Đang tải... (xem toàn văn)
Bài thu hoạch của trường đại học tây nguyên thực hành lý sinh đã tính kết quả, chỉ cần thay kết quả theo công thức là ra....bài chuẩn theo sách thực hành của trường....................................................................................................................................................
Báo cáo thực hành lý sinh GVHD: Th.s Đặng Thị Thanh Hà Lớp CTYK15C Tổ : 11 Bi XC NH NNG LNG HOT HểA CA QU TRèNH CO BểP TIM CH TCH RI MC TIấU Sau nghiờn cu bi thc hnh ny, sinh viờn cú th: Xỏc nh c i tng nghiờn cu ca ng hc; Nm vng nng lng hot húa ca mt phn ng (mt quỏ trỡnh); Mụ t mi liờn quan gia hng s tc ca phn ng vi nhit ; Nm vng bn cht ca i lng Q10 v ý ngha ca nú; Thnh tho phng phỏp cụ lp tim ch v tớnh nng lng hot húa ca mt quỏ trỡnh sinh hc 1.1 Lí THUYT ng hc nghiờn cu tc ca phn ng (hay quỏ trỡnh) v s ph thuc ca nú vo cỏc yu t nh nhit , nng v s cú mt ca cht xỳc tỏc hoc c ch mt phn ng húa hc xy thỡ cỏc nguyờn t, phõn t ca cht tham gia phi thay i, sp xp li cu trỳc ca nú v hỡnh thnh nờn mt trt t cu trỳc mi sn phm ca phn ng Mun vy, nguyờn t hoc phõn t phi cú mt nng lng ti thiu vt qua hng ro lc y gia cỏc lp v in t liờn kt vi nhau, ú nng lng hot húa l nng lng ti thiu cn thit nguyờn t, phõn t cú th tham gia vo phn ng Theo Maxwell Boltzmann, s phõn b phõn t theo nng lng cú dng nh trờn hỡnh Gi s Ehh l nng lng ti thiu cn thit phõn t ca mt cht cú th tham gia vo mt loi phn ng thỡ ta thy ch nhng phõn t no cú nng Hỡnh 1-1 S phõn b phõn t theo nng lng E- nng lng; Ehh nng lng hot húa; N s phõn t; Ze ng thng song song vi trc tung lng bng hoc ln hn Ehh (l nhng phõn t cú nng lng nm bờn phi ng thng Ze) l cú kh nng tham gia vo phn ng to thnh sn phm Báo cáo thực hành lý sinh GVHD: Th.s Đặng Thị Thanh Hà Lớp CTYK15C Tổ : 11 Khi nhit thay i, lm thay i ng nng chuyn ng nhit ca cỏc phõn t Do ú tng nng lng ca cỏc phõn t cng thay i Chng hn nhit tng lờn (T > T1) thỡ nng lng ca cỏc phõn t tng lờn, phõn t cú nng lng bng hoc ln hn Ehh s nhiu hn, th hin ng cong phõn b Maxwell Boltzmann dch sang bờn phi, vy chỳng cú kh nng tham gia vo phn ng nhiu hn lm cho tc phn ng tng lờn lnK Mi liờn quan gia tc v phn ng v nhit c biu din qua phng trỡnh Arhenius ú: K tc ca phn ng; Enh nng lng hot húa; P yu t lp th; R hng s khớ; Z h s va Hỡnh 1-2 S ph thuc ca tc phn ng vo nhit chm; T nhit tuyt i th biu din s ph thuc ca lnK th vo i lng c th hin trờn hỡnh ny cú ý ngha quan trng, da vo nú chỳng ta cú th xỏc nh c giỏ tr nng lng hot húa ca mt quỏ trỡnh: Nng lng hot húa cũn cú th c xỏc nh thụng qua mt i lng khỏc, i lng Q10 i lng Q10 hay cũn c gi l h s Vant Hoff i lng ny l t s gia hai hng s tc ca phn ng iu kin chờnh lch 10 Censius (10oC) Trong ú: K1 hng s tc ca phn ng nhit ban u T1; K2 hng s tc ca phn ng nhit T2 = T1 +10; i lng Q10 cú ngha quan trng Nú cho bit hng s tc ca phn ng tng hay gim bao nhiờu ln nhit thay i 10 oC Biu thc toỏn hc th hin mi liờn quan gia nng lng hot húa ca quỏ trỡnh i lng Q10 nh sau: Ehh = 0,46.T1.T2.lgQ10 Báo cáo thực hành lý sinh GVHD: Th.s Đặng Thị Thanh Hà Lớp CTYK15C Tổ : 11 Trong thc nghim chỳng ta cú th xỏc nh i lng Q 10 v vy vic tớnh giỏ tr nng lng hot húa ca mt quỏ trỡnh (nht l quỏ trỡnh sinh hc) tr nờn d dng Mc ớch ca bi thc ny l xỏc nh nng lng hot húa ca quỏ trỡnh co búp tim ch tỏch ri 1.2 THC HNH 1.2.1 Dng c, húa cht v vt liu kộo to kộo chc ty khay m 10 inh ghim cc thy tinh canuyl cun ch khn lau dựng m ch / nhúm bn xp ghim ch cụng t hỳt bỡnh tam giỏc cú nỳt cao su di hai l ni cỏch thy khay (chu) nc ỏ nhit k loi 50oC lớt dung dch Ringer dựng cho ng vt bin nhit ng h bm giõy 1.2.2 Cỏc bc tin hnh 1.2.2.1 Tỏch ri tim ch Dựng kim chuyờn dng chc ty ch, t ch lờn bn m, dung ghim c nh bn chi ch vo bn m Dựng kộo to m rng xoang ngc ch, cn thn ct b mng bao tim s thy tim ch cựng hai ng mch: mt r sang trỏi, mt r sang phi t ng mch ch Nh nhng lt tim ch lờn s thy tnh mch ch phớa di Dựng kộo panh nh, lun si ch di chng 15-20cm xung di hai ng mch v tnh mch ch Cn thn lun ch qua tnh mch vỡ thnh tnh mch rt mng nờn d b rỏch Tht cht tnh mch ch v ng mch phớa phi ca ch Nh nhng kộo si ch nõng ng mch trỏi lờn, ct vỏt mt ng, to mt l nh lun canuyl cú cha dung dch Ringer (dung dch sinh lý mỏu lnh) vo sõu tõm tht S xut hin ct mỏu canuyl tim co búp y lờn chng t canuyl ó a vo n tõm tht Dựng ng hỳt rỳt b mỏu canuyl, tip tc cho dung dch Ringer vo canuyl tim cho n ton b mỏu tim ó c thay th ht bng dung dch Ringer Tht cht ch, buc ng mch trỏi vo canuyl ri dung kộo ct ri tim lng ngc ch, qu tim sau tỏch ri c th m p, y ct dung dch sinh lý canuyl lờn xung nhp nhng thỡ vic tỏch ri (hay cụ lp) tim ch mi t yờu cu Gn canuyl cú tim ch v nhit k vo hai l nh ca nỳt bỡnh to m cho bu thy ngõn ca nhit k v mm tim mt cao nh Bỡnh m l bỡnh tam giỏc thy tinh cú cha dung dch sinh lý to m cho tim cụ lp hot ng tt hn Nu k thut tỏch tt ta Báo cáo thực hành lý sinh GVHD: Th.s Đặng Thị Thanh Hà Lớp CTYK15C Tổ : 11 cú mt qu tim cụ lp p nhp nhng ti gi liờn tc 1.2.2.2 Xỏc nh i lng Q10 v nng lng hot ng ca quỏ trỡnh co búp tim ch tỏch ri Chun b ba bỡnh m cha khong 50ml dung dch Ringer nhit khỏc Bỡnh t nhit ca phũng thớ nghim Bỡnh t mỏy iu nhit cú nhit cao hn nhit phũng 10oC Bỡnh t vo chu nc ỏ h nhit xung thp hn nhit phũng 10oC Khi nhit ó n nh, t tim ch cụ lp vo bỡnh m nhit phũng, m s nhp p ca tim thi gian phỳt, ú chớnh l hng s tc ca quỏ trỡnh co búp tim ch tỏch ri (KT) m ớt nht ln ly giỏ tr trung bỡnh Lu ý: Cú th xỏc nh hng s tc ca quỏ trỡnh bng cỏch xỏc nh thi gian m tim p c 20 nhp Suy 60 giõy p c bao nhiờu nhp Lm nh vy cú th tit kim c thi gian hn Tin hnh tng t nh trờn nhit cao hn v thp hn 10oC so vi nhit phũng xỏc nh c KT+10 v KT-10 Cn chỳ ý mi ln thay i nhit phi ch phỳt cho tim thớch ng vi iu kin nhit mi bỡnh m p dng cụng thc tớnh i lng Q10 iu kin tng nhit : T ú tớnh nng lng hot húa ca quỏ trỡnh co búp tim ch tỏch ri iu kin ny l: Ehh = 0,46.T1.T2.lgQ10 (T1, T2 chuyn thnh nhit tuyt i) Cũn iu kin gim nhit thỡ: v nng lng hot húa l: Ehh = 0,46.T1.T2.lgQ'10 1.2.3 Kt qu thc hnh Sau ln o ta cú c bng giỏ tr tn s k nh sau: Nhit (0C) Nhit phũng 320C Nc dỏ 220 C Nc m 42 0C Ln 1(l/P) 43 45 47 Ln (l/p) 46 38 48 Ln (l/p) 42 35 43 Q10 iu kin nhit phũng vi nc ỏ: Q10 = 43/39= 1.1025 p dng cụng thc ta cú nng lng hot húa: Ehh = 0,46.T1.T2.Lg(Q10) = 0,46.(273+22).(273+32).Lg43/39 = 1755 Q10 iu kin nhit thng t m : Q10 = 46/43 = 1,06976 p dng cụng thc ta cú nng lng hot húa: Ehh = 0,46.(273+42).(273+32).Lg46/43 = 1294 kcal I KT LUN 1) Trong iu kin nhit phũng vi nc ỏ: a Tn s Q10 = 1.1025 b Nng lng hot húa Ehh = 1755 kcal 2) Trong iu kin nhit thng t m : a Tn s Q10 = 1,06976 b Nng lng hot húa Ehh = 1755 kcal Trung bỡnh 43 39 46 kcal Bi TNH THM MT CHIU CA DA CH MC TIấU Sau nghiờn cu bi thc hnh ny, sinh viờn cú th: 2.1 Nm vng th no l tớnh thm ca t bo mụ; Nm vng c s ca hin tng mng cú tớnh thm chn lc; Mụ t hai c ch chuyn vt cht qua mng t bo; Gii thớch c hin tng thm mt chiu ca t bo v mụ; Nm vng phng phỏp dựng cht mu nghiờn cu tớnh thm; Lí THUYT L mt h thng h, t bo sng luụn thc hin quỏ trỡnh thay i cht vi mụi trng bờn ngoi Quỏ trỡnh ny ch cú th xy nh kh nng mng t bo v mụ cho thõm nhp hoc thi hi cỏc cht khớ, nc v cỏc cht hũa tan i qua Kh nng ú c gi l tớnh thm ca t bo v mụ (tham kho thờm v lý thuyt mng t bo) Tớnh thm khụng nhng ch ph thuc vo cu trỳc c trng ca tng loi t bo v mụ m cũn ph thuc rt nhiu vo trng thỏi chc nng ca chỳng Chớnh cu trỳc c trng v trng thỏi chc nng ca cỏc loi t bo v mụ quy nh tớnh thm cú chn lc i vi cỏc cht khỏc t mụi trng vo t bo Mt t bo v mụ khụng cũn kh nng hot ng thc hin cỏc chc nng (t bo b cht) thỡ tớnh thm chn lc cng khụng cũn na, tớnh thm ca mng t bo thay i, lung vt cht i vo hoc t bo cng thay i theo Ngy ngoi thc bo, ung bo (cũn gi l m bo) cú hai c ch chuyn vt cht qua mng t bo ó c lm sỏng t, ú l: 2.1.1 C ch chuyn th ng L c ch chuyn vt cht qua mng theo tng cỏc loi gradient, khụng tiờu tn nng lng Quỏ trỡnh chuyn ny din nh mt quỏ trỡnh khuch tỏn, tuõn theo nh lut Fick: Trong ú - tc khuch tỏn vt cht qua - Tit din m vt khuch tỏn qua (cm 2) ; mng (g/s); - gradient nng (g/cm 3); S D h s khuch tỏn (g/cm2.s) Du () cụng thc nờu lờn ý ngha vt lý ca quỏ trỡnh l sau thi gian khuch tỏn (t) lng vt cht ó b gim i so vi giỏ tr ban u Tc khuch tỏn cng ln thỡ nng cht ban u cng gim nhanh 2.1.2 C ch chuyn tớch cc L c ch chuyn vt cht qua mng ngc tng gradient cú tiờu phớ nng lng ca quỏ trỡnh trao i cht C ch ny gn lin vi hot ng ca cỏc cht mang l cỏc phõn t lypoprotein thnh phn cu trỳc mng Hot ng ca mt cỏc protein cht mang chuyn tớch cc ion K+ v Na+ ngc gradient nng ca chỳng l Na + - K+ - ATPaza ó c nghiờn cu khỏ chi tit v c mụ t nh hot ng ca bm ion Na+ - K+ Bng c ch ny, t bo v mụ ó trỡ c gradient nng cỏc cht, nh ú m chỳng cú kh nng sinh cụng di quỏ trỡnh sng Tc cng nh chiu hng thõm nhp ca cỏc cht vo t bo v mụ khụng ch ph thuc vo tớnh thm chn lc ca mng m cũn ph thuc vo bn cht ca cỏc cht v vo mc thay i tớnh cht húa lớ ca cỏc cht ú Chng hn, nu cú mt cht no ú ó xõm nhp vo ni bo nú tham gia vo phn ng húa hc thnh mt cht khỏc, hoc nu nú chuyn t trng thỏi t sang trng thỏi liờn kt, thỡ kh nng khuych tỏn tr li mụi trng ngoi ca nú rt khú xy Vớ d mt axit yu hoc kim yu ngoi mụi trng chỳng khụng phõn li nờn d dng khuch tỏn vo t bo Khi vo bờn ni bo, iu kin mụi trng ó thay i nờn chỳng b phõn li thnh cỏc ion, d tham gia vo cỏc liờn kt húa hc nờn mt kh nng khuych tỏn ngoi, nờn axớt yu v kim yu ch cú kh nng thm theo mt chiu nht nh Da ch l mt i tng thun li quan sỏt v nghiờn cu tớnh thm mt chiu i vi mt s cht (trong ú cú xanh methylene, mt thuc nhum cú tớnh kim yu) Da ch bao gm biu mụ phớa ngoi v mụ liờn kt bờn Biu mụ c cuu to t n lp t bo Ngoi cựng, ph lờn biu mụ l mt mng cutin mng cú ngun gc t dch ca cỏc tuyn nhy v mt lp t bo sng Tip theo l cỏc lp t Hỡnh 2-1 Cu to mụ da ch bo biu mụ cú dng hỡnh trũn, xp hi tha to Mng cutin; Lp t bo sng; Cỏc lp t bo sinh trng biu mụ; Lp t bo mng nn; Cỏc sc t; Lp mụ liờn kt thnh cỏc khe gian bo Trong cựng l lp t bo cú hỡnh lng tr, nhõn ca chỳng cú hỡnh ụ van, xp xớt v c gi l t bo mng nn Tt c cỏc lp t bo ny c gi l lp t bo sinh trng, chỳng cú kh nng phõn chia mnh thay th cỏc t bo biu mụ gi Di mng nn l lp mụ liờn kt ni nh v cỏc sc t mu xanh en (Hỡnh 1) Biu mụ da ch cú kh nng hp th cao, phn ng acid yu (cú tớnh acid yu), cũn lp mụ liờn kt cú kh nng hp th yu v phn ng kim yu Vi cu trỳc mụ c trng nh vy, da ch thm mt chiu t mụ liờn kt biu mụ i vi mt s thuc nhum cú tớnh kim yu nh xanh methylene Bi vỡ lp mụ liờn kt cú tớnh kim yu, cỏc cht ny khụng b phõn li thnh cỏc ion Chỳng cng khụng b hp th mnh nờn d dng khuych tỏn lp biu mụ lp biu mụ cú tớnh axớt nờn cỏc cht b phõn li v bi hp th mnh ú chỳng khụng cú kh nng khuych tỏn theo chiu ngc li Tớnh thm mt chiu ca t bo v mụ khụng phi l bt bin m cng cú th b thay i tớnh cht húa lý ca mụi trng 2.2 THC HNH 2.2.1 Dng c, húa cht v vt liu kim chc ty kộo to sc mỏy so mu xỏc nh mt quang hc ca dung dch cun ch 100 ml cn 96o khay m hoc bn m 100ml dung dch xanh methylen ng thy tinh hỡnh tr cú chiu di 7-8 cm np y lỏ nhụm hoc nha, gia 0,1% dung dch sinh lớ 1000ml dung dch sinh lớ dung cho ng vt bin nhit c c mt l cú ng kớnh bng pipet loi -10 ml v giỏ pipet ng kớnh ng thy tinh khn lau dựng m cc thy tinh loi 100ml ch/nhúm sinh viờn 2.2.2 Cỏc bc tin hnh 2.2.2.1 Chun b tỳi da ch Mi nhúm bt hai ch, dung kim chc ty ch cho ch bt ng Cn thn ly da ca bn bp chõn ch cho khụng b thng lm cỏc tỳi da ch Dựng hai chic, mt nguyờn, chic ln ngc li cho biu mụ vo ri ngõm vo dung dch sinh lý cho da ch gi nguyờn trng thỏi sinh lý bỡnh thng hai chic cũn li lm nh trờn nhng ngõm cn 90o vi thi gian l 120 phỳt nhm git cht da ch Dựng ch buc mt u ca nhng tỳi da ch ó chun b trờn vo cỏc ng thy tinh hỡnh tr, cũn u buc tỳm li cho dung dch sinh lý vo tỳi kim tra xem tỳi cú b rũ r khụng Nu khụng, dung dch sinh lý i ri cho 5ml dung dch xanh methylen 0,1% vo v nhỳng cỏc tỳi ny vo cỏc cc ng mt lng 100ml dung dch sinh lý bng Chỳ ý cho mc xanh methylen tỳi cao bng mc dung dch sinh lớ cc Hỡnh 2-2 Mu tỳi da ch; a ng thy tinh hỡnh tr; b Tỳi da ch c ngõm dung dch 2.2.2.2 Quan sỏt hin tng thm ca xanh methylen qua cỏc tỳi ch t cỏc cc cú tỳi da ch trờn vao bỡnh n nhit 22 oC 40 phỳt Sau ú nhn xột bng mt thng xem Xanh methylen khuych tỏn t ngoi theo chiu no: t mụ liờn kt biu mụ hay ngc li t biu mụ mụ liờn kt? ng thi so sỏnh vi nhng tỳi ó ngõm cn xem cú nhn xột gỡ, ghi cỏc nhn xột vo v v bỏo cỏo kt qu vi cỏn b hng dn thc hnh 2.2.2.3 nh lng Xanh methylen ó thm qua da ch Dng th chun Sau t cỏc tỳi da ch vo bỡnh n nhit, ch i kt qu, nhanh nhúng chun b cỏc dung dch xanh methylen cú cỏc nng : 0,002; 0,004; 0,006; 0,008; 0,01; 0,02% dung dch sinh lớ Dung mỏy so mu xỏc nh mt quang hc (D) ca cỏc dung dch va pha Dng th biu din s ph thuc mt quang hc vo nng , ta cú th chun Xỏc nh lng xanh methylen ó thm qua da Sau 40 phỳt (hoc lõu hn nu cú thi gian) nhc b cỏc tỳi da ch cỏc cc, dung a thy tinh khuy u dung dch cc ri ờm xỏc nh mt quang hc trờn mỏy so mu, Da vo th chun xỏc nh nng xanh methylen ó thm qua da ngoi 2.2.3 Kt qu thc hnh Cp chi ngõm cn : thy xanh metylen thm bờn ngoi Cp chi ngõm dung dch sinh lý : chi nguyờn thỡ thm xanh metylen ngoi Cũn chi ln ngc thỡ khụng - Cp chi ngõm cn, c chi ln ngc v chi nguyờn u thm xanh metylen ngoi vỡ ngõm cn cỏc t bo biu mụ v mụ liờn kt u b phỏ hy nờn xanh metylen d dng thm qua hai lp trờn rõ bờn ngoi Nu = thỡ = ; ú tia sỏng chiu vuụng gúc vi mt phõn cỏch gia hai mụi trng v s truyn thng Nu tia sỏng i t mụi trng chit quang ln sang mụi trng chit quang nh thỡ gúc ti s nh hn gúc khỳc x (hỡnh 5-1) Khi gúc ti tng dn thỡ s n lỳc gúc khỳc x bng 900 v tia khỳc x s trt trờn b mt phõn cỏch gia hai mụi trng Gúc ti ng vi trng hp ú c gi l gúc gii hn ton phn (kớ hiu ) Hin tng tia sỏng b góy khỳc truyn tr li mụi trng c gúc ti ln hn gúc gii hn ton phn c gi l phn x ton phn Khi = ta cú biu thc n21 = sin Trong thc nghim ngi ta phõn bit chit sut tng i v chit sut tuyt i ca mụi trng Chit sut tuyt i ca mt mụi trng l chit sut ca nú i vi chõn khụng, c xỏc nh bng t s tc ỏnh sỏng chõn khụng (c) v tc ỏnh sỏng mụi trng nghiờn cu (vx): Trong ú: chit xut tuyt i ca mụi trng x ang xột; c tc ỏnh sỏng chõn khụng; - tc ỏnh sỏng mụi trng x Chit sut tuyt i ca mt mụi trng sut cho bit tc truyn ỏnh sỏng mụi trng ú nh hn tc truyn ỏnh sỏng chõn khụng bao nhiờu ln Chit sut tng i ca mụi trng vi mụi trng bng t s chit sut tuyt i ca hai mụi trng ú: ú l biu thc liờn h gia chit sut tng i v chit sut tuyt i ca hai mụi trng cú ỏnh sỏng truyn qua 5.1.2 Nguyờn lý hot ng ca khỳc x k ABBE Nguyờn lý hot ng ca khỳc x k nhỡn chung da trờn hin tng phn x ton phn ca tia sỏng truyn qua mụi trng Khi xỏc nh c gúc gii hn ton phn s d dng xỏc nh c chit sut Trong cỏc dch sinh vt nh huyt thanh, dch mụ chit sut ch yu ph thuc vo lng protein cha ú Vỡ vy chit sut ca huyt phn ỏnh khỏ chớnh xỏc hm lng ca protein cha nú Cho nờn phng phỏp khỳc x k c dựng khỏ ph bin nh lng protein tng s v cỏc loi protein thnh phn ca huyt Trờn hỡnh 5-2 l cu to ca khỳc x k ABBE, cũn hỡnh 5-3 cho bit rừ ng i ca tia sỏng qua cỏc b phn ca khỳc x k v dung dch nghiờn cu Hỡnh 5-2 Cu to ngoi ca khỳc x k ABBE Th kớnh tiờu im; B phn b chớnh nột ranh gii hai pha ti sỏng ; Trng iu chnh nột ranh gii ti sỏng; Bung cha lng kớnh v thang o chit sut cựng h iu nhit; Trng xoay lng kớnh o v thang o vũng; Kớnh c kt qu; Vớt iu chnh c hc; B phn gn nhit k Hỡnh 5-3 ng i ca tia sỏng khỳc x k 5.1.3 Cỏch s dng khỳc x k ABBE t khỳc x k vo v trớ d thao tỏc Dựng ng cao su lp cỏc mu ca h iu nhit dn nc m vo lm n nhit bung o Dựng nc ct hai ln v vớt chnh c hc (7) chnh khỳc x k v v trớ ban u: nc cú h s n = 1,3330; hm lng cht khụ 0% Cỏc bc tin hnh nh sau: + Nh nhng c khúa, m bung o, s tỏch hai lng kớnh: lng kớnh o v lng kớnh chiu ỏnh sỏng + H lng kớnh chiu sỏng xung, v trớ nm ngang Dựng pipet nh 2-3 git nc ct lờn lng kớnh + Nõng lng kớnh chiu sỏng lờn v trớ c, ộp cht hai lng kớnh dn mng git nc trờn hai mt lng kớnh + Dựng gng chiu sỏng ton b lng kớnh + Xoay trng (5) chnh ng ranh gii gia hai pha ti sỏng quan sỏt c th kớnh (1) Dựng trng (3) v (2) iu chnh nột ca ng ranh gii Xoay trng (5) a ng ranh gii ny v gia vch ch thp hin vi trng + Qua th kớnh (6) cú hai bng chia , bng bờn trỏi ch h s khỳc x, bng bờn phi ch hm lng khụ ca cht tớnh theo % Nh vy i vi nc ct ln, cú hm lng cht khụ l 0%; ng vi h s chit sut bng bờn trỏi l 1,3330 ú chớnh l v trớ ban u + Nu bng o v trớ ban u m ng ranh gii lch gia du ch thp thỡ phi dựng vớt chnh c hc (7) a nú v v trớ cn thit (lu ý lm vic ny di s giỏm sỏt ca cỏn b hng dn) M bung o, lau sch nc ct trờn b mt lng kớnh, nh 2- git dung dch nghiờn cu lờn mt lng kớnh xỏc nh h s chit sut n ca chỳng 5.2 THC HNH 5.2.1 Dng c, húa cht v vt liu mỏy khỳc x k Abbe pipet loi 2ml mỏy li tõm 150 ml (NH4)2SO4 bóo hũa cõn a 10 ml huyt nguyờn cht ca bp in cc thy tinh cha 200 ml chu nhit ng vt mỏu núng 150 ml dung dch acid acetic 0,04 N ng li tõm 150 ml nc ct hai ln cc thy tinh 50 100ml Bụng, gc mm thm nc lau kớnh cụng t hỳt bỳt d vit trờn kớnh 5.2.2 Cỏc bc tin hnh 5.2.2.1 Xỏc nh protein tng s huyt nguyờn cht Sau ó chnh khỳc x k v v trớ 0, nh 2- git huyt nguyờn lờn b mt lng kớnh Vn cht hai lng kớnh bng c khúa Quan sỏt qua th kớnh, dựng trng xoay (3) a ng ranh gii sỏng ti v gia vch ch thp Nhỡn vo thang o ghi li chit sut ca huyt nguyờn (kớ hiu n6) Da vo bng ó cho (ph lc I) xỏc nh thnh phn (%) ca protein cú huyt 5.2.2.2 nh lng albumin v globulin huyt nh lng c anbumin v globulin l hai tiu thnh phn chớnh ca protein huyt ta lm nh sau: Bc 1: Chun b nm ng ly tõm sch, cú trng lng bng nhau, ỏnh s t n ng s Cho ml huyt + ml acid acetic 0,04 N lc u, un cỏch thy phỳt, ly ngui, sau ú em ly tõm 3000 vũng/phỳt 10 phỳt Dch thu c sau ly tõm khụng cha protein vỡ acid acetic ó lm chỳng kt ta ht ng s Cho ml huyt + ml (NH4)2SO4 bóo hũa, lc u s thy cú ta em ly tõm 3000 vũng/phỳt 30 phỳt Dch thu c sau ly tõm cú cha albumin vỡ globulin ó b (NH4)2SO4 kt ta ht Lu ý: + Nờn cựng ly tõm ng v tit kim thi gian + Trng lng hai ng phi bng v t i xng + Ch ly dch sau ly tõm o chit sut ng s Cho ml acid acetic 0,04 N + ml nc ct lc u s c dung dch acid acetic 0,02 N ng s Cho ml (NH4)2SO4 bóo hũa + ml nc ct lc u, s c dung dch (NH4)2SO4 na bóo hũa ng s Cho ml nc ct tinh khit Bc 2: Dựng khỳc x k o chit sut ca cỏc dch sut nm ng nghim trờn Cn o nhiu ln ly giỏ tr trung bỡnh Chit sut dch ng s l n1 Chit sut dch ng s l n2 Chit sut dch ng s l n3 Chit sut dch ng s l n4 Chit sut dch ng s l n5 Bc 3: nh lng albumin theo cụng thc sau: A(%) = 2(n n ) ( n1 n ) 0, 00177 (5.4) 0,00177 l chit sut ca dung dch albumin 1% Bc 4: nh lng globulin theo cụng thc sau: G (%) = n [n + ( n n ) ] 0, 00229 (5.5) 0,00229 l chit sut ca dung dch globulin 1% Bc Tớnh h s K: h s tng quan albumin/globulin thng cú giỏ tr n nh cỏc c th cú trng thỏi sinh lý bỡnh thng, nú dao ng khong 1,2 2,0 v c xỏc nh: K= A(%) G(%) (5.6) 5.2.3 Kt qu thc hnh Kt qu cỏc thớ nghim lp thnh bng v 2: STT CH3COOH 0,04% 1ml (NH4)2SO4 BO HềA Nc Ct 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml Huyt Thanh 1ml 2ml 1ml 2ml Cho cỏc cht vo tng ng nghim theo bng trờn + ng 1: Cho cỏc cht trờn vo v chng cỏch thy vũng phỳt, sau ú ngui em ly tõm vũng 10 phỳt, tc 3000 vũng/phỳt + ng 2:Cho cỏc cht trờn vo, lc nh s xut hin kt ta em li tõm 30 phỳt, tc 3000 vũng/ phỳt o v tớnh kt qu I KT QU Bng 1: STT Giỏ tr cn o CHIT Ln Ln Giỏ tr trung bỡnh Ln N1 1,36 1,36 1,36 1,36 N2 1,40 1,40 1,40 1,40 N3 1,363 1,362 1,363 1,362 N4 1,40 1,40 1,40 1,40 N5 1,365 1,365 1,363 1,363 N6 1,372 1,373 1,373 1,374 STT Bng Ch tiờu nghiờn cu Giỏ tr trung bỡnh Anbumin 1,47% Globulin 1,2% H s K 1,225 Bi TNH CHT QUANG HC CA PHN T HEMOGLOBIN MC TIấU Sau nghiờn cu bi thc hnh ny, sinh viờn cú th: Mụ t cu trỳc ca phõn t hemoglobin v chc nng ca nú; Nm vng cỏc dng c bn v cỏc dn xut ca oxyhemoglobin; Gii thớch c vỡ cỏc dn xut ca phõn t hemoglobin khỏc thỡ tớnh cht quang hc ca chỳng khỏc nhau; Thnh tho phng phỏp o mt quang hc xỏc nh nng ca cht nghiờn cu 6.1 Lí THUYT Phõn t hemoglobin l thnh phn c bn ca t bo hng cu Trong mt t bo hng cu cú khong 200 triu phõn t hemoglobin Mi phõn t hemoglobin cha chng 9000 nguyờn t cỏc loi nh H, C, N, Fe, S, O Trng lng phõn t hemoglobin rt ln (chng 66.000 68.800 Da) Phõn t hemoglobin c cu to t hai thnh phn chớnh, ú l protein globin v nhúm chc HEM HEM c cu thnh t bn vũng pyrol gn vi mt nguyờn t st (Fe) trung tõm Chớnh nguyờn t st ny thc hin chc nng chuyn oxy t hng cu ti cỏc mụ, t bo Globin l cỏc loi protein cú cu trỳc phc gm bn chui polypeptid: hai chui thuc nhúm - polypeptid v hai chui thuc nhúm - polypeptid Mi chui gn vi mt nhúm HEM Phõn t hemoglobin c kớ hiu l Hb; nú liờn kt vi phõn t oxy thỡ c gi l oxyhemoglobin (HbO2) Cú bn dng oxyhemoglobin Chỳng c to thnh nh sau: Hb4 + O2 = Hb4O2 Hb4O2 + O2 = Hb4O4 Hb4O4 + O2 = Hb4O6 Hb4O6 + O2 = Hb4O8 Cỏc phn ng trờn l thun nghch Khi liờn kt vi phõn t oxy, phn ng ca chui v - polypeptid cú khỏc Chui - polypeptid co cun li liờn kt vi phõn t oxy, v dui oxy tỏch chỳng Trong ú chui - polypeptid khụng thay i cu hỡnh k c trng thỏi liờn kt vi oxy cng nh trng thỏi t Cú l s bin i cu hỡnh ca - polypeptid nh hng n tớnh cht quang hc ca cỏc dn sut ca phõn t hemoglobin Trong bn dng oxyhemoglobin trờn thỡ dng th t d gn v d tỏch phõn t oxy Hb Nú l dng bóo hũa oxy, m bo cho quỏ trỡnh hụ hp xy d dng Ngoi oxyhemoglobin, methemoglobin (metHb) l dng dn xut khỏc ca Hemoglobin Vỡ mt lý no ú, nguyờn t st nhúm HEM ca Hb b thay i húa tr (t húa tr thnh húa tr 3) thỡ Hb ú c gi l metHb MetHb khụng cú kh nng tỏch oxy phõn t ca nú Nờn nu mỏu cha mt lng ln metHb thỡ quỏ trỡnh trao i khớ s khụng din ra, c th b thiu oxy trm trng Ph hp th ca cỏc dn sut Hb khỏc cú dng khỏc Ph hp th c trng ca HbO2 cú hai vch sm, hp vựng ỏnh sỏng vng lc, cũn Hb cú mt vch sm nhng rng hn cng vựng ỏnh sỏng trờn iu ú cho thy mt quang hc phn ỏnh c trng ca dn sut Hb Trong bi thc hnh ny chỳng ta s tin hnh tỡm hiu tớnh cht quang hc ca Hb v cỏc dn sut ca nú nh vo quang ph k 6.2 THC HNH 6.2.1 Dng c, húa cht v vt liu 01 mỏy quang ph k 500 ml dung dch sinh lý PBS pH = 7,2 01 mỏy li tõm 10ml heparin 01 cõn a 10ml dung dch ferixyanua kali K3[Fe(CN)6] 04 ng li tõm ml 05 pipet cỏc loi ml ml 10g tinh th bóo hũa hũa hemoglobin chun 100 ml dung dch detionit natri Na2S2O3 bóo 05 chut nht trng (hoc mỏu g ln ) 6.2.2 Cỏc bc tin hnh 6.2.2.1 Dng th chun Ly Hb tinh th pha 10 dung dch cú nng chun khong m nng ca Hb dung dch nghiờn cu cú th thay i (tựy thuc vo hng cu loi ng vt no dựng lm thớ nghim) o mt quang hc (D) ca cỏc dung dch Hb chun ó pha trờn bc súng 400 nm Kt qu c ghi vo bng dng th chun Trờn trc tung t cỏc gỏi tr mt quang hc, trờn trc honh t cỏc giỏ tr nng tng ng 6.2.2.2 Thu nhn cỏc dn sut ca hemoglobin Thu nhn HbO2 Trỏng heparin vo thnh ng nghim chng ụng mỏu Ly mỏu vo ng ly tõm Ly tõm 1500 vũng/phỳt phỳt loi b huyt tng, ly hng cu Ra hng cu bng dung dch PBS ba ln bng cỏch ly tõm 1500 vũng/phỳt phỳt Lm huyt tiờu hng cu bng cỏch cho nc ct vo, lc nh u ri li tõm 3000v/phỳt phỳt loi b mng hng cu, dch mu ti sut l dung dch oxyhemoglobin (HbO2) (nu c cú th pha loóng vi nc) Thu nhn methờmoglobin (metHb) Cho ml dung dch HbO mi thu c trờn vo ng nghim ly tõm, cho thờm git dung dch ferixyanua kali bóo hũa vo ng nghim, lc u nh tay c dung dch cú mu xanh thm, ú l metHb Thu nhn hemoglobin Cho ml dung dch HbO trờn vo ng nghim, cho thờm git dung dch detionit natri Na2S2O3 bóo hũa vo, lc u nh tay c dung dch Hb cú mu nõu sm 6.2.2.2 o mt quang hc cỏc dn sut trờn bng quang ph k bc súng 540 nm Da vo mt quang hc o c v ng cong th chun xỏc nh nng ca cỏc dn sut trờn Lu ý: Cỏc thớ nghim cn tin hnh sau thu c HbO vỡ nu lõu nú s b oxy húa thnh metHb Cn cho vo cuvột ng dch i chng kim tra mt lng tng ng K3[Fe(CN)6] nu mt quang hc ca metHb v Na2S2O3 nu o mt quang hc ca Hb 6.2.3 Kt qu thc hnh STT Dn xut Hb Mt quang hc Ln 1 Hb02 (chun 0,402 Na2S2O3 MetHb ( chun 0,128 K3[Fe(CN)6] Hb ( chun nc 0,306 ct ) Ln Ln 0,518 0,552 0,490 0,176 0,130 0,144 0,293 0,349 0,316 Gii thớch vỡ cỏc dn xut ca phõn t Hemoglobin khỏc thỡ tớnh cht quang hc ca chỳng khỏc nhau: - Hemoglobin c cu to t thnh phn : Hem v Gobin Trong cu to ca globin gm cú chui liờn kt ú chui liờn kt Polypeptid cú liờn kt vi oxy v liờn kt tỏch oxy Do ú chỳng cú kh nng trao i oxy v thc hin tt trao i khớ vi mụi trng - Oxyhemoglobin c to thnh t Hemoglobin + Oxy: ú oxyhemoglobin cng cú kh nng trao i khớ vi mụi trng - Methemoglobin : c to thnh t Fe 2+= chuyn thnh Fe3+ nờn trao i khớ vi mụi trng Do ú cỏc dn xut ca phõn t Hemoglobin khỏc thỡ tớnh cht quang hc ca chỳng cng khỏc Bi XC NH P SUT THM THU BNG PHNG PHP BAGIERAST MC TIấU Sau nghiờn cu bi thc hnh ny, sinh viờn cú th: Phõn tớch vai trũ v ý ngha ca ỏp sut thm thu i vi c th sinh vt; Khc sõu bn cht ca ỏp sut thm thu; Nm vng iu kin quan sỏt v xỏc nh giỏ tr ca ỏp sut thm thu; Nm vng nguyờn tc ca phng phỏp Bagierast; Thnh tho phng phỏp xỏc nh ỏp sut thm thu ca dch sinh vt 4.1 Lí THUYT i vi h thng sng s khuch tỏn v thm thu cú mt vai trũ quan trng quỏ trỡnh trao i cht thc vt, nhng quỏ trỡnh chuyn cỏc cht dinh dng t t vo r, ri lờn thõn n lỏ, s chuyn cỏc cht nha theo dc thõn cõy u gn lin vi giỏ tr ca ỏp sut thm thu ng vt, s cú mt ca ỏp sut thm thu keo úng mt vai trũ quan trng vic iu hũa nc mỏu cỏc loi tiờm mao nc ngt, cú c quan iu hũa ỏp sut thm thu, c quan ny chớnh l nhng khụng bo cú kh nng co búp v tit cỏc dung dch nhc trng trỡ ỏp sut thm thu, nh ú m t bo khụng b trng Ngoi quỏ trỡnh iu hũa nc, ỏp sut thm thu cũn cú vai trũ quan trng vic bi tit cỏc cht cn bó, cũn gõy nờn lc húa thm thỳc y quỏ trỡnh sinh tng hp ATP mt quỏ trỡnh sinh nng lng quan trng v ch yu ca c th sinh vt Giỏ tr ca ỏp sut thm thu mt s i tng bc thp cú th dao ng mt khong no ú tựy thuc vo nng cỏc cht mụi trng xung quanh, cũn cỏc c th bc cao cú giỏ tr tng i n nh mc dự nng ca cỏc cht mụi trng xung quanh cú th thay i Chng hn ỏp sut thm thu ca huyt mỏu ngi trng thỏi sinh lớ bỡnh thng cú giỏ tr l 7,4at (dao ng khong 7,35 7,45 at) Bn cht ca ỏp sut thm thu l nng phõn t ca cỏc cht hũa tan gõy nờn Vỡ vy giỏ tr ca ỏp sut thm thu ph thuc vo giỏ tr nng , ngoi nú cũn ph thuc vo nhit tuyt i ca mụi trng Vant Hoff ó tớnh toỏn v a cụng thc xỏc nh ỏp sut thm thu (P) nh sau: P= CRT Trong ú : C - l nng cht tan (mol); R - l hng s khớ (8.31.103 jun/kmol.) ; T - l nhit tuyt i (oK) ; - h s phõn li iu ny cng cú ngha ỏp sut thm thu ph thuc vo s lng cỏc tiu phn (s ion, s phõn t, s ht) dung dch Cho nờn i vi cỏc dung dch keo cú nng loóng thỡ nh lut Vant Hoff khụng cũn chớnh xỏc na, bi vỡ cỏc ht keo cú kh nng keo t lm cho s lng ht h gim i Tớnh cht ny giỳp chỳng ta d dng gii thớch c vỡ ỏp sut thm thu ca cỏc dung dch keo thng cú giỏ tr nh hn ca dung dch thc, hay vỡ ỏp sut thm thu ca hai h keo cú cựng nng trng lng, ch khỏc v kớch thc ca ht m giỏ tr ca chỳng li khỏc Thc nghim cho thy rng ỏp sut thm thu keo t l vi ly tha bc ba bỏn kớnh ca ht, vỡ th cho nờn kớch thc ca ht thay i khụng ỏng k cng s dn n thay i giỏ tr ca ỏp sut thm thu rt ln Vớ d : kớch thc ht mi thay i hai ln thỡ ỏp sut thm thu ó thay i ti tỏm ln Trong trng hp dung dch cú nng tng i m c thỡ phng trỡnh Vant Hoff cú dng nh sau : Trong ú: M - trng lng phõn t cht tan; B - hng s c trng cho s tng tỏc gia cỏc ht vi iu kin quan sỏt c hin tng thm thu l phi cú s chờnh lch v nng cỏc cht hũa tan gia hai pha c ngn cỏch bi mt mng bỏn thm Mng bỏn thm l mng ch cho phõn t dung mụi m khụng cho phõn t cht hũa tan i qua Trờn hỡnh 4-1 cho thy bỡnh A v B c ngn cỏch bi mt mng bỏn thm M, gi s chỳng cựng cha mt loi dung dch, nhng nng dung dch bỡnh A nh hn bỡnh B (CA < CB), ú s cú mt dũng dung mụi chuyn t A sang B lm cho mc cht lng bỡnh B dõng cao hn bỡnh A Ct cht lng y gõy nờn mt ỏp sut tỏc dng lờn mng M, ngn cn dũng dung mụi tip tc chuyn sang B Hỡnh 4-1 Thớ nghim quan sỏt hin tng thm thu Khi t ti trng thỏi cõn bng (cú bao nhiờu phõn t nc chuyn t A sang B thỡ cú by nhiờu chuyn t B sang A) ỏp sut ct cht lng gõy nờn t giỏ tr (Po) i lng ny cú th dựng c trng nh lng cho ỏp sut thm thu ca dung dch Trong thc t, cú mt mng bỏn thm lớ tng nh vy quan sỏt v xỏc nh ỏp sut thm thu mt cỏch trc tip l rt khú, cho nờn ngi ta thng o ỏp sut thm thu bng phng phỏp giỏn tip da trờn nguyờn tc v s ph thuc ca ỏp sut hi trờn b mt vo nng dung dch Dung dch no cú nng cao (tng ng vi ỏp sut thm thu ln) thỡ ỏp sut hi trờn b mt nh Ngc li, dung dch no cú nng thp (cú ỏp sut thm thu nh) thỡ ỏp sut hi trờn b mt ca nú ln Nu cho b mt thoỏng ca hai dung dch ny tip xỳc vi s xy hin tng dch chuyn ca cỏc phõn t dung mụi th hi v phớa dung dch cú nng cao hn lm cho th tớch ca nú tng lờn, cũn th tớch ca dung dch cú nng nh s b gim i Da vo hin tng ny Bagierast ó xõy dng phng phỏp xỏc nh ỏp sut thm thu da vo quan sỏt s chuyn ng ca bt khớ gia hai dung dch cú nng khỏc mao qun u im ca phng phỏp ny l cú th tin hnh nhit phũng, lng cht cn thit nghiờn cu ớt nờn phự hp vi cỏc i tng sinh vt 4.2 THC HNH 4.2.1 Dng c, húa cht v vt liu kớnh hin vi cú thc o vt kớnh 50 mao qun cú ng kớnh 1,5 mm v chiu di cm a ng h 10 lam kớnh 50 g paraphin a thy tinh ốn cn 250 ml nc ct giỏ ng nghim 250 ml dung dch NaCl (1%) giỏ pipet 50 ml dung dch nghiờn cu (dung dch 10 ng nghim loi 10ml NaCl m sinh viờn khụng bit trc nng pipet loi 5ml ) 4.2.2 Cỏc bc tin hnh 4.2.2.1 Xỏc nh ỏp sut thm thu ca dch nghiờn cu Bc Chun b dung dch kim tra Dựng nc ct v dung dch NaCl 1% pha cỏc dung dch cú nng ; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7% vo cỏc ng nghim khỏc Cỏc dung dch ú c gi l dung dch kim tra Bc Chun b tiờu bn soi kớnh hin vi - Rút chng ml dung dch nghiờn cu mt a ng h, dựng mt a khỏc rút mt cỏc dung dch kim tra vi th tớch nh trờn Ly mt mao qun, cm nghiờng v nhỳng mt u vo a ng dung dch kim tra, cú hin tng mao dn dung dch s t t dõng lờn mao qun Khi cht lng dõng lờn n gia mao qun thỡ nhc a ng h, quay ngc cho cht lng chy sang u ca mao qun, mc cht lng cỏch u mỳt mao qun chng 1,5 mm thỡ lp tc nhỳng vo a ng h ng dung dch nghiờn cu Dung dch ny s dõng lờn y dung dch kim tra tr v v trớ ban u v to thnh bt khớ gia Hỡnh 4-2 a Tiờu bn mao qun dựng quan sỏt s chuyn ng ca bt khớ b Vũng cung bt khớ hin vi trng t mao qun lờn lam kớnh (nh ghi ký hiu khụng b nhm ln dung dch hai u mao qun) H trờn ốn cn cho paraphin núng chy ri dựng nú gn kớn hai u ca mao qun li ta c mt tiờu bn quan sỏt trờn kớnh hin vi (hỡnh 11a, hỡnh 11b) Bc Quan sỏt s chuyn ng ca bt khớ t tiờu bn lờn bn kớnh hin vi, chnh kớnh v tiờu bn cho mt hai mộp ca bt khớ (cú hỡnh vũng cung) trựng vi im giao ca hai ng chộo hin vi trng ri theo dừi hng chuyn ng ca vũng cung bt khớ (xem hỡnh 11.b) Bt khớ gia hai dung dch cú nng khỏc mao qun bao gi cng chuyn ng v phớa cú nng thp hn (cn lu ý rng hng chuyn ng quan sỏt di hớnh hin vi ngc chiu vi thc t) Da vo hng chuyn ng ca vũng cung ta bit c dung dch kim tra (ó bit trc nng ) cú nng ln hn hay hn dung dch nghiờn cu Ghi li kt qu theo hng dn bng Tin hnh tng t vi cỏc dung dch kim tra khỏc cho n vũng cung bt khớ ng im, khụng dch chuyn v trớ ban u Nng dung dch nghiờn cu cú giỏ tr ỳng bng nng ca dung dch kim tra ú (trong vớ d bng l 0,5%) Kt qu thớ nghim Dung dch kim tra (NaCl) 0,3% 0,4% 0,5% 0,6% 0,7% Hng chuyn ng Nng ỏp sut thm thu (P): P = CRT CM = C%.10.D = 0,6.10.1,003 = 0,103 M 58,5 Ta cú : h s phõn ly ca Nacl =2 p dng cụng thc ta cú: P= 2.0,103.0,082.(273+32)= 5,118 at Huyt [...]... hồng cầu 3.1 LÝ THUYẾT Chúng ta biết màng tế bào có một ý nghĩa đặc biệt quan trọng trong đời sống của tế bào U.B.Frank - một nhà lý sinh nổi tiếng đã nói rằng: “Mọi hoạt động sống đều diễn ra trên “sân khấu” - màng” Màng ở đây được hiểu theo ý nghĩa rộng, gồm các loại màng có mặt ở bên trong tế bào (màng nội Hình 3-1 Tế bào hồng cầu người quan sát qua kính hiển vi điện tử bào) và màng sinh chất, màng... điều hòa nước, áp suất thẩm thấu còn có vai trò quan trọng trong việc bài tiết các chất cặn bã, còn gây nên lực hóa thẩm thúc đẩy quá trình sinh tổng hợp ATP – một quá trình sinh năng lượng quan trọng và chủ yếu của cơ thể sinh vật Giá trị của áp suất thẩm thấu ở một số đối tượng bậc thấp có thể dao động trong một khoảng nào đó tùy thu c vào nồng độ các chất ở môi trường xung quanh, còn ở các cơ thể... môi trường có ánh sáng truyền qua 5.1.2 Nguyên lý hoạt động của khúc xạ kế ABBE Nguyên lý hoạt động của khúc xạ kế nhìn chung dựa trên hiện tượng phản xạ toàn phần của tia sáng khi truyền qua môi trường Khi xác định được góc giới hạn toàn phần sẽ dễ dàng xác định được chiết suất Trong các dịch sinh vật như huyết thanh, dịch mô… chiết suất chủ yếu phụ thu c vào lượng protein chứa trong đó Vì vậy chiết... trường Do đó các dẫn xuất của phân tử Hemoglobin khác nhau thì tính chất quang học của chúng cũng khác nhau Bài 6 XÁC ĐỊNH ÁP SUẤT THẨM THẤU BẰNG PHƯƠNG PHÁP BAGIERAST MỤC TIÊU Sau khi nghiên cứu bài thực hành này, sinh viên có thể: 1 Phân tích vai trò và ý nghĩa của áp suất thẩm thấu đối với cơ thể sinh vật; 2 Khắc sâu bản chất của áp suất thẩm thấu; 3 Nắm vững điều kiện để quan sát và xác định giá trị... phép, kết quả tế bào hồng cầu không bị vỡ và lắng xuống đáy ống nghiệm Bài 4 ĐỊNH LƯỢNG PROTEIN HUYẾT THANH BẰNG KHÚC XẠ KẾ MỤC TIÊU Sau khi nghiên cứu bài thực hành này, sinh viên có thể: 1 Nắm vững bản chất hiện tượng khúc xạ ánh sáng; 2 Phân biệt các khái niệm chiết suất tương đối và chiết suất tuyệt đối; 3 Trình bày nguyên lý hoạt động của khúc xạ kế ABBE; 4 Thành thạo phương pháp xác định protein... dịch metylen và lớp mô liên kết sẽ hấp thụ và giữ lại Như vậy: tính thấm của da ếch từ trong ra ngoài tế bào cao hơn tính thấm cao hơn từ ngoài vào trong Bài 3 XÁC ĐỊNH ĐỘ BỀN CỦA MÀNG TẾ BÀO HỒNG CẦU MỤC TIÊU Sau khi nghiên cứu bài thực hành này, sinh viên có thể: 1 Phân biệt thế nào là môi trường ưu, nhược và đẳng trương 2 Phản ứng của tế bào động vật và thực vật trong các loại môi trường đó 3 Thành...- Ở cặp chi ngâm trong dung dịch sinh lý: + Chi nguyên thấm ra ngoài + Chi lộn ngược không thấm vì : lớp mô liên kết của ếch có tính kiềm yếu các chất này không bị phân ly thành các ion, chúng cũng không bị hấp thu mạnh nên dễ dàng khuyếch tán qua lớp biểu mô Ở lớp biểu mô do có tính acid nên các chất bị phân ly và hấp thụ... 1,365 1,365 1,363 1,363 6 N6 1,372 1,373 1,373 1,374 STT Bảng 2 Chỉ tiêu nghiên cứu Giá trị trung bình ± ∆ 2 Anbumin 1,47% 3 Globulin 1,2% 4 Hệ số K 1,225 Bài 5 TÍNH CHẤT QUANG HỌC CỦA PHÂN TỬ HEMOGLOBIN MỤC TIÊU Sau khi nghiên cứu bài thực hành này, sinh viên có thể: 1 Mô tả cấu trúc của phân tử hemoglobin và chức năng của nó; 2 Nắm vững các dạng cơ bản và các dẫn xuất của oxyhemoglobin; 3 Giải thích... polypeptid: hai chuỗi thu c nhóm α - polypeptid và hai chuỗi kia thu c nhóm β - polypeptid Mỗi chuỗi gắn với một nhóm HEM Phân tử hemoglobin được kí hiệu là Hb; khi nó liên kết với phân tử oxy thì được gọi là oxyhemoglobin (HbO2) Có bốn dạng oxyhemoglobin Chúng được tạo thành như sau: Hb4 + O2 = Hb4O2 Hb4O2 + O2 = Hb4O4 Hb4O4 + O2 = Hb4O6 Hb4O6 + O2 = Hb4O8 Các phản ứng trên là thu n nghịch Khi liên... vùng ánh sáng trên Điều đó cho thấy mật độ quang học phản ánh đặc trưng của dẫn suất Hb Trong bài thực hành này chúng ta sẽ tiến hành tìm hiểu tính chất quang học của Hb và các dẫn suất của nó nhờ vào quang phổ kế 6.2 THỰC HÀNH 6.2.1 Dụng cụ, hóa chất và vật liệu − 01 máy quang phổ kế − 500 ml dung dịch sinh lý PBS pH = 7,2 − 01 máy li tâm − 10ml heparin − 01 cân đĩa − 10ml dung dịch ferixyanua kali