BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN VIẾT HỢI KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG KHÁNG THỂ NEWCASTLE CỦA ĐÀN GÀ NUÔI TẠI TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU VÀ HUẤN LUYỆN CHĂN NUÔI LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI - 2014 BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN VIẾT HỢI KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG KHÁNG THỂ NEWCASTLE CỦA ĐÀN GÀ NUÔI TẠI TRUNG TÂM NGHIÊN CỨU VÀ HUẤN LUYỆN CHĂN NUÔI CHUYÊN NGÀNH: THÚ Y MÃ SỐ : 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS TRẦN THỊ LAN HƯƠNG HÀ NỘI - 2014 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tôi xin cam đoan thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Mọi giúp đỡ cảm ơn Hà Nội, ngày14 tháng 10 năm 2014 Tác giả luận văn Nguyễn Viết Hợi Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, cố gắng, nỗ lực thân có hướng dẫn tận tình cô hướng dẫn khoa học TS Trần Thị Lan Hương Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cô hướng dẫn, người giành nhiều thời gian quý báu tận tình giúp đỡ, hướng dẫn suốt trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn: - Các thầy, cô giáo Bộ môn Vi sinh vật – Truyền nhiễm khoa Thú y - Ban quản lý đào tạo – Học viện Nông nghiệp Việt Nam - Ban giám đốc Trung tâm Nghiên cứu Huấn luyện chăn nuôi -Tập thể cán bộ, công nhân viên phòng ban, trạm, trại thực nghiệm Trung tâm Nghiên cứu Huấn luyện chăn nuôi Đã tận tình giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Nhân dịp này, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp - Những người tạo điều kiện, động viên, giúp đỡ vượt qua khó khăn trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Hà Nội, ngày14 tháng 10 năm 2014 Tác giả luận văn Nguyễn Viết Hợi Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU vii MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu đề tài 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Bệnh newcastle 2.2 Virus Newcastle 14 2.3 Miễn dịch chống bệnh Newcastle 18 2.4 Vacxin vấn đề phòng bệnh Newcastle 21 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1 Đối tượng 28 3.2 Nội dung nghiên cứu 28 3.3 Nguyên liệu 28 3.4 Phương pháp nghiên cứu 29 3.4.1.Phương pháp lấy máu huyết 29 3.4.2 Phương pháp làm phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu gà (HI) 30 3.4.3 Phương pháp xử lý số liệu 34 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 35 4.1 Vài nét tình hình sản xuất chăn nuôi Trại thực nghiệm Liên Ninh Trung tâm Nghiên cứu Huấn luyện chăn nuôi 35 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii 4.2 Xác định kháng thể thụ động Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 37 4.2.1 Tương quan hàm lượng kháng thể Newcastle gà mẹ với kháng thể thụ động gà Dominant Partridge D300 38 4.2.2 Diễn biến kháng thể thụ động gà Dominant Partridge D300 43 4.3 Xác định thời điểm thích hợp để tác động liều vacxin Newcastle cho đàn gà Dominant Partridge D300 48 4.4 Xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 sau sử dụng lịch dùng vacxin Newcastle khác 53 4.4.1 Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 hai tháng tuổi sau dùng vacxin Medivac ND –IB với lịch dùng khác 54 4.4.2 Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 sau dùng vacxin nhũ dầu Medivac ND – IB - IBD lần lần 58 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 67 5.1 Kết luận 67 5.2 Đề nghị 68 TÀI LIỆU THAM KHẢO 69 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng 4.1 Cơ cấu đàn gà năm 2011 - 2013 36 Bảng 4.2 : Tương quan hàm lượng kháng thể Newcasle gà Dominant Partridge D300 mẹ với kháng thể thụ động gà 39 Bảng 4.3 : Tương quam hàm lượng kháng thể Newcastle gà mẹ Dominant Partridge D300 với kháng thể thụ động gà ( cá thể) 42 Bảng 4.4 Diễn biến kháng thể thụ động Newcastle gà Dominant Partide D300( nở từ trứng gà mẹ hiệu giá HI log2) 45 Bảng 4.5 Diễn biến kháng thể thụ động Newcastle gà Dominant Partide D300( nở từ trứng gà mẹ hiệu giá HI log2) 46 Bảng 4.6: Ảnh hưởng kháng thể thụ động đến đáp ứng miễn dịch gà dùng vacxin Medivac ND – IB lần đầu(gà nở từ trứng gà mẹ sau tiêm vacxin 3, tháng) 49 Bảng 4.7 Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Gà Dominant Partridge D300 sau dùng vacxin Medivac ND - IB với lịch dùng vacxin khác 56 Bảng 4.8: Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 sau sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần với lịch dùng vacxin khác 60 Bảng 4.9: Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 sau sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần với lịch dùng vacxin khác 64 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang Hình 4.1 : Tương quan kháng thể Newcastle gà mẹ với kháng thể thụ động gà 41 Hình 4.2 : Tương quan kháng thể Newcastle gà mẹ Dominant Partridge D300 với kháng thể thụ động gà ( cá thể) 43 Hình 4.3 : Diễn biến kháng thể thụ động gà (Lô : HI gà có gà mẹ HI= log2 ; Lô : HI gà có gà mẹ HI= log2 ) 47 Hình 4.4 : Ảnh hưởng kháng thể thụ động đến kháng thể Newcastle gà sử dụng vacxin lần đầu 51 Hình 4.5: Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà 58 Dominant Partridge D300 sau sử dụng vacxin Medivac ND - IB với lịch dùng vacxin khác 58 Hình 4.6: Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà 62 Dominant Partridge D300 sau sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac NDIB-IBD lần với lịch dùng vacxin khác 62 Hình 4.7: Kết xác định hàm lượng kháng thể Newcastle đàn gà Dominant Partridge D300 sau sử dụng vacxin nhũ dầu Medivac ND-IB-IBD lần với lịch dùng vacxin khác 65 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU ARN Acid ribonucleic GMT Geometic Mean Titer H Hemagglutinin HA Haemagglutination Hb Hemoglobin HI Haemagglutination inhibition EID50 50 percent Embryo infective dose ELD50 50 percent Embryo lethal dose MDT Mean Death Time N Neuraminidase IB Infectious bronchitis IBD Infectious Bursal Disease ND Newcastle disease OIE Office International des Epizooties TN Thí nghiệm ICPI Intracerebral pathogenicity index in day-old chicks IVPI Intravenous pathogenicity index in 6-week-old chickens Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài Bệnh Newcastle virus Newcsatle gây ra, bệnh truyền nhiễm cấp tính chủ yếu gà gà tây, bệnh lây lan mạnh, gây chết với tỷ lệ cao Bệnh phát năm 1926, đến bệnh mối đe dọa nguy hiểm cho ngành chăn nuôi gia cầm giới nói chung Việt Nam nói riêng Mặc dù có nhiều biện pháp đề nhằm ngăn chặn, khống chế bệnh bệnh xảy ra, đặc biệt bệnh thường xuyên xảy giai đoạn nuôi gà gà hậu bị gây thiệt hại lớn kinh tế Biện pháp hữu hiệu để ngăn chặn, khống chế, đến toán dịch bệnh sử dụng vacxin Newcastle tạo miễn dịch chủ động để phòng bệnh Newcastle cho đàn gà Những vacxin nhược độc, vacxin vô hoạt sử dụng tạo miễn dịch cho đàn gà chống bệnh Newcastle.Vì nhiều nước bệnh toán Ở Việt Nam, để phòng bệnh Newcastle cho đàn gà nhiều loại vacxin sản xuất nước sử dụng vacxin chủng Lasota, Lasota chịu nhiệt, chủng F dùng cho gà Vacxin chủng Mukteswar dùng cho gà tháng tuổi Ngoài vacxin có vacxin nhập ngoại Avinew, Medivac ND clone 45, vacxin nhị giá, vacxin đa : Medivac ND-IB, Nobilis G+IB+ND, Medivac ND-IB-IBD… Trong trình sử dụng vacxin cho đàn gà lúc đạt hiệu bảo hộ tốt Có sở dùng vacxin Newcastle cho đàn gà, bệnh Newcastle xảy Nghiên cứu vấn đề Silim(1992) cho biết khả đáp ứng miễn dịch đàn gà chịu ảnh hưởng nhiều yếu tố : Kháng thể thụ động, chất lượng vacxin, lịch dùng vacxin… Trung tâm Nghiên cứu Huấn luyện chăn nuôi nơi Nghiên cứu cung cấp giống gà cho nhiều tỉnh thành nước Con giống gia cầm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page Sau theo thời gian, hàm lượng kháng thể Newcastle giảm xuống tốc độ giảm chậm đến tuần thứ 12 hàm lượng kháng thể đạt (4,20±0,33)log2 có 26/30 mẫu có HI ≥ 3log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 86,67% đến tuần thứ 15 hàm lượng kháng thể (3,17±0,24)log2, tỷ lệ bảo hộ 73,33% + Lô gà dùng vacxin theo lịch : Gà tiêm vacxin vào lúc 50 ngày tuổi, với liều 0,5ml/con Sau sử dụng vacxin nhũ dầu tuần mẫu kiểm tra có hiệu giá HI cao dao động khoảng 4log2 đến 6log2, HI bình quân đạt (5,10±0,23)log2, số mẫu có HI ≥ log2 100% Hàm lượng kháng thể Newcastle tiếp tục tăng lên rõ rệt tuần thứ đạt (6,60±0,30)log2 Hàm lượng kháng thể đạt cao tuần thứ (8,73±0,26)log2, mẫu kiểm tra có hiệu giá HI cao dao động khoảng 7log2 đến 10log2 So sánh hàm lượng kháng thể tuần thứ tuần thứ sau dùng vacxin ta thấy có khác với (P[...]... tâm nghiên cứu và Huấn luyện chăn nuôi 1.2 Mục tiêu nghiên cứu của đề tài - Xác định được hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà Dominant Partridge D300 nuôi tại Trung tâm Nghiên cứu và Huấn luyện chăn nuôi sau khi sử dụng vacxin phòng bệnh - Làm cơ sở khoa học bổ sung cho quy trình sử dụng vacxin Newcastle phòng bệnh cho đàn gà Dominant Partridge D300 nuôi tại Trung tâm Nghiên cứu và Huấn luyện chăn. .. bệnh Newcastle của đàn gà sau khi sử dụng vacxin Newcastle Đàn gà Dominant Partridge D300 khi áp dụng lịch dùng vacxin Newcastle mà trại đang dùng cho hiệu quả như thế nào ? Từ đó góp phần hoàn thiện qui trình thú y phòng bệnh Newcastle cho đàn gà Dominant Partridge D300 Xuất phát từ thực tế trên chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài: Khảo sát hàm lượng kháng thể Newcastle của đàn gà nuôi tại Trung tâm. .. dịch dịch thể với virus Newcastle, sự hình thành kháng thể cũng tuân theo quy luật chung Khi virus Newcastle vào cơ thể, kháng thể dịch thể không sinh ra ngay lập tức mà phải có thời gian tiềm tàng từ 4 - 5 ngày, kháng thể dịch thể mới xuất hiện, lượng kháng thể tăng dần, đạt mức cao nhất khoảng 3 - 4 tuần Nếu không nhận được kích thích lại của kháng nguyên thì kháng thể trong máu giảm dần và biến mất... động cho cơ thể Theo Tims và cs (1997), đối với virus Newcastle, khi vào cơ thể gà sẽ kích thích cơ thể gà sinh ra đáp ứng miễn dịch dịch thể là chủ yếu Virus Newcastle nhược độc vào cơ thể, chỉ sau 2 - 3 ngày đáp ứng miễn dịch qua trung gian tế bào đã xuất hiện Chính nhờ có quá trình đáp ứng miễn dịch này, ta có thể giải thích được khả năng bảo hộ của gà có được trước khi kháng thể dịch thể xuất hiện... tăng tính gây bệnh của chúng Bell J.G.(1988), đã nghiên cứu sự lưu hành virus Newcastle ở 3 vùng có trại gà chăn nuôi theo kiểu công nghiệp và 3 vùng không có trại gà công nghiệp của Moroco vào mùa đông năm 1986-1987, bằng cách thu thập mẫu huyết thanh và dịch khí quản từ 100 gà ở mỗi vùng để kiểm tra Thấy lưu hành virus ở các vùng phụ thuộc vào phương thức chăn nuôi tập trung hoặc chăn thả Năm 1989,... là kháng thể thụ động, là cơ sở tạo nên miễn dịch thụ động ở gà con Hiệu giá kháng thể thụ động ở gà con có liên quan đến hiệu giá kháng thể có trong lòng đỏ trứng và trong huyết thanh của gà mẹ Hiệu giá kháng thể thụ động cao hay thấp khác nhau ở gà con 1 ngày tuổi có ý nghĩa quan Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 18 trọng đối với gà con trong tuần lễ đầu Lượng. .. tác giả cùng cộng sự, đã nghiên cứu mối tương quan giữa hiệu giá kháng thể lưu hành và khả năng bảo hộ chống lại virus cường độc Newcastle Kết quả thấy: hiệu giá kháng thể lưu hành nhỏ hơn 2log2 thì gà không có khả năng bảo hộ, do đó cần tiêm chủng lại Hiệu giá kháng thể lớn hơn 2log2 và nhỏ hơn 3 log2 thì 1 tháng sau khi kiểm tra lại kháng thể và dùng lại vacxin Hiệu giá kháng thể lớn hơn 3log2, tỷ lệ... ngày sẽ xuất hiện các dấu hiệu đầu tiên của bệnh Sau 7 - 10 ngày gà chết mổ khám thấy bệnh tích giống như của gà mắc bệnh ngoài tự nhiên - Gây nhiễm cho phôi: dùng phôi gà 9 - 11 ngày tuổi, tốt nhất lấy phôi gà của đàn gà SPF (Specific Pathogen Free) hoặc gà không có kháng thể Newcastle Mỗi mẫu tiêm 0,2 ml/phôi/5 phôi; tiêm vào xoang niệu mô Phôi chết sau 2 - 7 ngày, để lạnh ở 4oC rồi thu hoạch lấy nước... tồn tại của kháng thể dài hay ngắn, lượng kháng thể được sản xuất ra nhiều hay ít còn phụ thuộc vào chủng virus Với virut Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 19 Newcastle thuộc nhóm Mesogen kháng thể ngăn trở ngưng kết hồng cầu tồn tại một năm sau khi gà khỏi bệnh, còn nếu sử dụng vacxin nhóm lentogen phải sau nhiều lần nhắc lại Kháng thể Newcastle chỉ tồn tại. .. hình thành kháng thể của gà chịu tác động của rất nhiều yếu tố chủ quan và khách quan Các yếu tố ảnh hưởng có 3 nhóm chính: Kháng nguyên, cơ thể vật chủ và điều kiện ngoại cảnh 2.4 Vacxin và vấn đề phòng bệnh Newcastle 2.4.1 Vacxin phòng bệnh Newcastle Virus gây bệnh Newcastle được phát hiện năm 1926 (Doyle, 1927), cho đến nay bệnh Newcastle vẫn còn là mối đe dọa nguy hiểm cho ngành chăn nuôi gia cầm