Đang tải... (xem toàn văn)
Mướp đắng có vị đắng, tính hàn nên trong dân gian thường dùng đểtrịcác bệnh mụn nhọt, giải nhiệt, trừphiền, thanh tâm, sáng mắt, giảm đau…
1 MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC i DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ vi DANH MỤC CÁC HÌNH vii MỞ ĐẦU TỔNG QUAN 1. ĐẠI CƯƠNG VỀ CÂY MƯỚP ĐẮNG 2 1.1 Mô tả cây 2 1.2 Phân bố và sinh thái 4 1.3 Y học dân gian của cây mướp đắng 1.3.1 Rễ 5 1.3.2 Thân 5 1.3.3 Lá 5 1.3.4 Hoa 6 1.3.5 Trái 6 1.3.6 Hạt 6 2. CÁC NGHIÊN CỨU VỀ MƯỚP ĐẮNG 7 2.1 Các công trình nghiên cứu trong nước 7 2.1.1 Thành phần hóa học 7 2.1.2 Tác dụng dược lý 7 2 2.2 Các công trình nghiên cứu trên thế giới 8 2.2.1 Thành phần hóa học 8 2.2.1.1. Triterpene 8 2.2.1.2. Steroid 9 2.2.1.3. Protein 9 2.2.1.4. Lipid 9 2.2.1.5. Carbohydrate 9 2.2.1.6. Caroteniod 10 2.2.2. Một số triterpene trong cây mướp đắng 10 2.2.2.1. Các triterpene glycoside được cô lập từ hạt mướp đắng 10 2.2.2.2 Các triterpene glycoside được cô lập từ trái mướp đắng 12 2.2.2.3 Các triterpene glycoside được cô lập từ lá và dây mướp đắng 16 2.2.3. Tác dụng dược lý 19 THỰC NGHIỆM 1. NGUYÊNLIỆU 23 2. ĐỊNH TÍNH CÁC HỢP CHẤT HỮU CƠ TRONG TRÁI MƯỚP ĐẮNG 23 2.1 Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất alkaloid 24 2.1.1 Thuốc thử alkaloid 24 2.1.2 Định tính alkaloid 24 2 2. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất flavonoid 25 2.2.1 Thuốc thử flavonoid 25 2.2.2 Định tính flavonoid 25 2.3. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất anthraglycoside 25 2.3.1 Thuốc thử anthraglycoside 25 2.3.2 Định tính anthraglycoside 25 2.4. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất sterol 26 2.4.1 Thuốc thử sterol 26 2.4.2 Định tính sterol 26 3 2.5 Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất saponin 26 2.5.1 Thuốc thử saponin 26 2.5.2 Định tính saponin 27 2.6. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất đường khử 28 2.7. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất tanin 28 2.7.1 Thuốc thử tanin 28 2.7.2 Định tính tanin 28 2.8. Khảo sát sự hiện diện của các hợp chất glycoside 28 2.8.1 Thuốc thử glycoside 28 2.8.2 Định tính glycoside 29 3. TÁCH CHIẾT, CÔ LẬP VÀ TINH CHẾ CÁC HỢP CHẤT 30 3.1. Thiết bị và hóa chất 30 3.1.1. Thiết bị 30 3.1.2. Hóa chất 30 3.2. Chiết xuất các nhóm hợp chất 31 3.3. Phân lập và tinh chế các hợp chất 32 KẾT QUẢ & THẢO LUẬN 1. KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH CÁC HỢP CHẤT HỮU CƠ TRONG TRÁI MƯỚP ĐẮNG 36 2. NHẬN DANH CẤU TRÚC CÁC CHẤT TINH KHIẾT 37 2.1. Chất MC1 37 2.1.1 Kết quả phân tích độ tinh khiết của MC1 bằng HPLC 37 2.1.2 Nhận danh cấu trúc hóa học của MC1A và MC1B 37 2.1.2.1. Mẫu chất MC1A 37 2.1.2.2 . Mẫu chất MC1B 41 2.2. Hợp chất MC6 47 2.3. Hợp chất MC5 51 KẾT LUẬN 4 1. CÁC KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐẠT ĐƯỢC 52 2. KIẾN NGHỊ 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO viii PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC xi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT brs : Broad singlet (NMR) COSY : Correlation Spectroscopy d : Doublet (NMR) đđ : Đậm đặc dd : Doublet of doublet (NMR) DEPT : Distortionless Enhancement by Polarization Transfer DMSO : Dimethyl sulfoxid PE : Petroleum ether EtOAc : Ethyl acetate EtOH : Ethanol HMBC : Heteronuclear Multiple Bond Correlation HPLC : High Performance Liquid Chromatography HSQC : Heteronuclear Single Quantum Correlation IR : Infrared J : Coupling constant m : Multiplet (NMR) MeOH : Methanol mp : Melting point MS : Mass Spectroscopy 5 NMR : Nuclear Magnetic Resonance ppm : Parts per million R f : Retention factor s : Singlet (NMR) t : Triplet (NMR) TLC : Thin Layer Chromatography UV : Ultra Violet α-Glc : α-glucosidase δ : Chemical shift DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Kết quả sắc ký cột thường 34 Bảng 3.1: Kết quả định tính các hợp chất hữu cơ trong trái khổ qua 36 Bảng 3.2: Dữ liệu phổ 1 H, 13 C - NMR; DEPT và HMBC của MC1A 39 Bảng 3.3 : Dữ liệu phổ 13 C-NMR và DEPT của MC1B 42 Bảng 3.4: Dữ liệu phổ 1 H, 13 C - NMR, DEPT và HMBC của MC1B 45 Bảng 3.5: Dữ liệu phổ 13 C-NMR và DEPT của MC6 49 Bảng 3.6: Dữ liệu phổ 1H, 13C-NMR, DEPT và HMBC của MC6 49 Bảng 3.7: So sánh dữ liệu phổ MC6 với tài liệu 50 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1: Quy trình chiết xuất các nhóm hợp chất của trái mướp đắng 32 Sơ đồ 2.2: Quy trình phân lập và tinh chế các hợp chất từ trái mướp đắng 33 6 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1: Cây khổ qua 3 Hình 1.2: Dây và lá khổ qua 3 Hình 1.3: Trái khổ qua 3 Hình 1.4: Hạt khổ qua 3 Hình 1. 5: Giàn khổ qua (Phú Yên) 3 Hình 1.6: Var. charantia L. 5 Hình 1.7: Var. abbreviata Ser. 5 Hình 2.1: Quá trình sấy nguyên liệu 23 Hình 2.2: Sắc ký cột 30 Hình 2.3: Sắc ký lớp mỏng 30 Hình 3.1: Tinh thể MC1 37 Hình 3.2: TLC của MC1, MC1A và MC1B 37 Hình 3.3: TLC của MC1A ở các hệ giải ly khác nhau 38 Hình 3.4: Công thức cấu tạo của MC1A 39 Hình 3.5: TLC của MC1B ở các hệ giải ly khác nhau 42 Hình 3.6: Công thức cấu tạo của MC1B 45 Hình 3.7: Mẫu chất MC6 48 Hình 3.8: TLC của MC6 48 Hình 3.9: Công thức cấu tạo c ủa MC6 51 Hình 3.10: Mẫu chất MC5 51 Hình 3.11: TLC của MC5 51 7 LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến: PGS.TS Nguyễn Ngọc Hạnh ThS. Phùng Văn Trung Người thầy đã truyền đạt cho em những kiến thức chuyên môn và kinh nghiệm nghiên cứu, tận tình hướng dẫn, chỉ bảo em trong suốt thời gian em nghiên cứu tại phòng Hóa hợp chất thiên nhiên- Viện Công nghệ Hóa học. Khoa Công nghệ Hóa- Thực phẩm cùng Thầy, Cô và các bạn sinh viên trường Đại học Lạc Hồng đã quan tâm độ ng viên, tạo mọi điều kiện cho em trong quá trình học tập và nghiên cứu. ThS. Phan Nhật Minh, các anh chị trong phòng Hóa hợp chất thiên nhiên, cùng các anh chị nghiên cứu viên trường Đại học Cần Thơ, các bạn sinh viên đến làm đề tài nghiên cứu đã tận tình hướng dẫn, góp ý, cung cấp tài liệu, tạo điều kiện giúp em làm tốt công việc của mình. Con kính gửi đến Gia đình lòng biết ơn sâu sắc. Xin chân thành cảm ơn! LẠ C HỒNG, tháng 11 năm 2009 Lê Thị Minh Nguyệt 8 LỜI MỞ ĐẦU Mướp đắng hay còn gọi là khổ qua (Momordica charantia L.), thuộc họ Bầu bí - Cucurbitaceae) được trồng ở nhiều nước trên thế giới, đặc biệt là những vùng có khí hậu nhiệt đới. Ở Việt Nam, cây được trồng ở hầu hết các tỉnh từ đồng bằng đến trung du và miền núi. Mướp đắng có vị đắng, tính hàn nên trong dân gian thường dùng để trị các bệnh mụn nhọt, giải nhiệt, trừ phi ền, thanh tâm, sáng mắt, giảm đau… Khoa học ngày nay đã chứng minh dịch chiết trái mướp đắng có khả năng ức chế khối u, có tác dụng hỗ trợ men gan và điều trị bệnh đái tháo đường… Hiện nay bệnh đái tháo đường là một trong các bệnh mãn tính, gây tử vong cao, đứng hàng thứ ba trên thế giới sau bệnh tim mạch và ung thư. Ở Việt Nam, tỉ lệ mắc bệnh ngày một gia tăng, đòi hỏi c ấp thiết phải tìm ra các loại thuốc hiệu quả, đặc trị. Mướp đắng có tác dụng đăc biệt như vậy nhưng hiện nay vẫn còn rất ít công trình nghiên cứu về hợp chất trị bệnh đái tháo đường. Vì thế, chúng tôi thực hiện nghiên cứu đề tài : “Góp phần khảo sát thành phần hóa học của trái mướp đắng”. 9 TỔNG QUAN 1. ĐẠI CƯƠNG VỀ CÂY MƯỚP ĐẮNG 1.1. Mô tả cây Tên khoa học: Momordica charantia L. Họ: Bầu bí (Cucurbitaceae) Tên nước ngoài: Bitter melon, bitter gourd (Anh), bitter apple, wild cucumber, bitter cucumber, ampalaya (Philipines), balsam pear (Mỹ), karela (Ấn Độ)… Tên Việt Nam: Mướp đắng, khổ qua, lương qua, cẩm lệ chi… [3] Ngoài ra nó còn có nhiều tên khác như: Mướp mủ, chua hao, dưa mát, hồng cô nương, hồng dương, bồ đạt, lại qua. [16] Mô tả cây mướp đắng: [3,21] Cây mướp đắng thuộc loại dây leo, có đời sống khoảng một năm. Đường kính dây khoảng 5-10mm, dây bò dài 5 – 7m, thân màu xanh nhạt có góc cạnh, leo được nhờ có nhiều tua cuốn, ở ngọn có lông tơ. Lá đơn, nhám, mọc so le, dài 5-10cm, rộng 4-8cm, phiến lá mỏng chia làm 5 – 7 thùy hình trứng, mép có răng cưa đều, mặt dưới lá màu xanh nhạt hơn mặt trên lá, gân lá nổi rõ ở mặt dưới, phiến lá có lông ngắn. Hoa mọc đơn độc ở kẽ lá, hoa đực và hoa cái cùng gố c, có cuống dài. Hoa đực có đài và ống rất ngắn, tràng gồm năm cánh mỏng hình bầu dục, nhụy 5 rời nhau. Hoa cái có đài và tràng hoa giống hoa đực. Tràng hoa màu vàng nhạt, đường kính khoảng 2cm . Trái hình thoi, dài 8 – 15cm, gốc và đầu thuôn nhọn. Mặt vỏ có nhiều u lồi to nhỏ không đều. Trái khi chưa chín có màu xanh hoặc xanh vàng nhạt, khi chín có màu vàng hồng. Vì thế ở Trung Quốc, mướp đắng còn có tên là hồng dương, hồng cô nương. Khi chín, trái nứt dần ra từ đầu, tách ra làm ba phần để lộ chùm áo hạt màu đỏ bên trong . 10 Hạt dẹt, dài 13 – 15mm, rộng 7 – 8mm, hình răng ngựa, thắt đột ngột ở hai đầu. Vỏ hạt cứng, quanh hạt có màng màu đỏ như màng hạt gấc. Hình 1.1: Cây mướp đắng Hình 1.2: Dây và lá mướp đắng Hình 1.3:Trái mướp đắng Hình 1.4: Hạt mướp đắng Hình 1.5: Giàn mướp đắng (Phú Yên) [...]... gan, đau lá lách.[22] Ở Trung Quốc, trái mướp đắng còn dùng để trị đột quị tim, bệnh sốt, khô miệng, viêm họng Ở Ấn Độ, dịch trái mướp đắng được dùng trị rắn cắn Người ta còn dùng bột trái mướp đắng để hàn các vết thương (làm kéo da non), trị vết loét ác tính Ở Thái Lan, dịch trái được dùng trị bệnh về gan, lá lách.[2] Với tính diệt khuẩn và chống oxi hóa, trái mướp đắng làm da mịn màng, trị mụn trứng... Nguyên cũng đã thăm dò tác dụng hạ đường huyết của một số bài thuốc dân gian ở mô hình đái tháo đường bằng streptozotocin trên chuột nhắt, mà thành phần của bài thuốc cũng có chứa trái mướp đắng 2.2 Các công trình nghiên cứu trên thế giới 2.2.1 Thành phần hóa học [14, 32] Người ta đã tìm thấy khoảng hơn 200 hợp chất có trong cây mướp đắng và được thống kê sơ bộ thành các nhóm chính như sau: 2 2.1 1 Triterpene... dạng, màu sắc của quả mà chia mướp đắng thành hai chủng loại: − Momordica charantia L var charantia L., trái to (đường kính > 5cm), màu xanh nhạt, gai tù, ít đắng − Momordica charantia L var abbreviata Ser., trái nhỏ (đường kính < 5cm), màu xanh đậm, gai nhọn, vị rất đắng 12 Hình 1.6: Var charantia L Hình 1.7: Var abbreviata Ser 1.3 Y học dân gian của cây mướp đắng Hầu hết các bộ phận của cây như rễ,... dược lý Y học cổ truyền và dân gian Việt Nam đã có nhiều kinh nghiệm chữa bệnh từ mướp đắng, nhưng chỉ ở dạng nguyên liệu thô ban đầu hoặc ở các dạng nước ép, nước sắc mà thôi Ngày nay, trên thị trường đã xuất hiện nhiều sản phẩm trái mướp đắng nhưng đa số ở dạng thực phẩm chức năng như trà hòa tan, trà túi lọc Điển hình là sản phẩm trà mướp đắng của Viện Dược liệu hay trà túi lọc mướp đắng của Công... xuất chế phẩm Morantin từ thành phần glycoside của trái mướp đắng dạng to, màu trắng và chứng minh tác dụng hạ đường huyết của nhóm glycoside trên thỏ gây đái tháo đường thực nghiệm bằng Alloxan [14] 15 Các tác giả Nguyễn Thị Như, Nguyễn Thị Bay đã nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết của một bài thuốc nam trên thực nghiệm lâm sàng, đó là sản phẩm trà túi lọc mà thành phần mướp đắng qua chiếm 60% Các tác... làm hạ huyết áp, kháng virus HIV…[17] 2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ MƯỚP ĐẮNG 2.1 Các công trình nghiên cứu trong nước 2.1.1 Thành phần hóa học Các tác giả Phạm Văn Thanh, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Thượng Dong, Vũ Kim Thu, Nguyễn Kim Phượng và Lê Minh Phượng của Viện Dược liệu đã thống kê và khảo sát sơ bộ các nhóm hoạt chất chính của cây mướp đắng Tuy nhiên, các tác giả này chưa cô lập được các hoạt... ĐẮNG Để giúp cho việc nghiên cứu thành phần hóa học và chiết xuất hoạt chất từ cây thuốc, trước hết cần phải tiến hành phân tích sơ bộ thành phần hóa học để chúng ta có khái niệm sơ bộ về mặt định tính, từ đó có thể định hướng cho việc chiết xuất cũng như việc xác định cấu trúc hóa học các hợp chất trong cây thuốc Từ mẫu cây, sử dụng kỹ thuật chiết tách khác nhau để có được cao chiết ethanol toàn phần. .. đái tháo đường của hoạt chất này, được phân lập từ dịch chiết EtOH của trái mướp đắng khô 28 Sau đó đến năm 1979, Pugazhenthi và Suryanarayana Murthy đã khẳng định một lần nữa charantin là hỗn hợp 2 chất và hoạt tính sinh học của nó vẫn có thể mất đi trong quá trình chiết xuất kéo dài [32] Hoạt tính kháng đái tháo đường của charantin Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng đái tháo đường của charantin trên... được dùng để chữa đau dạ dày, lỵ cấp tính , đau mắt [4,15] 1.3.5 Trái Trái còn xanh có vị đắng, khi chín thì ít đắng hơn Trái mướp đắng có tính hàn (mát), không độc Trái xanh có tính giải nhiệt, làm tiêu đờm, nhuận tràng, bổ thận, nuôi can huyết, bớt mệt mỏi, giảm stress, xoa dịu thần kinh, giải độc, lợi tiểu, làm bớt đau khớp Khi chín mướp đắng có tính bổ thận, kiện tỳ, dưỡng huyết, diệt giun (sán, lãi),... thân, lá, hoa, trái, hạt đều có thể dùng làm thuốc chữa bệnh [4] 1.3.1 Rễ Rễ tươi, sắc nước uống, mỗi ngày một thang, từ 1000ml nước với 60g rễ mướp đắng tươi, sắc còn 400ml, chia làm 2 – 3 lần uống, có thể áp dụng cho mọi dạng bệnh Rễ mướp đắng dùng trị lỵ, nhất là amip Tại Ấn Độ, dịch rễ (cũng như lá, trái) mướp đắng được dùng trị bệnh tiểu đường, do có tác dụng làm giảm đường huyết Rễ mướp đắng còn có . cứu đề tài : Góp phần khảo sát thành phần hóa học của trái mướp đắng . 9 TỔNG QUAN 1. ĐẠI CƯƠNG VỀ CÂY MƯỚP ĐẮNG 1.1. Mô. 1.1: Cây mướp đắng Hình 1.2: Dây và lá mướp đắng Hình 1.3 :Trái mướp đắng Hình 1.4: Hạt mướp đắng
![hình kim, không màu, vị đắng; mp= 236 – 237oC; [α]20D= 63.3o. - Góp phần khảo sát thành phần hóa học của trái mướp đắng](https://media.store123doc.com/figures/002/738/hinh-kim-mau-vi-dang-mp-oc-a-2738135.png)
![− Công thức chung:C30H48O4; M= 472 đvC; dạng bột vô định hình, [α]26 D = +58.0o (C=0.48; MeOH) - Góp phần khảo sát thành phần hóa học của trái mướp đắng](https://media.store123doc.com/figures/002/738/cong-thuc-chung-dang-bot-dinh-hinh-meoh-2738136.png)
![Bảng 3.6: So sánh dữ liệu phổ của MC6 với tài liệu [20] - Góp phần khảo sát thành phần hóa học của trái mướp đắng](https://media.store123doc.com/figures/002/738/bang-sanh-lieu-pho-mc-tai-lieu-2738153.png)
