cá chạch sông (Macrognathus siamensis) LVTN Cao học Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 76 Nguyễn Đức Tuấn, Khương Văn Thưởng, Lê Thiên Lý 2006 Nghiên cứu kỹ thuật sinh sản nhân tạo cá Lăng chấm (Hemibagrus guttatus) điều kiện nuôi Số trang 14 http://chonongnghiep.com/forum.aspx?g=posts&t=817 Ngày truy cập 16/4/2009 Nguyễn Văn Kiểm Nguyễn Văn Triều 2008 Nuôi vỗ thành thục kích thích cá lăng (Mystus wyckii) sinh sản kích thích tố Tạp chí khoa học 2008 (Tập 2) Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 39 – 44 Nguyễn Thị Hồng Thắm 2007 Nghiên cứu đặc điểm sinh lý sinh sản thử nghiệm sản xuất giống lươn đồng (Monopterus albus) LVTN Cao học Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 73 Ngô Trọng Lư 2002 Kỹ thuật ni cá quả, cá chình, chạch, cá bống bóp, lươn đồng Nhà xuất Hà Nội Số trang: 119 Phạm Minh Thành 2008 Nghiên cứu thành thục ao kích thích cá cịm (Chitala Chitala) sinh sản Tạp chí khoa học 2008 (Tập 2) Trường Đại học Cần Thơ Số trang: 59– 66 268