TRƯỜNG ĐẠI HỌC s PHẠM HÀ NỘI KHOA HÓA HỌC NGUYỄN THỊ THU HOÀI NGHIÊN CỨU PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT COUMARIN TỪ CÂY CHÒI MÒI CHUA (ANTIDESMA ACIDUM) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC • • • • C huyên ngành: H ữu N g ò i hư óng dẫn khoa học P G S.T S P H A N V Ă N K IỆ M Hà Nội - 2015 Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp L Ờ I CẢ M Ơ N Khóa luận tốt nghiệp hoàn thành phòng Nghiên cứu cấu trúc, Viện Hóa sinh biến-Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ ViệtNam Trước tiên, em xin chân thành cảmơn PGS TS PHAN VẨN KIÊM anh chị hướng dẫn Viện Hóasinh biển-Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam nhiệt tìnhhướng dẫn em suốt trình thực khóa luận tốt nghiệp.Với tấtcả lòng kính trọng lòng biết ơn chân thành, em xin cảm ơn thầy giáoPGS.TS NGUYỄN VẢN BẰNG người tận tình, chu đáo dạy bảo em trongsuốt năm học trường hoàn thiện khóa luận Em xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa Hóa Học-Trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ, dạy dỗ em quátrình học tập trường Xin cảm ơn tất bạn bè động viên giúpđỡ em trình học tập làm khóa luận Trong trình làm khóa luận tốt nghiệp cốgắng chắn tránh thiếu sót.Vì emkính mong nhận ý kiến đóng góp, bảo quý thầy cô Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 thảng 04 năm 2015 Sinh viên NGUYỀN THỊ THƯ HOÀI NCt ỉ ĩ Y P N T H Ĩ T H Ĩ Ỉ H i l À J K M A - Khnn Hnn Hnr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội D A N H M ỤC CÁC C H Ữ V IẾ T TẮ T [a]D Độ quay cực specific optical Rotation 1JC-NMR Phô cộng hưởng từ hạt nhân Cacbon 13 Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy 'H-NMR Phố cộng hưởng từ hạt nhân proton Proton Magnetic Resonance Spectroscopy 'H-'H 'H-'H Chemical Shift Correlation Spectroscopy co sy 2D-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hai chiều Two-Dimensional NMR cc Sắc DEPT Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer EI-MS Phố khối lượng va chạm electron kỷcột Column Chromatography Electron Impact Mass Spectroscopy FAB-MS Phồ khối lượng bắn phá nguyên tử nhanh Fast Atom Bombardment Mass spectrometry HMBC Heteronuc lear Multiple Bond Connectivity HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence HR-FAB-MS Phổ khối lượng bắn phá nguyên tử nhanh phân giải cao High Resolution Fast Atom Bombardment Mass spectrometry IR Phồ hồng ngoại Infrared Spectroscopy Me Nhóm metyl MS Phổ khối lượng Mass Spectroscopy NOESY Nucler Overhauser Effect Spectroscopy TLC Sắc kỷ lóp mỏng Thin Layer Chromatography NCtT J Y F N t h ĩ T H ỈĨ HilẢ I K M - Khnn Hnn H nr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp M Ụ C LỤC M Ở Đ Ẩ U .1 CHƯƠNG TỒNG QUAN 1.1 Những nghiên cứu tổng quan Chòi mòi c h u a 1.1.1 Thực vật học 1.1.2 Mô tả 1.1.3 Nguồn gốc phân bố 1.1.4 Thành phần hóa h ọ c 1.1.5 Hoạt tính sinh h ọ c 16 1.1.6 Công dụng 17 1.2 Tình hình nghiên cứu chi Antidesma Việt Nam 18 1.3 Lớp chất coumarin, thành phần hóa học có chòi mòi chua 20 1.3.1 Giới thiệu chung 20 1.3.2 Đặc điểm cấu trú c 21 1.4 Các phương pháp chiết mẫu thực vật 22 1.4.1 Chọn dung môi chiết 22 1.4.2 Quá trình chiết 24 1.5 Các phương pháp sắc kí phân lập hợp chất hữu c 25 1.5.1 Đặc điểm chung phương pháp sắc kí 25 1.5.2 Cơ sở phương pháp sắc kí 26 1.5.3 Phân loại phương pháp sắc kí 26 NCt ỉ ĩ Y P N T H Ĩ T H Ĩ Ỉ H i l À J K W A - Khnn Hnn H nr Trường Đại học Sưphạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp 1.6 Một số phương pháp hoá lý xác định cấu trúc củacác hợp chất hữu 31 1.6.1 Phổ hồng ngoại (Infrared Spectroscopy, IR ) 31 1.6.2 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NuclearMagnetic Resonance Spectroscopy NM R) 32 CHƯƠNG ĐỒI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 35 2.1 Mau thực vật 35 2.2 Phân lập họp chất 35 2.2.1 Sắc kí lớp mỏng (TLC) 35 2.2.2 Sắc kí lớp mỏng điều chế 35 2.2.3 Sắc kí cột (C C ) 35 2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 36 2.3.1 Điếm nóng chảy (M p) 36 2.3.2 Phổ cộng hưởng từ hạt n h ân 36 2.4 Hóa chất thiết b ị 36 CHƯƠNG THỤC NGHIỆM .37 3.1 Phân lập họp chất 37 CHƯƠNG KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 39 4.1 Xác định cấu trúc hợp chất 39 4.2 Xác định cấu trúc hợp chất 43 4.3 Xác định cấu trúc chất 49 NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ th ỉỉ HilÀ I K M A - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sưphạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp D A N H M Ụ C CÁC B Ả N G B IÈ U , H ÌN H VẼ VÀ s ĐÒ Hình 1.1: Cây Chòi mòi ch u a Hình 3.1: Sơ đồ phân lập chất từ Chòi mòi chua 38 Hình 4.1: cấu trúc phân tử họp chất 39 Hình 4.2: Phổ ^-N M R hợp chất 39 Hình 4.3: Phổ 13C-NMR họp chất 40 Hình 4.4: Phổ DEPT hợp chất 40 Hình 4.5: Phổ hai chiều HSỌC hợp chất 42 Hình 4.6: phổ HMBC hợp chất 42 Hình 4.7: cấu trúc phân tử hợp chất 43 Hình 4.8: Phổ ^-N M R hợp chất 44 Hình 4.9: Phổ 13C-NMR họp chất .45 Hình 4.10: Phổ DEPT hợp chất 46 Hình 4.11: Phố HMBC họp chất .47 Hình 4.12: Phổ HSỌC hợp chất 47 Hình 4.13: cấu trúc phân tử hợp chất .49 Hình 4.14:Phổ 'H-NMR hợp chất 50 Hình 4.15: phổ I3C-NMR hợp chất 50 Hình 4.16: Phổ DEFT hợp chất 51 Hình 4.17:Phổ HMBC họp chất 51 Hình 4.18:PHỔ HSQC họp chất 52 Bảng 4.1: Số liệu NMR hợp chất số liệu tham k h ảo 43 Bảng 4.2: số liệu NMR hợp chất số liệu tham k h ảo 48 Bảng 4.3: số liệu NMR hợp chất số liệu tham k h ảo 52 NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ th ỉỉ HilÀ I K M A - Khnn Hnn Hnr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội M Ở ĐẦU Nước ta có khí hậu thảm thực vật phong phú đa dạng.Dân tộc Việt Nam có truyền thống sử dụng loài thảo mộc làm thuốc chữa bệnh Những năm gần xu hướng tìm kiếm số hoạt chất loài thảo mộc có tác dụng chữa bệnh ngày tăng vàthu hút nhà khoa học nghiên cứu Theo số liệu thống kê thảm thực vật Việt Nam có 12000 loài, số có 3200 loài sử dụng làm thuốc y học dân gian [ 1] Từ xưa đến nay, thuốc dân gian đóng vai trò quan trọng việc chăm sóc sức khỏe cho người.Ngày hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phân lập từ cỏ ứng dụng nhiều ngành công nghiệp, nông nghiệp chăm sóc sức khỏe người Chúng sử dụng làm thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phấm mỹ phâm Mặc dù công nghiệp tống hợp hóa dược ngày phát triển mạnh mẽ, tạo biệt dược khác sử dụng công tác phòng, chữa bệnh, nhờ giảm tỷ lệ tử vong nhiều song đóng góp thảo dược không mà chỗ đứng Y học Các thảo dược tiếp tục dùng nguồn nguyên liệu trực tiếp, gián tiếp cung cấp chất đầu cho công nghiệp bán tống họp nhằm tìm kiếm dược phẩm cho việc điều trị chứng bệnh thông thường bệnh nan y Trong số loài cần quan tâm nghiên cứu có Chòi mòi chua(Antidesma acidum).VỞ\ mục đích nghiên cứu thành phần cunmarin có Chòi mòi chua xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập.Từ tạo sở cho việc nghiên cứu lĩnh vực tìm kiếm phương thuốc giải thích tác dụng chữa bệnh NCt ỉ ĩ Y P N t h ĩ t h ỉỉ h íìà ĩ K I 7Á - Khnn Hnn Hnr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội thuốc cổ truyền Việt Nam Đây yếu tố qua trọng có ý nghĩa to lớn phát triển y học Nhiệm vụ đề tài: 1.Thu hái mẫu Chòi mòi chua, xử lí mẫu Phân lập họp chất Xác định cấu trúc họp chất phân lập NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ T H ỈĨ HilẢ I K W A - Khnn Hnn H nr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội C H Ư Ơ N G T Ố N G Q U A N 1.1 Những nghiên cứu tổng quan Chòi mòi chua 1.1.1 Thực vật học Phân loại thực vật học Chòi mòi chua xác định sau: Giới : Plantae Bộ : Malpighiales Họ :Phyllanthaceae Tổng :Antidesmeae Chi :Antidesma Loài :Acidum 1.1.2 Mô tả - Thân: Cây gỗ nhỏ cao 5-10 m Nhánh cong queo, có lông thưa, sau nhẵn có màu xám nhạt - Lá: Lá hình bầu dục hay hình thoi hẹp bầu dục tròn, có hình tim, mặt đầy lông nhung - Hoa: Cụm hoa hình chuỳ gồm 3-8 hay nách phía - Hình 1.1: Cây chòi mòi chua Hoa đực không cuống có 4-5 đài; 4-5 nhị có bao phấn hình chữ U; nhuỵ lép có lông - Hoa gần không cuống, có đài; bầu có lông mềm, 3-4 đầu nhuỵ - Quả: Quả tròn, to 4,5mm, hình bầu dục dẹt Ra hoa tháng 4-6[l] NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ T H ỈĨ HilẢ I K W A - Khnn Hnn H nr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 1.1.3 Nguồn gốc phân bố Chi Chòi mòi (Antidesma) có nguồn gốc từ vùng Đông Nam Á với khoảng 100 loài, riêng Thái Lan có đến 18 loài Trong Hệ thống phân loại APG (sinh học phân tử) chòi mòi xếp vào Họ Diệp hạ châu (Phyllanthaceae) Họ Diệp hạ châu (danh pháp khoa học: Phyllanthaceae) họ thực vật, trước coi phân họ Phyllanthoideae họ Đại kích (Euphorbiaceae)[l] Phân họ Phyllanthoideae chia tách từ họ Euphorbiaceae theo kết phân tích dòng dõi tiến hóa Họ bao gồm 0 tông, 55-59 chi khoảng 1.725-1.745 loài thân gỗ, bụi thân thảo, phân bố khu vục nhiệt đới[18,29] Chi Phyllanthus, chi lớn thực vật có hoa, chứa 0 loài, hay nửa số loài họ [18] Họ hàng gần gũi coi họ Picrodendraceae[20] Họ Phyllanthaceae đông đảo số lượng khu vực nhiệt đới, với nhiều loài khu vực ôn đới phía nam, loài sống xa phía bắc tới miền trung khu vục ôn đới phía bắc[27] Trong nhiều hệ thống phân loại trước Chi Antidesma gọi với nhiều tên đồng nghĩa khác: > Bestram Adans > Coulẹịia Dennst > Minutalia Fenzl > Rhytis Lour > Rubina Noronha > Stiỉago L Đa số Hệ thống trước xếp chi vào Họ Thầu dầu (Euphorbiaceae) Trên giới có khoảng 100 loài, phân bố vùng nhiệt đới cận nhiệt đới châu Á, châu ú c, đảo thuộc Thái Bình NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ T H ĨĨ HilẢ I K I 7Á - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Bảng 4.1 Số liệu NMR hợp chất số liệu tham khảo c ffôcm ôc3’1 DEPT ỏHa,D(mult., J = Hz) HMBC (H—>C) 160.7 160.45 c 111.8 109.98 CH 6.16 (d, 10.0) 2, 4a 138.6 139.89 CH 8.16 (d, 10.0) 2, 5, 8a 4a 106.7 103.50 c - 154.2 151.85 c - 119.9 112.88 c - 161.3 161.11 c - 95.0 8a 154.8 7- OMe 55.8 56.12 c h 3.83 (s) 1’ 22.5 21.73 3.28 (d, 7.0) 5,6,7, 2', 3' 2' 121.9 122.46 CH 5.08 (t, 7.0) \4 ' 3' 131.5 130.57 4' 17.6 17.64 c h 1.60 (s) 2', 3', 5' 5' 25.5 25.44 c h 1.70 (s) \ 3', 4’ 91.56 CH 154.25 c ch2 c - 6.57 (s) 4a, 6, 7, 8a - - ađotrong DMSO-d6, 125 MHz, c500 MHz ' ỗcủơ hợp chât toddaculin 4.2 Xác định cấu trúc họp chất Hình 4.7: Cấu trúc phân tử hợp chất n g ĩĩy Pn t h ĩ THỈĨ HilÀ ỉ 43 K M A - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sưphạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Trên phồ proton hợp chất quan sát thấy tín hiệu proton olefin có tín hiệu đặc trung cho nối đôi nằm vòng độ chuyển dịch hóa học 7,85 (1H, d, J = 9,5 Hz), 6,57 (1H, d, J= 10,0 Hz), 6,20 (1H, d, J = 9,5 Hz) 5,71 (1H, d, J = 10,0 Hz); 6,54 (1H, s) Ngoài quan sát thấy tín hiệu nhóm methoxy 3,87 (3H, s) tín hiệu methyl bậc Hình 4.8: Phổ 'H-NMR hợp chất Trên phô cacbon DEPT nhận biết 15 tín hiệu cacbon với tín hiệu cacbon bậc 4, tín hiệu cacbon olefin, tín hiệu cacbon nhóm methyl tín hiệu cacbon nhóm methoxy Dựa vào độ dịch chuyển hóa học kết hợp so sánh với số liệu phố họp chất xanthoxyletin [32] thấy hoàn toàn phù hợp; cho phép dự đoán hợp chất xanthoxyletin.Sự sai khác số vị trí khang định lại dựa phố chiều HSQC HMBC.Các tín hiệu proton gán với tín hiệu cacbon tương ứng dựa việc phân tích phổ chiều HSQC Trên phổ chiều HMBC quan sát thấy tương tác proton nhóm methyl 1,47 (H-4) với tín hiệu cacbon 77,47 (C-3) 130,53 (C-2) Tương tác proton olefin 5,71 (H-2) với tín hiệu cacbon 77,47 (C-3) 111,28 (C-6 ) Tương tác proton 6,57 (H-l) với tín hiệu cacbon 77,47 (C-3), 152,79 (C-5) 157,51 (C-7); tương tác proton 7,85 (H-4) với tín hiệu cacbon 152,79 (C-5), 155,5 l(C- a) NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ th ỉỉ HilÀ I 44 K M A - Khnn Hnn Hnr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học s l i ’phạm Hà Nội 160,98 (C-2) Tín hiệu proton nhóm methoxy với tín hiệu cacbon 152,79 (C5) cho phép khẳng định nhóm methoxy gắn với cacbon C-5 Từ kết phân tích khắng định hợp chất xanthoxyletin có công thức phân tử C 15H ]4 4, M= 258 220 200 180 160 140 Hình 4.9:Phổ NCt ỉ ĩ Y P N t h ĩ t h ĩĩ n o ỉ 120 ÌOO 13C-NMR 80 60 40 20 o hợp chất 45 K W A - Khnn Hnn H nr Truờng Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tắt nghiệp DEPT90 110 170 160 ISO 140 130 120 110 100 90 80 70 «0 so 40 30 20 ppa DEPT135 CHÍCH3 CH2 , - Ỵ - T - r - -r - r110 170 ICO ISO 140 130 120 UI T " 100 pf* C13CPD iL —T T I T .T .I T .> .T— IN 170 ICO 150 140 130 120 110 100 Pf* Hình 4.10:Phô DEPT họp chất NCt ỉ ĩ Y P N t h ĩ th ĩỉ h o ỉ K I 7Á - K h n n H n n H n r Truờng Đại học Sư phạm Hà Nội 111.1 o 11 Khóa luận tắt nghiệp 11 • • •* m • ♦ — i * — • • — • • ♦ • * Hình 4.11:Phổ HMBC hợp chất2 IJ, u - — — — ĩ é s s s i s s ổ s i s ố s s s ĩ Hình 4.12:Phổ HSQC họp chất NCt ỉ ĩ Y P N t h ĩ th ĩỉ h o ỉ 47 K M - Khnn Hnn H nr Truờng Đại học Su phạm Hà Nội Khóa luận tắt nghiệp Bảng 4.2SỐ liệu NMR hợp chất số liệu tham khảo c *ÕC[1] ôcaJ DEPT ỏHa,D(irnilt., J = Hz) HMBC (H—>C) 160.9 160.98 c - 112.2 112.25 CH 6.20 (d, 9.5) 2, 4a 138.5 138.48 CH 7.85 (d, 9.5) 2, 5, 8a 4a 107.2 107.30 c - 152.7 152.79 c - 111.2 111.28 c - 157.4 157.51 c - 100.6 100.73 CH 6.54 (s) 8a 155.4 155.51 5- OMe 63.5 63.58 1' 115.7 115.74 2’ 130.5 3’ 77.4 77.47 c - 4’ 28.2 28.06 ch3 1.47 (s) \ 3’, 5’ 5’ 28.2 28.06 ch3 1.47 (s) 2’, 3', 4’ 4a, 6, 7, 8a c - ch3 3.87 (s) CH 6.57 (d, 10.0) ,7 ,3 ’ 130.53 CH 5.71 (d, 10.0) 6, 3’, 4’, 5’ “đo CDC13, 125 MHz, c500 MHz.ô cùa hợp chât xanthoxyletin [ỉ] NCt ỉ ĩ Y P N t h ĩ th ĩỉ h o ỉ 43 K M - Khnn Hnn H nr Trường Đại học Sưphạm Hà Nội 4.3 Khóa luận tốt nghiệp Xác định cấu trúc chất Phổ chiều (proton, cacbon DEPT) hợp chất 3có dạng tương tự hợp chất Sự sai khác dễ nhận thấy phổ hợp chất chuyển dịch phía trường mạnh tín hiệu cacbon metin 91,29 (so với 100,73 chất 2) tín hiệu nhóm methoxy 55,75 (so với 63,58 chất 2) Kết hợp so sánh với số liệu phổ hợp chất alloxanthoxyletin [15], thấy hoàn toàn phù họp vị trí tương ứng.Các tín hiệu proton gán với tín hiệu cacbon tương ứng dựa việc phân tích phố chiều HSQC (bảng 3) Trên phổ chiều HMBC quan sát thấy tương tác tín hiệu proton nhóm methyl 1,46 (H-4', H-5') với tín hiệu cacbon 77,52 (C-3') 127,32 (C-2') Tương tác proton olefin 5,55 (H-2') với tín hiệu cacbon 77,52 (C-3') 106,28 (C-6 ) Tương tác proton 6,59 (H-l*) với tín hiệu cacbon 77,53 (C-3'), 106,28 (C-6 ), 149,98 (C-5) 158,05 (C-7); tương tác tín hiệu proton nhóm methoxy (3,86) với tín hiệu cacbon 158,05 (C-7) cho phép khẳng định vị trí nhóm methoxy đính trực tiếp vào C-7 Từ kết phân tích khang định hợp chất alloxanthoxyletin có công thức phân tử c |5H |4 O , M= 258 NCt ỉ ĩ y P N HilÀ I t h ĩ th ỉỉ 49 K M A - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hình 4.14: Phổ 'H-NMR hơD chất Hình 4.15: Phổ NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ THĨ Ĩ HilẢ I 13C-NMR hợp chất 5(1 K M A - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp D E PT 90 180 170 160 ISO Ỉ4fl 130 120 110 100 90 80 70 60 SO 40 30 20 pọm ICO ISO 14Q 130 120 ỉ 10 100 90 80 70 60 50 40 30 20 ppm D E PT 135 CH iCH CH2 180 170 C13C PD ill 1 140 130 Hình 4.16 Phô DEPT họp chẩt Hình 4.17: Phô HMBC họp chất n g ỉĩy P n t h ỉ t h ĩ ĩ HílÀ ĩ 51 K M Á - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 1 1 1 Khóa luận tốt nghiệp _ L - — - — — 0 0 0 0 0 0 0 Hình 4.18: Phổ HSQC hợp chất Bảng 4.3 Số liệu NMR hợp chất số liệu tham khảo c ÔCÍM DEPT ôhíi,d(muit., / = Hz) HMBC (H—>C) ffÔC[l] 161.2 161.17 c - 111.0 110.91 CH 6.14 (d, 9.5) 2, 4a 138.4 138.34 CH 7.93 (d, 9.5) 2, 5, 8a 4a 102.4 103.47 c - 150.0 149.98 c - 106.3 106.28 c - 158.1 158.05 c - 91.3 91.29 CH 6.32 (s) 8a 155.7 155.67 c - 7- OMe 55.8 55.75 ch3 3.86 (s) 1' 115.9 115.86 CH 6.59 (d, 10.0) 5, 6, 7, 3' 2’ 127.4 127.31 CH 5.55 (d, 10.0) 6, 3’, 4', 5’ 3' 77.8 77.52 c - 4' 27.7 27.71 ch3 1.46 (s) 2', 3’, 5' 5’ 27.7 27.71 ch3 1.46 (s) \ 3', 4' 6, 7, 4a, 8a ađotrong CDCI3, ì25M H z, ‘500 MHz ỗ hợp chât alloxanthoxyletin [1] NC t ỉ ĩ y P N t h ĩ T H Ỉ Ĩ H i l Ả I K M A - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sưphạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp K ẾT L U Ậ N Bằng phương pháp sắc ký kết hợp, ba hợp chất 5- demethyltoddaculin (1), xanthoxyletin (2) alloxanthoxyletin (3) phân lập từ Antidesma Acidum cấu tróc hóa học chúng xác định phương pháp phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều hai chiều NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ th ỉỉ HilÀ I K M A - Khnn Hnn Hnr Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội T À I LIỆ U T H A M K H Ả O [1] Võ Văn Chi, 1993 Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Trẻ, tập [2] Phạm Thế Chính cộng Thành phần hóa học chòi mòi tía (.Antidesma bunius L.), Tạp chí Khoa học Công nghệ, Tập 90, 21-24 ( 2012) [3] Trần Đình Sơn, Vũ Thị Kim Ngọc, Nguyễn Thị Hồng Điệp, Phan Thanh Hải (2008) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân, Quyển 1, Nxb Y Hà Nội [4] Trần Đình Sơn, Vũ Thị Kim Ngọc, Nguyễn Thị Hồng Điệp, Phan Thanh Hải (2008) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân, Quyển 2, Nxb Y Hà Nội [5] Adegoke s A., Agada F D., and Ogundipe L o , 2013 Antibacterial activity of methanol and ethanol leaf extracts of Antidesma venosum and Lannea barteri.Afr J Microbiol Res., 7(27): 3442-3447 [6 ] Arbain D., and Taylor w c , 1993 Cyclopeptide alkaloids from Antidesma m on tana Phytochemistry, 33(5): 1263-1266 [7] Bringmann G., Rischer H., Wohlfarth M., and Schlauer J., 2000 Biosynthesis of Antidesmone in Cell Cultures of Antidesma membranaceum (Euphorbiaceae): An Unprecedented Class of GlycineDerived Alkaloids J Am Chem Soc., 122(41): 9905-9910 [8] Buske A., Busemann s., Muhlbacher J., Schmidt J., Porzel A., Bringmann G., and Adam G., 1999 Antidesmone, a novel type isoquinoline alkaloid from Antidesma membranaceum (Euphorbiaceae) Tetrahedron, 55(4): 1079-1086 [9] Buske A., Schmidt J., Porzel A., and Adam G., 2001 Alkaloidal, megastigmane and lignan glucosides from Antidesma membranaceum (Euphorbiaceae) Eur J Org Chem., 18: 3537-3543 NCtTJYFN T H Ĩ T H Ỉ Ĩ H i l À I 54 K M Á - Khnn H nn H n r Trường Đại học Sư phạm Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp [10] Boyom F F., Assembe E z., A Zollo P H., Agnaniet H., Menut C., and Bessiere J M., 2003 Aromatic plants of tropical central Africa Part XLII Volatile components from Antidesma laciniatum Muell Arg var laciniatum growing in Cameroon Flavour Fragrance /.,18(5): 451-453 [11] Chen Y C., Cheng M J., Lee s J., Dixit A K., Ishikawa T., Tsai I L., and Chen I s., 2004 Coumarinolignans from the root of formosan Antidesma pentandrum var barbatum Helv Chim Acta,87(11): 28052811 [12] Chen Y C., Cheng M J., Lee s J., Tsai I L., and Chen I s., 2007 Chemical constituents from the root of Antidesma pentandrum var barbatum J Chin Chem Soc (Taipei, Taiwan), 54: 1325-1332 [13] Djouossi M G., Tebou p L F., Mabou F D., Ngnokam D., Tapondjou L.A., Harakat D., and Nazabadioko L V., 2014 Chevalierinoside A: A new isoflavonoid glycoside from the stem bark of Antidesma chevalieri Beille (Euphorbiaceae) B ull Chem Soc Ethiop., 28: 309-314 [14] Elya B., Forestrania R C., Ropi M., Kosela s., Awang K., Omar H., and Hadi A H A., 2014 The new alkaloid from Antidesma cuspidatum M.A Rec Nat Prod., 8(4):342-347 [15] Eleni Melliou, Prokopios magiatis, Sofia Mitaku, Alexios- Leandros Skaltsounis, Efrosini Chinou, and Ioanna Chinou, Natural and synthetic 2,2- dimethylpyranocoumarins with antibacterial activity, J N p, 2005, 68, 78-82 [16] Garain A K., Chakravarti N N., and Chakrabaitty T., Chemiealinvestigation of Antidesma ghesaembilla Gaertn 1973 Bull Calcutta Sch Trop Med, 21(2): 26 N G U Y E N T H Ĩ THỈĨ N il À Ỉ K M A - Khnn Hnn H n r Truong Dai hoc Su pham Ha Noi Khóa luận tốt nghiệp [17] Gargantiel M F., and Ysrael M C., 2014 Antioxidant activity andhypoglycemic potential of Antidesma ghasembilla Gaertn (Phyllantaceae) International J Sci Tec Resreach., 3(3): 422-431 [18] Hashendra S Kathriarachchi, Petra Hoffmann, Rosabelle Samuel, Kenneth J Wurdack, and Mark W Chase (2005) “Molecular phylogenetics of Phyllanthaceae inferred from five genes (plastid atpB, matK, 3'ndhF, rbcL, and nuclear PHYC)” Molecular Phylogenetics and Evolution 36 (1): 112-134 doi:10.1016/j.ympev.2004.12.002 [19] J O Kokwaro, I Messana, C Galeffi, M Patamia and G B M Bettolo.,1983 Research on African Medicinal Plants V.l Coumarins from Zanthoxylum usambarense Planta medica, Vol 47, 251-253 [20] Kenneth J Wurdack, Charles C Davis 2009 "Malpighiales phylogenetics: Gaining ground on one of the most recalcitrant clades in the angiosperm tree of life." American Journal of Botany 96(8): 1551 1570 [21] Kikuchi H., Tensho A., Shimizu I., Shiokawa H., Kuno A., Yamada S.,Fujiwara T., and Tomita K., 1983 Lupeolactone, a new |3-lactone from Antidesma pentandnim Merr Chem Lett.,4: 603-606 [22] Mahomoodally M F., Fakim A G., and Subratty A H., 2006 Stimulatoryeffects of Antidesma madagascariense on D-glucose, Ltyrosine, fluid and electrolyte transport across rat everted intestine, comparable to insulin action in vitro Br JBiom ed Sci,63(1): 12-17 [23] Magadula J J., Mulholland D A., and Crouch N R., 2012 The isolation of important biosynthetic intermediate; Presqualene alcohol and Its acetate derivative from Antidesma Venosum.,J Adv Sci Res, 3(4): 32-35 N f r J J Y F N T H I T M ỈỈ HÍ)À ỉ S6 K M A - Khnn H nn H n r Truong Dai hoc Su pham Hä Noi Khóa luận tốt nghiệp [24] Maria S., Islam F., Qais N., and Hasan C M., 2-13 Isolation of vomifoliol: a megastigmane from leaves of Antidesma ghaesembilla Asian J Chem.,25(6): 3533-3534 [25] Mwangomo D T., Moshi M J., and Magadula J J., 2012 Antimicrobialactivity and phytochemical screening of Antidesma venosum root and stem bark ethanolic extracts Int J Res Phytochem Pharma col., 2(2): 90-95 [26] Nuengchamnong N., and Ingkaninan K., 2009 On-line HPLC-MSDPPH assay for the analysis of phenolic antioxidant compounds in fruit wine: Antidesma thwaitesianum Muell Food Chem., 118(1): 147-152 [27] Petra Hoffman 2007 "Phyllanthaceae" tr 250-252 Trong: Vernon H Hey wood, Richard K Brummitt, Ole Seberg, Alastair Culham Flowering Plant Families of the World Firefly Books: Ontario, Canada [28] Puangpronpitag D., Areejitranusorn P., Boonsiri P., Suttajit M., andYongvanit P., 2008 Antioxidant activities of polyphenolic compounds isolated from Antidesma thwaitesianum Müll Arg seeds and marcs JF ood Sei., 73(9):C648-53 [29] Rosabelle Samuel, Hashendra S Kathriarachchi, Petra Hoffmann, Michael H.J Barfuss, Kenneth J Wurdack, Charles C Davis, and Mark W Chase 2005 "Molecular phylogenetics of Phyllanthaceae: evidence from plastid matK and nuclear PHYC sequences." American Journal of Botany 92(1): 132-141 [30] Rizvi S H., Shoeb A., Kapil R S., and Popli S P., 1980 Two diuretic triterpenoids from Antidesma menasu Phytochemistry?, 19(11): 2409-2410 NCtTJYFN T H Ĩ T H Ỉ Ĩ N i l À Ỉ 57 K M - Khnn Hnn H n r [...]... glucoside [9]; từ rễ loài A Pentandrum đã phân lập được hai phenyl alkaloid [ 1 2 ]; từ vỏ cây Ả cuspidatum đã phân lập được hai alkaloid có hoạt tính ức chế tế bào L1210 [16] - Các họp chất coumarinolignan Từ rễ loài A pentandrum đã phân lập được một loạt các coumarin [11,12] - Các họp chất megastigmane - Các họp chất lignan glucoside - Các họp chat polyphenol Các nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt... phô biến là: - Cây chòi mòi thường (Antidesma ghaesembilla) - Cây chòi mòi lá tím {Antidesma bunius (L.) Spreng) - Cây chòi mòi bụi (.Antidesma firuticosa (Lour) Muell-Arg) 1.1.4 Thành phần hóa học Trên thế giới có một số nghiên cứu về hóa học và hoạt tính sinh học chi Antidesma Nghiên cứu về thành phần hóa học cho thấy các cây thuộc chi này chứa các chất thuộc nhóm alkaloid(đặc biệt ở vỏ cây chứa alkaloid... Trong đó hợp chất 3 là hợp chất mới lần đầu tiên được phân lập từ chi antidesma mọc tại Việt Nam [2] NCt ỉ ĩ y P N t h ĩ T H Ỉ Ĩ H i l À I 18 K M Á - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 Khóa luận tắt nghiệp COOH N G Ỉ Ĩ Y p N t h ỉ T H ĨĨ HilÀ ĩ 19 K I 7Á - Khnn H n n H n r Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 1.3 Khóa luận tắt nghiệp Lóp chất coumarin, thành phần hóa học có trong cây chòi mòi chua. .. dung môi phân cực hơn các hiđrocacbon thế clo Người ta cho rằng các dung môi thuộc nhóm rượu sẽ thấm tốt hơn lên màng tế bào nên quá trình chiết với các dung môi này sẽ thu được lượng lớn các thành phần trong tế bào Trái lại, khả năng phân cực của chlorofrom thấp hơn, nó có thể rủa giải các chất nằm ngoài tế bào Các ancol hoà tan phần lớn các chất chuyển hoá phân cực cùng với các hợp chất phân cực... sắc kí trong phân lập các hợp chất hữu cơ Phương pháp sắc kí (Chromatography) là một phương pháp phố biến và hữu hiệu nhất hiện nay, được sử dụng rộng rãi trong việc phân lập các họp chất hữu cơ nói chung và các họp chất thiên nhiên nói riêng 1.5.1 Đặc điếm chung của phương pháp sắc k í Sắc kí là phương pháp tách, phân tích, phân li các chất dựa vào sự khác nhau về bản chất hấp phụ và sự phân bố khác... Khóa luận tốt nghiệp Năm 1983, H Kikuchi và cộng sự đã phân lập được một hợp chất mới, lupeol lactone (9) và lupeol (10) từ phần trên mặt đất của loài A pentandrum[\7] Năm 1993, D Arbain và cộng sự thông báo đã phân lập được các cyclopeptide alkaloid (14-16) từ loài A montana[20] NMe2 NHMe 14 NHMe 15 16 Năm 1997, ngoài ba amit feruloyl và (-) - syringaresinol, Buske A và cộng sựđã phân lập thành công hợp. .. các hợp chat dime, 8 , 8 -bis- (dihydroconiferyl) - diferuloylate [8 ] NCtT J Y F N t h ĩ T H ỈĨ HilẢ I 7 K M A - Khnn Hnn Hnr Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 Khóa luận tốt nghiệp R= C19H39 R = C20H41 R= C21H43 Năm 1999, A Buske và cộng sự đã phân lập được một họp chất mới antidesmone (một alkaloid dạng isoquinoline) (17) từ cây A.membranaceum [8 ] Hợp chất này được nghiên cứu quá trình sinh tổng hợp. .. Nam Tại Việt Nam, các công trình nghiên cứu về thành phần hóa học cũng như hoạt tính sinh học của loài này còn khá khiêm tốn mặc dù trong đông y đã sử dụng cây chòi mòi tía làm thuốc từ lâu.Cho đến nay, các nghiên cứu về hóa học cũng như hoạt tính sinh học từ các chất chiết xuất được từ các loài thuộc chi AntidesmatạiViệt Nam vẫn còn nhiều hạn chế, mới chỉ mang tính chất thăm dò, chưa đưa ra hướng ứng... độc), flavone, coumarinolignan, megastigmane, lignan glucoside, benzopyrannone, axit íerulic và đặc biệt rất giàu các polyphenol, ngoài ra còn có tinh dầu, vitamin Trong đó: Các họp chất nhóm alkaloid chiếm tỉ trọng lớn Các công bố nghiên cứu về thành phần hóa học của chi Antidesma cho thấy, hầu hết các loài thuộc chi này đều chứa các họp chất nhóm alkaloid - Các họp chất alkaloid: Các họp chất alkaloid...Khóa luận tốt nghiệp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 Dương và châu Phi Ớ Việt Nam có 26 loài, thuộc 2 phân chi, đó có khoảng 6 6 nhánh, trong loài đặc hữu Các loài trong Chi Chòi mòi hiện nay phát hiện ở các nước Đông Nam Á, Trung Quốc, Ân Độ, Trung Á và phía Bắc Châu úc Đây là các loài cây mọc hoang dại có thân gổ đa niên cao khoảng 5-10 m, có thể cao đến 15 m Ớ Việt nam cây chòi mòi mọc hoang ... quan tâm nghiên cứu có Chòi mòi chua( Antidesma acidum). VỞ mục đích nghiên cứu thành phần cunmarin có Chòi mòi chua xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập. Từ tạo sở cho việc nghiên cứu lĩnh... Khóa luận tốt nghiệp D A N H M Ụ C CÁC B Ả N G B IÈ U , H ÌN H VẼ VÀ s ĐÒ Hình 1.1: Cây Chòi mòi ch u a Hình 3.1: Sơ đồ phân lập chất từ Chòi mòi chua 38 Hình 4.1: cấu trúc phân. .. nam chòi mòi mọc hoang vùng rừng thưa vùng đồng bằng, có ba loài phô biến là: - Cây chòi mòi thường (Antidesma ghaesembilla) - Cây chòi mòi tím {Antidesma bunius (L.) Spreng) - Cây chòi mòi bụi