Đang tải... (xem toàn văn)
Enzyme protease
Bộ Công Thương Trường Đại Học Công Nghiệp TPHCM Viện Công Nghệ Sinh Học Và Thực Phẩm Lớp: NCTP5A Nhóm: 02 GV: Nguyễn Thị Trang Đề Tài: Enzyme protease Nội dung gồm: GIỚI THIỆU II- CHUẨN BỊ GIỐNG – TẠO SINH KHỐI 2.1 Phân lập giống Vi Sinh Vật – Chủng nấm mốc Aspergillus Oryzae 2.1.1 Vai trò giống công nghệ enzyme 2.1.2 Yêu cầu giống Vi Sinh Vật công nghiệp enzyme 2.1.3 Giới thiệu chủng nấm mốc Aspergillus oryzae 2.1.4 Quá trình phân lập giống Vi Sinh Vật a Phân lập giống điều kiện tự nhiên b Phân lập giống điều kiện sản xuất c Phân lập giống mẫu giống hư hỏng 2.2 Giới thiệu phương pháp phân lập nấm mốc Aspergillus Oryzae III: CÔNG NGHỆ LÊN MEN TẠO ENZYME PROTEASE 3.1 Giới thiệu phương pháp lên men bề mặt a Môi trường lỏng b.Môi trường đặc 3.2 Sản xuất nấm mốc giống – nuôi cấy tạo sinh khối 3.2.1 Môi trường cho sản xuất mốc giống: 3.2.2 Chuẩn bị mốc giống 3.2.3 Nuôi cấy tạo sinh khối 3.3 Thu nhận enzym protease từ nấm mốc Aspergillus Oryzae 3.3.1 Sinh trưởng sinh tổng hợp protease từ nấm 3.3.2.Qui trình thu nhận enzyme protease Thuyết minh qui trình: Thu nhận sản phẩm: Trích ly: Quá trình kết tủa enzym protease: II Kết luận I Giới Thiệu Sử dụng enzyme sản xuất đời sống vấn đề nhà khoa học kỹ thuật ý từ lâu Ngày nay, việc sử dụng trở thành phổ biến nhiều nước mang lại lợi ích kinh tế lớn Ngoài số enzyme đa sử dụng rộng rãi lâu đời( amylaza, prôtêaza…), có hàng chục loại enzyme khác nghiên cứu áp dụng vào thực tế II- CHUẨN BỊ GIỐNG – TẠO SINH KHỐI 2.1 Phân lập giống Vi Sinh Vật – Chủng nấm mốc Aspergillus Oryzae - Quá trình lên men hoạt động sống tế bào Vi Sinh Vật môi trường Quá trình xảy điều kiện tự nhiên trình sản xuất công nghiệp Bản chất trình nói mặt hình thức phương diện khác hoàn toàn Vi sinh vật công nghiệp Ứng dụng Nấm mốc Aspergillus oryzae 2.1.1 Vai trò giống công nghệ enzyme Trong công nghệ enzyme từ VSV, giống đóng vai trò định: - Giống VSV định đến suất enzyme nhà máy - Giống VSV định đến chất lượng sản phẩm sinh học ( hoạt tính enzyme) - Giống VSV định vốn đầu tư cho sản xuất - Và cuối giống VSV định đến giá thành sản phẩm Như vậy, giống VSV có ý nghĩa to lớn phát triển công nghệ VSV Sản xuất giống ca cao từ vườn đầu dòng công nhận Tuyển chọn sản xuất sốgiống hoa hồng, hoa cúc phù hợp với điều kiện sản xuất c Phân lập giống mẫu giống hư hỏng - Các ống giống bị nhiễm trình bảo quản Do bị nhiễm, nhiều tế bào VSV giống bị thoái hoá, nhiều tế bào không bị thoái hoá Việc phân lập lại từ nguồn giống nhiều lại đạt kết tốt giống long lai tạo từ giống long ruột đỏ Hạt giống 2.2 Giới thiệu phương pháp phân lập nấm mốc Aspergillus Oryzae -Trong đất có nhiều loài vi sinh vật có khả sinh tổng hợp enzyme protease Ở nấm mốc nguồn chất thích hợp cho trình sinh tổng hợp enzyme protease protein Chúng ta phân lập từ đất, thức ăn hay mua trực tiếp từ cung cấp nấm mốc giống Ưu điểm việc giống mua thời gian bảo quản hiệu suất chất lượng giống đảm bảo chắn Tuy nhiên, trình phân lập giống cho kết đầy thú vị có ý nghĩa việc bổ sung chủng giống phòng thí nghiệm III: CÔNG NGHỆ LÊN MEN TẠO ENZYME PROTEASE 3.1 Giới thiệu phương pháp lên men bề mặt - Cuối kỷ 19 đầu kỷ 20, việc nuôi cấy VSV thường thực theo phương pháp bề mặt Phương pháp phát triển rộng rãi, không để thu nhận chế phẩm enzyme mà trước tiên phương pháp thu nhận kháng sinh số trình lên men truyền thống 3.1.1 Ưu nhược điểm phương pháp nuôi cấy bề mặt - ưu điểm phương pháp nuôi cấy bề mặt là: + Nuôi cấy bề mặt dễ thực Quy trình công nghệ thường không phức tạp + Lượng enzyme tạo thành từ nuôi cấy bề mặt thường cao nhiều so với nuôi cấy chìm + Chế phẩm enzyme thô ( bao gồm thành phần môi trường sinh khối VSV, enzyme nước ) +Nuôi cấy bề mặt không cần sử dụng nhiều thiết bị phức tạp, việc vận hành công nghệ việc đầu tư vừa đơn giản vừa không tốn +Trong trường hợp bị nhiễm VSV lạ, ta dễ dàng xử lý - Nhược điểm lớn dễ nhận thấy là: Phương pháp tốn lớn diện tích cho nuôi cấy Trong phương pháp VSV phát triển bề mặt môi trường ( môi trường lỏng môi trường bán rắn) nên cần nhiều diện tích a Môi trường lỏng - Ở môi trườn lỏng, VSV phát triển bề mặt môi trường, tạo thành khuẩn lạc ngăn cách pha lỏng ( môi trường ) pha khí ( không khí ) Ở đây, VSV sử dụng chất dinh dưỡng từ dung dịch môi trường, O2 từ không khí, tiến hành trình tổng hợp enzyme Enzyme ngoại bào tách từ sinh khối hòa tan vào dung dịch môi trường Enzyme nội bào nằm sinh khối VSV b.Môi trường đặc - Trong trường hợp này, VSV phát triển bề mặt môi trường, nhận chất dinh dưỡng từ hạt môi trường sinh tổng hợp enzyme nội bào ngoại bào Các enzyme ngoại bào thẩm thấu vào hạt môi trường, enzyme nội bào nằm sinh khối VSV 3.2 Sản xuất nấm mốc giống – nuôi cấy tạo sinh khối 3.2.1 Môi trường cho sản xuất mốc giống: - Dùng môi trường tổng hợp Môi trường Benhamin Bột ngô 20g Glucose 10g Pepton 10g Cao Nấm men 4g Nước 1000ml 3.2.2 Chuẩn bị mốc giống - Nuôi cấy giồng bao gồm: - Trong ống thạch nghiêng hay giữ giống ống nghiệm - Trong bình tam giác (nhân giống nhỏ) - Trên sàng, khay (nhân giống lớn) 3.2.3 Nuôi cấy tạo sinh khối - Sau phân lập thành công môi trường chọn lọc từ đĩa petri cấy chuyển mốc sợi sang (hay lấy nấm mốc từ ống giống) ống thạch khác Yêu cầu ống giống phải tuyệt đối đảm bảo khiết, không lẫn lộn loài VSV khác Môi trường thạch nghiêng phải đảm bảo đầy đủ dinh dưỡng - Tiếp tục nhân giống nuôi cấy đạt sinh khối theo mong muốn 3.3 Thu nhận enzym protease từ nấm mốc Aspergillus Oryzae 3.3.1 Sinh trưởng sinh tổng hợp protease từ nấm - Khi nuôi VSV tạo protease có trình liên quan mật thiết với Quá trình tổng hợp sinh khối VSV trình tích tụ enzyme tế bào môi trường [...]... trình tổng hợp enzyme Enzyme ngoại bào sẽ được tách ra từ sinh khối và hòa tan vào dung dịch môi trường Enzyme nội bào sẽ nằm trong sinh khối VSV b.Môi trường đặc - Trong trường hợp này, VSV phát triển trên bề mặt môi trường, nhận chất dinh dưỡng từ hạt môi trường và sinh tổng hợp ra enzyme nội bào và ngoại bào Các enzyme ngoại bào sẽ thẩm thấu vào trong các hạt môi trường, còn các enzyme nội bào... giống thanh long ruột đỏ Hạt giống 2.2 Giới thiệu phương pháp phân lập nấm mốc Aspergillus Oryzae -Trong đất có nhiều loài vi sinh vật có khả năng sinh tổng hợp enzyme protease Ở nấm mốc nguồn cơ chất thích hợp cho quá trình sinh tổng hợp enzyme protease này là protein Chúng ta có thể phân lập từ đất, thức ăn hay có thể mua trực tiếp từ cung cấp nấm mốc giống Ưu điểm của việc này là giống mua thì thời...vai trò của ion Hydronium trong phản ứng xúc tác của các enzym Enzyme tái tổng hợp 2.1.2 Yêu cầu giống Vi Sinh Vật trong công nghiệp enzyme Công nghệ sản xuất enzyme thuộc nhóm công nghệ lên men hiện đại và được sản xuất theo quy mô công nghiệp Do đó, giống VSV ứng dụng trong công nghệ enzyme cần phải có những yêu cầu và những chuẩn mực nhất định Đó là: - Giống VSV phải cho... điểm của phương pháp nuôi cấy bề mặt là: + Nuôi cấy bề mặt rất dễ thực hiện Quy trình công nghệ thường không phức tạp + Lượng enzyme được tạo thành từ nuôi cấy bề mặt thường cao hơn rất nhiều so với nuôi cấy chìm + Chế phẩm enzyme thô ( bao gồm thành phần môi trường sinh khối VSV, enzyme và nước ) +Nuôi cấy bề mặt không cần sử dụng nhiều thiết bị phức tạp, do đó việc vận hành công nghệ cũng như việc đầu... trong việc bổ sung một chủng giống mới tại phòng thí nghiệm III: CÔNG NGHỆ LÊN MEN TẠO ENZYME PROTEASE 3.1 Giới thiệu về phương pháp lên men bề mặt - Cuối thế kỷ 19 đầu thế kỷ 20, việc nuôi cấy VSV thường được thực hiện theo phương pháp bề mặt Phương pháp này được phát triển rất rộng rãi, không chỉ để thu nhận chế phẩm enzyme mà trước tiên đó là phương pháp thu nhận kháng sinh và một số quá trình lên men... lập một giống chủng VSV để thu nhận enzyme thì có 3 cách phân lập: + Phân lập giống trong điều kiện tự nhiên + Phân lập giống trong điều kiện sản xuất + Phân lập giống trong mẫu giống đã hư hỏng a Phân lập giống trong điều kiện tự nhiên - Trong điều kiện tự nhiên, VSV để có thể tồn tại và thích nghi nhanh được thì cần phải có khả năng sinh tổng hợp thật nhiều loại enzyme để chuyển hóa nhanh cơ chất... năng sinh tổng hợp thật nhiều loại enzyme để chuyển hóa nhanh cơ chất có trong môi trường thành vật chất cung cấp cho tế bào Điều này thì không thích hợp cho việc sinh tổng hợp enzyme ( ở quy mô sản xuất công nghiệp ) với một loại enzyme thật sự mạnh các vi khuẩn có lợi đượcphân lập từ các loài vi khuẩn có trong tự nhien trong mọi điều kiện nhằm gia tăng số lượng sinh sản trong tự nhiên b Phân lập giống