BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - NGUYỄN THỊ NGUYỆT NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỐI LIÊN HỆ GIỮA VẬN CHUYỂN GIA SÚC VÀ BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ở MỘT SỐ TỈNH MIỀN TRUNG VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI, 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - NGUYỄN THỊ NGUYỆT NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỐI LIÊN HỆ GIỮA VẬN CHUYỂN GIA SÚC VÀ BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ở MỘT SỐ TỈNH MIỀN TRUNG VIỆT NAM CHUYÊN NGÀNH: THÚ Y MÃ SỐ: 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS: HUỲNH THỊ MỸ LỆ TS: NGUYỄN VĂN LONG HÀ NỘI, 2014 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu tôi, phần kết dự án “Triển khai nghiên cứu vận chuyển gia súc miền Trung Việt Nam” với ký hiệu LOA FAVIE 2013/21 GCP/RAS/283/ROK Cục Thú y Tổ chức Nông nghiệp Lương thực Liên hợp quốc (FAO) đầu tư tổ chức thực Kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác Tôi xin cam đoan, giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 29 tháng 10 năm 2014 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Nguyệt Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, cố gắng thân, nhận quan tâm giúp đỡ tổ chức, quan, nhà khoa học, thầy cô giáo, bạn bè đồng nghiệp người thân gia đình Trước tiên, xin chân thành cảm ơn Cục Thú y Tổ chức Nông nghiệp Lương thực Liên hợp quốc (FAO), cho phép tham gia triển khai sử dụng số liệu, kết dự án “Triển khai nghiên cứu vận chuyển gia súc miền Trung Việt Nam” với ký hiệu LOA FAVIE 2013/21 GCP/RAS/283/ROK Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc hướng dẫn, giúp đỡ chân tình, đầy trách nhiệm hết lòng khoa học TS Huỳnh Thị Mỹ Lệ TS Nguyễn Văn Long Nhân dịp này, xin cảm ơn giúp đỡ Ban quản lý đào tạo giảng viên khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam giảng dạy suốt thời gian học tập Trường Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới thầy, quan, nhà khoa học đồng nghiệp tỉnh triển khai dự án giúp đỡ suốt thời gian qua Tôi xin gửi lời cảm ơn tới người thân gia đình quan tâm, động viên giúp hoàn thành luận văn Hà Nội, ngày 29 tháng 10 năm 2014 Tác giả luận văn Nguyễn Thị Nguyệt Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung 1.2 Lịch sử bệnh LMLM 1.2.1 Lịch sử bệnh 1.2.2 Tình hình dịch bệnh LMLM giới 1.2.3 Tình hình dịch bệnh LMLM Việt Nam 1.3 Virus gây bệnh Lở mồm long móng 11 1.3.1 Hình thái cấu trúc virus LMLM 11 1.3.2 Phân loại phân bố virus LMLM 12 1.3.3 Đặc tính nuôi cấy virus 13 1.3.4 Sức đề kháng 13 1.4 Một số đặc điểm bệnh LMLM 14 1.4.1 Loài vật mắc bệnh 14 1.4.2 Đường xâm nhập 15 1.4.3 Chất chứa mầm bệnh 15 1.4.4 Cơ chế sinh bệnh 15 1.4.5 Đường lây lan nguồn bệnh 16 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii 1.5 Triệu chứng, bệnh tích 17 1.5.1 Triệu chứng 17 1.5.2 Bệnh tích 18 1.6 Phương pháp chẩn đoán bệnh LMLM 18 1.6.1 Phản ứng ELISA 18 1.6.2 Kỹ thuật sinh học phân tử - kỹ thuật PCR 20 1.7 Khái quát loại hình vận chuyển gia súc Việt Nam 20 1.7.1 Vận chuyển đường 20 1.7.2 Vận chuyển đường sắt 21 1.7.3 Vận chuyển đường thủy 21 1.7.4 Vận chuyển hàng hóa đường hàng không 21 Chương NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 NGHIÊN CỨU 22 Nội dung nghiên cứu 22 2.1.1 Mô tả tình hình chăn nuôi dịch bệnh LMLM tỉnh nghiên cứu 22 2.1.2 Nghiên cứu xác định mức độ lưu hành virus LMLM gia súc vận chuyển 22 2.1.3 Nghiên cứu xác định loại hình vận chuyển gia súc 22 2.1.4 Nghiên cứu xác định yếu tố liên quan đến loại hình vận chuyển gia súc lưu hành virus LMLM 22 2.2 Nguyên liệu 22 2.3 Phương pháp nghiên cứu 23 2.3.1 Mô tả tình hình chăn nuôi dịch bệnh LMLM tỉnh nghiên cứu 23 2.3.2 Nghiên cứu xác định mức độ lưu hành virus LMLM gia súc vận chuyển 2.3.3 Nghiên cứu xác định loại hình vận chuyển gia súc 24 27 2.3.4 Nghiên cứu xác định yếu tố liên quan đến loại hình vận chuyển gia súc 27 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 30 Mô tả tình hình chăn nuôi dịch bệnh LMLM tỉnh nghiên cứu 30 3.1.1 Tình hình chăn nuôi gia súc tỉnh nghiên cứu 30 3.1.2 Tình hình dịch bệnh LMLM từ năm 2010 - 2014 33 3.2 Nghiên cứu xác định mức độ lưu hành virus LMLM gia súc vận chuyển 38 3.2.1 Kết lấy mẫu 38 3.2.2 Kết xét nghiệm mẫu huyết mẫu probang 40 Nghiên cứu xác định loại hình vận chuyển gia súc 43 3.3.1 Loại hình vận chuyển gia súc theo không gian (địa phương) 43 3.3.2 Loại hình vận chuyển gia súc theo thời gian 46 3.3.3 Đối tượng mục đích vận chuyển 49 3.3 3.4 Xác định yếu tố liên quan đến loại hình vận chuyển gia súc lưu hành virus LMLM 49 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 52 Kết luận 52 Đề xuất 53 TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 PHỤ LỤC 58 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ BHK Baby Hamster Kidney CI Confidence interval ELISA Enzyme linked immuno-sorbent assay FAO Food and Agriculture Organization FMD Foot and Mouth Disease KHBT Kết hợp bổ thể LMLM Lở mồm long móng LPB-ELISA (Liquid Phase Blocking-ELISA) NN&PTNN Nông nghiệp Phát triển nông thôn OIE World Organisation for Animal Health OR Odds ratio PBS phosphate buffer saline PCR Polymerase Chain Reaction ROC Operating Characteristic SE Standard error SEAFMD RCU The Southeast Asia Foot and Mouth Disease Campaign (SEAFMD) Regional Coordination Unit in Bangkok USD United States dollar WRLFMD World Reference Laboratory for Foot and mouth disease WTO World Trade Organization Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 3.1: Tổng đàn trâu, bò, lợn 11 tỉnh nghiên cứu từ năm 2010 – 10/2014 30 3.2: So sánh nguy có dịch LMLM tỉnh nghiên cứu giai 34 3.3: Tổng hợp số lượng gia súc bị bệnh, chết bệnh LMLM buộc phải tiêu hủy 37 3.4: Tổng hợp kết lấy mẫu địa phương 39 3.5: Tổng hợp kết giám sát lưu hành virus LMLM tỉnh 41 3.6: Tổng hợp số liệu vận chuyển gia súc 43 3.7: So sánh thông số vận chuyển gia súc hai miền Bắc miền Nam 44 3.8: Tổng hợp theo đối tượng mục đích vận chuyển 49 3.9: Kết phân tích mô hình đa tầng, nhiều biến (Multilevel 50 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 3.1: So sánh tổng đàn trâu 11 tỉnh nghiên cứu 32 3.2: So sánh tổng đàn bò 11 tỉnh nghiên cứu 32 3.3: So sánh tổng đàn lợn 11 tỉnh nghiên cứu 33 3.4: Bản đồ thể mức độ dịch bệnh LMLM (tổng số gia súc bị 35 3.5: Diễn biến ổ dịch LMLM theo thời gian 11 tỉnh 36 3.6: Số lượng mẫu lấy trình giám sát 40 3.7: Diễn biến gia súc vận chuyển có mẫu huyết mẫu 42 3.8: Bản đồ thể tỉnh ghi chép số liệu vận chuyển gia súc tỉnh tiếp nhận gia súc 3.9: 45 Phân bố theo thời gian tổng số gia súc (trâu, bò, lợn) vận chuyển tỉnh nghiên cứu 3.10: Phân bố theo thời gian trâu vận chuyển tỉnh 46 47 3.11: Phân bố theo thời gian bò vận chuyển tỉnh nghiên cứu 47 3.12: Phân bố theo thời gian lợn vận chuyển tỉnh nghiên cứu 48 3.13: Đường cong ROC (receiver operating characteristic) thể khả dự đoán mô hồi quy logic đa tầng nhiều biến Chỉ số phía đường cong ROC 0.793 cho thấy mô phân biệt tốt khả gia súc vận chuyển khỏi xã Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 51 Page viii Sơ đồ: Các bước tiến hành xét nghiệm mẫu phương pháp ELISA Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69 Phụ lục 4: Quy trình xét nghiệm xác định kháng nguyên virus LMLM phương pháp RT - PCR “Nghiên cứu xác định mực độ lưu hành vi rút LMLM gia súc vận chuyển” Đối tượng mẫu biểu mô bệnh trâu, bò, lợn, … huyễn dịch tế bào a Trang thiết bị - Micropipettes kênh lấy thể tích từ 0.5-10µl;10-100µl ; 1001000µl - Micropipettes 08 kênh lấy thể tích từ 50-300µl - Multistepper 08 kênh lấy thể tích từ 50-250µl - Máy Vortex - Máy Spin CUBEE - Máy lắc đĩa TITRAMAX 101 - Máy lắc đĩa gia nhiệt HLC (Model: MHR23) - Máy chiết xuất RNA/DNA tự động kỹ thuật hạt từ tính (KingFisher Flex96) - Máy chiết xuất RNA/DNA tự động kỹ thuật hạt từ tính (KingFisher Flex ml) - Máy li tâm lạnh MIKRO 200R ống 1,5ml - Máy hấp khử trùng Autoclave - Máy đọc kết RT-PCRBioRad - Máy RT-PCR Stratagene Mx3005P - Cabinet Class II - Tủ lạnh + 4oC - Tủ lạnh –20°C - Tủ lạnh -80oC Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70 - Đĩa nhựa 96 giếng - Nắp đậy đĩa - Đĩa từ dành cho đĩa 96 giếng (Magnetic Ring Stand) - Khay INOX chiết xuất 15 mẫu - KF ml tube ( tube chứa dung dịch lỗ tube) - F ml TIP Combs (thanh nhựa để trộn mẫu với dung dịch chiết xuất) - Tips phù hợp với Micropipettes - Ống Eppendoff 0.5ml, 1.5ml - Ống nhựa ly tâm 5ml, 10ml, 50ml - Chai thủy tinh 500-1000ml - Đồng hồ đếm thời gian có chuông báo kết thúc - Bút viết b Nguyên liệu b.1 Nguyên liệu hóa học b.1.1 Dung dịch Phosphate Buffered Saline (PBS) Thành phần Số lượng NaC1 8.0 g KC1 0.2 g Na2HPO4 1.15 g KH2PO4 0.2 g Lượng hóa chất cho vào bình thủy tinh, cho nước cất lần vào để đủ lít, khuấy tan hoàn tòan, hấp Autoclave 110°C trong15 phút điều chỉnh pH 7.3 ± 0.1 b.1.2 Ethanol 90%,70% b.1.3 Dung dịch chiết tách theo kitMagMAX™-96 Viral RNA Isolation Kit Part Number AM1836-5 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 71 b.1.4 Dung dịch chiết tách theo kit InviMAG Virus RNA Kit KFFlex96 Catalogue Number: 7443300200 b.1.5 Hóa chất tạo MasterMix theo QIAGEN®OneStep RT-PCR Kit Catalogue Number: 210212 b.1.6 Hóa chất tạo MasterMix theo invitrogen SuperScript® III Platinum® One-Step Quantitative RT-PCR System Catalogue Number: 11732-020 b.2 Nguyên liệu sinh học Đoạn mồi (primers) Đoạn dò (probe) Trình tự Mồixuôi FMDV_Callahan 3DF Mồingược FMDV_Callahan 3DR Đoạndò FMDV_Callahan 3DP 5’- ACT GGG TTT TAC AAA CCT GTG A-3’ 5’-GCG AGT CCT GCC ACGGA-3’ 5’-FAMTCC TTT GCA CGC CGT GGG AC BHQ1-3’ Mồi xuôi FMDV_SA- 5’- CAC YTY AAG RTG ACA YTG RTA CTGGTA IR-219-246F C-3’ Mồi ngược FMDV_SAIR-315-293R Đoạn dò FMDV_SAmulti2-PIR-292-269R 5’- CAG ATY CCR AGT GWC ICI TGT TA-3’ 5’- FAM CCT CGGGGT ACC TGA AGGGCA TCC BHQ1-3’ Trình tự đoạn mồi đoạn dò theo tài liệu theo quy trình USDA Đối chứng dương Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 72 Mẫu dương cung cấp phòng thí nghiệm Úc cách thu thập mẫu dương tính từ trình xét nghiệm trước đánh giá, định sử dụng cán quản lý kỹ thuật sinh học phân tử tổ Siêu vi trùng Chia nhỏ vào tube 0.5 ml, dán nhãn giữ -80oC tủ lạnh số 05 (P.409) c Chuẩn bị c.1 Chuẩn bị mẫu Theo hướng dẫn chuẩn bị, xử lý bảo quản mẫu số: TYV6-HDPPBL-07.01 c.2 Chuẩn bị dung dịch – hóa chất chiết tách Theo qui trình số TYV6-HDTH.VR-01.01hoặc TYV6-HDTH.VR-01.02 c.3 Chuẩn bị Master Mix Chú ý: Quá trình chuẩn bị mục 6.3 thực phòng MasterMix (P.410) PCR Cabinet - Trước vào phòng Master Mix phải tính thể tích loại nguyên liệu cho số mẫu xét nghiệm thực theo nguyên tắc: N phản ứng = số mẫu xét nghiệm+ 02 mẫu đối chứng+ 01 mẫu hao hụt Kết tính phải ghi vào cột “Thể tích cho N phản ứng (µl) phiếu TYV6-BM.VR-10.02A, mang phiếu TYV6-BM.VR-10.02A vào phòng Master Mix ( P.410) để thực - Dùng cồn 70 độ để vệ sinh micropipette, mặt làm việc PCR Cabinet - Kiểm tra bổ sung ( cần thiết) số lượng loại tip micropipette - Chuẩn bị “cool box” để chứa tube nguyên liệu, tube master mix, tube PCR đĩa PCR 96 giếng - Chuẩn bị túi chứa tip micropipette sau dùng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 73 - Lấy nguyên liệu từ ngăn âm20oC tủ lạnh để vào ngăn +4oC để rã đông Vẫn giữ Enzyme Mix ngăn âm 20oC - Trộn nguyên liệu Votex ly tâm Quick spin để kéo nguyên liệu xuống đáy tube - Các nguyên liệu rã đông +4oC phải giử lạnh “cool box” mang vào PCR Cabinet để chuẩn bị Master Mix Nước RNA DNA không cần phải giử lạnh - Căn vào “Tổng thể tích Master Mix cho N phản ứng” để chọn tube chứa Master Mix cho phù hợp - Lấy loại nguyên liệu theo thứ tự (cột Stt) phiếu TYV6BM.VR-10.02A cho vào tube chứa Master Mix, Enzyme Mix không đông đá âm 20oC nên giữ ngăn âm 20oC đến sử dụng.Thể tích loại nguyên liệu theo cột “Thể tích cho N phản ứng (µl)” Chuẩn bị Master Mix kit Invitrogen Stt Nguyên liệu Dung dịch mẹ Nước RNA DNA Dung dịch đệm 2X Taq Mix Mồi xuôi FMDV_Callahan 3DF 20 µM Mồi ngược FMDV_Callahan 3DR 20 µM µM Đoạn dò FMDV_Callahan 3DP 20 µM MồixuôiFMDV_SA-IR-219-246F Mồi ngược FMDV_SA-IR-31520 µM 293R Đoạn dò FMDV_SAmulti2-P-IR6 µM 292-269R Tổng thể tích Master mix cho phản ứng 10 Mẫu RNA Tổng thể tích cho phản ứng Thể tích cho Thể tích cho phản ứng N phản ứng (µl) (µl) 5.5 12.5 0.5 0.5 0.5 0.5 1 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 0.5 20 25 Page 74 - Để tube nguyên liệu (dung dịch mẹ) trở lại ngăn âm (-) 20oC tủ lạnh, vị trí quy định - Trộn Master Mix votex ly tâm Quick spin để kéo toàn Master Mix xuống đáy tube trước chia vào tube PCR-dạng trip (20µl/tube) đĩa PCR 96 giếng ( 20µl /giếng) - Tube PCR-dạng trip / đĩa PCR 96 giếng chứa Master Mix phải giử lạnh “cool box” chuyển sang Phòng Chiết tách RNA/DNA (P.408), để vào ngăn +4oC tủ lạnh, sẵn sàng để xét nghiệm d Các bước thực d.1 Chiết tách DNA/RNA Theo qui trình số TYV6-HDTH.VR-01.01 TYV6-HDTH.VR01.02 d.2 Thực phản ứng, vận hành máy RT-PCR d.2.1 Dùng Micropipette thể tích 0.5-10ul rút 5µl mẫu chiết tách mục 7.1 cho vào đĩa PCR 96 giếng tube PCR-dạng trip chứa sẵn 20µl dung dịch Master Mix chuẩn bị mục 6.3 d.2.2 Với đĩa PCR 96 giếng: dùng giấy dán đĩa chuyên dụng dán thật kín bề mặt đĩa Sau ly tâm lạnh 2000 vòng/1 phút (Máy ly tâm lạnh Hettich, P.403) để kéo toàn dung dịch phản ứng xuống đáy giếng d.2.3 Với tube PCR-dạng trip: Đóng chặt nắp, sau ly tâm Quick spin để kéo toàn dung dịch phản ứng xuống đáy tube d.2.4 Đặt đĩa PCR 96 giếng tube PCR-dạng trip vào máy Realtime PCR theo sơ đồ phiếu TYV6-BM.VR-PCR.01 Cài đặt chương trình phù hợp với sơ đồ mẫu, chương trình nhiệt chuẩn bị phiếu quản lý xét nghiệm PCR Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 75 d.2.5 Chương trình nhiệt độ thời gian cài đặt sau: Chương trình nhiệt độ thời gian cho máy RealTime-PCR 50 oC 15 phút chu kỳ 95 oC 02 phút chu kỳ 94 oC 20 giây 60 oC 60 giây 40 chu kỳ Ghi nhận tín hiệu bước 60 oC e Kết * Đọc kết - Kiểm tra hệ thống mẫu đối chứng dương đối chứng âm - Nếu hệ thống mẫu đối chứng dương đối chứng âm điều chỉnh baseline theo 5% tín hiệu huỳnh quang theo lần máy hiển thị đọc kết xét nghiệm theo baseline - Nếu hệ thống mẫu đối chứng dương đối chứng âm không phải thực lại phép thử theo mục 6.3 mục 7.2 * Giải thích kết Mẫu dương tính giá trị Ct [...]... xác định mối liên hệ giữa vận chuyển gia súc và bệnh LMLM ở một số tỉnh miền Trung Việt Nam 2 Mục tiêu của đề tài Xác định các yếu tố có liên quan đến các loại hình vận chuyển gia súc và lưu hành virus LMLM, từ đó đề xuất biện pháp phòng bệnh có hiệu quả Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 2 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung Bệnh Lở mồm long móng. .. nghiên cứu - Mô tả sơ lược về tình hình chăn nuôi trâu, bò và lợn tại các tỉnh nghiên cứu - Mô tả tình hình dịch bệnh LMLM tại các tỉnh nghiên cứu từ năm 2010 đến tháng 10/2014 2.1.2 Nghiên cứu xác định mức độ lưu hành virus LMLM trên gia súc được vận chuyển - Mô tả mức độ lưu hành virus LMLM ở trâu, bò, lợn được vận chuyển tại các tỉnh nghiên cứu 2.1.3 Nghiên cứu xác định các loại hình vận chuyển gia súc. .. 1.7.2 Vận chuyển đường sắt Thời gian vận chuyển gia súc được quy định sẵn theo thời gian tàu chạy, không thay đổi được thời gian Vận chuyển được khối lượng lớn, với vận tốc nhanh ổn định giá thành lại thấp Vận chuyển bằng đường sắt chỉ vận chuyển trên một tuyến đường cố định, không thể đưa gia súc về tới đích cuối cùng Cần phải chuyển phương tiện vận chuyển nữa 1.7.3 Vận chuyển đường thủy Có thể vận chuyển. .. dịch bệnh LMLM từ năm 2006 – 2013 (Nguyễn Thu Thủy và cộng sự, 2013) - Các tỉnh này nằm dọc trên tuyến đường Quốc lộ 1 do đó có tần suất vận chuyển gia súc lớn, nhất là vận chuyển gia súc từ biên giới vào Việt Nam (Cocks và cộng sự, 2009) - Các trạm kiểm dịch đầu mối giao thông giữa tỉnh này và tỉnh khác được lựa chọn để dừng xe vận chuyển gia súc và lấy mẫu máu, mẫu probang 2.3.2.2 Lựa chọn gia súc vận. .. tố vận chuyển gia súc có thể đóng vai trò quan trọng trong việc phát tán lây lan dịch bệnh LMLM, nhất là tại một số tỉnh miền Trung, nơi có lượng gia súc được vận chuyển trong nước và từ nước ngoài vào Việt Nam rất lớn Vì vậy, để có cơ sở phân tích, đưa ra những nhận định chính xác nhằm có các biện pháp phòng chống bệnh LMLM phù hợp và hiệu quả hơn chúng tôi tiến hành nghiên cứu đề tài Nghiên cứu xác. .. hình vận chuyển gia súc trâu, bò, lợn tại các tỉnh nghiên cứu 2.1.4 Nghiên cứu xác định các yếu tố liên quan đến các loại hình vận chuyển gia súc và lưu hành virus LMLM 2.2 Nguyên liệu - Số liệu về tổng đàn trâu, bò, lợn và dịch bệnh LMLM do các Chi cục Thú y thu thập và báo cáo về Cục Thú y từ năm 2010 – 2014 - Số liệu địa lý chi tiết đến cấp xã năm 2011 (Nhà xuất bản Tài nguyên Môi trường và Bản đồ Việt. .. bò và 42.134 con lợn; 1.624 con dê Tổng số gia súc bị chết và tiêu hủy là 39.228 con trong đó 6.217 con trâu, 805 con bò, 31.993 con lợn và 213 con dê phải tiêu hủy Năm 2012: dịch lở mồm long móng đã xuất hiện ở 59 xã, phường, thuộc 29 huyện của 12 tỉnh: Đắc Lắc, Đắc Nông, Hà Giang, Hà Nam, Hải Dương, Nam Định, Nghệ An, Quảng Nam, Quảng Ngãi, Quảng Ninh, Thái Bình và Thanh Hoá Tổng số gia súc mắc bệnh. .. hiện các ổ dịch mới (Tô Long Thành và cộng sự, 2006) 1.2.3 Tình hình dịch bệnh LMLM ở Việt Nam Ở Việt Nam, ổ dịch LMLM đầu tiên được phát hiện ở Nha Trang năm 1898, sau đó bệnh lan rộng ra cả 3 miền Bắc, Trung, Nam (Nguyễn Vĩnh Phước, 1978) Trong 2 năm 1921 - 1922 có 690 ổ dịch nổ ra ở các tỉnh phía Bắc làm 13.018 trâu, bò và lợn mắc bệnh, trong đó 446 con chết Ở Trung Bộ và Bắc Trung Bộ, dịch đã gây... mắc bệnh Năm 2002 bệnh LMLM xảy ra ở 26 tỉnh, thành phố với 10.287 trâu, bò mắc bệnh Năm 2003 bệnh LMLM xảy ra ở 38 tỉnh, thành phố; trong đó 28 tỉnh có dịch LMLM trâu, bò, 28 tỉnh có dịch ở lợn (có 18 tỉnh dịch xảy ra ở cả trâu bò và lợn), với tổng số 20.303 trâu, bò, 1.178 dê và 3.533 lợn mắc bệnh Các tỉnh có số trâu, bò mắc bệnh nhiều như: Quảng Trị, Phú Yên, Đắc Lắc, Khánh Hoà, Gia Lai, Hà Giang... tả theo không gian, thời gian và theo đối tượng mắc bệnh được sử dụng để mô tả dịch bệnh LMLM tại các tỉnh nghiên cứu - So sánh mức độ dịch bệnh dựa trên phân tích thống kê Chi-square test Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 23 2.3.2 Nghiên cứu xác định mức độ lưu hành virus LMLM trên gia súc được vận chuyển Các nguyên tắc và phương pháp nghiên cứu cắt ngang (Cross-sectional ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - NGUYỄN THỊ NGUYỆT NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH MỐI LIÊN HỆ GIỮA VẬN CHUYỂN GIA SÚC VÀ BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ở MỘT SỐ TỈNH MIỀN... đưa nhận định xác nhằm có biện pháp phòng chống bệnh LMLM phù hợp hiệu tiến hành nghiên cứu đề tài Nghiên cứu xác định mối liên hệ vận chuyển gia súc bệnh LMLM số tỉnh miền Trung Việt Nam Mục... 2.1.2 Nghiên cứu xác định mức độ lưu hành virus LMLM gia súc vận chuyển - Mô tả mức độ lưu hành virus LMLM trâu, bò, lợn vận chuyển tỉnh nghiên cứu 2.1.3 Nghiên cứu xác định loại hình vận chuyển gia