BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC *  * KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC Chuyên ngành: Hóa Hữu KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRÊN CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY MỘC KÝ NGŨ HÙNG DENDROPHTOE PENTANDRA (L.) MIQ., HỌ CHÙM GỬI (LORANTHCEAE) KÝ SINH TRÊN CÂY XOÀI MANGIFERA INDICA, HỌ ĐÀO LỘN HỘT (ANACARDIACEAE) Người hướng dẫn khoa học: Th.S NGUYỄN HOÀNG HẠT CN TRƯƠNG QUỐC PHÚ Sinh viên thực hiện: LÊ THỊ TÚ TRINH TP.HỒ CHÍ MINH-2012 Trang LỜI CẢM ƠN Hoàn thành khóa luận tốt nghiệp, xin gửi lời biết ơn sâu sắc tới: Thầy Nguyễn Hoàng Hạt giảng dạy, hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi để em hoàn thành luận văn Thầy Trương Quốc Phú, người thầy tận tâm nhiệt tình, hướng dẫn, giúp đỡ em nhiều trình làm thực nghiệm Cô Nguyễn Thị Ánh Tuyết, thầy Nguyễn Thụy Vũ, hỗ trợ trang thiết bị, dụng cụ sở để em hoàn thành tốt khóa luận Cô Lê Thị Thu Hương giúp đỡ em trình tìm tài liệu giải phổ Cảm ơn chị Vũ Hoàng Thanh Phương, anh Văn Bá Lảnh, anh Khưu Kiến Toàn giúp đỡ nhiệt tình, truyền thụ kinh nghiệm quý báu từ ngày đầu em thực đề tài Cảm ơn bạn Nguyễn Vũ Mai Trang, Nguyễn Thị Minh Trang, Nguyễn Trần Bảo Huy, Nguyễn Thị Kim Liên giúp đỡ, chia sẻ, động viên lúc vui buồn, gặp khó khăn thời gian thực đề tài Cảm ơn bố mẹ giúp đỡ, động viên chỗ dựa tinh thần lớn giúp hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Xin gửi lời chúc tốt đẹp tới tất người! Chân thành cảm ơn Lê Thị Tú Trinh Trang DANH MỤC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT EA : Ethyl acetate C : Chloroform M : Methanol NXB : Nhà xuất pp : Page (trang) Rf : Hệ số trễ (Ratio of flow) Tr : Trang s (singlet) : Mũi đơn d (doublet) : Mũi đôi dd (doublet- doublet) : Mũi đôi - đôi m (multiplet) : Mũi đa J : Hằng số ghép NMR : Phổ cộng hưởng từ hạt nhân HSQC : Tương quan H-C qua nối HMBC : Tương quan H-C qua 2, nối COSY : Phổ tương quan proton- proton Trang DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ VÀ BẢNG Hình 1: Cây Mộc ký ngũ hùng tự nhiên Hình 2: Hoa Mộc ký ngũ hùng Hình 3: Cây xoài Hình 4: Một phần phổ 1H-NMR hợp chất MX10 Hình 5.1: Một phần phổ HMBC hợp chất MX10 Hình 5.2: Một phần phổ HMBC hợp chất MX10 Hình 5.3: Một phần phổ HMBC hợp chất MX10 Hình 6: Tương quan phổ HMBC vòng A MX10 Hình 7: Tương quan phổ HMBC vòng B MX10 Hình 8: Một phần phổ 1H-NMR hợp chất MX11 Sơ đồ 1: Sơ đồ điều chế loại cao Sơ đồ 2: Sơ đồ phân lập MX10 từ phân đoạn EA.1 Sơđồ 3: Sơ đồ phân lập MX10 từ phân đoạn EA.2 Bảng 1: Sắc kí cột silica gel phân đoạn EA.1 Bảng 2: Sắc kí cột silica gel phân đoạn EA.1.2 từ bảng Bảng 3: Sắc kí cột silica gel phân đoạn EA.1.2.1 từ bảng Bảng 4: Sắc kí cột silica gel phân đoạn EA.2 Bảng 5: Sắc kí cột silica gel phân đoạn EA.2.3 Bảng 6: Số liệu phổ NMR hợp chất MX10 hợp chất so sánh Bảng 7: Số liệu phổ NMR hợp chất MX11 hợp chất so sánh Trang DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục 1-3 Phụ lục 4-6 Phụ lục 7,8 Phụ lục 9-13 Phụ lục 14-16 Phụ lục 17-21 Phụ lục 22-24 Phụ lục 25-27 Phụ lục 28, 29 Phụ lục 30-32 Phụ lục 33-36 : Phổ 1H-MNR hợp chất MX10 : Phổ 13C-NMR hợp chất MX10 : Phổ DEPT 90 135 hợp chất MX10 : Phổ COSYcủa hợp chất MX10 : Phổ HSQC hợp chất MX10 : Phổ HMBC hợp chất MX10 : Phổ 1H-MNR hợp chất MX11 : Phổ 13C-NMR hợp chất MX11 : Phổ DEPT 90 135 hợp chất MX11 : Phổ HSQC hợp chất MX11 : Phổ HMBC hợp chất MX11 Trang MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU .7 Chương 1: TỔNG QUAN .8 1.1 Cây mộc ký ngũ hùng – ký sinh 1.1.1 Đặc tính thực vật 1.1.2 Nghiên cứu dược tính 10 1.1.3 Nghiên cứu hóa học 12 1.2 Cây Xoài – Cây chủ 16 1.2.1 Đặc tính thực vật 16 1.2.2 Nghiên cứu dược tính 17 1.2.3 Nghiên cứu hóa học 18 Chương 25 THỰC NGHIỆM .25 2.1 Nguyên liệu, hóa chất thiết bị 26 2.1.1 Nguyên liệu 26 2.1.2 Hóa chất .26 2.1.3 Thiết bị 26 2.2 Điều chế cao thô 26 2.3 Cô lập hợp chất từ cao EA 29 2.3.1 Sắc kí cột cho phân đoạn EA.1 29 2.3.2 Sắc kí cột cho phân đoạn EA.2 31 Chương 35 KẾT QUẢ 35 VÀ THẢO LUẬN .35 3.1 Khảo sát cấu trúc hóa học chất MX10 .36 3.2 Khảo sát cấu trúc hóa học chất MX11 .40 Chương 48 KẾT LUẬN .48 VÀ ĐỀ XUẤT 48 4.1 Kết luận 49 4.2 Đề xuất 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO .51 Trang LỜI MỞ ĐẦU Ngày nay, với phát triển vượt bậc khoa học kỹ thuật, ngành hóa học đóng vai trò quan trọng phát triển xã hội Các nhà hóa học, nhiều đường khác nhau, tạo sản phẩm có ứng dụng lĩnh vực như: Y học, Dược học, Sinh học, Nông nghiệp,… Tuy nhiên, sản phẩm tạo cách tổng hợp có kết tốt lại gây nhiều tác dụng phụ cho người môi trường Vì thế, hóa học hợp chất thiên nhiên ngày quan tâm Các nhà hóa học tiến hành tách chiết, cô lập, bán tổng hợp ngày nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học để tạo sản phẩm hữu ích từ cỏ thiên nhiên để nâng cao chất lượng sống Cây Chùm gửi từ xa xưa sử dụng y học để chữa trị số bệnh Tuy nhiên việc sử dụng chùm gửi làm thuốc chữa bệnh tùy thuộc vào loại chủ mà ký sinh (hay bán ký sinh) Việc nghiên cứu dược tính chùm gửi tiến hành bước đầu thu số kết khả quan Với lí đó, tiến hành khảo sát thành phần hóa học chùm gửi Mộc kí ngũ hùng Dendrophtoe pentandra (L.) Miq., thuộc họ chùm gửi (Loranthaeae) kí sinh xoài, với mong muốn đóng góp phần nhỏ việc tìm hiểu thành phần hóa học chùm gửi Trong khuôn khổ đề tài khóa luận tốt nghiệp, tập trung nghiên cứu thành phần hóa học cao ethyl acetate Mộc ký ngũ hùng, sống ký sinh Xoài Trang Chương TỔNG QUAN Trang 1.1 Cây mộc ký ngũ hùng – ký sinh 1.1.1 Đặc tính thực vật Mộc ký ngũ hùng thuộc họ Chùm gửi (Loranthaceae), gọi Tầm gửi Năm Nhị có tên khoa học Dendrophthoe pentandra (L.) Miq (Loranthus pentandrus L.)[4] Hình 1: Cây Mộc ký ngũ hùng tự nhiên Cây bán ký sinh có nhánh to, hình trụ, sù Lá mọc so le, có gần đối; phiến đa dạng, chóp tù hay nhọn, gốc tù, không lông, dày da, dài 5-9cm, rộng 3-6cm Hoa xếp thành bông, đơn độc đôi nách lá; hoa có cánh, đính thành ống phình, phía đỏ Quả xoan tròn, cao đến 1cm, bao thùy đài[29] Phân bố: giới, Mộc ký ngũ hùng tìm thấy Ấn Độ, Lào, Thái Lan, Campuchia, Malaysia, Philipin Ở Việt Nam, Mộc ký ngũ hùng thường mọc đồng trung du rừng ngập mặn ven biển, từ Hà Tây tới Khánh Hoà, Lâm Ðồng, Ninh Thuận, Tây Ninh, Ðồng Nai, thành phố Hồ Chí Minh, Bà Rịa - Vũng Tàu, Kiên Giang Thường gặp ký sinh Trám trắng có Dâu[2,9] Hình 2: Hoa Mộc ký ngũ hùng Trang 1.1.2 Nghiên cứu dược tính Cho đến nay, chưa có công trình nghiên cứu dược tính Mộc ký ngũ hùng có tên khoa học Dendrophthoe pentandra (L.) Miq (Loranthus pentandrus L.) sống ký sinh xoài Dược tính Mộc ký ngũ hùng ký sinh chủ khác chưa nghiên cứu nhiều, người ta chủ yếu biết đến dược tính Mộc ký ngũ hùng thông qua thuốc dân gian, như: +Ở Indonesia, Mộc ký ngũ hùng sống ký sinh gòn dùng trị bệnh tiêu chảy, Mộc ký ngũ hùng sống ký sinh xoài có tác dụng trị bệnh tiểu đường[27] +Ở Thái Lan, Mộc ký ngũ hùng ba thuốc địa quan trọng có hoạt tính kích thích miễn dịch mạnh ứng dụng điều trị bệnh mãn tính[12] Tuy nhiên, có nhiều nghiên cứu dược tính chi Dendrophthoe nói riêng, thuộc họ Chùm gửi nói chung Những công trình công bố cho thấy số chúng có tác dụng dược lý đáng quan tâm, đặc biệt tiếng thuốc “Tang ký sinh” với tính bổ thận, ích huyết, mạnh gân xương, an thai, lợi sữa[6] Dùng riêng phối hợp với vị thuốc khác trường hợp sau: trị đau xóc hông hai bên; đại tiện máu, lưng gối đau; tăng huyết áp, chân tay tê bại, tắc tia sữa, đau bụng, động thai, ho máu, đau lưng, suy nhược thần kinh[30] Ngoài ra, Chùm gửi có tác dụng chữa bệnh cao huyết áp, cao huyết áp người già, thấp khớp người cao huyết áp, phù thận người cao huyết áp, viêm tắc động mạch chi người cao huyết áp người mắc bệnh đái tháo đường[9],… BS Đỗ Huy Bích (BV Y học Cổ truyền TP.HCM) nghiên cứu thuốc cổ phương Độc hoạt tang ký sinh dạng viên nén có tác dụng giảm đau cải thiện chức vận động khớp Kết quả: 63 bệnh nhân (11 nam, 52 nữ), có 81,39% bệnh nhân giảm đau; 91,9% bệnh nhân cải thiện vận động (gấp gối), tác dụng ý muốn Kết luận: Viên nén Độc Hoạt Tang Ký Sinh điều trị bệnh nhân thoái hóa khớp gối có hiệu tốt, an toàn, dễ sử dụng, chọn lựa sử dụng cho phác đồ điều trị thoái hóa khớp gối[31] Gần đây, nhà khoa học Viện Y học thực nghiệm Dentingen (CHLB Đức) tìm thấy nước ép Chùm gửi chất Protein miễn dịch, chất làm tăng Trang 10 Phụ lục 9: Phổ COSY MX10 Trang 76 Phụ lục 10: Phổ COSY MX10 Trang 77 Phụ lục 11: Phổ COSY MX10 Trang 78 Phụ lục 12: Phổ COSY MX10 Trang 79 Phụ lục 13: Phổ COSY MX10 Trang 80 Phụ lục 7: Phổ DEPT 90 135 MX10 Trang 81 Phụ lục 8: Phổ DEPT 90 135 MX10 Trang 82 Phụ lục 17: Phổ HMBC MX10 Trang 83 Phụ lục 18: Phổ HMBC MX10 Trang 84 Phụ lục 19: Phổ HMBC MX10 Trang 85 Phụ lục 20: Phổ HMBC MX10 Trang 86 Phụ lục 21: Phổ HMBC MX10 Trang 87 Phụ lục 14: Phổ HSQC MX10 Trang 88 Phụ lục 15: Phổ HSQC MX10 Trang 89 Phụ lục 16: Phổ HSQC MX10 Trang 90 [...]... (L. f) Dans Thành phần hóa học có trong cây Dandrophtoe falcata (L. f) Dans ., họ Chùm gửi (Loranthaceae)[1 3,1 9,2 0,2 2,2 5,2 6] Strospeside ( 1 ), Odoroside F ( 2 ), Neritaloside ( 3 ), β-Sitosterol ( 4 ), Stigmasterol ( 5 ), Catechin ( 6 ), Oleanoic acid ( 7 ), Gallic acid ( 8 ), Ellagic acid ( 9 ), Quercetin (1 0 ), Leucocyanidin (1 1 ), Quercitrin (1 2 ), Kaempferol-3-O-α-Lrhamnopyranoside (1 3) , Myricitine (1 4 ), β-Amyrin acetate. .. thần, chất gây m , thuốc lợi tiểu, trị bệnh hen suyễn, điều kinh, trị bệnh lao phổi, trị viêm loét, giúp làm đông máu, ngừa sảy thai, sinh non… 1.1.3 Nghiên cứu về hóa học Hiện tại vẫn chưa có công trình nào công bố về thành phần hóa học của cây Mộc ký ngũ hùng Dendrophthoe pentandra (L. ) Miq (Loranthus pentandrus L .) sống ký sinh trên cây Xoài Tuy nhiên đã có một số công trình nghiên cứu cây Mộc ký ngũ. .. 3,2 2-dihydroxycycloart-24-en-26-oic (3 6 ), cycloart-24-ene 3,2 1-diol (3 7 ), cycloart-24-ene- 3,2 6-diol (3 8 ), oxocycloart-24-ene-26-al (3 9 ), cycloartan-29-ol (4 0 ), cycloart-25-ene- 3,2 4,2 7-triol (4 1 ), 2 0,2 6-dihydroxy-24dammaren-3-one (4 2 ), acid 3,2 3-dihydroxycycloart-24-en-26-oic (4 3 ), acid 3,2 2dihydroxycycloart-24-en-26-oic (4 4 ), 2 0,2 4-epoxydammarane- 3,2 5,2 6- triol (4 5 ), 2 0,2 4-epoxy-2 5,2 6-dihydroxydammaran-3-one (4 6 ), acid isomangiferolic... 2’ ,6 ’’-Di-O-galloyl-3-glucosyliriflophenone (5 9 ), 2’ ,3 ’ ,6 ’’-Tri-O-galloyl-3- glucosyliriflophenone (6 0 ), 3-glucosylmaclurin (6 1 ), 6’’-(4-hydroxybenzoyl)-3glucosylmaclurin (6 2 ), 2’’-( 3,4 ,5 -trihydroxybenzoyl)-6’’-(p-hydroxybenzoyl)-3- glucosylmaclurin (6 3 ), 6’’-( 3,4 ,5 -trihydroxybenzoyl)-2’’-(p-hydroxybenzoyl)-3- glucosylmaclurin (6 3 ), 2’ ,3 ’ ,6 ’’-( 3,4 ,5 -Trihydroxybenzoyl)-3-glucosylmaclurin (6 5 ), telephone A (6 6 ), telephone B (6 7 ), mangiferin... 5-Heptadecyl- 1,3 -benzenediol (8 4 ), (8 3 ), 5-(2-Heptadecenyl)- 1,3 -benzenediol 5-(10-Heptadecenyl)- 1,3 -benzenediol (8 5 ), 5-(12-Heptadecenyl)- 1,3 - benzenediol (8 6) Tanin: acid metatrigallic (8 7) Dẫn xuất furane: 2-methyl-4-butanolide (8 8 ), 1 5,5 -farnesanolide (8 9) Ancol: Mangalkanol (9 0 ), 7(1 4)- Farnaesene- 9,1 2-diol (9 1) Acid: Acid mangfarnasoic (9 2 ), acid citric (9 3) Cấu trúc hóa học của các hợp chất có trong cây Xoài: ... (2 5) acid ambonic (2 6 ), cycloartane- 3,2 4,2 5-triol (2 7 ), 24acethyl- 9,1 9-cyclolanostane- 3,2 5-diol (2 8 ), 3-tetradecanoyl cycloartane-2 4,2 5-diol (2 9 ), 3-hexadecanoylcycloartane-2 4,2 5-diol (3 0 ), 2 4,2 5-Dihydroxycycloartan-3-one (3 1 ), 25-methoxylcycloartane- 3,2 4-diol (3 2 ), 25-methoxyl-3- hexadecanoylcycoartane-24-ol (3 3 ), cycloartane- 3,2 9-diol (3 4 ), cycloart-24-ene 3,2 2,2 6-triol (3 5 ), acid 3,2 2-dihydroxycycloart-24-en-26-oic... niêm mạc, sát trùng Dùng chữa ho, đau sưng cổ họng, đau răng 1.2.3 Nghiên cứu về hóa học Các nghiên cứu về hóa học trên cây Xoài cho thấy trong cây có sự phong phú về các loại hợp chất hữu cơ gồm các Steroid, Flavonoid, Terpen, Tanin, Dẫn xuất furane, Ancol, acid, hợp chất phenol,… Cho tới nay có rất nhiều hợp chất cô lập được từ cây xoài[ 1 1,1 4,1 5,1 7,2 1,2 3,2 4,2 8]: Steroid : acid ambolic (2 5) acid... trong vùng 7 6,4 16 8,2 4 ppm, chi tiết độ dịch chuyển hóa học của các nguyên tử cacbon được trình bày trong bảng 6 Phổ 1H-NMR (500MHz, DMSO, δppm) (phụ lục 2, 3) : 7,5 4 (1H; d; 4 J= 2,5 Hz); 7,0 4 (1H; d; 3J= 8,5 Hz); 7,7 3 (1H; dd; 3J= 8,5 Hz; 4J= 2,5 Hz); 6,6 8 (1H; d; J= 2,0 Hz); 6,3 7 (1H; d; 4J= 2,0 Hz); 1tín hiệu mũi đơn của proton –OH tại δ H 4 1 2,5 3ppm; 1 tín hiệu mũi đôi tại δ H 5,3 9ppm (1H; d; J= 7,5 Hz) và 1 tín... O H H (1 5) (1 6) H3COC H H O O H H O O H H (1 8) (1 7) Trang 15 HOOC(H3C)HC HO HO(H3C)2C H O O O H H O O H H (2 0) (1 9) MeO EtO OH OH O O H O H O H H (2 1) (2 2) HO HO OH OH O O H H O O H H (2 4) (2 3) 1.2 Cây Xoài – Cây chủ 1.2.1 Đặc tính thực vật Cây xoài có tên khoa học Mangifera Indica L, thuộc họ Đào lộn hột (Anacardiaceae) Trang 16 Còn có tên khác là muỗm, swai, makmounang, manguier Cây to cao 15-20m... isomangiferolic (4 7 ), acid mangiferolic (4 8 ), 3-hydroxycycloart-24-en-26-al (4 9 ), acid 3-acethylmangiferolic (5 0 ), manglupenone (5 1 ), 26-hydroxy-24-methylenecycloartan-3-one (5 2 ), acid 28hydroxymangiferonic (5 3 ), acid 3-oxocycloart-24-en-26-oic (5 4) Flavonoid : 3-hydroxy-2-(4-methylbenzoyl)chromone (5 5 ), 3-methoxy-2-(4- methylbenzoyl)chromone (5 6 ), 1,7 -dihydroxyxanthone (5 7 ), inriflophenone (5 8 ), 2’ ,6 ’’-Di-O-galloyl-3-glucosyliriflophenone ... Qua việc tìm hiểu thành phần hóa học cao Ethyl acetate Mộc ký ngũ hùng Dendrophtoe pentandra (L.) Miq., Họ Chùm Gửi (Louranthaeae) ký sinh xoài Mangifera indica họ Đào lộn hột (Anacardiceae),được... hành khảo sát thành phần hóa học chùm gửi Mộc kí ngũ hùng Dendrophtoe pentandra (L.) Miq., thuộc họ chùm gửi (Loranthaeae) kí sinh xoài, với mong muốn đóng góp phần nhỏ việc tìm hiểu thành phần hóa. .. hóa học chùm gửi Trong khuôn khổ đề tài khóa luận tốt nghiệp, tập trung nghiên cứu thành phần hóa học cao ethyl acetate Mộc ký ngũ hùng, sống ký sinh Xoài Trang Chương TỔNG QUAN Trang 1.1 Cây mộc