BÀI NGHIÊN CỨU Nghiên cứu bào chế liposome nifedipin phương pháp hydrat hóa màng film Trần Thị Hải Yến, Nguyễn Thu Hà, Phạm Thị Minh Huệ Trường Đại học Dược Hà Nội SUMMARY Nifedipin is a calcium blocker, used in hypertension and angina But it has lipophylic property, therefore oral formulations of nifedipin has very low bioavailobility Liposomes ore small artificial vesicles of sphericoI shape thot can be created from cholesterol and natural non-toxic phospholipids Due to its hydrophobic character, liposomes are promising systems fornifedipin delivery In this study liposomal nifedipin was prepared by hydration of lipid film with these parameters: evaporation temperature: 40PC, evaporation time: 18 hours, hydration process: phosphate buffer solution pH 6.5 at 50PC for hours, reducing liposomal size: probe sonicotion with frequency 10000 Hz, interrupted for 15 minutes in control temperature The contents of phospholipid and evaporation time had influence on the characteristic ofnifedipin liposome Từ khóa: liposome, nifedipin, hydrơthóa màng film Đặt vấn đề Ngày nay, với phát triển mạnh mẽ khoa học kĩ thuật nhiều dạng thuốc đời Liposome dạng thuốc tác dụng hướng đích, có triển vọng tăng sinh khả dụng giảm độc tính nhiều dược chất Đây dạng thuốc đầu tư nghiên cứu phát triển nước giới Liposome cấu thành từ phospholipid cholesterol Cấu tạo liposome bao gồm nhân nước nhiều lớp vỏ phospholipid kép bao quanh, nhờ mà phù hợp làm chất mang cho dược chất thân nước hay thân dầu [1 ] Nifedipin dược chất thân dầu, có tác dụng chẹn kênh calci, định điểu trị cao huyết áp đau thắt ngực Do nifedipin thực tế không tan nước nên sinh khả dụng dạng thuốc qui ước không cao Nhiều hướng nghiên cứu đặt để táng sinh khả dụng thuốQ sử dụng liposome làm chất mang thuốc để tăng hấp thu qua da niêm mạc hướng có triển vọng, nghiên cứu [2,4] Trong nghiên cứu bước đầu nghiên cứu xây dựng quy trình bào chế liposome nifedipin phương pháp hỵdrat hóa màng film 42 Nghỉên cứu duợcĩhông tỉn th uõ c Số 2/2014 Nguyên liệu phưomg pháp nghiên cứu Nguyên liệu Nifedipin - Đức, phosphatidylcholin đậu nành (SPC) - Lipoid, Đức; cholesterol (choi), methanol Trung Quốc; cloroform - Labscan, Thái Lan; nước tinh khiết - Việt Nam Máy cất quay Rovapor R-210, bình cẩu đáy tròn 1000 ml - Buchi, Đức; máy đo kích thước tiểu phân (KTTP) phân bố KTTP Zetasizer ZS 90 - Malvern, Anh; máy siêu âm Labsonic - Nhật, máy đo quang phổ hấp thụ UV-Vis u 1800 - Hitachi, Nhật Phương pháp nghiên cứu Phương pháp bào chế liposome nifedipin Liposome nifedipin bào chế phương pháp hydrat hóa màng film SPC, choi nifedipin hòa tan vào cloroform dung dịch thật, chuyển vào bình cẩu đáy tròn dung tích 1000 ml, cất quay nhiệt độ 40°c thu lớp màng film Lớp film lipid hydrat hóa dung dịch đệm phosphat pH 6,5 nhiệt độ 50°c thu hỗn dịch liposome nifedipin thô Hỗn dịch thu mang siêu âm ngắt quãng với tắn số 10000Hz, kết hợp làm lạnh để làm nhỏ kích thước liposome  A Phương pháp đánh giá liposome nifedipin Hình thức Hỗn dịch liposome nifedipin màu trắng đục mờ, không lắng cặn KTTPvàphân bốKTTP: mẫu pha loãng 100 lần nước tinh khiết đo KTTP trung bình Z-average (nm) phân bố KTTP (PDI-chỉ số đa phân tán) máy zetasizer ZS 90 Hiệu suất liposome hóa Để đánh giá hiệu suất liposome hóa, cần thiết phải loại nifedipin tự khỏi hỗn dịch liposome Nifedipin tự thực tế không tan nước tổn dạng kết tủa hỗn dịch, lí tâm hỗn dịch tốc độ 3500 v/ph vòng 30 phút, nifedipin tự kết tủa xuống đáy ống ly tâm Lấy phẩn hỗn dịch liposome phía trên, định lượng nifedipin nifedipin liposome hóa Hiệu suất liposome hóa nifedipin tính công thức sau: ,, Nifedipin liposome hóa , , H= '' "T , " X 100 (% Nifedipin toàn phần Nifedipin toàn phẩn: lượng nifedipin hỗn dịch liposome trước lí tâm Nifedipin liposome hóa: lượng nifedipin hỗn dịch liposome sau li tâm Kết nghiên cứu Ảnh hưởng tỉ lệ tá dược, dược chất tới số đặc tính liposome nifedipin Các công thức bào chế liposome với tỉ lệ tá dược khác đặc tính mẫu trình bày bảng Bảng Ảnh hưởng tỉ lệ tó dược, dược chất đến đặc tính liposome nlfedipin Công thức SPC:Chol:Nif(Tỉlệmol) KTTP trung bình (d.nm) PDI Hiệu suất (%) A611 :1 : 131,3 0,278 35,7 A621 :2 : 116,1 0,274 35,1 A631 6:3:1 108,9 0,269 42,3 A801 :0 : 103,9 0,277 67,6 A811 :1 : 106,3 0,289 64,1 A821 :2 : 111,9 0,273 6 ,1 A831 8:3:1 109,3 0,269 49,6 Kết bảng cho thấy KTTP mẫu khác biệt đáng kể hiệu suất liposome hóa khác nhiều mẫu Cùng lượng dược chất, tỉ lệ SPC tăng hiệu suất liposome hóa cao Công thức A621 A821 có KTTP nhỏ, phân bố khoảng hẹp, hiệu suất liposome hóa tương đối cao lựa chọn để tiếp tục nghiên cứu cải thiện hiệu suất liposome hóa Ảnh hưởng thời gian cất quay Hai công thức lựa chọn A621 A821 bào chê theo quy trình thay đổi điểu kiện cất quay từ lên thành 18 giờ, mẫu ký hiệu B621 B821 Kết đánh giá KTTP hiệu suất liposome hóa sau bào chế sau tuần bảo quản điểu kiện 2-8°C thể bảng Bổng So sánh ĩhời gian cất quay đén độc tính củoliposomeniíedipin Mẫu Thờỉ gian cất quay (giờ) KTTP trung bình (d.nm) PDI Hiệu suất sau bào chế(%) B621 18 61,99 0,254 88,7 8 ,2 A621 116,1 0,274 35,1 293 B821 18 110,4 0,291 75,4 74,1 A821 111,9 0,273 6 ,1 58,3 Hiệu suất sau tuấn (%) SỐ2/2014 Nghiên Cứu duợclhống tin thuõc 43 BÀI NGHIÊN CỨU * ^ Kết bảng cho thấy có cải thiện hiệu suất liposome hóa đáng kể kéo dài thời gian cất quay Ngoài ra, hiệu suất liposome hóa mẫu cất quay giảm nhiểu sau thời gian tuẩn bảo quản 2-8°C, mẫu cất quay 18 không thay đổi đáng kể Bàn luận vể công thức bào chế, nifedipin choi đểu thân dẩu nằm lớp phospholipid kép liposome, thay đổi nhiệt độ chuyển pha phospholipid Khi tỉ lệ nifedipin choi lớn 50 mol% làm nhiệt độ chuyển pha phospholipid, lớp màng film bong tróc hết trình hydrat hóa trở lại [3] Do khảo sát mẫu có tỉ lệ nifedipin choi nhỏ 50 mol% Về thời gian cất quay, thông thường sau cất quay khoảng 15 phút điều kiện nhiệt độ 40°c, có hút chân không phẩn lớn cloroform bay hết để lại lớp film mỏng lipid mang dược chất bám lại đáy bình cầu.Tuy nhiên, lượng nhỏ dung môi lưu lại bên lớp lipid Lượng dung môi sót lại không ảnh hưởng đến hiệu suất liposome hóa, mà ảnh hưởng đến tính ổn định liposome nhưgây độc tính cho chế phẩm Để loại hết vết dung môi cẩn tiếp tục cất quay sau lớp film lipid Với quy trình cất quay giờ, hiệu suất liposome hóa cao mẫu có tỉ lệ phospholipid cao (bảng 1) Tuy nhiên tăng thời gian cất quay lên 18 để loại bỏ vết dung môi hữu hiệu suất liposome hóa tăng nhiểu mẫu có tỉ lệ phospholipid thấp (bảng 2) Điểu chứng tỏ vết dung môi hữu lại mẫu làm giảm hiệu suất liposome hóa nhiểu mẫu A621 hòa tan phần phospholipid Khi loại triệt để dung môi hữu lượng phospholipid cẩn thiết để mang dược chất mẫu B621 Nói cách khác, không cần thiêt phải sử dụng tỉ lệ phospholipid cao mẫu B821 để mang lượng dược chất Do vậy, thời gian cất quay tốt 18 Kết luận Đã bào chế liposome nifedipin phương pháp hydrat hóa film với thông số lựa chọn sau: bốc dung môi áp suất giảm nhiệt độ 40°c 18 giờ, hydrat hóa trở lại màng film dung dịch đệm phosphat pH 6,5 50°c giờ, siêu âm đầu dò với tẩn số 10000 Hz để làm giảm KTTP liposome 15 phút, ngắt quãng, có làm lạnh Tỉ lệ tá dược thời gian bốc dung môi đểu ảnh hưởng đến đặc tính liposome nifedipin TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ Y tế, Trường Đại học Dược Hà Nội - Bộ môn Bào chế (2005), Một số chuyên để bào chế đại, NXB Y học, Hà Nội Kamiya s et al (2008), "Preparation and stabilization of nifedipine lipid nanoparticles" Int J Pharm.(354), pp 242-247 Torchilin V et al (2003), Liposomes: A practical approach, OUP Oxford, pp 27-34 Vyas s.p et al.(1995), "Liposome based nasal delivery system of nifedipine: development and characterization", IntJ Pharm.,pp 23-30 Yamaguchi T et al (2009), "Effects of frequency and power of ultrasound on the size reduction of liposome” Chem Phys.Lipids (160), pp 58-62 44 Nghiên cứuduợcĩhõng tin th uõ c i SÕ2/2014 ... tốt 18 Kết luận Đã bào chế liposome nifedipin phương pháp hydrat hóa film với thông số lựa chọn sau: bốc dung môi áp suất giảm nhiệt độ 40°c 18 giờ, hydrat hóa trở lại màng film dung dịch đệm... nifedipin tự kết tủa xuống đáy ống ly tâm Lấy phẩn hỗn dịch liposome phía trên, định lượng nifedipin nifedipin liposome hóa Hiệu suất liposome hóa nifedipin tính công thức sau: ,, Nifedipin liposome. .. Nifedipin liposome hóa , , H= '' "T , " X 100 (% Nifedipin toàn phần Nifedipin toàn phẩn: lượng nifedipin hỗn dịch liposome trước lí tâm Nifedipin liposome hóa: lượng nifedipin hỗn dịch liposome sau