BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Nguyễn Đăng Thùy NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH IN VITRO CÂY TRÀM TA (Melaleuca cajuputi Powell) LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Nguyễn Đăng Thùy NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH IN VITRO CÂY TRÀM TA (Melaleuca cajuputi Powell) Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS VƯƠNG ĐÌNH TUẤN Thành phố Hồ Chí Minh - 2014 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan luận văn công trình nghiên cứu riêng Kết tŕnh bày lu ận văn trung thực chưa tác giả công bố công trình Các trích dẫn bảng biểu, kết nghiên cứu tác giả khác; tài liệu tham khảo luận văn/ luận án có nguồn gốc rõ ràng theo quy định Tác giả LỜI CẢM ƠN Xin trân trọng cảm ơn TS Vương Đình Tuấn tận tình hướng dẫn trình nghiên cứu hoàn thiện luận văn Xin chân thành cảm ơn anh Nguyễn Xuân Cường anh chị viện Khoa học Lâm nghiệp Nam Bộ giúp đỡ, hỗ trợ tạo điều kiện tốt để học tập thực đề tài Xin cảm ơn thầy cô trường Đại học Sư phạm bạn lớp Sinh học thực nghiệm - K23 giảng dạy, hỗ trợ động viên thời gian học tập trường TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2014 TÁC GIẢ LUẬN VĂN Nguyễn Đăng Thùy MỤC LỤC Trang Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình MỞ ĐẦU I Lí chọn đề tài II Mục tiêu nghiên cứu III Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận văn Chương TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu Tràm ta 1.1.1 Đặc điểm sinh học Tràm ta 1.1.1.1 Phân loại 1.1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.1.3 Phân bố đặc điểm sinh thái 1.1.2 Giá trị sử dụng 1.1.2.1 Bảo vệ môi trường sinh thái 1.1.2.2 Cung cấp gỗ cho xây dựng số ngành công nhiệp 1.1.2.3 Sản phẩm gỗ 1.1.3 Tình hình trồng khai thác gỗ sản phẩm gỗ Tràm ta 1.2 Nuôi cấy mô tế bào thực vật ứng dụng 1.2.1 Sự phát sinh quan nuôi cấy in vitro 1.2.1.1 Sự phát sinh chồi bất định 1.2.1.2 Sự phát sinh rễ bất định 10 1.2.1.3 Sự phát sinh mô sẹo 11 1.2.2 Vai trò chất ĐHST thực vật phát sinh quan 11 1.2.2.1 Auxin 12 1.2.2.2 Cytokinin 13 1.2.2.3 Gibberelin 14 1.3 Tình hình nghiên cứu vi nhân giống Tràm ta nước giới 14 1.3.1 Tình hình nghiên cứu vi nhân giống tràm ta giới 14 1.3.2 Tình hình nghiên cứu vi nhân giống tràm ta nước 15 Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Thời gian địa điểm thực đề tài 16 2.2 Vật liệu 16 2.2.1 Vật liệu ban đầu 16 2.2.2 Hóa chất dụng cụ thí nghiệm 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Khử trùng bề mặt mẫu cấy 16 2.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp auxin cytokinin, thành phần môi trường nuôi cấy lên khả tạo sẹo từ mầm 17 2.3.2.1 Ảnh hưởng kết hợp riêng lẻ NAA TDZ lên khả tạo sẹo từ mầm 17 2.3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng thành phần môi trường nuôi cấy lên khả tạo sẹo từ mầm 18 2.3.2.3 Ảnh hưởng kết hợp NAA BA lên khả tạo sẹo 18 2.3.3 Nghiên cứu khả tái sinh chồi từ mô sẹo 19 2.3.4 Nghiên cứu nhân nhanh tạo cụm chồi từ chồi phát sinh từ mô sẹo 19 2.3.5 Nghiên cứu ảnh hưởng chất ĐHST thực vật lên khả kéo dài chồi Tràm ta 19 2.3.6 Nghiên cứu ảnh hưởng auxin khác nồng độ khác lên khả rễ in vitro Tràm ta 20 2.3.7 Nghiên cứu khả thích nghi Tràm ta in vitro điều kiện vườn ươm 20 2.4 Xử lý thống kê 21 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp auxin cytokinin, thành phần môi trường nuôi cấy lên khả tạo sẹo từ mầm 22 3.1.1 Ảnh hưởng kết hợp auxin cytokinin lên khả tạo sẹo từ mầm 22 3.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng thành phần môi trường nuôi cấy lên khả tạo sẹo từ mầm 27 3.1.3 Ảnh hưởng kết hợp NAA BA lên khả tạo sẹo từ mầm 28 3.2 Nghiên cứu khả tái sinh chồi từ mô sẹo 30 3.3 Nghiên cứu nhân nhanh tạo cụm chồi từ chồi phát sinh từ mô sẹo 33 3.4 Nghiên cứu ảnh hưởng số chất ĐHST thực vật lên khả kéo dài chồi 36 3.5 Nghiên cứu ảnh hưởng auxin nồng độ khác lên khả rễ in vitro Tràm ta 38 3.6 Nghiên cứu khả thích nghi Tràm ta in vitro điều kiện vườn ươm 41 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 43 DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ CỦA TÁC GIẢ 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu 1/2MS 2,4-D BA ĐHST GA3 IAA IBA MS NAA TDZ Chú giải Thành phần môi trường MS giảm nửa đa lượng vi lượng 2,4- Dichlorophenoxyacetic Acid N6 - Benzyladenine Điều hòa sinh trưởng Gibberellic Acid Indol - - Acetic Acid Indole - - Butyric Acid Thành phần môi trường MS (Murashige Skoog, 1962) Naphthaleneacetic Acid Thidiazuron DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1.Thành phần môi trường nuôi cấy thí nghiệm 17 Bảng 2.2 Ảnh hưởng kết hợp hay riêng lẻ NAA TDZ lên khả tạo sẹo 18 Bảng 2.3 Ảnh hưởng thành phần môi trường nuôi cấy cảm ứng tạo mô sẹo 18 Bảng 2.4 Ảnh hưởng BA NAA lên khả tạo sẹo 19 Bảng 2.5 Ảnh hưởng chất ĐHST lên khả kéo dài chồi 20 Bảng 3.1 Ảnh hưởng kết hợp NAA TDZ cảm ứng tạo mô sẹo 22 Bảng 3.2 Ảnh hưởng kết hợp NAA BA cảm ứng tạo mô sẹo 29 Bảng 3.3 Phát sinh quan chồi từ mô sẹo sau tháng nuôi cấy 31 Bảng 3.4 Số chồi chiều cao chồi sau tháng môi trường nhân chồi 34 Bảng 3.5 Ảnh hưởng chất ĐHST thực vật lên khả kéo dài chồi 36 Bảng 3.6 Ảnh hưởng chất điều hòa tăng trưởng thực vật lên khả tạo rễ chồi Tràm ta sau tuần nuôi cấy 40 Phụ lục 11 Xử lý số liệu bảng 3.1 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean ngthuc 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 Total N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 105 93.333 96.667 91.667 81.667 71.667 71.667 78.333 66.667 83.333 65 65 51.667 58.333 48.333 63.333 36.667 41.667 28.333 56.667 70 75 53.333 61.667 40 66.667 61.667 71.667 33.333 26.667 21.667 52.333 2.88675 2.88675 2.88675 20.20726 15.27525 7.63763 7.63763 2.88675 7.63763 13.22876 7.63763 12.58306 5.7735 10.40833 2.88675 7.63763 2.88675 15.27525 15 34.0343 10.40833 25 7.63763 7.63763 2.88675 14.43376 5.7735 12.58306 29.61343 1.66667 1.66667 1.66667 11.66667 8.81917 4.40959 4.40959 1.66667 4.40959 2.88675 7.63763 4.40959 7.26483 3.33333 6.00925 1.66667 4.40959 1.66667 8.81917 8.66025 2.88675 19.64971 6.00925 14.43376 4.40959 4.40959 1.66667 8.33333 3.33333 7.26483 2.88997 86.1622 89.4956 84.4956 31.4691 33.7208 52.6938 59.3604 59.4956 64.3604 52.5793 32.1379 32.6938 27.0753 33.9912 37.4776 29.4956 22.6938 21.1622 18.7208 32.7379 62.5793 -31.213 35.8109 -22.103 47.6938 42.6938 64.4956 -2.5221 12.3245 -9.5914 46.6024 100.5044 103.8378 98.8378 131.8643 109.6125 90.6396 97.3062 73.8378 102.3062 77.4207 97.8621 70.6396 89.5914 62.6755 89.1891 43.8378 60.6396 35.5044 94.6125 107.2621 87.4207 137.8792 87.5224 102.1034 85.6396 80.6396 78.8378 69.1888 41.0088 52.9247 58.0643 90 95 90 60 55 65 70 65 75 60 55 45 45 45 55 35 35 25 40 55 70 15 50 15 60 55 70 25 20 10 0 95 100 95 100 85 80 85 70 90 70 80 60 70 55 75 40 50 30 70 85 80 80 70 65 75 70 75 50 30 35 100 ANOVA Between Groups Within Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig 82436.667 8766.667 91203.333 34 70 104 2424.608 125.238 19.360 000 Homogeneous Subsets Subset for alpha = 0.05 stt 15 22 29 35 34 21 33 19 28 20 17 14 26 23 16 27 31 18 12 13 10 30 24 32 25 11 Sig N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 0 0 21.6667 26.6667 28.3333 33.3333 36.6667 40 41.6667 0.061 28.3333 33.3333 36.6667 40 41.6667 48.3333 0.057 33.3333 36.6667 40 41.6667 48.3333 51.6667 53.3333 0.061 36.6667 40 41.6667 48.3333 51.6667 53.3333 56.6667 0.061 40 41.6667 48.3333 51.6667 53.3333 56.6667 58.3333 0.087 41.6667 48.3333 51.6667 53.3333 56.6667 58.3333 61.6667 61.6667 0.064 48.3333 51.6667 53.3333 56.6667 58.3333 61.6667 61.6667 63.3333 65 65 66.6667 66.6667 70 0.052 51.6667 53.3333 56.6667 58.3333 61.6667 61.6667 63.3333 65 65 66.6667 66.6667 70 71.6667 71.6667 71.6667 0.076 10 53.333 56.666 58.333 61.666 61.666 63.333 65 65 66.666 66.666 70 71.666 71.666 71.666 75 0.054 Phụ lục 12 Xử lý số liệu hình 3.5 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean ngthuc 10 11 12 Total N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 3 3 3 3 3 3 36 56.6667 70 75 63.3333 81.6667 71.6667 80 68.3333 55 55 28.3333 40 62.0833 15.27525 15 17.55942 5.7735 7.63763 12.58306 21.79449 22.91288 16.07275 8.66025 19.47067 8.81917 8.66025 2.88675 10.13794 3.33333 4.40959 2.88675 7.26483 12.58306 13.22876 9.27961 3.24511 18.7208 32.7379 62.5793 19.7133 67.3245 52.6938 67.5793 37.0753 0.8595 -1.9187 -11.5936 18.4867 55.4954 94.6125 107.2621 87.4207 106.9534 96.0088 90.6396 92.4207 99.5914 109.1405 111.9187 68.2603 61.5133 68.6713 40 55 70 45 75 65 75 55 40 30 10 30 10 70 85 80 80 85 80 85 80 80 75 40 45 85 ANOVA Between Groups Within Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig 8468.75 11 769.886 3.849 0.003 4800 13268.75 24 35 200 Homogeneous Subsets Subset for alpha = 0.05 ngthuc 11 12 10 Sig N 3 3 3 3 3 3 28.3333 40 0.322 40 55 55 56.6667 63.3333 0.081 55 55 56.6667 63.3333 68.3333 70 71.6667 75 80 81.6667 0.058 Phụ lục 13 Xử lý số liệu bảng 3.2 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean ngthuc Total N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 3 3 3 3 27 60 61.6667 65 80 40 30 53.3333 55 26.6 52.4074 21.79449 18.92969 10.40833 8.66025 10 2.88675 13.22876 10 18.93158 12.58306 10.92906 6.31925 2.88675 5.7735 1.66667 7.63763 5.7735 3.64338 5.8595 14.6427 35.8109 58.4867 27.5793 5.1586 46.1622 22.1379 5.1586 44.9183 114.1405 108.6906 87.5224 101.5133 52.4207 54.8414 60.5044 87.8621 54.8414 59.8965 45 40 50 75 35 20 50 40 20 20 85 75 70 90 45 40 55 65 40 90 ANOVA ngthuc Between Groups Within Groups Total Sum of Squares df Mean Square F Sig 6468.519 808.565 5.107 0.002 2850 9318.519 18 26 158.333 Homogeneous Subsets Subset for alpha = 0.05 ngthuc Sig N 3 3 3 3 26.6 30 40 0.37 40 53.3333 55 60 61.6667 65 0.076 60 61.6667 65 80 0.089 Phụ lục 14 Xử lý số liệu bảng 3.3 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean mausong ngthuc mauchoi 10 11 12 13 Total N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound 15.0448 45.3875 3 36.6667 83.3333 20.81666 15.27525 12.0185 8.81917 3 3 3 3 3 39 83.3333 96.6667 93.3333 53.3333 76.6667 80 66.6667 60 63.3333 73.3333 86.6667 73.3333 20.81666 5.7735 11.54701 15.27525 5.7735 17.32051 15.27525 10 20.81666 15.27525 23.09401 21.19252 12.0185 3.33333 6.66667 8.81917 3.33333 10 8.81917 5.7735 12.0185 8.81917 13.33333 3.39352 3 3 3 26.6667 56.6667 66.6667 96.6667 90 13.3333 50 20.81666 25.16611 30.5505 5.7735 10 5.7735 12.0185 14.52966 17.63834 3.33333 5.7735 3.33333 33.3333 30.5505 17.63834 31.6219 82.3245 64.649 15.3875 62.3245 36.9735 28.7208 35.1586 11.6219 35.3875 29.298 66.4635 25.0448 -5.8494 -9.225 82.3245 65.1586 -1.0088 50 42.5583 Minimum Maximum 88.3781 121.2792 20 70 60 100 135.0448 111.0088 122.0177 91.2792 91.0088 123.0265 104.6125 84.8414 115.0448 111.2792 144.0354 80.2032 60 90 80 40 70 60 50 50 40 60 60 20 100 100 100 70 80 90 80 70 80 90 100 100 78.3781 119.1828 142.5583 111.0088 114.8414 27.6755 50 10 30 40 90 80 10 50 50 80 100 100 100 20 50 109.225 60 10 11 12 13 Total 3 16.6667 6.6667 15.27525 5.7735 8.81917 3.33333 3 20 0 20 0 11.54701 0 21.2792 -7.6755 29.6828 0 39 36.6667 34.81782 5.57531 25.38 54.6125 21.0088 0 30 10 69.6828 0 0 40 0 47.9533 100 ANOVA mausong Sum of Squares df Mean Square 10333.333 12 861.111 6733.333 17066.667 26 38 258.974 38533.333 12 3211.111 7533.333 26 289.744 46066.667 38 F Sig Between Groups 3.325 0.005 11.083 Within Groups mauchoi Total Between Groups Within Groups Total Homogeneous Subsets Mausong Subset for alpha = 0.05 ngthuc 10 11 12 13 Sig N 3 3 3 3 3 3 36.6667 53.3333 60 63.3333 0.073 53.3333 60 63.3333 66.6667 73.3333 76.6667 80 83.3333 83.3333 0.059 60 63.3333 66.6667 73.3333 76.6667 80 83.3333 83.3333 86.6667 0.092 63.3333 66.6667 73.3333 76.6667 80 83.3333 83.3333 86.6667 93.3333 0.059 66.6667 73.3333 76.6667 80 83.3333 83.3333 86.6667 93.3333 96.6667 0.059 Mauchoi Subset for alpha = 0.05 ngthuc 12 13 10 11 Sig N 3 3 3 3 3 3 0 6.6667 13.3333 16.6667 20 26.6667 6.6667 13.3333 16.6667 20 26.6667 33.3333 0.105 0.101 20 26.6667 33.3333 50 0.057 26.6667 33.3333 50 56.6667 50 56.6667 66.6667 0.057 0.268 66.6667 90 96.6667 0.05 Phụ lục 15 Xử lý số liệu bảng 3.4 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N so_choi Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound M 30 2.2000 88668 16189 1.8689 2.5311 30 8.2333 3.12590 57071 7.0661 9.4006 30 9.6333 3.89945 71194 8.1773 11.0894 30 21.9667 5.15607 94137 20.0414 23.8920 30 49.8333 16.26310 2.96922 43.7606 55.9061 30 1.1000 2.12295 38760 3073 1.8927 30 0000 00000 00000 0000 0000 210 13.2810 17.80469 1.22864 10.8588 15.7031 6.77541 46755 12.3591 14.2028 Total Model Fixed Effects Random Effects cao_choi 6.72212 -3.1675 29.7294 30 1.4300 85829 15670 1.1095 1.7505 30 1.3533 53674 09800 1.1529 1.5538 30 9100 68347 12478 6548 1.1652 30 4667 20567 03755 3899 5435 30 3533 14320 02614 2999 4068 30 0367 07184 01312 0098 0635 30 0000 00000 00000 0000 0000 210 6500 71873 04960 5522 7478 47205 03257 5858 7142 22313 1040 1.1960 Total Model Fixed Effects Random Effects ANOVA Sum of Squares so_choi Between Groups Mean Square 56935.457 9489.243 9318.967 203 45.906 66254.424 209 Between Groups 62.729 10.455 Within Groups 45.236 203 223 107.965 209 Within Groups Total cao_choi df Total F Sig 206.709 000 46.917 000 Homogeneous Subsets so_choi Subset for alpha = 0.05 ngthuc N 30 30 1.1 30 2.2 30 8.2333 30 9.6333 30 21.9667 30 Sig 49.8333 0.239 0.424 1 cao_choi Subset for alpha = 0.05 ngthuc Sig N 30 30 0.0367 30 0.3533 30 0.4667 30 0.91 30 1.3533 30 1.43 0.764 0.354 0.53 Phụ lục 16 Xử lý số liệu bảng 3.5 Descriptives 95% Confidence Interval for Me STT sochoi_2t Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Boun 30 2.2333 1.19434 21805 1.7874 2 30 3.7667 1.04000 18988 3.3783 30 5.6667 1.51620 27682 5.1005 30 4.9333 1.55216 28338 4.3537 5 30 9.1667 1.91335 34933 8.4522 30 7.8667 2.02967 37056 7.1088 30 2.3667 2.22033 40538 1.5376 30 1.4000 1.52225 27792 8316 30 12.5333 9.39454 1.71520 9.0254 16 270 5.5481 4.90765 29867 4.9601 30 5.2000 2.00688 36641 4.4506 30 1.8333 1.28877 23530 1.3521 30 1.9333 1.20153 21937 1.4847 30 1.4667 1.19578 21832 1.0202 30 5.1667 1.20583 22015 4.7164 30 3.3333 1.15470 21082 2.9022 30 1.6333 1.29943 23724 1.1481 30 7000 65126 11890 4568 30 14.2667 7.58825 1.38542 11.4332 17 Total caochoi_4ts Mean Total sochoi_4t N 270 3.9481 4.82992 29394 3.3694 30 2.3267 1.29932 23722 1.8415 2 30 5.0333 2.60217 47509 4.0617 30 5.3667 2.61275 47702 4.3911 30 5.8533 1.99840 36486 5.1071 30 3.0167 84571 15441 2.7009 30 2.6333 50742 09264 2.4439 30 1.8000 73812 13476 1.5244 30 1.7000 40684 07428 1.5481 30 3.6667 1.98413 36225 2.9258 270 3.4885 2.21421 13475 3.2232 Total ANOVA Sum of Squares sochoi_2t sochoi_4t caochoi_4ts df Mean Square F Between Groups 3274.341 409.293 Within Groups 3204.533 261 12.278 Total 6478.874 269 Between Groups 4215.007 526.876 Within Groups 2060.267 261 7.894 Total 6275.274 269 Between Groups 596.753 74.594 Within Groups 722.082 261 2.767 1318.834 269 Total Homogeneous Subsets sochoi_2t Subset for alpha = 0.05 ngthuc N 30 1.4 30 2.2333 2.2333 30 2.3667 2.3667 30 3.7667 30 3.7667 4.9333 30 4.9333 5.6667 30 7.8667 30 9.1667 30 12.5333 Sig 0.318 0.111 0.198 0.418 0.152 sochoi_4t Subset for alpha = 0.05 ngthuc N 30 7000 30 1.4667 30 1.6333 30 1.8333 1.8333 30 1.9333 1.9333 30 30 5.1667 30 5.2000 30 Sig 3.3333 14.2667 133 051 963 1.000 Sig 33.336 000 66.746 000 26.962 000 caochoi_4t Subset for alpha = 0.05 ngthuc N 30 1.7000 30 1.8000 1.8000 30 2.3267 2.3267 2.3267 30 2.6333 2.6333 30 30 30 5.0333 30 5.3667 30 5.8533 3.0167 3.0167 3.6667 Sig .171 067 131 131 072 Phụ lục 17 Xử lý số liệu bảng 3.6 Descriptives 95% Confidence Interval for Mean ngthuc sore1 daire1 N Mean Std Deviation Std Error Lower Bound Upper Bound Minimum 30 1.4000 1.34990 42687 4343 2.3657 00 30 3.0000 1.24722 39441 2.1078 3.8922 2.00 30 4.1000 1.19722 37859 3.2436 4.9564 3.00 30 5.9000 3.28126 1.03763 3.5527 8.2473 3.00 30 5.9000 3.87155 1.22429 3.1305 8.6695 1.00 30 7.9000 4.50802 1.42556 4.6752 11.1248 3.00 30 6.9000 3.44642 1.08985 4.4346 9.3654 3.00 30 1.3000 1.15950 36667 4705 2.1295 00 30 1.8000 1.47573 46667 7443 2.8557 00 10 30 2.3000 94868 30000 1.6214 2.9786 1.00 11 30 2.6000 1.64655 52068 1.4221 3.7779 00 12 30 1.4000 1.26491 40000 4951 2.3049 00 13 30 2.1000 2.07900 65744 6128 3.5872 00 Total 390 3.5846 3.19832 28051 3.0296 4.1396 00 30 3100 31780 10050 0827 5373 00 30 1.7875 1.05253 33284 1.0346 2.5404 38 30 7400 26957 08524 5472 9328 35 30 8050 26921 08513 6124 9976 40 30 8750 24296 07683 7012 1.0488 50 30 1.1650 42821 13541 8587 1.4713 40 sore2 daire2 30 4500 21731 06872 2945 6055 25 30 1.1000 97325 30777 4038 1.7962 00 30 7550 65041 20568 2897 1.2203 00 10 30 9800 46738 14780 6457 1.3143 40 11 30 1.1500 63683 20138 6944 1.6056 00 12 30 4450 43170 13651 1362 7538 00 13 30 5625 47232 14936 2246 9004 00 Total 390 8558 65365 05733 7423 9692 00 30 2.7000 1.15950 36667 1.8705 3.5295 1.00 30 3.9000 1.10050 34801 3.1127 4.6873 2.00 30 6.7000 1.63639 51747 5.5294 7.8706 5.00 30 8.0000 3.01846 95452 5.8407 10.1593 5.00 30 8.0000 3.71184 1.17379 5.3447 10.6553 2.00 30 13.1000 7.17170 2.26789 7.9697 18.2303 4.00 30 14.1000 6.27960 1.98578 9.6078 18.5922 6.00 30 1.8000 1.31656 41633 8582 2.7418 00 30 2.7000 1.25167 39581 1.8046 3.5954 1.00 10 30 2.8000 1.13529 35901 1.9879 3.6121 1.00 11 30 3.8000 1.39841 44222 2.7996 4.8004 2.00 12 30 3.5000 1.26930 40139 2.5920 4.4080 2.00 13 30 3.5000 1.35401 42817 2.5314 4.4686 2.00 Total 390 5.7385 4.91092 43072 4.8863 6.5906 00 30 1.5250 51384 16249 1.1574 1.8926 60 30 2.9250 95051 30058 2.2450 3.6050 50 30 1.4000 37639 11902 1.1307 1.6693 1.00 30 1.4000 42817 13540 1.0937 1.7063 75 30 1.6250 55590 17579 1.2273 2.0227 75 30 1.4050 42652 13488 1.0999 1.7101 75 30 8050 30952 09788 5836 1.0264 40 30 1.7500 1.50000 47434 6770 2.8230 00 30 1.6750 71734 22684 1.1618 2.1882 50 10 30 1.5000 82496 26087 9099 2.0901 50 11 30 1.8250 91325 28880 1.1717 2.4783 50 12 30 1.0500 32914 10408 8145 1.2855 75 13 30 1.3000 19720 06236 1.1589 1.4411 1.00 Total 390 1.5527 82683 07252 1.4092 1.6962 00 ANOVA sore1 daire1 sore2 daire2 Sum of Squares df Mean Square F Sig Between Groups 637.169 12 53.097 9.104 000 Within Groups 682.400 117 5.832 Total 1319.569 129 Between Groups 18.692 12 1.558 5.003 000 Within Groups 36.425 117 311 Total 55.117 129 Between Groups 1950.308 12 162.526 16.381 000 Within Groups 1160.800 117 9.921 Total 3111.108 129 Between Groups 29.641 12 2.470 4.936 000 Within Groups 58.551 117 500 Total 88.192 129 Homogeneous Subsets sore1 Subset for alpha = 0.05 ngthuc 12 13 10 11 Sig daire1 N 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 1.3000 1.4000 1.4000 1.8000 2.1000 2.3000 2.6000 3.0000 187 1.8000 2.1000 2.3000 2.6000 3.0000 4.1000 063 4.1000 5.9000 5.9000 118 5.9000 5.9000 6.9000 7.9000 093 Subset for alpha = 0.05 ngthuc N 1 12 13 10 30 30 30 30 30 30 30 30 30 3100 4450 4500 5625 7400 7550 8050 8750 4450 4500 5625 7400 7550 8050 8750 9800 5625 7400 7550 8050 8750 9800 7400 7550 8050 8750 9800 11 Sig sore2 30 30 30 30 054 069 1.1000 1.1000 1.1500 1.1650 064 152 Subset for alpha = 0.05 ngthuc 10 12 13 11 Sig daire2 N 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 1.8000 2.7000 2.7000 2.8000 3.5000 3.5000 3.8000 3.9000 212 3.8000 3.9000 6.7000 053 6.7000 8.0000 8.0000 389 13.1000 14.1000 479 Subset for alpha = 0.05 ngthuc N 12 13 10 11 Sig 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 8050 1.0500 1.3000 1.4000 1.4000 1.4050 1.5000 1.5250 053 1.0500 1.3000 1.4000 1.4000 1.4050 1.5000 1.5250 1.6250 1.6750 1.7500 065 1.3000 1.4000 1.4000 1.4050 1.5000 1.5250 1.6250 1.6750 1.7500 1.8250 171 2.9250 1.000 1.7875 1.000 [...]... 1.3.1 Tình hình nghiên cứu vi nhân giống cây Tràm ta trên thế giới Trên thế giới đã có nhiều nghiên cứu về khả năng thích ứng với các điều kiện sinh thái khác nhau cũng như các nghiên cứu về hàm lượng tinh dầu và chất lượng 15 gỗ của cây Tràm ta Tuy nhiên, hiện chưa tìm thấy kết quả nào nghiên cứu về tái sinh in- vitro cây Tràm ta Mặc dù đã có nhiều nghiên cứu tái sinh cây Tràm xuất xứ từ Úc (Melaleuca alternifolia)... thích hợp Tỷ lệ auxin/ cytokinin quyết định kiểu tái sinh cơ quan từ mô sẹo chưa phân hóa in vitro Tỷ lệ auxin/ cytokinin cao giúp sự tạo rễ Tỉ lệ auxin/ cytokinin thấp giúp sự tạo chồi Một tỉ lệ cân, bằng giữa auxin và cytokinin sẽ tạo nên khối mô sẹo không phân hóa (Mok, 1994) Các cytokinin thường sử dụng là Benzyladenin (BA), Kinetin, 2 isopentenyladenin (2 - iP) và Zeatin (cytokinin tự nhiên) Trong... cajuputi Powell) được thực hiện để tạo cơ sở tiền đề cho quy trình cải tạo giống cây Tràm II MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Tìm được chất điều hòa sinh trưởng (ĐHST) thực vật, nồng độ và sự phối hợp các chất ĐHST để tái sinh cây Tràm ta từ mô sẹo trong điều kiện in vitro III Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA LUẬN VĂN Đây là nghiên cứu tái sinh in vitro thông qua mô sẹo trên đối tượng cây Tràm ta (Melaleuca cajuputi. .. sinh in vitro cây Tràm ta thông qua mô sẹo có nguồn gốc từ cây mầm Đề tài này không chỉ phục vụ cho công tác nhân giống thông thường mà còn là bước đầu tiên và được xem là khâu quan trọng nhất trong việc nghiên cứu ứng dụng phương pháp chuyển gene hay gây đa bội hóa trong cải thiện giống trên đối tượng là cây Tràm ta 3 Chương 1 TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY TRÀM TA 1.1.1 Đặc điểm sinh học của cây. .. chồi Tràm ta sau 4 tuần 39 Hình 3.17 Ảnh hưởng của NAA lên khả năng ra rễ của Tràm ta sau 4 tuần 39 Hình 3.18 Cây Tràm ta sau 2 tuần cấy ra bầu đất trong điều kiện vườn ươm 41 Hình 3.19 Cây Tràm ta sau 3 tuần cấy ra bầu đất trong điều kiện vườn ươm 41 Hình 3.20 Sự tăng trưởng của Tràm ta sau 1, 2, 3, 4, 5, 6 tuần trong điều kiện vườn ươm 42 1 MỞ ĐẦU I LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI Cây Tràm ta. .. ít nghiên cứu thành công trong cải thiện giống cây lâm nghiệp trên nhiều đối tượng khác nhau bằng kỹ thuật chuyển gene hay gây đa bội hóa… Để phát triển được quy trình cải tạo giống bằng các phương pháp đó, khâu quan trọng đầu tiên là phải xây dựng được hệ thống tái sinh cây hoàn chỉnh từ những tế bào đơn lẻ (Castellanos - Hernández, 2011) Do đó, đề tài Nghiên cứu nhân nhanh in vitro cây Tràm ta (Melaleuca. .. MDF, ván dăm gỗ (Trần Thanh Cao, 2002) 1.1.2.3 Sản phẩm ngoài gỗ  Tinh dầu Tràm Lá là bộ phận cung cấp tinh dầu chủ yếu ở cây Tràm với hàm lượng cineol (30%); α - terpinolen; γ - terpinen; trans - cariophilen; …ở Tràm gió và cineol (2%); α - terpinolen (10%); γ - terpinen (10%); β - malien (15%); … ở Tràm cừ (Lê Ngọc Thạch, 2003) Dầu Tràm được phân loại là không độc, không gây cảm giác, mặc dù với nồng... Việt, 2000) Auxin có tác dụng khởi phát quá trình tạo mô sẹo, còn cytokinin lại làm tăng khả năng phân chia của các tế bào mô sẹo (Nguyễn Đức Lượng và cộng sự, 2002) Sự kết hợp giữa auxin và cytokinin sẽ làm tăng khả năng tạo mô sẹo từ khúc cắt trụ hạ diệp của cây 1.2.2.2 Cytokinin Nhóm chất cytokinin kích thích sự phân chia tế bào và quyết định sự phân hóa chồi Tỷ lệ auxin/ cytokinin quyết định sự... diệp Bộ: Myrtales Họ: Myrtaceae – Họ Sim Chi: Melaleuca Loài: Melaleuca cajuputi Powell Ở một số nước như Malaysia, Thái Lan, Indonesia cây Tràm ta được gọi bằng “gelam”, “kayu putih”, “samet” hay “met” Tên tiếng Anh được biết đến ở một số nơi khác như “swamp tea-tree”, “paperback tea-tree” và “cajeput” (Tanit Nuyim, 2008) Ở Việt Nam cây Tràm được biết đến với tên gọi Tràm ta, Tràm cừ hay Tràm gió (Nguyễn... Hợp, 2002) Ở nước ta Tràm tồn tại cả 2 hoặc 3 dạng sống trên các lập địa khác nhau Ở đồng bằng sông Cửu Long có dạng Tràm cừ, Tràm lùn và Tràm bụi, trong đó Tràm cừ là chiếm phần lớn Ở Nam Trung Bộ có dạng Tràm cừ và Tràm bụi Ở Bắc Trung Bộ có dạng Tràm cừ, Tràm lùn và Tràm bụi nhưng nhiều nhất là ở 2 dạng sau Ở Đông Bắc mới chỉ gặp có 2 dạng chính là Tràm lùn và Tràm bụi, trong đó Tràm bụi chiếm ưu ... Tràm ta Tuy nhiên, chưa tìm thấy kết nghiên cứu tái sinh in- vitro Tràm ta Mặc dù có nhiều nghiên cứu tái sinh Tràm xuất xứ từ Úc (Melaleuca alternifolia) Trong nghiên cứu cảm ứng tạo sẹo từ Tràm. .. PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Nguyễn Đăng Thùy NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH IN VITRO CÂY TRÀM TA (Melaleuca cajuputi Powell) Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC NGƯỜI... GIỐNG CÂY TRÀM TA TRONG NƯỚC VÀ TRÊN THẾ GIỚI 1.3.1 Tình hình nghiên cứu vi nhân giống Tràm ta giới Trên giới có nhiều nghiên cứu khả thích ứng với điều kiện sinh thái khác nghiên cứu hàm lượng tinh