TRƯỜNG ĐẠI HỌC HẢI PHÒNG VIỆN SINH NÔNG HỌ VÀ TÊN: NGUYỄN THỊ HƯƠNG NGÀY SINH: 30 - 05 - 1994 LỚP: CÔNG NGHỆ SINH HỌC K13 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN OXY HÓA SULFUR Ở VÙNG VEN BIỂN HẢI PHÒNG ĐỂ ỨNG DỤNG XỬ LÝ KHÍ ĐỘC H2S TRONG NUÔI TRỒNG THỦY SẢN Chuyên ngành: Công nghệ sinh học [ Người hướng dẫn khoa học: TS Trần Đình Lân Học vị: Tiến sĩ Chức danh khoa học: Tiến sĩ Khoa học Giáo viên hướng dẫn: Th.S Vũ Thị Lan Phương BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc đến TS Trần Đình Lân – Trạm nghiên cứu biển Đồ Sơn- Viện Tài Nguyên Môi Trường Biển, người thầy tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ cho em kiến thức, kinh nghiệm, lời khuyên quý báu, tạo điều kiện thuận lợi cho em trình thực đề tài khóa luận Em xin cảm ơn toàn thể anh, chị Trạm nghiên cứu biển Đồ Sơn, giúp đỡ tạo điều kiện cho em có hội thực tập đơn vị giúp đỡ nhiều trình thực tập Em xin chân thành cảm ơn ThS Vũ Thị Lan Phương nhiệt tình bảo, giúp đỡ em nhiều suốt trình thực đề tài Bên cạnh đó, em xin chân thành cảm ơn thầy, cô Trạm nghiên cứu biển Đồ Sơn với Lãnh đạo Viện Tài Nguyên Môi Trường Biển tạo điều kiện giúp đỡ suốt thời gian học tập, nghiên cứu trường viện Cuối cùng, em xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè, đặc biệt ba mẹ bên động viên, giúp đỡ em suốt trình học tập thực khóa luận Hải Phòng, ngày tháng năm 2016 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Sinh viên Nguyễn Thị Hương DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH VÀ BIỂU ĐỒ DANH MỤC VIẾT TẮT ATP: Adenozin Diphotphat NTTS: Nuôi trồng thủy sản FAO: Agriculture Organization of the United Nation (Tổ chức lương thực Nông nghiệp Liên Hiệp Quốc) GHCP: Giới hạn cho phép RNM: Rừng ngập mặn BOD: Nhu cầu sinh hóa DO: hàm lượng oxy nước ĐC: Đối chứng MĐTB: Mật độ tế bào 10 OD: Mật độ hấp thụ quang bước sóng định (OD 600, OD 420) 11 [SO42-]: Hàm lượng ion sunfat nước 12 [H2S]: Hàm lượng hydrogen sulfide nước BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Phần 1: MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Vấn đề ô nhiễm môi trường nói chung ô nhiễm nước nói riêng vấn đề nhức nhối toàn giới Vấn đề ngày trầm trọng, đe dọa trực tiếp phát triển kinh tế - xã hội bền vững, tồn tại, phát triển hệ tương lai Xã hội ngày phát triển, với phát triển ạt khu, cụm, điểm công nghiệp, làng nghề thủ công truyền thống có phục hồi phát triển mạnh mẽ, khu đô thị, tất yếu dẫn đến môi trường ngày suy thoái loại nặng, vi sinh vật gây bệnh đặc biệt hợp chất chứa lưu huỳnh Như nuôi trồng thủy sản nguyên nhân gây ô nhiễm phần lớn chất hữu dư thừa từ thức ăn, phân rác thải khác đọng lại đáy ao nuôi Ngoài ra, hóa chất, kháng sinh sử dụng trình nuôi trồng dư đọng lại mà không xử lý Việc hình thành lớp bùn đáy tích tụ lâu ngày chất hữu cơ, cặn bã nơi sinh sống vi sinh vật gây thối, vi sinh vật sinh khí độc như NH3, NO2, H2, H2S, CH4 Sự ô nhiễm không ảnh hưởng xấu đến hệ sinh thái mà gây tác động không tốt đến sức khỏe người Vì vậy, vấn đề bảo vệ môi trường, bảo vệ nguồn nước nhiệm vụ cấp bách toàn giới Trong năm qua, có nhiều công trình nghiên cứu cho thấy việc ứng dụng biện pháp sinh học vào xử lý nguồn nước thải giàu chất hữu – đặc biệt nguồn nước thải có chứa hợp chất lưu huỳnh – mang lại hiệu cao an toàn cho môi trường Trong số trường hợp, hợp chất oxy hoá lưu huỳnh bị oxy hóa thành sulphur Một số loài vi sinh vật có khả tận dụng nguồn lượng để chuyển hóa ATP thành lượng Trong điều kiện hiếu khí, nhiều nhóm vi khuẩn oxy hóa hợp chất oxy hoá lưu huỳnh thành thiosulfat, sulphur loài vi khuẩn thuộc chi: Micromonas spp., Bacillus spp., Pseudomonas spp Klebsiella spp, Thiobacilus … BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Trên giới, việc sử dụng nhóm vi khuẩn tham gia xử lý ô nhiễm (đặc biệt việc loại bỏ hydro sulfur nước) biết đến qua nhiều nghiên cứu ứng dụng thực tế Ở Việt Nam, việc ứng dụng vi sinh vật vào xử lý nước đánh giá hiệu quả, xong lĩnh vực han chế Trước tình hình ô nhiễm môi trường mức báo động việc nghiên cứu nhóm vi sinh vật để đưa vào ứng dụng cần thiết Vì em thực nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu đặc điểm sinh học số chủng vi khuẩn oxy hóa sulfur vùng ven biển Hải Phòng để ứng dụng xử lý khí độc H2S nuôi trồng thủy sản.” 1.2 MỤC ĐÍCH VÀ YÊU CẦU 1.2.1 Mục đích Tuyển chọn xác định đặc điểm chủng vi khuẩn có hoạt tính oxy hóa sulfur nhằm đưa sở cho việc áp dụng nhóm vi khuẩn vào xử lí H 2S đầm nuôi thủy sản Hải Phòng, nhằm tối ưu hoá trình oxy hóa sulfur tự nhiên hệ thống ao nuôi, đảm bảo môi trường cho nuôi trồng hiệu suất cao bền vững 1.2.2 Yêu cầu Phân lập chủng vi khuẩn có hoạt tính oxy hóa sulfur Tuyển chọn chủng vi khuẩn có hoạt tính oxy hóa sulfur cao Xác định đặc điểm sinh học chủng vi khuẩn oxy hóa sulfur phân lập Thử nghiệm đánh giá khả xử lý H2S vi khuẩn oxy hóa sulfur thí nghiệm mô BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 TÌNH HÌNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN TRÊN THẾ GIỚI VÀ VIỆT NAM 2.1.1 Tình hình nuôi trồng thủy sản giới Tổng sản lượng khai thác NTTS toàn giới đạt khoảng 142 triệu vào năm 2008 sản lượng từ NTTS (bao gồm nước nước mặn) vào khoảng 52 triệu tấn, chiếm 46% tổng sản lượng Bảng cho thấy sản lượng từ NTTS liên tục tăng từ năm 2004 đến 2009 [1] Bảng 2.1: Sản lượng NTTS giới năm 2004 - 2009 (triệu tấn) (Nguồn: FAO, 2010) Năm 2004 200 2006 20007 2008 2009 25,2 26,8 28,7 30,7 32,9 35,0 Biển 16,7 17,5 18,6 19,2 19,7 20,1 Tổng NT 41,9 44,3 47,4 49,9 52,5 55,1 Nước Ghi chú: không bao gồm sản lượng rong biển, số liệu ước tính tạm thời NTTS ngành sản xuất thực phẩm động vật tăng nhanh nhất, lượng cung cấp thực phẩm bình quân tính đầu người từ năm 1970 0,7kg/ người năm 2008 7,8 kg/người, tăng bình quân hàng năm 6,6% Nếu không tính đến sản lượng rong biển, sản lượng từ NTTS đạt triệu năm đầu 1950 tăng lên 52,5 triệu vào năm 2008, đạt tổng giá trị 98,4 tỉ đô la Mỹ [1] Sản lượng từ NTTS chủ yếu làm nguồn cung cấp thực phẩm cho người Trên toàn giới tăng từ 42,6% (năm 2006) lên đến 45,7% (năm 2008) sản lượng từ NTTS làm thực phẩm Riêng Trung Quốc, lượng thực phẩm thủy hải sản năm 1970 chiếm 23,6% tăng lên đến 80,2% năm 2008 Riêng nước lại, lượng thực phẩm thủy hải sản tăng từ 4,8% năm 1970 lên 26,7% năm 2008 Mặc dù nghề NTTS có truyền thống lâu đời số nước, nhìn chung toàn giới nghề non trẻ, phát triển nhanh khoảng 50 năm qua NTTS chủ yếu phát triển khu BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 vực Châu Á - Thái Bình Dương, chiếm 89% giá trị sản lượng 79% giá trị kinh tế Trong đó, phải kể đến Trung Quốc quốc gia mạnh NTTS, chiếm 62% tổng sản lượng toàn cầu 52% tổng giá trị Tỉ lệ tăng trưởng trung bình sản lượng toàn giới năm 2006 năm 2008 5,3% [1] Bảng 2.2: Các nước có sản lượng NTTS cao giới (Nguồn: FAO, 2010) Quốc gia Sản lượng(nghìn tấn) 1990 2000 Tỷ lệ phát triển trung bình hàng năm 2008 1990-2000 2000-2008 1990-2008 Trung Quốc 482 21 522 32 736,1 2,7 5,4 9,4 Ấn Độ 017 943 479 6,7 7,6 7,1 Việt Nam 160 499 462 12,0 22,1 16,4 Indonesia 500 789 690 4,7 10,0 7,0 Thái Lan 292 738 374 9,7 8,1 9,0 Băng-la- dét 193 657 006 13,1 5,5 9,6 Na- uy 151 491 844 12,6 7,0 10,0 Chi-lê 32 392 843 28,3 10,1 19,8 Philippin 380 394 741 0,4 8,2 3,8 Nhật Bản 804 763 732 –0,5 –0,5 –0,5 62 340 694 18,6 9,3 14,4 99 675 30,2 27,1 28,8 Hoa Kỳ 315 456 500 3,8 1,2 2,6 Hàn Quốc 377 293 474 –2,5 6,2 1,3 Ai Cập Myanma Trên giới, Châu Á cho sản lượng thủy sản nuôi trồng lớn nhất, chiếm 89% tổng sản lượng 77% tổng giá trị sản phẩm thủy sản nuôi trồng giới năm 2006 Năm 2006, tổng sản lượng NTTS giới 51 triệu sản lượng khai thác 92 triệu Trong số này, Trung Quốc chiếm 66,7% tổng sản lượng nuôi, nước Châu Á khác chiếm 22,8%, nước khác lại Châu Âu, Châu Mỹ, Úc… chiếm 10,5% Nghề NTTS nội địa tiếp tục đóng góp cho nghề nuôi thủy sản nói chung, với 61% sản lượng 53% tổng giá trị sản phẩm nuôi trồng Nuôi thủy sản nước chiếm 58% sản lượng 48% giá trị, nuôi biển chiếm 34% sản lượng 36% giá trị Trong đó, nuôi nước lợ với tỷ lệ sản lượng thấp 8% BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 cho tỷ lệ giá trị đến 16% nuôi chủ yếu loài tôm có giá trị cao Cơ cấu nhóm loài nuôi cho thấy, năm 2006, cá nước cho sản lượng cao 27,8 triệu tấn, đạt giá trị 29,5 triệu USD; động vật thân mềm rong biển cho sản lượng giá trị tương đương Trong đó, giáp xác có sản lượng 4,5 triệu đạt giá trị đến 17,95 triệu USD [1] [2] Đối tượng NTTS phong phú Theo Pillay, có 465 loài thực vật thủy sinh rong tảo đối tượng nuôi trồng [3] FAO liệt kê 107 loài cá, 21 loài giáp xác 43 loài nhuyễn thể nuôi từ năm 1994[4] Số lượng chắn tăng lên hàng năm Tuy nhiên, tùy nơi với mục đích nuôi khác mà đối tượng nuôi khác Châu Á, Trung Quốc Nam Á nuôi chủ yếu loài cá chép, Đông Á nuôi chủ yếu loài cá biển có giá trị cao Vùng Châu Mỹ la tinh Caribê, nuôi chủ yếu cá hồi tôm; Vùng Bắc Mỹ nuôi chủ yếu cá hồi đại dương Một số loài thủy sản quan trọng nuôi gồm cá hồi Đại Tây Dương, cá trắm, cá mè hoa, cá chình Châu Âu, cá chình Nhật Bản, cá hồi vân, cá rô phi vằn, tôm xanh, tôm sú, tôm he chân trắng, hầu Mỹ, hầu Thái Bình Dương, rong mứt, rong bẹ, rong sụn v.v Số liệu thống kê từ báo cáo tổng quan nước giới diện tích ao nuôi nước nước mặn số nước FAO cho biết Trung Quốc nước có diện tích lớn với 5.583.276 ao nuôi thủy sản nước 676.184 nước lợ [6] [7] Bảng 2.3: Diện tích ao nuôi nước nước lợ số nước giới (Nguồn: FAO, 2005) [11] Tên nước Diện tích ao nuôi nước Diện tích ao nuôi nước (ha) lợ (ha) Trung Quốc 5.583.276 676.184 Bangladesh 151.000 203.071 Cu Ba 11.424 1.383 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Ai Cập 64.100 Hungary 28.000 Ấn Độ 850.000 Indonesia 97.821 480.762 Nepal 6.000 Tổng 6.832.621 1.361.400 Theo số liệu tổng hợp Verdegem (từ thống kê năm 2004 FAO) cho biết giới có khoảng 8.750.000 ao nuôi nước 2.333.000 ao nuôi nước lợ sử dụng Sản lượng thủy sản thu từ nguồn nuôi nước chiếm 59,9% tổng sản lượng 56% tổng giá trị Sản lượng thủy sản từ nuôi biển chiếm 32,3% tổng sản lượng 30,7% tổng giá trị NTTS biển đóng góp nhiều loài có giá trị cao nhóm cá có vây, giáp xác bào ngư đồng thời nhiều nhóm loài đem lại sản lượng cao hầu, điệp, ngao, sò… NTTS từ nước lợ chiếm 7,7% sản lượng 13,3% giá trị 2.1.2 Tình hình nuôi trồng thủy sản Việt Nam Việt Nam thập niên 1990 năm đầu kỉ 21, sản lượng thủy sản nuôi trồng có tốc độ tăng trưởng cao, vượt xa tốc độ tăng trưởng khai thác Trong thập niên cuối kỷ trước, Việt Nam trở thành 10 nước có sản lượng cá nuôi lớn giới, sau Trung Quốc, Ấn Độ, Inđônêxia, Nhật Bản, Thái Lan, Banglađesh Ở Việt Nam, nghề nuôi thủy sản phát triển động Nghề nuôi thủy sản truyền thống thập niên 1960, nhiên vòng 10 năm nay, nghề nuôi thủy sản có tốc độ phát triển nhanh chóng Theo thống kê Bộ Thủy sản năm 1999 nước có tổng cộng 524.619 NTTS, đạt sản lượng 480.767 Năm 2005, nước có gần 1.000.000 nuôi thủy sản, đạt sản lượng 1.437.356 tấn, đó, sản lượng nuôi thủy sản nước lợ - măn 546.716 tấn, sản lượng nuôi nước đạt 890.650 Năm 2008, tổng sản lượng NTTS Việt Nam đạt 2.448.000 tấn, tăng 15% so với năm 2007 Sản lượng thuỷ sản nuôi trồng năm 2009 ước tính đạt 2.569,9 nghìn tấn, tăng 4,2% so với năm trước, chủ yếu địa phương tiếp tục chuyển đổi mở rộng diện tích nuôi trồng theo hướng kết hợp đa canh, đa Bên cạnh đó, mô hình nuôi thuỷ sản lồng, bè tiếp tục phát 10 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Bảng 4.6: Đặc điểm khuẩn lạc tế bào chủng vi khuẩn chọn STT Kí hiệu chủng gram Đặc điểm tế bào ĐS-02-3 - Tế bào màu hồng, hình que ĐS-02-4 - Tế bào màu hồng, hình bầu dục ĐS-01-7 - Tế bào màu hồng, hình tròn ĐS-01-9 - Tế bào màu hồng, hình cầu ĐS-03-11 + Tế bào màu xanh đen, hình que to dài Hình ảnh nhuộm gram 42 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Để phân lập định danh xác hơn, em tiến hành thử test sinh hóa đặc trưng nhóm vi khuẩn oxy hóa sulfur Kết test thử thể bảng 4.7: Bảng 4.7: Một số đặc tính sinh hóa chủng Test mẫu ĐS-02-3 ĐS-024 ĐS-017 ĐS-01-9 ĐS-03-11 Sinh NH3 + + + - + Sinh H2S - - - - - Đ hóa citrate - - + - - Pg xelulozo - - - - - MR + + - + + NO3- - + + + - VP - - - - - + + + - + Catalaza + + + + - Glucozo - + + - + Lactazo - + - - - Saccazo - - - - - Sinh indol - - + - - Urease - - - - - Oxidase - + + + + Tween 80 - + - - - Pg tinh bột Chú thích: Âm tính (-), Dương tính (+) 43 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Để nhận dạng tên chủng nghiên cứu em dựa vào đặc điểm sinh thái, khuẩn lạc, nhuộm gram phản ứng sinh hoá nêu bảng 4.7 Qua quan sát khuẩn lạc đĩa thạch kính hiển vi hầu hết khuẩn lạc tròn trắng, di chuyển Riêng chủng ĐS-03-11 có khả ăn sâu vào mặt thạch Ta xác định sau: chủng ĐS-02-3 thuộc loài Micromonas spp (Bergys manual of systematic bacteriology volume 3), chủng ĐS-02-4 ĐS-01-9 thuộc loài pseudomonas spp (Bergys manual of systematic bacteriology volume 3), chủng ĐS01-7 thuộc loài Thiobacilus sp (Bergys manual of systematic bacteriology volume 3), chủng ĐS-03-11 thuộc loài bacillus spp (Bergys manual of systematic bacteriology volume 3) Các chủng có khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh em chọn để nghiên cứu tiếp vào thí nghiệm mô khả khử sulfur 4.4 NGHIÊN CỨU MỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG VÀ OXY HÓA CÁC HỢP CHẤT KHỬ CỦA LƯU HUỲNH CỦA CÁC CHỦNG LỰA CHỌN 4.4.1 Ảnh hưởng nhiệt độ Để tìm nhiệt độ tối thích chủng vi khuẩn hiếu khí này, nghiên cứu khả sinh trưởng, phát triển khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh nhiệt độ 20oC, 30oC, 37oC, 45oC, bổ sung 10% giống, sau 24h nuôi cấy tiến hành kiểm tra khả sinh trưởng khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng vi khuẩn Nghiên cứu thực ngày Bảng 4.8: Kết ảnh hưởng nhiệt độ đến khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng lựa chọn Ảnh hưởng nhiệt độ 20 oC OD [SO42](mg/l) 30 oC OD [SO42-](mg/l) 37 oC OD [SO42-](mg/l) 45 oC OD ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-019 ĐS-0311 0.42 0.40 0.38 0.41 0.44 358.46 355.46 389.59 365.3 406.67 0.51 0.54 0.52 0.50 0.55 522.47 486.57 552.67 552.37 562.48 0.44 0.46 0.48 0.45 0.48 452.67 512.67 542.57 502.77 552.67 0.27 0.28 0.32 0.35 0.42 44 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP [SO42-](mg/l) Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 240.83 257.438 308.63 280.63 310.53 Từ Bảng 4.8 ta thấy chủng vi khuẩn khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt nhiệt độ 30 oC Tuy nhiên dải nhiệt độ từ 25-37 oC chủng vi khuẩn hiếu khí có khả sinh trưởng hoạt tính oxy hóa thiosulfate tốt Điều chứng tỏ chủng lựa chọn thuộc nhóm vi sinh vật ưa ấm trung bình ưa thích trung bình khoảng 20-40 (tối ưu 30-37 oC Vì vậy, chọn 30 oC nhiệt 4.4: hưởng nhiệt Ảnh chất hưởng lưu độ Biểu tối ưuđồcho cácẢnh chủng vi khuẩn sinh trưởng Biểu oxyđồ hóa4.5: hợp khử độ đến khả oxy hóa hợp nhiệt độ đến khả sinh huỳnh hìnhlưu thửhuỳnh nghiệmcủa sau chất cho khửmôcủa trưởng số chủng vi khuẩn chủng vi khuẩn 4.4.2 Ảnh hưởng độ mặn (sức chịu mặn) Nhóm vi khuẩn phân lập được phân lập khu vực nước mặn Chúng thích nghi với nhiều độ mặn khác Bởi vậy, để tìm độ muối tối thích chủng vi khuẩn hiếu khí này, nghiên cứu khả sinh trưởng, phát triển khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh độ muối 0% 0, 5%0, 15%0, 20%0, 25%0, 30%0 Bổ sung 10% giống, tiến hành kiểm tra khả sinh trưởng khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng vi khuẩn nhiệt độ tối thích 30oC Nghiên cứu thực ngày Bảng 4.9: Kết ảnh hưởng độ mặn đến khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng lựa chọn Tên mẫu Độ mặn %0 OD [SO42-](mg/l) %0 OD ĐS-023 ĐS-0311 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 0.28 0.25 0.24 0.21 0.25 190.65 207.63 210.66 178.33 180.43 0.32 0.29 0.31 0.30 0.32 45 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP [SO42-](mg/l) 10 %0 Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 240.839 257.43 308.63 280.63 310.53 0.50 0.51 0.51 0.49 0.52 455.65 465.76 465.57 428.93 478.85 0.51 0.54 0.52 0.50 0.55 522.47 486.57 542.67 502.37 562.48 0.46 0.48 0.50 0.46 0.51 445.65 455.46 467.57 458.53 488.85 0.30 0.32 0.48 0.39 0.45 358.468 355.468 389.591 365.378 406.678 0.27 0.22 0.37 0.30 0.46 330.468 320.379 440.366 305.467 450.368 OD [SO42-](mg/l) 15 %0 OD [SO42-](mg/l) 20 %0 OD [SO42-](mg/l) 25 %0 OD [SO42-](mg/l) 30 %0 OD [SO42-](mg/l) Từ bảng 4.9: ta thấy độ mặn khác nhóm vi khuẩn sinh trưởng có khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh Nhưng với độ mặn 15 o/oo gần độ mặn địa vi khuẩn chúng phát triển có khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt Riêng chủng 11 thích nghi với độ mặn cao, lên tới 30 o/oo mà sinh trưởng khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt Vì vậy, chọn 15 o/oo độ mặn tối ưu cho chủng vi khuẩn sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh cho mô hình thử nghiệm sau 4.4.3 Ảnh hưởng pH pH yếu tố quan trọng có ảnh hưởng đến phát triển vi sinh vật nói chung khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng vi sinh vật nói riêng Độ pH đo máy đo pH (704 Metrohm, Đức) dịch nuôi Để khảo sát pH thích hợp trình sinh trưởng khả nằn oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh, chủng lựa chon nuôi cấy môi trường thiosulfate có pH từ 3, 5, 7, 9, 10 nhiệt độ tối ưu 30 oC độ muối tối ưu 15 o/oo Nghiên cứu thực ngày, chọn ngày thứ để tiến hành nghiên cứu Biểu đồ 4.7: Ảnh hưởng độ Biểu đồ 4.6: Ảnh hưởng độ mặn đến sinh trưởng mặn đến khả oxy hóa hợp chủng vi khuẩn 46 chất khử lưu huỳnh chủng vi khuẩn BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Bảng 4.10 Kết ảnh hưởng pH đến khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng lựa chọn Tên mẫu pH pH DO [SO42-](mg/l) pH DO [SO42-](mg/l) pH DO [SO42-](mg/l) pH DO [SO42-](mg/l) pH 10 DO [SO42-](mg/l) ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 ĐS-03-11 0.27 0.25 0.31 0.26 0.33 170.75 155.11 190.66 178.33 202.43 0.40 0.38 0.45 0.42 0.45 240.83 257.43 308.63 280.69 310.53 0.51 0.54 0.52 0.50 0.55 522.47 486.57 542.67 502.37 562.48 0.46 0.44 0.48 0.47 0.48 358.468 355.468 389.59 365.37 406.67 0.30 0.29 0.35 0.40 0.42 180.858 165.111 195.568 168.43 302.43 Từ bảng 4.10 Khả sinh trưởng khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng tốt pH Tuy nhiên, pH = 5, pH = 9, pH =10 chủng có khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt Điều phù hợp với nghiên cứu trước ảnh hưởng pH tới phát triển vi sinh vật, hầu hết môi trường tự nhiên có pH nằm khoảng 5-9, hầu hết vi sinh vật phát triển tối ưu khoảng đó, ví dụ E Coli phát triển môi trường có pH từ 4,4-9 [1] Tại pH = hay pH= 10 môi trường axít, kềm hoá cao nhóm vi khuẩn phát triển bới khả oxy hoá hợp chất khử lưu huỳnh giảm đáng kể Vì vậy, em chọn pH = pH tối ưu cho chủng vi khuẩn sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh cho mô hình thử nghiệm sau 4.4.4 Ảnh hưởng oxy hòa tan Oxy môi Biểu đồ hòa 4.8:tan(DO) Ảnh hưởng pHtrường đến yếu tố quan trọng có ảnh hưởng đến khả triển oxyvihóa chất phát sinh vậthợp hiếu khíkhử nói chung khả oxy hóa hợp chất khử của lưu huỳnh chủng vi Biểu đồ 4.9 Ảnh hưởng pH đến47 khuẩn khả sinh trưởng vi khuẩn BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 lưu huỳnh chủng vi sinh vật nói riêng Độ oxy hòa tan xác định máy đo oxy (YSI-58, Mỹ) dịch nuôi Để khảo sát DO thích hợp trình sinh trưởng khả nằng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh, chủng lựa chon nuôi cấy môi trường thiosulfate có DO từ 1, 3, 5, nhiệt độ tối ưu 30oC, độ muối tối ưu 15 o/oo pH =7 Nghiên cứu thực ngày, chọn ngày thứ để tiến hành nghiên cứu Bảng 4.11: Kết ảnh hưởng ôxy hoà tan đến khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng lựa chọn OD Mẫu OD OD ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 DO 0.14 0.15 0.14 0.15 0.16 [SO42](mg/l) 58.46 55.46 89.59 65.37 76.67 DO 0.51 0.54 0.52 0.50 0.55 [SO42](mg/l) OD DO [SO42](mg/l) OD DO [SO42](mg/l) 482.47 456.57 0.54 522.47 0.57 486.57 0.55 520.83 0.56 537.43 472.67 0.53 542.67 0.54 508.63 452.37 0.51 502.37 0.54 550.63 ĐS-03-11 522.48 0.59 562.48 0.57 510.53 Từ bảng 4.10 ta nhận thấy nhóm vi khuẩn nhóm vi khuẩn hiếu khí nên thích nghi với nồng độ oxy hòa tan môi trường cao Với nồng độ oxy hòa tan nước DO = (0-1) mg/l vi khuẩn phát triển chậm, khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh không tốt Khi nồng độ oxy hòa tan nước DO = (3-5) mg/l điều kiện vi khuẩn phát triển khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt Khi nồng độ oxy trạng thái bão hòa, số vi khuẩn phát triển khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh Vì vậy, chọn DO = (3-5) mg/l DO tối ưu cho chủng vi khuẩn sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh cho mô hình thử nghiệm sau Biểu đồ 4.10: Ảnh hưởng DO đến khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng 48 Biểu đồ 4.11: Ảnh hưởng DO đến khả sinh trưởng chủng vi khuẩn BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 4.4.5 Ảnh hưởng nguồn nitơ Các chất dinh dưỡng đa lượng vi lượng có ý nghĩa lớn trình nuôi cấy chủng vi sinh vật Hiểu nguyên tố, hàm lượng cấu thành tế bào, nguồn gốc chất dinh dưỡng chức chúng tế bào vi sinh vật cần thiết nghiên cứu tối ưu hóa môi trường nuôi cấy lên men sản xuất sản phẩm công nghiệp Nitơ nguyên tố đa lượng có ý nghĩa lớn trình nuôi cấy, có chức xây dựng nên acid amin, nucleotit axit nucleic coenzyme Do đó, em sử dụng hai nguồn nitơ vô hữu gồm: NH4Cl, NaNO3, NaNO2 cao men để tiến hành nghiên cứu Nghiên cứu thực ngày với nhiệt độ, độ mặn, pH tối ưu Bảng 4.12: Kết ảnh hưởng hợp chất nitơ đến khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh chủng lựa chọn Nguồn nitơ Mẫu Cao men DO [SO42-](mg/l) NH4Cl DO [SO42-](mg/l) NaNO3 DO [SO42-](mg/l) NaNO2 DO [SO42](mg/l) ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 ĐS-03-11 0.61 0.65 0.64 0.67 0.69 558.46 555.46 589.59 565.37 576.67 0.41 0.39 0.52 0.50 0.55 482.47 456.57 472.67 452.37 522.48 0.54 0.57 0.53 0.51 0.59 522.47 486.57 542.67 502.37 562.48 0.45 0.36 0.44 0.40 0.50 520.83 537.43 508.63 550.63 510.53 49 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Từ bảng 4.11 cho thấy, chủng vi sinh vật có khả sinh trưởng khả oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt nguồn nitơ vô hữu cơ, nhiên chủng vi khuẩn có khả sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt bổ sung nguồn nitơ cao men Riêng chủng ĐS-03-11 sử dụng nguồn nitơ NaNO3 cho khả năng sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh tốt Cao men nguồn đạm nhiều loài vi sinh vật ưa thích Cao men chứa acid amin, peptid, vitamin tan nước loại hydratcarbon Tuy nhiên sử dụng cao men để sản xuất công nghiệp bổ sung vào môi trường nuôi cấy xử lý trường đắt Từ hình cho thấy chủng vi khuẩn sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử sulfur tốt bổ sung nguồn nitơ muối NaNO Trong muối NaNO3 chứa nguyên tố N cần thiết cho chủng vi khuẩn chứa nguyên tố Na, natri có chức xây dụng nên cation vô tế bào, cofactor cho nhiều phản ứng enzyme Chúng chọn NaNO nguồn nitơ tối ưu cho chủng vi khuẩn sinh trưởng oxy hóa hợp chất khử lưu huỳnh cho mô hình thí nghiệm Biểu đồ 4.12: Ảnh hưởng Biểu đồ 4.13 Ảnh hưởng nguồn nito đến khả oxy hóa nguồn nito đến khả sinh 4.5 KHẢ NĂNG XỬcác LÝhợp H2Schất TRONG TRƯỜNG Ô trưởng NHIỄM khử lưuMÔI huỳnh của vi chủng vi khuẩn ác chủng vi khuẩn 4.5.1 Kết thí nghiệm Để đánh giá mật độ tế bào chủng vi sinh vật có mô hình thí nghiệm Em tiến hành đánh giá số lượng vi sinh vật có 1ml nước thí nghiệm có vi sinh vật phương pháp đếm số lượng khuẩn lạc CFU (Colony forming unit) tiến hành môi trường thiosulfate thạch Xác định số lượng tế bào có thí nghiệm mô lúc ban đầu (T o), sau (T1), 8giờ (T2), 12giờ (T3) Kết thể bảng 4.13: Bảng: 4.13 Mật độ tế bào vi sinh vật trình thí nghiệm mô MĐTB(CFU/ml ) ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 ĐS-03-11 50 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 To(0h) 0.35x106 0.22x106 0.26x106 0.32x106 0.34x106 T1(4h) 0.61x106 0.42x106 0.48x106 0.57x106 0.58x106 T2(8h) 0.11x107 0.69x106 0.82x106 0.10x107 0.10x107 T3(12h) 0.14x107 0.10x107 0.13x107 0.14x107 0.16x107 Bảng 4.14 Khả xử lý H2S thí nghiệm vi khuẩn [H2S] ĐC (mg/l) control ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 ĐS-03-11 To(0h) 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 T1(4h) 0.71 0.4 0.35 0.35 0.37 0.30 T2(8h) 0.68 0.2 0.15 0.1 0.12 0.05 T3(12h) 0.64 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 Bảng 4.15: Sự thay đổi pH thí nghiệm vi khuẩn pH ĐC ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 ĐS-03-11 To(0h) 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 T1(4h) 7.0 7.1 7.2 7.2 7.3 7.2 T2(8h) 7.0 7.5 7.2 7.4 7.3 7.6 T3(12h) 7.0 7.7 7.4 7.5 7.5 7.8 Bảng 4.16: Khả xử lý sulfur chủng vi sinh vật sau 4h 8h H2S(%) ĐS-02-3 ĐS-02-4 ĐS-01-7 ĐS-01-9 ĐS-03-11 T1(4h) 46.67 53.33 53.33 50.67 60.00 T2(8h) 73.33 80 86.66 84 93.33 T3(12h) 100 100 100 100 100 Trong mô hình thí nghiệm mô khả sử lý sulfur chủng vi sinh vật thử nghiệm có khả oxy hoá sulfur nước bị ô nhiễm Trong đầu từ To đến T1 hầu hết chủng oxy hoá tầm 50% lượng sulfur nước ô nhiễm Bởi thời gian chủng vi khuẩn thích nghi dần với môi trường nên đạt sinh khối chưa tối ưu Sau chủng có khả oxy hoá sulfur cao, đặc biệt chủng ĐS-03-11 đạt tới 93% hàm lượng sulfur ban đầu Trong 51 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 khoảng thời gian mật độ tế bào vi khuẩn đạt cao lên tới 10 Hầu môi trường làm thí nghiệm mô qua thời gian khảo sát pH môi trường không thay đổi nhiều nằm khoảng trung tính pH = (7-7.8) Bởi trình chuyển hoá hàm lượng lưu huỳnh nước chủ yếu thành hợp chất muối sunfat Biểu đồ 4.14 Khả xử lý H2S thí nghiệm vi khuẩn Biểu đồ 4.15 Sự thay đổi pH thí nghiệm vi khuẩn Biểu đồ: 4.16 Khả xử lý sulfur chủng vi sinh vật sau 4h 8h Phần 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Trong trình nghiên cứu phân lập 11 chủng có khả oxy hoá hợp chất khử lưu huỳnh chọn chủng có hoạt tính cao làm chủng để nghiên cứu ĐS-02-3, ĐS-02-4, ĐS-01-7, ĐS-01-9, ĐS-03-11 Dựa vào đặc điểm hình thái khuẩn lạc, nhuộm gram sinh hoá ta xác định sau: chủng ĐS-02-3 thuộc loài Micromonas spp, chủng ĐS-02-4 ĐS-01-9 thuộc loài pseudomonas spp, chủng ĐS-01-7 thuộc loài Thiobacilus sp, chủng ĐS03-11 thuộc loài bacillus spp Năm chủng vi khuẩn lựa chọn có khả sinh trưởng hoạt tính oxy hóa thiosulfate tốt 30oC, pH 7, độ mặn 150/oo sử dụng nguồn nitơ NaNO3 Cả chủng vi khuẩn có khả oxy hóa hợp chất khử sulfur môi trường bị ô nhiễm lên tới 80% riêng chủng ĐS-03-11 đạt tới 93,33% 5.2 KIẾN NGHỊ Tiếp tục tiến hành phân loại chủng vi khuẩn rõ ràng phân loại phân tử dựa trình tự đoạn gen mã hóa 16S rRNA để đối chiếu ngân hàng gen 52 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 Tiếp tục mô hình thử nghiệm chủng vi khuẩn với điều kiện ảnh hưởng khác để đưa vào ứng dụng phục vụ cho lĩnh vực NTTS 53 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo tiếng Việt Nguyễn Thành Đạt (2004) “Cơ sở Sinh học vi sinh vật”, Nhà xuất giáo dục” & Smith CA, Hussey AM (2005) Gram Stain Protocols American society for microbiology Conference for Undergraduate Educators – American Lưu Văn Diệu, Nguyễn Đức Cự, 2003 Hướng dẫn quan trắc phân tích môi trường biển Lưu Phân Viện hải hương học Hải Phòng (nay Viện Tài nguyên môi trường biển) Lê Văn Cát (chủ biên), Đỗ Thị Hồng Nhung, Ngô Ngọc Cát (2006) Nước nuôi thủy sản chất lượng giải pháp cải thiện chất lượng NXB Khoa học kỹ thuật, tr.102105, tr.173 Trần Lưu Khanh, (2008), Báo cáo số kết quan trắc, cảnh báo môi trường số vùng nuôi hải sản, cảng cá, bến cá tập trung, Viện Nghiên cứu Hải sản Lê Gia Hy (2010) “Giáo trình vi sinh vật học”, NXB Khao Học Công Nghệ Pp.111-136 Bộ Thủy Sản (1994 a), “Chương trình phát triển nghề cá từ năm 1994 - 1995 đến 2000”, Báo cáo tổng kết hoạt động năm nghề cá (1993-1998), tr 32- 45, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Bộ Thủy Sản (2006), Báo cáo đánh giá kết thực chương trình phát triển nuôi trồng thủy sản giai đoạn 2000-2005 biện pháp thực đến năm 2010, tr 68-100 Tài liệu tham khảo tiếng Anh Aroca, G.; Urrutia, H.; Nunez, D.; Oyarzuns, P.; Arancibia, A and Guerero K (2007) “Comparison on the removal of hydrogen sulfide in biotrickling filters inoculated with Thionacillus thioparus and Acidithiobaccillus thiooxidans”, Electronic Journal of Biotechnology,vol.10,no.4 Barbosa, V.L.; Atkins, S.D.; Barbosa, V.P.; Burgess, J.E and Stuetz, R.M (2006) “Characterization of Thiobacillus thioparus isolated from an activated sludge bioreactor used for hydrogen sulfide treatment” Journal of AppliedMicrobiology, vol 101, no.6, p 1269-1281 Bitton, G (1999) Wastewater microbiology,John Wiley & Sons, New York, USA 54 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 DS Chaudhary, S Vigneswara, H.-H Ngô, WG Shim H Moon (2003) lọc sinh học xử lý nước nước thải (PDF) Hàn Quốc Tạp chí Chemical Engineering Vol.20 No.6 Hurse, T.J.; Kappler U; Keller, J (2008) “Using anoxygenic phototrophic bacteria for the removal of sulfide from wastewater” In Hell, R.; Dahl, C.; Knaff, D.; Leustek, T (Ed) Sulfur metabolism in phototrophic organisms Science Pillay, T.V.R., and Kutty, M.N., (1990), “Aquaculture – Principles and Practices”, Blackwell Pubishing Ltd pp 64-68 FAO, (2010), “The State of World Fisheries and Aquaculture”, Food and Agriculture Organization (FAO), Rome, Italy FAO, (2009), “The State of World Fisheries and Aquaculture”, Food and Agriculture Organization (FAO), Rome, Italy FAO, (1996), “The State of World Fisheries and Aquaculture”, Food and Agriculture Organization (FAO), Rome, Italy 10 FAO (2006) World review of fisheries and aquaculture The state of World Fisheries and Aquaculture Food and Agriculture Organization of the United Nations, Rome, Italy 11 FAO, (2005), “The State of World Fisheries and Aquaculture”, Food and agriculture Organization (FAO), Rome, Italy 12 Robertson, L A & Kuenen, J G (2006) The Genus Thiobacillus In: TheProkaryotes, pp 812-827 Edited by M Bworkin, S Falkow, E Rosenberg, K H Sehleifer & Stackebrandt Berlin: Springer, Sorokin, D.Y.; Robertson, L.A.; and Kuenen, J.G (2000) Isolation and characterization of alkaliphilic, chemolithoautotrophic, sulfur – oxidizing bacteria Antonie van Leeuvenhoek 77, pp 251-262 13 Smith CA, Hussey AM (2005) Gram Stain Protocols American society for microbiology Conference for Undergraduate Educators – American 14 Verdegem, M.C.J., and Bosma, R.H., (2009), “Water withdrawal for brackish and inland aquaculture and options to produce more fish in ponds with present water use”, Water Policy, 11, pp 52-68 15 Donati, E., Curutchet, G., Pogliani, C and Tedesco, P.H, "Bioleaching of covellite using pure and mixed cultures of Thiobacillus 55 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 ferrooxidans and Thiobacillus thiooxidans", Process Biochemistry, 31, 129-134 Apr 1996 Tài liệu tham khảo internet http://www.fao.org/fishery/en www.fistenet.gov.vn http://doc.edu.vn/tai-lieu/giao-trinh-quan-ly-chat-luong-nuoc-nuoi-trong-thuy-san- dac-tinh-hoa-hoc-cua-moi-truong-nuoc-68609/ 56 [...]... gian nghiên cứu: Tháng 12/2015- 5/2016 3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - Thu mẫu tại một số điểm ở Hải Phòng - Phân lập và tuyển chọn một số chủng vi khuẩn oxy hóa sulfur - Nghiên cứu một số đặc điểm sinh học của một số chủng vi khuẩn oxy hóa sulfur có hoạt tính cao - Xác định khả năng xử lí H2S 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Kí hiệu mẫu: ĐS: Đồ Sơn 01: Rừng ngập mặn 02: đền bà đế 03: đầm nuôi Để nghiên cứu vi khuẩn. .. KHUẨN OXY HÓA SULFUR VÀ ỨNG DỤNG TRONG XỬ LÍ SULFUR 2.3.1 Đặc điểm vi khuẩn oxy hóa sulfur Nhóm vi khuẩn oxy hóa sulfur được phát hiện năm 1887 do nhà khoa học Sergeri Winogradsky Ông đã tham gia nghiên cứu các đặc điểm sinh hóa của vi khuẩn oxy hóa lưu huỳnh trong các phòng thí nghiệm tại Bary Các vi khuẩn oxy hóa lưu huỳnh luôn gắn liền với sự xuất hiện của các hydro sulfur tự do trong tự nhiên Nhóm vi. .. Hương – CNSH K13 Một số vi khuẩn sống ở tầng đáy có khả năng xử lý H2S được sử dụng rộng rãi trong nuôi trồng thủy sản để duy trì điều kiện nước ao nuôi Một trong những chủng có hiệu quả trong vi c xử lý H2S là Rhodopseudomonas (sản phẩm Rhodo Bacil) Quá trình loại bỏ H2S được thực hiện theo quá trình như sau: Vi c xử lý sinh học với độc tính của H2S vi khuẩn có thể nuôi cấy để tạo sinh khối và được đưa... DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 3.1.1 Đối tượng, vật liệu Nhóm vi khuẩn oxy hóa sulfur được thu thập ở các địa điểm ở vùng ven biển Hải Phòng 24 BÁO CÁO TỐT NGHIỆP Nguyễn Thị Hương – CNSH K13 3.1.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu Địa điểm nghiên cứu: Trạm nghiên cứu biển Đồ Sơn Địa điểm lấy mẫu: khu vực đầm nuôi trồng thủy sản, rừng ngập mặn... lí sulfur bằng vi khuẩn oxy hóa sulfur a Chu trình chuyển hóa lưu huỳnh trong nước Chu trình lưu huỳnh trong nước là một vòng tuần hoàn quan trọng nhất đối với cuộc sống thủy sinh Đây là cơ sở lý luận của vi c sử dụng các loại vi khuẩn oxy hoá lưu huỳnh và khử lưu huỳnh để xử lý ô nhiễm H2S trong nước Trong môi trường tự nhiên, lưu huỳnh tồn tại ở các dạng khác nhau, từ lưu huỳnh phân tử ở dạng khí. .. Hệ thống xử lý bằng phương pháp hiếu khí (Aerobic methods) Tác nhân tham gia vào hệ thống xử lý này bao gồm các vi khuẩn, xạ khuẩn, nấm và một số vi sinh bậc thấp Các dụng cụ thường là bể thông khí sinh học (Aeroten) hoặc các đĩa lọc sinh học Quá trình xử lý diễn ra như sau: - Bùn hoạt tính (vi sinh vật ở trạng thái huyền phù) có trong nước thải từ các đầm nuôi tôm được đưa vào hệ thống xử lý 16 BÁO... ít nhất Đặc biệt xử lý bằng biện pháp sinh học sẽ không gây tái ô nhiễm môi trường mà nhược điểm của biện pháp xử lý bằng hoá học mắc phải Biện pháp xử lý sinh học sử dụng đặc điểm của vi sinh vật là khả năng đồng hoá được nhiều nguồn cơ chất khác nhau từ tinh bột, cellulose, hợp chất nitơ, kim loại nặng …Thực chất của phương pháp này là nhờ hoạt động sống của vi sinh vật (sử dụng một số hợp chất hữu... mạnh trong nước và phân tán trong các cặn bã Sự oxy hóa sulfide liên quan đến các vi sinh vật trong lớp bùn Trong điều kiện kỵ khí, sulfate được sử dụng là chất nhận điện tử trong quá trình trao đổi chất của vi sinh vật Quá trình này dẫn đến vi c sản sinh ra khí H2S H2S được sản sinh qua nhiều bước trung gian liên quan đến quá trình khử của vi sinh vật H2S là thành phần tan trong nước nên sự tích lũy H2S. .. Ảnh hưởng của oxy hòa tan Oxy hòa tan(DO) trong môi trường là yếu tố quan trọng và có ảnh hưởng đến sự phát triển của vi sinh vật hiếu khí nói chung và khả năng oxy hóa hợp chất khử của lưu huỳnh của các chủng vi sinh vật nói riêng Độ oxy hòa tan được xác định bằng máy đo oxy (YSI-58, Mỹ) trong dịch nuôi Để khảo sát DO thích hợp trong quá trình sinh trưởng cũng như khả năng oxy hóa hợp chất khử của lưu... pH của một số chủng vi khuẩn Trong các thử nghiệm phân lập được lấy từ các mẫu khác nhau của vi khuẩn oxy hóa lưu huỳnh vừa bị oxy hóa Trong số đó, chủng phân lập được lựa chọn dựa trên khả năng giảm độ pH tốt hơn trên xanh bromophenol chứa sulfur oxy hóa tròn dịch thể bằng cách thay đổi màu sắc của các môi trường nuôi cấy từ màu xanh tím sang màu vàng nhạt dần Những vi khuẩn này được coi là vi khuẩn