Chƣơng I: GIỚI THIỆU Cá bống kèo (Pseudapocryptes elongates) loài cá địa với nguồn giống tự nhiên phong phú nguồn thực phẩm nhiều người ưa chuộng Hiện nay, cá bống kèo loài thủy đặc sản có giá trị kinh tế cao, tiêu thụ rộng rãi nước có giá trị xuất Tuy nhiên, năm gần đây, nghề nuôi cá bống kèo gặp trở ngại lớn bệnh xuất lây lan diện rộng làm ảnh hưởng đến sản lượng nuôi trồng thu nhập người dân Cá bống kèo nuôi tập trung số tỉnh vùng Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) Cà Mau, Bạc Liêu Sóc Trăng, Bạc Liêu tỉnh có diện tích nuôi lớn, diện tích nuôi đạt 405 vào năm 2011 (Sở Nông nghiệp & PTNT tỉnh Bạc Liêu, 2012) Tuy nhiên từ năm 2007 đến cá bống kèo nuôi thương phẩm bị bệnh với dấu hiệu bệnh lý xuất huyết thân, vi hậu môn với tỉ lệ chết cao chết diện rộng Xuất huyết dấu hiệu bệnh lý nhiều tác nhân gây virus, vi khuẩn môi trường Tác nhân gây xuất huyết mô tả nhiều vi khuẩn Điển tác nhân gây bệnh xuất huyết cá rô phi (Oreochromis spp.) số tỉnh miền Bắc Việt Nam Phạm Hồng Quân ctv., 2013 xác định vi khuẩn Streptococcus agalactiae gây Vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá điêu hồng (Oreochromis spp.) (Đặng Thị Hoàng Oanh Nguyễn Thanh Phương, 2012) Bệnh xuất huyết tác nhân vi khuẩn S iniae, theo kết nghiên cứu Trần Vĩ Hích Nguyễn Hữu Dũng (2011) tác nhân gây bệnh xuất huyết cá chẽm (Latex calcarifer) vi khuẩn S iniae, vi khuẩn tác nhân gây bệnh cá bơn Nhật Bản (Paralichthys olivaceus), cá đù đỏ (Sciaenops ocellates) (Eldar et al., 1999) Ngoài ra, bệnh xuất huyết cá vi khuẩn S dysgalactiae, vi khuẩn gây hội chứng xuất huyết, bơi xoắn, phương hướng cá đối (Liza alata, Liza haemotocheila) (Qi et al., 2013), cá tầm (Acipencer schrenckii) (Yang Li, 2009), cá nâu (Mugil cephalus) cá bớp (Rachycentron canadum) (Abdelsalam et al., 2009) Tác nhân gây bệnh xuất huyết cá tìm thấy nhiều loài vi khuẩn khác Aeromonas hydrophila gây bệnh cá tra (Loan ctv., 2009), Vibrio parahaemolyticus V alginolyticus gây bệnh cá mú giống cá mú thịt, (Leong tak Seng, 1994; Somkiat Kanchanakhan, 1996; Nguyễn Thị Thanh Thùy ctv., 2009 trích dẫn Võ Văn Nha, 2012) Do tác nhân gây bệnh đa dạng, nên việc phòng trị bệnh xuất huyết động vật thủy sản có hiệu tác nhân nguyên nhân gây bệnh xác định xác Hiện nay, chưa có nghiên cứu thức bệnh xuất huyết cá bống kèo, nhằm cung cấp thông tin cho đơn vị quản lý, nhà chuyên môn khuyến cáo người nuôi phòng, trị bệnh cách hiệu Vì thế, đề tài “Xác định tác nhân vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá bống kèo (Pseudapocryptes elongatus)” góp phần vào việc kiểm soát dịch bệnh cá bống kèo nói riêng thủy sản nuôi vùng nói chung ngày hiệu 1.1 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu trƣớc mắt: Khảo sát đánh giá tình hình xuất bệnh xuất huyết cá bống kèo nuôi tỉnh Bạc Liêu Xác định đặc điểm bệnh học tác nhân gây bệnh cá bống kèo từ đề xuất giải pháp phòng trị bệnh hiệu Mục tiêu lâu dài: Cung cấp thông tin làm sở cho giải pháp phòng trị bệnh cá bống kèo hướng đến nghề nuôi cá bống kèo bền vững 1.2 Phạm vi nghiên cứu: Nghiên cứu tập trung vào phân lập, định danh, xác định tác nhân vi khuẩn gây bệnh cá bống kèo nuôi Đồng thời phát triển qui trình chẩn đoán bệnh thử nghiệm phòng trị bệnh xuất huyết cá bống kèo qui mô phòng thí nghiệm 1.3 Nội dung nghiên cứu Luận án tập trung nghiên cứu nội dung sau: Phân lập định danh vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá bống kèo nuôi thương phẩm 1.1 Điều tra, khảo sát trạng bệnh cá bống kèo nuôi 1.2 Phân lập định danh vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá bống kèo Xác định tác nhân vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá bống kèo 2.1 Xác định đặc điểm bệnh học 2.2 Xác định đặc điểm mô học 2.3 Xác định đặc điểm huyết học Phát triển qui trình chẩn đoán bệnh xuất huyết cá bống kèo phương pháp sinh học phân tử Phương pháp điều trị bệnh xuất huyết cá bống kèo qui mô phòng thí nghiệm 4.1 Lập kháng sinh đồ xác định nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) thuốc kháng sinh lên vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá bống kèo 4.2 Bố trí thí nghiệm điều trị bệnh qui mô phòng thí nghiệm 1.4 Giới hạn nghiên cứu Nghiên cứu tác nhân vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá bống kèo nuôi thương phẩm tỉnh Bạc Liêu 1.5 Ý nghĩa nghiên cứu Kết nghiên cứu nhằm đáp ứng cho trình đa dạng vật nuôi thủy sản góp phần gia tăng sản lượng động vật thủy sản Thông tin từ kết khảo sát trạng bệnh cá bống kèo qui trình phòng trị bệnh góp phần hạn chế thiệt hại trình nuôi cá bống kèo mang lại hiệu suất kinh tế, tăng thu nhập cho người nuôi 1.6 Điểm luận án Lần xác định tác nhân gây bệnh xuất huyết cá bống kèo vi khuẩn Streptococcus dysagalactiae thời điểm bệnh thường xuất cá bống kèo nuôi ao Hoàn chỉnh qui trình phát vi khuẩn S dysgalactiae để ứng dụng chẩn đoán sớm, nhanh đặc hiệu tác nhân gây bệnh xuất huyết cá bống kèo phương pháp PCR Đề xuất số loại kháng sinh điều trị bệnh xuất huyết cá bống kèo Chƣơng II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Phân loại cá bống kèo Hiện cá bống kèo gọi phổ biến Pseudapocryptes elongatus Tên tiếng Việt cá bống kèo hay cá bống kèo vẩy nhỏ Tên tiếng Anh Lanceolate goby Theo Cuveir (1816), cá bống kèo phân loại: Bộ: Perciformes Họ: Gobiidae Giống: Pseudapocryptes Loài: Pseudapoccryptes lanceolatus (Bloch & Schneider, 1801) Pseudapocryptes elongatus (Cuveir, 1816) Hình 2.1: Cá bống kèo 2.2 Tình hình nuôi cá bống kèo giới nƣớc 2.2.1 Tình hình nuôi cá bống kèo giới Cá bống kèo loài cá phân bố rộng vùng cửa sông hay hệ sinh thái rừng ngập mặn bãi bùn Ấn Độ, Banglades, Campuchia, Nhật Bản, Trung Quốc, Việt Nam…(Abid et al., 2014) Đây đối tượng quan tâm phát triển nghề nuôi giới cá dễ nuôi có giá trị dinh dưỡng cao, có 34 giống cá bống thuộc họ Gobiiidae tập trung nuôi nước Banglades, Trung Quốc, Đài Loan, Thái Lan, Philippines Việt Nam (Polgar Lim, 2011) Theo Hong Zhang (2004) Trung Quốc sinh sản nhân tạo thành công loài cá bống có tên khoa học Boleophthalmus pectinirostris phát triển nuôi đối tượng với mật độ nuôi từ 4,5 – 7,5 con/m2, suất trung bình đạt từ 750 đến 975 kg/ha Diện tích nuôi loài cá Trung Quốc đạt khoảng 13.000 (Hong et al., 2007) Đây loài cá bống nuôi phổ biến Nhật Bản, Hàn Quốc Đài Loan (Takeshi, 2008) Một loài cá bống khác cá bống kèo Pseudapocryptes elongates phát triển mạnh số nước Châu Á, điển Đài Loan Việt Nam, loài cá nuôi dạng mô hình nuôi thâm canh bán thâm canh (Dinh et al., 2007) với suất nuôi đạt bình quân 0,8 tấn/ha mật độ thấp 6,4 tấn/ha mật độ nuôi cao (Trương Hoàng Minh Nguyễn Thanh Phương, 2011) 2.2.2 Tình hình nuôi cá bống kèo nƣớc Cá bống kèo đối tượng thủy sản tỉnh vùng ven biển ĐBSCL quan tâm phát triển nuôi năm gần Cá bống kèo (Pseudapoccryptes elongatus) loài cá địa, đối tượng nuôi mới, diện tích nuôi đối tượng không đáng kể, năm đầu 2000 diện tích nuôi dối tượng vài ha, nhiên vào năm 2011, 2012 diện tích nuôi đối tượng tăng 105 Cà Mau (Sở Nông nghiệp & PTNT tỉnh Cà Mau, 2013) 445 tỉnh Bạc Liêu (Sở Nông nghiệp & PTNT tỉnh Bạc Liêu, 2013), diện tích nuôi cá bống kèo tỉnh Bạc Liêu tập trung 03 huyện trọng điểm thành phố Bạc Liêu, huyện Hòa Bình huyện Đông Hải Theo Trung tâm Khuyến nông – khuyến ngư Bạc Liêu (2013) cá bống kèo nuôi quy mô thâm canh với diện tích ao nuôi từ 3.000 m2 đến 5.000 m2 Mật độ thả giống cao, trung bình thả nuôi 100 con/m2, thời gian nuôi từ – tháng cá đạt trung bình từ 40 – 50 con/kg, suất ước đạt từ 10 – 15 tấn/ha, số hộ nuôi đạt suất 20 tấn/ha, lợi nhuận bình quân từ 100 triệu – 150 triệu đồng/ha Công trình phục vụ cho trình nuôi đối tượng đơn giản, người nuôi tốn công chăm sóc, chủ yếu tập trung chủ yếu giai đoạn cải tạo ao xử lý nước đầu vụ nuôi suốt thời gian nuôi, người nuôi hoạt động thay nước ao, cung cấp thêm nước cần thiết cho cá ăn liên tục ngày Chính hoạt động góp phần làm cho môi trường ao nuôi ngày xấu chất cặn bã tích tụ đáy ao nguyên nhân gây bệnh cá ảnh hưởng đến suất nuôi lợi nhuận người sản xuất 2.3 Tình hình xuất bệnh cá bống kèo Do tốc độ phát triển nghề nuôi cá bống kèo phát triển nhanh chóng, cá nuôi hình thức công nghiệp – bán công nghiệp với mật độ nuôi cao, lên đến 100 con/m2 (Trung tâm Khuyến nông – khuyến ngư Bạc Liêu, 2013), kỹ thuật nuôi đối tượng chưa hoàn chỉnh, người dân chưa trang bị đầy đủ kiến thức phương pháp quản lý, chăm sóc phòng trị bệnh cá nuôi Cá bống kèo nuôi điều kiện ao nuôi không thay nước, lượng thức ăn cung cấp liên tục ngày tạo lượng thức ăn dư thừa tích tụ đáy ao, quản lý môi trường ao nuôi người dân sử dụng loại vi sinh cải thiện điều kiện sống cá nuôi, kết hợp yếu tố làm cho chất lượng môi trường nuôi ngày bị ô nhiễm ảnh hưởng đến sức khỏe cá, tạo điều kiện cho mầm bệnh bộc phát Mô hình nuôi cá bống kèo thương phẩm mô hình nuôi mới, diện tích nuôi mô hình nhỏ so với tổng diện tích nuôi thủy sản tỉnh Cà Mau, Bạc Liêu Sóc Trăng, nên số liệu thống kê diện tích cá bị thiệt hại tỷ lệ thiệt hại thức từ quan chức năng, năm 2007, 2008 2009 năm mà nghề nuôi cá bống kèo tỉnh Bạc Liêu tỉnh lân cận Sóc Trăng Cà Mau gặp nhiều khó khăn phát sinh dịch bệnh, cá bị chết hàng loạt có ao tỷ lệ chết lên đến 90%, cá biệt có ao tỷ lệ cá chết “trắng”, ngày người nuôi vớt từ 200 – 300 cá bống kèo chết ao với dấu hiệu thường thấy xuất huyết, chướng bụng, nổ mắt lở loét (http://vasep.com.vn) 2.4 Bệnh xuất huyết cá 2.4.1 Dấu hiệu bệnh lý Cá bệnh xuất huyết có dấu hiệu bệnh lý xuất huyết mảng đỏ thể, xuất huyết khắp da cá, tập trung nhiều gốc vây đuôi, hậu môn bị viêm xuất huyết Hoại tử đuôi, vây, xuất vết thương lưng, mắt lồi, mờ đục phù Bụng sưng to, xoang bụng chứa dịch, nội tạng hoại tử, thận tỳ tạng sưng to (Từ Thanh Dung ctv., 2005) Kết nghiên cứu cá điêu hồng bị bệnh xuất huyết cho thấy, cá bệnh có dấu hiệu bệnh lý bơi lờ đờ, hoạt động chậm chạp, linh hoạt, bơi lội phương hướng, mắt lồi đục, thân có đốm xuất huyết vây ngực vây bụng, mang tái nhạt, bụng trương to, xoang bụng có chứa dịch màu vàng, nội tạng bị xuất huyết, mềm nhũn (Đặng Thị Hoàng Oanh Nguyễn Thanh Phương, 2012) Kết tương tự nghiên cứu số loài cá bị bệnh xuất huyết cá tầm (Wunging Aihua Li, 2009), cá đối (Qi et al., 2013) cá rô phi (Phạm Hồng Quân ctv., 2013) 2.4.2 Đặc điểm mô bệnh học Kết nghiên cứu Trương Đình Hoài ctv (2012) cá rô phi (Oreochromis niloticus) bị bệnh xuất huyết cho thấy, mang cá xuất huyết, phù nề tăng sinh biểu mô Mô não bị sung huyết, viêm thoái hóa nhu mô não Mô thận cá xuất nhiều vùng bị sung huyết, tụ huyết thoái hóa, ống thận bị hoại tử cấu trúc Mô gan cá xuất nhiều tế bào đại thực bào, đảo tụy tăng sinh, xuất nhiều vùng sung huyết, tụ máu, thoái hóa giảm số lượng tế bào gan Ở mô ruột cá bị sung huyết, xuất huyết, thoái hóa nội mạc Tương tự nghiên cứu cá điêu hồng (Oreochromis spp.) bị bệnh xuất huyết cho thấy có biến đổi mô học bị xuất huyết, có chất dịch tế bào da Gan, tụy thận sưng to có tượng sung huyết, xuất huyết (Đặng Thị Hoàng Oanh Nguyễn Thanh Phương, 2012) Những biến đổi mô mang cá bệnh xuất huyết sợi mang bị dính lại, phình to cấu trúc mang cản trở hô hấp tình trạng bệnh nặng gây chết cá (Đặng Thụy Mai Thy Đặng Thị Hoàng Oanh, 2011; Trương Đình Hoài ctv., 2014) Kết nghiên cứu Đặng Thụy Mai Thy ctv (2012) cho thấy mô thận cá rô (Anabas testudineus) bệnh xuất huyết bị sung huyết, xuất huyết gây hoại tử, ống thận bị xơ hóa, quản cầu thận bị biến đổi cấu trúc ảnh hưởng đến chức hoạt động thận Ở cá bệnh xuất huyết, quan sát mô gan kết cho thấy gan cá bị sung huyết, xuất huyết gây hoại tử Mô gan bị nhiễm khuẩn, xuất không bào lipid to bất thường, tế bào lympho tế bào hồng cầu diện nhiều dẫn đến vùng mô bị xơ hóa nhẹ nặng hình thành u nang vôi hóa cuối gây hoại tử (John Patricia, 2007) 2.4.3 Đặc điểm huyết học Tế bào hồng cầu có dạng hình oval hay elip nhân hình tròn Số lượng hồng cầu cá nước mặn dao động từ 0,9 - triệu tế bào hồng cầu/ml Số lượng tế bào hồng cầu thể cá bị ảnh hưởng nhiều nguyên nhân tập tính sống loài, cá sống tầng mặt có số lượng hồng cầu thấp so với loài cá sống tầng tầng đáy; cá đực có số lượng hồng cầu cao cái, số lượng hồng cầu phụ thuộc vào chất lượng thức ăn thể cá bị nhiễm bệnh làm thay đổi đáng kể số lượng hồng cầu thể cá (Phạm Tân Tiến, 2010) Bạch cầu thành phần hệ thống miễn dịch, với chức bảo vệ giúp thể chống lại tác nhân ảnh hưởng yếu tố bên bên môi trường sống Quá trình tạo bạch cầu thể đáp ứng cho việc bảo vệ thể suốt thời kỳ thể gặp tình trạng sốc nhiễm bệnh Bạch cầu tế bào máu có nhân, kích thước khác tùy thuộc vào loại bạch cầu Các loại bạch cầu thường tìm thấy gồm tế bào lympho, bạch cầu đơn nhân, bạch cầu trung tính tiểu cầu (Mostafa et al., 2000) Bạch cầu đơn nhân tế bào bạch cầu tham gia vào hệ thống miễn dịch không đặc hiệu với vai trò thực bào, tiêu diệt kháng nguyên đặc biệt khả trình diện kháng nguyên để thực bước khởi đầu trình đáp ứng miễn dịch đặc hiệu Bạch cầu trung tính có khả thực bào vật có kích thước nhỏ vi khuẩn có khả di chuyển xuyên qua mao mạch có chuyển động định hướng đến nơi bị viêm nhiễm, nơi bị viêm có bạch cầu tập trung nhiều (Phạm Tân Tiến, 2010) Sự gia tăng tỉ lệ số lượng bạch cầu trung tính cho thấy hoạt động hệ bạch huyết gia tăng để tiêu diệt vi sinh vật lạ xâm nhập vào thể (Ellis, 1988) Các tế bào lympho tế bào có khả miễn dịch Các bạch cầu không hạt sản xuất kháng thể β-globulin γ-globulin, kháng thể chống vi trùng mạnh Tế bào lympho sinh loại kháng thể để chống lại kẻ thù (Phạm Tân Tiến, 2010) Chức tiểu cầu giải phóng chất thromboplastin để gây đông máu, đặc biệt tình trạng viêm nhiễm Tiểu cầu có đặc tính kết dính nhờ mà góp phần đóng miệng vết thương Ngoài tiểu cầu tham gia vào trình đáp ứng miễn dịch (Houston, 1990; Chinabut ctv., 1991) Các tiêu huyết học cá bị bệnh xuất huyết có thay đổi đáng kể số lượng tế bào hồng cầu giảm bị vi khuẩn phá hủy, số lượng tế bào bạch cầu tăng đáng kể (Martins et al., 2008), số lượng bạch cầu trung tính cá bệnh tăng cao (Pathiratne Rajapakshe, 1998) diện tiểu cầu gia tăng tế bào lympho nhằm tăng cường chế phòng vệ cá bị nhiễm bệnh (Martins et al., 2008) 2.5 Tổng quan đặc điểm vi khuẩn gây bệnh cá 2.5.1 Bệnh vi khuẩn Vibrio Theo Austin (2010), Vibrio thuộc họ Vibrionaceae, vi khuẩn Gram (-), có dạng hình que, chuyển động nhờ tiên mao, phản ứng oxydase catalase dương tính, có khả oxy hóa lên men môi trường O/F Kích thước tế bào 0,3 - 0,5 x 1,4 - 2,6µm Hầu hết Vibrio spp phân bố môi trường nước mặn, thích hợp 20 - 40‰, có loài phát triển độ mặn 70‰, nên Vibrio mối đe dọa cho nghề nuôi động vật thủy sản Vi khuẩn Vibrio phân lập phương pháp vi sinh vật học môi trường nuôi cấy chọn lọc TCBS, môi trường này, vi khuẩn Vibrio phát triển nhanh, sau 15-18 giờ, nhiệt độ 30-35oC khuẩn lạc Virio lớn phân biệt rõ ràng môi trường nuôi cấy (Đỗ Thị Hòa ctv., 2004) Bảng 2.1 Đặc điểm sinh hóa số loài vi khuẩn Vibrio (Inglis et al., 1994) Đặc điểm sinh hóa Phát triển nhiệt độ 4oC Phát triển nhiệt độ 37oC Phát triển 0%NaCl Phát triển 3%NaCl Phát triển 7%NaCl Nhạy cảm 0/129 (10µg) Phát triển TCBS Β- galactosidase Arginine dihydrolase Lysine decarboxylase Orinithine decarboxylase Phản ứng citrate Sinh H2S Phản ứng urease Indole Voges – Proskauer Thủy phân gelatin Axit hóa glucose Axit hóa mannitol Axit hóa inositol Axit hóa sorbitol Axit hóa sucrose Axit hóa arabinose + + S Y + + + + + + + + + + + + S + + + + - + + S O + D - + + + S Y + + + + + + + + + - + + S G + + + + + - + + + R Y + + D + + + + + + - Ghi chú: V anguillarum; V ordalii; V salmonicida; V.cholerae; V vulnificus; V alginolyticus G: màu xanh; Y: màu vàng; D: có phản ứng; O: Cá bị nhiễm khuẩn Vibrio spp thường có dấu hiệu điển xuất huyết vây mắt lồi, mờ đục giác mạc Cá lờ đờ biếng ăn, mang có màu nhợt nhạt thiếu máu nặng (Toranzo et al., 2005) Trong họ Vibrionaceae, loài vi khuẩn gây bệnh nghiêm trọng cá biển V anguillarum, V ordalii, V salmonicida Vi khuẩn V anguillarum phân bố rộng rãi môi trường, chúng gây nhiễm trùng huyết điển hình bệnh xuất huyết loài cá nước ấm lạnh có kinh tế quan trọng, bao gồm cá hồi Thái Bình Dương Đại Tây Dương (Oncorhynchus spp Salmo salar), cá hồi vân (Oncorhynchus mykiss), cá bơn (Scophthalmus maximus), cá chẽm (Dicentrarchus labrax), cá tráp (Sparus aurata), cá vược (Morone saxatilis), cá tuyết (Gadus morhua), cá chình Nhật Bản Châu Âu (Anguilla japonica Anguilla anguilla), cá Ayu (Plecoglossus altivelis) (Toranzo Barja, 1993; Actis et al., 1999) Vibrio gây thiệt hại mô hình nuôi tôm công nghiệp Philippin, Ấn Độ Indonesia (Austin, 2010) 2.5.2 Bệnh vi khuẩn Pseudomonas Vi khuẩn Pseudomonas thuộc họ Pseudomonadeceae, Gram (-), có dạng hình que, không sinh bào tử, kích thước tế bào khoảng 0,5 – 1,0 x 1,5 – 5,0 µm, chuyển động nhờ tiên mao Pseudomonas phát triển môi trường đơn giản hiếu khí Đa số loài Pseudomonas có phản ứng oxy hóa, số phản ứng oxy hóa không lên men môi trường O/F Giới hạn nhiệt độ phát triển rộng từ – 43oC Chúng phân bố rộng khắp môi trường, đất nước, chúng gây bệnh cho người, động vật thực vật Pseudomonas thường gây bệnh xuất huyết cá, gây bệnh chủ yếu cá nước Tác nhân gây bệnh cá gồm số loài: P fluorescens, P chlororaphis, P anguilliseptica, P dermoalba, P putida (Inglis et al., 1994) Bảng 2.2 Đặc điểm sinh hóa số loài Pseudomonas (Buller, 2004) Chỉ tiêu Gram Di động Phát triển 37oC Oxidase Catalase Lysine decarboxylase Arginine dihydrolase Indole Voges - Proskauer Thủy phân aesculin Thủy phân gelatin O/F Arabinose Glucose Inositol Lactose Mannitol Sorbitol Sucrose Trehalose P anguilliseptica + + + + + P chlororaphis + + + v + v + O + + + + + P fluorescens + + + + + O + + v + v v v P putida + + + + O + + + + - Ghi chú: (+) phản ứng dương; (-) phản ứng âm.v: phản ứng xảy chậm Trong số loài Pseudomonas phát từ cá bệnh gồm: P chlororaphis, P anguilliseptica, P fluorescens, P putida, P plecoglossicida, vi khuẩn P anguilliseptica coi tác nhân gây bệnh nguy hiểm cho cá nuôi (Toranzo Barja, 1993; Austin Austin, 1999) P anguilliseptica gây tỉ lệ chết cao ao nuôi lươn Nhật Bản (Wakabayashi Egusa, 1972) Sau trại lươn Châu Âu, Đài Loan, Scotland Đan Mạch (Stewart et al., 1983) Vi khuẩn phân lập từ loài cá khác cá tráp đen cá Ayu Nhật Bản (Nakai et 10 Query 481 Sbjct 926 Query 541 Sbjct 866 Query 601 Sbjct 806 Query 661 Sbjct 746 Query 721 Sbjct 686 Query 781 Sbjct 626 Query 841 Sbjct 566 Query 901 Sbjct 506 Query 961 Sbjct 446 TTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAG 540 TTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTCCGGCACTAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTTCAACCTTGCGGTCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTCCGGCACTAA 600 GCCCCGGAAAGGGCCTAACACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GCCCCGGAAAGGGCCTAACACCTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATC 660 TAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGAGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGC 720 TTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAATTCCAC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTTCGCCACCGGTGTTCCTCCATATATCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAATTCCAC 780 TCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTCTCCAGTTTCCAAAGCGTACAATGGTTGAGCCACTGCC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TCTCCCCTTCTGCACTCAAGTTCTCCAGTTTCCAAAGCGTACAATGGTTGAGCCACTGCC 840 TTTAACTTCAGACTTAAAGAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAAC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTTAACTTCAGACTTAAAGAACCGCCTGCGCTCGCTTTACGCCCAATAAATCCGGACAAC GCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGTTA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GCTCGGGACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTCCCTTTCTGGTTA GTTACCGTCACA |||||||||||| GTTACCGTCACA 867 807 747 687 627 567 900 507 960 447 972 435 Vi khuẩn B6-9TT Kết giải trình tự gen 16S AAGTAGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTA ACGCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCG CATGACAATGGAGGACTCATGTCTTTCATTTAAAAGGTGCAATTGCATCACTATGAGATG GACCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGC CGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGA GGCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAG TGAAGAAGGTTTTCGAATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGG AAAATCCACCATGTGACGGTAACTAACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGC CGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAG GCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAGGCAGTGGCTCAACCATTGTACGCTTTGGAAACTG GAGAACTTGAGTGCAGAAGGGGAGAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGA TATATGGAGGAACACCGGTGGCGAAAGCGGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTC GAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAG TGCTAGGTGTTAGGCCCTTTCCGGGGCTTAGTGCCGGAGCTAACGCATTAAGCACTCCGC CTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCG GTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTC CTGACCGGTCTAGAGATAGGCTTTCCCTTCGGGGCAGGAGTGACAGG 136 Streptococcus dysgalactiae subsp dysgalactiae strain TSOD1 16S ribosomal RNA gene, partial sequence Sequence ID: gb|KM077497.1|Length: 1426Number of Matches: Range 1: to 1005GenBankGraphicsNext MatchPrevious Match Alig nment stati sti cs fo r matc h #1 Score Expect Identities Gaps Strand 1836 bits(994) 0.0 996/997(99%) 0/997(0%) Plus/Plus Query Sbjct Query 61 Sbjct 69 Query 121 Sbjct 129 Query 181 Sbjct 189 Query 241 Sbjct 249 Query 301 Sbjct 309 Query 361 Sbjct 369 Query 421 Sbjct 429 Query 481 Sbjct 489 Query 541 Sbjct 549 Query 601 Sbjct 609 Query 661 Sbjct 669 Query 721 Sbjct 729 Query 781 Sbjct 789 Query 841 Sbjct 849 AAGTAGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AAGTAGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAA 60 CGCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CGCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCA 120 TGACAATGGAGGACTCATGTCTTTCATTTAAAAGGTGCAATTGCATCACTATGAGATGGA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TGACAATGGAGGACTCATGTCTTTCATTTAAAAGGTGCAATTGCATCACTATGAGATGGA 180 CCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCG 240 ACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGC 68 128 188 248 300 308 AGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAA 360 GAAGGTTTTCGAATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAAT ||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAAT 420 CCACCATGTGACGGTAACTAACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCACCATGTGACGGTAACTAACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGT 480 AATACGTAGGTCCCGAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AATACGTAGGTCCCGAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTC 540 TTTAAGTCTGAAGTTAAAGGCAGTGGCTCAACCATTGTACGCTTTGGAAACTGGAGAACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTTAAGTCTGAAGTTAAAGGCAGTGGCTCAACCATTGTACGCTTTGGAAACTGGAGAACT 600 TGAGTGCAGAAGGGGAGAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TGAGTGCAGAAGGGGAGAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGA 660 GGAACACCGGTGGCGAAAGCGGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCGT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GGAACACCGGTGGCGAAAGCGGCTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGCGT 720 GGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAGGTG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAGGTG 780 TTAGGCCCTTTCCGGGGCTTAGTGCCGGAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTAGGCCCTTTCCGGGGCTTAGTGCCGGAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGT 840 ACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATG 900 137 368 428 488 548 608 668 728 788 848 908 Query 901 Sbjct 909 Query 961 Sbjct 969 TGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCCTGACCGGTC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCCTGACCGGTC TAGAGATAGGCTTTCCCTTCGGGGCAGGAGTGACAGG ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TAGAGATAGGCTTTCCCTTCGGGGCAGGAGTGACAGG 960 968 997 1005 Vi khuẩn A1F1 Kết giải trình tự gen 16S TAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATCAAGTA GAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGTGTGAGTAAC GCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACC GCATAAAAGTGTTTAACCCATGTTAAACATTTAACAGGTGCAACTGCATCACTATG AGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACG ATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCA GACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGACC GAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTCTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGAG AAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAAATAACCAGAAAGG GACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGGGGTAATACGTAGGTCCCGAGCTTTGTCCG GATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAGGCA GTGGCT CAAC Streptococcus dysgalactiae 16S ribosomal RNA, partial sequence Sequence ID: gb|AF433167.1|AF433167Length: 1466Number of Matches: Score Expect Identities Gaps Strand 1099 bits(595) 0.0 607/613(99%) 0/613(0%) Plus/Plus Query 12 Sbjct Query 72 Sbjct 61 Query 132 Sbjct 121 Query 192 Sbjct 181 Query 252 Sbjct 241 Query 312 Sbjct 301 Query 372 Sbjct 361 Query 432 Sbjct 421 Query 492 Sbjct 481 CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT 71 GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGTGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC |||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||| GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC 131 ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG 191 TTAAACATTTAACAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG |||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG 251 TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC 311 CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG 371 CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTCTCGGATCGTAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||| CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA 431 AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAAAT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| | AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT 491 AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGGGGTAATACGTAGGTCCCGAGCT ||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||| AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCG 138 60 120 180 240 300 360 420 480 551 540 Query 552 Sbjct 541 Query 612 Sbjct 601 TTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAG GCAGTGGCTCAAC ||||||||||||| GCAGTGGCTCAAC 611 600 624 613 Vi khuẩn A1F2 Kết giải trình tự gen 16S TAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGT AGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTTA CGCGTAGGTAACCTACCTCATACCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATAC CGCATAGAAGTGTTTAACCCATGTTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTAT GAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGAC GATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCC AGACT CCTACGGGAG GCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGAC CGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGA GAAG AATGAAGGTG GGATTGGAAA ATCCACCATG TGACGGTAACTTACCAGAAA GGGAGGGCTA ACTACGTGCC AGCAACCGCG GTTATACGTA GGTCCC Streptococcus dysgalactiae 16S ribosomal RNA, partial sequence Sequence ID: gb|AF433167.1|AF433167Length: 1466Number of Matches: Score Expect Identities Gaps Strand 939 bits(508) 0.0 526/535(98%) 0/535(0%) Plus/Plus Query 12 Sbjct Query 72 Sbjct 61 Query 132 Sbjct 121 Query 192 Sbjct 181 Query 252 Sbjct 241 Query 312 Sbjct 301 Query 372 Sbjct 361 Query 432 Sbjct 421 Query 492 Sbjct 481 CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTTACGCGTAGGTAACCTACCTC ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||||||| GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC 71 60 131 120 ATACCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAGAAGTGTTTAACCCATG ||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||| ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG 191 TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG 251 TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC 311 CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG 371 CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA 431 AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGAAGGTGGGATTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT |||||||||||||||||||||||| ||||||| ||||||||||||||||||||||||||| AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT 491 TACCAGAAAGGGAGGGCTAACTACGTGCCAGCAACCGCGGTTATACGTAGGTCCC |||||||||||| ||||||||||||||||||| ||||||| ||||||||||||| AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCC 139 546 535 180 240 300 360 420 480 Vi khuẩn A1F4 Kết giải trình tự gen 16S TAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGT AGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTA ACGCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATA CCGCATAAAAGTGTTTAACCAATGTTTAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTAT GAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGAC GATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCC AGACTCCTACGGAAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGAC CGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGA GAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACTAACCAGAAAG GGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCGGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCGTTGTCC GGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAGG Streptococcus dysgalactiae 16S ribosomal RNA, partial sequence Sequence ID: gb|AF433167.1|AF433167Length: 1466Number of Matches: Score Expect Identities Gaps Strand 1088 bits(589) 0.0 597/601(99%) 0/601(0%) Plus/Plus Query 12 Sbjct Query 72 Sbjct 61 Query 132 Sbjct 121 Query 192 Sbjct 181 Query 252 Sbjct 241 Query 312 Sbjct 301 Query 372 Sbjct 361 Query 432 Sbjct 421 Query 492 Sbjct 481 Query 552 Sbjct 541 Query 612 Sbjct 601 CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT 71 GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC 131 ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCAATG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||| ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG 191 TTTAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG || ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG 60 120 180 251 240 TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC 311 CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGAAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG |||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||||| CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG 371 CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA 431 AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT 491 AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCGGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCG ||||||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||||||||||| AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCG 551 TTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAG 611 G | G 612 601 140 300 360 420 480 540 600 Vi khuẩn A1F6 Kết giải trình tự gen 16S CATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAAC CCATGTTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGT ATTAGCTAGTTAGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGA GAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCA GCAGTAGGGAATCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGTGTGAGT GAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGT GGAAAATCCACCATGTGACGGTAACTAACCAGAAAGGGACAGCTAACTACGTGCC AGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAG CGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAAGGCAGTGGCTCAACCATTGTAC GCTCTGGAAACTGGAGAACTTGAGTGCAGAAGGAGAGAGTGGAATTCCATGTGTA GCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAGGAACACCGGTGGCGAAA GC Streptococcus dysgalactiae 16S ribosomal RNA, partial sequence Sequence ID: gb|AF433167.1|AF433167Length: 1466Number of Matches: Score Expect Identities Gaps Strand 1085 bits(587) 0.0 597/602(99%) 0/602(0%) Plus/Plus Query Sbjct 120 Query 61 Sbjct 180 Query 121 Sbjct 240 Query 181 Sbjct 300 Query 241 Sbjct 360 Query 301 Sbjct 420 Query 361 Sbjct 480 Query 421 Sbjct 540 Query 481 Sbjct 600 Query 541 Sbjct 660 Query 601 Sbjct 720 CATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCAT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCAT 60 GTTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GTTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTA 120 GTTAGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGG ||| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGG 180 CCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCG 240 GCAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGTGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTA |||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||| GCAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTA 300 AAGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAAC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AAGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAAC 360 TAACCAGAAAGGGACAGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGC ||||||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TAACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGC 179 239 299 359 419 479 420 539 GTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTCTTTAAGTCTGAAGTTAAA 480 GGCAGTGGCTCAACCATTGTACGCTCTGGAAACTGGAGAACTTGAGTGCAGAAGGAGAGA ||||||||||||||||||||||||| ||||||||||||||||||||||||||||| |||| GGCAGTGGCTCAACCATTGTACGCTTTGGAAACTGGAGAACTTGAGTGCAGAAGGGGAGA 540 GTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAGGAACACCGGTGGCGAAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAGGAACACCGGTGGCGAAA 600 GC || GC 602 721 141 599 659 719 Vi khuẩn A1F9 Kết giải trình tự gen 16S TAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGT AGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTA ACGCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATA CCGCATAAAAGTGTTTAACCCATGTTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTA TGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGA CGAAACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCC CAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGATTCTTCGGCAATGGACGGAAGTCTGAC CGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGA GAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACTAACCAGAAAG GGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCGTTGTCC GGA TTTATTGGGC GTAAA Streptococcus dysgalactiae 16S ribosomal RNA, partial sequence Sequence ID: gb|AF433167.1|AF433167Length: 1466Number of Matches: Score Expect Identities Gaps Strand 1031 bits(558) 0.0 562/564(99%) 0/564(0%) Plus/Plus Query 12 Sbjct Query 72 Sbjct 61 Query 132 Sbjct 121 Query 192 Sbjct 181 Query 252 Sbjct 241 Query 312 Sbjct 301 Query 372 Sbjct 361 Query 432 Sbjct 421 Query 492 Sbjct 481 Query 552 Sbjct 541 CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT 71 GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC 131 ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG 191 TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG 251 TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGAAACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC ||||||||||||||||||||||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||| TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC 311 CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGATTCTTCGG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ||||||| CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCGG 371 CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CAATGGACGGAAGTCTGACCGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAA 431 AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AGCTCTGTTGTTAGAGAAGAATGATGGTGGGAGTGGAAAATCCACCATGTGACGGTAACT 491 AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| AACCAGAAAGGGACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTCCCGAGCG 551 TTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAA |||||||||||||||||||||||| TTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAA 575 564 142 60 120 180 240 300 360 420 480 540 10 Vi khuẩn A5F4 Kết giải trình tự gen 16S TAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGT AGAACGCTGAGGACTGGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGGACGGGTGAGTAC CGCGTAGGTAACCTACCTCATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATAC CGCATAAAAGTGTTTAACCCATGTTAAACATTTACAAGGTGCAACTGCATCACTAT GAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAGTTGGTGAAGTAACGGCTCACCAAGGTGAC GATACATAGCCGACCTGAGAGAGTGATCGGCCAAACTGGGACTGAAACACGGCCC AGCCT CCTAC Streptococcus dysgalactiae 16S ribosomal RNA, partial sequence Sequence ID: gb|AF433167.1|AF433167Length: 1466Number of Matches: Score Expect Identities Gaps Strand 568 bits(307) 3e-158 325/334(97%) 0/334(0%) Plus/Plus Query 12 Sbjct Query 72 Sbjct 61 Query 132 Sbjct 121 Query 192 Sbjct 181 Query 252 Sbjct 241 Query 312 Sbjct 301 CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| CCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTAGAACGCTGAGGACT 71 GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGGACGGGTGAGTACCGCGTAGGTAACCTACCTC |||||||||||||||||||||||||||| ||||||||||| ||||||||||||||||||| GGTGCTTGCACCGGTCCAAGGAGTTGCGAACGGGTGAGTAACGCGTAGGTAACCTACCTC 131 ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| ATAGCGGGGGATAACTATTGGAAACGATAGCTAATACCGCATAAAAGTGTTTAACCCATG 191 TTAAACATTTACAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG ||||||||||| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| TTAAACATTTAAAAGGTGCAACTGCATCACTATGAGATGGACCTGCGTTGTATTAGCTAG 251 TTGGTGAAGTAACGGCTCACCAAGGTGACGATACATAGCCGACCTGAGAGAGTGATCGGC ||||||| ||||||||||||||||| |||||||||||||||||||||||| ||||||||| TTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATACATAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGC 311 CAAACTGGGACTGAAACACGGCCCAGCCTCCTAC || ||||||||||| ||||||||||| ||||||| CACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTAC 143 345 334 60 120 180 240 300 Phụ lục C.5 Kết quan sát mẫu mô cá bống kèo Ao Cá ĐỢT 1 A1F1 A1F2 A1F3 A1F4 A1F5 A2F1 A2F2 A2F3 A2F4 A2F5 A2F6 A2F7 A2F8 A2F9 A2F10 A3F1 A3F2 A3F3 A3F4 A3F5 A3F6 A3F7 A3F8 A3F9 A3F10 A4F1 A4F2 A4F3 A4F4 A4F5 A4F6 A4F8 A4F9 A4F10 ĐỢT A6F1 A6F2 A6F3 A6F4 A6F6 A6F7 A6F8 Mang Gan Thận Sợi mang thứ cấp dính lại, biến đổi cấu trúc phiến mang, tăng sinh tế bào biểu mô, có tượng nhiễm khuẩn, động mạch vào sợi mang thứ cấp bị sung huyết Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to thoái hóa ngắn lại Sung huyết tĩnh mạch gan, biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô, quản cầu thận biến đổi cấu trúc, phình to teo nhỏ nhiễm khuẩn Sung huyết tĩnh mạch gan, biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô, quản cầu thận biến đổi cấu trúc, phình to teo nhỏ nhiễm khuẩn Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to thoái hóa ngắn lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô, quản cầu thận biến đổi cấu trúc, phình to teo nhỏ nhiễm khuẩn Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to thoái hóa ngắn lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô 144 A6F9 A6F10 A7F1 A7F2 A7F3 A7F4 A7F5 A7F6 A7F7 A7F8 A7F9 A7F10 A8F5 A9F4 ĐỢT A10-1 A10-2 A10-3 A10-6 A10-7 A10-10 A11-1 A11-3 A11-4 A11-5 A11-6 A11-7 A11-8 A11-9 A11-10 A12-1 A12-2 A12-3 A12-4 A12-6 A12-7 A12-8 A12-9 A12-10 ĐỢT B1-1 B1-2 B1-3 B1-4 Sợi mang thứ cấp dính lại, biến đổi cấu trúc phiến mang, tăng sinh tế bào biểu mô, có tượng nhiễm khuẩn, động mạch vào sợi mang thứ cấp bị sung huyết Sung huyết tĩnh mạch gan, biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô, quản cầu thận biến đổi cấu trúc, phình to teo nhỏ nhiễm khuẩn Sợi mang thứ cấp dính lại Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Sợi mang thứ cấp dính lại Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Biến đổi cấu trúc mô Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại, biến đổi cấu trúc phiến mang, tăng sinh tế bào biểu mô, có Sung huyết tĩnh mạch gan, biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô, quản cầu thận biến đổi cấu trúc, phình to teo 145 B1-5 B1-6 B1-7 B1-8 B1-9 B1-10 B2-1 B2-3 B2-4 B2-5 B2-6 B2-7 B2-8 B2-9 B2-10 B3-1 B3-2 B3-3 B3-4 B4-1 B4-2 B4-3 B4-4 B4-5 B4-6 B4-7 B5-1 B5-2 B5-3 B5-4 B5-5 B5-6 B5-7 B5-8 B5-9 B5-10 B6-3 B6-4 B6-5 B6-6 B6-9 B6-10 tượng nhiễm khuẩn, động mạch vào sợi mang thứ cấp bị sung huyết nhỏ nhiễm khuẩn Sợi mang thứ cấp dính lại Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to thoái hóa ngắn lại Biến đổi cấu trúc mô Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại, biến đổi cấu trúc phiến mang, tăng sinh tế bào biểu mô, có tượng nhiễm khuẩn, động mạch vào sợi mang thứ cấp bị sung huyết Sung huyết tĩnh mạch gan, biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô, quản cầu thận biến đổi cấu trúc, phình to teo nhỏ nhiễm khuẩn Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Sợi mang thứ cấp dính lại, sợi mang thứ cấp phình to Biến đổi cấu trúc mô Sung huyết xuất huyết vùng mô Ký hiệu: A: ao cá bệnh, F: cá; T: Thận, G: gan; TT: tỳ tạng ; K: ao cá khỏe 146 Phụ lục C.6 Kết thí nghiệm cảm nhiễm Ngày Tổng cá chết Tỷ lệ (%) Đối chứng L1 L2 L3 B1-6T L1 L2 L3 B2-3TT L1 L2 L3 B2 L1 L 10 10 10 10 10 10 10 1 1 1 1 1 1 1 13,3 2 2 2 7 0 23 76,7 147 10 0 0 7 10 0 22 73,3 10 0 8 0 9 86 Phụ lục C.7 Kết thí nghiệm LD50 Số liệu cá thí nghiệm LD50 với chủng vi khuẩn B1-6T Ngiệm thức Ngiệm thức L1 L2 L3 20 0 7 7 7 7 20 9 9 9 20 0 7 7 7 Ngày 10 11 12 13 14 Tổng cá chết Tỷ lệ (%) L1 L2 20 11 13 13 13 13 13 13 13 13 Ngiệm thức L3 20 0 1 8 8 8 8 L1 L2 L3 20 0 11 12 13 13 13 13 13 13 13 20 9 9 9 9 20 0 8 8 8 8 20 8 8 8 8 Ngiệm thức L1 L2 20 13 14 16 16 16 16 16 16 16 16 Ngiệm thức L3 20 10 13 15 16 16 16 16 16 16 16 L1 20 0 10 11 12 12 12 12 12 12 12 L2 20 11 15 16 16 16 16 16 16 16 16 16 Ng L3 20 12 13 15 15 15 15 15 15 15 15 L1 20 10 13 15 16 16 16 16 16 16 16 16 23 29 30 44 47 38,3 48,3 50 73,3 78,3 20 10 14 17 18 18 18 18 18 18 18 18 Nghiệm thức 1: 4,25 x 102 CFU/ml; Nghiệm thức 2: 4,25 x 103 CFU/ml; Nghiệm thức 3: 4,25 x 104 CFU/ml; Nghiệm thức 4: 4,25 x 105 CFU/ml; Nghiệm thức 5: 4,25 x 106 CFU/ml; Nghiệm thức 6: 4,25 x 107 CFU/ml; Nghiệm thức 7: 4,25 x 108 CFU/ml; Nghiệm thức đối chứng: cá tiêm nước muối sinh lý Số liệu cá thí nghiệm LD50 với chủng vi khuẩn B2-5G Ngiệm thức Ngày 10 11 L1 L2 L3 20 0 11 12 12 12 12 20 0 9 9 20 0 8 8 8 Ngiệm thức L1 20 1 2 10 10 10 10 L2 20 12 13 13 13 13 L3 Ngiệm thức L1 L2 L3 20 1 11 11 11 11 11 20 2 12 14 14 14 14 20 10 11 12 13 13 13 13 13 20 0 10 12 12 12 12 148 Ngiệm thức L1 20 10 12 14 16 16 16 16 L2 20 0 10 11 13 13 13 L3 20 2 10 12 13 13 13 Ngiệm thức L1 20 0 8 9 10 11 14 15 L2 20 0 13 13 13 13 13 L3 20 12 14 15 15 15 15 15 Ngiệm L1 20 0 13 14 14 14 14 L 12 13 14 12 12 12 Tổng cá chết Tỷ lệ chết (%) 9 8 10 10 10 13 13 13 12 12 12 11 11 11 14 14 14 13 13 13 16 16 16 13 13 13 13 14 14 16 17 17 13 13 13 29 35 38 43 45 48,33 58,33 63,33 71,67 75 15 15 15 14 14 14 81 Nghiệm thức 1: 3,5 x 102 CFU/ml; Nghiệm thức 2: 3,5 x 103 CFU/ml; Nghiệm thức 3: 3,5 x 104 CFU/ml; Nghiệm thức 4: 3,5 x 105 CFU/ml; Nghiệm thức 5: 3,5 x 106 CFU/ml; Nghiệm thức 6: 3,5 x 107 CFU/ml; Nghiệm thức 7: 3,5 x 108 CFU/ml; Nghiệm thức đối chứng: cá tiêm nước muối sinh lý Phụ lục C.8 Kết thí nghiệm điều trị Ngày thí nghiệm NT1 NT2 NT3 NT4 NT5 3 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 1 0 1 2 4 2 4 2 3 3 3 1 1 2 2 4 1 1 1 2 0 0 0 0 1 2 1 0 0 0 0 1 10 1 0 0 0 0 11 0 0 0 0 0 12 0 0 0 0 0 13 0 0 0 0 1 14 0 0 0 0 0 0 15 0 0 0 0 0 0 0 16 0 0 0 0 0 0 0 17 0 0 0 0 0 0 0 18 0 0 0 0 0 0 19 0 0 0 0 0 0 0 20 0 0 0 0 0 0 0 21 0 0 0 0 0 0 0 10 11 10 9 10 10 10 21 23 23 20 19 20 21 21 22 21 20 20 21 20 22 7 33,33 36,67 33,33 30 30 26,67 30 33,33 33,33 30 33,33 26,67 70 76,67 76,67 Tổng cộng cá chết Số cá lại Tỉ lệ cá chết % 149 Tỉ lệ cá sống (%) 66,67 63,33 66,67 70 70 73,33 70 66,67 66,67 70 66,67 73,33 30 23,33 23,33 NT1: cá gây cảm nhiễm cho ăn thức ăn trộn kháng sinh DO nguyên liệu từ ngày thứ NT2: cá gây cảm nhiễm cho ăn thức ăn trộn kháng sinh DO thành phẩm từ ngày thứ NT3: cá gây cảm nhiễm cho ăn thức ăn trộn kháng sinh FFC nguyên liệu từ ngày th NT4: cá gây cảm nhiễm cho ăn thức ăn trộn kháng sinh FFC thành phẩm từ ngày th NT5: cá gây cảm nhiễm cho ăn thức ăn không trộn thuốc NT6: cá tiêm nước muối sinh lý cho ăn thức ăn không trộn thuốc NT7: cá không gây cảm nhiễm, không tiêm nước muối sinh lý cho ăn thức ăn khôn 150 [...]... ESC) trên cá nheo Mỹ với tỷ lệ hao hụt rất cao (Austin và Austin, 1993) Hiện nay, hầu như chưa có công trình nghiên cứu nào ở nước ngoài về bệnh trên cá bống kèo, đặc biệt là bệnh xuất huyết được công bố Tuy nhiên, đã có nhiều công trình nghiên cứu về bệnh xuất huyết trên các đối tượng nuôi thủy sản như cá chép, cá nheo mỹ, cá tra, cá rô phi, cá điêu hồng hay lươn đồng Tác nhân gây bệnh chủ yếu gây bệnh. .. Feltham, 1993) Vi khuẩn A salmonicida gây ra bệnh xuất huyết, bệnh lở loét trên một số loài cá và bệnh Furunculosis ở cá hồi Cá bệnh thường có dấu hiệu chậm chạp, kém ăn, thường bơi trên tầng nước mặt, hô hấp khó khăn, trên thân có các vùng áp xe sâu, xuất huyết trên da và ở các gốc vây, mắt cá bệnh thường bị lồi Bệnh có nguy cơ lây nhiễm rất cao, theo nhiều con đường khác nhau, nếu vi khuẩn tồn tại... năng khử nitrate 13 Vi khuẩn Aeromonas có khả năng vận động, là tác nhân gây bệnh nhiễm trùng máu, xuất huyết Cá bị bệnh thường kém ăn hoặc bỏ ăn, nổi lờ đờ trên tầng mặt Da cá thường đổi màu tối không có ánh bạc, cá mất nhớt, khô ráp, rụng vẩy để lộ da bị xuất huyết Các đốm xuất huyết màu đỏ xuất hiện trên thân, các gốc vây, quanh miệng, râu xuất huyết hoặc bạc trắng Có thể xuất hiện các vết loét ăn sâu... liên cầu khuẩn ở con người được xác định trong số các bệnh nhân tại một bệnh vi n ở Ontario (Weinstein et al., 1996) S iniae, một tác nhân gây bệnh trên cá lại là nguyên nhân gây ra bệnh ở con người (Eldar et al., 1994; Eldar et al., 1995; Perera et al., 1995) được phân lập từ cả bốn bệnh nhân trên Tất cả bệnh nhân đều có nguồn gốc Trung Quốc và có liên quan đến cá sống, ba trong số các loài cá liên... khi đó vi khuẩn Lactococcus garvieae phát triển trong môi trường THCR với khuẩn lạc màu trắng hoặc màu cam nhạt Môi trường TH-CR có thể sử dụng để phân lập vi khuẩn từ cá bệnh và nhận dạng khuẩn lạc để chẩn đoán vi khuẩn S dysgalactiae nhóm C gây bệnh trên cá (Abdelsalm et al., 2009) 2.8 Chẩn đoán bệnh xuất huyết ở cá Các phương pháp nuôi cấy truyền thống dùng trong chẩn đoán bệnh vi khuẩn ở cá khi... về sự kháng thuốc của vi khuẩn gây bệnh xuất huyết trên cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) của Từ Thanh Dung (2012) cho thấy, đa số vi khuẩn gây bệnh xuất huyết cá tra (hơn 87% số chủng vi khuẩn) nhóm vi khuẩn Aeromonas spp nhạy với florfenicol Hơn 81% số chủng vi khuẩn Aeromonas spp nhạy với doxycycline So với doxycycline, tetracycline đã giảm tác dụng chỉ còn 58% số chủng vi khuẩn nhạy Cũng qua kết... Trong số các liên cầu khuẩn gây bệnh trên cá, L garvieae, S iniae và S parauberis có thể được coi là tác nhân chính gây bệnh ở cá biển L garvieae lây nhiễm trên các loài cá nước mặn như cá chỉ vàng tại Nhật Bản và các loài nước ngọt như cá hồi vân chủ yếu ở Ý, Tây Ban Nha, Pháp, Anh và Úc (Bercovier et al., 1997) Gần đây, một trường hợp gây nhiễm của L garvieae cũng đã được phát hiện ở loài cá biển... 16 Các chủng vi khuẩn gây bệnh này được phân chia làm 3 nhóm dựa vào đặc điểm dung huyết: dung huyết α, dung huyết β và dung huyết γ (Baya et al., 1990) Ngày nay, người ta chia những vi khuẩn này thành hai nhóm dựa vào độc lực của vi khuẩn theo nhiệt độ Trong đó, S parauberis, S iniae, S agalactiae được xem là tác nhân gây bệnh Streptococcosis cho các loài cá nước ấm ở nhiệt độ trên 15oC Các vi khuẩn. .. khuẩn gây bệnh ở vùng nước ấm được xem là những tác nhân có khả năng gây bệnh cho người (Toranzo et al., 2004) Khi nghiên cứu vi khuẩn gây bệnh xuất huyết ở cá rô phi nuôi (Oreochromis spp.) tại một số tỉnh miền Bắc Vi t Nam của Phạm Hồng Quân và ctv (2013) đã tiến hành thu được 60 mẫu cá bệnh có dấu hiệu xuất huyết, nhóm nghiên cứu đã phát hiện được có 52/60 mẫu cá bệnh do vi khuẩn S agalactiae gây. .. giảm các sợi fibrin trong các mao mạch (Bromage và Owen, 1999) Vi khuẩn S.iniae còn được xác định là tác nhân gây bệnh trên cá và động vật có vú, kể cả con người (Austin và Austin, 1999) 2.6.2 Bệnh do vi khuẩn Streptococcus agalactiae Vi khuẩn S agalactiae được gọi là Streptococcus nhóm B là một trong bốn bêta tán huyết liên cầu khuẩn Vi khuẩn thuộc nhóm Gram (+), không di động, sinh trưởng trong các