Bộ YTÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược IIÀ NỘI LỜI CẢM ƠN Sau thời gian nỗ lực thực đề tải, thời điểm hoàn thành khóa luận lúc tỗi xin phép hày lỗ lòng biết ơn sâu sắc tới người hường dan, dìu dắt giúp đỡ để tâi cú thể hoàn thành NGUYÊN THANH XUÂN khỏa ỉuậrt cửa cách tốt Trước hết, với lòng kính trọng biết ơn sầu sac, tói xin gùi lời XÁC ĐỊNH HẦM GERMANI câm ơn chân thành tới thầvLƯỢNG cô: TRONG ĐẬU TƯƠNG BÂNG PHƯƠNG PHÁP AAS Ths Nguyên Thị Ngọc Hà TS.LUẶN Phan Túy KHÓA TỎT NGHIỆP Dược SI DẠI IIỌC KHÓA 59 ( 2004 2009 TS Vù Đức Lụi > Là người trực tiếp hướng dẫn, chi bão tận tình tạo điều kiện giúp đỡ suối trình thực đề tài, Người hướng dẫn : TS Vũ Đức Lợi Tôi xin chân thành câm ơn thầy có giáo trang Bọ môn HóaĐợi TkS, Nguyễn Thị Ngọc cương Vô cơ, người đem lại cho kién thức vê hóa vổ tận tình giúp đỡ tói trang suốt thài gian làm để tải Tôi xin trán trọng gứi lởi cám an tới Ban giám hiệu, Phòng đào tạo Hà Nội-2009 DANH MỤC CHỮ VIÉT TẲT AAS Phương pháp quang phố hẩp thụ nguyên từ (Atoraic Abscrptior 3pectroph0(0metry) ETA-AAS Phép đo quang phồ hấp thụ nguyền tử không lửa (Eketrothermal Atomisation Atonùc Absorption specttopho to metry) P-ÂẢS Phép đo quang pitồ hẳp thụ nguyễn tư iưẫ (Flame Atomic Absorption spectrophotometry) CV-AAS Phép quang phô hấp thụ dùng kỹ thuật DANH MỤC BẢNG Trang Băng - Độ ẩm cùa mẫu đặu tương 24 Bâng - Cắc thòng 30 đo Germuni 24 Bảng - Khảo sảt nhiệt độ tro hóa mẫn 26 Bảng - Chương trình nhiệt độ cùa lò grapMt 27 Bảng - KỂt qui phân tích mẫu diuần CKM 3120a ,.27 Bảng Ễ - Kết phân tích hàm lượng mẫu chuẩn ũc nồng độ ppb 2S Bàng -Khầơẵát tỷ lệ mù vô tợ liốa mẫu HNOyđậe; ĨỈQỠ4 âặe W5WSSS:I9Bảng - Két qua cua mẫu chưa thêm chuần 31 Bảng - Kết dà thêm chuẩn (nồng độ chuẫn thêm vào 20ppb) 32 Băng 10 - Khào sát độ thu hoi Germani 32 Bang 11 - Khảo sát độ lặp lại cửa phương phảp 33 Băng 12 - Quy trinh dịnh luựng ũermani trang đậu tương .34 Bảng 13 - Hàm lượng Gennctnium mẫu dậu tương 35 Báng 14 - Kct qua hàm lượng trung binh cứa ũs mẫu dậu tướng 37 MỤC LỤC Trang ĐẬT VẤN ĐỀ PHÂN I - TÔNG QUAN u TỔNG QUAN VẼ CẦY ĐẬU TƯƠNG 1.1.1 Dặc điẾra thực vật 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Tãc dụng dược lý 1.1.4 Cống dụng 1.2 TỎNG QUAN VỀ GERMANI 1.2.1 Tính chẩt lý hóa học Ge .6 1.2.2 Các hợp chất GermarầÍ (í 1.2.3 NgưÀn Gcrmani 1.2.4 Vai trò cùa Germatii , ,.„ 1.2.5 Các phương pháp định lượng Germani ưong dược liệu 1.2.6 Độc tính Getmaní 12 1.2.7 Tác dụng cũa Gersnani hạt đậư tương 12 1.3 TỐNG QUAN VẺ QƯANG PHỎ HẤP TUỤ NGUYÊN Từ (AAS) 12 1.3.1 Cơ sờ lý thuyết cùa phương pháp phutmg pháp nghiên cứu 21 2.2 KẺr QUÀ TI [Ực NGHIỆM VÀ NHẶN XÉT 24 2.2.1 Kháo sát quy ưình định lượng Ge 24 2.2.2 Định lượng Gerraani mẫu đậu tương 33 2.3 BÀN LUẬN 36 2.3.1 Phưtmg pháp phản tích 36 2,1.4 ĐẶT VẤN ĐỀ Hại dậu tương dùng lất phổ biển trang bữa ăn hàng ngày mụi ngưởí thể gi từ lâu biết đến thực phầm bả dưỡng với nhiêu chắt đạm, vitamin nhiều nguyên tố vi lượng cẩn thiết cho thẻ Ngoài vai trò thực phẩm đậu tương biểt đến vị thuốc có khả nang làm giám nguy ung Lhư ung thư vú, ung tlur tuyến tiều liệt, ung thư dày, Như đa biết ung thư nguyên nhân thú hai gây nên chết hàng trâm ngàn người thẻ giới năm Chinh vi inà người ta tiếu hành nhiêu nghiên cửu hạt đậu tương tác đụng diệu kỳ Rầt nhiều nhá khoa học có nhữug nghiên cứu chứng minh uỉc dụng điệu kỷ hạt đậu tương định phẩn 1Ớ11 11Ó giàu Germani R.OSS, Pelton Lee Overholser chì Gertnaní 132 (một hợp chất hữu cứa Génnaiti) giiúp cợ thệ nâng cao khả nằng đáp ứng với PHÀN I - TÔNG QUAN 1.1 TÔNG QUAN VẺ GÂY ĐẬU TUƯNG Tên khoa học\ Glycine max (L.) Merr, Glycine sạja Sieb.et 2ucc ũ.hispiiia Max Tên khác4, dậu nành, hoàng đậu miêu,., Hình ì — t áy đậu tương 1.1,1, Đặc điềm tỉiực vật Cây thào, hàng nam, có thăn mánh, cao tự 0,86 dẻn 0,90m, có lông, có cành mọc hướng hi-n phía trỄn Lá mọc cách có Jl ]á chét hình trái xoan, gan mũi nhọn, không gốc Hoa trắng hav tím xểp thành cbìim nách Quã thõng, hình liềm, cố nhiều lỏng mềm mâu vàng Hạt hình thận dài, màu vùng rơm nhạt, Trung vú đồng bàng sồng Mississippi nơi sản xuất đậu tương với sàn lượng lớn nhát giới Dậu tương thu hoạch khô vàng, chọn ngày nắng ráo, cắt phưi khô rẳi đập lấy hạt Hật đem sằng sẩy, phơi đcn khư, để nguội, báo quản chum đậy kín, đé nơi khô ráo, thoúng mát Bộ phịìn dùng: Hạt phơi sấy khô dầu ép từ hạt [1] 1.1.2 Thành phần hứa học Toàn chứa 12% nước, 16% glucid, 14-15% protcm, 6% muồi khoáng chầt klìỗsg ĩé stef Hạt chứa trung bình 8% nước, 4-5% chất vọ co, cẻ nhiều kali (2%), natri (0,38%), canxỄ (0,23%), photpho (0,65% ), magie (0,24% ), lưu huỳnh (0,45%) soyasaponin IV có IS diện l đon vị galactosyl mang nhóm hydroxymethyl (CH2OH) [1] Tác dụng ức chế monoamirtoxydase A (MAO) Nghiên cứu hoạt tinh cùa 1V1AO dùng serotonin làm co chẩt cho thấv tlavoroid dậu tương có tác dụng ức ché MAO [1] Tác dụng chống oxy hóa (antỉoxidant) Sự peroxy hóa lipid tiến hành microíửrrt tim gan cũa chuột cổng trang Dùng adriamycin chạt sinh gốc tự do, nen làm tàng oxv hóa lipid Tác dụng chống oxy hóa cùa isoílavon chiết từ đậu tương nghiên cứu so sánh vơi a-iocoíerol Kit quẩ cho tliẫy UõAãvõn cồ tấc đụng nĩịuĩH hơti ct-lõcõíẽíõl SÊ100 Lần [1J Tác dụng lảm giám cholesteroỉ máu TTIL nghiệm trẽn người có mức choksterol tương tự nhau, thấy ăn nhiều pmícĩn đậu tương, mức giảm cholesterol nhiều Tác đụng dinh dưỡng Đâu tương cỏ I Lý lệ cao chất đạm, chất béo, chất đường, chất khoáng nguyên tổ vi lượng Đặc biệt chất béo dậu tương có tỷ lệ acid béo thiểt yểư tới 50%, acid linoleìc chiếm 6,5%, Các acid béo náy thành phần quan trọng máng tế bào, màng bào quan té bào vỏ bọc tnyelin cúa tế bào thần kinh, chứng có vai trò quan trọng phát triển tho kế cã hệ thần kinh trình tái tao tế bào [1 ], 1.1.4 Công dụng Trong ỵ dưực, bôỊ dậu tương trận ỴỚị ỊỊgũ cổCj cacap dnnậ làm thức |n cho irẽ sơ sinh, người bị bệnh đái đường dư giá trị dinh dưỡng cao gluciđ sinh gíycogen Côn dùng làm thức ãn cho người bị Gút, ngưởi ảm dậy, người lao dộng sức Lexithin casein dùng riông hay phoi hợp làm thuộc bồ dường, làm nguyên liệu Stigmastcrol dứng tổng hợp progesterol [1] - Bình thạch anh 50 inL, 100 mL - Pĩpet 10 mL Pípet định mửc 1,2, 3, 5, 10,20 mL Hỏa chất - Hình - L ọ Germanỉ chuẩn 99,999% Phương pháp nghiên cứu 2.1.4.1 Phương pháp xử lý mẫu Mầu sấy khỏ đến độ ẩm định sau vô co hóa Tùy thuộc vào chất chất phân tích, đỗi tượng mẫu, trang thiết 21 a w!ĩõĩ thời gian phân tích so với phương pháp vô co hóa khô, bảo toàn chất phân tích, phải dùng lượng axit nhiều, vi axit sử dụng tighiSn cửu phài có độ tinh khiết cao Hai acid mà chủng lựa chọn acid HNOj đặc HCIO4 đặc, ađd HNOĩ đặc tác nhân giải phóng vết nguyên tổ mầu dược liệu, acid HCIO4 đặc chất oxy hóa mạnh nén dùng để phá hủy hoàn toàn chất hợp chất hữu cờ Dùng acid HCÌO4 đạc từ đầu gây cháy nồ chất oxy hỏa rảt mạnh nẾn tiến hành vò có hóa mần bảng acid HTs'03 đạc trước đc vô hóa chất hữu dễ bị oxy hóa, sau ốữ dùng acid HCÌO4 đặc để vồ hỏa hoàn toàn mẫu phàn tích 2.1.4.2 Phương pháp định lượng Hùm luụng Germani mẫu dậu tương thấp, thường khoảng 3pg/g nên sau vô hóa pha thành dung dịch có nồng độ thấp chí khoảng ng/g dó chúng la khàng thè dùng kỹ thuật vỏ cư hú cỏ lửa (Ff 22 22 KÉT ỌUÀ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT hóa phương mẫu 2500°c, sau đối nhiệt độtrình tro mầucứu, từ cùa pháp (hấp, Dữ nghiện Trong đó: 2.2.1 Khâo sátđó quythay trình định ltrựng Ge hóa Bảng 34 - Khảo sát trình nhiệtnhiệt độ trođộhóa mẫu Chương củaluyện lờ graphit quảcác phân 3120a ĩ, ỉ XửKét lý mẫu mẫutích đậumẫu tươngchuẩn trước CRM khỉ phân tích cho Ihảy phương pháp củ độ chinh a: Hùm lượng Ce mẫu dậu Uíơng (í-ig/g) xác cao, độ thu hồi cùa Ge đạt 95%, đáp ứng dược yêu đuợc phơi khôtích vả sẩy nhiệt độ hảm 80°c cẩu Đậu tương Lẩy phân vòng 81i Sau lượng vétsátGe đồi tượng mẫu 2.2.1.3, Khữo chương trình nhiệt độmẫu phẵn lòkhác graphừ M: Nồne độ Ge tích theo đường nghiền nhó đậu tương bắng xay sinh tố đến độ ]HỊ.n 2.2 1.5 Khảo sát gỉđỉ hạn phát phương pháp thích hụp, sây liêp tục trongquá vòng 81i,nguyên tử hóa mẫu Trong kỹ thuật khống Giấ trình tri trang binh; Báng - Độ ẩm i=l cùa mẫu dậu tương Giới hạn phát nông độ thấp nhât có thẾ phát lừa, chương được, nồng độ nảy trình 6nhiệt dộ ấnh hưởng nhiều đếnhàm hiỆti lượng suát nguyên từ hóa mẫu, vàGe lánòng yếu tố độ ppb Bảng • Kết phân tích mâu chuẩn 2.2.1.4 Khảo sát độ đủng phép đo Phương sai: định đến độ nhạy đô lặp lại cùa phương pháp s =\íĩ? Do lệch hiệnchuẫn: giới chưa có mẫu thực vật chuẩn, Độ kết nghtên Quá Ltìnlt nguyên từ hòa mẫu xảy ta ơong 16 grapbìt cứu tác giă truóc sứ dụng mẫu thật vả thêm ĐộKhăo lệch bình:đo xảy rachuẩn theokiện hẩp thụgiai 2.2 Ị.2 cáctruug điều nguyên tử đoạn chỉnh xác = — 100lượng Ge RSD[...]... thu hòi cùa phương pháp định lượng - Kháo sát độ lạp lại của phương pháp dịnh lượng Định lượng Germani trong các mẫu dậu tương - Xác định độ ầm cửa các mẫu đậu tương - Dinh lượng Gcnnani trong các mlu đậu tương - Xít lý và đánh giá két quá thực nghiệm 20 - Bình thạch anh 50 inL, 100 mL - Pĩpet 10 mL Pípet định mửc 1,2, 3, 5, 10,20 mL Hỏa chất - Hình 4 - L ọ Germanỉ chuẩn 99,999% Phương pháp nghiên... phương pháp quang phổ phát xạ nguyên từ sử dụng nguồn cảm ứug cao tần Plasma (ICPAES), phương pháp phổ khối lượng kết hợp vớỉ nguồn càtn ứng cao tần Plasma (ICP-MS), phương pháp diện hóa phương pháp pho huỳnh quang nguyên tũ (AFS)j phương pháp đo quang và các phươug pháp khác Phương pháp do quang [17] Phương pháp đo quang dã dược Li Zaijun áp dụng để phân tích hàm lượng Ge ữong các mẫu thực phầm Phương pháp. .. lượng Gennanĩ đó là: Đậu Lương Trung Quốc: xual xứ tạị Trung Quồũ, hạt mảu vảng, to, tròn, mẩy Đậu tương xanh Thái Nguvẽn Đậu lương xanh [ ỉà Bắc Đậu tương Hà Nội Hình 3 - Các loại đậu tuông 19 2.1.2 Nội dung nghiên cứu Yíũ' dựng guỵ irinìỉ định lượng Germaní - Khảo sát điều kiện đo trên máy quang phố hap thụ nguyền tử Kháo sát độ chính xác của phương pháp - Kháo sát giỏi hạn phát hiện của phương pháp. .. trên cho thấy phương pháp có độ lặp lại tốt, khoáng tin cậy là 7,7854 ± 0,56, độ lệch chuân tương dồi là 7,78%, Do dó phưcrtig pháp nảy có rhé được áp dụng để định lượng Gemiani trong cấc mẫu dậu cản 3 mẫu, tíén húnh vồ cơvậy, hóa tương Vởì mồi loại tiếpđậu tươngtheo Như qua quá trình khân sát, chúng tỏi thây phương pháp cố độ thu hồi tốt (H = 97%), độ lặp lại cao, nên có thể ầp dụng phương pháp náy dể... phưong pháp này vẫn còn nhiều hạn ché, do vậy rất ít công trình Eghiõn cứu phân tích hàm ỉưựng Gc trong thực phẳm vù dược liệu sứ dụng phương pháp nảy Phương pháp phơ tán xạ và huỳnh quang iìaX [16, 18) Phương pháp phổ tán xạ và huỳnh quang tia X dược tác già Yuji Horino hoàn thiện vào năm 2003, trước kia các tác già chỉ sử dụng các phương pháp riêng rè như phưcmg pháp tán xạ tia X hay phương pháp huỳnh... ạuẳ trong điều trị ung thư Ễũiỉg như điều trị Ễấe bệnh thoái hóa [8], Ngoài ra Ge còn giúp làm tăng lượng Oxy trong cơ thể do đỏ làm chậm lại sự phát triển cùa tễ bào ung thư vá thậm chí có thê dưa những tê bào này về trạng 8 Các phưong pháp định lirọug Germani trong đưực liệu 1.2.4 Hiện nay cô nhiều phương pháp nhạy và chọn lọc để phản tích Ge như phương pháp Quang pliồ hầp thụ nguyên từ (AAS) , phương. .. về nguyên tó Gennanù đặc điểm, phàn bố trong tự nhiên, vai trò và tác dụng của Ge 2 Xâv dựng quy trình định lượng Germani: - Xử lý mẫu: phương pháp vô cơ hóa uớt với tỷ lệ mẫn đậu tương : HNOj : HCIO4 là 0,lg: ỊOinL; lniL (độ thu hồi của phương pháp là 97,0%) - Nguvên tử hóa: kỹ thuật nguyên tử hóa không ngọn lửa (ETA -AAS) 2 Tách và định luụng riêng Ge hữu cơ trong dược Liệu TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài... Yanhong Zhang đưa ra phuơng pháp phân tích Ge ừong tro than bàng phương pháp này vả so sánh độ chính xác cùa phtỉp phân tích với phương pháp Pho khải lượng sử dụng nguồn căm úng cao tần Plasma, Tác giả đà sử tiụna Pic Compton để bồ chỉnh thành phẩn nền và sử cụng dĩa thúy tinh có chứa mầu và LÌ2B4O7/LÌBO3 theo tỷ lộ khối lượng 1:9, phuơna pháp này cho phép phân tích hàm 10 Phương pháp quang phồ phát xạ... 9,0250+ 0,7696 2.3 BÀN LUẬN nghiên cứu Líènpháp thể giới thỉ tích hàm hiợng Germani trong các 2.3.1 Phutrng phân Háng 14 - Kết quả hàm tượng trung bình của Ge trong các mẫu dậu tương Chúng Lôi liễn hảnh quy trình đỉnh lượng Germaiú trong các mẫu dậu tương với các nội dung cụ thế sạn: - Xừ lý mẫu: Do hàm lượng Gcrmani ờ dạng vết nên chúng tôi sử dụng phương pháp vô cơ hỏa nứt để tránh gâ.y mất mlư, Mẫu... trình định ltrựng Ge hóa Bảng 34 - Khảo sát trình nhiệtnhiệt độ trođộhóa mẫu Chương củaluyện lờ graphit quảcác phân 3120a 2 ĩ, 1 ỉ XửKét lý mẫu mẫutích đậumẫu tươngchuẩn trước CRM khỉ phân tích cho Ihảy phương pháp củ độ chinh a: Hùm lượng Ce trong mẫu dậu Uíơng (í-ig/g) xác cao, độ thu hồi cùa Ge đạt trên 95%, đáp ứng dược yêu về đuợc phơi khôtích vả sẩy à nhiệt độ hảm 80°c cẩu Đậu tương Lẩy phân trong ... (ICP-MS), phương pháp diện hóa phương pháp huỳnh quang nguyên tũ (AFS)j phương pháp đo quang phươug pháp khác Phương pháp quang [17] Phương pháp đo quang dã dược Li Zaijun áp dụng để phân tích hàm lượng. .. pháp Kháo sát khoảng tuyến tính nồng đp độ hấp Lhụ a Kháo sát điều kiện vô hóa mẫu - - Kháo sát độ thu hòi cùa phương pháp định lượng - Kháo sát độ lạp lại phương pháp dịnh lượng Định lượng Germani. .. Iigọn lừa (F -AAS) Nguyên tử hóa khổng lừa (ETA -AAS) Kỹ thuật hóa lạnh (CV -AAS) Tủy nguyên tố định lượng mà ta có phép đo thích hợp Phép đo F -AAS ETA -AAS hay dùng hon cà 15 Trong phép đo F -AAS nhiệt