LỜI NÓI ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Trứng làm giàu với acid béo chưa no nhiều nối đôi (PUFA) omega-3 (ω-3, n-3) xem loại thực phẩm chức Các acid béo thuộc nhóm omega-6 tiền chất quan trọng eicosaenoid hệ thống paracrine (như prostaglandin, leukotriene, prostacyclin, thromboxane acid hydroxyd) Các acid béo thuộc nhóm omega-3 có vai trò quan trọng chức thần kinh, thị giác, điều hòa hoạt động tim mạch miễn dịch, hỗ trợ cho phát triển não, cải tiến thị giác Tổng hợp nội sinh AA, EPA DHA xảy từ tiền thân acid béo thiết yếu có thức ăn acid linoleic (LA) acid α-linolenic (ALA) thông qua nối dài chuỗi carbon enzyme Δ5 Δ6 desaturations (quá trình chuyển đổi chất béo no thành chất béo chưa no, cách đưa vào nối đôi nguyên tử carbon acid béo) Đối với hoạt động desaturate, Δ5 giao cho gen FADS1, FADS2 desaturase Δ6 Tuy nhiên, chuyển hóa ALA thể người thành EPA DHA đạt 0,1-8%, cần đảm bảo lượng ăn vào acid béo đầy đủ Mức độ ăn vào ALA DHA gia tăng dễ dàng người tiêu thụ nhận trứng làm giàu acid béo omega-3 số lượng acid béo trứng phụ thuộc vào phần gà mái đẻ Ở đồng sông Cửu Long số loại chất béo có sẵn dầu cám gạo dầu cá tra đưa vào làm nguồn bổ sung chất béo cho heo nái gà mái đẻ Dầu cám gạo dầu cá tra giàu acid béo thiết yếu acid linoleic 33,1 10,9%, nhiên loại dầu lại chứa chủ yếu omega-6 omega-9 Do cần có phối hợp loại chất béo với để tăng tỷ lệ acid béo omega-3 giảm tỷ lệ omega-6/omega-3 thức ăn gà mái đẻ Ở nước ta có nghiên cứu công bố việc làm giàu chất lượng trứng tăng cường hàm lượng acid béo thiết yếu DHA vào trứng để cải thiện giá trị dinh dưỡng phần người Nội dung nghiên cứu luận án - So sánh ảnh hưởng nguồn mức độ bổ sung chất béo lên suất sinh sản gà mái đẻ thành phần acid béo trứng - Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn cung cấp chất béo tỷ lệ acid béo omega-6/omega-3 bổ sung phần lên thành phần acid béo lòng đỏ trứng gà - Xác định tỷ lệ dầu phù hợp nên sử dụng cho gà mái đẻ - So sánh hiệu sử dụng nguồn chất béo lên tích lũy acid béo n-3 lòng đỏ - Đánh giá thay đổi biểu gen FADS (fatty acid desaturase) gen FADS1 FADS2 mã hóa enzyme quan trọng cho desaturation - Đánh giá ảnh hưởng nguồn cung cấp chất béo lên hàm lượng cholesterol lòng đỏ trứng Những đóng góp luận án Đã tìm thấy Giống (Isa Brown Hisex Brown) tuổi gà không ảnh hưởng lên thành phần hóa học, có tác động lên thành phần acid béo trứng Đã tìm thấy bổ sung dầu cám gạo với mức 2% vào phần làm tăng tỷ lệ đẻ khối lượng trứng gà Đã tìm thấy hàm lượng DHA ω-3 lòng đỏ tăng, cholesterol giảm phần có tỷ số ω-6/ ω-3 thấp Đã phát biểu gen FADS1 FADS2 có quan hệ tuyến tính cao với hàm lượng DHA lòng đỏ trứng * Cấu trúc luận án Luận án gồm phần mở đầu, chương, danh mục công trình nghiên cứu, danh mục tài liệu tham khảo Toàn nội dung trình bày 154 trang, có 43 bảng 19 hình, sử dụng 290 tài liệu tham khảo đính kèm 19 trang phụ lục Nội dung luận án công bố báo số Tạp Chic Khoa Học Phát Triển Nông Thôn, đăng tạp chí Khoa Học Kỹ Thuật Chăn Nuôi 2014, đăng tạp chí Khoa Học trường Đại Học Cần Thơ năm 2014 đăng kỹ yếu Hội nghị toàn quốc Chăn Nuôi - Thú Y năm 2015 Các công trình công bố ghi cuối luận án Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU Trong chương trình bày kiến thức vài trò acid béo thiết yếu, omega-3, omega-6 omega-9, chức khác biệt acid béo tỷ lệ omega-6/omega-3 đời sống động vật Bên cạnh đó, điểm qua công trình nghiên cứu chế sinh tổng hợp acid béo chưa no nhiều nối đôi vai trò enzyme desaturase FADS1 FADS2 trình chuyển hóa omega-3 thành EPA DHA Quá trình tổng hợp acid béo trứng, nguồn gốc cholesterol lòng đỏ trứng vai trò sinh học cân cholesterol gà mái đẻ Ngoài ra, công trình nghiên cứu việc làm giàu omega-3 cho trứng cách cung cấp nguồn dầu khác phần gà mái đẻ Chƣơng 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đề tài tiến hành qua thí nghiệm: Thí nghiệm Ảnh hưởng giống gà ISA Brown Hisex Brown tuổi gà mái lên thành phần hóa học thành phần acid béo trứng gà Thí nghiệm Xác định thành phần acid béo số loại dầu mỡ dùng chăn nuôi gia súc gia cầm Thí nghiệm Ảnh hưởng nguồn cung cấp chất béo phần lên suất, chất lượng trứng, thành phần acid béo cholesterol lòng đỏ trứng lipid huyết tương gà mái đẻ giống gà Hisex Brown Thí nghiệm Ảnh hưởng việc bổ sung dầu cám gạo kết hợp với dầu cá hồi phần lên suất sinh sản thành phần acid béo, cholesterol lòng đỏ trứng giống gà Hisex Brown Thí nghiệm Ảnh hưởng tỷ lệ acid béo omega-6/omega-3 phần lên suất sinh sản thành phần acid béo, cholesterol lòng đỏ trứng gà giống gà Hisex Brown Thí nghiệm Ảnh hưởng nguồn bổ sung dầu phần lên tương quan biểu FADS1 FADS2 với hàm lượng acid béo omega-6 omega-3 lòng đỏ trứng gà giống gà Hisex Brown 2.1 Mẫu vật động vật thí nghiệm Thí nghiệm thực giống gà Hisex Brown ISA Brown từ 21-48 tuần tuổi; thí nghiệm 3, 4, thực gà Hisex browm giai đoạn đẻ trứng từ 32-50 tuần tuổi Thí nghiệm tiến hành loại chất béo động vật dầu cá hồi (2 mẫu), dầu cá tra (3 mẫu) mỡ heo (2 mẫu) loại dầu dầu phộng, dầu nành, dầu dừa dầu cám gạo, loại dầu mẫu Có tổng cộng 19 mẫu phân tích Dầu dừa mua từ nhà máy sản xuất sản phẩm dừa Bến Tre, phần dầu dừa ép từ phần cơm vỏ lụa dừa Dầu phộng dầu nành dầu tinh luyện mua siêu thị Dầu cám gạo dạng dầu thô mua công ty Willmar Agro Vietnam, Cám Cái lân, TP Cần Thơ Dầu cá tra lấy từ sở chuyên sản xuất dầu cá tra huyện Thốt Nốt, TP Cần Thơ Dầu cá hồi nhập Chile mua từ công ty AFIEX, An Giang Mỡ heo tươi mua từ chợ chế biến cách ly trích nhiệt độ theo phương pháp thủ công 2.2 Thức ăn phần thí nghiệm Thí nghiệm 1: Cả hai giống gà nuôi loại thức ăn thí nghiệm công ty Emivest cung cấp (Bảng 2.1) Bảng 2.1: Thành phần hóa học phần thí nghiệm Thành phần hóa học % trạng thái gần khô Vật chất khô (DM) Protein thô (CP) Tro (Ash) Béo thô (EE) Xơ trung tính (NDF) Xơ thô (CF) Calci (Ca) Photpho (P) ME, MJ/kg 89,91 16,56 12,88 4,81 14,87 2,89 3,78 1,65 12 Thí nghiệm 3: Đề tài thực phần thức ăn thí nghiệm (xem Bảng 2.2) Bảng 2.2: Các phần thí nghiệm Khẩu phần Nguồn cung cấp Tỷ lệ bổ sung Dầu cám gạo KPCS + 1% dầu cám gạo (DCG1) KPCS + 2% dầu cám gạo (DCG2) KPCS + 3% dầu cám gạo (DCG3) Dầu nành KPCS + 1% dầu nành (DN1) KPCS + 2% dầu nành (DN2) KPCS + 3% dầu nành (DN3) Dầu cá hồi KPCS + 1% dầu cá hồi (DCH1) KPCS + 2% dầu cá hồi (DCH2) KPCS + 3% dầu cá hồi (DCH3) Thí nghiệm Đề tài thực phần thức ăn thí nghiệm, NTĐC sử dụng 3% DCG, NT thí nghiệm sử dụng DCG kết hợp với DCH trình bày sau (1) NTĐC: nghiệm thức đối chứng có 3% DCG (2) NT1: 0,5% DCG + 2,5% DCH (3) NT2: 1,0% DCG + 2,0% DCH (4) NT3: 1,5% DCG + 1,5% DCH (5) NT4: 2,0% DCG + 1,0% DCH (6) NT5: 2,5% DCG + 0,5% DCH Thí nghiệm Đề tài thực phần thức ăn thí nghiệm, KPCS không bổ sung chất béo, trình bày sau: (1) Khẩu phần sở (KPCS): không bổ sung chất béo (2) NT1: KPCS + 0,5%DN + 2,5% DCH; có tỷ lệ ω-6/ω-3 = (TLO2) (3) NT2: KPCS + 1,0%DN + 2,0% DCH; ω-6/ ω-3 = (TLO3) (4) NT3: KPCS + 1,5% DN + 1,5% DCH; ω-6/ ω-3 = (TLO4) (5) NT4: KPCS + 2,0% DN + 1,0% DCH; ω-6/ ω-3 = (TLO5) (6) NT5: KPCS + 2,5% DN + 0,5% DCH; ω-6/ ω-3 = (TLO6) Thí nghiệm Đề tài thực 11 phần thức ăn thí nghiệm (Bảng 2.3) Bảng 2.3: Các phần thí nghiệm TT Khẩu phần thí nghiệm Khẩu phần sở (KPCS) KPCS + 1% dầu nành (DN1) KPCS + 1,5 % dầu nành (DN1.5) KPCS + 2% dầu nành (DN2) KPCS + 2,5% dầu nành (DN2.5) KPCS + 3% dầu nành (DN3) TT Khẩu phần thí nghiệm KPCS + 1% dầu cá hồi (DC1) KPCS + 1,5 % dầu cá hồi (DC1.5) KPCS + 2% dầu cá hồi (DC2) 10 KPCS + 2,5% dầu cá hồi (DC2.5) 11 KPCS + 3% dầu cá hồi (DC3) 2.3 Bố trí thí nghiệm phân tích thống kê Tất đề tài bố trí theo phương pháp thống kê sinh vật học tiến hành phân tích phương sai, sử dụng chương trình Minitab 16 2.4 Phƣơng pháp lấy mẫu trứng Thí nghiệm 1: Trước đưa gà vào thí nghiệm cho gà làm quen với thức ăn tuần bắt đầu lấy mẫu trứng gà qua giai đoạn, đầu kỳ (21TT), kỳ (38TT) cuối kỳ (54TT) Ở giai đoạn tuổi, mẫu lấy liên tục ngày, lấy tất số trứng đơn vị thí nghiệm, có tổng cộng 432 trứng Sau đơn vị thí nghiệm chọn ngẫu nhiên, từ Bảng số ngẫu nhiên trình bày Snedecor Cochran (1957), để khảo sát thành phần phân tích thành phần hóa học acid béo trứng Thí nghiệm 3, 4, 6: sau cho gà ăn thức ăn thí nghiệm tuần, mẫu trứng thu thập lần, lần cách lần hai tuần Mỗi lần lấy mẫu liên tục ngày, lấy tất số trứng đơn vị thí nghiệm, sau chọn ngẫu nhiên để khảo sát chất lượng phân tích thành phần acid béo (qui trình lấy mẫu thực theo thí nghiệm 1) 2.5 Phƣơng pháp thu mẫu trữ mẫu gan thí nghiệm Đến cuối kỳ thí nghiệm (sau 12 tuần cho ăn thức ăn thí nghiệm 10 tuần thí nghiệm 6), ô chuồng chọn ngẫu nhiên gà mái đẻ mổ lấy mẫu gan Mẫu gan gà đẻ sau lấy khỏi thể gà bảo quản nitơ lỏng nhiệt độ âm 196oC, sau mang phòng thí nghiệm trữ âm 80oC Sau phân lập RNA từ mẫu gan thực Real time RT – PCR để xác định biểu gen băng thiết kế sau: Mồi: Các cặp mồi sử dụng phản ứng Real time RT-PCR thiết kế dựa theo chương trình Primer Chi tiết cặp mồi thể qua Bảng 2.4 Bảng 2.4: Trình tự cặp mồi Gen Trình tự mồi (5’ 3’) Betaactin* Fw: GTGATGGACTCTGGTGATGG Rv: TGGTGAAGCTGTAGCCTCTC Fw: CAAATCGAGCACCACCTTTT Rv: TCTAGCCAGAGTTCCCCTGA Fw: CATTGGCTTGGCTAATGGTT Rv: CAAACTTGTGGACGATGTGG FADS1 FADS2 Sản hẩm (bp) Acc No 150 NM-205518 173 HQ667600.1 168 NM_001160428.2 2.6 Các tiêu theo dõi - Hàm lượng dưỡng chất thức ăn, phần trứng gà phân tích với tiêu như: vật chất khô (DM), protein thô (CP), béo thô (EE), tro, Canxi (Ca), Phospho (P) theo qui trình tiêu chuẩn AOAC (1994) Thành phần acid béo lòng đỏ trứng xác định phương pháp sắc ký khí -Các tiêu suất sinh sản như: tỷ lệ đẻ gà; tiêu tốn thức ăn/ngày, Khối lượng trứng, sản lượng trứng, hệ số chuyển hóa thức ăn -Các tiêu chất lượng trứng: gồm có khối lượng thành phần trứng tỷ lệ lòng trắng, lòng đỏ, tỷ lệ vỏ Chỉ số hình dáng, đơn vị Haugh (Haugh Unit, HU), độ dầy vỏ, màu sắc lòng đỏ, số lòng trắng đặc, số lòng đỏ -Thành phần lipid huyết tương gà triglycerid, cholesterol HDL-cholesterol, hàm lượng cholestrol lòng đỏ trứng -Biểu gen FADS1 FADS2 thực mẫu gan gà Sử dụng phương pháp Real time RT – PCR để xác định gen FADS1 FADS2 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Thí nghiệm 1: 3.1.1 Ảnh hƣởng giống gà tuổi lên thành phần trứng Giống tuổi gà ảnh hưởng có ý nghĩa lên khối lượng trứng tỷ lệ vỏ, nhừn không tác động lên tỷ lệ lòng đỏ lòng trắng (Bảng 3.1) Gà HIB cho khối lượng trứng, tỷ lệ vỏ cao gà ISB lứa tuổi Khối lượng trứng tăng theo tuổi gà mái đẻ Tỷ lệ vỏ giảm theo tuổi gà mái trứng to tỷ lệ vỏ giảm Bảng 3.1: Ảnh hƣởng giống tuổi gà lên thành phần trứng Giống * Tuần tuổi KL trứng, g TL vỏ, % TLLT,% TLLĐ , % b a 21 55,17 13,80 64,39 21,82 a b Hisex 38 61,00 12,57 62,37 25,07 a b 54 61,27 12,68 61,98 25,35 21 48,31c 12,82b 65,11 22,07 b b ISA 38 54,28 12,53 63,67 23,80 a b 54 61,70 12,47 62,55 24,98 a,b: số trung bình cột mang chữ số mũ khác nhau, sai khác có ý nghĩa (P[...]... dùng 3.5 Thí nghiệm 5 Ảnh hƣởng các tỷ lệ acid béo -6/-3 trong khẩu phần lên năng suất sinh sản và thành phần acid béo, cholesterol của lòng đỏ trứng gà 3.5.1 Ảnh hƣởng các tỷ lệ acid béo ω-6/ ω-3 trong khẩu phần lên năng suất sinh sản của gà thí nghiệm Bảng 3.12 cho thấy tỷ lệ acid béo ω-6/ ω-3 không ảnh hưởng lên tỷ lệ đẻ (P=0,76) và tiêu tốn thức ăn (TTTĂ) của gà thí nghiệm vì gà đang ở giai đoạn... giống gà Isa Brown và Hisex Brown và tuổi của gà mái đến khối lượng cũng như thành phần acid béo nuôi của lòng đỏ trứng khi nuôi cùng một loại thức ăn, nhưng không có sự khác biệt giữa giống và tuổi gà đến thành phần hóa học của quả trứng Nguồn cung cấp chất béo trong khẩu phần nuôi gà khá đa dạng bao gồm dầu mỡ từ công nghiệp chế biến nông-súc-thủy sản, có thành phần acid béo rất khác nhau và có khả năng... (2014) Ảnh hưởng của việc bổ sung dầu cám gạo và dầu cá hồi trong khẩu phần lên năng suất sinh sản và thành phần acid béo, cholesterol của lòng đỏ trứng giống gà Hisex Brown Tạp chí KHKT Chăn nuôi 12: 35-43 4 Lê Thanh Phương, Lưu Hữu Mãnh, Nguyễn Nhựt Xuân Dung (2014) Ảnh hưởng các tỷ lệ acid béo -6/-3 khẩu phần lên năng suất sinh sản và thành phần acid béo, cholesterol của lòng đỏ trứng gà Tạp Chí... ω-6/ω-3 trong khẩu phần từ 2 đến 3 cải thiện được tỷ lệ này tốt nhất cho quả trứng Tuy nhiên, hàm lượng cholesterol lòng đỏ trứng ít chịu sự tác động của nguồn chất béo trong khẩu phần 25 DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI 1 Lê Thanh Phương, Lưu Hữu Mãnh, Nguyễn Nhựt Xuân Dung (2014) Ảnh hưởng nguồn cung cấp chất béo trong khẩu phần đến năng suất, chất lượng trứng, thành phần axit béo. .. lệ acid béo ω-6/ ω-3 trong khẩu phần đã làm thay đổi thành phần acid béo của lòng đỏ trứng, hàm lượng DHA và Σ ω-3 cao nhất ở các khẩu phần có tỷ lệ ω-6/ ω-3 thấp nhất (TLO2) Ngược lại tỷ lệ Σ ω-6 tăng cùng với mức tăng của tỷ lệ ω-6/ ω-3 Như vậy khẩu phần TLO2 cải thiện chất lượng trứng tốt nhất về phương diện tăng hàm lượng DHA (Bảng 3.13) 19 3.5.3 Ảnh hƣởng các tỷ lệ acid béo ω-6/ ω-3 trong khẩu phần. . .trứng như tổng chất rắn, protein, chất béo của trứng, lòng đỏ, lòng trắng không bị ảnh hưởng bởi giống hay tuổi gà, tuy nhiên loại chất béo có ảnh hưởng bởi giống và tuổi gà nhất là hàm lượng DHA 3.2 Thí nghiệm 2: Xác định thành phần acid béo của một số dầu mỡ dùng trong chăn nuôi gia súc gia cầm 3.2.1 Thành phần acid béo của một số loại dầu mỡ thí nghiệm Dầu dừa có chứa ΣSFA cao nhất, trong. .. ω-3 thành DHA hoặc acid arachidonic 3.6 Thí nghiệm 6: Ảnh hƣởng nguồn bổ sung dầu trong khẩu phần lên tƣơng quan giữa biểu hiện FADS1 và FADS2 với hàm lƣợng acid béo omega-6 và omega-3 của lòng đỏ trứng gà 3.6.1 Ảnh hƣởng các mức độ bổ sung dầu nành và dầu cá trong khẩu phần lên thành phần acid béo của lòng đỏ trứng Các tỷ lệ bổ sung trong khẩu phần không làm thay đổi ∑SFA và ∑USFA của lòng đỏ trứng. .. béo trong khẩu phần lên năng suất, chất lƣợng trứng, thành phần acid béo và cholesterol của lòng đỏ trứng và lipid huyết tƣơng của gà mái đẻ 3.3.1 Ảnh hƣởng của nguồn cung cấp dầu và các tỷ lệ bổ sung lên năng suất trứng Các loại dầu bổ sung đã ảnh hưởng lên tỷ lệ đẻ của gà (P=0,01; Bảng 3.5) Bảng 3.5 Ảnh hƣởng các loại dầu trong khẩu phần lên năng suất sinh sản của gà Nguồn dầu Dầu cám gạo Dầu cá hồi... định thành phần acid béo của một số loại dầu mỡ dùng trong chăn nuôi gia súc gia cầm Kỷ Yếu Hội nghị Khoa Học Toàn Quốc Chăn Nuôi-Thú Y toàn quốc, ngày 28-29/4/2015, trang 224-231 NXB Nông Nghiệp 6 Lê Thanh Phương, Lưu Hữu Mãnh, Nguyễn Nhựt Xuân Dung (2015) Ảnh hưởng giống và tuổi của gà mái lên thành phần hóa học và thành phần acid béo của trứng gà Kỷ Yếu Hội nghị Khoa Học Toàn Quốc Chăn NuôiThú Y, ngày... cholesterol của huyết tương, thấp nhất ở gà nuôi bổ sung DN Tương tự, hàm lượng triglycerid thấp nhất ở khẩu phần DN, kế đến là DCH và cao nhất là DCG Ngược lại hàm lượng HDL-cholesterol cao nhất ở khẩu phần DCH, kế đến là DCG và thấp nhất ở DN 13 3.3.3 Ảnh hƣởng nguồn cung cấp dầu trong khẩu phần lên thành phần acid béo của lòng đỏ trứng Bảng 3.7 Ảnh hƣởng của nguồn cung cấp dầu lên thành phần acid béo (% ... sung chất béo lên suất sinh sản gà mái đẻ thành phần acid béo trứng - Nghiên cứu ảnh hưởng nguồn cung cấp chất béo tỷ lệ acid béo omega-6/omega-3 bổ sung phần lên thành phần acid béo lòng đỏ trứng. .. nghiệm: Thí nghiệm Ảnh hưởng giống gà ISA Brown Hisex Brown tuổi gà mái lên thành phần hóa học thành phần acid béo trứng gà Thí nghiệm Xác định thành phần acid béo số loại dầu mỡ dùng chăn nuôi gia... nghiệm Ảnh hưởng nguồn cung cấp chất béo phần lên suất, chất lượng trứng, thành phần acid béo cholesterol lòng đỏ trứng lipid huyết tương gà mái đẻ giống gà Hisex Brown Thí nghiệm Ảnh hưởng việc