BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM ðOÀN THỊ THẢO NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ðẶC ðIỂM BỆNH LÝ CỦA GÀ MẮC CẦU TRÙNG THỰC NGHIỆM BẰNG LOÀI EIMERIA TENELLA CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y Mà SỐ : 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN HỮU NAM HÀ NỘI, NĂM 2014 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa ñược sử dụng ñể bảo vệ học vị Tôi xin cam ñoan rằng, giúp ñỡ cho việc thực luận văn ñã ñược cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn ñều ñã ñược rõ nguồn gốc Tác giả ðoàn Thị Thảo Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CẢM ƠN Trong trình nghiên cứu tiến hành thực ñề tài, ñã nhận ñược quan tâm, giúp ñỡ hướng dẫn tận tình thầy giáo, cô giáo nhà trường, ñặc biệt thầy cô Bộ môn Bệnh lý – Khoa Thú y Lời ñầu tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS TS Nguyễn Hữu Nam người ñã trực tiếp tận tình bảo, hướng dẫn, tạo ñiều kiện giúp ñỡ trình thực ñề tài Nhân dịp này, xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo, cô giáo Ban ðào tạo, thầy giáo, cô giáo Bộ môn Bệnh lý Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam, Công ty Chẩn ñoán Medlatec Cùng toàn thể cán công nhân viên khoa Chăn nuôi – Thú y trường ðại học Nông Lâm Bắc Giang Xin chân thành cảm ơn cán nhân dân số sở chăn nuôi gà ñịa bàn tỉnh Bắc Giang ñã tạo ñiều kiện cho trình nghiên cứu học tập, thực ñề tài ðồng thời qua ñây cho gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia ñình, người thân bạn bè, ñồng nghiệp ñộng viên, tạo ñiều kiện ñể hoàn thành tốt luận văn Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2014 Học viên ðoàn Thị Thảo Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục i Danh mục từ viết tắt iii Danh mục bảng iii Danh mục hình v Danh mục biểu ñồ vi MỞ ðẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nghiên cứu trong, nước cầu trùng gà 1.1.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.1.2 Tình hình nghiên cứu nước 1.2 Một số ñặc ñiểm cầu trùng 1.2.1 Cấu trúc oocyst cầu trùng 1.2.2 Vòng ñời phát triển cầu trùng 1.2.3 Tính chuyên biệt cầu trùng 12 1.3 Bệnh cầu trùng gà (Avian Coccidiosis) 13 1.3.1 Các loài cầu trùng gây bệnh gà 13 1.3.2 ðặc ñiểm dịch tễ học 16 1.3.3 Sinh bệnh học 18 1.3.4 Triệu chứng lâm sàng bệnh tích gà bị bệnh cầu trùng 18 1.3.5 Các phương pháp chẩn ñoán bệnh cầu trùng gà 20 1.4 Miễn dịch bệnh cầu trùng gà 21 1.5 Máu vai trò máu 23 1.5.1 Khái niệm 23 1.5.2 Chức sinh lý máu 24 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i 1.5.3 Thành phần hoá học máu 24 Chương ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 ðịa ñiểm nghiên cứu 28 2.2 ðối tượng nghiên cứu 28 2.3 Nội dung nghiên cứu 28 2.4 Vật liệu phương pháp nghiên cứu 29 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 36 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 3.1 Tình hình nhiễm cầu trùng ñàn gà nuôi tỉnh Bắc Giang 37 3.1.1 Tỷ lệ nhiễm bệnh theo tuổi 37 3.1.2 Tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo phương thức chăn nuôi 39 3.1.3 Tỷ lệ nhiễm cầu trùng gà theo mùa 40 3.2 Kết nghiên cứu số tiêu huyết học gà mắc cầu trùng thực nghiệm 41 3.2.1 Một số tiêu hệ hồng cầu gà mắc cầu trùng thực nghiệm 41 3.2.2 Một số tiêu hệ bạch cầu gà mắc cầu trùng thực nghiệm 44 3.2.3 Hàm lượng protein huyết tiểu phần protein gà mắc cầu trùng thực nghiệm 3.3 46 Kết xác ñịnh triệu chứng lâm sàng gà mắc cầu trùng thực nghiệm 3.4 48 Kết xác ñịnh bệnh tích gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm 52 3.4.1 Bệnh tích ñại thể 52 3.4.2 Bệnh tích vi thể 54 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 59 Kết luận 59 ðề nghị 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Danh mục Giải nghĩa Cs Cộng E tenella Eimeria tenella E coli Escherichia Coli g Gram Hb Hemoglobin HC Hồng cầu HE Heamatoxylin – Eosin LHSTtb Lượng huyết sắc tố trung bình NðHSTtb Nồng ñộ huyết sắc tố trung bình Vtb Thể tích trung bình Stb Diện tích trung bình Nxb Nhà xuất SMKT Số mẫu kiểm tra SMN Số mẫu nhiễm TLN Tỷ lệ nhiễm STT Số thứ tự TN Thí nghiệm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 3.1 Tỷ lệ nhiễm cầu trùng số ñàn gà tỉnh Bắc Giang 37 3.2 Kết nghiên cứu số tiêu hệ hồng cầu gà mắc cầu trùng thực nghiệm 3.3 41 Kết nghiên cứu tiêu hệ bạch cầu gà mắc cầu 44 trùng thực nghiệm 3.4 Kết nghiên cứu hàm lượng protein huyết tiểu phần protein gà mắc cầu trùng thực nghiệm 3.5 46 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng gà mắc cầu trùng thực nghiệm 3.6 48 Kết xét nghiệm mẫu phân gà số gà chết sau gây nhiễm thực nghiệm (n = 20 con) 3.7 51 Bệnh tích ñại thể gà bị mắc cầu trùng thực nghiệm tuần tuổi khác 52 3.8 Bệnh tích vi thể ruột gà mắc cầu trùng thực nghiệm 55 3.9 Tần suất xuất giai ñoạn phát triển cầu trùng gà tiêu vi thể quan gà bệnh Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 57 Page iv DANH MỤC HÌNH STT Tên biểu ñồ Trang 1.1 Cấu tạo oocyst giống Eimeria gây bệnh 1.2 Vòng ñời phát triển cầu trùng giống Eimeria 3.1 Gà gây nhiễm cầu trùng, ủ rũ, lông xù, xơ xác, phân bết hậu môn 50 3.2 Bệnh tích gà gây nhiễm cầu trùng, xuất huyết manh tràng 54 3.3 Một số hình ảnh bệnh tích vi thể ruột gà mắc cầu trùng thực nghiệm ñược gây loài E tenella Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 58 Page v DANH MỤC BIỂU ðỒ STT 3.1 Tên biểu ñồ Trang Sự biến ñộng tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo tuổi gà tỉnh Bắc Giang 3.2 38 Sự biến ñộng tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo phương thức chăn nuôi gà tỉnh Bắc Giang 3.3 39 Sự biến ñộng tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo mùa gà tỉnh Bắc Giang 3.4a 40 Sự biến ñổi tiêu hệ hồng cầu gà mắc cầu trùng thực nghiệm ñược gây loài E tenella 3.4b 42 Sự biến ñổi tiêu hệ hồng cầu gà mắc cầu trùng thực nghiệm ñược gây loài E tenella 3.5 43 Sự thay ñổi công thức bạch cầu gà mắc cầu trùng thực nghiệm so với gà khỏe 3.6 45 Sự thay ñổi hàm lượng protein huyết tiểu phần protein gà mắc cầu trùng thực nghiệm so với gà khỏe 47 3.7 Triệu chứng lâm sàng gà mắc cầu trùng thực nghiệm 50 3.8 Bệnh tích ñại thể gà mắc cầu trùng thực nghiệm 53 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi MỞ ðẦU Tính cấp thiết ñề tài Với xu phát triển kinh tế xã hội ñất nước theo hướng giao lưu, hội nhập khu vực quốc tế, với sách hợp lý khuyến khích nông nghiệp phát triển như: Giao ñất, giao rừng, khuyến khích nông dân làm kinh tế VAC, VACR mà nông nghiệp nước ta ñã ñang ñạt ñược nhiều thành tựu to lớn, góp phần không nhỏ vào công xây dựng, phát triển ñất nước Ngành chăn nuôi nói chung, chăn nuôi gà nói riêng chiếm vị trí quan trọng kinh tế quốc dân Chăn nuôi gà nguồn cung cấp thực phẩm cho người nguồn cung cấp nguyên liệu cho ngành chế biến Bắc Giang tỉnh trung du phía ñông bắc, có nghề chăn nuôi gà phát triển, chăn nuôi “gà ñồi” năm gần ñây Chăn nuôi gà nghề góp phần quan trọng việc xóa ñói giảm nghèo cho nhân dân tỉnh, nhiều hộ gia ñình ñã vươn lên làm giàu nghề Song, dịch bệnh vấn ñề cấp bách nan giải cho sở chăn nuôi nhiều năm qua Ngoài bệnh truyền nhiễm thường gặp Newcastle, Cúm gia cầm, Tụ huyết trùng, Bạch lỵ, Thương hàn phải kể ñến bệnh ký sinh trùng ñường ruột gây nên, ñó có bệnh cầu trùng Bệnh cầu trùng gà bệnh phổ biến ñược xem bệnh gây tác hại lớn chăn nuôi (Jensen et al., 2000) phổ biến ñàn gà nuôi công nghiệp, bán công nghiệp kể gà thả vườn Bệnh làm rối loạn tiêu hóa, tế bào thượng bì ruột bị tổn thương, không hấp thu ñược dinh dưỡng, ảnh hưởng ñến trình trao ñổi chất, giảm hiệu việc chuyển hóa thức ăn giảm tăng trọng (Conway et al., 1993; Shirley et al., 2005), dẫn tới gà còi cọc, chậm lớn, suy yếu tiêu tốn thức ăn (Donal and Elizabeth, 2007; Intervet, 2009) Ngoài gây chết, thiệt hại kinh tế, ñặc biệt tiền ñề cho bệnh khác bùng phát, xảy triền miên ảnh hưởng lớn ñến hiệu kinh tế chăn nuôi (Morris and Gasser, 2006) Hàng năm, phí tổn cho thuốc phòng bệnh lên ñến 90 triệu USD Mỹ, Ý 20 triệu Lia, Hungary 15 triệu Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ăn, lông xù xơ xác, lông hậu môn dính bết phân phát chuồng nuôi có phân lẫn nước, lẫn bọt khí, phân sáp, dùng loại thuốc phòng trị cầu trùng có thị trường cho ñàn gà, ñồng thời kết hợp làm tốt công tác vệ sinh chuồng trại, thức ăn, nước uống cho gà Song song với việc sử dụng kháng sinh, loại thuốc bổ bà chăn nuôi nên kết hợp với chăm sóc tốt ñể nâng cao sức ñề kháng cho gà tránh bùng phát bệnh khác Giảm tối ña thiệt hại cầu trùng bệnh khác gây nên Ngoài việc xác ñịnh triệu chứng lâm sàng chủ yếu gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm, tiến hành xác ñịnh thời ñiểm số gà nhiễm cầu trùng thông qua việc xét nghiệm phân lô gà thí nghiệm theo dõi số gà chết sau gây nhiễm Kết ñược trình bày bảng 3.6 Bảng 3.6 Kết xét nghiệm mẫu phân gà số gà chết sau gây nhiễm thực nghiệm (n = 20 con) Ngày xét nghiệm mẫu Số nhiễm phân (con) Tỷ lệ (%) Số chết (con) Tỷ lệ (%) 0,00 0,00 0,00 0,00 25,00 0,00 17 85,00 0,00 20 100,00 0,00 20 100,00 15,00 Bảng cho thấy, sau gây nhiễm cầu trùng, noãn nang bắt ñầu ñược thải phân ngày thứ cao ngày thứ trở ñi Do noãn nang thường ñược thu bắt ñầu ñược từ ngày thứ ñến thứ (Conway and McKenzie, 2007), theo tác giả ngày thứ số noãn nang ñào thải/g phân bắt ñầu giảm Mặt khác, ngày thứ gà bắt ñầu chết, ñiều sau nhiễm gà có biểu giảm ăn, có bỏ ăn dẫn ñến kiệt sức Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 51 3.4 Kết xác ñịnh bệnh tích gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm 3.4.1 Bệnh tích ñại thể Bằng phương pháp mổ khám bệnh cầu trùng không toàn diện Skrjabin 20 gà chết gây bệnh cầu trùng thực nghiệm ñã ñược mổ khám, kiểm tra bệnh tích ñường ruột ñánh giá ñược tổn thương ñại thể bệnh Kết ñược trình bày bảng 3.7 Bảng 3.7 Bệnh tích ñại thể gà bị mắc cầu trùng thực nghiệm tuần tuổi khác Bệnh tích ñường tiêu hóa ðối tượng Số gà mổ Manh tràng khám Ruột non Trực tràng n Tỷ lệ (%) n Tỷ lệ (%) n Tỷ lệ (%) Gà bệnh 20 20 100,00 15,00 10,00 ðối chứng 20 5,00 0,00 0,00 (n: Số dương tính) Qua bảng tổng hợp thấy: Bệnh tích manh tràng: ðây nơi tập trung bệnh tích chủ yếu nhất, với tổn thương bệnh lý nặng Trong nghiên cứu này, 100 % gà có biểu bệnh tích manh tràng Manh tràng thường sưng to, căng mọng, nhìn từ bên có màu ñỏ sẫm Dùng kéo rạch phần manh tràng bên xuất cục máu ñông, gạt hết lớp máu ñông ñi thấy niêm mạc manh tràng xuất huyết ñám, lớp niêm mạc bị hủy hoại, vách manh tràng bị mỏng ñi nhiều so với manh tràng gà không mắc bệnh ðiều góp phần làm sáng tỏ vị trí ký sinh chủ yếu loài cầu trùng E tenella Bệnh tích xuất huyết toàn manh tràng xuất giai ñoạn sinh sản vô tính thứ 2, phân có lẫn máu ngày sau gà nhiễm bệnh, gà ăn ít, mệt mỏi, yếu uống nước nhiều Manh tràng xuất huyết nặng – ngày sau nhiễm Nếu gà bị thiếu Vitamin K khả xuất huyết kéo dài gây chết gà Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 52 Quá trình sinh sản vô tính hữu tính tế bào biểu mô manh tràng ban ñầu gây tượng sung huyết, sau ñó hoại tử xuất huyết niêm mạc Sự phá vỡ hàng loạt tế bào niêm mạc manh tràng gây xuất huyết lan tràn, tế bào biểu mô bong tróc Ở giai ñoạn phát triển tiếp theo, cầu trùng xâm nhập sâu vào vách ruột gây hoại tử, xuất huyết lớp tế bào hạ niêm mạc tuyến manh tràng Ngày thứ bắt ñầu thấy xuất oocyst phân (Loay, 1991; Williams, 1991) Oocyst thường có nhiều phân ngày – sau ñó giảm nhanh Bệnh tích ruột non: Ngoài tổn thương bệnh lý chủ yếu manh tràng có tổn thương lan vị trí ñoạn ruột gần manh tràng ruột non Tập trung chủ yếu 2/3 phía sau ruột non (hồi tràng) tiếp giáp với manh tràng, bệnh tích nhẹ manh tràng, nhìn từ bên có ñám xuất huyết lấm tấm, ruột non căng phồng chứa nhiều thức ăn không tiêu Lấy kéo cắt dọc ruột non, gạt bỏ lớp chất chứa ñi thấy niêm mạc ruột non có nhiều ñiểm có màu trắng quần thể bào tử phân chia (Schizont) màu ñỏ xuất huyết Thành ruột dày mỏng gồ ghề làm cho ruột chỗ to, chỗ nhỏ không ñều Bệnh tích trực tràng: Thành trực tràng phát triển tăng sinh, dầy lên, chỗ dầy mỏng gồ ghề, niêm mạc trực tràng có ñiểm xuất huyết Sự khác bệnh tích ñại thể ñường ruột ñược biểu diễn qua biểu ñồ 3.8 Gà bệnh ðối chứng 100.00 100.00 90.00 80.00 Tỷ lệ (%) 70.00 60.00 50.00 40.00 30.00 15.00 10.00 20.00 5.00 10.00 0.00 0.00 0.00 Manh tràng Ruột non Trực tràng Biểu ñồ 3.8 Bệnh tích ñại thể gà mắc cầu trùng thực nghiệm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 53 Bệnh tích ñại thể gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm ñược minh họa rõ qua hình ñây: Hình 3.2 Bệnh tích gà gây nhiễm cầu trùng, xuất huyết manh tràng 3.4.2 Bệnh tích vi thể Nghiên cứu bệnh tích vi thể nội dung quan trọng giúp cho việc ñánh giá tổn thương bệnh lý cấp ñộ mô bào Tuy nhiên bệnh cầu trùng gà bệnh lý tập trung ñường tiêu hóa ñề tài tập trung làm rõ biến ñổi vi thể ñường tiêu hóa mà chủ yếu ruột Sau kiểm tra bệnh tích ñại thể từ gà mổ khám, tiến hành lấy ñoạn ruột: ruột non, manh tràng, trực tràng gà bệnh ñể làm tiêu bản, kiểm tra bệnh tích vi thể Mỗi gà bệnh tiến hành lấy mẫu quan miếng bệnh phẩm, miếng bệnh phẩm ñúc thành block Mỗi block tiến hành cắt, nhuộm tiêu chọn tiêu ñẹp sau ñó tiến hành soi kính hiển vi ñể ñọc kết bệnh tích vi thể ðể ñánh giá bệnh tích vi thể: Nếu block có tiêu có bệnh tích trở lên coi dương tính (+) ðể ñánh giá có mặt cầu trùng tiêu vi thể: cần block có tiêu có xuất giai ñoạn phát triển cầu trùng bên thể ñược coi dương tính Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 54 Bảng 3.8 Bệnh tích vi thể ruột gà mắc cầu trùng thực nghiệm Manh tràng Số Bệnh tích Ruột non Trực tràng block/cơ Block Tỷ lệ Block Tỷ lệ Block Tỷ lệ quan (+) (%) (+) (%) (+) (%) Sung huyết 18 18 100 44,44 11 61,11 Xuất huyết 18 18 100 27,78 22,22 18 18 100 12 66,67 50,00 Thoái hóa tế bào 18 18 100 10 55,56 50,00 Hoại tử tế bào 18 18 100 33,33 38,89 Thâm nhiễm tế bào viêm Quan sát qua kính hiển vi tiêu vi thể bệnh lý gà bị bệnh cầu trùng, thấy bệnh tích vi thể quan sau: - Manh tràng: Qua tiêu vi thể mà quan sát cho thấy tổn thương manh tràng ñiển hình gà ñược gây bệnh chủng E tenella (Chủng ñược cầu trùng manh tràng) Lớp niêm mạc manh tràng bị viêm, xuất huyết, mạch quản giãn rộng lòng chứa nhiều tế bào hồng cầu, bạch cầu cục máu ñông Các lông nhung bị ñứt nát, xuất huyết, tế bào hình ñài bị phá hủy, lông nhung dính lại với ñám Xen kẽ vào ñó có xuất huyết lan tràn Có nhiều trường hợp manh tràng giãn rộng, ñường kính tăng gấp ñến lần so với bình thường Lớp niêm mạc bị phá hủy, bào mòn làm cho thành ruột mỏng lại lớp hạ niêm mạc gắn với lớp áo Trong tiêu vi thể mà quan sát, cho thấy giai ñoạn phát triển khác cầu trùng tế bào biểu mô manh tràng bao gồm Schizont, Merozoite Macrogamete Do bị xuất huyết nhiều, gà bị thiếu máu biểu dễ nhận thấy mào yếm nhợt nhạt, gà bị cân muối khoáng thể nên hay uống nước Sự kết hợp dính lại với tế bào lông nhung tế bào biểu mô hình ñài gây nên rối loạn chức hấp thu vận ñộng nhu ñộng ruột làm cho gà ăn Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 55 ñi, máu nhiều, suy dinh dưỡng, gà kiệt sức chết - Ruột non: Ruột non sung huyết, lòng ruột có hồng cầu, xác bạch cầu, tế bào thượng bì chất chứa lòng ruột non Nhiều lông nhung bị ñứt nát, xuất huyết Các tế bào lông nhung bị biến ñổi, dính lại với thành ñám làm ruột non bị thu hẹp diện tích hấp thu thức ăn - Trực tràng: Chúng quan sát tiêu vi thể cho thấy tổn thương trực tràng sau: Trong lòng ruột có chất nhầy lẫn máu tế bào niêm mạc bị thoái hóa, hoại tử Lớp niêm mạc bị phá hủy, nhiều tế bào biểu mô bị phá vỡ, nhiều lông nhung bị ñứt nát Lớp hạ niêm mạc bị xuất huyết thành ñám, tập trung nhiều tế bào hồng cầu, bạch cầu có thâm nhiễm tế bào bạch cầu ña nhân trung tính (Heterophile) Nhìn chung bệnh tích vi thể ñoạn ruột khác giống nhau, ñều kết chế tác ñộng chung cầu trùng: xâm nhập phá hủy hàng loạt tế bào biểu mô ruột Tuy nhiên có khác mức ñộ nghiêm trọng: biến ñổi bệnh tích manh tràng rõ nhiều nhất, trực tràng số tiêu có bệnh tích chiếm tỷ lệ biến ñổi bệnh tích thường nặng, bệnh tích ruột non thường nhẹ Chúng tìm thấy giai ñoạn phát triển khác cầu trùng tiêu vi thể quan gà bệnh: manh tràng, ruột non, trực tràng Xác suất tìm thấy manh tràng cao (0,94%), tiếp ñó ruột non (0,11%) thấp trực tràng (0,06%) (Bảng 3.9) Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 56 Bảng 3.9 Tần suất xuất giai ñoạn phát triển cầu trùng gà tiêu vi thể quan gà bệnh Cơ quan Số block Số block Tần suất nghiên cứu nghiên cứu dương tính xuất Manh tràng 18 17 0,94 Ruột non 18 0,11 Trực tràng 18 0,06 Như vậy, qua tiêu bệnh tích vi thể cho ta thấy rõ tổn thương bệnh lý mà cầu trùng gây nên hiểu rõ chế sinh bệnh cầu trùng ñể từ ñó làm sở cho công tác chẩn ñoán ñiều trị bệnh cầu trùng gà Bệnh tích vi thể ruột gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm ñược minh họa rõ qua hình ñây: Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 57 Hình 3.3 Một số hình ảnh bệnh tích vi thể ruột gà mắc cầu trùng thực nghiệm ñược gây loài E tenella a – Giai ñoạn tiền schizont cầu trùng ruột gà; b – Megatozit schizont II ruột gà; c – Noãn nang lòng manh tràng, HE ×100; d – Noãn nang lòng manh tràng, HE ×400; e – Noãn nang ñã hình thành ruột gà, chuẩn bị xuất theo phân ngoài; g – Noãn nang vùng hạ niêm mạc manh tràng, HE ×100; h – Tế bào biểu mô bị phá hủy cầu trùng, HE ×100; i – Thâm nhiễm bạch cầu toan hạ niêm mạc ruột gà gây nhiễm cầu trùng, HE ×100; k – Xuất huyết lan tràn manh tràng; l – Cục máu ñông lòng ruột gà gây nhiễm cầu trùng, HE ×100 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 58 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ Kết luận Qua theo dõi, lấy mẫu xét nghiệm ñàn gà nuôi tỉnh Bắc Giang nghiên cứu biến ñổi bệnh lý gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm, rút số kết luận sau: Tình hình mắc bệnh cầu trùng gà nuôi tỉnh Bắc Giang - Gà nuôi từ sở chăn nuôi ñịa bàn tỉnh Bắc Giang có tỷ lệ nhiễm bệnh cầu trùng cao (33,75%) - Nhiễm cao tuần thứ - (39,24 - 48,89%) - Hình thức chăn nuôi bán công nghiệp có tỷ lệ nhiễm cao (37,01%) - Mùa Hè có tỷ lệ nhiễm cầu trùng gà cao (41,83%) Biến ñộng số tiêu huyết học gà mắc bệnh cầu thực nghiệm: - Số lượng hồng cầu giảm 1,83 triệu/µl so với gà khỏe 2,52 triệu/µl, hàm lượng hemoglobin giảm 70,50 g/l gà khỏe 96,00 g/l tỷ khối huyết cầu giảm rõ rệt (22,87 %) so với gà khỏe (30,75 %) Ngược lại thể tích bình quân hồng cầu tăng lên 125,39 fl gà khỏe 123,30 fl Tuy nhiên nồng ñộ huyết sắc tố trung bình hồng cầu lượng huyết sắc tố trung bình hồng cầu thay ñổi không ñáng kể - Số lượng bạch cầu tăng tới 32,26 nghìn/µl gà khỏe mạnh 28,63 nghìn/µl Công thức bạch cầu thay ñổi, ñó tỷ lệ bạch cầu ña nhân trung tính tăng 52,83 % so với gà khỏe 35,24 %, bạch cầu toan tăng nhẹ 3,24 % gà khỏe 1,12 %, tế bào lympho giảm 41,02 % so với gà khỏe 60,89 % Trong bạch cầu kiềm bạch ñơn nhân lớn thay ñổi không ñáng kể - Hàm lượng protein tổng số giảm nửa so với gà khỏe, gà bệnh 17,29 g/l gà khỏe 34,75 g/l Lượng albumin giảm mạnh 6,14 % so với gà khỏe 17,64 %, lượng α1-globulin, β-globulin, γ-globulin ñều giảm, tỷ lệ A/G giảm 0,55 so với gà khỏe 1,03 Tuy nhiên hàm lượng α2- Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 59 globulin khác biệt gà thí nghiệm gà khỏe Triệu chứng lâm sàng ñặc trưng gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm Các biểu triệu chứng lâm sàng ñặc trưng bệnh cầu trùng gà là: ủ rũ, lười vận ñộng (90%), gà giảm ăn, uống nước nhiều, lông xù xơ xác, trạng thái phân ñặc trưng, thường lẫn máu Thấp tỷ lệ gà có triệu chứng bỏ ăn (25%) Bệnh tích gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm - Bệnh tích ñại thể: Thường tập trung chủ yếu ñường ruột mà chủ yếu manh tràng ðặc biệt sung huyết, xuất huyết ñoạn manh tràng, trực tràng ruột non - Bệnh tích vi thể chủ yếu là: xuất huyết, thoái hóa hoại tử tế bào ñặc biệt lớp biểu mô niêm mạc ruột Ngoài gặp giai ñoạn phát triển khác cầu trùng bên lòng ruột gà ðề nghị - ðề nghị tiếp tục nghiên cứu bệnh cầu trùng (tỷ lệ nhiễm, cường ñộ nhiễm) nhiều giống gà nhiều ñịa phương khác với dung lượng mẫu lớn, phạm vi rộng thời gian nghiên cứu dài ñể có kết so sánh ñánh giá diện rộng bệnh gà - Cần tiến hành nghiên cứu thêm ñặc ñiểm dịch tễ học bệnh cầu trùng thời gian sống cầu trùng môi trường ñể từ ñó có ñầy ñủ kết luận bệnh - Ở ñây lựa chọn liều lượng noãn nang gây bệnh 105 với chủng Eimeria tenella gây nhiễm giống gà Lương Phượng ðề nghị nghiên cứu thêm với liều lượng noãn nang, chủng cầu trùng giống gà khác ñể làm rõ ảnh hưởng khác ñến biến ñổi bệnh lý gà Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Vũ Triệu An (2006) ðại cương sinh lý bệnh gia súc Nhà Xuất Y học, Hà Nội Nguyễn Thành Chung (2010) Nghiên cứu số ñặc ñiểm bệnh lý chủ yếu bệnh cầu trùng gà Luận văn thạc sỹ nông nghiệp, ðH Nông nghiệp Hà Nội Cù Xuân Dần, Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân (1996) Sinh lý gia súc Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội ðào Trọng ðạt, Phan Thanh Phượng (1984) Bệnh gia súc non Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Xuân Hoạt, Phạm ðức Lộ (1980) Tổ chức học, phôi thai học Nxb ðại học trung học chuyên nghiệp, Hà Nội Nguyễn Hữu Hưng (2010) Khảo sát tình hình nhiễm cầu trùng gà nuôi công nghiệp hai tỉnh Sóc Trăng Vĩnh Long Khoa học kỹ thuật Thú y Tập XVII, 4: 6168 Phạm Văn Khuê, Phan Lục (1996) Ký sinh trùng bệnh ký sinh trùng thú y Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Văn Quang (1999) Giáo trình Ký sinh trùng thú y Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Thị Kim Lan, Phạm Sỹ Lăng, Nguyễn Văn Quang (2008) Giáo trình Ký sinh trùng thú y Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Ngọc Lanh (1982) Tìm hiểu miễn dịch học, Tập Nhà xuất Y học, Hà Nội Phạm Sỹ Lăng, Tô Long Thành (2006) Bệnh ñơn bào ký sinh ñộng vật nuôi Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Thị Mai (1997) Tình hình nhiễm cầu trùng xí nghiệp gà Phúc Thịnh thử nghiêm thuốc phòng trị Luận văn Thạc sỹ nông nghiệp, ðH Nông nghiệp Hà Nội Lê Minh (2008) Một số ñặc ñiểm dịch tễ bệnh cầu trùng lợn số huyện thuộc tỉnh Thái Nguyên Khoa học kỹ thuật Thú y Tập XV, 2: 63-67 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 61 Lê Tuyết Minh (1994) Nghiên cứu số ñặc ñiểm dịch tễ học bệnh cầu trùng gà Hybro HV85 từ ñến 49 ngày tuổi Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp, ðH Nông nghiệp I Hà Nội Hồ Văn Nam (1982) Giáo trình chẩn ñoán bệnh không lây gia súc Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Lê Văn Năm (2003) Bệnh cầu trùng gia súc, gia cầm Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Hoàng Thạch, Phan ðịch Lân (1996) Một số ñặc tính loài Eimeria ký sinh gà công nghiệp thả vườn nuôi TP Hồ Chí Minh vùng phụ cận Tạp chí khoa học công nghệ QLKT (Hà Nội), 26 - 29 Hoàng Thạch, Phan Hoàng Dũng, Lê Thanh Ngà, Nguyễn Thị Mỹ Hiền, Lê ðức Thắng (1997) Kết xét nghiệm bệnh tích ñại thể vi thể gà bị bệnh cầu trùng KHKT Thú y, 4: Nguyễn Như Thanh, Lê Thanh Hòa (1997) Miễn dịch học thú y Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Lê Khắc Thận (1977) Giáo trình sinh hóa ñộng vật NXB ðại học trung học chuyên nghiệp, Hà Nội Trịnh Văn Thịnh, ðỗ Dương Thái (1982) Công trình nghiên cứu ký sinh trùng Việt Nam Nxb Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội Dương Công Thuận (1973) Bệnh cầu trùng gà chăn nuôi công nghiệp Tạp chí KH Thú y, 2: 43-47 Hồ Thị Thuận (1985) ðiều tra ñiều trị bệnh cầu trùng số trại gà công nghiệp Trung tâm Thú y Nam bộ, 291-302 Hoàng Văn Tiến, Trịnh Hữu Hằng, Bùi ðức Lũng, Nguyễn Tấn Anh, Lê Viết Ly, Lê Văn Thọ, 1995 Sinh lý gia súc Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân, Nguyễn Bá Mùi, Lê Mộng Loan (1998) Giáo trình sinh lý gia súc Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Tiếng Anh Adams, D.O., Hamilton, T.A (1984) The cell biology of macrophage activation Rev Immunol, 2: 283 Adamu, M., Boonkaewwan, C., Gongruttananun, N., Vongpakorn, M (2013) Hematological, Biochemical and Histopathological Changes Caused by Coccidiosis in Chickens Nat Science, 47: 238 - 246 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 62 Conway, D., Sasai, K., Gaafar, S., Smothers, C (1993) Effects of Different Levels of Oocyst Inocula of Eimeria acervulina, E tenella , and E maxima on Plasma Constituents, Packed Cell Volume, Lesion Scores, and Performance in Chickens Avian Dis, 37: 118-123 Conway, D.P., McKenzie, M.E (2007) Poultry Coccidiosis, Diagnostic and Testing Proceduces Blackwell Publishing, Iowa, USA Daugschies, A., Bose, R., Marx, J., Teich, K., Friedhoff, K (2002) Development and application of a standardized assay for chemical disinfection of coccidia oocysts Vet Parasitol, 103: 299-308 Donal, P., Conway, Elizabeth, M., M (2007) Poultry Coccidiosis, Diagnostic and Testing Proceduces Blackwell Publishing, Iowa, USA Dongjean, Y., Sang, S.K., Hyun, S.L., Wongi, M (2011) A simple and efficient method for isolation of a single Eimeria oocyst from poultry litter using a micromanipulator Res Vet Med, 90: 260-261 Ellis, C.C (1986) Studies of the Vaibitily of the Oocyst of Eimeria tenella, with particular reference to condition of incubation Cornell Vet, 28: 267 Goodrich, H.P (1944) Coccidia Oocysts Parasitol, 36-72 Horton, S.C (1963) Immunity to avian coccidiosis World Poultry, 401-405 Intervet (2009) Important Poultry Diseases Intervet International bv, Netherlands Jensen, J., B, Hammond, D., M, Trager, W (2000) In Vitro Cultivation of Protozoan Parasites CRC Press, United States Johannes, K (1996) Parasitic infections of domestic animals A diagnostic manual, Birkhauser Verlag, Basal, Boston and Berlin Khalafalla, R.E., Daugschies, A (2010) Single oocyst infection: a simple method for isolation of Eimeria spp from the mixed field samples Parasitol res, 107: 187188 Kolapxki, N.A., Paskin, P.L (1980) Bệnh cầu trùng gia súc, gia cầm Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Levine, N.D (1985) Veterinary protozology Ames, Iowa: Iowa State University Press, USA Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 63 Long, P.L (1979) The effect of some Anticoccidial drugs on the development of immunity to the coccidiosis in field and Laboratory Cambs England Avian Pathology, 453-467 McDougald, L.R (1991) Coccocidiosis, In diseases of Poultry Iowa State University Press, Ames, USA Morris, G., Gasser, R (2006) Biotechnological advances in the diagnosis of avian coccidiosis and the analysis of genetic variation in Eimeria Biotechnol Adv 24, 590-603 Ogbe, A.O., Atawodi, S.E., Abdu, P.A., Oguntayo, B.O., Dus, N (2009) Oral treatment of Eimeria tenella-infected broilers using aqueous extract of wild mushroom (Ganoderma sp): Effect on haematological parameters and histopathology lesions African Journal of Biotechnology, 9: 8923-8927 Reid, W.M (1978) Coccidiosis In Diseases of Poultry, 7th Edition Iowa State Univ Press, Ames, IA Shirley, M., Smith, A., Tomley, F (2005) The biology of avian Eimeria with an emphasis on their control by vaccination Adv Parasitol, 60: 285-330 Shirley, M.W (1995) Eimeria species and strains of chickens European Commission DGXII, Luxembourg Stotish, R.L., Wang, C.C (1978) Peparation and furification of Merozoites J of Parasitol, 61: 700-703 Talebi, A., Asri-Rezaei, S., Rozeh-Chai, R., Sahraei, R., 2005 Comparative Studies on Haematological Values of Broiler Strains (Ross, Cobb, Arbor-acres and Arian) International Journal of Poultry Science, 4(8): 573-579 Tyzzer, E.E (1932) Coccidiosis in gallinaceous birds Amer.J.Hyg, 43-55 Tyzzer, E.E., Theiler, H (1929) A comparative study of species of Eimeria in the chickens Urquhart, G.M., Armour, J., Duncan, J.L., Dunn, A.M., Jennings, F.W (1996) Veterinary Parasitology, 2nd Edition Blackwell Science Scotland Zhao., X., Donald W, D., Eric S, L (2001) A simple method of DNA extraction for Eimeria species Microbiological Method, 44: 131-137 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 64 [...]... Nghiên cứu một số ñặc ñiểm bệnh lý của gà mắc cầu trùng thực nghiệm bằng loài Eimeria tenella Nghiên cứu này ñược thực hiện nhằm xác ñịnh một số chỉ tiêu huyết học và bệnh lý chủ yếu của gà mắc bệnh cầu trùng ñược gây bởi chủng E tenella, từ ñó bổ sung vào bức tranh toàn diện về các biến ñổi bệnh lý của gà mắc bệnh cầu trùng và là cơ sở giúp chẩn ñoán bệnh Mục tiêu của ñề tài Khảo sát tình hình nhiễm cầu. .. Tình hình nhiễm cầu trùng và các chủng loại gây bệnh cầu trùng trên ñàn gà nuôi trên ñịa bàn tỉnh Bắc Giang, một số biến ñổi về sinh lý, sinh hoá máu, cũng như giải phẫu bệnh lý ở ruột của gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm Nó cung cấp những số liệu khoa học, thực tiễn, những thông tin quan trọng giúp các nhà chăn nuôi và thú y nắm ñược cơ bản về tình hình nhiễm cầu trùng cũng như một số ñặc ñiểm về... hàng ngàn mẫu phân gà và ñưa ra kết luận: gà công nghiệp ở miền Bắc nước ta nhiễm 5 loài cầu trùng: E tenella, E mitis, E maxima, E brunetti, E necatrix ðào Hữu Thanh (1975) ñã nghiên cứu về bệnh cầu trùng gà ở các trang trại nuôi tập trung công nghiệp và ñưa ra một số kết quả về tình hình dịch tễ của bệnh cầu trùng gà Dương Thanh Liêm, Võ Bá Thọ (1982) ñã ñề cập ñến bệnh cầu trùng trong chăn nuôi gà. .. và một số chỉ tiêu huyết học (Adamu et al., 2013; Hoàng Thạch và cs., 1997; Nguyễn Thành Chung, 2010) Tuy nhiên, chưa có nghiên cứu nào ñề cập ñến các biến ñổi bệnh lý của gà mắc bệnh cầu trùng thực nghiệm Xuất phát từ thực tiễn sản xuất, ñược sự phân công của Ban ñào tạo, Khoa Thú y, Bộ môn Bệnh lý, dưới sự hướng dẫn của thầy giáo PGS TS Nguyễn Hữu Nam, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ñề tài: Nghiên. .. nhiễm cầu trùng có sự khác nhau theo tình trạng vệ sinh thú y trong chăn nuôi Gà nuôi trong ñiều kiện vệ sinh kém có tỷ lệ nhiễm là cao nhất Lê Tuyết Minh (1994) ñã nghiên cứu về tình hình nhiễm Eimeria và bệnh cầu trùng gà ở một số trại gà tại một số vùng của Hà Nội ñã xác ñịnh có 4 loài cầu trùng trên gà thịt là: E tenella, E maxima, E mitis, E necatrix Vũ ðình Chính và cs (1977) nói về tình hình bệnh. .. cầu trùng gây nên làm gà bị nhiễm trùng huyết cấp tính 1.3.4 Triệu chứng lâm sàng và bệnh tích của gà bị bệnh cầu trùng * Triệu chứng lâm sàng Triệu chứng lâm sàng của gà bị bệnh cầu trùng thay ñổi tùy thuộc vào ñộ tuổi của gà, loài cầu trùng, số lượng oocyst có mặt trong từng cá thể gà Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 18 Có nhiều tác giả ñồng quan ñiểm là bệnh. .. trùng ở gà tại Bắc Giang Gây nhiễm cầu trùng thực nghiệm thành công trên giống gà Lương Phượng bằng loài Eimeria tenella, sau ñó làm rõ các ñặc ñiểm bệnh lý chủ yếu (chỉ tiêu huyết học, bệnh tích ñại thể và vi thể ñường ruột) của gà thí nghiệm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 2 Những ñóng góp của ñề tài trong khoa học và thực tiễn ðây là công trình nghiên cứu. .. sinh chủ yếu ở hồi tràng, E tenella ký sinh chủ yếu ở manh tràng… và chúng gây ra những biến ñổi bệnh lý chủ yếu tại vị trí mà chúng ký sinh Trong ñó chủng E tenella gây bệnh phổ biến trên gà và gây ra các biến ñổi bệnh lý nặng nhất Cho ñến nay ñã có nhiều nghiên cứu về bệnh cầu trùng gà ở gà mắc bệnh tự nhiên, trong ñó có các nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm, các biến ñổi bệnh lý (triệu chứng lâm sàng, các... gây bệnh (Sporulation) mới có khả năng gây bệnh và truyền bệnh từ gà này sang gà khác (Kolapxki and Paskin, 1980) 1.2.3 Tính chuyên biệt của cầu trùng Bệnh cầu trùng khác với các bệnh do vi khuẩn và virus về bản chất tự giới hạn trong quá trình sinh trưởng và phát triển của nó ðiều ñó có ñược là do tính chuyên biệt của cầu trùng Tính chuyên biệt của cầu trùng là sự thích nghi phức tạp và lâu dài của cầu. .. gồm Eimeria tenella, Eimeria acervulina, Eimeria mitis, Eimeria brunetti, Eimeria necatrix, Eimeria maxima, Eimeria praecox, Eimeria hagani, Eimeria mivatti Và có 7 trong số 9 loài trên loài gây bệnh phổ biến (trừ Eimeria hagani, Eimeria mivatti) (Conway and McKenzie, 2007; McDougald, 1991) Sau này, một số tác giả khác ở Trung Âu và Liên Xô (cũ) như Yakimoff, Kotlan ñã ñưa ra một số công bố về 3 loài: