BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA HĨA HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH HÓA HỮU CƠ KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO CHLOROFORM CỦA QUẢ MƯỚP ĐẮNG MOMORDICA CHARANTIA L GVHD: ThS Lê Thị Thu Hương SVTH: Phạm Thị Hoài TP HCM, tháng năm 2013 LỜI CẢM ƠN Con xin kính gởi đến ba, mẹ lịng biết ơn sâu sắc Công ơn sinh thành, dưỡng dục lời động viên ba, mẹ động lực giúp vững bước sống Em xin chân thành cảm ơn tất quý Thầy Cô khoa Hóa Học, trường Đại Học Sư Phạm Tp HCM tận tình dạy dỗ, truyền đạt kiến thức cho em suốt khóa học Em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Ths Lê Thị Thu Hương tận tình hướng dẫn, giúp đỡ động viên em Em xin cảm ơn tổ mơn Hóa Hữu Cơ, cô Ts Nguyễn Thị Ánh Tuyết hỗ trợ cho em hóa chất thiết bị phục vụ cho khóa luận Em xin tỏ lịng biết ơn q Thầy Cơ Hội đồng bảo vệ khóa luận tốt nghiệp xem xét, góp ý cho khóa luận em Cảm ơn bạn Tạ Thị Hồng Huệ bạn lớp Hóa K35C động viên, giúp đỡ suốt năm học đại học Tp HCM, tháng năm 2013 CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT TRONG BÀI KHÓA LUẬN Ký hiệu Tiếng Anh Tiếng Việt chữ viết tắt CHCl Chloroform Clorofom PE Petroleum Ether Ete dầu EtOAc Ethyl Acetate Etyl Axetat MeOH Methanol Metanol EtOH Ethanol Etanol NMR Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân DEPT Distortionless Enhancement Phổ DEPT by Polarization Transfer HMBC Heteronuclear Multiple Tương quan H-C qua liên kết Bond correlation HSQC Heteronuclear Single Quantum Tương quan H-C qua 2, liên kết Correlation ppm Part per million Một phần triệu br s Broad singlet Mũi đơn, rộng s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi dd Double of Doublet Mũi đôi đôi m Multiplet Mũi đa J Coupling constant Hằng số ghép spin TLC Thin Layer Chromatography Sắc ký lớp mỏng Rf Retention factor MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1.1 1.1.1 TỔNG QUAN MÔ TẢ VỀ CÂY MƯỚP ĐẮNG KHÁI QUÁT 1.1.2 MÔ Tả THựC VậT 1.2 PHÂN BỐ VÀ SINH THÁI [11,13] 1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ 1.4 CÔNG DỤNG CỦA CÂY MƯỚP ĐẮNG 1.4.1 Rễ 1.4.2 DÂY 1.4.3 LÁ 1.4.4 QUả 1.4.5 HOA 1.4.6 HạT 1.5 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HĨA HỌC 1.5.1 CÁC CƠNG TRÌNH TRONG NƯớC 1.5.2 CÁC CÔNG TRÌNH TRÊN THế GIớI CHƯƠNG THỰC NGHIỆM 23 2.1 NGUYÊN LIỆU, HÓA CHẤT, THIẾT BỊ 23 2.1.1 NGUYÊN LIệU 23 2.1.2 HÓA CHấT 23 2.3 CÔ LẬP VÀ TINH CHẾ CÁC HỢP CHẤT 24 2.3.1 KHảO SÁT PHÂN ĐOạN Đ1 25 2.3.2 KHảO SÁT PHÂN ĐOạN Đ3 26 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT C1 30 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT C2 30 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 4.1 CÁC KẾT QUẢ ĐÃ ĐẠT ĐƯỢC 38 4.2 ĐỀ XUẤT 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 LỜI MỞ ĐẦU Ngày với phát triển khoa học, y học, nhiều loại bệnh phát nghiên cứu phương thuốc điều trị Để đáp ứng hết nhu cầu chăm sóc sức khoẻ người bệnh, nhà dược liệu nghiên cứu, tổng hợp nhiều loại thuốc đặc trị với quy mô công nghiệp Tuy nhiên, sau thời gian sử dụng số loại thuốc tổng hợp lại có tác dụng phụ khơng mong muốn Chính người có xu hướng trở lại với thiên nhiên, từ cỏ phân tích, giải mã thành phần hố học dược tính chất với mong muốn tìm phương thuốc an toàn cho sức khoẻ người tiêu dùng Mặt khác, nước ta nước nhiệt đới gió mùa, có khí hậu nóng ẩm nên nguồn thực vật tự nhiên phong phú đa dạng Vì lý mà việc nghiên cứu thành phần hóa học cỏ ngày đẩy mạnh Cây mướp đắng có tên khoa học Momordica charantia L thuộc họ Bầu bí (Cucurbitaceae) Quả mướp đắng từ xưa người chọn làm nguồn lương thực thiết yếu lẽ chứa nhiều chất dinh dưỡng tốt cho sức khoẻ lại dễ chế biến, dễ trồng, dễ chăm sóc Theo Đơng y, mướp đắng có tính hàn, vị đắng, khơng độc, dùng thường xuyên giúp giảm bệnh da, làm cho da dẻ mịn màng Theo y học đại, mướp đắng có tác dụng diệt vi khuẩn virus, chống lại tế bào ung thư; hỗ trợ đắc lực cho bệnh nhân ung thư chữa tia xạ Chính lí trên, chúng tơi chọn đề tài: “Khảo sát thành phần hóa học cao chloroform mướp đắng Momordica charantia L.” với mong muốn đóng góp phần nhỏ việc tìm hiểu thành phần hóa học có mướp đắng thu hái xã Mỹ Hạnh Bắc, huyện Đức Hòa, Long An Chương TỔNG QUAN 1.1 MÔ TẢ VỀ CÂY MƯỚP ĐẮNG 1.1.1 Khái quát Tên khoa học : Momordica charantia L Thuộc họ: Bầu bí (Cucurbitaceae) Tên nước ngoài: Bitter melon, bitter ground (Anh), bitter apple, wild cucumber, bitter cucumber, ampalaya (Philipines), balsam pear (Mỹ), karela (Ấn Độ)…[13] Tên việt nam: khổ qua, mướp đắng, lương qua, cẩm lệ chi… [12,13] Mướp đắng tồn hai dạng quần thể: mọc hoang trồng trọt Loại trồng trọt phong phú giống xếp chung vào chi mướp đắng Momordica Nếu theo hình dạng bên ngồi người ta chia mướp đắng thành hai chủng loại: [4,11]  Momordica charantia L Var charantia L., to (đường kính > 5cm), màu xanh nhạt, gai tù, đắng  Momordica charantia L Var abbreviata Ser., nhỏ (đường kính < 5cm), màu xanh đậm, gai nhọn, vị đắng Hình 1.1: Var abbreviata Ser Hình 1.2: Var charantia L 1.1.2 Mơ tả thực vật Mướp đắng thuộc loại dây leo tua cuốn, thân có cạnh, có mọc lơng tơ, có đời sống khoảng năm Lá mọc so le, dài 5-10 cm, rộng 4-8 cm, phiến chia làm 5-7 thuỳ, hình trứng, mép khía Mặt màu nhạt mặt trên, gân có lơng ngắn [6,10,12,13] Hoa đực hoa mọc riêng nách lá, có cuống dài Hoa đực có đài ống ngắn, tràng gồm năm cánh mỏng hình bầu dục, nhụy rời Hoa có đài tràng hoa giống hoa đực Tràng hoa màu vàng nhạt, đường kính khoảng cm [4,10,,13] Quả hình thoi, dài 8-15 cm, gốc đầu thn nhọn, mặt vỏ có nhiều u lồi to nhỏ không Quả chưa chín có màu xanh vàng xanh nhạt, chín có màu vàng hồng Vì Trung Quốc, mướp đắng cịn có tên hồng dương, hồng nương Khi chín, nứt dần từ đầu, tách làm ba phần để lộ chùm áo hạt màu đỏ bên [13,14] Hạt dẹp, dài 13-15 mm, rộng 7-8 mm, trơng gần giống hạt bí ngơ Quanh hạt có màng đỏ bao quanh (giống màng hạt gấc) [11,13] Hình 1.3: Dây hoa mướp đắng Hình 1.4: Hạt mướp đắng 1.2 PHÂN BỐ VÀ SINH THÁI [11,13] Từ thời xưa, mướp đắng trồng vùng Đông Ấn Nam Trung Quốc, sử dụng loại rau ăn giàu chất sắt vitamin C Sau đó, du nhập sang châu Phi châu Mỹ Latinh Quần thể mướp đắng trở nên phong phú với giống đa dạng tạo trình chọn giống lai tạo Ở Việt Nam, mướp đắng trồng khắp tỉnh từ Bắc vào Nam, số vùng núi cao lạnh Sa Pa (Lào Cai), Phó Bảng (Hà Giang)…thì khơng thấy có mướp đắng Trên giới, mướp đắng có mặt hầu nhiệt đới cận nhiệt đới Trung Quốc (Phúc Kiến, Quảng Đông, Quảng Tây, Giang Tô, Triết Giang); số nước đông nam châu Á Ấn Độ, Malaysia, Philippin; châu Phi vùng Caribbean Cây mướp đắng có biên độ sinh thái tương đối rộng, nhiệt độ thích hợp cho sinh trưởng từ 20oC – 35oC, lượng mưa năm từ 1500 – 2500 mm Cây chịu nhiều điều kiện đất khác phát triển tốt điều kiện thoáng nước đất giàu chất hữu Mướp đắng trồng quanh năm Cây sinh trưởng nhanh mùa mưa ẩm, hoa sau – tuần gieo trồng Sau già, tàn lụi kết thúc vòng đời sau – tháng tồn 1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ Y học cổ truyền dân gian Việt Nam có nhiều kinh nghiệm chữa bệnh từ mướp đắng dạng thô ban đầu dạng nước ép, nước sắc Ngày thị trường xuất nhiều sản phẩm từ mướp đắng chủ yếu dạng thực phẩm chức trà hồ tan, trà túi lọc Điển hình sản phẩm trà Khổ Qua viện Dược Liệu Các tác giả Nguyễn Thị Như, Nguyễn Thị Bay nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết thuốc nam thực nghiệm lâm sàn, sản phẩm trà túi lọc mà thành phần mướp đắng chiếm 60% [11] Các tác giả Mai Phương Mai, Võ Phùng Nguyên thăm dò tác dụng hạ đường huyết số thuốc dân gian mơ hình đái tháo đường streptozotocin chuột nhắc mà thành phần thuốc có chứa mướp đắng.[11] Các tác giả Mai Phương Mai, Nguyễn Thị Hạnh, Nguyễn Ngọc Hạnh chứng minh tác dụng hạ đường huyết dịch chiết từ mướp đắng thu hái Thái Nguyên với dung môi khác nhau.[30] Theo y học đại, mướp đắng có tác dụng: [11]  Diệt vi khuẩn virut, chống lại tế bào gây ung thư, hổ trợ đắc lực cho bệnh nhân ung thư chữa trị tia xạ  Chống gốc tự - nguyên nhân gây lão hoá phát sinh bệnh tim mạch, tăng huyết áp, rối loạn lipit máu, tổn thương thần kinh, viêm đường tiết niệu, đái tháo đường  Tăng oxy hoá glucozơ, ngăn chặn hấp thu glucozơ vào tế bào Ức chế hoạt tính men tổng hợp glucozơ  Có tác dụng sinh học giống insulin, giúp thể tăng tiết insulin  Có tác dụng tốt người mắc bệnh đái tháo đường dạng type Hỗ trợ tăng tác dụng, giảm liều lượng, giảm tác dụng phụ loại sulfamid trị đái tháo đường dạng type  Dịch chiết từ mướp đắng có khả ức chế khối u, hổ trợ men gan  Cao methanol 50% mướp đắng cho tác dụng hạ đường huyết 25% (liều dùng 30 mg/kg), cao butanol cho kết 34% với liều dùng Các tác giả cho hợp chất phân cực, tan nhiều butanol có khả làm giảm đường huyết Cơ chế hoạt động tương tự insulin thông qua tiết insulin từ tuyến tuỵ Phụ lục phổ 2.1d Phổ 1H-NMR giãn rộng hợp chất C2 29 29 21 21 27 27 18 19 20 17 11 HO HO O O 1' 3' 19 26 15 O 6' 24 17 11 OH 15 OH 20 26 6' 18 24 HO HO O 1' 3' OH OH Phụ lục phổ 2.2a Phổ 13C-NMR hợp chất C2 29 29 21 27 18 19 20 27 24 18 11 26 19 15 HO HO 1' 3' OH 26 15 OH O 24 17 11 OH O 20 17 6' 21 O 6' HO HO O 1' 3' OH Phụ lục phổ 2.2b Phổ 13C-NMR giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.2c Phổ 13C-NMR giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.3a Phổ DEPT-NMR hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.3b Phổ DEPT-NMR giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.3c Phổ DEPT-NMR giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.4a Phổ HSQC hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.4b Phổ HSQC giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.4c Phổ HSQC giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.5a Phổ HMBC hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.5b Phổ HMBC giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.5c Phổ HMBC giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.5d Phổ HMBC giãn rộng hợp chất C2 Phụ lục phổ 2.5e Phổ HMBC giãn rộng hợp chất C2 ... HSQC, HMBC so sánh với tài liệu công bố 4.2 KIẾN NGHỊ Tiếp tục khảo sát cao chloroform để phân l? ??p hợp chất khác cao Khảo sát thành phần hóa học cao methanol TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Hải Ân... phần hóa học cao chloroform mướp đắng Momordica charantia L. ” với mong muốn đóng góp phần nhỏ việc tìm hiểu thành phần hóa học có mướp đắng thu hái xã Mỹ Hạnh Bắc, huyện Đức Hịa, Long An Chương... 70o, tiến hành điều chế loại cao dựa độ phân cực khác hợp chất có quả: cao petroleum ether, cao chloroform, cao methanol Từ cao chloroform phân l? ??p chất tinh khiết alcol hỗn hợp steroid nhận danh