BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH LÊ HỮU THÀNH THỬ NGHIỆM DỊCH ÉP LÁ ỔI VÀ CỦ TỎI TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH DO VI KHUẨN Streptococcus spp TRÊN CÁ TRÊ LAI (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP THẠC SỸ CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN VINH – 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH THỬ NGHIỆM DỊCH ÉP LÁ ỔI VÀ CỦ TỎI TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH DO VI KHUẨN Streptococcus spp TRÊN CÁ TRÊ LAI (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP THẠC SỸ CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN MÃ SỐ: 60.62.70 Người thực hiện: Lê Hữu Thành Người hướng dẫn khoa học: TS Trần Ngọc Hùng VINH, 2012 LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, trước hết xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới Thầy giáo TS Trần Ngọc Hùng, người định hướng nghiên cứu đề tài hướng dẫn tận tình tạo điều kiện giúp đỡ suốt trình thực luận văn Tôi xin cảm ơn tập thể cán Khoa Nông Lâm Ngư, cán Trung tâm THTN, Khoa Sau đại học Trường Đại học Vinh tạo điều kiện giúp đỡ trình thực đề tài Cuối xin chân thành cảm ơn thầy giáo, cô giáo, gia đình bạn bè động viên nhiệt tình ủng hộ để hoàn thành khóa học Nghệ An, ngày 12 tháng 10 năm 2012 Tác giả Lê Hữu Thành CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU TRONG LUẬN VĂN TT: Thứ tự NTTS: Nuôi trồng thủy sản CTTA: Công thức thức ăn CT: Công thức TN: Thí nghiệm Nxb: Nhà xuất DANH MỤC CÁC BẢNG Số bảng Tên bảng Trang 3.1 So sánh khả kháng vi khuẩn Streptococcus spp dịch ép 32 ổi củ tỏi với thuốc kháng sinh 3.2 Ảnh hưởng nồng độ pha loãng dịch ép lên khả kháng 34 khuẩn 3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả kháng vi khuẩn 36 Streptococcus spp 3.4 Kết phân lập vi khuẩn gây bệnh lở loét cá trê lai 43 DANH MỤC CÁC HÌNH Số hình Tên hình Trang 1.1 Cá trê lai 1.2 Vi khuẩn Streptococcus spp 1.3 Lá ổi 1.4 Tỏi Allium sativum L 2.1 Sơ đồ khối nghiên cứu 2.2 Sơ đồ bước pha loãng nồng độ vi khuẩn 2.3 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 2.4 Đường cấy vi khuẩn đĩa lồng 2.5 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 3.1 Đường kính vòng vô khuẩn dịch ép ổi loại kháng sinh 10 22 23 26 28 29 32 vi khuẩn Streptococcus spp 3.2 Đường kính vòng vô khuẩn dịch ép củ tỏi loại kháng sinh 33 vi khuẩn Streptococcus spp 3.3 Tỷ lệ cá nhiễm bệnh thí nghiệm phòng bệnh dịch ép ổi 3.4 Tỷ lệ sống cá công thức thí nghiệm phòng 37 38 bệnh dịch ép ổi 3.5 Tỷ lệ cá nhiễm bệnh thí nghiệm phòng bệnh củ tỏi 3.6 Tỷ lệ sống cá công thức phòng bệnh dịch ép củ 40 41 tỏi 3.7 Cá bị bệnh gan phù nề 3.8 Nuôi cấy vi khuẩn từ cá bị bệnh 3.9 Nhuộm gram vi khuẩn từ cá bị bệnh 3.10.Tỷ lệ sống cá nhiễm bệnh thí nghiệm trị bệnh dịch ép ổi 3.11 Tỷ lệ sống cá công thức thí nghiệm trị bệnh 3.12 Tỷ lệ sống cá nhiễm bệnh thí nghiệm trị bệnh dịch ép củ tỏi 3.13 Tỷ lệ sống cá công thức thí nghiệm trị bệnh 43 43 43 44 45 46 47 MỤC LỤC Lời cảm ơn Các chữ viết tắt ký hiệu luận văn Danh mục bảng Danh mục hình Mục lục Mở đầu Lý chọn đề tài Mục tiêu đề tài Nội dung nghiên cứu Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Vài nét đối tượng nghiên cứu 1.1.1 Cá trê lai 1.1.2 Vi khuẩn Streptococcus spp 1.1.3 Lá ổi 1.1.4 Tỏi Allium sativum L Trang i ii iii iv vi 1 2 4 1.2 Tình hình nghiên cứu sử dụng thảo dược phòng, trị bệnh 14 nhiễm khuẩn động vật thủy sản 1.2.1 Tình hình nghiên cứu sử dụng thảo dược giới 1.2.2 Tình hình nghiên cứu sử dụng thảo dược nước Chương Đối tượng, vật liệu, phương pháp, địa điểm thời gian 14 16 21 nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.2 Vật liệu nghiên cứu 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp lấy dịch ép thảo dược 2.3.2 Phương pháp định lượng mật độ vi khuẩn 2.3.3 Phương pháp thử kháng sinh đồ 2.3.4 Phương pháp bố trí thí nghiệm 2.3.4 Phương pháp xử lí số liệu 2.4 Thời gian địa điểm nghiên cứu Chương Kết nghiên cứu thảo luận 3.1 Kết thử kháng sinh đồ dịch ép ổi củ tỏi vi 21 21 21 22 22 23 24 31 31 32 32 khuẩn Streptococcus spp 3.2 Kết thử nghiệm ảnh hưởng nồng độ pha loãng dịch ép lên 34 khả kháng khuẩn 3.3 Kết thử nghiệm ảnh hưởng nhiệt độ đến khả kháng 36 khuẩn 3.4 Kết thử nghiệm khả phòng bệnh ổi củ tỏi 37 vi khuẩn Streptococcus spp gây cá trê lai 3.5 Kết thử nghiệm khả trị bệnh ổi củ tỏi vi 43 khuẩn Streptococcus spp gây cá trê lai Kết luận đề nghị Tài liệu tham khảo 49 Phụ lục MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) loài cá dễ nuôi có khả chống chịu với môi trường khắc nghiệt Đây đối tượng năm qua nuôi phổ biến Song người nuôi gặp số khó khăn bất cập thị trường chưa thực ổn định bị tác động dịch bệnh Một tác nhân gây bệnh nguy hiểm cho đối tượng cá trê lai nói riêng cho cá nước nói chung vi khuẩn Streptococcus spp Ở nước ta, dù chưa xảy trận dịch nghiêm trọng có thiệt hại cảnh báo dịch bệnh đối tượng gây ra, ước tính thiệt hại năm khoảng 150 triệu USD [22] Một giải pháp để phòng trị bệnh vi khuẩn sử dụng loại kháng sinh, nhiên dao hai lưỡi Nếu sử dụng kháng sinh không cách không chữa bệnh cho đối tượng nuôi mà ảnh hưởng xấu tới sức khỏe, môi trường sinh thái tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc Ngoài ra, việc sử dụng kháng sinh điều trị bệnh động vật thủy sản để lại dư lượng sản phẩm gây hại cho người tiêu dùng khả tiêu thụ sản phẩm Từ giai đoạn năm 80, 90 giới thống kê có xấp xỉ 20% loài thực vật có hoạt tính sinh học phù hợp để tạo thành dược phẩm Và nay, phần lớn loại kháng sinh giới thiệu thị trường nhiều người tiêu dùng ưa chuộng có nguồn gốc từ tự nhiên bán tổng hợp [13] Chính ưu điểm đó, người nghiên cứu sử dụng loại thảo dược phòng trị bệnh nhiễm khuẩn cho đối tượng nuôi động vật Thủy sản có nhiều nghiên cứu thử nghiệm cho thấy kết khả quan Đặc biệt, năm qua vấn đề kháng thuốc tồn dư kháng sinh sản phẩm Thủy sản mối quan tâm người tiêu dùng việc sử dụng kháng sinh nguồn gốc từ tự nhiên giải pháp vừa đảm bảo an toàn vệ sinh thực phẩm thân thiện với môi trường sinh thái [14] Việt Nam quốc gia có tiềm đa dạng sinh học cao, nhiều loại thảo dược quý ghi nhận có khả kháng khuẩn ứng dụng vào việc chữa trị bệnh nhiễm khuẩn người số loại động vật khác [19] Do có số nghiên cứu tác dụng loại thảo dược như: tỏi, húng, trầu không, nghệ, hẹ, ổi… đối tượng cá chép, tôm sú, cá trắm cỏ, cá rô phi vằn,… Nhưng nghiên cứu dừng thử nghiệm tính kháng khuẩn loại thảo dược Chính vậy, cho phép Khoa Sau đại học, Trường Đại hoc Vinh kế thừa nghiên cứu trước tiến hành thực đề tài: “Thử nghiệm dịch ép ổi củ tỏi phòng trị bệnh vi khuẩn Streptococcus spp cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male)” Mục tiêu nghiên cứu đề tài Xác định khả phòng trị bệnh lở loét vi khuẩn Streptococcus spp gây cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) dịch ép ổi dịch ép củ tỏi điều kiện thực nghiệm Nội dung nghiên cứu Để đạt mục tiêu nghiên cứu trên, đề tài triển khai nội dung sau: - Thử nghiệm khả kháng khuẩn dịch ép ổi dịch ép củ tỏi vi khuẩn Streptococcus spp - Thử nghiệm ảnh hưởng nồng độ dịch ép củ tỏi dịch ép ổi tới khả kháng vi khuẩn Streptococcus spp - Thử nghiệm ảnh hưởng nhiệt độ đến khả kháng vi khuẩn Streptococcus spp dịch ép ổi dịch ép củ tỏi - Thử nghiệm khả phòng bệnh lở loét cho cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) vi khuẩn Streptococcus spp gây dịch ép ổi, dịch ép củ tỏi điều kiện thực nghiệm - Thử nghiệm khả trị bệnh lở loét cho cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) vi khuẩn Streptococcus spp gây dịch ép ổi, dịch ép củ tỏi điều kiện thực nghiệm 10 PHỤ LỤC Bảng Diễn biến bệnh lý cá sau cảm nhiễm vi khuẩn Streptococcus spp thí nghiệm phòng bệnh Sau cảm nhiễm ngày CT1 CT2 CT3 CT4 Cá hoạt động bình thường Cá bắt đầu xuất có dấu hiệu hoạt động yếu, lại hoạt động bình thường, bị tổn thương vết tiêm 17% số cá bể xuất huyết thân hoạt động yếu, bơi lờ đờ mặt nước Cá hoạt động bình thường Cá bắt đầu xuất có dấu hiệu hoạt động yếu có vết loét thân, bị tổn thương vết tiêm Cá hoạt động bình thường Hoạt động bình thường, bị tổn thương vết tiêm Cá hoạt động bình thường Toàn bị tổn thương vết tiêm, 20% cá thể có vết loét thân hoạt động yếu 6,7% số cá chết có dấu hiệu bệnh lý 30% số cá có họạt động kém, bơi lờ đờ có 23% số cá có vết loét thân 16,7% số cá bị chết chết, 40% số cá có hoạt động có vết loét thân Các lại 6,7% số cá có dấu 6,7% có dấu có 43% số cá tiếp hiệu xuất huyết hiệu xuất huyết tục có tượng xuất huyết, số hoạt động kém, 27% số cá bị chết 3,3% số cá bị chết 3,3% số cá chết 10,3% số cá bị có dấu hiệu có dấu hiệu chết có biểu bệnh lý 10,3% số bệnh lý loét bệnh lý, cá có hoạt động thân, 10% số cá lại xuất có vết loét hoạt động vết loét thân thân 6,7% số hoạt động cá có vết loét thân 10% số cá bị chết 10% số cá bị Số cá chết chết, 6,7% số chết, 6,7% số cá 63,3% cá hoạt động hoạt động lại hoạt động có vết loét có vết loét yếu, có dấu hiệu thân Các thân Các xuất huyết lại hoạt động bình lại hoạt động thân 57 hoạt động bình thường thường bình thường 30% số cá bị chết 20,7% số cá có hoạt động kém, sử dụng thức ăn kém, số có biểu vết loét thân 44,3% số cá bị chết, 20,3% số cá có biểu hoạt động kém, có vết loét thân Còn lại hoạt động bình thường 13,3% số cá bị chết, 6,7% số cá có biểu bệnh lý, lại hoạt động bình thường 13,3% số cá bị chết có dấu hiệu bệnh lý, lại hoạt động bình thường 40% số cá bị chết, lại có dấu hiệu bệnh lý rõ ràng, bơi lờ đờ, bỏ ăn 16,7% số cá bị chết, 3,3% số cá có biểu bệnh lý, lại hoạt động bình thường 3,3% số cá có dấu hiệu bệnh lý Còn lại hoạt động bình thường 100% số cá bị chết, còn lại có biểu xuất huyết phần lưng, bơi lờ đờ, bỏ ăn Bảng Diễn biến bệnh lý cá sau tiêm cảm nhiễm Streptococcus spp Lô TN Diễn biến bệnh lý cá sau tiêm cảm nhiễm vi khuẩn CT1 CT2 CT3 CT4 – ĐC 6,7% số cá bị chết, lại hoạt động yếu 20% số cá chết, 17,6% có dấu hiệu sưng đỏ ví trí tiêm, lại hoạt động yếu 6,7% số cá bị chết, lại hoạt động yếu 17,6% số cá chết, lại hoạt động yếu, 2,7% số cá có dấu hiệu sưng đỏ vết tiêm 3,3% số cá bị chết, lại hoạt động yếu 10% số cá chết, 10% số cá có dấu hiệu sưng đỏ vết tiêm 16,7% số cá bị chết, lại hoạt động yếu 10% số cá chết, 50,7% số cá có xuất vết nhớt da quanh vết tiêm, có 17,6% số cá sưng đỏ vết tiêm, cá bơi lờ đờ 58 Số cá chết chiếm 23,3%, 23,3% số cá có dấu hiệu sưng đỏ ví trí tiêm, lại hoạt động yếu Số cá chết Số cá chết Số cá chết 10%, chiếm 33,3%, 13,3%, 17,6% số 33,3% số cá có 13,3 % số cá có cá có dấu hiệu dấu hiệu sưng dấu hiệu sưng sưng đỏ ví trí đỏ ví trí ngày đỏ ví trí tiêm, tiêm, lại hoạt tiêm, lại cá có nhiều động yếu hoạt động yếu nhớt, lại hoạt động yếu 30% số cá chết, 40% số cá chết, 16,7% số cá 50% số cá bị 10% có dấu hiệu 3,3% số cá có chết, 6,6% số cá chết, 13,3% số sưng đỏ vết dấu hiệu sưng sưng đỏ vết cá bị lở loét, tiêm, 13,3% số đỏ vết tiêm, tiêm, 16,7% số 37,7% số cá ngày cá có dấu hiệu 16,7% số cá có cá có dấu hiệu sưng đỏ vết bơi linh hoạt dấu hiệu bơi linh bơi linh hoạt tiêm, lại vết hoạt và vết sưng hoạt động yếu sưng đỏ mờ dần vết sưng đỏ mờ đỏ mờ 37,7% số cá 47,7% số cá 23,3% số cá 773,3% số cá chết, 16,7% số chết, 20% số cá chết, 23,3% số chết, 13,3% số cá có dấu hiệu có dấu hiệu bơi cá có dấu hiệu cá bị lở loét, ngày bơi linh hoạt linh hoạt bơi linh hoạt 10% số cá sưng vết vết sưng đỏ vết sưng đỏ vết tiêm sưng đỏ mờ dần mờ dần đỏ mờ dần Còn lại 60% số 53,3% số cá 73,3% số cá 100% số cá bị ngày cá hoạt động lại hoạt động lại hoạt động chết bình thường bình thường bình thường Bảng Diễn biến bệnh lý cá sau cảm nhiễm vi khuẩn Streptococcus spp Sau cảm nhiễm CT1 CT2 Cá hoạt động yếu, có dấu Cá hoạt động yếu, có dấu hiệu sưng đỏ vị trí tiêm hiệu sưng đỏ vị trí tiêm 3,3% số cá chết, 23,3% số cá có 6,7% số cá chết , 43,3% số cá sưng dấu hiệu sưng đỏ vị trí tiêm, đỏ vị trí tiêm, lại hoạt động lại hoạt động yếu yếu 10% số cá bị chết, 43,3% số cá có 23,3% số cá chết, toàn số cá ngày dấu hiệu xuất huyết thân, số lại xuất huyết sưng đỏ vị trí tiêm lại hoạt động 59 13,3% số cá bị chết, 26,7% sốc cá 20% số cá chết, lại có ngày có dấu hiệu sưng đỏ vị trí tiêm xuất vết loét thân, bơi lờ đờ mặt nước 16,7% số cá chết Có 16,7 số cá 60,3% số cá chết lại có ngày có có dấu hiệu sưng đỏ vị trí biểu xuất hu yết bơi lờ đờ tiêm mặt nước 40% số cá chết Các lại 80% số cá chết, lại có tượng loét thân dấu hiệu loét phần thân, hoạt động có 13,3 % số cá có biểu yếu lành vết loét thân 50% số cá chết Có 33,3% số cá có 100% số cá chết vết loét thân có xu hướng lành vết loét thân, hoạt động bình thường Bảng Diễn biến bệnh lý cá sau tiêm cảm nhiễm Streptococcus spp Lô NT Diễn biến bệnh lý cá sau cảm nhiễm vi khuẩn CT1 CT2 –ĐC 16,7% số cá chết, xuất 20% số cá chết, có biểu ngày vết sưng đỏ vết tiêm, có vết sưng đỏ vết lại hoạt động tiêm, lại yếu, bơi yếu, ăn lờ đờ, ăn Có thêm 33,3% số cá chết, Có thêm 40,3% số cá chết, số số lại hoạt động lại hoạt động yếu, ngày yếu, 16,7% số cá có dấu ăn Có 33,3% có dấu hiệu hiệu sưng đỏ vết tiêm, cá sưng đỏ vết tiêm ăn Có 40,7% số cá chết, Có 60% số cá chết, 33,3% số có tượng loét vết cá xuất vết nhớt quanh vết tiêm, 16,7% số cá sưng đỏ tiêm, 10% số cá sưng đỏ vết vết tiêm tiêm Có 50% số cá chết, 16,7% Có 67,7% số cá chết, 16,7% số số cá sưng đỏ vết tiêm, cá bị lở loét ví tiêm có 16,7% số cá hoạt động dấu hiệu lan rộng sang vị 60 nhanh nhẹn hơn, nhớt trí khác da dần vết sưng đỏ có dấu hiệu giảm Số cá chết 57,7% số cá chết, Có 83,3% số cá chết, số lại ngày số lại hoạt động nhanh hoạt động yếu nhẹn Cá tượng chết ngày 100% Cá chết thêm, 57,7% số cá lại hoạt động nhanh nhẹn, nhớt, xuất huyết mờ dần Bảng 5: Tỷ lệ cá nhiễm bệnh sau tiêm thí nghiệm phòng bệnh sau cảm nhiễm ngày ngày ngày 10 20 33.33 44.44 28.57 33.33 CT1 CT2 0 0 10 10 10 20 10 10 30 33.33 10 22.22 33.33 71.43 11.11 11.11 25 66.67 11.11 12.5 33.33 60 11.11 0 0 0 10 10 0 0 0 CT3 0 10 10 11.11 0 0 10 11.11 11.11 11.11 11.11 10 50 100 100 100 100 CT4 10 40 100 100 100 100 20 40 100 100 100 100 Bảng Kết phân tích ANOVA tỷ lệ cá biểu bệnh lý thí nghiệm phòng bệnh Oneway Descriptives TLBHBE NH N Tota l Mean 44.3100 16.7033 3.3033 1.0000E 12 37.4067 95% Confidence Interval Minim Maxim for Mean Std Error um um Lower Bound Upper Bound 15.39793 8.89000 3.9694 80.4706 33.33 60.00 6.41436 3.70333 -12.2308 19.6375 00 11.11 6.41436 3.70333 -12.2308 19.6375 00 11.11 Std Deviation 00000 00000 100.0000 41.86291 12.08478 10.8082 61 100.0000 100.00 100.00 64.0051 00 100.00 Test of Homogeneity of Variances TLBHBENH Levene Statistic df1 df2 Sig 8.029 009 ANOVA TLBHBENH Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 18638.769 638.769 19277.537 df Mean Square 6212.923 79.846 11 Post Hoc Tests 62 F 77.811 Sig .000 Multiple Comparisons Dependent Variable:TLBHBENH (I) (J) Mean Std Sig 1=NT 1=NT Difference (I- Error 38.51667* 7.29594 38.51667* 7.29594 -57.78000* 7.29594 -38.51667* 7.29594 00000 7.29594 -96.29667* 7.29594 -38.51667* 7.29594 00000 7.29594 -96.29667* 7.29594 57.78000* 7.29594 96.29667* 7.29594 96.29667* 7.29594 LSD 38.51667* 7.29594 38.51667* 7.29594 -57.78000* 7.29594 -38.51667* 7.29594 00000 7.29594 -96.29667* 7.29594 -38.51667* 7.29594 00000 7.29594 -96.29667* 7.29594 57.78000* 7.29594 96.29667* 7.29594 96.29667* 7.29594 * The mean difference is significant at the 0.05 level Homogeneous Subsets 63 003 003 000 003 1.000 000 003 1.000 000 000 000 000 001 001 000 001 1.000 000 001 1.000 000 000 000 000 95% Confidence Interval Lower Upper Bound Bound 15.1525 61.8808 15.1525 61.8808 -81.1442 -34.4158 -61.8808 -15.1525 -23.3642 23.3642 -119.6608 -72.9325 -61.8808 -15.1525 -23.3642 23.3642 -119.6608 -72.9325 34.4158 81.1442 72.9325 119.6608 72.9325 119.6608 21.6922 55.3411 21.6922 55.3411 -74.6045 -40.9555 -55.3411 -21.6922 -16.8245 16.8245 -113.1211 -79.4722 -55.3411 -21.6922 -16.8245 16.8245 -113.1211 -79.4722 40.9555 74.6045 79.4722 113.1211 79.4722 113.1211 TLBHBENH 1=NT N Subset for alpha = 0.05 1,2=N Tukey HSDa 16.7033 3 3.3033 44.3200 1.0000E2 Sig 1.000 1.000 1.000 Duncana 16.7033 3 3.3033 44.3200 1.0000E2 Sig 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng 7: Tỷ lệ cá có biểu bệnh lý sau cảm nhiễm thí nghiệm trị bệnh sau cảm nhiễm ngày ngày ngày NT1 20 50 44.44 44.44 44.44 37.50 25.00 12.50 10 40 40 44.44 37.5 37.50 37.50 12.50 NT2 10 40 33.33 33.33 44.44 44.44 33.33 25 20 50 100 100 100 100 100 100 10 40 100 100 100 100 100 100 20 60 100 100 100 100 100 100 * Kết phân tích ANOVA tỷ lệ cá có biểu bệnh lý thí nghiệm trị bệnh * Bảng: đường kính vòng vô khuẩn thí nghiệm lần lặp đường kính vòng vô khuẩn CT1 CT2 (Bt (Ciprofloxacin) SMX/TMP) 31 33 33 7.5 32 *Kết xử lý ANOVA thí nghiệm 64 CT3 (lá ổi) 19.5 21 20.5 21 DKVVK N Total Mean Std Deviatio n Std Error 95% Confide nce Interval for Upper Minimu Mean Bound m Lower Maximu Bound m 32.2500 7.8750 20.5000 95743 47871 30.7265 33.7735 85391 42696 6.5162 9.2338 70711 35355 19.3748 21.6252 10.4238 12 20.2083 3.00911 13.5853 26.8313 31.00 7.00 19.50 33.00 9.00 21.00 7.00 33.00 Test of Homogeneity of Variances DKVVK Levene Statistic 346 df1 df2 Sig 716 ANOVA DKVVK Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 1188.792 594.396 6.438 715 1195.229 11 Post Hoc Tests 65 F 831.000 Sig .000 Multiple Compari sons Depende nt Variable: DKVVK (I) 1=CIPR O, 2=BT, 3=LAOI (J) 1=CIPR Mean O, 2=BT, Differenc 3=LAOI e (I-J) Std Error Sig 95% Confiden ce Interval Lower Bound Tukey HSD 24.37500 59803 000 22.7053 26.0447 * 59803 000 10.0803 13.4197 24.37500 59803 000 -26.0447 -22.7053 59803 000 -14.2947 -10.9553 59803 000 -13.4197 -10.0803 59803 000 10.9553 14.2947 59803 000 23.0222 25.7278 * 59803 000 10.3972 13.1028 24.37500 59803 000 -25.7278 -23.0222 59803 000 -13.9778 -11.2722 59803 000 -13.1028 -10.3972 59803 000 11.2722 * Upper Bound 11.75000 * 12.62500 * 11.75000 * 12.62500 * LSD 24.37500 * 11.75000 * 12.62500 * 11.75000 * 12.62500 * * The mean difference is significant at 66 13.9778 Homogeneous Subsets DKVVK 1=CIP RO, a Subset for alpha = 0.05 N Tukey HSD 4 Duncan a Sig 4 Sig 7.8750 20.5000 32.2500 1.000 7.8750 1.000 1.000 20.5000 32.2500 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 4.000 Bảng Số lượng cá chết sau cảm nhiễm vi khuẫn thí nghiệm phòng bệnh Sau 0h 12h 48h 60h 72h 78h 96h 108h 120h 132h 144h 156h 168h 180 P1.1 0 0 0 0 1 CT1 CT2 CT3 CT4 P1.2 P1.3 P2.1 P2.2 P2.3 P3.1 P3.2 P3.3 P4.1 P4.2 P4.3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 1 1 1 1 1 1 0 0 0 0 1 1 0 0 1 0 0 0 0 1 1 0 0 1 0 0 0 1 * Kết xử lý ANOVA tỷ lệ cá chết trình thí nghiệm Oneway 67 Descriptives TYLEC HET 95% Confidence Interval for Mean Std Std N Mean Deviation Error Lower Bound 3 3 Tot al 12 43.33 3.3333 5.77350 28.9912 33 16.66 6.6666 11.54701 -12.0177 67 13.33 3.3333 5.77350 -1.0088 33 63.33 8.8191 15.27525 25.3875 33 34.16 6.6808 23.14316 19.4622 67 Minim Maximu um m Upper Bound 57.6755 40.00 50.00 45.3510 10.00 30.00 27.6755 10.00 20.00 101.2792 50.00 80.00 48.8711 10.00 80.00 Test of Homogeneity of Variances TYLECHET Levene Statistic 1.895 df1 df2 Sig 209 ANOVA TYLECHET Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 5025.000 1675.000 866.667 108.333 5891.667 11 Post Hoc Tests 68 F 15.462 Sig .001 Multiple Comparisons Dependent Variable:TYLECHET 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Tukey HSD LSD 26.66667 8.49837 055 -.5481 53.8814 30.00000* 8.49837 032 2.7852 57.2148 -20.00000 8.49837 165 -47.2148 7.2148 -26.66667 8.49837 055 -53.8814 5481 3.33333 8.49837 978 -23.8814 30.5481 8.49837 46.66667* 003 -73.8814 -19.4519 8.49837 30.00000* 032 -57.2148 -2.7852 -3.33333 8.49837 978 -30.5481 23.8814 8.49837 50.00000* 002 -77.2148 -22.7852 20.00000 8.49837 165 -7.2148 47.2148 46.66667* 8.49837 003 19.4519 73.8814 50.00000* 8.49837 26.66667* 8.49837 002 014 22.7852 7.0694 77.2148 46.2639 30.00000* 8.49837 008 10.4027 49.5973 8.49837 20.00000* 046 -39.5973 -.4027 8.49837 26.66667* 014 -46.2639 -7.0694 3.33333 8.49837 705 -16.2639 22.9306 8.49837 46.66667* 001 -66.2639 -27.0694 8.49837 30.00000* 008 -49.5973 -10.4027 -3.33333 8.49837 705 -22.9306 16.2639 8.49837 50.00000* 000 -69.5973 -30.4027 20.00000* 8.49837 046 4027 39.5973 46.66667* 8.49837 001 27.0694 66.2639 50.00000* 8.49837 000 30.4027 69.5973 * The mean difference is significant at the 0.05 level 69 Homogeneous Subsets TYLECHET 1=NT 1,2=N Subset for alpha = 0.05 N a Tukey HSD 3 13.3333 16.6667 Duncana 16.6667 43.3333 43.3333 63.3333 Sig 3 978 13.3333 16.6667 Sig 055 165 43.3333 63.3333 705 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Bảng Số lượng cá chết trình thí nghiệm trị bệnh Sau cảm Cảm nhiễm P1.1 NT1 P1.2 P1.3 0h P4.1 NT2 P4.2 0 0 24 0 0 48h 0 0 60h 0 0 72h ngày 0 0 78h 0 0 96h ngày 1 108h 0 0 120h ngày 1 132h 0 144h ngày 1 156h 0 0 168h ngày 0 192h ngày 0 198h 0 0 216h ngày 0 228h 0 0 * Kết phân tích ANOVA tỷ lệ cá chết trình thí nghiệm 70 P4.3 0 0 0 1 2 1 0 0 0 0 1 2 T-Test Group Statistics 1=NT 1,2=N T2 N TYLECHE T Mean Std Deviation Std Error Mean 16.6667 5.77350 3.33333 93.3333 5.77350 3.33333 Independent Samples Test Levene's Test for Equality of Variances F TYLEC Equal variances HET assumed Equal variances not assumed Sig t 1.00 000 16.26 t-test for Equality of Means Std 95% Sig Erro Confidence (2- Mean tailed Differe r Interval of the df ) nce Diff Difference eren Lower Upper 4.71 000 76.666 89.754 63.578 405 67 95 38 4.0 4.71 16.26 000 76.666 89.754 63.578 00 405 67 95 38 71 [...]... cứu 1.1.1 Cá trê lai Ngành động vật có x ơng sống: Lớp cá x ơng: Vestebrata Osteichthys Phân lớp cá vây tia: Actinopterygi Bộ cá chép: Cipriniformes Họ cá trê: Pangasidae Giống: Clarias Tên tiếng Vi t: Cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) Hình 1.1 Cá trê lai - Đặc điểm hình thái: Cá trê lai được lai giữa cá trê phi và cá trê vàng, có ngoại hình tương tự cá trê vàng, da... nghiệm khả năng phòng và trị bệnh đối với vi khuẩn Streptococcus spp gây ra trên cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) * Thí nghiệm 4: Nghiên cứu khả năng phòng bệnh của dịch ép lá ổi và củ tỏi đối với vi khuẩn Streptococcus spp gây ra trên cá trê lai * Sơ đồ bố trí thí nghiệm Cá khỏe được nuôi thuần 7 ngày Bổ sung thảo dược vào trong thức ăn với 4 CT CT1 (20ml thảo dược/kg... gariepinus male) của dịch ép lá ổi và dịch ép củ tỏi trong điều kiện thực nghiệm Đánh giá tính khảng khuẩn Steptococcus spp của dịch ép thảo dược Đánh giá ảnh hưởng của nồng độ pha loãng dịch ép với khả năng kháng khuẩn Đánh giá ảnh hưởng của nhiệt độ tới khả năng khảng khuẩn -Nhiệt độ phù hợp -Nồng độ phù hợp Thử nghiệm khả năng phòng trị bệnh của dịch ép thảo dược đối với bệnh lở loét Streptococcus spp trên. .. nước ép thảo dược đường kính 6mm - Dao, kéo, panh, găng tay… - Thùng x p, máy sục khí, dây sục khí, đá bọt 2.3 Phương pháp nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu: Đánh giá khả năng khảng khuẩn Streptococcus spp của dịch ép củ tỏi và dịch ép lá ổi *Sơ đồ khối nghiên cứu: 26 X c định khả năng phòng trị bệnh lở loét do vi khuẩn Streptococcus spp gây ra trên cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus. .. GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Cá trê lai Cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) giai đoạn nuôi thương phẩm 2.2 Vật liệu nghiên cứu - Lá ổi: Lá ổi (loại lá bánh tẻ) được thu ở x Nghi Phong - Nghi Lộc - Nghệ An - Tỏi (Allium sativum L) - Vi khuẩn Streptococcus spp được thu và lưu giữ bởi Phòng thí nghiệm Cơ sở Thuỷ sản, Bệnh học thủy sản – Nông Lâm Ngư, ... x c định mật độ vi khuẩn - Theo dõi tình trạng bệnh lý của cá (6h/1 lần) và ghi chép hàng ngày Các dấu hiệu bệnh lý (nếu có) sẽ được ghi chép lại cụ thể Sau khi cá chết sẽ được thu con cá, phân lập, định danh vi khuẩn để chắc chắn rằng vi khuẩn gây chết cá là vi khuẩn Streptococcus spp So sánh sự biểu hiện bệnh lý và tỷ lệ sống sót giữa các bể Từ đó rút ra kết luận về tác dụng phòng bệnh của dịch ép. .. huyết áp, phòng bệnh x vữa động mạch Các bác sĩ Nhật Bản lại nhận x t rằng do Tỏi chứa chất allixotine nên Tỏi có tác dụng chữa đau lưng, vi m khớp Ngoài ra các nghiên cứu lâm sàng cũng cho thấy Tỏi có tác dụng chữa trị được nhiều căn bệnh như: các bệnh về tai, mũi, họng; bỏng nhiễm khuẩn và vết thương có mủ; dùng Tỏi để trị các loại giun; dùng nước ép Tỏi để trị vi m âm đạo trùng roi; chữa các bệnh về... Các kết quả nghiên cứu thăm dò tính kháng khuẩn, ảnh hưởng của nồng độ và nhiệt độ đến khả năng kháng vi khuẩn Streptococcus spp được ghi nhận bằng đường kính vòng vô khuẩn của các đĩa giấy tẩm dịch ép bằng phương pháp thử kháng sinh đồ của Bauer - Kirby, 1997 Từ kết quả trên, tiến hành lựa chọn dịch ép của loài thảo dược có tính kháng khuẩn tốt để thử nghiệm khả năng phòng và trị bệnh đối với vi khuẩn. .. phân chính là tỏi và gừng bước đầu đã có hiệu quả rất tốt trong vi c phòng và trị bệnh đốm đỏ ở qui mô phòng thí nghiệm và thử nghiệm ngoài thực địa tại 3 tỉnh Quảng Ninh, Nam Định, Hà Giang phòng bệnh cho cá trắm cỏ bước đầu cho kết quả tốt Ở Quảng Ninh và Nam Định, cá trắm cỏ cho ăn thuốc phòng đã không nhiễm bệnh trong khi đó ở các lô đối chứng vẫn có hiện tượng cá chết do nhiễm bệnh vi khuẩn Tại tỉnh... x bờ ao, cá thường phóng lên bờ Cá trê lai hoạt động bơi lội và ăn mạnh vào chiều tối và mờ sáng - Cá trê lai có những đặc điểm nổi trội hơn so với cá trê vàng và cá trê phi + Cá trê phi: Có nguồn gốc từ Châu Phi Tên khoa học là Clarias gariepinus Thân có màu x m có những mảng vân đen to, cá lớn nhanh Cá trê phi trong vòng 6 tháng đạt bình quân 1kg/con Trọng lượng cá đạt tối đa là 12,8kg nhưng thịt ... VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH THỬ NGHIỆM DỊCH ÉP LÁ ỔI VÀ CỦ TỎI TRONG PHÒNG TRỊ BỆNH DO VI KHUẨN Streptococcus spp TRÊN CÁ TRÊ LAI (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) LUẬN... macrocephalus female x Clarias gariepinus male) vi khuẩn Streptococcus spp gây dịch ép ổi, dịch ép củ tỏi điều kiện thực nghiệm - Thử nghiệm khả trị bệnh lở loét cho cá trê lai (Clarias macrocephalus female. .. đề tài X c định khả phòng trị bệnh lở loét vi khuẩn Streptococcus spp gây cá trê lai (Clarias macrocephalus female x Clarias gariepinus male) dịch ép ổi dịch ép củ tỏi điều kiện thực nghiệm Nội