ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN NGỌC DOAN Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG, NỒNG ĐỘ CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG VÀ CHẤT HỮU CƠ TỰ NHIÊN ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG HOA LAN HỒ ĐIỆP (Phalaenopsis sp.) TỪ PHÁT HOA BẰNG KỸ THUẬT IN VITRO” KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2010 - 2014 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN NGỌC DOAN Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG, NỒNG ĐỘ CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG VÀ CHẤT HỮU CƠ TỰ NHIÊN ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG HOA LAN HỒ ĐIỆP (Phalaenopsis sp.) TỪ PHÁT HOA BẰNG KỸ THUẬT IN VITRO” KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Khoa : Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm Khóa học : 2010 - 2014 Người hướng dẫn : ThS Nguyễn Thị Tình Khoa CNSH - CNTP , ĐH Nông Lâm Thái Nguyên Thái Nguyên, 2014 LỜI CẢM ƠN Được trí ban giám hiệu nhà trường, ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài : “Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường, nồng độ chất kích thích sinh trưởng chất hữu tự nhiên đến khả nhân giống hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp từ phát hoa kỹ thuật in vitro” Qua tháng thực tập phòng nuôi cấy mô Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm đến em hoàn thành đề tài Để đạt kết ngày hôm em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới cô giáo ThS Nguyễn Thị Tình tận tình bảo, hướng dẫn em thời gian thực đề tài Em xin gửi lời cảm ơn tới Ks Lã Văn Hiền bảo thời gian en thực tập phòng nuôi cấy mô Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè hết lòng động viên, giúp đỡ tạo điều kiện vật chất tinh thần cho em trình học tập, nghiên cứu Do trình độ thời gian thực đề tài có giới hạn nên đề tài tránh khỏi sai sót Em mong nhận đóng góp ý kiến thầy cô bạn để đề tài em hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Sinh viên Nguyễn Ngọc Doan DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) .26 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) 28 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) .29 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 32 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng KT, CR đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) .34 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả rễ lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 35 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 4.1 Biểu đồ ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) 27 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) 28 Hình 4.3 Biểu đồ ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 30 Hình 4.4 Biểu đồ ảnh hưởng nồng độ BA NAA đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 32 Hình 4.5 Biểu đồ ảnh hưởng hàm lượng KT, CR đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 34 Hình 4.6 Biểu đồ ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả rễ hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 36 DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT BAP : 6-Benzylaminopurie CR : Cà rốt CT : Công thức DNA : Deoxyribonucleic acid ĐC : Đối chứng IAA : Indol axetic acid Kinetine : 6-Furfurylaminopurine KT : Khoai tây MS : Murashige & Skoog’s NAA : Naphlene axetic acid ND : Nước dừa TN : Thí nghiệm VTM : Vitamin VW : Vacin & Went MỤC LỤC Trang PHẦN 1: MỞ ĐẦU .1 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Yêu cầu nghiên cứu 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .2 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn .2 PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp 2.1.1 Nguồn gốc phân bố .3 2.1.2 Phân loại 2.1.3 Đặc điểm thực vật học lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp 2.1.4 Điều kiện trồng lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp .8 2.1.4.1 Giá thể 2.1.4.2 Nhiệt độ 2.1.4.3 Ánh sáng .9 2.1.4.4 Nước tưới .9 2.1.4.5 Phân bón .10 2.2 Nuôi cấy mô tế bào thực vật 10 2.2.1 Khái niệm .10 2.2.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 2.2.2.1 Tính toàn tế bào 11 2.2.2.2 Sự phân hóa phản phân hóa tế bào 11 2.2.3 Sự phát triển mẫu điều khiển yếu tố môi trường 12 2.3 Tình hình nghiên cứu lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp giới Việt Nam 17 2.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 17 2.3.2 Tình hình nghiên cứu nhân giống lan Hồ Điệp Việt Nam 18 PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Đối tượng (vật liệu) phạm vi nghiên cứu 19 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 19 3.3 Hóa chất thiết bị 19 3.3.1 Hóa chất 19 3.3.2 Thiết bị 19 3.4 Nội dung nghiên cứu 20 3.5 Phương pháp nghiên cứu 20 3.5.1 Cách bố trí thí ngiệm .20 3.5.2 Chỉ tiêu theo dõi 25 3.6 Xử lý số liệu .25 PHẦN 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .26 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường, nồng độ chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 20 ngày nuôi cấy) 26 4.1.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 20 ngày nuôi cấy) 26 4.1.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 20 ngày nuôi cấy) .26 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ chất kích sinh trưởng chất hữu tự nhiên đến khả nhân nhanh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 60 ngày nuôi cấy) 29 4.2.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ kinetin đến khả nhân nhanh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 60 ngày nuôi cấy) 29 4.2.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 60 ngày nuôi cấy) 31 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả rễ hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 60 ngày nuôi cấy) 35 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .38 5.1 Kết luận 38 5.2 Đề nghị .38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp giống lan yêu thích không màu sắc, kiểu dáng mà mang nét đẹp sang trọng trang nhã, hoa lan Hồ Điệp lại lâu tàn Chính vậy, nhanh chóng trở thành sản phẩm trồng trọt mang lại hiệu kinh tế cao không Việt Nam mà nhiều nước giới Đài Loan, Nhật Bản, Hà Lan, Mỹ… [4],[7] Hồ Điệp loài lan khó nhân giống, thường cho hệ số nhân thấp điều kiện vườn ươm [10] Để có số lượng lớn giống, đồng đáp ứng nhu cầu thị trường thật nan giải Trong năm gần đây, công nghệ lai giống kết hợp gieo hạt ống nghiệm cho tỷ lệ nẩy mầm cao, tạo nên đa dạng màu sắc, cấu trúc, kích thước hoa sau hệ Tuy nhiên nhân giống phương pháp gieo hạt mang tính ngẫu nhiên thu có tính trạng yêu thích hay không gần có cho hoa đẹp mẹ Vì vậy, nhà nuôi cấy mô nước giới thường dùng phát hoa làm vật liệu nuôi cấy, phát hoa Hồ Điệp có chứa mắt ngủ phần gốc, có bề mặt nhẵn bóng dễ khử trùng, tỷ lệ thành công cao mà tạo dòng ổn định di truyền Để giải khó khăn giống thực tế sản xuất, kích thích sản xuất hoa lan Hồ Điệp phát triển tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường, nồng độ chất kích thích sinh trưởng chất hữu tự nhiên đến khả nhân giống hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp từ phát hoa kỹ thuật in vitro” 1.2 Mục đích nghiên cứu Nhân nhanh giống lan Hồ Điệp tìm môi trường, nồng độ chất kích thích sinh trưởng chất hữu tự nhiên thích hợp nâng cao khả tái sinh, nhân nhanh rễ từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp 1.3 Yêu cầu nghiên cứu - Xác định ảnh hưởng môi trường chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp - Xác định ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng chất hữu tự nhiên đến khả nhân nhanh chồi hoa lan Hồ Điệp kỹ thuật in vitro - Xác định ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ hoa lan Hồ Điệp kỹ thuật in vitro 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống hoa lan Hồ Điệp phương pháp nuôi cấy in vitro 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Xây dựng quy trình nhân nhanh giống lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp phương pháp nuôi cấy in vitro, để đảm bảo cung cấp số lượng lớn giống có chất lượng, đồng chi phí rẻ cho sản xuất 37 Kết 2,13 rễ/ chồi thấp so với 2,78 cấy môi trường (đa lượng MS + Vi lượng MS, không bổ sung chất hữu cơ) (2,78 rễ) chiều dài rễ cao (1,20 cm) [11] 38 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu cho thấy: - Môi trường có bổ sung BAP 1mg/l, MS + agar 6g/l + đường 30g/l + than hoạt tính 2g/l + pepton 2g/l + nước dừa 150ml/l cho kết tái sinh chồi hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp cao với tỉ lệ chồi tái sinh 86,67% - Môi trường có bổ sung BAP 0,5 mg/l + NAA 0,3 mg/l KT 50 g/l CR 50 g/l với môi trường MS + agar 6g/l + đường 30g/l + than hoạt tính 2g/l + pepton 2g/l + nước dừa 150ml/l cho hệ số nhân hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp cao 7,37 lần - Môi trường có bổ sung IBA 0,5 mg/l với môi trường MS + agar 6g/l + đường 30g/l + than hoạt tính 2g/l + pepton 2g/l + nước dừa 150ml/l cho tỉ lệ tạo rễ lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp cao với 2,13 rễ/chồi 5.2 Đề nghị Tiếp tục nghiên cứu sinh trưởng, phát triển lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp đưa môi trường tự nhiên: + Ảnh hưởng điều kiện chăm sóc nhiệt độ, độ ẩm + Ảnh hưởng loại giá thể 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Ngô Xuân Bình, Bùi Bảo Hoàn, Nguyễn Thị Thúy Hà (2003), Giáo trình công nghệ sinh học, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Đinh Thị Giang (2011), “Nghiên cứu ảnh hưởng số biện pháp kỹ thuật đến sinh trưởng hoa lan Hồ Điệp phalaenopsis” Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp trường Đại học Nông Lâm, Đại học Thái Nguyên Trần Hợp (1990) Phong lan Việt Nam, tập 2, Nxb Khoa học kĩ thuật Hà Nội Phan Thúc Huân (1989), Hoa lan cảnh vấn đề phát triển sản xuất kinh doanh xuất khẩu, Nxb Nông nghiệp thành phố Hồ Chí Minh Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam,quyển 1,2,3 Nxb Trẻ Nguyễn Như Khanh, Nguyễn Văn Đính (2011), Giáo trình chất điều hòa sinh trưởng thực vật, Nxb Giáo dục Việt Nam Nguyễn Xuân Linh, Nguyễn Thị Kim Lý (2005), Ứng dụng công nghệ sản xuất hoa, Nxb lao động, Hà Nội Trần Thị Lệ, Trương Thị Bích Phượng, Trần Thị Triêu Hà (2008), Giáo trình Công nghệ sinh học thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Võ Thị Bạch Mai (1996), “Nhân giống vô tính số loại lan Hồ Điệp (phalaenopsis sp)” Luận án phó tiến sĩ khoa học Thành phố Hồ Chí Minh 10 Nguyễn Công Nghiệp (2000), Trồng hoa lan, Nxb Thành phố Hồ Chí Minh 40 11 Nguyễn Thị Pha, Trần Thị Xuân Mai, Lê Thị Mai Trang Nguyễn Thị Liên (2011) “ Nuôi cấy mầm ngủ phát hoa lan Hồ Điệp (phalaenosis sp.) Tạp chí Khoa học Công nghệ trang 12-20 12 Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý, Nguyễn Trường Sơn, Đỗ Năng Vịnh (2003), “Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống nuôi trồng phong lan Phalaenopsis (lan Hồ Điệp)” Báo cáo hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc 2003 13 Nguyễn Thiện Tịch cộng (1996), Kỹ thuật nuôi trồng hoa lan, Nxb Nông nghiệp, thành phố Hồ Chí Minh 14 Nguyễn Văn Uyển, 1993, Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác chọn giống trồng, Nxb Thành phố Hồ Chí Minh 15 Đào Thanh Vân, Đặng Tố Nga (2007), Giáo trình hoa lan, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 16 Đỗ Năng Vịnh (2005), “Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng”, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 17 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp, 2009, Công nghệ sinh học tập - Công nghệ sinh học tế bào, Nxb Giáo dục Tài liệu tiếng Anh 18 Griesbach RJ (2002) “Development of Phalaenopsis Orchids for the Mas-Market” Trends in new crops and new uses Alexandria, VA: ASHS 19 Hass-Von Schmude N.F.(1983) Klonale Massenvemehrung von Phalaenopsis Die Orchidee, 34: 242-248 20 Hass-Von Schmude NF (1985) “Tissue culturing Phalaenopsis using leaves and leaf segments” In : TanK (ed.) Proceedings of 11th Orchid Conference, p.311, Miami 41 21 Tanaka M and Sakanishi Y (1977) “Clonal propagation of Phalaenopsis by leaf culture” American Orchid Society Bulletin, 46 : 733-737 22 Tanaka M and Sakanishi Y (1985) ”Regeneration capacity of in vitro cultured leaf segment excised from mature Phalaenopsis plants Bulletin”, University of Osaka Prefecture, Series B, 37 : 1-4 23 Tanaka M (1987) “Studies on the clonal propagation of Phalaenopsis through in vitro culture” Memoir, Facculty of Agriculture, Kagawa Univiversity, Japan, 49: 1-85 24 Park SY Murthy HN and Paek KY (2002) “Rapid prop- agation of Phalaenopsis from floral stalk-derived leaves” In Vitro Cellular and Developmental Biology-Plant 38: 168-172 42 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Một số kết ảnh thí nghiệm CT 3: MS TLTS 76,67% Hình 1: Ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) CT 3: IBA mg/l TLTS 86,67% Hình 2: Ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) 43 Kinetine mg/l HSN (lần) 0,0 0,3 0,5 0,7 1,0 3,53 3,77 4,37 3,83 3,17 Hình Ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) BA (mg/l) HSN (lần) 0,0 0,3 0,5 0,7 1,0 2,33 3,97 5,17 3,10 2,90 Hình Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) 44 KT g/l CR g/l HSN (lần) 25 25 50 50 50 25 25 50 5,13 7,37 5,77 5,67 Hình Ảnh hưởng hàm lượng khoai tây, cà rốt đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 60 ngày nuôi cấy) Hình Ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả rễ (sau 60 ngày nuôi cấy) 45 Phụ lục 2: Kết xử lí số liệu Bảng 1: Ảnh hưởng số môi trường đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE TN11 10/ 6/14 20:57 :PAGE Anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi tu phat hoa lan Ho Diep VARIATE V003 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2091.67 697.222 41.83 0.000 * RESIDUAL 133.333 16.6667 * TOTAL (CORRECTED) 11 2225.00 202.273 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN11 10/ 6/14 20:57 :PAGE Anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi tu phat hoa lan Ho Diep MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLTS 43.3333 66.6667 76.6667 56.6667 SE(N= 3) 2.35702 5%LSD 8DF 10.8667 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN11 10/ 6/14 20:57 :PAGE Anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi tu phat hoa lan Ho Diep F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTS GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 62.500 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 14.222 4.0825 9.5 0.0001 | | | | 46 Bảng 2: Ảnh hưởng BAP đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE TN22 10/ 6/14 21:13 :PAGE Anh huong cua nong BAP den kha nang tai sinh tu phat hoa lan Ho Diep VARIATE V003 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2773.33 693.333 34.67 0.000 * RESIDUAL 10 200.000 20.0000 * TOTAL (CORRECTED) 14 2973.33 212.381 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN22 10/ 6/14 21:13 :PAGE Anh huong cua nong BAP den kha nang tai sinh tu phat hoa lan Ho Diep MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLTS 73.3333 80.0000 86.6667 66.6667 46.6667 SE(N= 3) 2.58199 5%LSD 10DF 9.39594 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TA BLE FILE TN22 10/ 6/14 21:13 :PAGE Anh huong cua nong BAP den kha nang tai sinh tu phat hoa lan Ho Diep F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 71.333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 14.573 4.4721 7.2 0.0000 | | | | 47 Bảng 3: Ảnh hưởng nồng độ Kinetin đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE TN3 26/ 5/14 21:55 :PAGE Anh hong cua nong Kinetine den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.32000 580000 62.14 0.000 * RESIDUAL 10 933336E-01 933336E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.41333 172381 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3 26/ 5/14 21:55 :PAGE Anh hong cua nong Kinetine den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 HSN 3.53333 3.76667 4.36667 3.83333 3.16667 SE(N= 3) 0.557774E-01 5%LSD 10DF 0.175757 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3 26/ 5/14 21:55 :PAGE Anh hong cua nong Kinetine den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.7333 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.41519 0.96609E-01 2.6 0.0000 | | | | 48 Bảng 4: Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE TN4 26/ 5/14 22: :PAGE Anh hong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 14.6293 3.65733 457.16 0.000 * RESIDUAL 10 800003E-01 800003E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 14.7093 1.05067 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN4 26/ 5/14 22: :PAGE Anh hong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 HSN 2.33333 3.96667 5.16667 3.10000 2.90000 SE(N= 3) 0.516399E-01 5%LSD 10DF 0.162719 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN4 26/ 5/14 22: :PAGE Anh hong cua nong BA den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.4933 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0250 0.89443E-01 2.6 0.0000 | | | | 49 Bảng 5: Ảnh hưởng hàm lượng khoai tây, cà rốt đến khả tạo chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE TN555 26/ 5/14 22:15 :PAGE Anh hong cua nong KT va CR den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 8.35000 2.78333 477.14 0.000 * RESIDUAL 466669E-01 583336E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 8.39667 763333 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN555 26/ 5/14 22:15 :PAGE Anh hong cua nong KT va CR den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 HSN 5.13333 7.36667 5.76667 5.66667 SE(N= 3) 0.440960E-01 5%LSD 8DF 0.143793 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN555 26/ 5/14 22:15 :PAGE Anh hong cua nong KT va CR den kha nang nhan nhanh cua lan Ho Diep F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 5.9833 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.87369 0.76376E-01 1.3 0.0000 | | | | 50 Bảng :Ảnh hưởng nồng độ IBA đến khả rễ hoa lan Hồ Điệp BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTR FILE TN6 26/ 5/14 22:51 :PAGE Amh huong cua nong IBA den kha nang re cua lan Ho Diep VARIATE V003 TLTR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1.79733 449333 96.29 0.000 * RESIDUAL 10 466667E-01 466667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.84400 131714 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN6 26/ 5/14 22:51 :PAGE Amh huong cua nong IBA den kha nang re cua lan Ho Diep MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TLTR 1.46667 1.70000 2.13333 1.53333 1.06667 SE(N= 3) 0.394406E-01 5%LSD 10DF 0.124279 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN6 26/ 5/14 22:51 :PAGE Amh huong cua nong IBA den kha nang re cua lan Ho Diep F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLTR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.5800 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.36292 0.68313E-01 4.3 0.0000 | | | | 51 Phụ lục 3: Môi trường Môi trường MS Bottle Component Stock Solution (g/l) I NH4NO3 KNO3 82,5 95 II MgSO4 7H2O MgSO4 4H2O ZnSO4 7H2O CuSO4 5H2O 37,0 2,23 1,058 0,0025 III CaCl2.2H2O KI CoCl2.6H2O 44,0 0,083 0,0025 IV KH2PO4 H3BO3 Na2MoO4.2H2O V FeSO4 7H2O Na2EDTA 2H2O 17,0 0,62 0,025 2,784 3,724 Amount to take preparation (ml) Final concentratic (mg/ l) 20 1.650,0 1.900,0 10 370,0 22,3 10,6 0,025 10 440,0 0,83 0,025 10 170,0 6,2 0,25 10 27,85 37,25 0,5 2,0 0,1 0,5 0,5 2,0 0,1 0,5 mg/100ml Vitamin Nicotinic acid Glycine ThiamineHCl PyridoxineHCl 100 100 100 100 Inositol 100,0 Sucrose 30,000 Agar 5,6000 PH 5,8 [...]... máy ảnh Canon IXUS 115HS (Nhật Bản) 20 Ngoài ra còn các trang thiết bị khác của phòng thí nghiệm Khoa Công nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm 3.4 Nội dung nghiên cứu Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và chất kích thích sinh trưởng đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng và chất hữu cơ tự nhiên đến khả năng nhân. .. Ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng và chất hữu cơ tự nhiên đến khả năng nhân nhanh từ phát hoa lan Hồ Điệp Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của nồng độ kinetin đến khả năng nhân nhanh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp - Cách bố trí thí nghiệm: + CT1(Đ/C) : Nền + Kinetin (0,0 mg/l) + CT2 : Nền + Kinetin (0,3 mg/l) + CT3 : Nền + Kinetin (0,5 mg/l) + CT4 : Nền + Kinetin (0,7 mg/l) + CT5 : Nền + Kinetin (1,0 mg/l)... tuy nhiên ở CT 3 (môi trường MS) có tỷ lệ tái sinh lớn nhất 76,67% 28 4.1.2 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của BAP đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 20 ngày nuôi cấy) Bảng 4.2 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của BAP đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) Hàm Số mẫu Số mẫu tái Tỉ lệ mẫu lượng Chất CT đưa vào sinh tái sinh BAP lượng chồi... dung 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và chất kích thích sinh trưởng đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của một số môi trường đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp - Công thức thí nghiệm: + CT1 : Môi trường 1/2 MS + CT2 : Môi trường 3/4 MS + CT3 : Môi trường MS + CT4 : Môi trường 3/2 MS Sử dụng thành phần khoáng, VTM trong môi trường MS có bổ... chất kích thích sinh trưởng đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp (sau 20 ngày nuôi cấy) 4.1.1 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của một số môi trường đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) Một trong yếu tố quan trọng nhất trong sự phát triển của thực vật là thành phần chất dinh dưỡng trong môi trường nuôi cấy Nồng độ thành phần chất khoáng đa... những phát hoa to khoẻ, cắt những đốt có chứa mắt ngủ vết cắt cách mắt ngủ 2 – 3 cm, tách bỏ vỏ bao quanh mắt ngủ Tình trạng mắt ngủ phải còn trắng xanh hay hơi đỏ của màu phát hoa, loại bỏ những mắt ngủ bị hoá đen và bị trày sướt - Phạm vi nghiên cứu: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường, nồng độ chất kích thích sinh trưởng và chất hữu cơ tự nhiên đến tái sinh, nhân nhanh và ra rễ lan Hồ Điệp bằng phương... tính 2g/l + pepton 2g/l + nước dừa 150ml/l - Các chất kích thích sinh trưởng: Có bổ sung BA và NAA với nồng độ cho kết quả tạo chồi cao nhất ở thí nghiệm 4 - Thiết kế thí nghiêm tương tự thí nghiệm 3 Nội dung 3: Ảnh hưởng của chất kích thích sinh trưởng đến khả năng ra rễ của hoa lan Hồ Điệp Phalaenopsis sp - Thí nghiệm 6: Ảnh hưởng của nồng độ IBA đến khả năng ra rễ - Công thức thí nghiệm: + CT1(Đ/C)... trong môi trường nuôi cấy Để tìm được nồng độ các chất khoáng thích hợp cho sự sinh trưởng, phát triển của mô ở giai đoạn vào mẫu, chúng tôi đã thay đổi tỷ lệ thành phần khoáng của môi trường MS Bảng 4.1 Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của một số môi trường đến khả năng tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp (sau 20 ngày nuôi cấy) CT Môi trường Số mẫu Số mẫu tái đưa vào sinh (mẫu) (mẫu) Tỉ lệ mẫu tái sinh. .. cytokinin có nhiều trong hạt, quả đang lớn, mô phân sinh Cytokinin kích thích hoặc ức chế nhiều quá trình sinh lý, trao đổi chất Cùng với auxin, cytokinin điều khiển sự phát sinh hình thái trong nuôi cấy mô Tỷ lệ auxin/cytokinin cao sẽ kích thích tạo rễ, ngược lại sẽ 16 hình thành chồi Cytokinin cảm ứng sự hình thành chồi bên và ức chế ưu thế đỉnh Quá trình sinh trưởng dãn dài của tế bào cũng chịu ảnh hưởng. .. sau: Auxin có ảnh hưởng tới tính hướng động của thực vật, tiêu biểu là tính hướng sáng và hướng đất Auxin gây ra hiện tượng ưu thế đỉnh (sự sinh trưởng của chồi đỉnh sẽ ức chế chồi nách) Auxin khởi động việc hình thành rễ bên và rễ phụ do auxin kích thích sự phân chia của tế bào trụ bì-nơi rễ sẽ sinh trưởng xuyên qua vỏ và biểu bì Ngoài ra, auxin còn có tác động đến việc hình thành chồi hoa, sự phát triển ... tài: “NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG, NỒNG ĐỘ CHẤT KÍCH THÍCH SINH TRƯỞNG VÀ CHẤT HỮU CƠ TỰ NHIÊN ĐẾN KHẢ NĂNG NHÂN GIỐNG HOA LAN HỒ ĐIỆP (Phalaenopsis sp.) TỪ PHÁT HOA BẰNG KỸ THUẬT IN VITRO ... trường chất kích thích sinh trưởng đến khả tái sinh chồi từ phát hoa lan Hồ Điệp Nội dung 2: Nghiên cứu ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng chất hữu tự nhiên đến khả nhân nhanh từ phát hoa lan Hồ. .. Điệp - Xác định ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng chất hữu tự nhiên đến khả nhân nhanh chồi hoa lan Hồ Điệp kỹ thuật in vitro - Xác định ảnh hưởng chất kích thích sinh trưởng đến khả rễ hoa