TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA SƯ PHẠM GÓP PHẦN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN FLAVONOID TRONG CÂY CỎ LÀO (CHROMOLAENA ODORATA L.) HỌ CÚC (ASTERACEAE) Luận văn Tốt nghiệp Ngành: Sư Phạm Hóa Học Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: ThS Ngô Quốc Luân Đặng Minh Khiêm Lớp: Sư phạm Hóa Học K33 Mã số sinh viên: 2071987 Cần Thơ, 2011 Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L MỞ ĐẦU Từ xa xưa, chưa có dược phẩm tổng hợp, người biết sử dụng loại thảo mộc có nguồn gốc từ thiên nhiên để chữa bệnh từ đơn giản đến bệnh nan y Điều trị theo cách mang lại hiệu tồn mặt hạn chế Hầu hết cỏ chứa từ hàng nghìn đến hàng vạn hợp chất khác Có hợp chất mang lại lợi ích cho sức khỏe người, có hợp chất tác dụng chất chất độc Cây cỏ có nhiều loài nhìn giống thuộc họ khác Nếu họ tính chất lại khác Có sử dụng làm thuốc chữa bệnh, có chứa nhiều độc tính Trong loại cây, để chữa loại bệnh có tương tác chất với Điều thúc đẩy nhà khoa học phải tìm cách để cô lập hợp chất riêng biệt Ngày nay, với phát triển mạnh mẽ hóa học, đặc biệt tổng hợp hữu cơ, kéo theo phát triển ngành dược Các loại dược phẩm tổng hợp ngày đa dạng có đóng góp to lớn việc bảo vệ sức khỏe người Tuy nhiên, dược phẩm tổng hợp đường hóa học thường đắt thường bị hạn chế phương pháp tổng hợp chưa kể tác dụng phụ không mong muốn Con người lại có xu hướng trở với dược phẩm có nguồn gốc từ thiên nhiên Do việc khảo sát thành phần hóa học cỏ thiên nhiên việc làm cần thiết Một mặt, khác phục nhược điểm mà phương pháp điều trị thời xưa mắc phải, mặt khác, việc tìm hợp chất thiên nhiên mang lại hy vọng to lớn cho bệnh nan y Con người tin tưởng vào tương lai chiến thắng bệnh tật Với tinh thần đó, đề tài “Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L., họ Cúc Asteraceae” mong muốn góp phần nhỏ vào việc nghiên cứu hợp chất có nguồn gốc thiên nhiên từ loài quen thuộc LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -1- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L I TỔNG QUAN VỀ CÂY CỎ LÀO [1], [10], [12] I.1 Hình thái Cây cỏ lào có tên yên bạch, cỏ hôi, cỏ Việt Minh, Cộng sản (herbe communiste), lốp bốp, ba bớp, bù xích, cỏ tàu bay, cỏ làm, cỏ kali, phân xanh, chùm hôi, cỏ nhật, nhã nhật (Tày), muồng mung phia (Dao), hay tên tiếng Anh fragrant thoroughwort, bitter bush, jack in the bush, siam weed, triffid weed tên tiếng Pháp langue de chat, eupatoire odorante… Tên khoa học: Chromolaena odorata L hay Eupatorium odoratum L (King & Robinson), chi Eupatorium L., thuộc họ Cúc (Compositae hay Asteraceae) Thân nhỏ, cao 1-2 m, mọc thành bụi, phân nhiều cành ngang Thân tròn, hình trụ thẳng, màu nhạt có rãnh lông nhỏ mịn Lá mọc đối, lúc non gần hình tam giác, trưởng thành biến dạng thành hình trám lệch Dài 6-8 cm, rộng 2-4 cm, gốc thuôn vát, đầu nhọn, có ba đường gân chính, mép có cưa to, hai mặt xanh đậm hai mặt Lá non có màu nâu tím, hai mặt có lông mịn nên chạm vào da có cảm giác ngứa, cuống dài 1-2 cm Vò cành non có mùi thơm hắc Hoa mọc thành cụm đầu cành thành ngù kép, gồm nhiều hoa có mùi thơm, tụ hợp thành hình đầu dài khoảng cm Hoa màu trắng non, có ánh tím nhạt nở rộng Mỗi cụm hoa có bắc xếp thành 3-4 hàng, có lông, mào lông có sợi Tràng hoa loe dần từ gốc, bao phấn tai Mùa hoa từ tháng 11-12 dương lịch Quả bế, hình thoi, có năm cạnh có lông Khi khô bay xa theo gió, nhờ mà cỏ lào có khả phát triển lan rộng nhanh Mùa hoa tùy vào khí hậu vùng Rễ cọc dạng chùm không nhau, màu trắng ngà Chung quanh gốc mọc nhiều tua rễ, tua gồm cọng chính, chung quanh cọng mọc nhiều rễ phụ phân nhánh Cỏ lào nhìn giống hy thiêm (Siegesbeckia orientalis L.), lớn phân biệt rõ ràng Tuổi thọ khoảng từ 1-2,5 năm LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -2- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Hình 1: Cây cỏ lào Hình 2: Lá cỏ lào Hình 3: Hoa cỏ lào Hình 4: Thân cỏ lào Hình 5: Rễ cỏ lào Hình 6: Quả cỏ lào khô LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -3- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L I.2 Phân bố-sinh thái Eupatorium L chi lớn họ Asteraceae Trên giới có khoảng 400 loài, đa số bụi, bụi nhỏ thân thảo Là loài ưa sáng, chịu khí hậu hanh khô Phân bố tập trung vùng nhiệt đới châu Mỹ, châu Phi, châu Á Vùng ôn đới ấm châu Âu có số loài Ở Việt Nam chi có khoảng 10 loài Trong đó, cỏ lào loài bụi sống lưu niên quen thuộc nhất, thích hợp với vùng khí hậu chí tuyến Nằm diện quan trọng thảm thực vật Cỏ lào có nguồn gốc từ đảo Antilles, sau phát tán sang nhiều nước Nam Mỹ, Tây - Nam Phi, quanh vùng Địa Trung Hải, đặc biệt nước vùng Đông Nam Á Các nước giới có nhiều cỏ lào như: Brazil, Colombia, Australia, Congo, Nigieria, Ivory Coast, Ấn Độ, Indonesia, Malaysia, Trung Quốc, Thái Lan, Việt Nam… Ở Việt Nam, cỏ lào thường gặp nhiều nơi từ tỉnh đồng đến tỉnh miền trung du đồi núi thấp Cỏ lào ưa sáng, chịu hạn sống loại đất, mọc tương đối tập trung diện tích lớn đồi, nương rẫy bỏ hoang, thảo nguyên, bìa rừng Do đó, xem cỏ lào loại tiên phong số trình diễn thứ sinh đất sau canh tác Cỏ lào hoa kết nhiều hàng năm Với số lượng hạt giống nhiều, lại phát tán nhờ gió nên cỏ lào có khả chiếm lĩnh mở rộng vùng phân bố cực nhanh Cây phát tán hoang dại, mọc khỏe, phát triển tốt vào mùa mưa Cây sinh sản vô tính mạnh Ngọn non, cành già bẻ trụi lá, cắm xuống đất tuần sau mọc rễ trắng Chặt sát gốc đâm chồi mạnh Mãi đến năm 1935, nhà thực vật học ghi nhận cỏ lào Việt Nam Mặt khác, cỏ lào có vai trò quan trọng phong trào cộng sản Việt Nam năm 1935-1945 Cỏ lào tươi dùng làm thực phẩm, cầm máu vết thương, ngụy trang cho quân đội Vì vậy, có tên cỏ Nhật, cỏ Việt Minh, Cộng sản I.3 Tác dụng dƣợc lý I.3.1 Trong dân gian - Về công dụng y học, từ lâu dân gian biết dùng cỏ lào để cầm máu, kháng viêm, chữa lành vết thương phần mềm, vết bỏng trị số bệnh nhiễm LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -4- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L khuẩn đường ruột tiêu chảy, lỵ cấp tính, viêm đại tràng, ung nhọt, ghẻ lở, đau nhức xương, cảm cúm, phòng trị đỉa cắn - Ở Campuchia Haiti, nước sắc cỏ lào uống chữa ho, cảm lạnh, cảm cúm Người Dominica dùng cỏ lào đắp chữa mụn nhọt vết loét lâu liền - Ở Bờ Biển Ngà Nepal, cỏ lào giã nát ép lấy dịch đắp trị vết đứt, vết thương chảy máu làm liền sẹo - Ở Nigieria, nước sắc cỏ lào chữa sốt, cúm cảm lạnh Cao cỏ lào dùng làm thuốc cầm máu vết thương Dịch ép loại thuốc sát trùng tốt dùng băng bó vết thương trị nhiễm khuẩn Cao toàn thuốc chống loét Một số thuốc dân gian từ cỏ lào: Theo Đông y cỏ lào có vị đắng, ấm Có sách nói mùi thơm, có sách cho hôi nên có nơi gọi cỏ hôi + Chữa vết thương phần mềm: Do tai nạn giao thông, ngã, bị đòn đánh Lá cỏ lào tươi nắm to (150g) rửa sạch, giã nát, đắp vào vết thương, băng chặt + Chữa lỵ trực khuẩn: Lá cỏ lào tươi nắm to (150g) rửa sạch, cắt nhỏ, hãm với nước nóng 80oC (nước sôi để phút trời lạnh, 10 phút trời nóng) với 500ml nước, giữ ấm bên đảm bảo 80 oC sau 15 phút lại đun phút Rút nước, vắt kiệt nước bã, lọc lấy nước thuốc cô 150ml Thêm 30 - 50g đường, đun sôi cho tan Người lớn uống lần 50 ml x lần/ngày liên tục đến khỏi Nếu lỏng nước cần cho uống nước cháo loãng (gạo + khoai lang củ nhỏ) pha muối (tốt oresol phân mau thành khuôn) ngày 500-600ml nước cháo loãng + Chữa vết thương mắt xước loét giác mạc (Người bệnh bị mù trực khuẩn mủ xanh bệnh nặng dùng thuốc nhỏ mắt có cocticoid): Ngọn cỏ lào non 50g rửa thật sạch, giã nát cối chày Dùng miếng gạc chia thuốc gói thành gói Đặt vào bát sạch, cho vào nồi áp suất hấp (15 phút kể từ lúc thấy xì hơi) Nếu nồi áp suất hấp cách thủy 30 phút (kể từ lúc nước sôi đến lúc ngừng đun) Mắt nạn nhân rửa nước muối 2% đun sôi để nguội, đắp gói thuốc băng lại, để nạn nhân nằm ngửa 12 thay thuốc lần Nếu bệnh nhẹ 24 khỏi LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -5- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L + Tiêu chảy - kiết lỵ: Quả na điếc 20 g đốt tồn tính, cỏ lào non 50g, gạo tẻ (rang thật vàng) 30g Tất sắc với 400 ml nước 100 ml, uống làm 2-3 lần ngày + Chữa sai khớp bong gân: Cây cỏ lào dùng non cành rửa sạch, nóng đắp vào vết thương băng chặt + Phòng đỉa cắn: Giã cỏ lào xoa khắp chân đùi trước lội xuống nước + Chữa đỉa cắn, chảy máu không ngừng: Vò cỏ lào xát vào chỗ đỉa cắn, máu cầm I.3.2 Trong hóa y - dược học [10] Cao chiết với cồn cỏ lào (trừ phần rễ) có tác dụng chống co thắt trơn gây histamine acetylcholine hồi tràng cô lập chuột lang Đã có nghiên cứu xác minh tác dụng cầm máu làm mau liền sẹo cỏ lào Đã có nghiên cứu sử dụng cao cỏ lào để điều trị chỗ vết thương phần mềm nhiễm khuẩn sẹo phần mềm lâu liền, với nồng độ thuốc 3,3:1 86 bệnh nhân (trong có 82 bệnh nhân phẫu thuật: mở rộng cắt tổ chức dập nát hoại tử, loại bỏ dị vật, cắt cụt chi cấp cứu, để hở hoàn toàn vết thương), chứng minh cỏ lào có tác dụng sau: - Làm giảm tiết dịch, giảm mùi hôi, hoại tử nhanh nhóm đối chứng Tuy nhiên điều trị vết thương chỗ 3-5 phút đầu, thuốc gây cảm giác đau xót vết thương mức độ chịu đựng - Làm rút ngắn thời gian điều trị vết thương thúc đẩy nhanh trình loại bỏ hoại tử, tân tạo mô liên kết làm liền sẹo Sẹo hình thành mềm, mịn, sẹo co kéo, sẹo lồi Màu sắc sẹo hồng nâu nhạt, không thấy sẹo bạc màu - Ức chế sinh trưởng in vitro in vivo chủng vi khuẩn gây nhiễm khuẩn vết thương tụ cầu khuẩn vàng, Escherichia coli, Proteus, trực khuẩn mủ xanh Những chủng phân lập từ bệnh phẩm lâm sàng phản tác dụng loại kháng sinh thông thường - Những nghiên cứu nồng độ hydroxyprolin hình ảnh siêu cấu trúc cho thấy vết thương điều trị cỏ lào, trình tổng hợp collagen phát triển tốt, tốc độ tổng hợp collagen tăng nhanh, đặc biệt tăng cao ngày đầu LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -6- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Ngày 28/06/2006, Viện Bỏng Lê Hữu Trác (Viện Bỏng Quốc gia - Hà Nội) công bố kết nghiên cứu quy trình sản xuất thuốc mỡ Eupolin dùng để điều trị bỏng Nguyên liệu sản xuất thuốc có nguồn gốc từ cỏ lào, loại thảo dược mọc nhiều miền đồi núi, trung du Việt Nam Tuy giá thành thấp thuốc có chất lượng vượt trội Nghiên cứu bệnh nhân bỏng cho thấy, thuốc mỡ Eupolin sản xuất từ cỏ lào có hiệu ức chế vi khuẩn mạnh, kích thích biểu mô phát triển, làm nhanh liền vết thương giảm sưng viêm Th.S Mai Mạnh Tuấn, Khoa Nghiên cứu Đông y Thực nghiệm bệnh, Viện Y học Cổ truyền Trung ương cho biết: Dịch chiết từ cỏ lào, nồng độ định có tác dụng kích thích tăng trưởng tế bào gốc dây cuống rốn Đây sở để tiến hành nghiên cứu chế phẩm điều trị bệnh nan y Ngoài có tác dụng chữa vết thương mắt xước loét giác mạc I.3.3 Các công dụng khác - Cỏ lào chứa nhiều đạm (N: 2,65% trọng lượng khô), lân (P2O5: 0,03% trọng lượng khô), kali (K2O: 1,9% trọng lượng khô) nên dùng làm phân xanh tốt - Ngâm nát cỏ lào nước ruộng, ao 1-2 ngày có tác dụng diệt số loại ấu trùng phát triển thành sâu bọ hay động vật có hại cho nông nghiệp - Làm thuốc trừ hay xua đuổi sâu mọt - Bón trực tiếp cỏ lào tươi đất làm giảm tuyến trùng có hại cho trồng II MỘT SỐ CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY CỎ LÀO [4] II.1 Các công trình nghiên cứu Việt Nam - Năm 1989, công trình nghiên cứu cho luận án phó tiến sỹ khoa học y dược Trương Minh Kháng (Học Viện Quân Y Hà Nội), nghiên cứu tách chiết cao toàn phần cỏ lào dạng bào chế cao lỏng, cao đặc, thuốc mỡ (SH-91) để điều trị vết thương, vết bỏng - Phát triển từ công trình này, Viện Bỏng Quốc Gia trực tiếp nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất thuốc mỡ Eupolin có nguồn gốc nguyên liệu từ cỏ lào để điều trị bỏng Kết công bố từ ngày 28/06/2006 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -7- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L - Năm 1993, Nguyễn Thị Diễm Trang, Lê Viết Ngọc Phương (Đại học Quốc gia Hà Nội) Nguyễn Xuân Dũng (Trung tâm Đào tạo Phát triển Sắc ký Việt Nam) có công trình nghiên cứu thành phần hóa học cỏ lào Kết cô lập xác định cấu trúc hai hợp chất thuộc nhóm chalcone odoratin 4,2’-dihydroxy-4’,5’,6’trimethoxychalcone - Năm 2000, Nguyễn Thị Ngọc Tú Lê Thị Hải Yến (Viện Hóa Học, Trung tâm Khoa học Tự nhiên Công nghệ Quốc gia), có công trình nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn số thành phần cao cỏ lào Theo kết nghiên cứu có hai tinh chất có hoạt tính kháng tốt số vi sinh vật kiểm định vi khuẩn gram âm, vi khuẩn gram dương, nấm mốc nấm men Tuy nhiên, tác giả chưa công bố cấu trúc hóa học chất có hoạt tính sinh học nói - Năm 2001, Nguyễn Kim Phi Phụng Nguyễn Ngọc Sương (Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh) có công trình nghiên cứu tách chiết cô lập hợp chất hữu có hoạt tính sinh học từ cỏ lào Kết cho thấy cô lập xác định cấu trúc chất gồm: ceryl alcohol, β-amyrine, β-sitosterol, odoratin, 2’-hydroxy3,4,4’,5’,6’-pentamethoxychalcone 4,2’-dihydroxy-4’,5’,6’-trimethoxychalcone - Năm 2004, Lê Văn Hạc, Nguyễn Thị Thanh Hoài (Đại học Vinh) Nguyễn Xuân Dũng (Đại học Quốc gia Hà Nội) có công trình nghiên cứu thành phần hóa học tinh dầu cỏ lào Nghệ An Hà Tĩnh Kết cho thấy thành phần hóa học tinh dầu cỏ lào có 60 chất, có khoảng 37 chất nhận danh với thành phần gồm: geijerene (20,7%; 15,5%), gecmacren-D (20,5%; 16,8%), αpinene (11%; 11,1%) β-caryophyllene (9,1%; 7,3%) - 2005, Nguyễn Đức Cường, Nguyễn Minh Chính (Học viện Quân y) thực đề tài: Bước đầu đánh giá độ ổn định xây dựng tiêu chuẩn sở thuốc mỡ Eupolin từ cao cỏ lào Kết điều chế thuốc mỡ Eupolin với độ ổn định cao (khoảng 25 tháng), đáp ứng yêu cầu sản xuất đại trà - 2006, Ngô Quốc Luân (Trường Đại học Cần Thơ), Nguyễn Ngọc Hạnh (Viện Công nghệ Hóa học) ly trích tinh dầu khảo sát thành phần hóa học cỏ lào Kết thu tinh dầu cỏ lào flavonoid như: odoratin, ombuin, 5,7-dihydroxy4-methoxyflavanone, 3,5,7-trihydroxy-4-methoxyflavone, 4,2’-dihydroxy-4’,5’,6’- LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -8- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L trimethoxychalcone Tinh dầu flavonoid thử nghiệm hoạt tính sinh học, kháng oxi hóa, kết có khả kháng số loại vi khuẩn gram âm, gram dương, nấm men, nấm mốc - 2010, Đào Thị Vân Trang, Đào Hùng Cường (Trường Đại học Sư phạm, Đại học Đà Nẵng) khảo sát trình chiết flavonoid từ cỏ lào Kết xác định điều kiện chiết thích hợp: tỉ lệ H2O:EtOH = 1:1, tỉ lệ nguyên liệu rắn:dung môi = 1:25, nhiệt độ: 85oC, thời gian II.2 Các công trình nghiên cứu giới - 1967-1969, Ahmad M., Nabi MN khảo sát thành phần hóa học cỏ lào Kết thu số alcol béo sterol flavonoid từ cao EtOH PE - 1974, Talapatra S.K cộng có công trình nghiên cứu thành phần hóa học cỏ lào Kết thu số flavonoid tritecpen từ cao PE - 1978, Baruah RN cộng công bố công trình nghiên cứu thành phần hóa học sâu hợp chất flavonoid cỏ lào mọc Ấn Độ Kết cho thấy xác định cấu trúc bảy hợp chất thuộc ba nhóm: flavone, flavonone, chalcone - 1993, Dieneba Bamba cộng công bố kết nghiên cứu thành phần hóa học thử hoạt tính sinh học tinh dầu cỏ lào Bờ Biển Ngà Kết cho thấy thành phần tinh dầu cỏ lào có khoảng 38 hợp chất, có 26 hợp chất xác định Tinh dầu cỏ lào có có tác dụng kháng tốt chủng vi khuẩn gram âm - 1997, Irobi O.N (Đại học Waterloo, Nigieria) công bố kết nghiên cứu hoạt tính kháng sinh cao cỏ lào chiết với EtOH phương pháp đục lổ đĩa thạch điều kiện phòng thí nghiệm Kết cho thấy loại cao có tác dụng kháng nhiều chủng vi khuẩn như: B Thuringiensis, S Aureus, E Coli, Pseudomonas sp., Streptococcus faecalis Klebsiella sp - 1998-2000, Phan Toàn Thắng (Đại học Quốc gia Singapore) cộng công bố nhiều kết xung quanh việc nghiên cứu điều chế thuốc mỡ Eupolin từ cao chiết nước cỏ lào ứng dụng vào việc điều trị vết thương, vết bỏng - 2000, Taiwo Oludare B (Đại học Ibadan, Nigieria) cộng công bố kết thử tính kháng viêm, hạ sốt chống co thắt trơn cao chiết MeOH cỏ lào loài chuột Kết cho thấy liều lượng từ 50-200 mg/kg có tác dụng LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -9- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L TÓM TẮT NỘI DUNG ĐỀ TÀI Không biết xác cỏ lào Việt Nam xuất nào, ngƣời ta biết rằng, cỏ lào loài di thực đến năm 1935, nhà thực vật học ghi nhận có mặt cỏ lào Việt Nam Cỏ lào có tên khoa học Chromolaena odorata L hay Eupatorium odoratum L (King & Robinson), chi Eupatorium L., thuộc họ Cúc (Compositae hay Asteraceae) Vùng phân bố rộng từ đồng bằng, trung du đến miền núi khả phát tán hạt phát triển mạnh mẽ Trong dân gian, có thuốc phòng trị hiệu bệnh tiêu hóa hay vết thƣơng phần mềm Cho đến có nhiều công trình nghiên cứu nƣớc cỏ lào Đối tƣợng nghiên cứu chủ yếu loài tinh dầu thành phần flavonoid Không phủ nhận hoạt tính sinh học qu báu hợp chất flavonoid việc bảo vệ sức khỏe ngƣời Chính mà nhà khoa học ngày nghiên cứu dƣợc tính mà nhóm hợp chất mang lại Và có phát khả quan việc hỗ trợ chống bệnh ung thƣ nhƣ bệnh nan y khác Trên tinh thần đó, đề tài giới hạn việc tìm hiểu hợp chất flavonoid có cỏ lào Việc thực chủ yếu cao EtOAc cô lập chất phƣơng pháp sắc k cột cổ điển kết hợp sắc k mỏng (TLC) Việc nhận danh xác định cấu trúc đƣợc thực máy đo phổ Cộng hƣởng từ hạt nhân (500 MHz cho H-NMR 125 MHz cho 13 C-NMR) Viện Hóa học, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam Điểm tan chảy đƣợc đo máy Electrothemal 9100 (UK), mao quản không hiệu chỉnh Với phƣơng pháp này, cô lập nhận danh đƣợc hợp chất thuộc nhóm flavonoid Hợp chất đƣợc thử nghiệm hoạt tính sinh học, kết thu đƣợc khả quan LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - xii - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 1: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL1 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 2: PHỔ 1H-NMR MỞ RỘNG CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL2 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 3: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL3 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 4: PHỔ 13C-NMR MỞ RỘNG CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL4 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 5: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL5 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 6: PHỔ DEPT MỞ RỘNG CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL6 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 7: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL7 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 8: PHỔ HMBC MỞ RỘNG CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL8 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 9: PHỔ HMBC MỞ RỘNG CỦA HỢP CHẤT LA8 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL9 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 10: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT LA5-14 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL10 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 11: PHỔ LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP 13 C-NMR CỦA HỢP CHẤT LA5-14 - PL11 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 12: HÌNH ẢNH ĐỊNH TÍNH CÁC HỢP CHẤT TRONG CÂY CỎ LÀO Ia IIIa Va LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP Ib II IIIb IV Vb - PL12 - Vc ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L VIa VIb VIIa VIIb Chú thích: Hợp chất I Ankaloid Thuốc thử a b Bouchardat Wasicky Tạo bọt II Saponin III Steroid Salkowsky Na2CO3 20% IV Coumarine V Flavonoid Libermann-Burchard Pb(CH3COO)2 FeCl3 c Mg/HClđđ Pb(CH3COO)2 FeCl3 VII Glycosyde Fehling Tollens LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL13 - VI Tanin ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ lào - Chromolaena odorata L Phụ lục 13: HÌNH ẢNH ĐỊNH TÍNH OMBUIN I II IV III Ombuin hòa tan EtOH I : Thuốc thử Mg/HClđđ II : Thuốc thử FeCl3 III : Thuốc thử H2SO4đđ IV : Thuốc thử Pb(CH3COO)2 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - PL14 - ĐẶNG MINH KHIÊM [...]... ppm) LA8 LA5-14 2 14 6,7 14 6,7 3 13 6,4 13 6,4 4 17 6,0 17 6,0 5 16 0,4 16 0,3 9 7,4 9 7,4 16 4,9 16 4,9 9 1,9 9 1,9 9 15 6,1 15 6,1 10 10 4,0 10 4,0 1’ 12 3,3 12 3,3 11 4,8 11 4,7 3’ 14 6,2 14 6,2 4’ 14 9,4 14 9,4 6 6,3 3 LA5-14 13 6,3 5 7 8 2’ 6,6 8 7,7 2 6,7 1 7,7 3 5’ 7,0 8 7,0 9 11 1,7 11 1,7 6’ 7,6 8 7,6 9 11 9,8 11 9,8 4’-OCH3 3,8 5 3,8 7 5 6,0 5 6,0 7-OCH3 3,8 4 3,8 6 5 5,6 5 5,6 3’-OH 9,2 9 9,3 0 3-OH 9,5 2 9,5 3 5-OH 1 2,4 3 1 2,4 4 LUẬN VĂN... KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L Bảng 7: So sánh dữ liệu phổ NMR của LA8 với ombuin[2] 1 Vị trí C/H H-NMR (DMSO, δ ppm) LA8 C-NMR (CDCl 3, δ ppm) LA8 ombuin 2 14 6,7 14 7,3 3 13 6,4 13 6,0 4 17 6,0 17 5,9 5 16 0,4 16 0,2 9 7,4 9 7,4 16 4,9 16 4,8 9 1,9 9 2,0 9 15 6,1 15 6,0 10 10 4,0 10 3,9 1’ 12 3,3 12 1,8 11 4,8 11 5,5 3’ 14 6,2 14 7,0 4’ 14 9,4 14 8,9 6 6,3 3 ombuin 13 6,3 6... 8 2’ 6,6 8 7,7 2 6,7 9 7,7 9 5’ 7,0 8 6,9 5 11 1,7 11 1,7 6’ 7,6 8 7,7 5 11 9,8 12 1,7 8 4’-OCH3 3,8 5 3,8 8 5 6,0 5 6,0 7-OCH3 3,8 4 3,8 6 5 5,6 5 5,8 3’-OH 9,2 9 9,5 3 3-OH 9,5 2 9,7 5 5-OH 1 2,4 3 1 2,4 6 LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - 25 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L Nên dự đoán LA8 chính l LA5-14 Như vậy, LA8 có công thức phân tử l C17H14O 7, phân tử khối l 330... bộ thành phần hóa học cây cỏ l o Kết quả cho thấy, cây cỏ l o có chứa các hợp chất như: alcaloid, flavonoid, steroid, glycosyde, saponin, tanin, coumarine - Từ cao EtOAc, đã cô l p và nhận danh 1 flavonoid thuộc nhóm flavonol l ombuin ( 3,5 ,3 ’-trihydroxy- 7,4 ’-dimethoxyflavone ), và đã thử hoạt tính sinh học II KIẾN NGHỊ - Tiếp tục khảo sát thành phần hóa học cây cỏ l o trên các loại cao khác như: PE,... cỏ l o mọc tại Thái Lan Thành phần chính tinh dầu cỏ l o gồm: pregeijerence (1 7,6 % ), germacrene-D (1 1,1 % ), α-pinene ( 8,4 % ), β-caryophyllene ( 7,3 % ), vestitenone ( 6,5 % ), β- pinene ( 5,6 % ), δ-cadinene ( 4,9 % ), geijerene ( 3,1 % ), bulnesol ( 2,9 %) và transocimene (9 2,2 %) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - 11 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L I DỤNG CỤ - HÓA CHẤT... LA8 với LA5-14 trong Luận văn Cao học LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - 23 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L “Nghiên cứu thành phần tinh dầu và flavonoid trong cây cỏ l o của tác giả Ngô Quốc Luân, Nguyễn Ngọc Hạnh, thấy có sự tương đồng Bảng 6: So sánh dữ liệu phổ NMR của LA8 với LA5-14 1 Vị trí C/H H-NMR (DMSO, δ ppm) LA8 C-NMR (CDCl 3, δ ppm) LA8... NGUYÊN LIỆU II.1 Thu hái nguyên liệu Nguyên liệu l l cây cỏ l o, được thu hái tại Khu II – Trường Đại học Cần Thơ Cỏ l o được thu hái vào 08/201 0, thời điểm này đang vào mùa mưa nên cây trong giai đoạn phát triển xanh tốt, chưa có hoa LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - 12 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L II.2 Xử l nguyên liệu Cỏ l o tươi chứa hàm l ợng... hóa học, nhận danh Sơ đồ 1: Quy trình thực nghiệm LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - 15 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L V ĐỊNH TÍNH SƠ BỘ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CÂY CỎ L O [4 ], [6 ], [7 ], [11] V.1 Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất steroid * Cân 1g bột kh , cho vào 20ml CHCl3 và ngâm trong 2 giờ Sau đó l c l y dịch trong l mẫu thử * Thuốc thử: - Salkowsky:... giảng Hóa học hợp chất thiên nhiên Đại học Cần Th , l u hành nội bộ [12] Võ Văn Chi, Trần Hợp, 1999 Cây cỏ có ích ở Việt Nam NXB Giáo dục, tập 1 (trang 505) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - 29 - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L B TÀI LIỆU THAM KHẢO TRÊN THẾ GIỚI [13] A Ngono Ngane, R Ebelle Eteme, F Ndifor, L Biyity, P.H Amvam Zollo, P Bouchet, 2006... cứu sau này Điểm đề nghị: 10 (A) Cần Th , ngày 21 tháng 05 năm 2011 Giáo viên hƣớng dẫn ThS Ngô Quốc Luân LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP - ii - ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid trong cây cỏ l o - Chromolaena odorata L NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN PHẢN BIỆN 1 Tên đề tài: “GÓP PHẦN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN FLAVONOID TRONG CÂY CỎ L O (Chromolaena odorata L. ) họ Cúc (Asteraceae) ” Sinh viên thực hiện: Đặng ... 16 4,9 16 4,9 9 1,9 9 1,9 15 6,1 15 6,1 10 10 4,0 10 4,0 1’ 12 3,3 12 3,3 11 4,8 11 4,7 3’ 14 6,2 14 6,2 4’ 14 9,4 14 9,4 6,3 3 LA5-14 13 6,3 5 2’ 6,6 8 7,7 2 6,7 1 7,7 3 5’ 7,0 8 7,0 9 11 1,7 11 1,7 6’ 7,6 8 7,6 9 11 9,8 ... Tuổi thọ khoảng từ 1- 2,5 năm LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP -2- ĐẶNG MINH KHIÊM Góp phần khảo sát thành phần flavonoid cỏ l o - Chromolaena odorata L Hình 1: Cây cỏ l o Hình 2: L cỏ l o Hình 3: Hoa cỏ l o. .. L I TỔNG QUAN VỀ CÂY CỎ L O [1 ], [10 ], [12] I.1 Hình thái Cây cỏ l o có tên yên bạch, cỏ hôi, cỏ Việt Minh, Cộng sản (herbe communiste ), l p bốp, ba bớp, bù xích, cỏ tàu bay, cỏ l m, cỏ kali,