BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI LÊ THỊ TUYẾT LAN KIỂM ðỊNH VÀ KHẢO NGHIỆM VACXIN PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN VÔ HOẠT LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN BÁ HIÊN HÀ NỘI – 2009 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây công trình nghiên cứu riêng Các kết quả, số liệu nêu luận văn hoàn toàn trung thực chưa ñược bảo vệ học vị khác Tôi xin cam ñoan thông tin trích dẫn luận văn ñều ñã ñược rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Lê Thị Tuyết Lan Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… i LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này, cố gắng thân nhận ñược giúp ñỡ tận tình nhiều cá nhân tập thể Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Bá Hiên- Trưởng môn Vi sinh vật, Truyền nhiễm – Khoa Thú y Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, người ñã tận tình giúp ñỡ suốt qua trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội; Viện ðào tạo sau ðại học; Khoa Thú y; Bộ môn Vi sinh vật, Truyền nhiễm- Khoa Thú y; Phòng kiểm nghiệm vacxin Vi trùng, Tổ Vi trùng 2- Xí nghiệp thuốc thú y TW ñã tạo ñiều kiện thuận lợi giúp ñỡ suốt trình học tập nghiên cúu Tôi xin cảm ơn tới gia ñình, bạn bè ñồng nghiệp ñã giúp ñỡ, ñộng viên suốt trình thực luận văn tốt nghiệp Hà Nội, ngày tháng năm Tác giả Lê Thị Tuyết Lan Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình x MỞ ðẦU i 1.1 Tính cấp thiết ñề tài 1.2 Mục ñích yêu cầu ñề tài 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn ñề tài 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 ðặc tính chung vi khuẩn Salmonella 2.2 Bệnh Salmonella biện pháp phòng trị bệnh 28 2.3 Bệnh Phó thương hàn lợn 30 2.4 Một số hiểu biết ñại cương vacxin 34 NỘI DUNG – NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 41 3.1 Nội dung 41 3.2 ðối tượng nghiên cứu 41 3.3 ðịa ñiểm nghiên cứu 41 3.4 Nguyên liệu dụng cụ, trang thiết bị 41 3.5 Phương pháp nghiên cứu 42 3.6 Phương pháp sử lý số liệu 46 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47 4.1 Kết sản xuất vacxin phó thương hàn lợn công nghệ lên men sục khí Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 47 iii 4.1.1 Nhân giống sản xuất 49 4.1.2 Kết ñếm số canh trùng giống 50 4.1.3 Kết kiểm tra khiết canh trùng ñưa vào sản xuất vacxin 51 4.1.4 Kết ñếm số canh trùng ñưa vào sản xuất vacxin 52 4.1.5 Kết kiểm tra vô trùng canh trùng ñưa vào sản xuất vacxin 53 4.1.6 Kết kiểm tra an toàn ñộc tố canh trùng 54 4.1.7 Kết kiểm tra vô trùng bán thành phẩm 55 4.2 56 Kết kiểm nghiệm vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt 4.2.1 Mẫu: 56 4.2.2 Kết kiểm tra vô trùng vacxin 57 4.2.3 Kết kiểm tra an toàn vacxin 58 4.2.4 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin 60 4.3 62 Kết xác ñịnh ñộ dài miễn dịch 4.3.1 Kết xác ñịnh ñộ dài miễn dịch vacxin PTH lợn vô hoạt sau tiêm vacxin thời ñiểm sau tiêm 21 ngày 63 4.3.2 Kết kiểm tra ñộ dài miễn dịch lô vacxin PTH lợn vô hoạt thời ñiểm sau tiêm tháng 64 4.3.3 Kết kiểm tra ñộ dài miễn dịch lô vacxin PTH lợn vô hoạt thời ñiểm sau 4,5 tháng tiêm phương pháp công cường ñộc thay ñộng vật thí nghiệm 65 4.3.4 Kết kiểm tra ñộ dài miễn dịch lô vacxin PTH lợn vô hoạt thời ñiểm sau tháng tiêm phương pháp công 4.4 cường ñộc thay ñộng vật thí nghiệm 66 Xác ñịnh thời gian bảo quản vacxin 67 4.4.1 Kết kiểm tra vô trùng lô vacxin PTH lợn vô hoạt sau thời ñiểm 6,9,12,18 tháng bảo quản 68 4.4.2 Kết kiểm tra tiêu an toàn vacxin PTH lợn sau thời ñiểm 6,9,12,18 tháng bảo quản Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 70 iv 4.4.3 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau tháng bảo quảnbằng phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 71 4.4.4 Kết kiểm tra hiệu lực sau tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 71 4.4.5 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau 12 tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 72 4.4.6 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau 18 tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí 4.5 nghiệm 73 Kết ứng dụng vacxin diện rộng 74 4.5.1 Kết xác ñịnh tiêu an toàn lô vacxin PTH lợn vô hoạt ứng dụng vào thực tế sản xuất ñịa bàn huyện ðan Phượng- Hà Nội 74 4.5.2 Xác ñịnh hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt phương pháp thử nghiệm lâm sàng diện rộng huyện ðan Phượng- Hà nội 75 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 82 5.1 KẾT LUẬN 82 5.2 ðỀ NGHỊ 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84 LỜI CAM ðOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… x v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Sal: Salmonella PTH: Phó thương hàn MLD: Minimum Lethal Dose ( liều gây chết tối thiểu) TCN: tiêu chuẩn ngành TK: khiết VK: Vi khuẩn TL: tỷ lệ Cð: cường ñộc Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… vi DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang 2.1 ðịnh type huyết học (serotyp) vi khuẩn Salmonella 2.2 ðặc tính sinh hóa số loài Salmonella 11 2.3 Phân biệt số vi khuẩn môi trường TSA 23 2.4 Phân biệt Salmonella E.coli môi trường Kligler 24 2.5 Thử nghiệm IMVIc số vi khuẩn ñường ruột 24 4.1 Kết kiểm tra khiết lô giống sản xuất vacxin 49 4.2 Kết ñếm số vi khuẩn lô giống sản xuất vacxin 50 4.3 Kết kiểm tra khiết canh trùng ñưa vào sản xuất vacxin 51 4.4 Kết ñếm số vi khuẩn canh trùng ñưa vào sản xuất vacxin 52 4.5 Kết kiểm tra vô trùng canh trùng ñưa vào sản xuất vacxin 53 4.6 Kết kiểm tra an toàn ñộc tố canh trùng sau ngày lắc giải ñộc (tiêm chuột bạch) 54 4.7 Kết kiểm tra vô trùng bán thành phẩm 56 4.8 Kết kiểm tra vô trùng lô vacxin PTH lợn vô hoạt 57 4.9 Kết kiểm tra an toàn vacxin lợn cai sữa 59 4.10 Kết kiểm tra an toàn vacxin ñộng vật thí nghiệm 59 4.11 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt phương pháp thay chuột lang 4.12 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin ñộng vật thời ñiểm sau tiêm 21 ngày 4.13 61 63 Kết kiểm tra hiệu lực lâm sàng lô Sal5 thời ñiểm sau tiêm tháng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 64 vii 4.14 Kết kiểm tra ñộ dài miễn dịch lô vacxin PTH lợn vô hoạt thời ñiểm sau tiêm tháng phương pháp công cường ñộc thay ñộng vật thí nghiệm 4.15 64 Kết kiểm tra ñộ dài miễn dịch lô vacxin PTH lợn vô hoạt thời ñiểm sau 4,5 tháng tiêm phương pháp công cường ñộc thay ñộng vật thí nghiệm 4.16 65 Kết kiểm tra ñộ dài miễn dịch lô vacxin PTH lợn vô hoạt thời ñiểm sau tháng phương pháp công cường ñộc thay ñộng vật thí nghiệm 4.17 Kết kiểm tra vô trùng vacxin sau thời ñiểm 6, 9, 12, 18 tháng bảo quản 4.18 69 Kết kiểm tra tiêu an toàn vacxin PTH lợn sau thời ñiểm 6, 9, 12, 18 tháng bảo quản 4.19 66 70 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 4.20 71 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 4.21 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau 12 tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 4.22 73 Kết xác ñịnh tiêu an toàn lô vacxin PTH lợn vô hoạt thử nghiệm ñịa bàn huyện ðan Phượng- Hà Nội 4.24 72 Kết kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt sau 18 tháng bảo quản phương pháp công cường ñộc ñộng vật thí nghiệm 4.23 72 74 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã ðồng Tháp – Huyện ðan Phượng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 75 viii 4.25 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Thọ An – Huyện ðan Phượng 4.26 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Thọ Xuân – Huyện ðan Phượng 4.27 79 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Trung Châu – Huyện ðan Phượng 4.30 78 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Tân Hội – Huyện ðan Phượng 4.29 77 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Tân Lập – Huyện ðan Phượng 4.28 76 80 Tổng hợp kết xác ñịnh hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt phương pháp thử nghiệm lâm sàng diện rộng huyện ðan Phượng- Hà Nội Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 81 ix thương hàn lợn vô hoạt thực ñịa xã thuộc Huyện ðan Phượng với số lợn ñược tiêm 1.432 Kết 100% lợn ñược tiêm phòng vacxin phó thương hàn lợn ñều phản ứng có hại gây sốt, ỉa chảy, ốm, chết, Vậy vacxin phó thương hàn lợn an toàn tuyệt ñối 4.5.2 Xác ñịnh hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt phương pháp thử nghiệm lâm sàng diện rộng huyện ðan Phượng- Hà nội Chúng ñã tiến hành tiêm vacxin lợn xã huyện ðan Phượng theo ñúng hướng dẫn nhà sản xuất tiêm cho lợn ml vào da, kết hợp với trạm thú y huyện theo dõi lợn thu thập số liệu thời gian tháng.Chúng ghi nhận trường hợp lợn chết có ñầy ñủ triệu chứng, bệnh tích ñiển hình bệnh Phó thương hàn lợn loại trừ trường hợp ñã bị bệnh ñược chữa khỏi kháng sinh Kết sau: Bảng 4.24 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã ðồng Tháp – Huyện ðan Phượng Chỉ tiêu Thôn Số lợn theo dõi (con) Lợn tiêm phòng Con Lợn không tiêm Tỷ lệ (%) Con Tỷ lệ (%) Lợn chết nghi bị PTH ðã tiêm phòng Tỷ Con lệ (%) Chưa tiêm phòng Con Tỷ lệ (%) ðánh giá bảo hộ Bãi Thuỵ 190 130 68.42 60 31.58 0 0 Tốt Bãi Tháp 260 60 23.08 200 76.92 0 13 Tốt ðồng Vân 200 50 25 150 75 0 14 Tốt ðại Thần 210 50 23.80 160 76.20 0 13 6.19 Tốt Thọ Vực 130 60 46.15 70 54.85 0 1.53 Tốt T.hợp 990 350 35.35 640 64.65 0 42 4.24 Tốt Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 75 Như số lợn chết nghi mắc PTH chủ yếu tập trung thôn Bãi Tháp nơi có số lợn nuôi nhiều tỷ lệ tiêm phòng thấp Cụ thể thôn Bãi Thuỵ tiêm phòng tốt nên lợn chết nghi PTH ñó thôn Bãi Tháp tỷ lệ chết lên ñến 5% Bảng 4.25 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Thọ An – Huyện ðan Phượng Chỉ tiêu Thôn Lợn tiêm phòng Số lợn theo dõi(con) Lợn không tiêm Tỷ lệ Tỷ lệ (%) (%) Lợn chết nghi bị PTH ðã tiêm phòng Tỷ Con lệ % Chưa tiêm phòng Con Tỷ lệ % ðánh giá bảo hộ ðông Hải 295 250 84.74 45 15.26 0 0.34 Tốt 362 162 44.75 200 55.25 0.6 11 3.04 Tốt 345 320 92.75 25 7.25 0 0 Tốt 310 190 61.29 120 38.71 0 1.29 Tốt 1312 922 70.88 390 29.72 0.6 16 1.22 Tốt Tây Sơn Bắc Hạ Vạn Vĩ T.hợp Theo kết bảng cho thấy: Trên toàn xã Thọ An có thôn tiêm phòng vacxin PTH lợn vô hoạt trung bình 70,88%, tỷ lệ chết 1,22% ñó có thôn Tây Sơn có tỷ lệ tiêm phòng thấp 50% (có 44.75%) có số lợn chết nghi chết Phó Thương hàn lợn lớn (11con) chiếm Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 76 3,04% Trong ñó thôn Bắc Hạ có tỷ lệ tiêm phòng cao (92.75%) lợn bị chết ðiều chứng tỏ thôn có tỷ lệ tiêm phòng vacxin cao số lợn nghi chết Salmonella gây Chúng thu thập số liệu xã Thọ Xuân (do Trạm thú y ðan Phượng cung cấp) có kết ñược trình bày bảng sau: Bảng 4.26 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Thọ Xuân – Huyện ðan Phượng Chỉ tiêu Số lợn theo dõi (con) Thôn Lợn tiêm phòng Lợn không tiêm Tỷ lệ (%) Con Tỷ lệ (%) Lợn chết nghi bị PTH ðã tiêm phòng Chưa tiêm phòng Tỷ lệ (%) Tỷ lệ (%) ðánh giá bảo hộ Hoà Bình 170 150 88.23 20 11.77 0 0 Tốt Chiến Thắng 135 120 88.88 15 11.12 0 0 Tốt Quyết Tiến 394 238 60.4 156 39.6 0 0.76 Tốt Thống Nhất 400 186 46.5 214 53.5 0 1.25 Tốt T.hợp 1099 694 71.01 405 28.99 0 0.73 Tốt Xã Thọ Xuân có thôn với tổng số lợn 1.099 con, ñó xã Quyết Tiến có số lợn nhiều tỷ lệ tiêm phòng có 60,40% có trường hợp lợn nghi chết Sal gây Trong ñó Xã Hòa Bình xã Chiến Thắng có tỷ lệ tiêm phòng 80% (88,23%, 88,88%) lợn nghi chết Sal gây Xã Thống Nhất xã có tỷ lệ tiêm phòng thấp 46,5% nên ñã có trường hợp lợn nghi chết PTH gây Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 77 Bảng 4.27 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Tân Lập – Huyện ðan Phượng Chỉ tiêu Lợn tiêm phòng Số lợn theo dõi(con) Lợn không tiêm Lợn chết nghi bị PTH Chưa ðã tiêm tiêm phòng Tỷ lệ phòng Tỷ lệ Con (%) (%) Tỷ Tỷ Con lệ lệ (%) (%) Thôn ðánh giá bảo hộ Hạ Hội 525 310 59.04 215 40.96 0 1.33 Tốt Hạnh ðàn 455 260 57.14 195 42.86 0.2 1.32 Tốt ðan Hội 386 351 90.93 35 9.07 0 0 Tốt Ngọc Kiệu 336 271 80.65 65 19.35 0 0.3 Tốt T.hợp 1702 1192 71.94 510 28.06 14 Tốt Qua bảng cho thấy có 2/4 thôn tỷ lệ tiêm phòng thấp (59,04%, 57,14%) ñó thôn Hạ Hội Hạnh ðàn Hai thôn có 13 trường hợp lợn nghi chết sal gây Trong thôn có thôn ðan Hội trường hợp lợn chết (tỷ lệ tiêm phòng 90,93%) thôn Ngọc Kiệu có trường hợp lợn chết ðể khẳng ñịnh khả bảo hộ vacxxin Phó thương hàn lợn vô hoạt tiếp tục theo dõi thu thập số liệu xã Trung Châu, Tân Hội Xã Tân Hội có thôn có 1/4 thôn có tỷ lệ tiêm phòng cao 90% trường hợp lợn chết, thôn lại tỷ lệ tiêm Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 78 phòng ñạt 60% có lợn nghi chết Sal gây (tỷ lệ chết 2%) Kết ñã cho thấy khẳng ñịnh thêm thôn có tỷ lệ tiêm phòng cao số lợn nghi chết Sal gây Kết ñược thể qua bảng ñây (Bảng 4.28): Bảng 4.28 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Tân Hội – Huyện ðan Phượng Chỉ tiêu Số lợn theo dõi (con) Lợn tiêm phòng Lợn không tiêm Tỷ lệ Tỷ lệ Con (%) (%) Thôn Lợn chết nghi bị PTH ðã tiêm phòng Con Chưa tiêm phòng Tỷ lệ Con (%) Tỷ lệ (%) ðánh giá bảo hộ Thượng Hội 230 150 65.21 80 34.79 0 6.25 Tốt Phan Long 200 126 74 37 0 6.76 Tốt Vĩnh Kỳ 313 218 69.64 95 30.36 0 3.16 Tốt Thuý Hội 251 231 92.03 20 7.97 0 0 Tốt 994 725 269 0 13 T.hợp 63 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… Tốt 79 Bảng 4.29 ðánh giá khả bảo hộ vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt ñàn lợn nuôi Xã Trung Châu – Huyện ðan Phượng Chỉ Số lợn tiêu theo dõi(con) Lợn tiêm phòng Tỷ lệ (%) Lợn không tiêm Con Tỷ lệ (%) Lợn chết nghi bị PTH ðã tiêm phòng Tỷ lệ (%) Thôn Chưa tiêm phòng Tỷ lệ (%) ðánh giá bảo hộ Hưu Trưng 360 345 95.83 15 4.17 0 0 Tốt Vân Môn 263 217 90.79 46 9.21 0 0 Tốt Phương Vinh 375 321 85.6 54 14.4 0 0.27 Tốt Chu Phan 315 243 77.14 72 22.86 0 0.63 Tốt Lại Yên 341 254 74.48 87 25.52 0 0.88 Tốt Phương Tiến 320 261 81.56 59 18.44 0 0.31 Tốt T.hợp 2031 164 390 15.77 0 0.34 Tốt 84.23 Nhìn vào bảng thấy Trung Châu có tỷ lệ tiêm phòng cao trung bình 80% (84,23%), xã có tỷ lệ tiêm phòng thấp 74,48% (thôn Lại Yên) Tổng số lợn nghi chết Sal gây có trường hợp Tỷ lệ tiêm phòng cao thôn Hưu Trưng với 95,83% Kết theo dõi ñánh giá khả bảo hộ vacxin Phó thương hàn lợn vô hoạt xã Trung Châu tương ñồng với xã ðồng Tháp, Thọ Xuân, Thọ An, Tân Lập, Tân Hội Từ kết có bảng tổng hợp việc tiêm phòng vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt sau: Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 80 Bảng 4.30 Tổng hợp kết xác ñịnh hiệu lực vacxin PTH lợn vô hoạt phương pháp thử nghiệm lâm sàng diện rộng huyện ðan Phượng- Hà Nội Chỉ tiêu Lợn tiêm phòng Lợn chết nghi bị PTH ðánh Chưa tiêm giá phòng bảo hộ Tỷ lệ vacxin (%) Số lợn theo dõi(con) Tỷ lệ (%) ðồng Tháp 990 350 35.35 0 42 4.24 Tốt Thọ An 1312 922 70.27 0.6 16 1.22 Tốt Thọ Xuân 1099 694 63.15 0 0.73 Tốt Trung Châu 4031 1641 40.71 0 0.17 Tốt Tân Lập 1702 1192 70.04 0.08 14 0.82 Tốt Tân Hội 994 725 0 13 1.31 Tốt ðịa ñiểm thử nghiệm(Xã) Tổng số 10128 72.94 ðã tiêm phòng Tỷ lệ Con (%) 5524 54.54 Tốt Qua bảng tổng hợp cho thấy xã có tỷ lệ tiêm phòng vacxin cao lợn nghi chết PTH ñó xã không tiêm có lợn nghi chết PTH xảy lẻ tẻ Kết luận: - Cần tiêm phòng ñầy ñủ, ñúng quy trình - Nơi tiêm phòng vacxin PTH lợn vô hoạt tốt khả bảo hộ ñàn lợn tốt, vacxin PTH lợn vô hoạt có hiệu lực tốt sử dụng thực ñịa Qua kết trên, khẳng ñịnh ñược vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt sản xuất công nghệ lên men sục khí ñạt tiêu chuẩn vô trùng, an toàn, hiệu lực theo tiêu chuẩn Cục thú y ban hành Vì vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt sản xuất công nghệ lên men sục khí hoàn toàn ñủ tiêu chuẩn xuất xưởng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 81 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Vacxin Phó thương hàn lợn vô hoạt vacxin dạng lỏng có chất bổ trợ keo phèn Vacxin ñược dùng ñể phòng bệnh Phó thương hàn lợn Vacxin có nhiều ưu ñiểm giá thành rẻ, liều tiêm nhỏ (1ml/con) tiêm vào da Vacxin ñược ñóng vào chai nhựa bảo quản nhiệt ñộ 2-80C Chúng ñã áp dụng công nghệ sản xuất vacxin tiên tiến công nghệ lên men sục khí ðã sản xuất ñược lô vacxin Phó thương hàn lợn vô hoạt theo công nghệ lên men sục khí Kiểm ñịnh ñược tiêu kĩ thuật vacxin: vô trùng, an toàn hiệu lực ñạt yêu cầu Xác ñịnh ñộ dài miễn dịch vacxin sau tiêm: ñã thực kiểm tra ñiểm 21 ngày, tháng, 4,5 tháng tháng phương pháp công cường ñộc thay chuột lang thí nghiệm thấy: Ở thời ñiểm 4,5 tháng vacxin ñạt tỷ lệ bảo hộ ñạt 100% Ở thời ñiểm tháng tỷ lệ bảo hộ bắt ñầu giảm 2/5 lô vacxin có tỷ lệ bảo hộ 60% 3/5 lô vacxin ñạt tỷ lệ bảo hộ 80% ðể trì ñược sức miễn dịch chắn ñàn lợn nên sử dụng vacxin lần năm Bảo quản nhiệt ñộ 2-8 0C - Sau 12 tháng bảo quản chất lượng vacxin ñạt tiêu chuẩn vô trùng, an toàn hiệu lực Nhưng 18 tháng hiệu lực vacxin ñã giảm (thời ñiểm hết hạn sử dụng theo dẫn nhà sản xuất Vì không sử dụng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 82 vacxin bảo quản giai ñoạn Thực thử nghiệm vacxin diện rộng: Kết 5524 lợn ñược tiêm phòng huyện ðan Phượng, thành phố Hà Nội, bước ñầu xác ñịnh vacxin an toàn có khả bảo hộ cao thực tế sản xuất 5.2 ðỀ NGHỊ ðề nghị ñưa vacxin vào thực tế sản xuất ñể phòng bệnh Phó thương hàn lợn Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Phùng Quốc Chướng (1995), Tình hình nhiễm Salmonella lợn vùng Tây Nguyên khả phòng trị, Luận án PTS KH Nông Nghiệp, Hà Nội Bộ Nông Nghiệp Phát triển nông thôn: chiến lược phát triển chăn nuôi ñến năm 2020, NXBNN, Hà Nội 2008, tr6-9 Cục Thú y (1994), Quy trình kỹ thuật kiểm nghiệm vacxin dùng thú y, NXBNN, Hà Nội 1994, tr7-10, 45-46 ðào Trọng ðạt, Phan Thanh Phượng (1986), Bệnh gia súc non tập II, NXB NN, Hà Nội, trang 67 – 91 Trần Xuân Hạnh (1995), “Phân lập giám ñịnh vi khuẩn Salmonella lợn – tháng tuổi”, Nông nghiệp, công nghiệp thực phẩm – Tạp chí khoa học công nghệ quản lý kinh tế, số năm 1995, Hà Nội 1995, trang 240 Vũ Bình Minh, Cù Hữu Phú (1999), Kết phân lập vi khuẩn E.coli Salmonella lơn mắc bệnh tiêu chảy, xác ñịnh số ñặc tính sinh vật hóa học chủng vi khuẩn phân lập ñược, Khoa học kỹ thuật thú y, tập 6, số – 1999 – Hội thú y Việt Nam, Hà Nội Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thị Thu Hà (1989), “Kết ñiều tra tình hình nhiễm vi khuẩn ñường ruột số sở chăn nuôi lợn”, Kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật thú y 1985-1989, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 1989, Tr 50-53 Nguyễn Vĩnh Phước, Hồ ðình Chúc, Nguyễn Văn Hanh, ðặng Thế Huynh (1978), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, NXBNN, Hà Nội Phan Thanh Phượng,Trần Thị Hạnh, Phạm Thị Ngọc, Ngô Hoàng Hưng (1996), “Nghiên cứu xác ñịnh vai trò vi khuẩn yếm khí Clostridium ferfringers hội chứng tiêu chảy lợn”, Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, số 12, năm 1996, Tr495-496 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 84 10 Lê Văn Tạo (1986), Nghiên cứu tác nhân gây bệnh vi trùng Salmonella Typhymurium Bản dịch luận án PTS, Kosice 1986 11 Lê Văn Tạo, Nguyễn Thị Vui (1994), “Phân lập ñịnh typ vi khuẩn Salmonella gây bệnh cho lợn”, Nông nghiệp, công nghiệp thực phẩm – Tạp chí khoa học công nghệ quản lý kinh tế, số 11 năm 1994, Hà Nội 1994, trang 430 – 431 12 Nguyễn Quang Tuyên (1995), Nghiên cứu ñặc tính số chủng Salmonella gây bệnh tiêu chảy bê, nghé biện pháp phòng trị Luận án PTS KH Nông nghiệp – Viện Thú y quốc gia, Hà Nội 1995 13 Nguyễn Quang Tuyên, ðoàn Thị Băng Tâm (1994), “Vai trò vi khuẩn Salmonella rối loạn tiêu hóa bê nghé Bắc Thái”, Khoa học kỹ thuật thú y, tập I, số năm 1994, Hội thú y Việt Nam-Hà Nội 14 Nguyễn Quang Tuyên, ðoàn Thị Băng Tâm (1995), “Kết ñiều tra bệnh Salmonella gây trâu bò số vùng Miền Bắc Việt Nam”, Nông nghiệp, công nghiệp thực phẩm – Tạp chí khoa học công nghệ quản lý kinh tế, số năm 1995, Hà Nội 1995, trang 239 15 Nguyễn Như Thanh (2001), Vi sinh vật thú y, NXBNN, Hà Nội, trang 84 16 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, NXBNN, Hà Nội, trang 63-64, 67, 72, 77, 79 17 John R Cole, Jr ðại học Georgia; Jerome C Nietfeld, ðại học bang Kansas; Kent J Schwart, ðại học bang Iowa (1996), “Salmonella Choleraeuis lợn”, Cẩm nang chăn nuôi lợn công nghiệp, Hà Nội, Tr 835-838 18 Nguyễn Như Thanh (1974), Giáo trình thực tập Vi sinh vật thú y, Hà Nội, tr56-57 19 Phạm Sỹ Lăng, Thuốc vacxin thú y (www.ebook.edu.vn) 20 Nguyễn Tuấn Hùng, 2007, luận văn Thạc sỹ nông nghiệp:” Nghiên cứu hoàn thiện vacxin PTH lợn vô hoạt công nghệ lên men sục khí” Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 85 Tiếng Anh 21 Altekruse S.F (1990), Salmonella enteritidis update, Foreign-Anim-DisRes-U-S-Dep-Agric-Anim-Plant-Health-Insp-Serv-Vet-ServEmergency-Programs Hyattsville, Md The Programs, Fall 1990 (18-3) p 6-7 22 Bean N.H, Griffin P.M (1990), Foodborne disease outbreaks in the United States, 1973-1987: Pathogens, vehicles and trends, J-Food-Prot Ames, Iowwa: International Association of Milk, Food and Envirnmental Sanitarians, Sept 1990.v.53 (9) p.804 – 817 charts 23 D’Aoust J.Y, Sewell A, Jean A (1990), Limited sensitivity of short (6h) selective enrichment for detection of foodborne Salmonella J-FoodProt Ames, Iowwa: International Association of Milk, Food and Envirnmental Sanitarians, July 1990.v.53 (7) p.562-565, 625 24 Dean A.G, Ching Y.C, Williams and Harden L.B (1972), “Test for E.coli Enterotoxin using infant mice”, J.Infect, Dis 125, 1972 p 407 – 411 25 Durand A.M, Giesecke W.H, Barnard M/L, Van-Der-Walt M.L, Steyn H.C (1990), “Salmonella isolated from feeds and feed ingredients during the period 1982 – 1988: Animal and public health implication”, Onderstepoort- J - Vet-Res Pretoria: South Africa Department of Agriculture and Water supply, V.v57 (3) p 175-181 26 Finlay B.B; Fallow S (1989), “Virulence factor associated with Salmonella spacies.” Micrological sciences, Vol No.11 27 Finlay B.B; Falkow S (1988), “Biochim 1988 in press Virulence factors associated with Salmonella spacies” Mocrilogical Sciences,Vol.5 No (11) 28 Le Minor L & Popoff M.Y (1987), Request for an opinion Designation of Salmonella enterica sp nov nom rev, as the type and only species of the genus Salmonella, Int J Syst Bacteriol, 37, 465-468 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 86 29 MacllroyS George (2000), “The relationship beTrung ươngeen feed and Salmonella contamination”, Service Bulletin of Arrbor Acres Farm, No.11 jun 1, p.17 – 19 30 Morris I.A, Way C, Sojka W.J (1976), “The effect of T and B lymphocyte depletion on the protection of mice vaccinated with a gel Emutant of Salmonella typhimurium”, Bristh J of Exp, Path 57, p354 – 360 31 Orskov I.F, Jann B and Jann K (1977), “Serology chemistry and genetic of O and K antigen of E.coli”, Bacteriological Review, Vol 41, p 667 – 710 32 Popoff M.Y., Bockemuhl J & McWhorter-Murlin A (1994), Supplement 1993 (No 37) to the Kauffmann-White scheme, World Health Organization Collaborating Centre for Reference and Research on Salmonella, Unite des Enterobacteries, U389 INSERM, Institute Pasteur,2Paris Res Microbiol, 145, 711-716 33 Popoff 3.Y (2001), Antigenic Formulas of the Salmonella Serovars, World 4ealth Organization Collaborating Centre for Reference and Researc5 on Salmonella, Pasteur Institute, Paris, France 34 Radostit O.M; Blood D.C and Gay C.C (1994), Vetarinary medicine A Textbook of the Diseases of cattle, sheep, pig, goat and horses, Paston press L.td, London, Norfolk, eighth Edition 35 Sandefur P.D, Peterson J.W (1977), Neutralization of Salmonella Toxininduced elongation of chinese- hamster-ovary cell choleranti Toxin, Ibid,Vol 15,p.982-988 36 Sedlock D.M, Koupal B.N, Deibel R.H (1978), Production and partial purification of Salmonella eteroToxin, J.Immun, Vol 20, p.375-380 37 Sedlock D.M, Deibel R.H (1978), Dectection of Salmonella typhimurium EnteroToxin using rabbit iieal loops, Can.J.Microbiol, Vol 24, p.268273 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 87 38 Shane S M, Gyimah J.e, Harrington K.S, Snider T.G.III (1985), “Etiology and pathogenesis of necrotic enteritis, Vet-Res-Commun”, Amsterdam Elsevier Science Publishers B.V, Sept 1985 v (4) p.269-287 39 Smith B.P, Reina, Guerra M, Stocker B.A.D (1989), Aromatic, dependent Salmonella typhimurium as modified vacxin for calves, Am J Vet Res 45 (11):2231, 2235 40 Snoeyenbos G.H (1991), Pullorum disease, Disease of poultry, Edition, p 74 – 81, 84 41 Taylor, Wilkins (1961), The effects of Salmonella and Shigella on the ligated loops of rabbits gut, India J.Med.Res, Vol 49, p.554 42 Valtonen M.V (1977), Role of Phogocytosis in mouse virulence of Salmonella typhimurium recombimant with O antigen 6,7 or 4,12, Infect Immune (18), p.574 43 Weinstein D.L, Carsiotis M, Lissner CH.R.Orien AD (1984), “Flagalla help Salmonella typhimurim survive within murine macrophages”, Infection and Immmun, 18, p.574 44 World Health Organization (WHO) Regional Office for Europe (2000) WHO Surveillance Programme for Control of Foodborne Infections and Intoxications in Europe Seventh Report on Surveillance of Foodborne Disease in Europe 1993-1998 Institute for Health Protection of Consumers and Veterinary Medicine BGVV FAO/WHO Collaborating Centre for Training and Research in Food Hygiene and Zoonoses, P.O Box 33 00 13, 14191 Berlin, Germany 45 Wray C & Wray A, eds (2000), Salmonella in Domestic Animals, CAB International, Wallingford, Oxon, UK Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 88 [...]... vacxin Phó thương hàn lợn vô hoạt ñưa vào tiêm phòng ñại trà bảo vệ ñàn lợn Vacxin Phó thương hàn lợn vô hoạt là loại vacxin sản xuất bằng công nghệ lên men sục khí tiên tiến ñạt hiệu quả phòng bệnh rất cao Tuy nhiên ñể khẳng ñịnh hiệu quả cũng như ñánh giá ñược chất lượng của vacxin sản xuất theo công nghệ mới này chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài: “ Kiểm ñịnh và khảo nghiệm vacxin phó thương hàn lợn. .. ở lợn từ 2- 4 tháng tuổi Bệnh này ñã ñược các nhà khoa học trong và ngoài nước nghiên cứu và có biện pháp phòng chống bằng cách tiêm vacxin phòng bệnh, tại Việt nam ñã có nhiều loại vacxin phòng bệnh hiệu quả Xí nghiệp thuốc Thú y Trung ương là ñơn vị sản xuất và cung ứng nhiều loại vacxin trong ñó có 2 loại vacxin phòng bệnh phó thương hàn lợn là vacxin Phó thương hàn lợn nhược ñộc ñông khô và vacxin. .. thạch máu 24 giờ (hình ảnh 3 18 minh hoạ) 18 2.4 Sơ ñồ phân lập và giám ñịnh Salmonella 20 2.5 Lợn mắc bệnh Phó thương hàn 32 2.6 Các tổn thương ở ruột già của lợn mắc bệnh Phó thương hàn 33 4.1 Tóm tắt qui trình sản xuất vacxin PTH lợn bằng công nghệ lên men sục khí 4.2 48 ðường biểu diễn ñộ dài miễn dịch của 5 lô vacxin phó thương hàn lợn vô hoạt Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa... lợn vô hoạt 1.2 Mục ñích yêu cầu của ñề tài - Kiểm nghiệm các chỉ tiêu kỹ thuật của vacxin: an toàn, vô trùng, hiệu lực - Xác ñịnh ñược ñộ dài miễn dịch của vacxin - ðánh giá ñược quy trình bảo quản vacxin - Ứng dụng vacxin vào thực tế 1.3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài Qua việc kiểm ñịnh và khảo nghiệm vacxin chúng tôi có thể ñánh giá ñược hiệu quả phòng bệnh của vacxin ñối với vật nuôi và. .. ñộng bằng vacxin chua tốt Các ổ dịch bệnh Lở mồm long móng, hội chứng PRRS, Phó thương hàn lợn … gây thiệt hại lớn trên ñàn lợn là ñiều cảnh báo cho chúng ta về mối nguy hại của dịch bệnh trong chăn nuôi lợn Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp…………… 1 Phó thương hàn lợn là một trong các bệnh truyền nhiễm gây thiệt hại lớn trên ñàn lợn, bệnh xảy ra hàng năm và chủ yếu... vật nuôi và xác ñịnh ñược ñộ dài miễn dịch ñể từ ñó ñưa ra ñược lịch tiêm phòng vacxin phó thương hàn lợn cho vật nuôi tốt nhất, nâng cao hiệu quả phòng bệnh phó thương hàn cho vật nuôi ðánh giá sự tác ñộng của quy trình bảo quản ñến chất lượng của vacxin ñể ñưa ra các khuyến cáo về cách bảo quản ñảm bảo tốt chất lượng vacxin Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……………... S.typhi Vàng ðỏ - + S.paratyphi A Vàng ðỏ - - S.paratyphi B Vàng ðỏ + ++ E.coli Vàng Vàng + - 2.1.10.2 Giám ñịnh Salmonella Với Salmonella phải làm phản ứng sinh hoá trước, sau ñó mới làm phản ứng huyết thanh vì Salmonella có rất nhiều loại và biến chủng nên rất khó hướng ngay vào một chủng nào * Phản ứng sinh hoá Dùng khuẩn lạc ñiển hình trên môi trường phân lập (SS, EMB…) - Cấy vào thạch mềm kiểm tra... với thionat Iod và Iodua kali sinh ra natri tetrathionat giúp Salmonella phát triển và kìm hãm E.coli; Iod kìm hãm các tạp khuẩn, lục sáng ức chế sự phát triển của vi khuẩn Gram dương và E.coli Chế môi trường bằng cách trộn các thành phần của môi trường với nhau, lắc ñều cho tan, lọc vô trùng, nếu không lọc vô trùng thì phải pha chế thật vô trùng, sau pha chế, ñể tủ ấm 48 giờ, nếu vô trùng ñem ñóng... xâm nhập vào cơ thể vật chủ và gây bệnh * Khả năng xâm nhập và nhân lên Nhờ yếu tố này vi khuẩn mới xuyên qua ñược lớp màng nhày của ruột xâm nhập vào tế bào biểu mô Khả năng xâm nhập vào tế bào Eukaryota và vào lớp mucosa ñường ruột là ñặc tính của một số chủng Salmonella cường ñộc Vi khuẩn Salmonella có 13 protein giúp vi khuẩn xâm nhập Các biến chủng của Salmonella không có khả năng xâm nhập vào tế... nhu cầu thực phẩm và ñảm bảo chất lượng cho người tiêu dùng và xuất khẩu Tỷ trọng chăn nuôi trong nông nghiệp ñến năm 2020 ñạt trên 42% trong ñó năm 2010 ñạt khoảng 32% và 38% vào năm 2015 ðảm bảo an toàn dịch bệnh và vệ sinh an toàn thực phẩm, khống chế có hiệu quả dịch bệnh trong chăn nuôi ðối với chăn nuôi lợn quyết ñịnh cũng ñịnh hướng ñến năm 2020 phát triển nhanh quy mô ñàn lợn ngoại theo hướng