Đang tải... (xem toàn văn)
1) Cô sôû lyù thuyeát cuûa phöông phaùp2) Ñònh luaät BEER3) Kyõ thuaät ñònh löôïng baèng phoå UVVIS4) Thieát bò ño phoå UVVIS5) ÖÙng duïngPhương pháp phân tích quang học dựa trên việc nghiên cứu sự tương tác của bức xạ ánh sáng trên chất khảo sát hoặc sự phát ra các bức xạ ánh sáng dưới một tác động hóa lý nào đó. Phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến, hay còn gọi là phương pháp quang phổ hấp thụ, hay phương pháp đo quang dựa trên khả năng hấp thụ chọn lọc các bức xạ rọi vào dung dịch của chất nghiên cứu trong một dung môi nhất định
Tóm tắt • 1) Cơ sở lý thuyết phương pháp • 2) Đònh luật BEER • 3) Kỹ thuật đònh lượng phổ UVVIS • 4) Thiết bò đo phổ UV-VIS • 5) Ứng dụng PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ LÀ GÌ??? Phương pháp phân tích quang học dựa việc nghiên cứu tương tác xạ ánh sáng chất khảo sát phát xạ ánh sáng tác động hóa lý KHÁI NIỆM VỀ PHƯƠNG PHÁP Phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến, hay gọi phương pháp quang phổ hấp thụ, hay phương pháp đo quang dựa khả hấp thụ chọn lọc xạ rọi vào dung dịch chất nghiên cứu dung mơi định Màu sắc ánh sáng: Tuỳ theo bước sóng ánh sáng chia thành vùng sóng : -Vùng tử ngoại 185 – 400 nm -Vùng khả kiến 400 – 760 nm Johann Wilhelm Ritter William Herschel MÁY QUANG PHỔ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN HĨA HỌC KIM LOẠI Máy quang phổ tử ngoại khả kiến chùm tia Máy quang phổ tử ngoại khả kiến cấu tạo - Nguồn sáng: cung cấp xạ điện từ - Bộ phận tán sắc: có nhiệm vụ chọn từ nguồn xạ bước sóng đặc trưng - Bộ phận đựng mẫu đo - Bộ phận detector dùng để đo cường độ tia xạ Cấu tạo chi tiết tính Nguồn sáng tạo xạ có cường độ khơng đổi tồn khoảng bước sóng, độ nhiễu thấp ổn định khoảng thời gian dài Bộ phận tán sắc tạo bước sóng khác từ tia sáng tán sắc góc khác Bộ phận tán sắc có hai loại: lăng kính cách tử -Lăng kính tạo ánh sáng nhiều màu cầu vồng từ ánh sáng mặt trời - Cách tử tạo góc tán xạ tuyến tính khơng phụ thuộc vào nhiệt độ Bộ phận đựng mẫu đo Cốc đo phải hồn tồn suốt tất bước sóng hấp thụ từ cốc làm giảm khoảng hấp thụ tuyến tính mẫu đo a)Cốc plastic hấp thụ mạnh 300nm b) Cốc thuỷ tinh hấp thụ mạnh vùng 320 nm c) Cốc thạch anh hấp thụ 210nm d) Cốc đo tốt cốc silica tổng hợp với chất lượng cao, suốt đến 190nm Detector Detector có nhiệm vụ chuyển tín hiệu ánh sáng thành tín hiệu điện Các máy quang phổ thường có detector ống nhân quang detector diode quang - Ống nhân quang có chức tổ hợp tín hiệu chuyển đổi qua vài giai đoạn khuyếch đại thân ống -diode quang có độ nhạy thấp khoảng UV thấp Giới hạn phát xấp xỉ 170-1100 nm detector sử dụng silicon Cấu tạo diode phát ánh sáng trắng Kiểm tra độ tinh khiết Vết tạp chất hợp chất hữu tinh khiết phát dễ dàng có cường độ hấp thu đủ lớn Ví dụ, rượu bán thị trường thường có lẫn Benzen, kiểm tra cách dung cuvet có b từ – 10cm để đo Nhận biết chất nghiên cứu cấu trúc Bằng cách so sánh phổ hấp thu với phổ hấp thu hợp chất thiên nhiên phổ mẫu chuẩn cho kết luận sản phẩm tổng hợp, dù hợp chất có màu carotenoit, antocxianin, porphirin, hay khơng màu alkane, alkene, Nghiên cứu hỗ biến Nhiều hợp chất tồn hai hay nhiều dạng khác nằm cân động gọi hỗ biến với dạng cấu tạo gọi dạng hỗ biến Dạng hỗ biến thường gặp hỗ biến xeto (λ = 275nm; ε = 20) đặc trưng cho nhóm C = lập, dạng hỗ biến enol (λ = 245nm; ε = 18000) gây nên nối đơi C=C C=O liên hợp, phân biệt dễ dàng dung mơi khác Phân tích hỗn hợp Để phân tích hỗn hợp phức tạp với nhiều thành phần, người ta thường dung PPSK lỏng với detector UV – VIS Các máy quang phổ UV – VIS đại có khả xác định nồng độ riêng rẽ hỗn hợp gồm n cấu tử Máy sử dụng tính chất cộng độ hấp thu để giải hệ phương trình cho kết nồng độ cấu tử hỗn hợp phân tích Xác định khối lượng phân tử Xác định số phân ly acid – baz Xác định số phân ly acid – baz phương pháp quan trọng để nghiên cứu cấu trúc hợp chất hữu Nội dung phương pháp đo phổ hấp thu chất hữu chứa nhóm có tính chất acid hay baz phụ thuộc vào pH mơi trường Xác định thành phần phức chất Thành phần phức chất DD xác định phương pháp quang phổ hấp thu tử ngoại khả kiến theo phương pháp khác phương pháp biến số liên tục, phương pháp tỉ lệ mol, [...]... đường chuẩn có độ dốc lớn nhất Cùng một sai số ∆A sai số ∆C nhỏ nhất - Tại λmax, sai số bước sóng ít ảnh hưởng 2 Chọn khoảng nồng độ thích hợp Khoảng nồng độ trong đó quan hệ giữa độ hấp thụ và nồng độ là tuyến tính Nồng độ phải được chọn sao cho độ hấp thụ thu được rơi vào khoảng vùng tối ưu là 0,2 – 0,8 và càng gần 0,43 càng tốt 3 Chọn các điều kiện làm việc khác ♦Chiết chất cần kiểm nghiệm khỏi tạp... nhau từ các tia sáng được tán sắc ở các góc khác nhau Bộ phận tán sắc có hai loại: lăng kính và cách tử -Lăng kính tạo ra ánh sáng nhiều màu như cầu vồng từ ánh sáng mặt trời - Cách tử tạo ra góc tán xạ tuyến tính khơng phụ thuộc vào nhiệt độ ... trời - Cách tử tạo góc tán xạ tuyến tính khơng phụ thuộc vào nhiệt độ Bộ phận đựng mẫu đo Cốc đo phải hồn tồn suốt tất bước sóng hấp thụ từ cốc làm giảm khoảng hấp thụ tuyến tính mẫu đo a)Cốc plastic... số bước sóng ảnh hưởng Chọn khoảng nồng độ thích hợp Khoảng nồng độ quan hệ độ hấp thụ nồng độ tuyến tính Nồng độ phải chọn cho độ hấp thụ thu rơi vào khoảng vùng tối ưu 0,2 – 0,8 gần 0,43 tốt... dựa khả hấp thụ chọn lọc xạ rọi vào dung dịch chất nghiên cứu dung mơi định Màu sắc ánh sáng: Tu theo bước sóng ánh sáng chia thành vùng sóng : -Vùng tử ngoại 185 – 400 nm -Vùng khả kiến 400