BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG Báo cáo chuyên đề Nuôi cấy mô Thực vật Chủ đề: VI NHÂN GIỐNG CÚC ĐỒNG TIỀN Gerbera jamesonii GIÁO VIÊN GIẢNG DẠY SINH VIÊN THỰC HIỆN PGS.TS LÂM NGỌC PHƯƠNG TRẦN CHÍ LINH Cần Thơ, 09/2015 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Từ xa xưa, ông cha ta biết nhân giống trồng phương pháp nhân giống vô tính truyền thống: giâm, chiết, ghép, Nhưng biện pháp đó, ngày bọc lộ nhiều hạn chế: giống nhân nhiều lần bị thoái hóa giống, mắc nhiều bệnh hơn, suất giảm, Do đó, để thực chiến lược phát triển nông nghiệp nay, việc nghiên cứu, ứng dụng nhân giống in vitro vào sản xuất thiết thực cần trọng đầu tư Với công nghệ vô trùng cao nhân giống in vitro khắc phục hạn chế phương pháp nhân giống vô tính truyền thống, đồng thời nâng cao suất chất lượng giống trồng giá trị nông học giá trị thương phẩm Thêm vào đó, ngày có nhiều mối quan tâm cúc đồng tiền Một loài thực vật thuộc chi số loài cảnh họ Cúc (Asteraceae), có tên khoa học Gerbera jamesonii Cúc đồng tiền xếp thứ (chỉ sau hoa hồng, cẩm chướng, cúc đại đóa tulip) 10 loài hoa cắt cành có giá trị thương mại trồng phổ biến giới Không dừng lại việc loài hoa cắt cành mà cúc đồng tiền trồng chậu vẻ đẹp, màu sắc, sức sống dai dẳng có khả phục hồi tốt sau trình vận chuyển đường dài Do có giá trị thẩm mỹ cao, nên loại hoa lý tưởng cắm hoa nghệ thuật trang trí khuôn viên, nhà cửa,… [1] Cúc đồng tiền loại hoa có sản lượng giá trị kinh tế cao Ở điều kiện thích hợp hoa quanh năm; trồng trọt chăm sóc đơn giản, tốn công, đầu tư lần thu hoa từ 4-5 năm Theo ước tính, Mỹ có 70 triệu cành hoa cúc đồng tiền tiêu thụ vào năm 2001 đem khoảng 220 triệu đô la Mỹ [2] Trong giáo dục nghiên cứu khoa học, loài hoa điển hình, dùng mô hình sinh học giúp nghiên cứu hình thành hoa Trong y học, hoa đồng tiền coi thuốc quý Trong Đông y Trung Quốc gọi Nhật Quế hoa Hoa đồng tiền có tác dụng nhiệt, tiêu đờm, làm ngừng ho (bằng cách: phơi khô cánh hoa mát, nấu nước uống); dùng chữa trị rắn cắn hay bị thương, sưng đau (cánh hoa đâm nhuyễn, pha với nước chín, lấy nước uống, xác đắp lên vết cắn, chỗ sưng), dùng để trị bệnh cảm lạnh điều trị thấp khớp [3] mà cúc đồng tiền có khả chống ung thư [4] Ngoài ra, hoa đồng tiền có chứa dẫn xuất coumarin (thành phần thuốc chống đông máu) nguồn gốc tự nhiên [5] Trong số nghiên cứu NaSa (cơ quan hàng không vũ trụ Mỹ), Đồng tiền chứng minh có tác dụng việc làm không khí Theo kết báo cáo loài có khả lọc chất khí độc gây ô nhiễm Trichloroethylene (thành phần có keo dán, chất tẩy sơn) Benzene (thành phần có xăng dầu) hiệu [6] Nhận thấy tìm to lớn cúc đồng tiền Trong năm gần đây, cúc đồng tiền nhiều nông dân đồng sông Cửu Long mạnh dạng đầu tư sản xuất hoa chậu vào dịp tết hoa cắt cành quanh năm ngày nhiều Cúc đồng tiền gieo trồng từ hạt tách nhánh Tuy nhiên, phương thức nhân giống vô tính lại có tỷ lệ nhân giống chậm, giống không đồng nhất, không đáp ứng nhu cầu canh tác thương mại Nguồn giống có chất lượng tốt chủ yếu nuôi cấy mô nhập nội từ Trung Quốc, Hà Lan có giá thành cao, thường không rõ nguồn gốc, không chủ động giống Do đó, để đáp ứng nhu cầu sản xuất bà nông dân việc đẩy mạnh nghiên cứu nhân giống cúc đồng tiền phương pháp in vitro thật cần thiết Bài báo cáo tìm hiểu sơ lược vi nhân giống đặc tính nuôi cấy giá trị kinh tế loài hoa cắt cành TỔNG QUAN TÀI LIỆU I PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY IN VITRO I.1 Khái niệm Nuôi cấy mô tế bào thực vật phạm trù khái niệm chung cho loại nuôi cấy nguyên liệu thực vật hoàn toàn vi sinh vật, môi trường dinh dưỡng nhân tạo, điều kiện vô trùng Nhân giống vô tính trồng in vitro hay vi nhân giống (Micropropagation) lĩnh vực ứng dụng có hiệu trông công nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật Bao gồm: + Nuôi cấy trưởng thành + Nuôi cấy quan: rễ, thân, lá, hoa, quả, bao phấn, noãn chưa thụ tinh + Nuôi cấy phôi: phôi non phôi trưởng thành + Nuôi cấy mô sẹo (callus) + Nuôi cấy tế bào đơn + Nuôi cấy protoplast: nuôi cấy phần bên trông tế bào thực vật sâu tách vỏ gọi nuôi cấy tế bào trần Đây phương pháp nhân giống đại thực phòng thí nghiệm nên gọi phương pháp nhân giống ống nghiệm (in vitro) để phân biệt với trình nuôi cấy điều kiện tự nhiên ống nghiệm (ex vivo) Khác vối phương pháp nhân giống truyền thống giâm, chiết cành ghép mắt, phương pháp nhân giống in vitro có khả thời gian ngắn tạo số lượng lớn để phủ kín diện tích đất định mà phương pháp nhân giống khác thay Ngoài phương pháp không phụ thuộc vào điều kiện tự nhiên nên tiến hành quanh năm Đây hướng ứng dụng rộng rãi Ở Việt Nam có nhiều phòng thí nghiệm nuôi cấy mô, nhiều trung tâm sản xuất giống trồng hàng năm cung cấp lượng đáng kể giống có chất lượng cao cho sản xuất chuối, dứa, khoai tây, loại lan, cảnh, lâm nghiệp I.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật Cơ sở khoa học phương pháp nuôi cấy mô tế bào in vitro học thuyết tính toàn (totipotence) tế bào Theo Haberlandt G (1902), nhà thực vật học người Đức, tất tế bào mang toàn lượng thông tin di truyền thể, gặp điều kiện thích hợp, tế bào có khả tái sinh phát triển thành cá thể hoàn chỉnh [7] Thực tế chứng minh khả tái sinh thể thực vật hoàn chỉnh từ tế bào riêng rẽ Hàng trăm loài trồng nhân giống quy mô thương mại cách nuôi cấy môi trường nhân tạo vô trùng tái sinh chúng thành với hệ số nhân giống vô lớn [8] Quá trình phát sinh hình thái nuôi cấy mô tế bào thực vật kết trình phân hóa phản phân hóa tế bào Trong đó: + Sự phân hóa tế bào chuyển tế bào phôi sinh thành tế bào mô chuyên hóa, đảm nhận chức khác + Khi tế bào phân hóa thành tế bào có chức riêng biệt, chúng không hoàn toàn khả biến đổi mà trường hợp cần thiết, điều kiện thích hợp chúng trở dạng tế bào phôi sinh phân chia mạnh mẽ Quá trình gọi phản phân hóa tế bào ngược lại với phân hóa tế bào Trong kỹ thuật nuôi cấy quan dinh dưỡng lá, thân…thì giai đoạn tạo mô sẹo tế bào quay trở trạng thái phôi sinh có khả phân chia liên tục mà hẳn chức quan dinh dưỡng lá, thân… trước Sự phân hoá phản phân hoá tế bào phôi sinh tế bào chuyên hoá biểu diễn theo sơ đồ sau: Phân hoá tế bào Tế bào phôi sinh Tế bào chuyên hoá Phản phân hoá tế bào Về chất phân hóa phản phân hóa trình hoạt hóa, ức chế gen Tại thời điểm trình phát triển cá thể, có số gen hoạt hóa để biểu tính trạng mới, số gen khác lại bị ức chế hoạt động Điều xảy theo chương trình mã hóa cấu trúc phân tử ADN tế bào, khiến trình sinh trưởng thể thực vật hài hòa Như vậy, kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật xét cho kĩ thuật điều khiển phát sinh hình thái tế bào thực vật (khi nuôi cấy tách rời điều kiện nhân tạo vô trùng) Đây điểm quan trọng sở đơn vị mô, tế bào, nhà sinh vật học thực kĩ thuật tiên tiến cho việc chọn, cải thiện lai tạo giống trồng [9], [10] I.3 Nhân giống vô tính in vitro-ưu, nhược điểm phương pháp Theo PGS- TS Ngô Xuân Bình [11]: "Nhân giống vô tính invitro phương pháp sản xuất hàng loạt từ phận (các quan, mô, tế bào) cách nuôi cấy chúng ống nghiệm điều kiện vô trùng tuyệt đối có môi trường nuôi cấy thích hợp kiểm soát" Nguyên tắc cho nhân giống vô tính là: Mọi thể sinh vật phức tạp gồm nhiều đơn vị nhỏ tế bào hợp thành Các tế bào phân hóa mang thông tin có tế bào tế bào độc lập, từ để tái tạo lại toàn thể I.3.1 Ưu điểm phương pháp nhân giống vô tính in vitro [12][13] + Đưa sản phẩm nhanh Theo lý thuyết, quần thể có độ đồng cao tái sinh từ ưu việt chọn lọc Do đó, người ta chọn lọc có tính trạng mong muốn để nhân lên thành số lượng lớn phục vụ cho mục đích thương mại, cho dù dị hợp tử mặt di truyền Nhân nhanh: số trường hợp kỹ thuật đảm bảo cho tốc độ nhân nhanh giống cây, - năm tạo hàng triệu Hệ số nhân giống in vitro thường đạt 36 -1012/năm loại khác Như vậy, kỹ thuật nhân giống vô tính khác lại có hệ số nhân giống cao Sản phẩm giống đồng nhất: nuôi cấy mô công nghệ nhân dòng, tạo quần thể có độ đồng cao Tiết kiệm không gian: hệ thống sản xuất hoàn toàn phòng thí nghiệm nên ảnh hưởng thời tiết, vật kiệu khởi đầu có kích thước bé, mật độ tạo nên đơn vị diện tích lớn nhiều so với sản xuất đồng ruộng nhà kính theo phương pháp truyền thống + Tính khả thi rộng Ví dụ: kỹ thuật giâm cành ứng dụng thành công số định, kích thướng - 20 cm, khả tạo rễ phụ vùng mô thượng tầng gần vết cắt khả đánh thức chồi phụ bị vùng tế bào lân cận phần toàn lại đoạn giâm khống chế Nếu tiến hành nuôi mô với kích thước - 10 mm tương tác tế bào loại mô đơn giản nhiều, hiệu tác động biện pháp nuôi cấy phải cao + Có tiềm công nghiệp hoá cao Nuôi cấy điều kiện chủ động hoàn toàn môi trường dinh dưỡng, chế độ chiếu sáng nhiệt độ tiền đề hoàn toàn thoát khỏi lệ thuộc mùa vụ xảy sản xuất nông nghiệp công nghiệp hoá hoàn toàn công việc sản xuất giống dây truyền sản xuất liên tục + Nâng cao chất lượng sản phẩm: cải tiến kiểu gen điều chỉnh cách sử dụng chất điều tiết sinh trưởng, kỹ thuật chuyển nạp gen điều kiện nuôi cấy in vitro Bằng kỹ thuật chủ động làm thay đổi kiểu gen thực vật mong muốn dễ dàng so với sử lý chất biến dị vào trồng so với đồng ruộng hay nhà lưới, nhà kính + Khả tiếp thị tốt: dạng sản phẩm linh hoạt, lợi vận chuyển, sản xuất quanh năm làm tăng khả tiếp thị kinh doanh sản phẩm I.3.1 Nhược điểm phương pháp Bên cạnh ưu điểm có nhược điểm mà công nghệ nuôi mô, tế bào gặp phải như: đòi hỏi trình độ kỹ thuật cao, kinh phí đầu tư bước đầu cao, thực khó khăn số trồng, sản phẩm bị biến đổi kiểu hình [11], [12] I.4 Ứng dụng nuôi cấy mô nhân giống hoa I.4.1 Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào với hoa giới Các nước chiếm ưu thị trường hoa tươi giới nước có công nghệ sản xuất hoa tiên tiến hiệu Họ nghiên cứu ứng dụng thành công kỹ thuật sinh học nông nghiệp đại khâu sản xuất như: chọn, tạo giống mới, nhân giống, nuôi trồng, bảo quản hoa,… Vậy, để thương mại hoá ngành sản xuất hoa phải chương trình hoá trình sản xuất cấp sản phẩm, loại gì, vào thời gian nào, tiêu chuẩn nào… điều thực kỹ thuật cao trước hết phải có công nghệ nhân giống đại Đó công nghệ nuôi mô tế bào thực vật Chỉ riêng Hà Lan hàng năm sản xuất 15 triệu hoa đồng tiền phương pháp nuôi mô để cung ứng cho sản xuất Ở Thái Lan năm xuất 13.000 hoa Lan cắt cành, tương ứng với 350 - 400 triệu cành hoa cắt, loại hoa sử dụng giống từ nguồn nuôi cấy mô Nuôi cấy mô ứng dụng nhiều loài hoa có chất lượng: + Trên hoa loa kèn: Hà Lan nuôi cấy mô cung ứng 8.020.133.000 cây(1986) lớn + năm 1982 7.217.528.000 [14] Trên đối tượng hoa Lan: năm 1982 Hà Lan sản xuất 3.119.000 cúc giống in vitro, đến năm 1986 số tăng tới 73.650.000 [14] Công nghệ nhân giống tiên tiến trở thành tảng cho ngành sản xuất hoa cảnh Hà Lan nước sản xuất hoa khác giới Bằng công nghệ nhân giống in vitro người ta sản xuất số lượng lớn giống khoẻ, bệnh hoàn toàn đồng mặt di truyền Hệ số nhân giống in vitro cúc đạt cao (410-610/năm) + Ngoài có nhiều giống hoa khác có giá trị sản xuất phương pháp nuôi cấy mô như: hoa lan, hoa lily, hoa đồng tiền, hoa lay ơn,… Có thể nói công nghệ nhân giống phương pháp nuôi cấy mô công nghệ tiên tiến nhiều nước có nông nghiệp phát triển áp dụng hiệu I.4.2 Ứng dụng nuôi cấy mô tế bào với hoa Việt Nam Công nghệ sinh học đại đưa vào nước ta muộn (khoảng đầu thập niên 90), nhiên phát triển nhanh áp dụng nhiều lĩnh vực như: Y học, nông nghiệp (nhân giống, lai tạo, cấy gen,…),… Đặc biệt lĩnh vực nông nghiệp đem lại nhiều thành lớn Xin đơn cử số thành tựu nhân giống in vitro hoa: + Năm 1995, viện kỹ thuật nông nghiệp Việt Nam thành công việc nhân + giống hoa loa ken phương pháp nuôi cấy mô [15] Năm 2005, Phân viên sinh học nhiệt đới Đà Lạt thành công việc nhân giống hoa lily phương pháp nuôi cấy mô [16] + Nhiều loài hoa khác hoa Lan, hoa cúc, hoa đồng tiền… số viện trung tâm công nghệ sinh học Việt Nam tiến hành nhân giống phương pháp nuôi cấy mô thành công năm qua Tuy nhiên giá thành giống nuôi cấy mô cao I.5 Các giai đoạn nhân giống in vitro [10] Sự thành công việc nhân giống in vitro đạt trải qua giai đoạn sau I.5.1 Giai đoạn 1: Khử trùng mô cấy Đây giai đoạn tối quan trọng, chí định toàn quy trình nhân giống in vitro Mục đích giai đoạn tạo nguyên liệu thực vật vô trùng để đưa vào nuôi cấy in vitro Vô trùng mô cấy thao tác khó, thành công lần Tuy vậy, kiên trì tìm nồng độ thời gian vô trùng thích hợp sau vài lần thử chắn đạt kết I.5.2 Giai đoạn 2: Tái sinh mô nuôi cấy Trong nhân giống in vitro, mẫu nuôi cấy thường sử dụng chồi chồi nách mẹ Ngoài ra, tùy đối tượng mà người ta dùng mẫu nuôi cấy rễ, thân, lá, đài hoa, cánh hoa, Mục đích giai đoạn tái sinh cách định hướng mô nuôi cấy Quá trình điều khiển chủ yếu dựa vào tỉ lệ hợp chất auxin, cytokinin ngoại sinh đưa vào môi trường nuôi cấy Tuy nhiên, cần phải quan tâm đến tuổi sinh lý mẫu cấy Người ta nhận thấy mẫu nuôi cấy lấy vào thời kỳ sinh trưởng mạnh cho kết khả quan tái sinh chồi I.5.3 Giai đoạn 3: nhân nhanh Toàn trình nhân giống in vitro xét cho nhằm mục đích tạo hệ số nhân cao Chính vậy, giai đoạn xem giai đoạn then chốt trình Để tăng hệ số nhân người ta thường phải đưa thêm vào môi trường dinh dưỡng nhân tạo chất điều hòa sinh trưởng (Auxin, Cytokinin, Gibberelin), chất bổ sung khác nước dừa, nước chiết giấm men, dịch thủy phân Casein kết hợp với yếu tố nhiệt độ, ánh sáng thích hợp Tùy thuộc vào đối tượng nuôi cấy người ta nhân nhanh kích thích hình thành cụm chồi (nhân cụm chồi), hay phát triển chồi nách (vi giâm cành) thông qua việc tạo từ phôi vô tính I.5.4 Giai đoạn 4: Tạo in vitro hoàn chỉnh Khi đạt kích thước định chồi chuyển từ môi trường giai đoạn sang môi trường tạo rễ Thường sau từ - tuần, từ chồi riêng lẻ xuất rễ trở thành hoàn chỉnh Ở giai đoạn này, người ta thường bổ sung vào môi trường nuôi cấy Auxin, chất IAA, IBA, α- NAA 2,4-D sử dụng, nghiên cứu nhiều I.5.5 Giai đoạn 5: Thích ứng in vitro điều kiện tự nhiên III.6 Nước tưới Ngay sau trồng, thời kỳ con, nên tưới phun mưa nhẹ 2-3 lần/ngày cho để trì ẩm độ đất 70-80 % làm mát giúp hồi phục bén rễ nhanh Tưới vào sáng sớm chiều mát (nhưng không muộn tạo điều kiện cho nấm bệnh phát triển) Giai đoạn sau, bén rễ cứng cáp, nên trì ẩm độ 60-70 % Không nên tưới nhiều nước độ ẩm đất cao thời gian dài làm cho bị úng chết rũ Có thể sử dụng nhiều phương pháp tưới khác nhau: tưới phun mưa, tưới rãnh, tưới nhỏ giọt Trong đó, phương pháp tưới nhỏ giọt tốt III.7 Tỉa Đây kỹ thuật đơn giản ảnh hưởng đến suất hoa lớn, tình hình sâu bệnh hại vườn Để nuôi hoa cần khoảng 3- công năng, có từ - hoa số khoảng 12-16 công Vì vậy, cần tỉa bỏ hợp lý để không ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển Cây trồng khoảng - tháng trở lên cần tỉa Chu kỳ tỉa tùy thuộc vào giống, mùa vụ, từ 20-30 ngày/1 lần Khi tỉa lá, tỉa bỏ già, bị sâu bệnh, cần tỉa mọc không trật tự làm ảnh hưởng đến trình quang hợp khác Tỉa nhẹ nhàng, tránh động đến gốc nhiều làm chết sinh trưởng chạm lại gây ảnh hưởng đến suất hoa IV SÂU BỆNH HẠI VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỪ [25] Lưu ý: Hiện nay, thuốc BVTV đăng ký danh mục thuốc BVTV phép sử dụng Việt Nam để phòng trừ sâu bệnh hại hoa đồng tiền ít, số đối tượng sâu bệnh hại loại thuốc đăng kí phòng trừ Chính bà nông dân tham khảo số loại thuốc bảo vệ phòng trừ đối tượng sâu bệnh hại tương tự trồng khác để sử dụng hoa đồng tiền Tuy nhiên trước sử dụng đại trà, cần phun thử diện tích hẹp để tránh rủi ro đáng tiếc xảy IV.1 Sâu hại biện pháp phòng trừ 26 IV.1.1 Sâu đất (Agrotis upsilon Rott.) Loại sâu thường cắn ngang gốc cây, đặc biệt trồng Chúng thường hoạt động vào ban đêm nên cần phun thuốc vào buổi chiều tối sau tươi đất thật ẩm Cần phải phun sau trồng phun 1- lần tuần Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Diazinon, Abamectin, Cypermethrin + profenofos, Esfenvalerate IV.1.2 Sâu hại hoa (Spodoptera litura) Chúng thường cắn phá, hại hoa làm giản suất chất lượng hoa Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ Abamectin, Emamectin, Cypermethrin IV.1.3 Nhện đỏ (Tetranychus sp.) Có kích thước nhỏ màu vàng đỏ, thường xuất bắt đầu hoa Nhện chích hút làm hoa không nở méo mó, làm bị xoăn lại ảnh hưởng đến quang hợp Khi phát triển thành dịch khó trị Biện pháp phòng trừ: Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Diafenthiuron, Hexythiazox, propargite, Abamectin, Fenpyroximate Emamectin benzoate… Phun đẫm ướt hai mặt (nhất mặt nhện thường trú ngụ mặt lá) để phòng trừ loại nhện IV.1.4 Bọ phấn (Trialeuroides vaporariorum) Bọ phấn phân bố rộng, hại nhiều đối tượng Trong nhà ấm phát sinh quanh năm, năm có từ 10-12 lứa Con trưởng thành có màu trắng thường bám mặt để chích hút nhựa ảnh hưởng đến suất hoa đồng tiền Ấu trùng đục tạo nên đường hầm Biện pháp phòng trừ: 27 + Để phòng trừ cần phát cỏ dại xung quanh nhà lưới để ruồi trắng nơi trú ngụ, dùng bẫy vàng để vây bắt + Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Thiamethoxam, Dinotefuran, Oxymatrine, Diafenthiuron IV.1.5 Bọ trĩ: (Frankliniella occidentalis) Thường sinh sống non hoa, chúng chích hút nhựa làm không phát triển bình thường được, làm hoa biến dạng, đổi màu Biện pháp phòng trừ: Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Imdacloprid, Abamectin, Cypermethrin, Dinotefuran, Emamectin benzoate IV.2 Bệnh hại biệp pháp phòng trừ IV.2.1 Bệnh phấn trắng (Oidium geberathium) Bệnh chủ yếu hại ảnh hưởng đến suất chất lượng hoa Thời kỳ đầu xuất đốm mốc màu trắng lá, sau lan rộng thành đốm hình tròn bầu dục lớn, màu trắng, phủ lớp bụi phấn trắng Cây bị bệnh xoắn lại, khô xám Nếu bệnh nặng lan truyền đến cành hoa, làm cho cành hoa nhỏ, chất lượng kém, suất thấp Bệnh thường xuất nhiệt độ ẩm độ cao Tưới nước bón đạm nhiều, rậm rạp, ánh sáng yếu, vườn không thông thoáng điều kiện thuận lợi cho bệnh phát triển mạnh Biện pháp phòng trừ + Bón cân đối phân, tỉa tạo thông thoáng cho vườn, ý giữ ẩm độ cách tưới nước cho + Biện pháp hóa học: Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Carbendazim, Azoxystrobin + Difenoconazole, Hexaconazole, Diniconazole phun theo nồng độ liều lượng ghi nhãn thuốc IV.2.2 Bệnh héo vàng: 28 Có thể nấm Fusarium sp Rhizoctonia solani gây Bệnh thường xuất bắt đầu cho hoa trở sau, phát triển mạnh vườn ẩm ướt Bệnh làm cho bị chết rũ, nhổ lên phần ngang mặt đất bị thối đen Biện pháp phòng trừ + Luân canh trồng, nhổ bỏ bệnh, rải vôi xử lý đất trước trồng + Dùng giống trẻ, khỏe, điều chỉnh độ ẩm vườn hợp lý Làm đất cho thật kỹ, dùng Foocmon Metyl bromide để khử trùng đất trước trồng + Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Iprodione, Fosetyl aluminium, metalaxyl + mancozeb, Thiopnate-Metyl phun thẳng vào gốc theo nồng độ liều lượng khuyến cáo IV.2.3 Bệnh mốc xám (Botrytis cinerea) Nấm có màu xám tro bếp nấm Botrytis gây ra, chủ yếu gây hại hoa, phần cổ hoa tràng hoa, bệnh nặng phát triển cánh hoa Khi gây hại, nấm làm tắt mạch cành hoa ngăn cản vận chuyển nước lên nụ hoa, làm cho hoa bị vàng, gục Biện pháp phòng trừ + Điều chỉnh ẩm độ vườn hợp lý, không nên tưới nước muộn tạo ẩm độ cao vào ban đêm điều kiện để bệnh phát triển mạnh + Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Iprodione, Chlorothalonil, Thiophanate-Methyl IV.2.4 Bệnh đốm Bệnh đốm vàng Alternaria sp bệnh đốm đen Cecosposa sp gây ra, phát triển mạnh độ ẩm môi trường cao Thường xuất trưởng thành đốm hình tròn hình bất định từ màu vàng nhạt chuyển sang màu nâu đậm đen Biện pháp phòng trừ: 29 + Vệ sinh đồng ruộng sẽ, bón cân đối N: P: K Duy trì ẩm độ đồng ruộng thấp, tránh tưới nước vào chiều tối tưới lên + Có thể tham khảo sử dụng hoạt chất để phòng trừ: Azoxystrobin Difenoconazole, Carbendazim, Mancozeb Sử dụng theo nồng độn liều lượng khuyến cáo V THU HOẠCH, ĐÓNG GÓI VÀ BẢO QUẢN [25] Thời điểm thu hoạch: thu hoạch hoa lúc sáng sớm chiều mát Trong ngày mát trời thu hoạch vào thời điểm khác Hoa sau bị cắt khỏi mẹ phải cắm vào nước có chất xử lý Flocare-NH đưa vào nơi thoáng mát Đóng gói, phân loại vận chuyển: phân loại, đóng gói bao bì theo yêu cầu khách hàng đóng vào thùng carton vận chuyển xa Thùng carton cần có đủ lỗ thông bố trí hợp lý Nếu chưa vận chuyển nên để hoa kho lạnh giữ nhiệt độ 4-5oC cắm hoa dung dịch bảo quản Flocare-NH Nếu vận chuyển xanên vận chuyển xe lạnh nhiệt độ 4-6oC vận chuyển vào ban đêm 30 VI VI NHÂN GIỐNG CÚC ĐỒNG TIỀN Gerbera jamesonii Hình minh họa vi nhân giống hoa đồng tiền Hoa đồng tiền nhân giống phương pháp là: phương pháp hữu tính (nhân giống hạt) phương pháp nhân giống vô tính (nhân giống tách cây, cắm cành, nuôi mô tế bào) Các vùng trồng hoa đồng tiền chủ yếu sử dụng giống từ nuôi cấy mô Có nhiều tác giả sử dụng biện pháp nuôi cấy mô để sản xuất giống hoa đồng tiền Cụ thể sau: * Theo Th.S Đặng Văn Đông PGS.TS Đinh Thế Lộc [24]: Hoa đồng tiền nhân giống phương pháp nuôi mô tiến hành sau: Vật liệu vào mẫu đế hoa non Cắt lấy nụ có đường kính khoảng 1cm, lấy thấm muối rửa sạch, đưa vào tủ nuôi cấy mô Rửa cho vào dung dịch chlorua thuỷ 31 ngân 0,1% tiêu độc 20 phút, lấy dùng nước rửa 3-4 lần, dùng panh dao bóc vẩy, cắt bỏ tất hoa nhỏ, giữ lấy đế hoa, cắt đế hoa thành miếng nhỏ vuông - 3mm Nuôi cấy 24 ± C, cường độ chiếu sáng 2.000 - 3.000lux Mỗi ngày chiếu sáng 12 - 16 Môi trường nuôi cấy đời thứ là:MS + BA mg/l + NAA 0,2 mg/l + IAA 0,2 mg/l Sau tuần hình thành thân mầm Sau đó, mầm chuyển vào môi trường: MS + KT 5mg/l + IAA mg/l nuôi cấy tiếp Đợi mầm cao 2cm, cắt chuyển vào môi trường 1/2MS + NAA 0,1mg/l cho rễ, sau khoảng tuần rễ dài - 3cm Chuyển rễ trồng chất gồm phần mùn cưa, phần than bùn, phần vụn đá xốp dùng lưới cản quang che nắng, che mưa Ở nơi độ ẩm không khí cao ngày phun nước lần, tuần phun dung dịch dinh dưỡng lần, sau 2-3 tuần sống, tăng dần cường độ chiếu sáng, chăm sóc - tuần đưa trồng ruộng Ở nơi khô hạn cần tăng cường phun mù để nâng cao tỷ lệ sống * Theo Hoàng Thị Phương Nga cộng [26]: Hoa đồng tiền nhân giống phương pháp nuôi cấy mô tiến hành sau: - Tạo nguồn vật liệu khởi đầu: Nguồn mô ban đầu để tạo nguyên liệu khởi đầu cho trình nuôi cấy ống nghiệm nụ hoa non số giống hoa đồng tiền Hà Lan Hoá chất khử trùng: nước Javen 1/8 10 phút, rửa nước cất vô trùng lần khử trùng tiếp lần dung dịch HgCl2 0,1% phút, rửa mẫu nước vô trùng lần Môi trườngtái sinh tối ưu: MS + 1ppm BAP + 0,2ppm Kinetin+0,2ppm IAA + 2,5% Saccaroza + 6,5 g Agar/l Trên môi trường sau 8-10 tuần mẫu nuôi cấy hình thành chồi hay callus Để tăng cường nguồn mẫu ban đầu phục vụ cho trình nhân nhanh áp dụng phương pháp nuôi lát mỏng tế bào 32 Lớp mỏng giống cắt với kích thước 0,5-0,7mm lấy từ mẫu đồng tiền cấy môi trường tái sinh tối ưu: MS + 1ppm BAP + 0,2 ppm Kinetin+0,2ppm IAA + 2,5% Saccaroza + 6,5 g Agar/l Cấy - lát/bình nuôi cấy Sau - tuần nuôi cấy ta thu lượng mẫu tăng - lần so với dùng phương pháp nhân chồi thông thường - Kỹ thuật nhân nhanh Môi trường tối ưu sử dụng cho trình nhân nhanh: MS + ppm Kinetin + 10% nước dừa + 2,5% Saccaroza + 6,5 g Agar/l Các mẫu nuôi cấy sau số lần nhân nhanh khả đẻ chồi tăng lên chất lượng chồi giảm mạnh thể số chồi nhiều chồi nhỏ, yếu, khả rễ vườn ươm tỷ lệ chết cao Chính mà cần phải có trình vào mẫu liên tục để thay thế, mẫu qua cấy chuyển - 10 lần Các mẫu sau cấy chuyển 5-6 lần nên giảm nồng độ chất điều tiết sinh trưởng 50% Cụ thể sau lần cấy chuyển môi trường tối ưu để tiếp tục cấy chuyển là: MS + 0,5 ppm Kinetin+10% nước dừa+ 2,5% Saccaroza + 6,5 g Agar/l Trên môi trường nhân ta tiếp tục nhân mẫu thêm - lần chuyển toàn mẫu cấy sang môi trường dinh dưỡng chất điều tiết sinh trưởng cụ thể là: MS + 10% nước dừa+ 2,5% Saccaroza + 6,5 g Agar/l Chồi sau 4-5 lần cấy ta chọn lấy chồi đủ tiêu chuẩn cấy sang môi trường tạo rễ loại bỏ toàn mẫu thay loạt mẫu - Kỹ thuật tạo hoàn chỉnh Môi trường tốt để tạo rễ cho chồi hoa đồng tiền là: MS + 0,1ppm NAA + 2,5% đường Saccaroza + 6,5g Agar/l - Kỹ thuật vườn ươm Giá thể thích hợp cho việc là: mùn + chấu hun 33 * Theo Ngô Đăng Vịnh, Hà Thị Thúy, Dương Minh Nga [27]: đưa quy trình nhân giống hoa đồng tiền sau: Vật liệu vào mẫu đế hoa đồng tiền non giống hoa đồng tiền nhập nội từ nước Quy trình nuôi cấy sau: Sử dụng dung dịch HgCl2 nồng độ 0,1 % với thời gian 10 phút thích hợp cho khử trùng đế hoa đồng tiền Môi trường tạo callus tái sinh chồi MS + 0,2 mg TDZ/l + 0,1 mg NAA/l + 50 gram đường/l + gram agar/l Môi trường nhân nhanh tốt môi trường bán lỏng MS + 1,5 mg BAP /l + 10% nước rừa + 1mg/l B1 + 50 gram đường/l + gram agar/l Môi trường rễ môi trường MS + 0,5 mg NAA/l + 50 gram đường/l + gram agar/l Giá thể thích hợp cho giai đoạn vườn ươm hỗn hợp đất + trấu hun + ¼ vi sinh *The Th.S Nguyễn Văn Hồng PGS.TS Ngô Xuân Bình:đã đưa qui trình nhân giống in vitro Cúc Đồng tiền sau [28]: Kỹ thuật khử trùng đế hoa đồng tiền non tốt khử trùng 0,1% HgCl2 thời gian 10 phút Bổ sung 1,5 mg/lít 2,4 - D vào môi trường MS + 30 gram saccarose/lít + 6,5 gram agar/lít +, pH = 5,8 tốt để tạo callus từ đề hoa đồng tiền non Bổ sung 0,1 mg/l NAA vào môi trường MS + 30 gram saccarose/lít +6,5 gram agar/lít + 1,0 mg/lít BAP + 0,2 mg/lít Kinetin+ 0,1 mg/lít NAA, pH = 5,8 thích hợp cho tái sinh chồi từ callus Bổ sung 1,5 mg/lít BAP + 15% nước dừa vào môi MS + 30 gram saccarose/lít + 6,5 gram agar/lít +, pH = 5,8 mang lại hiệu cao nhân nhanh chồi hoa đồng 34 tiền sau tái sinh Bổ sung 0,15 mg/l NAA vào môi trường MS + 30 gram saccarose/lít + 6,5 gram agar/lít + 0,15 mg/lít NAA, pH = 5,8 mang lại hiệu rễ tốt giai đoạn tạo hoàn chỉnh từ chồi hoa đồng tiền Giá thể hoa đồng tiền nuôi mô tốt đồi với giai đoạn vườn ươm giá thể đất, cát, trấu phân vi sinh Sông Gianh trộn theo tỷ lệ 1:1:1:1/4 *Theo M.R Shylaja, P Sashna, V Chinjusha and P.A Nazeem:đã đưa qui trình nhân giống in vitro Cúc Đồng tiền sau [29]: Mẫu vật liệu ban đầu nụ hoa đồng tiền có đường kính 1,0-1,2 cm Qui trình khử mẫu sau: nụ hoa đồng tiền rửa vòi nước chảy ngâm 10 phút giọt chất tẩy rửa sau rửa lại nước cất vô trùng Đem vào tủ cấy khử trùng mẫu với thủy ngân 0.1 % phút Tạo mô sẹo BAP 3mg / l + NAA 0,1 mg / l Kéo dài NAA 0.1mg / l (nồng độ thấp) Rễ IBA 1mg / l Đất cát+than bùn *Theo Surind er Kuma r an d Jit e nde r Kum a r Ka nw ar[30] Các hoa đồng tiền loại bỏ cuống cắt thành miếng nhỏ có kích thước 5-6 mm kiện vô trùng Các mẫu cấy khử trùng bề mặt với 0.1% HgCl2 từ đến phút Sau rửa nước cất vô trùng cấy môi trường MS Các mẫu cấy không nhiễm chuyển sang môi trường MS có bổ sung 30g/l sucrose, 8g agar, 2mg/l 2,4-D đặt tối để tạo mô sẹo Tái sinh chồi môi trường MS có bổ sung 1mg/l BA 35 Thuần dưỡng phân chuồng + cát (1:1) *Theo Chenna REDDY Aswath , MEWA LAL Choudhary Lá hoa đồng tiền ( thứ 3) rửa kỹ phút với nước, khử trùng với ethanol (70%) 30s, rửa với nước cất khử trùng, sau tiếp tục khử với NaClO (0.1%) 10 phút,cắt thành miếng nhỏ kích thước 5x5 mm cấy vào moi trường MS Mô sẹo tái sinh môi trường MS bổ sung 0,4 mg/l BAP, 4,0 mg/l NAA 3% sucrose Sau tuần mô sẹo chuyển sang môi trường MS bổ sung mg L-1 NAA mg L-1 BAP Sau tuần chuyển chồi vào môi trường MS có bổ sung NAA (2mg/l) rễ Sau tuần đưa dưỡng với giá thể Đất+phân (1:1) KẾT LUẬN Giữa loài hoa, hoa đồng tiền (Gerbera Jamesonii) lên loài hoa đẹp, Đặc biệt, hoa đồng tiền kép có kích thước lớn, có nguồn gốc từ Nam Phi nhập nội vào nước ta năm gần Loại hoa trồng nhiều nơi: chậu, công viên, ruộng Hoa đồng tiền sử dụng nhiều mục đích: cắm lọ, trang trí, trồng chậu Không đẹp mà hoa đồng tiền có nhiều màu : trắng, vàng, hồng, đỏ, cam, … màu lại có ý nghĩa đặc biệt riêng Nhưng dù màu loài hoa tượng trưng cho hạnh phúc Nó mang ý nghĩa vẻ đẹp điều kỳ diện Nó mang đến cho tươi sáng vui vẻ Không thế, thể ngây thơ, tình yêu lòng ca ngợi + + + + Hoa đồng tiền trắng: thể trắng tinh khiết Hoa đồng tiền vàng: thể niềm hạnh phúc Hoa đồng tiền hồng: thể ca ngợi khích lệ Hoa đồng tiền đỏ: thể tình yêu thắm đợm Nhờ vào ưu điểm mà hoa đồng tiền nhiều người lựa chọn Khi đến 36 dịp lễ, tết, giá thành hoa tăng cao Việc mở rộng diện tích trồng hoa đồng tiền trở thành vấn đề gặp nhều khó khăn nguồn giống không đáp ứng số lượng chất lượng Bởi nay, việc sản xuất hoa chủ yếu sử dụng phương pháp cổ truyền gieo hạt tách nhánh Nguồn giống có chất lượng tốt chủ yếu nuôi cấy mô nhập nội từ Trung Quốc, Hà Lan có giá thành cao, thường không rõ nguồn gốc, không chủ động giống Do việc đẩy mạnh vi nhân giống hoa đồng tiền vấn đề cần thiết để phát triển hoa đồng tiền Việt Nam cách mạnh mẽ phong phú chất lượng suất Việc vi nhân giống giúp tạo nguồn giống bệnh, chất lượng tốt dồi cung cấp cho thị trường hoa, có địa gần cho người nông dân mua giống tốt, nguồn gốc đáng tin cậy TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Dr M.V SRINIVASA KARNATAKA GOWDA (2009), HI-TECH FLORICULTURE IN 37 [2] BROEK VAN DEN L., HAYDU J.J., HODGES A.W., NEVESE.M., 2004 Production, marketing and distribution of cut flowers in the United States and Brazil Annual Report of Florida Agricultural Experiment Station, University of Florida: 1–19 http://hortbusiness.ifas.ufl.edu/cutUSDA/ ERS%20Flowers%20 Brazil-us.pdf [3] Ye JN, Wang SQ, Cai K, Komatsu M, Mikage T, Namba T (1990) Pharmacological studies on folk medicine in Sichuan province, China II On Tu-er-fang derived from Gerbera plants J Pharm Soc Jpn 110: 374-382) [4].http://connection.ebscohost.com/c/articles/95906333/anticancer-activity-gerberajamesonii-a549-adeno-carcinomic-human-alveolar-basal-epithelial-cell-line-vitro-study [5] http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0031942200979779 [6] Wolverton, B C., et al Interior landscape plants for indoor air pollution abatement: final report NASA September, 1989 pp 11-12 [7] Vũ Văn Vụ (1999), Sinh lý thực vật ứng dụng, Nxb Giáo dục, Hà Nội [8] Murashige, T (1980), “Plant growth substances in commercial uses of tissue culture” In: Plant growth Substances 1979, ed by F.Skoog Springer- Verag, Berlin Heidelberg New York, pp 426 – 434 [9] Nguyễn Như Khanh, Nguyễn Văn Đính (2006), Sinh học phát triển thực vật, Nxb Giáo dục Hà Nội [10] Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật nghiên cứu ứng dụng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội [11] Ngô Xuân Bình, Nguyễn Thị Thuý Hà, 2000 Giáo trình công nghệ sinh học [12] Đỗ Năng Vịnh, 2005 Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng NXB Nông Nghiệp [13] Nguyễn Quang Thạch CS,2003 – Bài giảng công nghệ sinh học thực vật Đại học NN I - Hà Nội [14] Nguyễn Xuân Linh (1998), Hoa kỹ thuật trồng hoa, Nxb Nông nghiệp Hà Nội [15] Nguyễn Thị Lý Anh (2005), Sự tạo củ Lily in vitro sinh trưởng Lily trồng từ củ in vitro, Tạp chí khoa học kỹ thuật nông nghiệp Tập III số [16] Yang Xiaohan, Liu Guangshu and Zhu Lu., 1996 [17] Nguyễn Đức Lượng (2002), Công nghệ tế bào, Nxb Đại Học Quốc gia Tp.HCM [18] Trần Văn Minh (2004), Công nghệ sinh học – Giáo trình cao học – nghiên cứu sinh Trường đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh 38 [19] Bùi Trang Việt (2000), Sinh lý thực vật đại cương, Đại học quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh [20] Dương Công Kiên (2002), Nuôi cấy mô thực vật, Nxb Đại Học Quốc gia Tp.HCM [21] Bùi Bá Bổng (1995), Nhân giống nuôi cấy mô, Sở khoa học công nghệ môi trường An Giang [22] Nguyễn Văn Uyển (1996,) Những phương pháp công nghệ sinh học thực vật Nxb Nông nghiệp, tập 1, [23] The Plant List (2010) “Gerbera jamesonii” [24] Th.S Đặng Văn Đông PGS.TS Đinh Thế Lộc, 2003- Hoa đồng tiền NXB Lao Động – Xã Hội [25] QUY TRÌNH KỸ THUẬT TRỒNG HOA ĐỒNG TIỀN (Ban hành kèm theo định số 1251/QĐ-SNN, ngày 13/12/2012 Sở Nông nghiệp PTNT Lâm Đồng V/v Ban hành tạm thời quy trình canh tác số trồng địa bàn tỉnh Lâm Đồng) [26] Hoàng Thị Nga, Nguyễn Thị Phương Hoa, Nguyễn Thị Giang, Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh - Xây dựng quy trình nhân giống hoa đồng tiền kỹ thuật cấy mô Tạp trí nông nghiệp phát triển nông thôn, Số 8/2003 [27] Ngô Đăng Vịnh, Hà Thị Thúy, Dương Minh Nga - Nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhânh nhanh giống hoa đồng tiền nhập nội công nghệ in vitro- Tạp trí nông nghiệp phát triển nông thôn, Số 8/2003, 1012-1014 [28] Nguyễn Văn Hồng, Ngô Xuân Bình (2009), “NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG HOA ĐỒNG TIỀN BẰNG PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẠI THÁI NGUYÊN” [29] M.R Shylaja and et al (2014), “AN EFFICIENT MICROPROPAGATION PROTOCOL FOR GERBERA JAMESONII BOLUS FROM FLOWER BUDS” [30] Surinder Kumar and Jitender Kumar Kanwar, (2007), “PLANT REGENERATION FROM CELL SUSPENSIONS IN Gerbera jamesonii Bolus” 39 [31] Chenna REDDY Aswath, et al (2002), “Rapid plant regeneration from Gerbera jamesonii Bolus callus cultures” 40 [...]... 4-6oC hoặc vận chuyển vào ban đêm 30 VI VI NHÂN GIỐNG CÚC ĐỒNG TIỀN Gerbera jamesonii Hình minh họa vi nhân giống hoa đồng tiền Hoa đồng tiền có thể nhân giống bằng các phương pháp là: phương pháp hữu tính (nhân giống bằng hạt) và phương pháp nhân giống vô tính (nhân giống bằng tách cây, cắm cành, nuôi cây mô tế bào) Các vùng trồng hoa đồng tiền chủ yếu sử dụng giống từ nuôi cấy mô Có nhiều tác giả... tốt nhất để tạo rễ cho chồi hoa đồng tiền là: MS + 0,1ppm NAA + 2,5% đường Saccaroza + 6,5g Agar/l - Kỹ thuật ra cây ngoài vườn ươm Giá thể thích hợp nhất cho vi c ra cây là: 1 mùn + 1 chấu hun 33 * Theo Ngô Đăng Vịnh, Hà Thị Thúy, Dương Minh Nga [27]: đã đưa ra quy trình nhân giống hoa đồng tiền như sau: Vật liệu vào mẫu là đế hoa đồng tiền non của các giống hoa đồng tiền nhập nội từ nước ngoài Quy... đầu tiên tiến hành lai tạo các giống đồng tiền với nhau Sau đó, người Pháp và người Hà Lan cũng tiến hành lai tạo và dần dần hai nước này đã trở thành trung tâm tạo giống đồng tiền của thế giới Từ Năm 1980, mỗi năm trên thế giới đã tạo được trên 80 chủng loại giống khác nhau, hoa có đường kính 8 cm trở lên và tạo ra những giống lai, cánh hoa kép Hiện nay, các giống đồng tiền hoa to đang được trồng rộng... 1 trấu hun + ¼ vi sinh *The Th.S Nguyễn Văn Hồng và PGS.TS Ngô Xuân Bình:đã đưa ra qui trình nhân giống in vitro Cúc Đồng tiền như sau [28]: Kỹ thuật khử trùng đế hoa đồng tiền non tốt nhất là khử trùng bằng 0,1% HgCl2 trong thời gian 10 phút Bổ sung 1,5 mg/lít 2,4 - D vào môi trường MS + 30 gram saccarose/lít + 6,5 gram agar/lít +, pH = 5,8 là tốt nhất để tạo callus từ đề hoa đồng tiền non Bổ sung... tiền hoa to đang được trồng rộng rãi trong sản xuất, phần lớn các giống đồng tiền mới là do các nhà tạo giống Hà Lan lai tạo ra Hoa Đồng tiền là một trong 10 loại hoa quan trọng nhất trên thế giới (sau hồng, cúc, lan, cẩm chướng, lay ơn) Các nước có sản lượng hoa lớn là: Hà Lan, Colombia, Pháp, Trung Quốc… Ở các nước này hầu hết cúc đồng tiền được trồng trong nhà có máy che 22 có trang bị hệ thống điều... đặt theo tên của một nhà tự nhiên học người Đức Traugott Gerber Chi đồng tiền Gerbera có khoảng 40 loài Các giống trồng hiện nay là con lai giữa G viridifilia Schult Bip và G jamesonii với các giống lai tự nhiên ở Nam Phi II.4 Yêu cầu sinh thái của cúc Đồng tiền [25] II.4.1 Yêu cầu về điều kiện ngoại cảnh II.4.1.1 Nhiệt độ Cây hoa đồng tiền thích hợp ở nhiệt độ từ 18- 250 C, ban đêm thích hợp từ 18-200C... sinh Sông Gianh được trộn theo tỷ lệ 1:1:1:1/4 *Theo M.R Shylaja, P Sashna, V Chinjusha and P.A Nazeem:đã đưa ra qui trình nhân giống in vitro Cúc Đồng tiền như sau [29]: Mẫu vật liệu ban đầu là những nụ hoa đồng tiền có đường kính 1,0-1,2 cm Qui trình khử mẫu như sau: các nụ hoa đồng tiền được rửa sạch dưới vòi nước chảy và ngâm 10 phút trong 1 giọt chất tẩy rửa sau đó rửa lại bằng nước cất vô trùng Đem... vẻ Không những thế, nó còn thể hiện sự ngây thơ, tình yêu và lòng ca ngợi + + + + Hoa đồng tiền trắng: thể hiện sự trong trắng tinh khiết Hoa đồng tiền vàng: thể hiện niềm hạnh phúc Hoa đồng tiền hồng: thể hiện sự ca ngợi khích lệ Hoa đồng tiền đỏ: thể hiện tình yêu thắm đợm Nhờ vào những ưu điểm trên mà hoa đồng tiền được rất nhiều người lựa chọn Khi đến 36 ... Giữa vô vàn các loài hoa, hoa đồng tiền (Gerbera Jamesonii) nổi lên là loài hoa đẹp, Đặc biệt, cây hoa đồng tiền kép có kích thước lớn, có nguồn gốc từ Nam Phi mới được nhập nội vào nước ta mấy năm gần đây Loại hoa này có thể trồng được ở nhiều nơi: chậu, công vi n, ruộng Hoa đồng tiền sử dụng được ở nhiều mục đích: cắm lọ, trang trí, trồng chậu Không những đẹp mà hoa đồng tiền còn có rất nhiều màu :... cả nước Trồng Đồng tiền về cơ bản không khó, song do đặc tính của cây Đồng tiền khác biệt so với một số loại hoa khác, nếu cần phải có những biện pháp riêng biệt Nắm được điều này, nghề sản xuất hoa Đồng tiền ở Vi t Nam còn có cơ hội phát triển hơn nữa III KỸ THUẬT TRỒNG VÀ CHĂM SÓC [25] III.1 Cây giống và tiêu chuẩn cây giống Cây giống khi trồng cần có các tiêu chuẩn không thấp hơn các tiêu chuẩn quy