ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ********* ĐÀO THỊ VI HÒA NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG QUI TRÌNH SẢN XUẤT VẮC XIN THƢƠNG HÀN VI POLYSACCHARIDE Ở VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2014 ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ĐÀO THỊ VI HÒA NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG QUI TRÌNH SẢN XUẤT VẮC XIN THƢƠNG HÀN VI POLYSACCHARIDE Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: VI SINH VẬT HỌC Mã số chuyên ngành: 62.42.40.01 Phản biện 1: TS Lê Văn Bé Phản biện 2: PGS.TS Trần Đình Từ Phản biện 3: TS Nguyễn Đức Hoàng Phản biện độc lập 1: PGS.TS Nguyễn Đinh Nga Phản biện độc lập 2: TS Nguyễn Đăng Quân NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS ĐÀO XUÂN VINH PGS TS PHẠM THỊ ÁNH HỒNG Thành phố Hồ Chí Minh – 2014 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cám ơn Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên - Thành phố Hồ Chí Minh thầy cô truyền đạt kiến thức cho suốt trình học tập nhƣ hoàn thành luận án Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn đến PGS TS Đào Xuân Vinh, Giám đốc Công ty Vắc xin Pasteur Đà Lạt PGS TS Phạm Thị Ánh Hồng, Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên ngƣời thầy tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực hoàn thành luận án Tôi xin chân thành cám ơn GS TS Trần Linh Thƣớc, Hiệu trƣởng PGS TS Hồ Huỳnh Thùy Dƣơng, Trƣởng phòng Đào tạo sau đại học Chị Trần Thị Phƣợng Giang, Phòng Đào tạo sau đại học Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên - Thành phố Hồ Chí Minh ngƣời thầy động viên, giúp đỡ hoàn thành luận án thủ tục cần thiết trình làm nghiên cứu sinh Tôi xin chân thành cám ơn Cố GS TSKH Đặng Đức Trạch, nguyên Chủ nhiệm Chƣơng trình Tiêm chủng Mở rộng Quốc gia, Viện phó Viện vệ sinh dịch tễ Hà Nội Dr John B Robbins Dr Shousun C Szu, Viện Y tế Quốc gia Mỹ TS Lê Văn Bé, Viện trƣởng GS TS Nguyễn Thị Kê, nguyên Viện trƣởng Viện Vắc xin Sinh phẩm y tế Nha Trang ngƣời thầy hƣớng dẫn, tạo điều kiện cho đƣợc tiếp cận học tập công nghệ sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi polysaccharide Tôi xin chân thành cám ơn TS Nguyễn Đình Bồng anh chị đồng nghiệp thuộc Phòng thƣơng hàn Vi, Phòng kiểm định - Viện Vắc xin sở Đà Lạt; anh chị đồng nghiệp thuộc Viện Vắc xin Sinh phẩm y tế Nha Trang nhiệt tình giúp hoàn thành mục tiêu nghiên cứu Tôi biết ơn ngƣời thân gia đình động viên, hỗ trợ, quan tâm tạo điều kiện cho đƣợc yên tâm học tập nghiên cứu LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu khoa học thực Các số liệu kết luận án trung thực chƣa đƣợc công bố công trình nghiên cứu khác Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng Tác giả Đào Thị Vi Hòa i năm MỤC LỤC Trang Trang phụ bìa Lời cảm ơn Lời cam đoan i Mục lục ii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng x Danh mục hình xii MỞ ĐẦU CHƢƠNG - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình dịch tễ bệnh Thƣơng hàn giới Việt Nam 1.2 Bệnh Thƣơng hàn 1.3 Vi khuẩn Thƣơng hàn 1.3.1 Hình thái vi khuẩn 10 1.3.2 Tính chất nuôi cấy 10 1.3.3 Đặc tính sinh hóa 11 1.3.4 Kháng nguyên 11 1.3.4.1 Kháng nguyên O (Ohne) 12 1.3.4.2 Kháng nguyên H [Hauch] 13 1.3.4.3 Kháng nguyên Vi (Virulence) 13 1.4 Kháng nguyên vỏ Vi polysaccharide 15 1.4.1 Cấu tạo kháng nguyên Vi polysaccharide S Typhi 15 1.4.2 Sinh tổng hợp kháng nguyên Vi PS S Typhi 18 1.4.2.1 Các gen mã hóa độc lực S Typhi (đảo gây bệnh (SPI-7), locus viaA locus viaB) 18 1.4.2.2 Sinh tổng hợp kháng nguyên Vi PS 19 ii Đáp ứng miễn dịch gây kháng nguyên Vi PS 21 1.4.3.1 Bản chất khả sinh miễn dịch kháng nguyên Vi PS 21 1.4.3.2 Cơ chế đáp ứng miễn dịch gây kháng nguyên PS 22 1.4.3 1.5 Vắc xin Thƣơng hàn 24 1.5.1 Lịch sử vắc xin Thƣơng hàn 24 1.5.2 Các loại vắc xin Thƣơng hàn 25 1.5.2.1 Vắc xin Thƣơng hàn chết toàn tế bào 25 1.5.2.2 Vắc xin Thƣơng hàn sống giảm độc lực 25 1.5.2.3 Vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 27 1.6 Sản xuất vắc xin Thƣơng hàn 29 1.6.1 Tình hình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS giới 29 1.6.1.1 Phƣơng pháp điều chế kháng nguyên Thƣơng hàn Vi PS điều kiện làm biến tính 29 1.6.1.2 Phƣơng pháp điều chế kháng nguyên Thƣơng hàn Vi PS điều kiện không biến tính 31 1.6.2 Sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Việt Nam CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 34 35 2.1 Vật liệu 36 2.1.1 Chủng giống 36 2.1.2 Kháng huyết 36 2.1.3 Hóa chất 36 2.1.4 Thiết bị 37 2.1.5 Môi trƣờng dung dịch 37 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 42 2.2.1 Sơ đồ nghiên cứu 43 2.2.2 Kiểm tra chủng giống Thƣơng hàn S Typhi Ty2 44 2.2.3 Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm nồi lên men lít 75 lít 44 2.2.3.1 Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm nồi lên men lít 44 iii 2.2.3.2 Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm nồi lên men 75 lít 45 2.2.4 Đánh giá vắc xin Thƣơng hàn Vi PS thực địa 45 2.2.5 Phƣơng pháp xây dựng quy trình sản xuất quy mô nồi lên men 300 lít 47 2.2.5.1 Khảo sát thông số nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S Typhi Ty2 nồi lên men 300 lít 47 2.2.5.2 Khảo sát thông số bất hoạt vi khuẩn Thƣơng hàn S Typhi Ty2 51 2.2.5.3 Phƣơng pháp thu tinh kháng nguyên Vi PS 52 2.3 Pha vắc xin 58 2.4 Phƣơng pháp kiểm định 58 2.5 Hình thành quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS quy mô nồi lên men 300 lít 59 2.6 Sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS theo thông số chọn khảo sát tính ổn định quy trình sản xuất 59 2.7 Khảo sát tính ổn định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 59 2.8 Tiêu chuẩn kháng nguyên Vi PS tiêu chuẩn vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 60 2.8.1 Tiêu chuẩn kháng nguyên Vi PS 60 2.8.2 Tiêu chuẩn vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 61 2.9 Hiệu kinh tế xã hội đề tài luận án 61 2.10 Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS quy mô nồi lên men 300 lít 62 2.11 Xử lý số liệu 62 CHƢƠNG – KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 64 3.1 Kết kiểm tra chủng giống Thƣơng hàn S Typhi Ty2 65 3.1.1 Kết kiểm tra hình thái vi khuẩn tính chất nuôi cấy 65 3.1.2 Kết kiểm tra đặc tính sinh hóa 67 3.1.3 Kết kiểm tra khả ngƣng kết với huyết 68 3.2 Kết sản xuất thử nghiệm nồi lên men lít 75 lít 70 iv 3.2.1 Kết sản xuất thử nghiệm nồi lên men lít 70 3.2.2 Kết sản xuất thử nghiệm nồi lên men 75 lít 70 3.3 Kết đánh giá vắc xin thực địa 73 3.3.1 Phản ứng phụ sau tiêm 73 3.3.2 Đáp ứng miễn dịch 74 3.4 Kết khảo sát thông số nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn S Typhi Ty2 nồi lên men 300 lít 76 3.4.1 Kết khảo sát tỷ lệ giống 76 3.4.2 Kết khảo sát nhiệt độ nuôi cấy 77 3.4.3 Kết khảo sát oxy hòa tan 79 3.4.4 Kết khảo sát thời gian nuôi cấy 81 3.4.5 Kết khảo sát thông số bất hoạt 85 3.4.6 88 3.5.1 Hình thành quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS nồi lên men 300 lít Kết sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS nồi lên men 300 lít theo thông số xác lập Kết thu nhận kháng nguyên Vi PS 3.5.2 Kết bất hoạt theo thông số chọn 91 3.5.3 Kết đánh giá chất lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 91 3.5.4 Kết số lƣợng kháng nguyên Vi PS sản lƣợng vắc xin 94 3.5.5 Khảo sát tính ổn định quy trình sản xuất 94 3.6 Quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 99 3.7 Kết kiểm tra tính ổn định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 101 3.7.1 Kết kiểm tra tính ổn định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS nhiệt độ 101 37oC 3.7.2 Kết kiểm tra tính ổn định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS nhiệt độ 101 17 – 25oC 3.7.3 Kết kiểm tra tính ổn định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS nhiệt độ 102 – 8oC 3.8 Hiệu kinh tế, xã hội đề tài luận án 3.5 v 89 89 103 3.8.1 Cung cấp vắc xin Thƣơng hàn Vi PS cho Chƣơng trình TCMR 103 Quốc gia 3.8.2 Giá thành vắc xin Thƣơng hàn Vi PS CHƢƠNG - KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 104 106 Kết luận 107 Đề nghị 107 NHỮNG ĐIỂM MỚI CỦA LUẬN ÁN 108 Về khoa học 108 Về thực tiễn ứng dụng 108 DANH MỤC CÔNG TRÌNH KHOA HỌC 109 TÀI LIỆU THAM KHẢO 110 PHỤ LỤC vi NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT ADN Acid deoxyribonucleic ARN Acid ribonucleic BCR B cell receptor Thụ thể tế bào B CD Cluster of differentiation Cụm biệt hóa CDC Center for Prevention CMI Cell-mediated immunity Miễn dịch trung gian tế bào CPS Capsule polysaccharide Polysaccharide vỏ Da Dalton DC Dendritic cells Tế bào có tua DO Dissolved oxygen Oxy hòa tan DOMI Diseases of the Most Impoverished Chƣơng trình phòng bệnh cho nƣớc nghèo EPS Exopolysaccharide Polysaccharide ngoại bào D/H Diameter/High Đƣờng kính/Chiều cao IgG Immunoglobulin kD Kilo Dalton LPS Lipopolysaccharide MS M cell Monosaccharide Microfold cells MZ MLNs Marginal zone Mesenteric lymph nodes NAD+ -nicotinamide adenine dinucleotide Disease Control vii and Trung tâm Kiểm soát Phòng chống dịch bệnh Tế bào biểu mô chuyên biệt Vùng rìa Hạch bạch huyết mạc treo ruột Thêm vào cột 200 µl/giếng mẫu chuẩn mẫu thử Pha loãng bậc từ cột tới cột 11 Ủ 37oC - Rửa lần dung dịch rửa - Cho 100 µl/giếng dung dịch cộng hợp pha loãng 1/500 đệm pha cộng hợp Ủ 37oC - Rửa lần dung dịch rửa - Thêm 100 µl/giếng dung dịch chất - Để nhiệt độ phòng từ 15 – 20 phút, đọc kết bƣớc sóng 405nm 10.14.2 Đánh giá kết - Đối tƣợng đƣợc xem có đáp ứng kháng thể kháng Vi nồng độ kháng thể (tính đơn vị ELISA) lớn kháng thể lần - Tính kết phần mềm Kineticalc V2.03 (Bio –TeK) - Dùng phần mềm so sánh kết STATA Corporation (Mỹ) để phân tích so sánh kết đáp ứng miễn dịch loại vắc xin PHỤ LỤC 11 Kết kiểm tra chất lƣợng loạt kháng nguyên Vi PS sản xuất từ nồi lên men lít NIH (Mỹ) Cách chuyển đơn vị hàm lƣợng O-acetyl từ % sang % (mol/mol) mmol/g: A mmol/g = % x 3,86/100 - Loạt 1: Hàm lƣợng O-acetyl = 36% Hàm lƣợng O-acetyl (mmol/g) = 36 x 3,86/100 = 1,39 - Loạt 2: Hàm lƣợng O-acetyl = 69% Hàm lƣợng O-acetyl (mmol/g) = 69 x 3,86/100 = 2,66 PHỤ LỤC 12 Kết kiểm tra chất lƣợng kháng nguyên Vi PS sản xuất nồi lên men 75 lít FDA (Mỹ) PHỤ LỤC 13 Kết kiểm định kháng nguyên Vi PS PHỤ LỤC 14 Kết kiểm định kháng nguyên Vi PS (Sanofi Aventis - Pháp) Lô Protein (mg/g) Nucleic acid (mg/g) O-acetyl (mmol/g) Kích thƣớc Vi (%) FA081773  0,7 7,65 3,27 83,5 FA081774  0,67 8,27 3,23 83,0 105B  10 13,20 2,73 51,0 106B  10 14,00 2,50 66,6 107A1  10 2,70 2,32 69,3 Trung bình  10 7,94 ± 4,60 2,78 ± 0,43 69,58 ± 13,43 Tiêu chuẩn  10  20 >2 > 50 Stt PHỤ LỤC 15 Kết kiểm định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS PHỤ LỤC 16 Giấy phép xuất xƣởng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS PHỤ LỤC 17 Kết kiểm định vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (Sanofi Aventis – Pháp) Stt Lô pH Phenol (mg/liều) Hàm lƣợng Vi (g/liều) O-acetyl (mol/liều) D0114 6,87 1,03 27,1 0,080 E0210 6,86 1,07 23,9 0,092 E0285 7,01 1,04 21,2 0,094 G0268 6.90 1,04 23,0 0,082 H1347 7,24 1,00 26,0 0,086 H0472 6,90 1,07 25,0 0,084 J0070 7,02 1,10 26,0 0,082 J0272 6,97 1,10 25,0 0,075 J0285 7,00 1,10 22,5 0,087 10 J0455 6,96 1,10 25,5 0,066 11 N0081 6,78 1,06 24,6 0,077 12 M1279 6,88 1,14 20,6 0,081 13 X0249 6,82 1,02 26,0 0,084 14 W1472 6,92 1,04 24,4 0,081 Trung bình 6,94 ± 0,11 1,06 ± 0,04 24,20 ± 1,94 0,082 ± 0,007 Tiêu chuẩn 6,5 – 7,5  1,25 17,5 – 32,5 0,064 – 0,106 PHỤ LỤC 18 Giấy phép lƣu hành vắc xin Thƣơng hàn Vi PS PHỤ LỤC 19 Giấy chứng nhận thực hành tốt sản xuất thuốc PHỤ LỤC 20 Hƣớng dẫn sử dụng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS PHỤ LỤC 21 Nhãn hộp lọ vắc xin Thƣơng hàn Vi PS PHỤ LỤC 22 Sử dụng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS Chƣơng trình Tiêm chủng Mở rộng Quốc gia PHỤ LỤC 23 Giấy phép nhập Vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (TYViVAC) vào Nigeria [...]... tế Quốc gia Mỹ Từ đó, chúng tôi nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật mới để sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS tại Vi t Nam Xuất phát từ ý nghĩa và yêu cầu thực tế trên, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: Nghiên cứu ứng dụng qui trình sản xuất vắc xin Thương hàn Vi polysaccharide ở Vi t Nam Mục tiêu của đề tài: - Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi polysaccharide bằng phƣơng pháp lên men... Thƣơng hàn Vi PS (TYPHIM Vi) của Pháp để cung cấp cho Chƣơng trình Tiêm chủng Mở rộng Quốc gia Để đáp ứng nhu cầu sử dụng và giảm giá thành vắc xin Thƣơng hàn, Công ty Vắc xin Pasteur Đà Lạt – DAVAC (trƣớc đây là Vi n vắc xin cơ sở 2 Đà Lạt thuộc Vi n vắc xin và sinh phẩm y tế Nha Trang – IVAC) tiếp nhận chuyển giao công nghệ sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS từ Vi n Y tế Quốc gia Mỹ Từ đó, chúng tôi nghiên. .. vắc xin Thƣơng hàn Vi PS của DAVAC và Sanofi Aventis 93 3.25 Số lƣợng kháng nguyên Vi PS và sản lƣợng liều vắc xin 94 3.26 Kết quả kiểm tra tính ổn định của vắc xin Thƣơng hàn Vi PS ở nhiệt độ 37oC 101 3.27 Kết quả kiểm tra tính ổn định của vắc xin Thƣơng hàn Vi PS ở nhiệt độ 17 – 25oC 102 3.28 Kết quả kiểm tra tính ổn định của vắc xin Thƣơng hàn Vi PS ở nhiệt độ 2 – 8oC 102 3.29 So sánh giá thành vắc. .. lƣợng Vi PS thô 96 3.16 Kết quả tính ổn định của hàm lƣợng Vi PS 96 3.17 Kết quả tính ổn định của hàm lƣợng O-acetyl 97 3.18 Kết quả tính ổn định của kích thƣớc Vi PS 97 3.19 Tính ổn định của sản lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 98 3.20 Vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (TYViVAC) 98 3.21 Số lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS đƣợc cung cấp cho Chƣơng trình Tiêm chủng Mở rộng Quốc gia 104 xiii MỞ ĐẦU 1 Thƣơng hàn là... Vi t Nam, vắc xin thế hệ cũ nhƣ vắc xin Thƣơng hàn bất hoạt toàn tế bào cho bảo vệ 51 – 67% nhƣng có tỷ lệ phản ứng phụ cao từ 9 – 34% ở ngƣời nhận và phải dùng nhiều liều Vắc xin Thƣơng hàn sống, giảm độc lực Ty21a có hiệu quả bảo vệ 65% nhƣng khó áp dụng rộng rãi do phải dùng nhiều liều, thiếu kháng nguyên Vi PS và vi khuẩn có khả năng hồi biến gây ảnh hƣởng đến chất lƣợng vắc xin [9,10,48,109] Vi c... triển vắc xin Thƣơng hàn Vi PS - một vắc xin phòng bệnh Thƣơng hàn thế hệ mới phù hợp với điều kiện của Vi t Nam là cần thiết Hơn nữa, sử dụng vắc xin sẽ mang lại lợi ích trong vi c bảo vệ sức khỏe cho ngƣời dân đối với bệnh Thƣơng hàn, làm giảm tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ chết cũng nhƣ gánh nặng về kinh tế 2 do bệnh Thƣơng hàn gây ra ở những vùng dịch lƣu hành [44,50] Từ năm 1997, Bộ Y tế phải nhập vắc xin. .. nghiên cứu: - Sản xuất thử nghiệm vắc xin Thƣơng hàn Vi PS ở nồi lên men 7 lít và 75 lít - Xây dựng quy trình sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS: + Xác định các thông số kỹ thuật thích hợp cho nuôi cấy vi khuẩn Thƣơng hàn Salmonella Typhi Ty2 ở nồi lên men 300 lít: Tốc độ khuấy, tốc độ sục khí, nhiệt độ, tỷ lệ giống, OD, pH, oxy hòa tan, thời gian gặt + Xác định các thông số bất hoạt thích hợp cho vi. .. khuẩn Thƣơng hàn khi nuôi cấy ở nồi lên men 300 lít + Đánh giá chất lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS đƣợc sản xuất theo quy trình sản xuất đã xây dựng 3 CHƢƠNG 1 - TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1 Tình hình dịch tễ bệnh Thƣơng hàn trên thế giới và ở Vi t Nam Theo thống kê của TCYTTG, hàng năm có 21,6 triệu ngƣời mắc và 216.500 ngƣời chết do bệnh Thƣơng hàn ở tất cả lứa tuổi trên toàn cầu, chủ yếu ở các nƣớc đang... gây bệnh có thành phần polysaccharide vỏ [56,103 Vắc xin Thƣơng hàn Vi polysaccharide (PS) với một mũi tiêm duy nhất chứa 25 g kháng nguyên Vi PS, là loại vắc xin chỉ sử dụng kháng nguyên vỏ - polysaccharide của vi khuẩn để tạo đáp ứng miễn dịch, không chứa toàn bộ tế bào của vi khuẩn và do vậy không tái sinh sản trong cơ thể nhận Vắc xin dễ dung nạp, tính an toàn cao và không có phản ứng phụ nghiêm... ở nồi lên men 75 lít 70 3.6 Chất lƣợng kháng nguyên Vi PS thu đƣợc từ nuôi cấy ở nồi lên men 75 lít 71 3.7 So sánh kiểm tra chất lƣợng kháng nguyên Vi PS bởi DAVAC, NIH và FDA 71 3.8 Kết quả kiểm tra chất lƣợng vắc xin Thƣơng hàn Vi PS sản xuất từ nồi lên men 75 lít 72 3.9 Phản ứng phụ sau khi tiêm vắc xin Thƣơng hàn Vi PS 73 3.10 Biến đổi nồng độ kháng thể và tỷ lệ đáp ứng miễn dịch sau khi tiêm vắc ... để sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi PS Vi t Nam Xuất phát từ ý nghĩa yêu cầu thực tế trên, tiến hành thực đề tài: Nghiên cứu ứng dụng qui trình sản xuất vắc xin Thương hàn Vi polysaccharide Vi t... QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN ĐÀO THỊ VI HÒA NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG QUI TRÌNH SẢN XUẤT VẮC XIN THƢƠNG HÀN VI POLYSACCHARIDE Ở VI T NAM Chuyên ngành: VI SINH VẬT... Vi PS thô ethanol 99% phenol Kháng nguyên Vi PS đƣợc làm khô pha chế vắc xin Thƣơng hàn Vi PS (TYPHIM Vi) [49,74] 1.6.2 Sản xuất vắc xin Thƣơng hàn Vi t Nam Trƣớc đây, Vi t Nam sử dụng loại vắc