61 I HC THI NGUYấN TRNG I HC NễNG LM Lấ VN IP TấN TI: NGHIấN CU C IM BNH Lí, LM SNG TRU GY NHIM TRYPANOSOMA EVANSI V NG DNG KIT CHN ON BNH TIấN MAO TRNG TRấN N TRU, Bề TI THI NGUYấN KHểA LUN TT NGHIP I HC H o to : Chớnh quy Chuyờn ngnh : Thỳ y Khoa : Chn nuụi thỳ y Khúa hc : 2009 - 2014 Ging viờn hng dn : TS Mai Anh Khoa Thỏi Nguyờn, thỏng 11 nm 2013 LI CM N Trong sut quỏ trỡnh hc v thc tt nghip em luụn nhn c s quan tõm, hng dn v giỳp tn tỡnh ca cỏc thy, cụ giỏo Khoa Chn nuụi Thỳ y cựng vi s giỳp ca bn bố v ng nghip Li u tiờn em xin c by t lũng bit n sõu sc n Ban giỏm hiu nh trng, Ban ch nhim khoa v cỏc thy, cụ giỏo, cỏn b Khoa Chn nuụi Thỳ y - Trng i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn ó tn tỡnh giỳp em sut thi gian hc ti trng c bit em xin chõn thnh cm n sõu sc ti cụ giỏo GS.TS Nguyn Th Kim Lan, cụ giỏo Th.s Nguyn Th Bớch o v cụ giỏo Th.s Th Võn Giang ó trc tip giỳp , hng dn em hon thnh khúa lun ny Em cng xin by t lũng bit n sõu sc n gia ỡnh, ngi thõn, bn bố v ng nghip ó giỳp , ng viờn, khớch l em hon thin khúa lun tt nghip ny Cui cựng em xin kớnh chỳc cỏc thy, cụ v cỏn b cụng nhõn viờn ca Khoa ca trng luụn mnh khe, thnh t v hnh phỳc Em xin trõn thnh cỏm n ! Thỏi Nguyờn ngy 25 thỏng 11 nm 2013 Sinh viờn Lờ Vn ip DANH MC CC BNG Trang Bng 4.1 Thi gian T evansi bt u xut hin v thi gian trõu gõy nhim cú biu hin lõm sng 31 Bng 4.2 Din bin thõn nhit ca trõu gõy nhim 32 Bng 4.3 Triu chng lõm sng ch yu trõu gõy nhim 38 Bng 4.4 S thay i mt s ch tiờu sinh lý mỏu trõu sau gõy nhim 39 Bng 4.5 Bnh tớch i th ch yu ca trõu b bnh tiờn mao trựng gõy nhim 40 Bng 4.6 T l nhim T evansi trõu, bũ trờn mt s a phng ca huyn ng H tnh Thỏi Nguyờn 42 Bng 4.7 T l phỏt hin ca KIT CATT s mu huyt (+) 43 Bng 4.8 T l phỏt hin ca KIT ELISA s mu huyt (+) 44 Bng 4.9 T l trõu nhim tiờn mao trựng qua ng dng KIT CATT v KIT ELISA chn oỏn 45 Bng 4.10 So sỏnh kh nng phỏt hin tiờn mao trựng ca KIT CATT v KIT ELISA vi phng phỏp tiờm truyn chut bch 46 DANH MC CC HèNH Trang Hỡnh 2.1: Cu to ca Trypanosoma Hỡnh 4.1: th din bin thõn nhit ca trõu gõy nhim 33 Hỡnh 4.2: th din bin thõn nhit ca trõu gõy nhim 33 Hỡnh 4.3: th din bin thõn nhit ca trõu gõy nhim 34 Hỡnh 4.4: th din bin thõn nhit ca trõu i chng 34 Hỡnh 4.5: th din bin thõn nhit ca trõu i chng 35 Hỡnh 4.6: th din bin thõn nhit ca trõu i chng 35 Hỡnh 4.7: th so sỏnh din bin thõn nhit ca trõu lụ gõy nhim v lụ i chng 36 CC CH VIT TT cs CATT ELISA HE kADN LATEX NSC Nxb TMT Tr T PBS : Cng s : Card Agglutination Trypanosomiasis Tet : Enzym - Linked Immunosobent Assay : Hematoxilin - Eosin : Kinettopplast Acid Nucleic Deoxyribose : Latex Agglutination Tet : Nguyờn sinh cht : Nh xut bn : Tiờn mao trựng : Trang : Trypanosoma : Dung dch mui m photphat : micro MC LC Trang Phn 1: M U 1.1 t 1.2 Mc tiờu nghiờn cu 1.3 í ngha khoa hc v ý ngha thc tin ca ti 1.3.1 í ngha khoa hc 1.3.2 í ngha thc tin Phn 2: TNG QUAN TI LIU 2.1 C s khoa hc ca ti 2.1.1 c im hỡnh thỏi, cu trỳc v phõn loi tiờn mao trựng 2.1.1.1 Phõn loi tiờn mao trựng ký sinh gia sỳc nhai li 2.1.1.2 c im hỡnh thỏi, cu to ca tiờn mao trựng 2.1.1.3 Cu trỳc khỏng nguyờn ca tiờn mao trựng Trypanosoma evansi 2.1.2 Dch t hc bnh tiờn mao trựng 2.1.2.1 Phõn b ca bnh 2.1.2.2 Vt ch v vt mụi gii truyn bnh tiờn mao trựng 2.1.2.3 Tui vt ch, mc bnh 10 2.1.3 c im bnh lý v lõm sng ca bnh 10 2.1.3.1 c im bnh lý 10 2.1.3.2 Triu chng lõm sng ca bnh tiờn mao trựng trõu, bũ 11 2.1.3.3 Bnh tớch ca bnh tiờn mao trựng 13 2.1.4 Nhng phng phỏp chn oỏn bnh tiờn mao trựng 13 2.1.4.1 Chn oỏn lõm sng 13 2.1.4.2 Chn oỏn thớ nghim 13 2.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu nc v ngoi nc 19 2.2.2 Tỡnh hỡnh nghiờn cu trờn th gii 20 Phn 3: I TNG, VT LIU, NI DUNG V PHNG PHP NGHIấN CU 23 3.1 i tng v vt liu nghiờn cu 23 3.1.1 i tng nghiờn cu 23 3.1.2 Vt liu nghiờn cu 23 3.2 a im v thi gian nghiờn cu 24 3.2.1 a im nghiờn cu 24 3.2.2 Thi gian nghiờn cu: 3/06/2013 n ngy 18/11/2013 24 3.3 Ni dung nghiờn cu 24 3.3.1 c tớnh gõy bnh ca T evansi trờn trõu gõy nhim 24 3.3.2 ng dng KIT huyt chn oỏn bnh tiờn mao trựng trõu, bũ ti huyn ng H tnh Thỏi Nguyờn 24 3.3.2.1 Thit lp phng phỏp 24 3.3.2.2 ng dng KIT huyt chn oỏn bnh T evansi gõy trờn n trõu, bũ huyn ng H tnh Thỏi Nguyờn 24 3.4 Phng phỏp nghiờn cu 25 3.4.1 Phng phỏp ly mu 25 3.4.2 Phng phỏp phỏt hin tiờn mao trựng mu 25 3.4.2.1 Phng phỏp xem ti (Direct smear) 25 3.4.2.2 Phng phỏp nhum Giemsa tiờu bn mỏu khụ (Ramanovsky) 25 3.4.2.3 Phng phỏp tiờm truyn ng vt thớ nghim 26 3.4.3 Phng phỏp m tiờn mao trựng mỏu ng vt gõy nhim v xỏc nh liu gõy nhim 26 3.4.3.1 Phng phỏp xỏc nh s tiờn mao trựng/ml mỏu chut bch 26 3.4.3.2 Phng phỏp xỏc nh liu gõy nhim 27 3.4.4 Gõy nhim T evansi cho trõu thớ nghim 27 3.4.5 Phng phỏp xỏc nh cỏc ch tiờu theo dừi trõu 27 3.4.5.1.Phng phỏp xỏc nh thi gian T evansi bt u xut hin mỏu trõu gõy nhim 27 3.4.5.2 Phng phỏp theo dừi thõn nhit v triu chng lõm sng 27 3.4.5.3 Phng phỏp m khỏm bnh tớch 28 3.4.5.4 Phng phỏp lm tiờu bn vi th 28 3.4.6 Phng phỏp so sỏnh kh nng phỏt hin tiờn mao trựng ca KIT chn oỏn vi phng phỏp tiờm truyn chut bch 28 3.4.7 Cỏc bc thc hin phn ng CATT 28 3.4.8 Cỏc bc thc hin phn ng ELISA 28 3.5 Phng phỏp x lý s liu 29 Phn 4: KT QU V THO LUN 31 4.1 c tớnh gõy bnh ca T evansi trờn trõu gõy nhim 31 4.1.1 Thi gian T evansi bt u xut hin v thi gian trõu gõy nhim cú biu hin lõm sng 31 4.1.2 Din bin thõn nhit ca trõu gõy nhim 32 4.1.3 Triu chng lõm sng ch yu ca trõu sau gõy nhim 38 4.1.4 S thay i mt s ch tiờu mỏu trõu gõy nhim 39 4.1.5 Bnh tớch i th ch yu ca trõu b bnh tiờn mao trựng gõy nhim 40 4.1.6 Bin i vi th mt s ni quan ca trõu bnh gõy nhim 41 4.2 ng dng KIT huyt chn oỏn bnh tiờn mao trựng trõu, bũ mt s a phng ca huyn ng H tnh Thỏi Nguyờn 42 4.2.1 T l nhim T evansi trõu, bũ trờn mt s a phng ca huyn ng H tnh Thỏi Nguyờn 42 4.2.2 T l phỏt hin ca KIT CATT s mu huyt (+) 43 4.2.3 T l phỏt hin ca KIT ELISA s mu huyt (+) 44 4.2.4 T l phỏt hin trõu nhim tiờn mao trựng bng mt s phng phỏp chn oỏn 45 4.2.5 So sỏnh kh nng phỏt hin tiờn mao trựng ca KIT CATT v KIT ELISA vi phng phỏp tiờm truyn chut bch 45 Phn 5: KT LUN V NGH 47 5.1 Kt lun 47 5.2 Tn ti 47 5.3 ngh 48 TI LIU THAM KHO 49 I Ti liu ting vit 49 II Ti liu ting Anh 51 Phn M U 1.1 t Bnh tiờn mao trựng l bnh ký sinh trựng ng mỏu khỏ ph bin trõu, bũ v nhiu loi ng vt khỏc Khi mc bnh th cp tớnh thng st cao 41 - 41,70C vi cỏc triu chng thn kinh nh ngó qu, kờu rng, i vũng trũn Trõu, bũ bnh s cht sau - 15 ngy th tớnh, cỏc triu chng lõm sng nh hn, bnh kộo di - thỏng, vt ngy cng gy, da khụ mc, niờm mc mt t mỏu mu tớa, ụi cú chm mỏu, chy nc mt, mt cú nhiu d c nh keo, niờm mc mt vng nht hay sm Sc kho ca trõu bũ bnh suy yu dn, kộm n, kộm nhai li, i phõn tỏo cú ln mỏu hoc i thỏo, phõn lng, mựi thi khm, cú vt i a c mng rut nỏt tng on Thng thy cú thu thng hu, c, nỏch, chõn, hỏng Trng hp bnh nng, vt t ngt st cao, bng chng to ri ln cht Theo s liu ca Phm S Lng (1982) [9], Phan ch Lõn (2004) [11], Phan Vn Chinh (2006) [2], bnh tiờn mao trựng xut hin nhiu vựng trờn c nc, vi t l mc khỏ cao: trờn trõu l 13 - 30%, trờn bũ l - 14%, ú t l gia sỳc cht/gia sỳc mc lờn ti 6,3 - 20% Cng theo bỏo cỏo ca cỏc tỏc gi trờn, t l mc Trypanosoma evansi gia sỳc vựng nỳi v trung du cao hn cỏc vựng ng bng v ven bin Trong ú, nc ta, chn nuụi gia sỳc nhai li cung cp sc kộo, tht, sa li trung ch yu cỏc tnh nỳi v trung du - l cỏc vựng cú iu kin t nhiờn thớch hp cho s phỏt trin chn nuụi gia sỳc nhai li, nhng c s h tng phc v cụng tỏc chn oỏn v iu tr ti a phng cũn yu kộm; dn ti h qu l bnh tiờn mao trựng tr nờn ph bin hn, nghiờm trng hn v gõy thit hi ln hn Tnh Thỏi Nguyờn cng l mt nhng tnh nỳi cú t l trõu, bũ cú kh nng b mc bnh tiờn mao trựng cao Hin nc ta ó s dng nhiu phng phỏp chn oỏn bnh tiờn mao trựng nh: phng phỏp chn oỏn truyn thng, phng phỏp chn oỏn huyt hc, phng phỏp chn oỏn sinh hc phõn t Trong ú, phng phỏp chn oỏn huyt hc c ỏnh giỏ l cú nhy v c hiu cao, cho kt qu nhanh v cú kh nng chn oỏn vi s lng mu ln thi gian ngn T nhng nm 1964 - 2006 cỏc tỏc gi Trnh Vn Thnh, on Vn Phỳc, Phan ch Lõn, Phm S Lng, Lờ Ngc M, Lng T Thu, Vng Th Lan Phng, Phan Vn Chinh ó nghiờn cu v bnh tiờn mao trựng vựng ng bng v ven bin Tuy nhiờn, nhng nghiờn cu v bnh tiờn mao trựng nỳi cũn rt hn ch, vỡ vy cha cú bin phỏp chn oỏn v phũng tr bnh hiu qu cao cú c s khoa hc xut bin phỏp chn oỏn lõm sng v chn oỏn huyt hc gúp phn gii quyt nhng khú khn cụng tỏc chn oỏn v ch ng phũng chng bnh, chỳng tụi thc hin ti: Nghiờn cu c im bnh lý, lõm sng trõu gõy nhim Trypanosoma evansi v ng dng KIT chn oỏn bnh tiờn mao trựng trờn n trõu, bũ ti Thỏi Nguyờn 1.2 Mc tiờu nghiờn cu Xỏc nh c im bnh lý, lõm sng ca bnh tiờn mao trựng gõy trờn trõu Xỏc nh nhy v c hiu ca KIT huyt hc ng dng chn oỏn nhanh bnh tiờn mao trựng cho trõu, bũ tnh Thỏi Nguyờn 1.3 í ngha khoa hc v ý ngha thc tin ca ti 1.3.1 í ngha khoa hc Kt qu ca ti l nhng thụng tin khoa hc v c im bnh lý v lõm sng bnh tiờn mao trựng trõu gõy nhim V kh nng ng dng, quy trỡnh s dng v hiu qu ca KIT huyt hc chn oỏn bnh tiờn mao trựng cho trõu, bũ 1.3.2 í ngha thc tin ti giỳp cỏc c quan thỳ y v ngi chn nuụi ỏp dng bin phỏp chn oỏn nhanh bnh tiờn mao trựng, t ú cú bin phỏp phũng chng nhm hn ch t l nhim v thit hi T evansi gõy ra; gúp phn nõng cao nng sut chn nuụi; thỳc y ngnh chn nuụi trõu, bũ phỏt trin 46 Bng 4.10 So sỏnh kh nng phỏt hin tiờn mao trựng ca KIT CATT v KIT ELISA vi phng phỏp tiờm truyn chut bch a phng (xó) Hung Thng Quang Sn Nam Hũa Tớnh chung S trõu kim tra 15 15 15 45 KIT CATT KIT ELISA 2 2 Tiờm truyn chut bch 2 Kt qu bng 4.10 cho thy: Sau s dng phng phỏp tiờm truyn chut bch phỏt hin tiờn mao trựng ó cho kt qu tng ng vi vic ng dng KIT CAT v KIT ELISA C mu dng tớnh vi KIT CATT v KIT ELISA cng ng thi dng tớnh vi tiờm truyn chut bch C th l: Xó Hung Thng cú mu phỏt hin tiờn mao trựng, xó Quang Sn cú mu phỏt hin tiờn mao trựng; xó Nam Hũa cú mu phỏt hin tiờn mao trựng Nh vy ta cú th khng nh rng vic ng dng KIT CATT v KIT ELISA chn oỏn bnh tiờn mao trựng cú hiu qu cao t l phỏt hin tiờn mao trựng tng ng vi t l phỏt hin bng phng phỏp tiờm truyn ng vt thớ nghim T kt qu ng dng KIT CATT v KIT ELISA vo chn oỏn phỏt hin bnh tiờn mao trựng, chỳng tụi cú nhn xột nh sau: C hai loi KIT ny u cú hiu qu cao, thi gian tin hnh nhanh Tuy nhiờn quỏ trỡnh thc hin chỳng tụi thy vic ng dng KIT ELISA vo chn oỏn l khỏ phc vy thc hin cỏc a phng s gp nhiu khú khn v cú th lm cho kt qu chn oỏn thiu chớnh xỏc 47 PHN KT LUN V NGH 5.1 Kt lun T kt qu thc hin ti: Nghiờn cu c im bnh lý, lõm sng trõu gõy nhim Trypanosoma evansi v ng dng KIT chn oỏn bnh trờn n trõu bũ nuụi ti Thỏi Nguyờn chỳng tụi cú mt s kt lun sau: Bnh lý v lõm sng bnh TMT trờn trõu: - Gõy nhim vi liu 3x107 T evansi/trõu, thi gian T evansi xut hin mỏu sm nht l ngy th v mun nht l ngy th sau gõy nhim Trõu cú triu chng st lờn xung, cn st (39,00C - 39,70C) kộo di - ngy ri gim, ngh st - ngy ri li st tip, mt sng cú d, gy, lụng khụ xự, run ry - C trõu gõy nhim u xut hin triu chng lõm sng, sm nht vo ngy th v mun nht vo ngy th sau gõy nhim - Trõu gõy nhim m khỏm thy cú bnh tớch: Tim nhóo, xoang bao tim tớch nc vng; phi sung huyt v t mỏu tng ỏm; gan sng to, nht mu; lỏch sng, mm nhn v nht mu; hch lõm ba sng, t mỏu; c nhóo, mu nht nht, nhỏt ct r nc; xoang ngc v xoang bng tớch dch mu vng nht ng dng kớt huyt chn oỏn bnh TMT trờn n trõu, bũ - Trõu, bũ xó: Hung Thng, Quang Sn, Nam Hũa thuc huyn ng H tnh Thỏi Nguyờn, nhim tiờn mao trựng vi t l: trõu l 12%; bũ l 8,82% - T l phỏt hin ca KIT CATT s mu huyt trõu dng tớnh l 91,7%, s huyt bũ dng tớnh l 100% - T l phỏt hin ca KIT ELISA s mu huyt trõu, bũ dng tớnh l 100% - T l trõu, bũ trờn thc a nhim tiờn mao trựng qua chn oỏn bng KIT CATT, KIT ELISA v tiờm truyn chut bch u l 15,56% 5.2 Tn ti - S lng trõu gõy nhim cũn ớt - ng dng KIT trờn trõu, bũ vi s lng cũn ớt nờn cha cú kt qu 48 chc chn v hiu qu chn oỏn ca KIT ó th nghim 5.3 ngh Tip tc trin khai th nghim KIT CATT v KIT ELISA vic chn oỏn phỏt hin tiờn mao trựng ti cỏc a phng cú th ỏnh giỏ khỏch quan v chớnh xỏc v hiu qu ca chỳng 49 TI LIU THAM KHO I Ti liu ting vit Phm Chin, Nguyn c Tõn, Lờ c Quyt (1999), Kt qu kho sỏt ký sinh trựng ng mỏu trờn n bũ huyn Mi Dinh Daklak", Kt qu hot ng khoa hc k thut Thỳ y, tr 53 Phan Vn Chinh (2006), Bnh tiờn mao trựng Trypanosoma evansi trõu, bũ nuụi ti cỏc tnh Trung v bin phỏp phũng tr, Lun ỏn Tin s nụng nghip, H Ni Nguyn Quc Doanh (1998), Nghiờn cu mt s c tớnh sinh hc ca trypanosoma evansi (Steel,1885), bnh hc T evansi gõy nờn - s dng khỏng nguyờn bo qun chn oỏn, Lun ỏn tin s Nụng nghip Nguyn Quc Doanh (1999), Mt s c tớnh sinh hc ca T evansi (Steel, 1885), bnh hc chỳng gõy ra, quy trỡnh bo qun v s dng ging T evansi chn oỏn bnh tiờn mao trựng, Lun ỏn Tin s nụng nghip, H Ni Lng Vn Hun, Lờ Hu Khng (1997), Giỏo trỡnh Ký sinh trựng Thỳ y, Trng i hc Nụng lõm TP H Chớ Minh Nguyn ng Khi (1995), "V triu chng sy thai bnh tiờn mao trựng trõu, bũ T evansi", Tp khoa hc k thut thỳ y, III, s 1, tr 69 - 71 Nguyn Th Kim Lan, Nguyn Th Lờ, Phm S Lng, Nguyn Vn Quang (2008), Ký sinh trựng hc thỳ y (giỏo trỡnh dựng cho bc cao hc), Nxb Nụng nghip, H Ni Nguyn Th Kim Lan (2011), Nhng bnh ký sinh trựng ph bin gia cm, ln v loi nhai li Vit Nam (Sỏch chuyờn kho dựng cho o to sau i hc), Nxb Nụng nghip, H Ni Phm S Lng (1982), Mt s c im dch t hc bnh tiờn mao trựng trõu, bũ Trypanosoma evansi cỏc tnh phớa Bc Vit Nam, Lun ỏn Phú tin s khoa hc Thỳ y 10 Phan ch Lõn (1974), Thnh phn h mũng Tabanidae v vai trũ truyn bnh ca nú Bc Vit Nam, Tp Khoa hc K thut Nụng nghip 11 Phan ch Lõn (1994, 2004), Bnh ngó nc trõu bũ, Nxb Nụng nghip, H Ni, tr 56 - 73 50 12 Phan Lc, Trn Vn Quyn, Nguyn Vn Th (1995), Tỡnh hỡnh nhim n bo ký sinh n trõu mt s vựng trung du v ng bng phớa bc Vit Nam Tp khoa hc k thut thỳ y 13 H Vit Lng (1998), n bo ký sinh, c im dch t v bin phỏp phũng tr bnh Trypanosomiasis bũ thuc Nam Trung B, Lun Thc s khoa hc Nụng nghip, H Ni 14 Lờ Ngc M (1994), "Kt qu bc u thit lp phn ng ELISA chn oỏn bnh tiờn mao trựng", Tp khoa hc k thut thỳ y, II, s 1, tr 111 - 115 15 Lờ Ngc M (1994), "Phng phỏp ELISA phỏt hin khỏng nguyờn v cỏc phng phỏp ký sinh trựng hc chn oỏn bnh tiờn mao trựng (T evansi) trõu, bũ mc bnh t nhiờn", Tp Khoa hc k thut Thỳ y, II, s 16 H Vn Nam (1963), Mt s nhn xột v bnh tiờn mao trựng nụng trng H Trung (Thanh Hoỏ), Vin Khoa hc k thut nụng nghip Vit Nam 17 on Vn Phỳc (1994), Kt qu ng dng mt s phng phỏp huyt hc chn oỏn bnh tiờn mao trựng trõu thc a", Tp Khoa hc k thut Thỳ y, II, s 18 Vng Th Lan Phng (2004), Nghiờn cu khỏng nguyờn b mt Trypanosoma evansi phõn lp t trõu, bũ phớa Bc Vit Nam v tinh ch khỏng nguyờn dựng phn ng dch hunh quang giỏn tip, Lun ỏn Tin s Nụng nghip, H Ni 19 Nguyn Vn Thin (2008), Thng kờ sinh vt hc ng dng chn nuụi, Nxb Nụng nghip, H Ni 20 Trnh Vn Thnh (1982), Cụng trỡnh nghiờn cu ký sinh trựng Vit Nam, NXB Khoa hc v K thut H Ni 21 Lng T Thu (1994), "Kt qu sn xut Conjugate hunh quang chn oỏn bnh tiờn mao trựng v so sỏnh nhy ca nú vi cỏc phng phỏp chun khỏc", Tp Khoa hc k thut Thỳ y, II, s 22 Lng T Thu, Lờ Ngc M (1996), "Nghiờn cu ng dng cỏc phng phỏp ngng kt trờn bn nha (CATT) chn oỏn tỡnh hỡnh bnh tiờn mao trựng (do T evansi) trờn n trõu Vit Nam", Tp Khoa hc k thut Thỳ y, IV, s 23 H Th Thun (1985), Tỡnh hỡnh trõu, bũ nhim bnh tiờn mao trựng v nghiờn cu quy trỡnh phũng tr cho trõu, bũ sa cỏc tnh phớa Nam Kt qu hot ng khoa hc k thut thỳ y 51 II Ti liu ting Anh 24 Aquino L P., Machado R Z., Alessi A C., Marques L C., de Castro M B., Malheiros E B (1999), Clinical, parasitological and immunological aspects of experimental infection with Trypanosoma evansi in dogs, Departamento de Patologia Veterinasria, Faculdade de Cienecias Agrasrias e Veterinasrias, Unesp, Jaboticabal, SP, 14870-000, Brasil (Mem Inst Oswaldo Cruz) 25 Barry J D., Tumer C M R (1991), The diamics of antigenic variation and growth of African trypanosomes, Parasitology Today, 7, pp 207 - 21 26 Chen Qijun (1992), Trypannosoma evansi in China Seminar 27 Davison (1999), Evaluation of diagnostic test for T evansi and then application in epidemiogical studies in Indonesia, PhS thesis Eliburgh 28 Diall O., Bocoum Z., Diarra B., Sanogo Y., Coulibaly Z., Waùgalo Y (1993), Epidemiology of trypanosomiasis caused by T evansi in camels in mali: results of parasitological and clinical survey, Laboratoire central vestesrinaire de Bamako, Mali (Rev Elev Med Vet Pays Trop) 29 Haridy F M., El-Metwally M T., Khalil H H., Morsy T A (2011), Trypanosoma evansi in dromedary camel: with a case report of zoonosis in greater Cairo, Egypt, J Egypt Soc Parasitol 30 Hoare C A (1972), The Trypanosomes of MammaIs A zoological monograph, Black well scientific Publication Oxford and Edinburgh 31 Losos G J., Ikede B O (1972), Review of the pathology of diseases of domectic and laboratory animal caused by T congolense, T vivax, T brucei, T rhoensiense and T gambiense, Joumal of Veterinary pathology, 9, pp - 15 32 Luckins A G (1988), Trypanosoma evansi in Asia, Parasitology today, pp - 49 33 Payne R C., Sukanto I P., Partoutomo S., Polytedi F (1992), Experimental infection of Friesian Holstein calves with an Indonesian isolate of Trypanosoma evansi, Trop Med Parasitol 34 Reid S A (2002), Command and retenue T evansi in Autralia, Tedences Parasitology Silva Rams (1995), Pathogenesis of T evansi infection in dogs and horses, haematological and clinical aspects, Science Rur 52 35 Tamarit A., Gutierrez C., Arroyo R., Jimenez V., Zagalỏ G., Bosch I., Sirvent J., Alberola J., Alonso I., Caballero C (2010), Trypanosoma evansi infection in mainland Spain, Vet Parasitol, 167(1):74 - 36 Ul Hasan M., Muhammad G., Gutierrez C., Iqbal Z., Shakoor A., Jabbar A (2006), Prevalence of Trypanosoma evansi infection in equines and camels in the Punjab region, Pakistan, Ann N Y Acad Sci; 1081:322 - 37 Umezawa E S., Souza A I., Pinedo Cancino V., Marcondes M., Marcili A., Camarrgo L M., Caamacho A A., Stolf A M., Teixeira M M (2009), :TESA blot for the diaqnosis of Chaqas disease in doqs from co-endemic regions for Trypanosoma cruzi, Trypanosoma evansi and Leishmania chagasi , Acta Trop 38 Vanhamme L., Pays E., (1995), Control of gene expression in Trypanosomes, Microbiol, Reb 39 Vickerman K and Luckins A G (1969), Localization of variable antigens in the surface coat of Trypanosma bruicei using ferritinconiugated antibody, Nature, 244 40 Wuyts N, Chokesajjawatee N, Panyim S (1994), A simplified and highly sensitive detection of Trypanosoma evansi by DNA amplification, Department of Biochemistry, Faculty of Science, Mahidol University, Bangkok, Thailand (Southeast Asian J Trop Med Public Health) 41 Woo (1971), Eveluation of the hematocrite centrufyge and other technique for the field diagnosis of humain Trypanosomiasis and filariasis, Acta tropica, 28 53 MT S HèNH NH MINH HA TI nh 1: Ba trõu trc gõy nhim nh : Soi mu mỏu ti di kớnh hin vi nh : Ly mỏu trõu ó gõy nhim T.evansi nh 4: T evansi tiờu bn mỏu ti nh 5: T evansi tiờu bn mỏu nhum giema 54 nh 6: Trõu gõy nhim T evansi cú triu chng run ry, da khụ, lụng xự; thy thng mi mt v cú d c, bi chõn sau nh 7: M khỏm trõu kim tra bnh tớch 55 nh 8: Bnh tớch i th ca trõu gõy nhim 56 i thc bo nh 9: Mụ lỏch xut huyt, xõm nhp t bo viờm nh 10: Cỏc xoang lỏch b gión, xut hin nhiu t bo viờm v i thc bo (Tiờu bn nhum HE, phúng i 200 ln) (Tiờu bn nhum HE, phúng i 400 ln) Cỏc lp c tim gión rng nh 11: Cỏc lp c tim b gión nh 12: Cỏc si c tim phỡ i (Tiờu bn nhum HE, phúng i 200 ln) (Tiờu bn nhum HE, phúng i 400 ln) Dch phự li cỏc ph nang nh 13: Dch phự li cỏc ph nang (Tiờu bn nhum HE, phúng i 200 ln) nh 14: Cỏc ph nang sung huyt, xõm nhp nhiu t bo viờm (Tiờu bn nhum HE, phúng i 400 ln) 57 nh 15: Ly mỏu bũ ti xó Nam Hũa kim tra TMT bng KIT v tiờm truyn chut bch nh 17: Kim tra s xut hin ca TMT trờn chut nh 16: Tiờu bn nhum giemsa mu mỏu trõu, bũ thu thp ti xó Huyn ng H nh 18: Tiờm truyn mu mỏu t trõu, bũ ca xó sang chut bch 58 nh 19: ng dng kit CATT chn oỏn bnh TMT cho trõu, bũ 59 Dng c, húa cht s dng vi kit ELISA Pha loóng mu huyt p a ELISA Ph huyt vo cỏc ging Kt qu ca phn ng ELISA nh : 20 ng dng kit ELISA chn oỏn bnh TMT cho trõu, bũ 60 TRNG H NễNG LM THI NGUYấN CNG HềA X HI CH NGHA VIT NAM KHOA CHN NUễI TH Y c lp - T - Hnh phỳc GIY XC NHN THC TP Kớnh gi: Ban ch nhim khoa chn nuụi thỳ y Trng i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn B mụn Dc lý v V sinh an ton thc phm khoa Chn nuụi thỳ y xỏc nhn sinh viờn Lờ Vn ip, lp 41TY - Khoa Chn nuụi Thỳ y, Trng i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn ó thc ti Phũng thớ nghim b mụn Dc lý v V sinh an ton thc phm khoa Chn nuụi thỳ y vi ti: Nghiờn cu c im bnh lý, lõm sng trõu gõy nhim Trypanosoma evansi v ng dng KIT chn oỏn bnh trờn n trõu bũ nuụi ti Thỏi Nguyờn Thi gian thc t ngy 3/6/2013 n ngy 18/11/2013 Sau thi gian thc tp, b mụn Dc lý v V sinh an ton thc phm khoa Chn nuụi thỳ y cú nhn xột i vi sinh viờn Lờ Vn ip nh sau Trong quỏ trỡnh thc tp, sinh viờn ip ó chp hnh tt ni quy, quy ch ca khoa, ca trng, ni thc hin ti Cú li sng, o c tt, chm ch, hũa nhó vi mi ngi, khụng ngng hc hi, tip thu nõng cao trỡnh chuyờn mụn Theo dừi s liu ca ti nghiờm tỳc, hon thnh tt nhim v c giao Cỏc s liu bn bỏo cỏo l nhng s liu ó c thụng qua B mụn Dc lý v V sinh an ton thc phm xỏc nhn sinh viờn Lờ Vn ip, lp 41TY- Khoa Chn nuụi Thỳ y, Trng i hc Nụng Lõm Thỏi Nguyờn ó hon thnh tt t thc tt nghip Kớnh mong nh trng v cỏc thy cụ giỏo khoa Chn nuụi Thỳ y tip tc giỳp sinh viờn Lờ Vn ip hon thnh tt khúa lun tt nghip Thỏi nguyờn, ngy 25 thỏng 11 nm 2013 Xỏc nhn ca trng b mụn [...]... LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu - Bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây trên trâu - KIT huyết thanh học để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng theo nguyên lý CATT và theo nguyên lý của phản ứng ELISA 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu - Tiên mao trùng (Trypanosoma evansi) : Được phân lập từ trâu, bò mắc bệnh tiên mao trùng tại một số tỉnh... dung nghiên cứu 3.3.1 Đặc tính gây bệnh của T evansi trên trâu gây nhiễm - Thời gian xuất hiện T evansi trên trâu gây nhiễm - Diễn biến thân nhiệt của trâu gây nhiễm - Diễn biến lâm sàng ở trâu gây nhiễm - Sự thay đổi một số chỉ tiêu máu ở trâu gây nhiễm - Bệnh tích đại thể của trâu gây nhiễm - Biến đổi vi thể ở một số nội quan của trâu bị bệnh do gây nhiễm 3.3.2 Ứng dụng KIT huyết thanh trong chẩn đoán. .. 2.1.3.1 Đặc điểm bệnh lý Khi ruồi trâu, mòng đốt, hút máu và truyền tiên mao trùng vào trâu, bò, ngựa, tiên mao trùng xâm nhập vào da, gây ra vết viêm trên mặt da Ta có thể quan sát được phản ứng viêm ở da của thỏ, cừu, dê và bò gây nhiễm thực nghiệm tiên mao trùng, kích thước chỗ viêm phụ thuộc vào số lượng tiên mao trùng được tiêm truyền (ước chừng khoảng 108 tiên mao trùng có thể gây viêm da - ở vị... bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò Lavara và Rosail năm 1912 trong tác phẩm kinh điển nói về tiên mao trùng và bệnh do tiên mao trùng gây ra đã mô tả đầy đủ về bệnh lý học của bệnh tiên mao trùng 21 Ligard (1902), Rudrrink và Wiekerrman đã có những công trình nghiên cứu về cơ thể và kháng nguyên tiên mao trùng Chen Qijun (1992) [26] cho biết: T evansi gây bệnh cho hầu hết các loài động vật như trâu, bò, ... bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò tại huyện Đồng Hỷ tỉnh Thái Nguyên 3.3.2.1 Thiết lập phương pháp - Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu của KIT CATT - Xác định độ nhạy, độ đặc hiệu của KIT ELISA - So sánh khả năng phát hiện tiên mao trùng của KIT chẩn đoán với phương pháp tiêm truyền chuột bạch 3.3.2.2 Ứng dụng KIT huyết thanh trong chẩn đoán bệnh do T evansi gây ra trên đàn trâu, bò ở huyện Đồng Hỷ tỉnh Thái. .. tễ bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò, dê, lạc đà Từ cuối mùa thu, mùa đông và đầu mùa xuân, trâu bò nhiễm tiên mao trùng phải sống trong điều kiện thời tiết lạnh, thiếu thức ăn nên sức đề kháng giảm, bệnh thường phát ra vào thời gian này và trâu bò bị đổ ngã hàng loạt Tiên mao trùng có sức đề kháng yếu, dễ chết khi tiếp xúc với nước cất, cồn và thuốc sát trùng 2.1.3 Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng của bệnh. .. tỉnh Thái Nguyên - Xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trên trâu, bò nuôi tại Đồng Hỷ Thái Nguyên bằng KIT CATT 25 - Xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng cho trâu, bò nuôi tại Đồng Hỷ Thái Nguyên bằng KIT ELISA 3.4 Phương pháp nghiên cứu 3.4.1 Phương pháp lấy mẫu Phương pháp lấy mẫu máu Sát trùng cổ trâu, bò bằng cồn 700 Dùng kim trích máu vô trùng chọc ngang một tĩnh mạch cổ, cho máu chảy vào ống Tube... Bắc và được giữ giống trong động vật thí nghiệm (dùng để gây bệnh nhân tạo cho trâu) - Trâu khoẻ mạnh: 6 con, khối lượng 120 - 130 kg/con - Mẫu bệnh phẩm (gan, lách, phổi, ruột, tim, thận, cơ, dịch hoàn) của trâu mắc bệnh tiên mao trùng do gây nhiễm - Mẫu huyết thanh của trâu, bò nghi bị bệnh tiên mao trùng ở một số địa phương của tỉnh Thái Nguyên - Hai loại KIT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng theo nguyên. .. tích dịch màu vàng nhạt; có những đám keo nhầy vàng dưới vùng da thuỷ thũng 2.1.4 Những phương pháp chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 2.1.4.1 Chẩn đoán lâm sàng Các biểu hiện lâm sàng đặc trưng của bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò, ngựa không phải lúc nào cũng phát hiện được Rất nhiều gia súc mang bệnh nhưng khó phát hiện các triệu chứng đặc trưng, nhất là đối với những gia súc mắc bệnh tiên mao trùng mãn tính... của KIT chẩn đoán với phương pháp tiêm truyền chuột bạch * Các bước tiến hành: - Bước 1: Lấy mẫu máu của trâu, bò đã nhiễm tiên mao trùng - Bước 2: Sử dụng cả 2 phương pháp chẩn đoán ( Dùng KIT chẩn đoán và phương pháp tiêm truyền chuột bạch ) trên cùng một mẫu máu trâu, bò * Kết quả: Khả năng phát hiện tiên mao trùng của KIT cao nếu tỷ lệ phát hiện tiên mao trùng ngang bằng với tỷ lệ phát hiện tiên mao ... evansi ứng dụng KIT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng đàn trâu, bò Thái Nguyên 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Xác định đặc điểm bệnh lý, lâm sàng bệnh tiên mao trùng gây trâu Xác định độ nhạy độ đặc hiệu KIT. .. T evansi gây đàn trâu, bò huyện Đồng Hỷ tỉnh Thái Nguyên - Xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu, bò nuôi Đồng Hỷ Thái Nguyên KIT CATT 25 - Xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng cho trâu, bò. .. cứu - Bệnh tiên mao trùng Trypanosoma evansi gây trâu - KIT huyết học để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng theo nguyên lý CATT theo nguyên lý phản ứng ELISA 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu - Tiên mao trùng