ÔN TẬP CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRONG BẢO VỆ THỰC VẬT Câu 1: Hãy nêu thiết bị công nghệ sinh học dùng bảo vệ thực vật? STT Tên thiết bị Công dụng Máy PCR Nhân DNA Máy điện di Dùng để điện di DNA, RNA gel Máy đọc gel Dùng để phát sản phẩm DNA, RNA sau điện di, nhuộm ethidium bromide Phân tích định tính định lượng Máy Realtime acid nucleic mẫu sinh PCR học Phân tích giải trình tự Nucleotide mẫu DNA từ người, động thực vật vi sinh Máy giải trình vật tự DNA Phân tích đặc tính phân đoạn acid nucleic Xác định xuất đột biến di truyền mẫu sinh vật Dùng để loại bỏ kháng thể, Máy rửa Elisa kháng nguyên thừa không đặc hiệu trình test Elisa Dùng để đọc kết test Máy đọc Elisa Elisa đọc OD Đo mật độ quang (OD) Máy đo quang chất với hấp thu bước phổ sóng tương ứng Máy ly tâm Phân tách thành phần hỗn hợp theo số lắng 10 Phân tách thành phần hỗn Máy siêu ly hợp dựa theo số lắng; ứng tâm dụng ly trích DNA, RNA, plasmid, protein, 11 Dùng để đông khô mẫu, vi khuẩn, DNA, từ tăng thời Máy đông khô gian bảo quản mẫu, không làm biến tính mẫu 12 Nồi hấp khử Khử trùng mẫu, hóa chất dụng trùng cụ thí nghiệm 13 Tủ cấy trùng vô Cách lý với điều kiện bên tạo môi trường làm việc vô trùng Nuôi cấy điều kiện nhân tạo 14 Tủ nuôi cấy 15 Dùng để nuôi cấy vi khuẩn, nấm Máy lắc định điều kiện cần lắc ổn ôn định nhiệt độ 16 Buồng đếm Dùng để đếm khuẩn lạc vi khuẩn khuẩn lạc Câu 2: Hãy trình bày kỹ thuật ly trích DNA? Vật liệu: Mẫu thực vật Dụng cụ: Micropipette 10 µl, 100 µl, 100 µl; ống Eppendorf 1,5 ml Thiết bị: Máy ly tâm; Máy vortex; Bồn ủ nhiệt Hóa chất: - Dung dịch đồng mẫu (Homogenization Buffer): Tris 200 mM (pH = 8), EDTA 25 mM, NaCl 250 mM, SDS 0,5% - Dung dịch PCI: Phenol – Chloroform – Isoamyl alcohol tỷ lệ 25 : 24 : - Dung dịch TE buffer: 10 mM Tris – Cl, mM EDTA (pH = 8), - Chloroform; Ethanol, cồn 70o Quy trình: - Bước 1: Lấy mẫu, mẫu ly trích lấy vào buổi sáng, mẫu non không già, sử dụng kéo khử trùng cồn 70o cắt mẫu kích thước 1cm2, cho vào ống tube đánh dấu; - Bước 2: Dung dịch đồng mẫu (Homogenization Buffer) ủ ẩm 60oC Dùng micropipette hút 400 µl dung dịch đồng mẫu vào ống tube chứa mẫu thu Dùng que nghiền nát mẫu tube - Bước 3: Bổ sung vào tube 500 µl dung dịch PCI sau lắc nhẹ phút đem ly tâm 12000 vòng/phút phút, hút dịch qua tube (có thể hút 300 µl dịch nổi); - Bước 4: Bổ sung 400 µl chloroform vào, lắc nhẹ phút, sau ly tâm 12000 vòng/phút phút, hút dịch qua tube (có thể hút 200 µl dịch nổi); - Bước 5: Thêm 600 µl ethanol 99o vào dịch thu được, lắc nhẹ phút, đem ủ - 20 oC vòng 30 phút Sau ly tâm 12000 vòng/phút phút, loại bỏ dịch thu kết tủa, phơi khô tube nhiệt độ phòng; - Bước 6: Cho vào kết tủa 50 µl dung dịch TE nước khử ion hấp khử trùng đem bảo quản oC - 20 oC Câu 3: Công nghệ sinh học gì? Công nghệ sinh học – Biotechnology – lĩnh vực công nghệ cao dựa tảng khoa học sống, kết hợp với quy trình thiết bị kỹ thuật nhằm tạo công nghệ khai thác hoạt động sống vi sinh vật, tế bào thực vật động vật để sản xuất quy mô công nghiệp sản phẩm sinh học có chất lượng cao, phục vụ cho lợi ích, nhu cầu người đồng thời phát triển kinh tế - xã hội bảo vệ môi trường Câu 4: Giải pháp phát triển công nghệ sinh học tỉnh An Giang? Phân tích nhận định mạnh tỉnh: tỉnh nông nghiệp lớn nước sản lúa cá da trơn thuộc hàng cao nước Do đó, ưu tiên ứng dụng công nghệ sinh học lĩnh vực trồng trọt thủy sản Nắm bắt nhu cầu thị trường thị hiếu nông dân, người tiêu dùng: ứng dụng công nghệ sinh học điều khiển giới tính cá, sinh sản nhân tạo, Tăng cường công tác nghiên cứu, thử nghiệm ứng dụng công nghệ sinh học sở lĩnh vực mạnh phù hợp thị hiếu Tăng cường công tác đào tạo thu hút cán bộ, nhà khoa học lĩnh vực công nghệ sinh học Tổ chức tập huấn trình diễn mô hình ứng dụng công nghệ sinh học: chuối, lan hồ điệp, tràm úc, khoai môn, khoai lang nuôi cấy mô, Khuyến cáo nông dân doanh nghiệp đầu tư vào lĩnh vực nông nghiệp ứng dụng công nghệ sinh học: trồng chuyển gen (GMO), Câu 5: Nêu ví dụ chuyển gen vào thực vật? Chuyển gen tổng hợp β-carotene (giống lúa vàng); Chuyển gen điều khiển màu hoa vào vỏ dưa hấu Câu 6: Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật gì? Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật vận dụng kỹ thuật cao mang tính công nghiệp sinh học bảo vệ thực vật để sản xuất loại chế phẩm sinh học loài ký sinh, ăn thịt góp phần quan trọng việc phòng trừ dịch hại nhằm đạt hiệu kinh tế xã hội cao, theo hướng bảo vệ môi trường sinh thái cộng đồng, tạo nông sản sạch, an toàn Phần lớn công nghệ sinh học bảo vệ thực vật dựa sở chuyển gen tái tổ hợp để tái sinh tế bào thành hoàn chỉnh mang gen – Genetically Modified Organism (GMO) – trồng biến đổi gen Câu 7: An toàn sinh học gì? An toàn sinh học (biosafety) khái niệm bảo vệ tính toàn vẹn sinh học Đối tượng chiến lược an toàn sinh học bao gồm biện pháp bảo vệ môi trường sinh thái sức khỏe người Trong nông nghiệp: Hạn chế nguy cơ, tác hại xảy virus sinh vật biến đổi di truyền, hạn chế nguy nhiễm khuẩn thực phẩm, Câu 8: Thành tựu công nghệ sinh học bảo vệ thực vật Việt Nam? - Công nghệ sản xuất hàng loạt ong mắt đỏ Trichogramma trừ số trứng sâu hại sở ký sinh ký chủ ngài gạo Corcyra cephalonica - Công nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh sở vi khuẩn Bacillus thuringiensis điều kiện Việt Nam để ứng dụng phòng trừ sâu hại rau, đậu, - Công nghệ tạo kít chẩn đoán nhanh bệnh hại trồng ELISA, PCR - Các nhà khoa học thuộc Viện Di truyền Nông nghiệp Việt Nam giúp đỡ nhà khoa học Anh giải mã thành công hệ gen 36 giống lúa Việt Nam - Viện Công nghệ Sinh học chọn tạo thành công đu đủ chuyển gen kháng virus gây bệnh đốm vòng - Viện Di truyền Nông nghiệp Việt Nam kết hợp với công ty TNHH Pioneer Hi – Bred Việt Nam nghiên cứu thành công giống bắp 30Y87H kháng sâu đục thân - Công nghệ sản xuất thuốc virus sâu xanh trừ sâu xanh (Nuclear Polyhedrosis Virus) - Công nghệ sản xuất thuốc nấm Boverit trừ sâu hại rau, rầy nâu hại lúa, - Tuyển chọn sưu tập hai chủng nấm Beauveria Metarhizium có hoạt tính cao Các phương pháp bảo quản giống nấm Beauveria Metarhizium điều kiện Việt Nam - Công nghệ sản xuất thuốc nấm Trichoderma trừ bệnh khô vằn ngô, lúa bệnh héo lạc - Công nghệ sản xuất tuyến trùng ký sinh gây bệnh côn trùng EPN để trừ sâu hại đất trồng Câu 9: Các giải thưởng Nobel 2015? Giải thưởng Nobel hóa học trao cho Tomas Lindahl, Paul Modrich Aziz Sancar công trình nghiên cứu chế sửa chữa ADN tế bào Câu 10: GMO GMC gì? GMO – Genetically Modified Organism – sinh vật biến đổi gen – sinh vật mà vật chất di truyền bị thay đổi nhân tạo phòng thí nghiệm thông qua kỹ thuật di truyền (Genetic Engineering – GE) GMC – Genetically Modified Crop – Cây trồng biến đổi gen – loại trồng lai tạo cách sử dụng kỹ thuật công nghệ sinh học đại, hay gọi kỹ thuật di truyền, công nghệ gene hay công nghệ DNA tái tổ hợp, để chuyển gene chọn lọc để tạo trồng mang tính trạng mong muốn Câu 11: Thành tựu công nghệ sinh học BVTV giới? - Các nhà nghiên cứu từ Đại học Adelaide Viện Khoa học Nông nghiệp Trung Quốc xác định gen GmSALT3 – gen chịu mặn đậu nành (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 14/01/2015 đến ngày 21/01/2015) - Các nhà nghiên cứu thuộc Trung tâm Nghiên cứu Quốc gia Công nghệ sinh học thực vật (NRCPB) Viện Công nghệ sinh học Ấn Độ thành công giống lúa công nghệ sinh học biểu gen CP4-EPSPS cho thấy khả chiu Glyphosate (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 14/01/2015 đến ngày 21/01/2015) - Các nhà khoa học từ Đại học Texas Tech, Bayer CropScience, Trung tâm Quốc gia Tài nguyên Genome (NGCR) nghiên cứu thành công công bố hệ gen giống châu Á (Gossypium arboreum) (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 10/12/2014 đến ngày 17/12/2014) - Các nhà nghiên cứu, dẫn đầu giáo sư sinh học Ray Ming, Đại học Illinois, thành công giải trình tự hệ gen dứa cung cấp thêm nhiều thông tin trình quang hợp chịu hạn (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 04/11/2015 đến ngày 11/11/2015) - Một nhóm nghiên cứu quốc tế nhà khoa học thuộc Viện Hàn lâm Khoa học Nông nghiệp Trung Quốc (CAAS) Bắc Kinh, Trung Quốc giải trình thành công 360 giống cà chua bao gồm tự nhiên hóa (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 15/10/2014 đến ngày 22/10/2014) - Các nhà khoa học Đại học California, Riverside Viện nghiên cứu lúa gạo quốc tế tìm thấy Gen AG1 giúp hạt thóc sống bị ngập lụt (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 07/10/2015 đến ngày 14/10/2015) - Các nhà nghiên cứu dẫn đầu S Krattinger J Sucher thuộc Đại Học Zurich, Thụy Sĩ chèn allele Lr34 vào giống lúa canh tác Nipponbare – gia tăng tính kháng bệnh đạo ôn lúa (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 21/10/2015 đến ngày 28/10/2015) - Các nhà khoa học từ Viện Nghiên cứu Nông nghiệp Mikocheni đối tác làm rõ hệ gen loại virus nguy hiểm gây bệnh sọc nâu sắn (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 21/10/2015 đến ngày 28/10/2015) - Các nhà khoa học từ Đại học Ghent, Viện Nông nghiệp Nghiên cứu Thủy sản (ILVO) đối tác vừa công bố kết nghiên cứu khoai tây chuyển gen - kết hợp gen tạo tính kháng bệnh bạc tốt khoai tây (Bản tin trồng công nghệ sinh học ngày 02/09/2015 đến ngày 09/09/2015) - Năm 2003, nhà khoa học Ian Wilmut, Keith Campbell cộng Viện Roslin Edinburgh, Scotland Đã nhân vô tính thành công động vật có vú giới – cừu Dolly Câu 12: Ứng dụng công nghệ sinh học BVTV? Tạo trồng chuyển gen (GMC) mang đặc tính di truyền mong muốn Sản xuất côn trùng ký sinh ăn thịt Sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Sản xuất chất có hoạt tính sinh học Pheromone Hormone trừ sâu hại Sản xuất chất có hoạt tính sinh học trừ chuột Sản xuất thuốc sinh học trừ cỏ dại Ứng dụng kỹ thuật Elisa PCR chẩn đoán nhanh bệnh [...]... cây trồng công nghệ sinh học ngày 02/09/2015 đến ngày 09/09/2015) - Năm 2003, các nhà khoa học Ian Wilmut, Keith Campbell và các cộng sự tại Viện Roslin ở Edinburgh, Scotland Đã nhân bản vô tính thành công động vật có vú đầu tiên trên thế giới – cừu Dolly Câu 12: Ứng dụng công nghệ sinh học trong BVTV? Tạo cây trồng chuyển gen (GMC) mang đặc tính di truyền mong muốn Sản xuất côn trùng ký sinh ăn thịt... gen (GMC) mang đặc tính di truyền mong muốn Sản xuất côn trùng ký sinh ăn thịt Sản xuất thuốc trừ sâu vi sinh Sản xuất các chất có hoạt tính sinh học Pheromone và Hormone trừ sâu hại Sản xuất các chất có hoạt tính sinh học trừ chuột Sản xuất thuốc sinh học trừ cỏ dại Ứng dụng kỹ thuật Elisa và PCR trong chẩn đoán nhanh bệnh ... 6: Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật gì? Công nghệ sinh học bảo vệ thực vật vận dụng kỹ thuật cao mang tính công nghiệp sinh học bảo vệ thực vật để sản xuất loại chế phẩm sinh học loài ký sinh, ... gia Công nghệ sinh học thực vật (NRCPB) Viện Công nghệ sinh học Ấn Độ thành công giống lúa công nghệ sinh học biểu gen CP4-EPSPS cho thấy khả chiu Glyphosate (Bản tin trồng công nghệ sinh học. .. đem bảo quản oC - 20 oC Câu 3: Công nghệ sinh học gì? Công nghệ sinh học – Biotechnology – lĩnh vực công nghệ cao dựa tảng khoa học sống, kết hợp với quy trình thiết bị kỹ thuật nhằm tạo công nghệ