ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ KHÁNH TÂM XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY TIÊU CHẢY CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRÊN NGAN, VỊT TẠI TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên, năm 2010 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ KHÁNH TÂM XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY TIÊU CHẢY CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRÊN NGAN, VỊT TẠI TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Nguyễn Quang Tính PGS-TS Cù Hữu Phú Thái Nguyên, năm 2010 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu trực tiếp thực với giúp đỡ TS Nguyễn Quang Tính, PGS.TS Cù Hữu Phú Các số liệu, hình ảnh kết luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tôi xin đảm bảo thông tin, trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Nguyễn Thị Khánh Tâm LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, nỗ lực thân, nhận giúp đỡ quý báu, bảo tận tình thầy suốt trình thực đề tài Nhân dịp này, cho phép bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc thầy: T.S Nguyễn Quang Tính, PGS.TS Cù Hữu Phú, người trực tiếp hướng dẫn trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn Khoa Sau đại học- Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, tập thể cán nghiên cứu Bộ môn Vi trùng- Viện Thú y Quốc gia gia đình, bạn bè đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ trình hoàn thành luận văn Thái Nguyên, ngày … tháng … năm 2010 Nguyễn Thị Khánh Tâm MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Trang MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số hiểu biết hội chứng tiêu chảy 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy vật nuôi 1.1.2.1 Ảnh hưởng môi trường, khí hậu 1.1.2.2 Nguyên nhân vi sinh vật 1.2 Tình hình nghiên cứu nước 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 12 1.3 Một số đặc tính vi khuẩn E coli nói chung chủng gây bệnh gia cầm nói riêng 13 1.3.1 Đặc điểm hình thái sức đề kháng vi khuẩn 13 1.3.2 Đặc điểm nuôi cấy 14 1.3.3 Đặc tính sinh hoá học 15 1.3.4 Cấu trúc kháng nguyên 15 1.3.4.1 Kháng nguyên O ( Kháng nguyên thân O- Somatic antigen) 16 1.3.4.2 Kháng nguyên H (Kháng nguyên lông- Flagella antigen) 16 1.3.4.3 Kháng nguyên K (Kháng nguyên vỏ bọc- Capsular antigen) 17 1.3.4.4 Kháng nguyên F ( Kháng nguyên bám dính- Fimbriae) 18 1.3.5 Các yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli 18 1.3.5.1 Yếu tố bám dính (adhesion) 19 1.3.5.2 Các yếu tố xâm nhập vi khuẩn E coli 21 1.3.5.3 Độc tố 29 1.3.6 Cơ chế gây bệnh vi khuẩn E coli 30 CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Đối tượng, thời gian địa điểm nghiên cứu 34 2.1.1 Đối tượng 34 2.1.2 Thời gian địa điểm 34 2.2 Nội dung 34 2.2.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ngan, vịt Bắc Giang 34 2.2.1.1 Điều tra tình hình ngan, vịt bị tiêu chảy theo địa phương, mùa vụ lứa tuổi 34 2.2.1.2 Xác định số triệu chứng bệnh tích ngan, vịt bị tiêu chảy 34 2.2.2 Kết xác định vai trò gây tiêu chảy vi khuẩn E coli ngan, vịt Bắc Giang 34 2.2.2.1 Phân lập xác định tỷ lệ vi khuẩn E coli ngan, vịt bị tiêu chảy nuôi huyện tỉnh Bắc Giang 34 2.2.2.2 Xác định số đặc tính sinh vật, hoá học chủng vi khuẩn E coli phân lập 34 2.2.2.3 Xác định khả sản sinh độc tố số chủng vi khuẩn E coli phân lập 34 2.2.2.4 Xác định serotype số chủng vi khuẩn E coli phân lập 34 2.2.2.5 Xác định độc lực số chủng vi khuẩn E coli phân lập động vật thí nghiệm 35 2.2.2.6 Xác định khả mẫn cảm với kháng sinh số chủng vi khuẩn E coli phân lập 35 2.2.3 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy ngan, vịt 35 2.3 Nguyên liệu 35 2.3.1 Mẫu nghiên cứu 35 2.3.2 Động vật thí nghiệm 35 2.3.3 Môi trường, hoá chất 35 2.4 Phương pháp nghiên cứu 36 2.4.1 Phương pháp chọn mẫu điều tra 36 2.4.2 Phương pháp lấy mẫu phân lập vi khuẩn 36 2.4.3 Xác định khả sản sinh độc tố số chủng vi khuẩn E coli phân lập phản ứng PCR 38 2.4.4 Phương pháp xác định serotype kháng nguyên O số chủng vi khuẩn E coli phân lập 40 2.4.5 Phương pháp xác định độc lực số chủng vi khuẩn E coli phân lập 41 2.4.6 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh số chủng vi khuẩn E coli phân lập 41 2.4.7 Xây dựng phác đồ điều trị tiêu chảy ngan, vịt 42 2.4.8 Phương pháp xử lý số liệu 43 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ngan, vịt Bắc Giang 44 3.1.1 Kết điều tra tình hình ngan, vịt mắc tiêu chảy theo địa phương 44 3.1.2 Kết điều tra tình hình ngan, vịt mắc tiêu chảy theo mùa vụ 45 3.1.3 Kết điều tra tình hình ngan, vịt mắc tiêu chảy theo lứa tuổi 47 3.1.4 Triệu chứng ngan, vịt bị tiêu chảy 49 3.1.5 Kết biến đổi bệnh tích ngan, vịt bị tiêu chảy 52 3.2 Kết xác định vai trò gây tiêu chảy vi khuẩn E coli ngan, vịt 53 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm ngan, vịt mắc tiêu chảy 53 3.2.1.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli 53 3.2.1.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ phủ tạng ngan, vịt bệnh 56 3.2.2 Kết giám định số đặc tính sinh hoá chủng vi khuẩn E coli phân lập 57 3.2.3 Kết xác định độc tố số chủng vi khuẩn E coli phân lập 59 3.2.4 Kết xác định serotype số chủng vi khuẩn E coli phân lập 60 3.2.5 Kết xác định độc lực số chủng vi khuẩn E coli phân lập chuột bạch 63 3.2.6 Kết xác định khả mẫn cảm với kháng sinh số chủng vi khuẩn E coli phân lập 65 3.3 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị tiêu chảy cho ngan, vịt 68 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 73 KẾT LUẬN 73 ĐỀ NGHỊ 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 76 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT APEC : Avian Pathogenic Escherichia coli ATP : Adenozin Triphosphat ADN : Acid Deoxyribonucleic ARN : Acid Ribonucleic BHI : Brain Heart Infusion Bp : Base pair Cnf : Cytotoxic necrotizing factor ColV : Colicin V C perfringens : Clostridium perfringen Cs : Cộng E.M.B : Eosin Methyl Blue E coli : Escherichia coli Hly : Haemolysin KXĐ : Không xác định Kg : Kilogam LD50 : Lethal Dose 50 LPS : Lipo polysaccharide LT : Heat- Labile- toxin L : Lít MHSA : Mannose Resistance Haemagglutination MRSA : Mannose Sensitive Haemagglutination MR : Methyl Red NCCLS : National Committee of Clinical Laboratory Satndards Nxb : Nhà xuất OMP : Outer Membrane Proteins PCR : Polymerase Chain Reaction PBS : Phosphate Buffer Saline RBC : Red blood cell Stx : Shiga toxin ST : Heat- Stable- toxin SIM : Sulfide Indole Motility TT : Thể trọng TSB : Tryptone soy broth Tr : Trang UV : Ultraviolet VT : Verotoxin VP : Voges Proskauer 75 CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN Nguyễn Thị Khánh Tâm, Nguyễn Quang Tính (2010), “Kết phân lập định typ vi khuẩn E coli ngan, vịt Bắc Giang”, Tạp chí Khoa học Công nghệ, Đại học Thái Nguyên, 71(9) 76 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Nguyễn Xuân Bình, Trần Thị Hạnh, Tô Thị Phấn (2002), 109 bệnh gia cầm cách phòng trị, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 47- 50 Tô Minh Châu, Trần Thị Bích Liên, Nguyễn Ngọc Hải (2002), “Kết phân lập định typ vi khuẩn E coli gà, trứng gà số sở chăn nuôi Thủ Đức vùng lân cận”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 9(2), tr 28- 31 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 57- 147 Đậu Ngọc Hào, Nguyễn Thị Thuận, Đào Tú Khanh (1995), “Một số loài nấm mốc phát thức ăn gia súc, gia cầm Đặc tính khả sản sinh Aflatoxin tự nhiên môi trường chăn nuôi loài Aspergillus Flavus ”, Công trình nghiên cứu khoa học, Viện thú y, 1990- 1995 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình (2002), “Chế tạo, thử nghiệm số chế phẩm sinh học phòng trị bệnh tiêu chảy phân trắng lợn E coli Cl perfringens”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 9(1), tr 19- 28 Hiệp hội chăn nuôi gia cầm Việt Nam, Sổ tay chăn nuôi gia cầm bền vững, Nxb Thanh Hóa, tr 292- 296 Vũ Khắc Hùng, Lê Văn Tạo, Pilipcinec (2005), “Xác định loại kháng nguyên bám dính thường gặp vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bị bệnh tiêu chảy phản ứng PCR”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 12(3), tr 22- 28 Vũ Khắc Hùng, Nguyễn Đức Tân, Nancy Cornick (2007), “Xác định tỷ lệ nhiễm phân tích yếu tố độc lực vi khuẩn E coli từ trâu bò khoẻ mạnh tỉnh miền Trung”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 14(2), tr 44- 50 77 Nguyễn Thị Liên Hương, Cù Hữu Phú, Đỗ Ngọc Thuý, Lê Thị Minh Hằng, Trần Việt Dũng Kiên (2009), “Tỷ lệ phân lập khả mẫn cảm kháng sinh chủng vi khuẩn E coli phân lập từ ngan mắc bệnh trực khuẩn coli”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 16 (6), tr 20- 24 10 Nguyễn Thị Liên Hương, Đỗ Ngọc Thuý, Lê Thị Minh Hằng (2010a), “Kết gây nhiễm thử nghiệm số chủng vi khuẩn E coli gây bệnh cho ngan phôi trứng”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 17(2), tr 58- 63 11 Nguyễn Thị Liên Hương, Cù Hữu Phú, Đỗ Ngọc Thuý, Lê Thị Minh Hằng (2010b), “Tình hình nhiễm số đặc điểm bệnh trực khuẩn coli ngan nuôi Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 17(3), tr 21- 27 12 Nguyễn Thị Kim Lan, Lê Minh, Nguyễn Thị Ngân (2006), “Vai trò ký sinh trùng đường tiêu hoá hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 13(3), tr 36- 40 13 Lê Hồng Mận, Bùi Đức Lũng (2007), Sổ tay chăn nuôi vịt, ngan, ngỗng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 182- 184 14 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phùng Quốc Chướng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập 4(1), tr 15- 21 15 Nguyễn Thị Nga, Trần Văn Hùng, Đỗ Thị Nhung, Nguyễn Thị Liên Hương, Dương Thị Oanh (2006), Tuyển tập công trình nghiên cứu khoa học công nghệ chăn nuôi ngan, ngỗng, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 197- 203 16 Nguyễn Vĩnh Phước (1976), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 377- 380 17 Trương Quang (2005), “Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E coli hội chứng tiêu chảy lợn 1- 60 ngày tuổi”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 12(1), tr 27- 32 78 18 Trương Quang, Phạm Hồng Ngân, Trương Hà Thái (2006), “Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E coli bệnh tiêu chảy bê, nghé”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 13(4), tr 11-17 19 Phạm Thế Sơn, Lê Văn Tạo, Cù Hữu Phú, Phạm Khăc Hiếu (2008), “Đặc tính vi khuẩn E coli, Salmonella spp Cl perfringens gây bệnh lợn tiêu chảy”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 15 (1), tr 73- 77 20 Lê Thị Tài (1997), Ô nhiễm thực phẩm với sức khoẻ người gia súc, Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, Viện thú y quốc gia, tr 65- 66 21 Lê Văn Tạo, Khương Bích Ngọc, Nguyễn Thị Vui, Đoàn Thị Băng Tâm (1993), “Xác định yếu tố gây bệnh di truyền plasmid vi khuẩn E coli phân lập từ lợn bị bệnh phân trắng để chọn giống sản xuất vacxin”, Báo cáo khoa học 1990- 1991, Nxb Nông nghiệp, tr 77- 88 22 Lê Văn Tạo (1997), Bệnh Escherichia coli gây Những thành tựu nghiên cứu phòng chống bệnh vật nuôi, Tài liệu giảng dậy sau đại học cho bác sỹ thú y kỹ sư chăn nuôi Viện thú y Quốc Gia Hà Nội, tr 207- 210 23 Trương Hà Thái, Nguyễn Ngọc Đức, Chu Thị Thanh Hương, Nguyễn Thị Thu Hiền, Nguyễn Thị Hải Đường (2009), “Bệnh trực khuẩn coli (Colibacilosis) số giống gà công nghiệp hướng thịt khả kháng kháng sinh số chủng E coli phân lập”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 16(6), tr 13- 19 24 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 81- 85 25 Võ Thành Thìn, Ellen Ons, Nguyễn Viết Không, Bruno Goddeeris (2008a),”Ứng dụng phương pháp multiplex PCR để phát khả tranh giành sắt vi khuẩn E coli gây bệnh gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 15(4), tr 60- 65 79 26 Võ Thành Thìn, Ellen Ons, Bruno M.Goddeeris (2008b), “Một số yếu tố độc lực chủng vi khuẩn E coli gây bệnh gà nuôi Khánh Hoà Phú Yên”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 15(6), tr 38- 43 27 Bùi Thị Tho (1996), Nghiên cứu tác dụng số thuốc hoá dược trị liệu phytonxit E coli phân lập từ bệnh lợn ỉa phân trắng Luận án PTS Khoa học Nông nghiệp 28 Nguyễn Thiên Thu, Lê Thị Thi, Đặng Văn Tuấn, Lê Thị Mỹ, Nguyễn Thị Xuân Hằng (2004), “Nghiên cứu bệnh E coli gây vịt nuôi số tỉnh miền trung Xây dựng biện pháp phòng trị bệnh”, Báo cáo khoa học Chăn nuôi thú y 2002- 2003, tr 87- 93 29 Tô Liên Thu (2004), “Tình trạng kháng kháng sinh vi khuẩn Salmonella E coli phân lập từ thịt lợn thịt gà vùng đồng Bắc Bộ”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 11(3), tr 29- 36 30 Đỗ Ngọc Thuý, Darren Trot, Alan Frost, Kirsty Townsend, Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hường, Vũ Ngọc Quý (2002), “Tính kháng kháng sinh chủng Escherichia coli phân lập từ lợn tiêu chảy số tỉnh miền Bắc Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 9(2), tr 21- 27 31 Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Thị Liên Hương, Lê Thị Minh Hằng, Trần Việt Dũng Kiên (2009), “Một số đặc tính chủng vi khuẩn E coli phân lập từ ngan mắc bệnh Colibacilosis”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 16(4), tr 32- 38 32 Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Thị Liên Hương, Lê Thị Minh Hằng, Trần Việt Dũng Kiên (2010), “Xác định số gen liên quan đến độc lực vi khuẩn E coli gây bệnh cho ngan phản ứng PCR”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 17(3), tr 28- 33 80 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 33 Abdelhamid Hammodi, Hebib Aggad (2008), “Antibioresistance of Escherichia coli strains isolated from chicken colibacillosis in Western Algeria Turk”, J Vet Anim Sci, 32(2), pp 123- 126 34 Achtman M., Heuzenroeder M., Kusecek B and Ochman H (1986), “Clonal analysis of Escherichia coli O2: K1 isolated from diseased humans and animal”, Infect Immun 51, pp 268- 276 35 Andrews S C., Robinson A K and Rodríguez- Quinones R (2003), “Bacterial iron homeostasis” FEMS Micro Rev 27 (2-3), pp 215- 237 36 Bertschinger H U., Fairbrother J M., Nielsen N O and Pohlenz J F (1992), Escherichia coli infection Deseases of swine IOWA State University press/AMES, IOWA U.S.A, 7th Edition, pp 487- 488 37 Bree A, Dho M and Lafont J P (1989), “Comparative infectivity for axenic and specific-pathogen-free chickens of O2 E coli strains with or without virulence factor”, Avian Dis 33, pp 134- 139 38 Brown V (1981), “Escherichia coli cells containing the ColV plasmid produce the iron ionophore aerobactin”, FEMS Microbiol Lett, pp 225- 228 39 Blackwell.T E (1989), Enteritidis and diarrhoea, Veterinary climate North American large animal pract, pp 547- 575 40 Blanco J E., Balanco M., Mora A., Jansen W H, Garcia V., Vasquez M L and Blanco J (1998), “Serotypes of Escherichia coli isolated from septicaemic chickens in Galicia (Northwest Spain)”, Vet Microbiol,61, pp 229- 235 41 Bullen J I (1981), “The significance of iron in effection”, Rewier of Infectious Diseases 3, pp 1127- 1138 42 Carter G R., Chengappa M M and Rober T S A W (1995), Essentials of veterinary Microbilology Copyright 1995 William and Wikkins, Rose tree corporater Center building 21400 North providence Rd, Suite 5025 Media PA 19063-2043 A waverly Company 1995 81 43 Cavalieri S J and Snynder I S (1982a), “Cytotoxin activity of a partially purifield Escherichia coli alpha- haemolysin”, J Med Microbiology 15, pp 11- 21 44 Cavalieri S J and Snynder I S (1982b), “Effect of Escherichia coli alphahaemolysin on human peripheral leukocyte viability in vitro”, J Med Microbiology 36, pp 450- 461 45 Clandy J and Savage D C (1981), “Another Colicin V phenotype in vitro adhension of Escherichia coli to mouse intestinal epithelium”, Infection and Immunity, 32, pp 343- 352 46 Dakashinamurthy A and Shukla B D (1991), “Problem and perspectives of spoilage fungi and mycotoxin in India”, Fungi and mycotoxins in stored products Asias proceeding, pp 213- 220 47 Delicato E R., De Brito B G., Gaziri L C and Vidotto M C (2003), “Virulence associated gens in Escherichia coli isolates from poultry with Colibacillosis”, Vet Microbiol 94(2), pp 97- 103 48 DeRosa M., Ficken M D and Barnes H J (1992), “Acute airsacculitis in untreated and cyclophosphamide- pretreated broiler chickens inoculated with Escherichia coli or Escherichia coli cell- free culture filtrate”, Vet.Pathol, 29 (1), pp 68- 78 49 Dho Moulin M and Lafont J P (1982), “Escherichia coli colonization of the trachea in poultry: compasion of virulence and avirulence strains in gnotoxenic chickens”, Avian Disease 26, pp 787- 797 50 Dho- Moulin M and Fairbrother J M (1999), “Avian pathogenic Escherichia coli (APEC)”, Vet Res 30, pp 299- 316 51 Dozois C M., Fairbrother J M and Harel J., Bosse M (1992), “Pap and pilrelated DNA sequences and other virulence determinants associated with Escherichia coli isolated from septisemic chickens and turkeys”, Infect Immun, 60 (7), pp 2648- 2656 82 52 Dozois C M and Chateloup N (1994), “Bacterial colonization anf in vivo expression of F1 (type 1) fimbrial antigens in chickens experimentally infected with pathogenic Escherichia coli”, Avians Dis, 38(2), pp 231- 239 53 Duguid J P., OLD, D C (1994), “Introduction: a histological perspective in: Fimbriae, adhesion, genetics, biogenesis and vaccines, Ed: Klemm, P Boca Raton, FL”, CRC Press, pp.1- 26 54 Emery D A., Nagaraja K V and Shaw D P (1992), “Virulence factors of Escherichia coli associated with colisepticemia in chickens and turkeys”, Avian Dis, 36, pp 504- 511 55 Emody L., Pal T., Safonova N V and Kuch B (1980), “Alpha-haemolysin: An additive virulence factor in Escherichia coli”, Acta Microbiology Academiae Scientarumm Hungaricae 27, pp 333- 342 56 Fairbrother J M (1992), Enteric colibacillosis Diseases of swine IOWA State Univesity Press/AMES, IOWA U.S.A, 7th Edition, pp 489- 496 57 Faradol- Gomez J D and Sansom M S (2003), “Acquisition of siderophores in gramnegative bacteria”, Nat Rev Mol Cell Biol, 4(2), pp 105- 116 58 Gophna U., Oelschlaeger T A., Hacker J and Ron E Z (2001), “Yersinia HPI in septicemic Escherichia coli strains isolated from diverse hosts”, FEMS.Micro Letters, 196, pp 57- 60 59 Griffiths E (1985), “Candidate Virulence Markers The ColV Plasmid Iron Sequestering System The Virulence of Escherichia coli” Reviews and Methods Academic Press, pp.193- 226 60 Gross W G (1994), Diseases due to Escherichia coli in poultry In Escherichia coli in Domestic Animal and Human, Edited by C.L Gyles Wallingford, England, CAB International, pp 237- 259 61 Hacker J (1992), “Role of Fimbriae adhensins in pathogenesis of Escherichia coli infections”, J Microbiol 38, pp 720- 727 83 62 Hsu F S., Chueck L L and Shen Y M (1983), Isolation, serotyping and drug resistance of Salmonella in scouring pig in Taiwan, Chung Hua Min Kuo 16, pp 283- 290 63 Isaacson R E., Colmeucro J and Richter P (1981), “Escherichia coli K99 pili are composed of one subunit species”, FEMS Microbiol, 12, pp 329- 332 64 JanBen T., Christine Schwarz, Petra Preikschat, Matthias Voss, Hans-C Philipp and Lothar H.Wieler (2001), “Virulence associated genes in avian pathogenic Escherichia coli (APEC) isolated from internal organs of poultry having died from Colibacilosis”, Avian Dis 45, pp 371- 378 65 Jesus E., Blanco, Miguel Blanco and Azucena Mora (1997), “Production of toxins (Enterotoxin, Verotoxins, and Necrotoxins) and Colicins by Escherichia coli strains isolated from septicemic anf healthy chickens: Relationship with in vivo pathogenicity”, Journal of Clinical Microbiology, pp 2953- 2957 66 Kallenius G., Mollby R and Svenson S B (1981), “Occurrence of P fimbriaed Escherichia coli in urinary tract infections”, Lancet 2, pp 1369- 1372 67 Kammler M., Schon C and Hantke K (1993), “Characterization of ferrous iron uptake system of Escherichia coli”, J Bacteriol 175 (19), pp 6212- 6219 68 Kaufmann J (1996), Parasitic infections of Domestic Animal Diagnostic Manual Birkhauser Verlag Basel-Boston-Berlin, pp 292- 334 69 Ketyl I., Moldyl E and Kentrohn T (1975), “Mouse oedema caused by a toxin substance of Escherichia coli strains”, Act Microbiol Acad Sci Hung, pp 307- 317 70 Kikuyasu Nakamura (2000), Colibacilosis Diseases of bird, Japan International Agricultural Council, pp 70- 73 71 La Ragione R M and Woodward M J (2002), “Virulence factor of Escherichia coli serotypes associated with avian colisepticaemia”, Res Vet Sci 73, pp 27- 35 72 Lei Dai, Li Ming Wu and Bei Bei Li (2008), “Characterization of antimicrobial resistance among Escherichia coli isolates from chickens in China between 2001 and 2006”, FEMS Microbiol Lett 286, pp 178- 183 84 73 Linggood M A and Roberts M (1987), “Incidence of the aerobactin ion uptake system among Escherichia coli isolates from infections of farm animals”, J Gen Microbiol, 133, pp 835- 842 74 Malayviya R., Ross E., Jakschik B A and Abraham S N (1996), “Mass cell degranulation induced by type I Fimbriated Escherichia coli in mice”, J.Clin, Invest 93, pp 1645- 1653 75 Maria de Fatima Martins, Nilce M., Martinez-Rossi, Alessandra Ferreira, Marcelo Brocchi, Tomomasa Yano, Antonio Fernando P Castro and Wanderley D Silveira (2000), “Pathogenic charateristics of Escherichia coli strains isolated from newborn piglets with diarrhea in Brazil”, Veterinary Microbiol, Volume 76, Issue1, pp 51- 59 76 McPaeke S J W., Smyth J A and Ball H J (2005), “Characterisation of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) associated with colisepticaemia compared to faecal isolated from health birds”, Veterinary microbiology 110, pp 245- 253 77 Mellata M., Bakour R., Jacquemin E and Mainil J G (2001), “Genotypic and phenotypic characterization of potential virulence of intestinal avian Escherichia coli strains isolated in Algeria”, Avian Dis 45, pp 670- 679 78 NCCLS (1999), Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animal; Approved Standard Pennsylvania, USA: The national Committee for Clinical Laboratory Standards 79 Nagy B and Fekete Pzs (1999), ETEC infection in pig Pathogenic Escherichia coli in animal Veterinary reseach Special issue Inra FNV Toulouse France, pp 259- 284 80 Orndoff P E (1994), Escherichia coli type1 pili in Molecular Genetics of bacterial pathogennesis, ASM Press, Washington D C, pp 91-111 85 81 Parreira V R and Yano T (1998), “Cytoxin produced by Escherichia coli isolated from chickens with swollen head syndrome (SHS)”, Vet Microbiol 62, pp 111- 119 82 Pourbakhsh S A., Boulianne M., Martineau-Doize B and Faibrother J M (1997), “Vilulence mechanisms of avian Fimbriated Escherichia coli in experimentally inoculated chickens”, Vet Microbiol 58, pp 195- 213 83 Purvis G M and Tremblay R R (1985), “Diseases of newborn”, Veterinary Microbiology, pp 192- 206 84 Radostits O M., Blood D C and Gay C C (1994), Veterinary medicine, the textbook of cattle, sheep, pigs, goats and horses Diseases caused by Escherichia coli London, Philadelphia, Sydney, Tokyo, Toronto, pp 703- 730 85 Smith H W (1963), “The haemolysins of Escherichia coli”, J Pathol Bacterial, pp 197- 212 86 Smith H W and Hall S (1967), “The transmissible nature of the genetic factor in E coli that controls haemolysin production”, J Gen Microbiol 47, pp 153- 161 87 Torres A G and Payne S M (1997), “Haem ion transport system in enterohaemorrhagic Escherichia coli O157: H7”, Mol Micro, 23, pp 825- 833 88 Vandekerchove F., Vandemaele C and Adriaensen (2005), “Virulenceassociated traits in avian Escherichia coli: Comparison between isolates from Colibacillosis- affected and clinically healthy layer flocks”, Veterinary Microbiology 108, pp 75- 87 89 Virginial L W and Crosa H J (1991), “Colicin V virulance plasmids, Microbiological, Bacterial iron sources: from siderophores to hemophores” Annu Rev Microbiol, 58, pp 611- 647 90 Wanderman C and Delepelaire P (2004), “Bacterial iron sources from siderophores to hemophores”, Annu Rev Microbiol, 58, pp 611- 647 86 91 Water V and Crosa J (1991), “Colicin V virulence plasmids”, Microbiol Rev 55, pp 437- 450 92 Yersushalmi Z., Smorodinsky N I and Naveh M W (1990), “Adherence pili of avian strains of E coli O78”, Infection and Immunity , pp 1129- 1131 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA Ảnh 1: Triệu chứng ngan bệnh Ảnh 2: Gan sưng, tim xuất huyết Ảnh 3: Xoang bụng viêm dính Ảnh 4: Hình thái khuẩn lạc E coli môi trường thạch MacConkey Ảnh 5: Hình thái khuẩn lạc vi khuẩn E coli môi trường thạch máu Ảnh 6: Hình thái vi khuẩn E coli KHV Ảnh 7: Thử khả di động sinh Idol môi trường SIM Ảnh 8: Phản ứng lên men đường Ảnh 9: Chuột sau thử độc lực Ảnh 10: Mổ khám chuột thí nghiệm Ảnh 11: Sản phẩm phản ứng PCR Ảnh 12: Khả mẫn cảm với kháng sinh số chủng vi khuẩn E coli phân lập [...]... rõ vai trò gây bệnh của vi khuẩn E coli cũng như có biện pháp điều trị hiệu quả, chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: "Xác định vai trò gây tiêu chảy của vi khuẩn Escherichia coli trên ngan, vịt tại tỉnh Bắc Giang và biện pháp điều trị" 2 Mục tiêu của đề tài - Xác định được vai trò của vi khuẩn E coli trong hội chứng tiêu chảy ở ngan, vịt - Xây dựng và đề xuất một số phác đồ điều trị tiêu chảy ở ngan,. .. chứng của ngan, vịt bị tiêu chảy 50 Bảng 3.5 Bệnh tích của ngan, vịt bị tiêu chảy 52 Bảng 3.6 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn E coli từ các mẫu phân .54 Bảng 3.7 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn E coli trên ngan, vịt 55 Bảng 3.8 Kết quả phân lập vi khuẩn E coli từ phủ tạng 56 Bảng 3.9 Kết quả giám định đặc tính sinh hoá của các chủng vi khuẩn E coli phân lập được 58 Bảng 3.10 Kết quả xác định. .. tuổi Ngan, vịt bị bệnh thường kém ăn, tăng trưởng kém, ủ rũ, phân trắng xanh… Tiêu chảy xảy ra do rất nhiều nguyên nhân: thức ăn, độc tố, virus, vi khuẩn Nguyên nhân tiêu chảy do vi khuẩn phải kể đến vai trò của vi khuẩn Escherichia coli (E coli) E coli là vi khuẩn thường trực trong đường tiêu hoá của vật nuôi, bình thường không gây bệnh nhưng khi gặp điều kiện ngoại cảnh bất lợi, sức đề kháng của. .. phác đồ điều trị tiêu chảy ở ngan, vịt 3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài - Kết quả phân lập, giám định serotype, xác định độc tố, độc lực của vi khuẩn E coli là dẫn liệu khoa học cho phép khẳng định vai trò của nó trong bệnh tiêu chảy ở ngan, vịt - Kết quả nghiên cứu của đề tài bổ sung thêm tư liệu, đồng thời là cơ sở để đưa ra phác đồ điều trị tiêu chảy ở ngan, vịt 3 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU... điều trị thử nghiệm ngan, vịt mắc tiêu chảy 70 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1 Sơ đồ quy trình phân lập, giám định vi khuẩn E coli 37 Hình 3.1 Biểu đồ tỷ lệ ngan, vịt mắc tiêu chảy theo địa phương 44 Hình 3.2 Biểu đồ tỷ lệ ngan, vịt mắc tiêu chảy theo mùa vụ 46 Hình 3.3 Biểu đồ tỷ lệ ngan, vịt mắc tiêu chảy theo lứa tuổi 48 Hình 3.4 Biểu đồ kết quả xác định serotype kháng nguyên O của một... thanh dịch hay xuất huyết Bệnh lý do vi khuẩn Salmonella sp thường gây rối loạn tiêu hoá và tiêu chảy, vi m hồi, manh và kết tràng có màng giả khi ở thể cấp tính và mãn tính C perfringens gây bệnh lý chủ yếu là vi m ruột cấp tính và kèm theo xuất huyết Trong đường tiêu hoá của vật nuôi có hệ vi khuẩn đường ruột, bao gồm các vi khuẩn có lợi và vi khuẩn có hại Vi khuẩn có lợi có tác dụng lên men, phân... khác * Tiêu chảy do virut Có hơn 10 loại virut có tác động làm tổn thương đường tiêu hoá gây vi m ruột ỉa chảy như: Enterovirus, Rotavirus, Coronavirus, Adenovirus type IV Nhiều virut gây bệnh đường tiêu hoá làm tổn thương các niêm mạc ruột, phá huỷ quá trình hấp thu và điều tiết dịch dẫn đến tiêu chảy nặng như: Coronavirus 1, Coronavirus 2, Rotavirus Bệnh lý xuất hiện chủ yếu là vi m ruột, vi m kết... nguyên bám dính F4 đóng vai trò quan trọng trong bệnh tiêu chảy ở lợn con theo mẹ Tác giả Trương Quang (2005) [17] khi nghiên cứu về vai trò gây bệnh của vi khuẩn E coli trong hội chứng tiêu chảy ở lợn từ 1- 60 ngày tuổi tại Hà Nội và vùng phụ cận đã khẳng định tỷ lệ chủng E coli có độc lực mạnh và các yếu tố gây bệnh của lợn bị tiêu chảy cao hơn rất nhiều so với lợn không bị tiêu chảy Yếu tố bám dính,... không chịu nhiệt, độc lực mạnh của các chủng phân lập từ lợn bị tiêu chảy và 8 không bị tiêu chảy là: 93,33%- 33,33%; 53,33%- 25,92%; 90,00%- 14,81%; 90,00%- 11,11%; 90,00%- 0% Trương Quang và cs (2006) [18] xác định vai trò gây bệnh của vi khuẩn E coli trong bệnh tiêu chảy của bê, nghé Kiểm tra 168 mẫu phân bê, nghé không bị tiêu chảy đã cho tỷ lệ dương tính với vi khuẩn E coli lần lượt là 80,99%; 85,11%... 2.1 Ký hiệu chuỗi ADN của các cặp mồi dùng để xác định khả năng sản sinh độc tố của vi khuẩn APEC và kích cỡ của các sản phẩm sau quá trình điện di 39 Bảng 2.2 Bảng tiêu chuẩn đánh giá kháng sinh đồ theo NCCLS (1999) 42 Bảng 3.1 Tỷ lệ ngan, vịt mắc tiêu chảy theo địa phương 44 Bảng 3.2 Tỷ lệ ngan, vịt bị tiêu chảy theo mùa vụ 45 Bảng 3.3 Tỷ lệ ngan, vịt mắc tiêu chảy theo lứa tuổi