BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN VÀ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY LÔNG GIA CẦM CỦA CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS MEGATERIUM V1 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS BÙI THỊ MINH DIỆU SINH VIÊN THỰC HIỆN LÂM KIỀU DIỄM MSSV: 3103948 LỚP: VI SINH VẬT HỌC K36 Cần Thơ, Tháng 12/2013 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC KHẢO SÁT CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN VÀ KHẢ NĂNG PHÂN HỦY LÔNG GIA CẦM CỦA CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS MEGATERIUM V1 CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS BÙI THỊ MINH DIỆU SINH VIÊN THỰC HIỆN LÂM KIỀU DIỄM MSSV: 3103948 LỚP: VI SINH VẬT HỌC K36 Cần Thơ, Tháng 12/2013 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Bùi Thị Minh Diệu Lâm Kiều Diễm DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT LỜI CẢM TẠ -- Tôi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: Ban Giám Hiệu, Ban lãnh đạo Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, tập thể quý Thầy, Cô - trường Đại học Cần Thơ dạy bảo, truyền đạt kiến thức tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập thực luận văn TS Bùi Thị Minh Diệu tận tình hướng dẫn, truyền đạt kinh nghiệm đóng góp ý kiến quý báu suốt trình thực hoàn thành luận văn tốt nghiệp Cô Nguyễn Thị Pha – Cố vấn học tập lớp Vi sinh vật học, khóa 36 – trường Đại học Cần Thơ động viên, an ủi giúp đỡ suốt trình học tập, thực hoàn thành luận văn Tập thể lớp Vi sinh vật học, khóa 36 lớp bạn Công nghệ Sinh học, khóa 36 giúp đỡ trình thực luận văn tốt nghiệp Cuối cùng, vô biết ơn công lao to lớn cha mẹ tạo điều kiện thuận lợi mặt vật chất lẫn tinh thần cho hoàn thành khóa học thực luận văn tốt nghiệp Kính chúc quý Thầy, Cô dồi sức khỏe, thành đạt nhiều lĩnh vực, có cống hiến quý báo cho nghiệp giáo dục Xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, ngày 16 tháng 11 năm 2013 Lâm Kiều Diễm Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT TÓM LƢỢC Lông vũ chứa khoảng 90% keratin thải với khối lượng lớn từ ngành chăn nuôi chế biến gia cầm làm ô nhiễm môi trường Sử dụng vi sinh vật, đặc biệt vi khuẩn để xử lý nguồn chất thải chứa keratin có ý nghĩa thiết thực ngành công nghiệp, nông nghiệp chế biến thức ăn gia súc, gia cầm sản xuất phân bón Mục tiêu nghiên cứu khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn Bacillus megaterium V1 Kết khảo sát cho thấy thời gian nuôi cấy tối ưu cho dòng vi khuẩn ngày Vi khuẩn phát triển thuận lợi môi trường pH nhiệt độ thích hợp 35oC Hoạt động vi khuẩn bị ức chế môi trường nuôi cấy có bổ sung glucose (1% w/v) Trong đó, môi trường có bổ sung rỉ đường (1% w/v), mật số vi khuẩn cho giá trị cao khả phân hủy bột lông lại giảm Ngoài bã đậu nành giúp làm tăng mật số vi khuẩn, nguồn nitơ khác bổ sung vào môi trường nuôi cấy làm giảm phát triển khả phân hủy bột lông vi khuẩn so với môi trường chứa bột lông nguồn dinh dưỡng Từ khóa: Bacillus megaterium, môi trường nuôi cấy tối ưu, phân hủy bột lông Chuyên ngành Vi sinh vật học i Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT MỤC LỤC Trang PHẦN KÝ DUYỆT LỜI CẢM TẠ TÓM LƢỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH HÌNH iv CÁC TỪ VIẾT TẮT vi CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƢƠNG LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược lông gia súc – gia cầm 2.2 Cấu trúc keratin 2.3 Enzyme keratinase 2.4 Sơ lược vi sinh vật phân hủy keratin 2.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình sinh tổng hợp enzyme keratinase lông gia cầm 2.5.1 Các yếu tố vật lý 2.5.2 Các yếu tố dinh dưỡng 2.6 Tình hình nghiên cứu nước 10 2.6.1 Tình hình nghiên cứu nước 10 2.6.1 Tình hình nghiên cứu nước 11 CHƢƠNG PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 3.1 Phương tiện nghiên cứu 13 3.1.1 Địa điểm - Thời gian 13 3.1.2 Giống vi khuẩn 13 3.1.3 Vật liệu 13 3.1.4 Môi trường nuôi cấy vi khuẩn 13 Chuyên ngành Vi sinh vật học ii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT 3.1.5 Hóa chất 14 3.1.6 Thiết bị - dụng cụ 14 3.2 Phương pháp nghiên cứu 15 3.2.1 Chuẩn bị mẫu vi khuẩn giống 15 3.2.2 Thí nghiệm 1: Khảo sát phát triển vi khuẩn theo thời gian 15 3.2.3 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ pH đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 15 3.2.4 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa carbon đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 16 3.2.5 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa nitơ đến sự phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 17 3.2.6 Phương pháp phân tích 18 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 4.1 Khảo sát phát triển vi khuẩn theo thời gian 20 4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ pH đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 21 4.3 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa carbon đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 24 4.4 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa nitơ đến sự phát triể n và khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 28 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 31 5.1 Kết luận 31 5.2 Đề nghị 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC Chuyên ngành Vi sinh vật học iii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng Thành phần protein acid amin có lông vũ Bảng Thành phần dinh dưỡng rỉ đường mía…………………………………….8 Bảng Thành phần bã đậu nành Bảng Thành phần hóa chất môi trường bột lông vũ lỏng 13 Bảng Thành phần hóa chất môi trường bột lông vũ rắn 14 Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ pH đến mật số vi khuẩn khả phân hủy bột lông gia cầm…………………………………………………………………22 Bảng Kết thí nghiệm Bảng Kết thí nghiệm Bảng Kết thí nghiệm Bảng 10 Kết thí nghiệm Chuyên ngành Vi sinh vật học iv Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Trang Hình Cấu trúc keratin Hình Biểu đồ thay đổi mật số vi khuẩn theo thời gian 20 Hình Biểu đồ ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa carbon đến mật số vi khuẩn 25 Hình Biểu đồ ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa carbon đến khả phân hủy bột lông vi khuẩn 26 Hình Biểu đồ ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa nitơ đến mật số vi khuẩn 28 Hình Biểu đồ ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa nitơ đến khả phân hủy bột lông vi khuẩn 29 Hình Biểu đồ ảnh hưởng tương tác pH nhiệt độ đến mật số vi khuẩn Hình Biểu đồ ảnh hưởng tương tác pH nhiệt độ đến khả phân hủy bột lông vi khuẩn……………………………………………………………… Chuyên ngành Vi sinh vật học v Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT CÁC TỪ VIẾT TẮT B Bacillus NXB Nhà xuất PTN Phòng thí nghiệm ĐVTN Đơn vị thí nghiệm SHPT Sinh học Phân tử CFU Colony Forming Unit rpm Rotation per minute w/v Weight/volume Chuyên ngành Vi sinh vật học vi Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT PHỤ LỤC Phụ lục Một số hình ảnh thí nghiệm Phụ lục 1.1 Hình ảnh thiết bị sử dụng phòng thí nghiệm Tủ cấy Máy cất nước Máy đo pH Chuyên ngành Vi sinh vật học Tủ ủ Tủ sấy Cân phân tích Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Bình hút ẩm Máy lắc Nồi khử trùng Chuyên ngành Vi sinh vật học Trường ĐHCT Cân điện tử Kính hiển vi Máy Vortex Tủ lạnh Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Phụ lục 1.2 Hình ảnh tiến hành thí nghiệm Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Phụ lục Các số liệu thí nghiệm Bảng Kết thí nghiệm Mật số (×108 CFU/mL) Trung bình (×108 Ngày Lần Lần Lần CFU/mL) 7,666 12 13 10 11,66 23 21 27 23,66 24 19 21 21,33 20 17 24 20,33 18 22 19 19,66 14 18 21 17,66 Bảng Kết thí nghiệm TT Nhiệt độ (°C) Mật số pH Mật số trung Phân hủy Lần Lần Lần bình (%) 30 2×108 6×108 3×108 3,66×108 19,20 30 4×108 5×108 1×108 3,33×108 19,90 30 7×108 6×108 4×108 5,66×108 16,68 30 8×108 5×108 7×108 17,82 30 5×108 6×108 5×108 5,33×108 17,80 30 7×108 8×108 4×108 6,33×108 22,56 30 13×108 9×108 12×108 11,33×108 20,04 30 11×108 11×108 8×108 10×108 23,40 30 9×108 8×108 12×108 9,66×108 25,74 10 30 12×108 17×108 18×108 15,66×108 23,80 11 30 20×108 16×108 15×108 17×108 21,30 12 30 9×108 15×108 15×108 12,66×108 29,00 Chuyên ngành Vi sinh vật học 8×108 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Nhiệt độ TT (°C) 13 30 14 Trường ĐHCT Mật số pH Mật số trung Phân hủy bình (%) Lần Lần Lần 19×108 18×108 24×108 20,33×108 33,68 30 16×108 15×108 27×108 19,33×108 28,06 15 30 18×108 21×108 20×108 19,66×108 24,48 16 35 5×108 4×108 5×108 4,66×108 25,88 17 35 8×108 3×108 5×108 5,33×108 19,64 18 35 4×108 6×108 7×108 5,66×108 20,38 19 35 12×108 8×108 5×108 8,33×108 27,16 20 35 9×108 7×108 6×108 7,33×108 22,80 21 35 6×108 5×108 11×108 7,33×108 26,80 22 35 12×108 13×108 10×108 11,66×108 28,50 23 35 13×108 11×108 8×108 10,66×108 33,64 24 35 11×108 9×108 19×108 13×108 31,66 25 35 20×108 19×108 17×108 18,66×108 37,02 26 35 22×108 15×108 23×108 20×108 42,08 27 35 15×108 20×108 22×108 19×108 42,48 28 35 28×108 30×108 21×108 26,33×108 52,68 29 35 18×108 30×108 29×108 25,66×108 47,84 30 35 25×108 23×108 17×108 21,66×108 47,10 31 40 3×108 1×108 2×108 2×108 20,54 32 40 4×108 2×108 1×108 2,33×108 14,68 33 40 2×108 3×108 2,33×108 15,46 34 40 7×108 4×108 5×108 17,22 35 40 3×108 4×108 9×108 5,33×108 17,54 36 40 9×108 6×108 8×108 7,66×108 24,82 37 40 11×108 8×108 10×108 9,66×108 24,82 38 40 8×108 12×108 12×108 10,66×108 23,96 Chuyên ngành Vi sinh vật học 2×108 4×108 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 TT Nhiệt độ (°C) Trường ĐHCT Mật số pH Mật số trung Phân hủy Lần Lần Lần bình (%) 39 40 9×108 14×108 13×108 12×108 28,50 40 40 11×108 18×108 20×108 16,33×108 31,14 41 40 15×108 14×108 21×108 16,66×108 33,14 42 40 16×108 21×108 17×108 18×108 28,92 43 40 21×108 15×108 19×108 18,33×108 32,60 44 40 17×108 22×108 20×108 19,66×108 43,86 45 40 23×108 18×108 19×108 20×108 35,46 46 45 8×107 8×107 6×107 7,33×107 18,60 47 45 9×107 7×107 10×107 8,66×107 14,28 48 45 5×107 10×107 12×107 9×107 14,98 49 45 10×107 13×107 13×107 12×107 18,94 50 45 11×107 13×107 14×107 12,66×107 15,74 51 45 12×107 18×107 16×107 15,33×107 14,20 52 45 35×107 32×107 33×107 33,33×107 22,40 53 45 40×107 30×107 40×107 36,66×107 18,48 54 45 50×107 70×107 80×107 66,66×107 26,68 55 45 60 70×107 90×107 76,66×107 27,68 56 45 110×107 80×107 60×107 83,33×107 28,60 57 45 50×107 80×107 100×107 76,66×107 26,10 58 45 150×107 160×107 160×107 156,66×107 30,80 59 45 110×107 120×107 90×107 106,66×107 31,44 60 45 140×107 90×107 80×107 103,33×107 29,90 Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT 25 Nhiet 30 35 40 45 Mat so vi khuan 20 15 10 5 pH Hình Biểu đồ ảnh hƣởng tƣơng tác pH nhiệt độ đến mật số vi khuẩn 50 Nhiet 30 35 40 45 45 Phan huy (%) 40 35 30 25 20 15 pH Hình Biểu đồ ảnh hƣởng tƣơng tác pH nhiệt độ đến khả phân hủy bột lông vi khuẩn Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Bảng Kết thí nghiệm Mật số (×108 CFU/ml) TT Nguồn C Mật số trung Phân hủy Lần Lần Lần bình (%) Bột bắp 12 10 16 12,66 36,76 Bột bắp 10 12 9,66 33,14 Bột bắp 16 10 19 15 40,42 Glucose 4,33 17,5 Glucose 10 7,66 18,74 Glucose 17,54 Sucrose 4,33 24,24 Sucrose 10 8,66 27,5 Sucrose 11 8,33 24,44 10 Rỉ đường 16 13 26 18,33 41,92 11 Rỉ đường 21 12 13,66 35,46 12 Rỉ đường 10 17 20 15,66 37,70 13 Đối chứng 25 23 14 20,66 41,94 14 Đối chứng 20 17 27 21,33 49,84 15 Đối chứng 15 22 34 23,66 50,24 Mật số trung Phân hủy Bảng 10 Kết thí nghiệm Mật số (×107 CFU/ml) TT Nguồn N Lần Lần Lần bình (%) NH4Cl 6,33 32,24 NH4Cl 6 5,66 30,66 NH4Cl 9 37,92 Bã đậu nành 32 29 27 29,33 27,54 Bã đậu nành 19 24 26 23 32,82 Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Mật số (×107 CFU/ml) TT Nguồn N Mật số trung Phân hủy Lần Lần Lần bình (%) Bã đậu nành 26 19 29 24,66 31,14 Bột đậu nành 25 19 18 20,33 26,62 Bột đậu nành 16 20 14 16,66 26,84 Bột đậu nành 18 19 14 17 34,34 10 Yeast extract 14 16 11 13,66 23,24 11 Yeast extract 12 14 11,66 28,68 12 Yeast extract 10 13 10,33 19,38 13 Đối chứng 21 25 26 24 48,4 14 Đối chứng 17 18 25 20 45,48 15 Đối chứng 18 24 22 21,33 45,94 Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Phụ lục Kết phân tích thống kê Phụ lục 3.1 Kết thống kê thí nghiệm One-way ANOVA: Log (CFU/mL) versus Ngày Source Ngày Error Total DF 14 20 SS 0.56578 0.06260 0.62838 S = 0.06687 Level N 3 3 3 MS 0.09430 0.00447 R-Sq = 90.04% Mean 8.8767 9.0633 9.3700 9.3267 9.3033 9.2933 9.2433 F 21.09 P 0.000 R-Sq(adj) = 85.77% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) ( * -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) + -+ -+ -+ 8.80 9.00 9.20 9.40 StDev 0.0874 0.0569 0.0557 0.0503 0.0751 0.0416 0.0862 Pooled StDev = 0.0669 Grouping Information Using Fisher Method Ngày N 3 3 3 Mean 9.37000 9.32667 9.30333 9.29333 9.24333 9.06333 8.87667 Grouping A A B A B A B B C D Means that not share a letter are significantly different Phụ lục 3.2 Kết thống kê thí nghiệm General Linear Model: Mật số versus Nhiet do, pH Factor Nhiet pH Type fixed fixed Levels Values 30, 35, 40, 45 4, 5, 6, 7, Analysis of Variance for Mật số, using Adjusted SS for Tests Source Nhiet pH Nhiet do*pH Error Total S = 1.31850 DF 12 40 59 Seq SS 559.74 2070.37 92.87 69.54 2792.52 Adj SS 559.74 2070.37 92.87 69.54 R-Sq = 97.51% Adj MS 186.58 517.59 7.74 1.74 F 107.33 297.73 4.45 P 0.000 0.000 0.000 R-Sq(adj) = 96.33% Unusual Observations for Mật số Obs 12 Mật số 12.6600 Fit 15.1067 Chuyên ngành Vi sinh vật học SE Fit 0.7612 Residual -2.4467 St Resid -2.27 R Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 30 58 21.6600 15.6600 24.5500 12.2167 0.7612 0.7612 Trường ĐHCT -2.8900 3.4433 -2.68 R 3.20 R R denotes an observation with a large standardized residual Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nhiet 35 30 40 45 N 15 15 15 15 Mean 13.6847 11.1293 11.0633 5.3412 Grouping A B B C Means that not share a letter are significantly different Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence pH N 12 12 12 12 12 Mean 18.9675 14.7742 9.3567 5.3033 3.1216 Grouping A B C D E Means that not share a letter are significantly different Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nhiet 35 30 40 35 40 30 45 35 40 30 45 35 30 40 35 45 30 40 45 45 pH 8 7 6 5 4 N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Mean 24.5500 19.7733 19.3300 19.2200 16.9967 15.1067 12.2167 11.7733 10.7733 10.3300 7.7733 7.6633 6.2200 5.9967 5.2167 4.5500 4.2167 2.2200 1.3330 0.8330 Grouping A B B B B C C D D E D E F E F G E F G F G H G H H H H H H I I I I I I J J J J J K K K K K Means that not share a letter are significantly different General Linear Model: Phan huy (%) versus Nhiet do, pH Factor Nhiet pH Type fixed fixed Levels Values 30, 35, 40, 45 4, 5, 6, 7, Analysis of Variance for Phan huy (%), using Adjusted SS for Tests Source Nhiet pH Nhiet do*pH DF 12 Seq SS 1204.24 2702.06 334.36 Chuyên ngành Vi sinh vật học Adj SS 1204.24 2702.06 334.36 Adj MS 401.41 675.51 27.86 F 39.83 67.03 2.76 P 0.000 0.000 0.008 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Error Total 40 59 S = 3.17452 403.10 4643.76 Trường ĐHCT 403.10 R-Sq = 91.32% 10.08 R-Sq(adj) = 87.20% Unusual Observations for Phan huy (%) Obs 44 Phan huy (%) 43.8600 Fit 37.3067 SE Fit 1.8328 Residual 6.5533 St Resid 2.53 R R denotes an observation with a large standardized residual Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nhiet 35 40 30 45 N 15 15 15 15 Mean 33.71 26.18 22.90 22.59 Grouping A B C C Means that not share a letter are significantly different Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence pH N 12 12 12 12 12 Mean 36.49 30.94 25.65 20.28 18.35 Grouping A B C D D Means that not share a letter are significantly different Grouping Information Using Tukey Method and 95.0% Confidence Nhiet 35 35 40 35 40 45 30 45 40 35 30 30 45 35 40 30 30 40 45 45 pH 8 8 7 6 5 4 N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Mean 49.21 40.53 37.31 31.27 31.07 30.71 28.74 27.46 25.76 25.59 24.70 23.06 22.52 21.97 19.86 19.39 18.59 16.89 16.29 15.95 Grouping A A B B C B C D B C D B C D C D E D E D E D E D E D E D E D E E E F F F F F F F F F F G G G G G G G G G G G G Means that not share a letter are significantly different Phụ lục 3.3 Kết thống kê thí nghiệm Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT One-way ANOVA: Mật số versus Nguồn Carbon Source Nguồn Carbon Error Total S = 2.033 Level Bột bắp Đối chứng Glucose Rỉ đường Sucrose DF 10 14 SS 769.92 41.34 811.26 MS 192.48 4.13 R-Sq = 94.90% N 3 3 Mean 12.440 21.883 5.663 22.663 7.107 F 46.56 P 0.000 R-Sq(adj) = 92.87% StDev 2.677 1.575 1.761 1.453 2.410 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * -) ( -* ) ( -* ) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+ -6.0 12.0 18.0 24.0 Pooled StDev = 2.033 Grouping Information Using Fisher Method Nguồn Carbon Rỉ đường Đối chứng Bột bắp Sucrose Glucose N 3 3 Mean 22.663 21.883 12.440 7.107 5.663 Grouping A A B C C Means that not share a letter are significantly different One-way ANOVA: Phân hủy (%) versus Nguồn Carbon Source Nguồn Carbon Error Total S = 3.155 Level Bột bắp Đối chứng Glucose Rỉ đường Sucrose DF 10 14 SS 1600.63 99.51 1700.14 MS 400.16 9.95 R-Sq = 94.15% N 3 3 Mean 36.773 47.340 17.927 38.360 25.393 StDev 3.640 4.681 0.705 3.280 1.827 F 40.21 P 0.000 R-Sq(adj) = 91.81% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) + -+ -+ -+ 20 30 40 50 Pooled StDev = 3.155 Grouping Information Using Fisher Method Nguồn Carbon Đối chứng Rỉ đường Bột bắp Sucrose Glucose N 3 3 Mean 47.340 38.360 36.773 25.393 17.927 Chuyên ngành Vi sinh vật học Grouping A B B C D Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Means that not share a letter are significantly different Phụ lục 3.4 Kết thống kê thí nghiệm One-way ANOVA: Mật số versus Nguồn Nitơ Source Nguồn Nitơ Error Total DF 10 14 S = 2.089 R-Sq = 93.84% Level Bã đậu nành Bột đậu nành Đối chứng NH4Cl Yeast extract SS 665.28 43.64 708.92 N 3 3 MS 166.32 4.36 Mean 25.663 17.997 21.777 6.663 12.993 F 38.11 P 0.000 R-Sq(adj) = 91.38% StDev 3.282 2.028 2.037 1.205 1.155 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( -* ) ( -* ) + -+ -+ -+ 7.0 14.0 21.0 28.0 Pooled StDev = 2.089 Grouping Information Using Fisher Method Nguồn Nitơ Bã đậu nành Đối chứng Bột đậu nành Yeast extract NH4Cl N 3 3 Mean 25.663 21.777 17.997 12.993 6.663 Grouping A B B C D Means that not share a letter are significantly different One-way ANOVA: Phân hủy (%) versus Nguồn Nitơ Source Nguồn Nitơ Error Total DF 10 14 S = 3.618 R-Sq = 86.94% Level Bã đậu nành Bột đậu nành Đối chứng NH4Cl Yeast extract SS 871.9 130.9 1002.8 N 3 3 MS 218.0 13.1 Mean 30.500 29.267 46.607 33.607 23.767 F 16.65 P 0.000 R-Sq(adj) = 81.72% StDev 2.698 4.395 1.570 3.818 4.672 Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * -) ( -* ) ( * -) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+ -20 30 40 50 Pooled StDev = 3.618 Grouping Information Using Fisher Method Nguồn Nitơ Đối chứng NH4Cl N 3 Mean 46.607 33.607 Chuyên ngành Vi sinh vật học Grouping A B Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Bã đậu nành Bột đậu nành Yeast extract 3 30.500 29.267 23.767 Trường ĐHCT B B C C Means that not share a letter are significantly different Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học [...]... tiêu theo dõi: Sự phát triển của vi khuẩn (mật số), hiệu suất phân hủy bột lông gia cầm 3.2.4 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hƣởng của nguồn dinh dƣỡng chứa carbon đến sự phát triển và khả năng phân hủy lông gia cầm của vi khuẩn  Mục đích: Đánh giá ảnh hưởng của các nguồn dinh dưỡng chứa carbon đến sự phát triển và khả năng phân hủy bột lông gia cầm của vi khuẩn B megaterium V1  Bố trí thí nghiệm: - Thí... dụng thực tế Xuất phát từ những vấn đề nêu trên, đề tài: Khảo sát các yếu tố ảnh hƣởng đến sự phát triển và khả năng phân hủy lông gia cầm của chủng vi khuẩn Bacillus megaterium V1 được thực hiện 1.2 Mục tiêu đề tài Xác định được điều kiện môi trường nuôi cấy thích hợp cho dòng vi khuẩn Bacillus megaterium V1 phân hủy lông gia cầm đạt hiệu quả cao nhất Chuyên ngành Vi sinh vật học 1 Vi n NC & PT Công... có sự tương tác giữa hai nhân tố pH và nhiệt độ ảnh hưởng đến sự phát triển và khả năng phân hủy bột lông của vi khuẩn Giá trị pH 8 và nhiệt độ là 35 oC là điều kiện thích hợp cho hoạt động phân hủy bột lông (keratin) và được sử dụng cho các thí nghiệm tiếp theo 4.3 Ảnh hƣởng của nguồn dinh dƣỡng chứa carbon đến sự phát triển và khả năng phân hủy lông gia cầm của vi khuẩn Đường là một nguồn carbon đóng... Khảo sát ảnh hƣởng của nguồn dinh dƣỡng chứa nitơ đến sƣ ̣ phát triển và khả năng phân hủy lông gia cầm của vi khuẩn  Mục đích: Đánh giá ảnh hưởng của các nguồn dinh dưỡng chứa nitơ đến sự phát triển và khả năng phân hủy bột lông của vi khuẩn B megaterium V1  Bố trí thí nghiệm: - Thí nghiệm được thực hiện ở nhiêt độ và pH thích hợp chọn ra từ thí nghiệm 2 - Bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với nhân tố thí... hƣởng của nhiệt độ và pH đến sự phát triển và khả năng phân hủy lông gia cầm của vi khuẩn Nhiệt độ và pH của môi trường là hai yếu tố thường ảnh hưởng lớn đến quá trình sinh trưởng và phát triển của vi khuẩn Thông thường khi nhiệt độ tăng thì tốc độ phản ứng tăng Tuy nhiên, tốc độ phản ứng chỉ tăng đến một giới hạn nhất định Vượt quá giới hạn đó, tốc độ phản ứng sẽ giảm Bên cạnh đó, pH môi trường ảnh hưởng. .. theo dõi: Mật số của vi khuẩn 3.2.3 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ và pH đến sự phát triển và khả năng phân hủy lông gia cầm của vi khuẩn  Mục đích: Xác định mức nhiê ̣t đô ̣ và pH thích hợp cho sự sinh trưởng , phát triển và phân hủy bột lông gia cầm của vi khuẩn Chuyên ngành Vi sinh vật học 15 Vi n NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT ... 8 và 4 mức nhiệt độ là 30°C, 35°C, 40°C, 45°C; nhằm khảo sát ảnh hưởng của hai nhân tố này đến sự phát triển và khả năng phân hủy bột lông của vi khuẩn, từ đó chọn ra mức nhiệt độ và pH thích hợp cho các thí nghiệm sau Chuyên ngành Vi sinh vật học 21 Vi n NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học khóa 36 - 2013 Trường ĐHCT Bảng 6 Ảnh hƣởng của nhiệt độ và pH đến mật số vi khuẩn và khả năng. .. sự phát triển của vi khuẩn  Sau bảy ngày nuôi lắc, tiến hành đánh giá khả năng phân hủy lông gia cầm  Chỉ tiêu theo dõi: Sự phát triển của vi khuẩn (mật số), hiệu suất phân hủy bột lông gia cầm 3.2.6 Phƣơng pháp phân tích a Xác định tỉ lệ bột lông bị phân hủy  Mục đích: Đánh giá khả năng phân hủy bột lông gia cầm của vi khuẩn trong các điều kiện môi trường nuôi cấy khác nhau  Các bước thực hiện:... Triết (2013) phân lập và đánh giá là một trong những chủng vi khuẩn có khả năng phân hủy lông gia súc – gia cầm đạt hiểu quả cao Tuy nhiên, sự phát triển cũng như khả năng phân hủy lông gia cầm của chủng vi khuẩn này phụ thuộc rất nhiều vào điều kiện môi trường nuôi cấy Do đó, vi c xác định các điều kiện môi trường nuôi cấy thích hợp là một nghiên cứu cần thiết trước khi đưa chủng vi khuẩn này vào ứng dụng... trình phát triển của nhiều loại vi sinh vật, đường cung cấp nguồn carbohydrate tạo thành các hợp chất cấu tạo nên tế bào và cung cấp năng lượng cho hoạt động sống của tế bào Khi bổ sung thêm các nguồn carbon, có thể giúp cho sự phân hủy keratin nhanh hơn hoặc làm ức chế sự phân hủy keratin của vi khuẩn Để xác định ảnh hưởng của nguồn carbon đến sự phát triển và khả năng phân hủy keratin của chủng vi khuẩn ... gia cầm sản xuất phân bón Mục tiêu nghiên cứu khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn Bacillus megaterium V1 Kết khảo sát cho thấy thời gian nuôi cấy tối ưu... mẫu vi khuẩn giống 15 3.2.2 Thí nghiệm 1: Khảo sát phát triển vi khuẩn theo thời gian 15 3.2.3 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ pH đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn. .. độ pH đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 21 4.3 Ảnh hưởng nguồn dinh dưỡng chứa carbon đến phát triển khả phân hủy lông gia cầm vi khuẩn 24 4.4 Ảnh hưởng nguồn