li Nghiên cúu tác dụng giảm đau phân đoạn alcaloid từ củ ô đẩu [Aconitum carmichaeli Debx.) trồng tỉnh Hà Giang Vũ Đức Lợi', Nguyễn Tiến Vững^ Nguyễn Thượng Dong^ Phạm Thị Vân Anh'' ’Khoa YDược, Đại Học Quốc Gia Hà Nội, ^Viện Pháp y Quốc gia, ^Viện Dược liệu, ^Trường Đại học YHà Nội SUMMARY An alkaloid fraction was isolated from daughter root ofAconitum carmichaeli Debx by column chromatography The fraction is to evaluate analgesic effect by methods: Koster, tail-fiick, hotplate The results show that oral administrations o f fraction at dose 12.5 mg, 25 mg and 50 mg/kg bodyweight o f mice/day for days had significantly analgesic effect Từ khóa: A carmichaeli, alcaloid, giảm đau, phụ tử Đặt vấn đề Cây ô đầu (Aconitum carmichaeli Debx.) trồng tỉnh Hà Giang tổng số 300 loài thuộc - Phân đoạn alcaloid từ phụ tử (củ ô đẩu); Bột phụ tử (2,8 kg) xay thô, sấy khô ngâm chiết ethanol Dịch chiết tổng loại cặn cách lọc qua giấy lọc sau đem cất thu cUi Aconitum phân bố giới Theo kinh nghiệm hổi dung môi áp suất giảm thu cao chiết dân gian, củ ò đầu thường dùng để chữa đau ethanol (300,8 g) Chiết lại lán cao chiết ethanol nhức xương khớp Theo Bùi Hổng Cường, dịch chiết nước phụ tử chế có tác dụng giảm đau phương n-hexan, cất thu hồi dung môi áp suất giảm thu cao chiết n-hexan (100,6 g) Cao chiết pháp nghiên cứu mâm nóng gây quặn đau acid acetic [1 ].Tuy nhiên, đến nước nhưtrên giới, chưa có công bố vể nghiên cứu tác dụng giảm đau phân đoạn alcaloid từ loài thuộc chi Aconitum Do tiến hành n-hexan triển khai phân tách sắc ký cột Silicagel nghiên cứu tác dụng giảm đau alcaloid từ củ ô đầu nhằm tìm phân đoạn alcaloid có tác dụng giảm đau tốt, sử dụng điểu trị bệnh Nguyên liệu phương pháp nghiên cứu với hệ dung môi rửa giải n-hexan: EtOAc (10:90) thu phân đoạn alcaloid (4,2 g) Phân đoạn định tính phản ứng với thuốc thử Mayer, Dragendorff, Bouchardat đểu cho kết dương tính - Động vật thí nghiệm: Chuột nhắt trắng dòng Swiss trưởng thành khỏe mạnh, giống, trọng lượng 20 ± g Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ương cung cấp Hóa chất, thiết bị - Aspirin (Aspégic) gói bột 100 mg hãng Sa­ Nguyên liệu - Cây ô đẩu thu hái vào tháng 10 năm 2012 huyện Quản Bạ, tỉnh Hà Giang Tên khoa học là: Aconitum carmichaeli Debx nofi Aventis, Pháp - Codein phosphat Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương cung cấp - Dung dịch acid acetic 1% - Máy hot plate model - DS37 hãng Ugo Basile (Ý) - Máy đo phán ứng dau tail-fìick (serles 16881), sản xuất Ugo - Basỉle, Ý Phưtíng pháf0 nghiên cứu Nghiên cứu tác dụng giảm dau phân đoạn mg/kg/ngày ngày - Ló 5: uống phân đoạn alcaloid Phụ tứ liều 50 mg/kg/ngày ngày Chuột lô 1, 3, uống nước cất thuốc thử ngày lẩn vào buổi sáng ulcaloid Phụ tủ bồng phương pháp mâm nóng" ngày liên tục Đánh giá phản ứng chuột trước uóng thuốc sau uống thuốc lấn cuối (hot plate)[2] Chuột nhắt tiẳng chia ngẫu nhiên ttìành lò, rnỗi lô 10 con: - Ló (chứng): uống nươc cãt liều 0,2 mi/iOg/ Iigay ngày Lồ 2; uống codein phosphat 2Ü rtig/ky lẫn truớc đo lẩn thứ hai - I,ò 3: uổng phân đoạn alcdloid Phụ tú liểu 12.5 mg/kg/ngày ngày - Lô 4: uống phân đoạn alcaioid củd Phụ tủ liéu 25 - Phương pháp gây đau máy tail-flick đuòi chuột nhắt trắng thực sau; -t Tác dụng lực tàng dần đuôi chuột H Khi đạt ngưỡng gây đau, chuột phản ứng Iđi bảng cách qudy lại liếtii vào đuôi vị trí gây đau rút đuòì kíìỏi kim gây đau - Đo số tiước cho uổng thuốc - Sau Iigày, sau uống liểu thuốc cuối giờ, đo lại lẩn lấn (trước uống thuốc) nig/kg/ngày ngày - Ló 5: uống phán đoạn alcaloid Phụ tử iiễu 50 Nghiền cứu tác dụng giảm đau phân đoạn aicaỉoid Phụ tử bầng phương pháp gây quặn đau mg/kg/ngày ngày bâng acid ơcetic [2 ] Chuột nhẳt trắng chia ngầu nhiên thành Chuột lô 1, 3, uống nước cát hoạc thuõc thứ rnối ngày lán vào buổi sáng ngày liên tục Đo thời gian phản ưng vơi nhiẹt độ chuột trước uỗng thuốc vá sau uổng thuốc lân cuối Phương pháp đo nttư sau; Dạt chuột lên márn nóng (máy hot plate) luòn trì nhiệt độ 56“C hệ thổng ốri nhiệt Thời gian phan ứng với kích thích nhiệt tính từ lúc đặt chuột lên mâm nóng đến chuột cỏ phản xạ liếm chân sau So sánh lô, lô 10 con; - Lô (chứng); uòng nước cát liếu 0,2 inl/10 g/ ngày ngày - Lô 2: uổng aspirin 150 mg/kg lân trước đo lẩn thứ hai - Lô 3: uống phân đoạn alcdloid CLÌd Phụ tử liều 12,5 mg/kg/ngày ngày - Lô 4; uống phân đoạn alcaloid Phụ tử liều 25 mg/kg/ngày ngày - Lô 5: uống phàn đoạn alcaloid cúd Phụ tử liều 50 uổng thuốc thử so sánh lô chuột với mg/kg/ngàỵ ngày Chuột lô 1, 3, uống nước cât nliau lioạc thuõc ihử môi lẩn vào buổi sang thời gian phản ứng với kích thích nhiệt trước sau Nghiêiì cứu tác dụng giám đau cúa phàn doạn alcaloid củu Phụ tử bàng máy tail-flick [5] Chuột nhắt trắng điiỢc chia ngầu nhiên thành lò, lô 10 - Lô (chứng); uống nước câi liêu 0,2 ml/10 g/ ngày liên tục Ngay thứ 3, sau Liỗrig thuốc I giờ, tiêm vào ổ bụng chuộl 0,2 rnl dung dịch acid acetic 1% Đếm số quạn đau tùng chuột phut hết phut thứ 30 iau tiêm acid dcetic ngày - Lò 2: uống codeìn phosphat 20 nig/kg lẩn Két nghiên cữu trước đo lẩn thứ hai giơ - Lô 3: uống phan dcạn alcdloid cúd Phụ tủ liều 12.5 mg/kg/ngày ngày - Lô 4: uống phân đoạn alcaloid cúa Phụ tử liểu 25 214 NghlènCứu duọcThống tlnthuõc Sỗ 6/2013 Tác aụng ỳiárn dau cúa phờii đoạn alcaloid Phụ tử phương pháp mâm nóng Kết bảng cho thấy: Báng I Ảnh hưởng LÙa phóii ă m Liluiloid Phụ tứ lên thời lỊÌon phùn ứĩig vả nliiệí tlậ cùo chuột nhiìỉ tiđtig Thời gian phản ứng với nhiệt độ lõ th u ộ t p trước-sau Trước Sau lô (chứng) 10 24.60 ±8,26 23,87 ± 7J1 > 0,05 Lô {Cũdeln phoiphat liếu 20 mg/kg) 10 23.60 ±6,02 41,68 ±8^52 < 0,001 > 0,05 < 0.001 « ,0 ±8,50 32,00 ±9,33 Pm Ló i (Phán đoạn alcdloid 12,5 mg/kg/ngày) 10 p,-, > 0,05 1ô (Phân đoạn alcaloid 25 rng/kg/ngày) 23,47 ±8,50 10 0,05 7,95 ±2,02 11,80 ±3,29 >0,05 0,05 0,05 > 0,05 >0,05 > 0,05 10-15 phút >15-20 phút >20-25 phút >25-30 phút Lô (chứng) 10 7,90 ±3,25 19,40 ±4,38 19,00 + 3,86 16,80 ±3,74 12,20 ±5,33 10,60 ±2,8 Lô (Aspirin liéu 150 mg/kg) 10 2,20 + 2,49 9,90 ±2,23 11,00 ±2,83 9,40 ±2,37 6,70 ±2,36 4,80 ±2,39 < 0,001 < 0,001 < 0,001 < 0,001 < 0,01 < 0,001 5,20 ±1,69 15,00 ±3,65 13,00 ±2,91 12,00 ±2,49 8,30 ±1,06 7,20 ±1,48 ... P2-, Lô3 (Phân oạnalcaloid 12,5 mg/kg/ngày) Lô (Phân đoạn alcaloid 25 mg/kg/ngày) Lô5 (Phân oạnalcaloid 50 mg/kg/ngày) 10 10 10 Kết bảng cho thấy; - Aspirin liểu 150 mg/kg có tác dụng làm giảm số... thử tác dụng giảm chất gây đau phản ứng viêm nhưbradykinin, serotonin histamin Kết nghiên cứu cho thấy phân đoạn alcaloid chiết từ Phụ tử có tác dụng giảm đau chỗ toàn thời gian nghiên cứu từ đau. .. tính cấp phân đoạn định thử tác dụng giảm đau Kết thử độc tính -3 phút Từ kết nghiên cứu cho thấy phân đoạn cấp phân đoạn alcaloid cho giá trị LDj(, = 991,36 aicaloid liểu có tác dụng giảm đau theo