ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Vũ Tùng Lâm ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI AMOXICILLIN VÀ CLOXACILLIN TRONG CHẾ PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP PHỔ ĐẠO HÀM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2014 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN Vũ Tùng Lâm ĐỊNH LƢỢNG ĐỒNG THỜI AMOXICILLIN VÀ CLOXACILLIN TRONG CHẾ PHẨM BẰNG PHƢƠNG PHÁP PHỔ ĐẠO HÀM Chuyên ngành: Hóa phân tích Mã số: 60440118 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS.VŨ ĐẶNG HOÀNGAA TS LÊ THỊ HỒNG HẢO A Hà Nội - 2014 LỜI CẢM ƠN Nhân dịp hoàn thành luận văn Thạc sĩ dƣợc học, xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc lời cảm ơn tới thầy cô giáo, gia đình, bạn bè ngƣời giúp đỡ thời gian qua Trƣớc hết, xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Vũ Đặng Hoàng ngƣời thầy kính mến hƣớng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để hoàn thành luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn TS Lê Thị Hồng Hảo - Viện Phó Viện Vệ Sinh An Toàn Thực Phẩm Quốc Gia, ngƣời tận tình bảo giúp đỡ suốt trình thực đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô Bộ môn Hóa Phân Tích hết giúp quan tâm, giúp đỡ trình học tập thực luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng Đào tạo sau đại học, thầy cô giáo trường Khoa Học Tự Nhiên Hà Nội giảng dạy tạo điều kiện tốt cho trình học tập nghiên cứu trƣờng Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ngƣời bạn sát cánh, động viên học tập nhƣ sống Và cuối cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình thân yêu, ngƣời bên cạnh suốt đời Hà Nội, tháng 12 năm 2014 Học viên Vũ Tùng Lâm MỤC LỤC Trang bìa Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình LỜI CẢM ƠN MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 TỔNG QUAN VỀ ĐỐI TƢỢNG PHÂN TÍCH 1.1.1 Một số đặc điểm hóa lý Amoxicillin trihydrat Cloxacillin 1.1.2 Đặc điểm dƣợc động học độc tính Amoxicillin trihydrat Cloxacillin [5] .4 1.1.2.2 Cloxacilin [5] 1.2 TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 1.2.1 Các phƣơng pháp định lƣợng amoxicillin cloxacillin chế phẩm6 1.2.2 Kết luận phƣơng pháp phân tích tham khảo .7 1.3 TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ ĐẠO HÀM (Derivative spectrophotometry) 1.3.1 Khái niệm 1.3.2 Các phƣơng pháp định lƣợng hỗn hợp đa thành phần quang phổ đạo hàm 15 1.3.3 Phƣơng pháp đạo hàm giao điểm không (zero-crossing derivative spectrophotometry) 16 1.3.4 Phƣơng pháp đạo hàm phổ tỷ số phổ (Ratio Spectra Derivative Spectrophotometry) 17 1.3.5 Ứng dụng quang phổ đạo hàm định lƣợng thuốc đa thành phần Việt Nam 19 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 22 2.2 THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 22 ii 2.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 23 2.3.1 Xây đựng phƣơng pháp định lƣợng đồng thời AMO CLO phƣơng pháp quang phổ UV-VIS sắc ký lỏng hiệu cao .23 2.3.2 Ứng dụng để định lƣợng đồng thời AMO CLO viên nang Faclacin 24 2.3.3 Xử lý kết thực nghiệm [3] 24 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 3.1 PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI AMO VÀ CLO 25 3.1.1 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu .25 3.1.2 Xây dựng phƣơng pháp xác định đồng thời Amo Clo .26 3.1.3 Độ lặp phƣơng pháp 34 3.1.4 Độ phƣơng pháp .36 3.2 PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO 37 3.2.1 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu .37 3.2.2 Kiểm tra lại phƣơng pháp sắc ký lỏng áp dụng Công ty Cổ phần Dƣợc phẩm Trung ƣơng 37 3.2.3 Khảo sát tính tích hợp hệ thống 41 3.2.4 Khảo sát độ lặp phƣơng pháp 42 3.2.5 Khảo sát độ phƣơng pháp .43 3.3 KẾT QUẢ PHÉP ĐỊNH LƢỢNG 44 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT .46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AMO : Amoxicilin CLO : Cloxacilin HPLC : Sắc ký lỏng hiệu nâng cao PĐH : Phổ đạo hàm PĐHTĐ : Phổ đạo hàm tỷ đối TLTK : Tài liệu tham khảo VKNTW : Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ƣơng iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số đặc điểm hoá lý AMOXICILLIN TRIHYDRAT CLOXACILLIN NATRI .3 Bảng 1.2 Ứng dụng quang phổ đạo hàm Việt Nam từ năm 1990 đến 20 Bảng 3.3 Kết khảo sát khoảng tuyến tính CLO .32 Bảng 3.4 Kết khảo sát khoảng tuyến tính AMO 33 Bảng 3.5 Kết khảo sát khoảng tuyến tính phƣơng pháp quang phổ UV-VIS .34 Bảng 3.6 Độ lặp phƣơng pháp quang phổ UV-VIS 35 Bảng 3.7 Kết định lƣợng hỗn hợp mẫu tự tạo AMO 100mg/L CLO 100mg/L phƣơng pháp quang phổ .36 Bảng 3.8 Kết khảo sát khoảng tuyến tính AMO 100mg/L 38 Bảng 3.9 Kết khảo sát khoảng tuyến tính CLO 100 mg/L 39 Bảng 3.10 Kết khảo sát khoảng tuyến tính diện tích pic với nồng độ AMO CLO 40 Bảng 3.11 Kết khảo sát tính thích hợp hệ thống sắc ký 41 Bảng 3.12 Độ lặp phƣơng pháp HPLC 42 Bảng 3.13 Kết định lƣợng hỗn hợp mẫu tự tạo phƣơng pháp HPLC .43 Bảng 3.14 Kết định lƣợng AMO viên nang FACLACIN .44 Bảng 3.15 Kết định lƣợng CLO viên nang FACLACIN 45 v Danh môc c¸c h×nh Hình 1.1 Phổ hấp thụ đạo hàm dải phổ tuân theo định luật phân bố Gauss Hình 1.2 Phổ hấp thụ (a), phổ đạo hàm bậc (b), phổ đạo hàm bậc (c) (dải phổ chất có vị trí độ cao nhƣng có độ rộng gấp đôi); phổ hấp thụ trans – stillben cyclohexan (d) phổ đạo hàm bậc (e), bậc (f) tƣơng ứng 10 Hình 1.3 Ảnh hƣởng tán xạ ánh sáng lên phổ hấp thụ phổ đạo hàm bậc [ 11 Hình 1.4 Phân biệt dải phổ phép toán đạo hàm 12 Hình 1.5 Phƣơng pháp peak – zero (zn tỷ lệ với nồng độ chất phân tích) 13 Hình 1.6 Đạo hàm bậc lamivudin (1) 15µg/ml; (2) 20 µg/ml; (3) 30 µg/ml (đƣờng nét liền) zidovudin (1) 30 µg/ml; (2) 50 µg/ml; (3) 75 µg/ml (đƣờng nét đứt) methanol Mũi tên bƣớc sóng định lƣợng 16 Hình 1.7 (a) Phổ tỷ số phổ acetaminophen nồng độ (a) 5,0 µg/ml, (b) 17,5 µg/ml, (c) 25,0 µg/ml, (d) 37,5 µg/ml, (e) 50,0 µg/ml nồng độ số chia (mephenoxalon) 12,5 µg/ml methanol (Δλ = nm) (b) Phổ đạo hàm tỷ số phổ bậc acetaminophen nồng độ (a) 5,0 µg/ml, (b) 17,5 µg/ml, (c) 25,0 µg/ml, (d) 37,5 µg/ml, (e) 50,0 µg/ml nồng độ số chia (mephenoxalon) 12,5 µg/ml methanol (Δλ = nm) .18 Hình 3.8 Phổ hấp thụ dung dịch AMO 100 mg/L, CLO 100 mg/L hỗn hợp AMO 100 mg/L + CLO 100 mg/L 26 Hình 3.9 PĐH bậc dung dịch AMO nồng độ (60 – 140 mg/L) 28 Hình 3.10 PĐH bậc dung dịch CLO nồng độ (60 – 140 mg/L) .29 Hình 3.11 PĐHTĐ dung dịch AMO nồng độ (60 – 140 mg/L) với số chia CLO 60 mg/L 30 vi Hình 3.12 PĐHTĐ dung dịch CLO nồng độ (60-140 mg/L) với số chia AMO 60 mg/L .31 Hình 3.13 Phổ đạo hàm bậc CLO bƣớc sóng 258,7 nm .32 Hình 3.14 Phổ đạo hàm tỉ đối số chia AMO bƣớc sóng 258 nm 33 Hình 3.15 Sắc kí đồ tách chất AMO 100 mg CLO 100 mg .38 Hình 3.16 Khoảng tuyến tính AMO từ 60 mg/L đến 140 mg/L 39 Hình 3.17 Khoảng tuyến tính AMO từ 60 mg/L đến 140 mg/L 40 vii MỞ ĐẦU Kháng sinh nhóm thuốc đƣợc sử dụng nhiều Việt Nam mô hình bệnh tật nƣớc ta chủ yếu bệnh nhiễm khuẩn, nhiễm ký sinh trùng nhiễm nấm Do kháng thuốc vi khuẩn tính phức tạp bệnh nhiễm khuẩn ngày gia tăng, việc sử dụng kháng sinh đơn thành phần nhiều trƣờng hợp không đáp ứng đƣợc yêu cầu điều trị Nhìn vào đơn thuốc đƣợc kê nay, phổ biến có đến 2-3 loại kháng sinh đƣợc sử dụng lúc để tăng hiệu điều trị Mặc dù vậy, việc phối hợp kháng sinh gặp phải số tƣơng tác bất lợi gây tai biến đáng tiếc tƣợng vi khuẩn kháng thuốc nguy hiểm Amoxicillin Cloxacillin kháng sinh thuộc nhóm Penicillin đƣợc sử dụng phổ biến Amoxicillin bền vững với dịch vị có khả hấp thu qua đƣờng tiêu hoá tốt nên kháng sinh nhóm Penicillin có hoạt phổ rộng hay đƣợc sử dụng để điều trị nhiễm khuẩn toàn thân Cloxacillin có tác dụng kháng penicillinase nên đƣợc định bệnh vi khuẩn gram dƣơng tiết penicillinase liên cầu khuẩn [1] Để nâng cao hiệu điều trị nhƣ tạo điều kiện cho việc sử dụng thuốc thuận tiện, kết hợp Amoxicillin trihydrate Cloxacillin Natri chế phẩm đƣợc định cho bệnh nhiễm khuẩn đƣờng hô hấp, sinh dục tiết niệu, da mô mềm, điều trị cấp cứu nhiễm khuẩn có nguy cao chờ đợi kết kháng sinh đồ Tuy thuốc có chứa đồng thời Amoxicillin Cloxacillin lƣu hành rộng rãi thị trƣờng dƣới dạng viên nang nhƣng Dƣợc điển Việt Nam chƣa có chuyên luận riêng cho dạng chế phẩm Việc định lƣợng Amoxicillin Cloxacillin viên nang đƣợc tiến hành chủ yếu phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu cao dựa vào công trình nghiên cứu biết [2, 4, 21, 23, 30, 31] Đây kỹ thuật phân tích đại, có khả định tính định lƣợng Hình 3.17 Khoảng tuyến tính AMO từ 60 mg/L đến 140 mg/L Mối quan hệ nồng độ AMO, CLO giá trị diện tích pic điều kiện sắc ký chọn đƣợc biểu diễn bảng 3.10 Bảng 3.10 Kết khảo sát khoảng tuyến tính diện tích pic với nồng độ AMO CLO HPLC Hoạt Khoảng tuyến tính chất (mg/L) AMO 60 - 140 y = 31,244x - 32,25 0.9995 CLO 60 - 140 y = 47,223x - 83,9 0,9996 Phƣơng trình hồi quy Hệ số xác định (R2) Nhận xét: Nhận thấy hệ số hồi quy tuyến tính r đƣờng chuẩn nằm 40 khoảng: 0,995 ≤ r ≤ Do vậy, đƣờng chuẩn dựng chấp nhận đƣợc 3.2.3 Khảo sát tính tích hợp hệ thống Việc khảo sát tính thích hợp hệ thống đƣợc tiến hành qua việc tiêm lặp lại lần dung dịch hỗn hợp chuẩn điều kiện sắc ký chọn Tính thích hợp hệ thống đƣợc đánh giá dựa giá trị độ lệch chuẩn tƣơng đối thời gian, diện tích pic, độ phân giải pic, hệ số bất đối pic Kết đƣợc thể bảng 3.11 Bảng 3.11 Kết khảo sát tính thích hợp hệ thống sắc ký AMO HPLC STT Thời gian CLO Diện tích pic (mAu x lƣu (phút) phút) Thời gian Diện tích pic (mAu x lƣu (phút) phút) 1,571 2610,7 4,004 4215,5 1,564 2622,8 3,979 4233,8 1,567 2594,2 3,956 4224,5 1,569 2600,5 3,957 4220,3 1,566 2601,1 4,005 4224,9 1,566 2595,6 3,957 4223,6 X TB 1,567 2604,2 3,976 4223,8 0,2 0,4 0,6 0,1 RSD (%) Số đĩa lý thuyết trung 955 973 bình Độ phân giải : RS = 15,68 41 Nhận xét: - Qua kết ta thấy thông số đặc trƣng nhƣ: số đĩa lí thuyết, hệ số bất đối, độ phân giải nằm giới hạn cho phép Vậy hệ thống sắc ký có khả tách tốt chất - Các giá trị độ lệch chuẩn tƣơng đối thời gian lƣu diện tích pic thấp 2% Nhƣ hệ thống sắc ký mà lựa chọn đảm bảo việc định lƣợng hỗn hợp chất AMO CLO đạt kết tốt 3.2.4 Khảo sát độ lặp phƣơng pháp Chúng tiến hành khảo sát độ lặp phƣơng pháp sắc ký dựa vào kết thống kê sau lần định lƣợng đồng thời AMO CLO với mẫu chế phẩm Bảng 3.12 Độ lặp phƣơng pháp HPLC (Lô 010808) Hàm lƣợng X (mg/viên) HPLC STT Lƣợng cân(g) AMO CLO 0,1207 248,79 255,78 0,1174 250,05 258,92 0,1155 246,42 256,42 0,1163 249,14 259,13 0,1181 249,70 257,81 0,1171 248,10 257,46 X TB 248,70 257,59 SD 1,31 1,33 RSD (%) 0,5 0,5 42 Nhận xét: Từ bảng nhận thấy giá trị RSD = 0,5 % < 2%, nhƣ đạt độ lặp phƣơng pháp 3.2.5 Khảo sát độ phƣơng pháp Đƣợc xác định thông qua % tìm lại mẫu tự tạo Bảng 3.13 Kết định lƣợng hỗn hợp mẫu tự tạo phƣơng pháp HPLC % tìm lại HPLC STT AMO CLO 99,02 100,45 99,53 100,92 100,51 99,71 99,81 98,93 100,87 100,16 99,50 100,57 X TB 99,87 100,12 SD 0,69 0,71 RSD (%) 0,7 0,7 Nhận xét: Từ bảng nhận thấy giá trị RSD = 0,7% < 2%, nhƣ đạt độ phƣơng pháp 43 3.3 KẾT QUẢ PHÉP ĐỊNH LƢỢNG Bảng 3.14 Kết định lƣợng AMO viên nang FACLACIN Hàm lƣợng % so với nhãn (trung bình ± SD)a,b AMOXICILLINc Lô HPLC PĐHTĐ 98,81±0,86 010808 99,48±0,53 t=1,633 F=2,735 98,75±0,81 011008 99,30±0,58 t = 1,352 F =1,950 99,33±1,27 010608 98,51±0,81 t = 1,333 F = 2,458 a: Mỗi chế phẩm đƣợc định lƣợng lần b: Với độ tin cậy p = 0,95; với test F(5,5) (0,05) = 5,05, test t10 (0,05) = 2,228 c: Viên nang FACLACIN có chứa 250 mg AMO 44 Bảng 3.15 Kết định lƣợng CLO viên nang FACLACIN Hàm lƣợng % so với nhãn (trung bình ± SD)a,b CLOXACILLINc Lô HPLC 010808 011008 010608 103,03±0,52 99,87±0,84 98,34±0,41 PĐH PĐHTĐ 102,50±0,57 103,25±0,92 t = 1,668 t = 0,507 F = 1,157 F = 3,013 100,11±1,34 100,43±0,55 t = 0,372 t = 1,366 F = 2,545 F = 2,333 98,94±0,65 98,62±0,91 t = 1,912 t = 0,687 F = 2,513 F = 4,926 a: chế phẩm đƣợc định lƣợng lần b: Với độ tin cậy p = 0,95; Test F(5,5) (0,05) = 5,05, Test t10 (0,05) = 2,228 c: viên nang FACLACIN có chứa 250 mg CLO 45 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT * Dựa vào kết nghiên cứu đề tài, rút số nhận xét sau: - Xây dựng đƣợc phép định lƣợng đồng thời AMO CLO trong hỗn hợp cách trực tiếp không qua trình tách chiết phƣơng pháp: PĐH, PĐHTĐ với độ lặp độ cao Sự khác biệt độ xác kết định lƣợng thu đƣợc từ phƣơng pháp nêu so với phƣơng pháp HPLC ý nghĩa thống kê với mức tin cậy 95% - Các phƣơng pháp quang phổ nêu có yêu cầu kỹ thuật đơn giản sử dụng nƣớc làm dung môi nên ứng dụng vào công tác kiểm nghiệm thuốc tiết kiệm thời gian, giảm thiểu chi phí - Không có sai khác đáng kể hàm lƣợng thực tế mẫu thuốc kiểm nghiệm so với hàm lƣợng ghi nhãn (98-104%) * Trên sở kết đạt đƣợc có số đề nghị nhƣ sau: - Tiếp tục nghiên cứu ứng dụng phƣơng pháp quang phổ hấp thụ UV-VIS vào kiểm nghiệm dạng bào chế đa thành phần (2-3 hoạt chất) có chứa kháng sinh khác lƣu hành thị trƣờng nói riêng dạng bào chế đa thành phần có khả hấp thụ UV- VIS nói chung - Ứng dụng chọn lọc phƣơng pháp đạo hàm, đạo hàm phổ tỷ đối tuỳ theo điều kiện thực tế vào công tác kiểm nghiệm viên nang Faclacin Công ty Cổ phần dƣợc phẩm Trung Ƣơng I – Pharbaco 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ môn Dƣợc lý, Trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội, Dƣợc lý học tập II (2005) , trang 112-116 Bộ môn Hoá dƣợc, Trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội, Hoá dƣợc tập II (2004), trang 188-193, 198 Bộ môn Hoá phân tích độc chất, Trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội, Hoá phân tích tập II (2005) Bộ Y tế, Dƣợc điển Việt Nam, xuất lần thứ (2002), trang 18-21, 77-78 Dƣợc thƣ quốc gia, NXB Y học, trang 52-54 Cao Thị Mai Phƣơng (1998), “Định lƣợng đồng thời acid benzoic acid salicylic thuốc mỡ benzosali phƣơng pháp quang phổ đạo hàm”, Thông báo kiểm nghiệm số 2, trang – Đinh Thị Hải Bình, Lê Thị Ngọc Diệp, Nguyễn Thanh Hải Trịnh Văn Lẩu (2010), “Định lƣợng đồng thời Loratadin Pseudoephedrin phƣơng pháp quang phổ đạo hàm bậc nhất”, Tạp chí Kiểm nghiệm thuốc số 2, trang 13 – 17 Đặng Trần Phƣơng Hồng Trịnh Văn Quỳ (1997), “Định lƣợng đồng thời Sulfadoxin Pyrimethamin viên nén Fansida phƣơng pháp HPLC phƣơng pháp quang phổ đạo hàm”, Thông báo kiểm nghiệm số 1, trang – 11 Đặng Trần Phƣơng Hồng Trịnh Văn Quỳ (1996), “Định lƣợng đồng thời vitamin B1 vitamin B6 viên nang vitamin B1 + B6 phƣơng pháp quang phổ đạo hàm”, Thông báo kiểm nghiệm số 1, trang – 11 10 Đặng Trần Phƣơng Hồng Trịnh Văn Quỳ (1996), “Định lƣợng Cloramphenicol, Dexamethason natri phosphat Naphazolin nitrat thuốc nhỏ mắt Collydexa phƣơng pháp quang phổ tử ngoại đạo hàm tỷ đối”, Thông báo kiểm nghiệm số 1, trang – 47 11 Lê Minh Trí Nguyễn Mã Huy Thanh (2003), “Định lƣợng đồng thời Loratadin Pseudoephedrin sulfat chế phẩm viên nén phƣơng pháp quang phổ tử ngoại đạo hàm”, Tạp chí Dƣợc học số 2, trang 28 – 30 12 Nguyễn Tƣờng Vy Đỗ Ngọc Thanh (2003), “Định lƣợng đồng thời Sulfamethoxazol Trimethoprim viên nén Trasepton phƣơng pháp quang phổ đạo hàm tỷ đối”, Tạp chí dƣợc học số 12, trang 28 – 29 13 Nguyễn Thị Mộng Thùy Nguyễn Đức Tuấn (2003), “Định lƣợng Nimesulid viên nén phƣơng pháp quang phổ đạo hàm bậc 2”, Tạp chí Dƣợc học số 4, trang 16 – 18 14 Ngô Tuấn Cộng Tô Minh Hùng (1997), “Phƣơng pháp quang phổ đạo hàm định lƣợng nhanh Quinin hydroclorid có lẫn chất phân hủy”, Thông báo kiểm nghiệm số 2, trang 23 – 28 15 Ngô Tuấn Cộng, Nguyễn Thu Hƣơng Tô Minh Hùng (1999), “Sử dụng máy tính lấy giá trị đạo hàm bậc phổ tỷ đối định lƣợng Cloramphenicol Naphazolin thành phần thuốc Naphaxetin”, Tạp chí Kiểm nghiệm thuốc số 2, trang 11– 16 16 Thái Nguyễn Hùng Thu (2007), "Định lƣợng trực tiếp dung dịch nhiều thành phần quang phổ đạo hàm tỷ đối", Tạp chí Dƣợc học số (376), 35 – 38 17 Trần Tứ Hiếu, Bùi Thị Hảo, Trịnh Văn Quỳ Đặng Trần Phƣơng Hồng (2003), “Định lƣợng đồng thời Papaverin Theophylin thuốc Sedokal phƣơng pháp quang phổ đạo hàm”, Tạp chí Kiểm nghiệm thuốc số 2, trang 19 – 23 Tiếng Anh 18 Andrew Moore, Sally Collins, Dawn Carroll, Henry McQuay (1997) Paracetamol with and without codeine in acute pain: a quantitative systematic review p.70 p.193–201 19 A Savitzky and M.J.E Golay (1964), “Smoothing and differentiation of data by simplified least squares procedures”, Analytical Chemistry 36, pp 1627 – 1639 48 20 A T Giese and C.S French (1955), “The analysis of overlapping spectral absorption bands by derivative spectrophotometry”, Applied Spectroscopy 9, pp.78 – 96 22 European Pharmacopoeia Fouth Edition (2002), Vol I, p.40-42, 647-648, 952954 23 Fadia H Metwally (2008), Simultaneous determination of Nifuroxazide and Drotaverine hydrochloride in pharmaceutical preparations by bivariate and multivariate spectral analysis, Spectrochimica Acta Part A 69, 343-392 24 Douglas A Skoog, Donald M West, F James Holler, Stanley R Crouch (2004) Fundamentals of Analytical Chemistry Chapter 30: Introduction to Analytical Separation; p 937 25 G Talsky (1994), Derivative spectrophotometry Low and high order, VCH Verlagsgesellschaft mbH, pp 45 – 95, 113 – 129 26 Liudmil Antonovand Daniela Nedeltcheva (2000) Resolution of overlapping UV-VIS absorption bands and quantitative analysis Chem Soc Rev, 29, 217-227 27 M Levent Altun, Nevin Erk (2001), The rapid quantitative analysis of phenprobamate and acetaminophen by RP-LC and compensation technique, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 25 85-92 28 N Erk (1999), “Application of derivative-differential UV spectrophotometry and ratio derivative spectrophotometric determination of mephenoxalone and acetaminophen in combined tablet preparation”, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 21, pp 429 – 437 29 Pharmcopoeia Fourth Edition (2002), Vol I, p 32-33, 185-186 30 S A ệzkan and B Uslu (2002), “Determination of lamivudine and zidovudine in binary mixtures using first derivative spectrophotometric, first derivative of the ratio-spectra and high-performance liquid Analytica Chimica Acta 466, pp 175 – 185 49 chromatography–UV methods”, 31 The Japanese Pharmacopoeia XIV (2001), p.244-245, 380 32 The United States Pharmacopoeia 28 (2005), Vol I, p.143-14, 525-527 50 PHỤ LỤC BẢNG KHẢO SÁT MẬT ĐỘ QUANG THEO BƢỚC SÓNG CỦA HỖN HỢP DUNG DỊCH AMO 100mg/L CLO 100mg/L TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 Bƣớc sóng (nm) 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 227,1 227,2 227,3 227,4 227,5 227,6 Mật độ quang dung dịch hỗn hợp AMO 100mg/L CLO 100mg/L 2,805 2,873 2,901 2,906 2,904 2,908 2,914 2,915 2,917 2,919 2,926 2,929 2,931 2,926 2,922 2,911 2,897 2,888 2,875 2,858 2,835 2,813 2,795 2,773 2,75 2,727 2,703 2,676 2,675 2,672 2,67 2,667 2,665 2,663 Mật độ quang dung dịch CLO 100mg/L 2,628 2,675 2,694 2,694 2,693 2,702 2,706 2,712 2,713 2,716 2,715 2,708 2,698 2,688 2,677 2,663 2,648 2,635 2,618 2,601 2,58 2,557 2,533 2,506 2,479 2,448 2,416 2,383 2,379 2,376 2,372 2,369 2,366 2,362 51 Mật độ quang dung dịch AMO 100mg/L 2,552 2,589 2,604 2,601 2,6 2,6 2,6 2,598 2,594 2,585 2,57 2,547 2,518 2,486 2,45 2,411 2,376 2,343 2,313 2,289 2,271 2,257 2,246 2,236 2,224 2,21 2,194 2,174 2,171 2,169 2,167 2,165 2,163 2,16 TT 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 Bƣớc sóng (nm) 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 258,1 258,2 258,3 258,4 258,5 258,6 258,7 Mật độ quang dung dịch hỗn hợp AMO 100mg/L CLO 100mg/L 2,653 2,627 2,597 2,564 2,531 2,498 2,466 2,432 2,398 2,361 2,324 2,282 2,234 2,176 2,103 2,016 1,912 1,792 1,659 1,517 1,372 1,229 1,094 0,969 0,858 0,761 0,678 0,608 0,551 0,505 0,469 0,466 0,463 0,46 0,458 0,455 0,452 0,45 Mật độ quang dung dịch CLO 100mg/L 2,348 2,309 2,27 2,226 2,179 2,13 2,076 2,017 1,953 1,884 1,81 1,731 1,648 1,561 1,47 1,376 1,279 1,181 1,082 0,984 0,888 0,796 0,71 0,629 0,554 0,486 0,426 0,374 0,328 0,29 0,257 0,254 0,251 0,249 0,246 0,243 0,24 0,238 52 Mật độ quang dung dịch AMO 100mg/L 2,15 2,123 2,092 2,058 2,02 1,977 1,928 1,871 1,803 1,723 1,633 1,532 1,422 1,305 1,185 1,066 0,95 0,841 0,74 0,649 0,567 0,496 0,436 0,387 0,346 0,313 0,288 0,27 0,257 0,248 0,243 0,243 0,243 0,243 0,243 0,242 0,242 0,242 TT 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 Bƣớc sóng (nm) 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 289,1 289,2 289,3 289,4 289,5 289,6 289,7 Mật độ quang dung dịch hỗn hợp AMO 100mg/L CLO 100mg/L 0,443 0,423 0,41 0,403 0,399 0,399 0,401 0,406 0,411 0,418 0,424 0,429 0,432 0,431 0,426 0,418 0,408 0,397 0,384 0,368 0,349 0,324 0,295 0,26 0,221 0,181 0,142 0,108 0,081 0,061 0,047 0,046 0,044 0,043 0,042 0,042 0,041 0,04 Mật độ quang dung dịch CLO 100mg/L 0,23 0,209 0,191 0,177 0,166 0,158 0,152 0,148 0,145 0,143 0,141 0,139 0,137 0,135 0,132 0,129 0,125 0,121 0,116 0,109 0,102 0,094 0,085 0,077 0,068 0,061 0,053 0,047 0,041 0,037 0,033 0,032 0,032 0,032 0,031 0,031 0,031 0,031 53 Mật độ quang dung dịch AMO 100mg/L 0,242 0,244 0,247 0,253 0,259 0,266 0,273 0,281 0,288 0,296 0,304 0,311 0,315 0,315 0,312 0,307 0,3 0,293 0,285 0,275 0,262 0,245 0,224 0,197 0,166 0,133 0,101 0,074 0,052 0,037 0,027 0,026 0,026 0,025 0,024 0,024 0,023 0,022 TT 111 112 113 114 Bƣớc sóng (nm) 290 291 292 293 Mật độ quang dung dịch hỗn hợp AMO 100mg/L CLO 100mg/L 0,037 0,031 0,027 0,024 Mật độ quang dung dịch CLO 100mg/L 0,03 0,027 0,025 0,024 54 Mật độ quang dung dịch AMO 100mg/L 0,021 0,017 0,014 0,013 [...]... Faclacin 2 bằng phƣơng pháp phổ đạo hàm với hai mục tiêu sau: 1 Xây dựng phép định lƣợng đồng thời hỗn hợp hai thành phần Amoxicillin và Cloxacillin bằng các phƣơng pháp quang phổ tử ngoại lấy phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao làm phƣơng pháp đối chiếu 2 Ứng dụng các phƣơng pháp này để định lƣợng Amoxicillin và Cloxacillin trong một số lô của chế phẩm Faclacin 2 của Công ty Cổ phần Dƣợc phẩm Trung... từ phổ UV – VIS sang phổ đạo hàm cho thấy thông tin thu đƣợc trên phổ đạo hàm nhiều hơn phổ hấp thụ ban đầu (số cực trị tăng khi số bậc đạo hàm tăng) có thể ứng dụng đƣợc trong phân tích định tính Hình 1.2 Phổ hấp thụ (a), phổ đạo hàm bậc 1 (b), phổ đạo hàm bậc 4 (c) (dải phổ của 2 chất có cùng vị trí và cùng độ cao nhƣng có độ rộng gấp đôi); phổ hấp thụ của trans – stillben trong cyclohexan (d) và phổ. .. độ quang của hỗn hợp AMO và CLO bằng tổng mật độ quang của dung dịch AMO với dung dịch CLO có cùng nồng độ 3.1.2.1 Chọn bước sóng định lượng đồng thời Amoxicillin và Cloxacillin Theo lý thuyết, đối với phƣơng pháp PĐH và PĐHTĐ 2 yếu tố chính ảnh hƣởng đến kết quả là bƣớc sóng định lƣợng và các thông số của phép lấy đạo hàm, phép làm trơn phổ đồ  Phƣơng pháp phổ đạo hàm - Lấy đạo hàm bậc nhất của phổ. .. đồng thời AMO và CLO trong hỗn hợp hai thành phần bằng quang phổ tử ngoại do sự đan xen phổ (Hình 3.8) Để định lƣợng AMO và CLO trong chế phẩm bằng phƣơng pháp quang phổ 26 truyền thống phải tiến hành tách chiết riêng từng hoạt chất rồi đo quang ở bƣớc sóng thích hợp Tuy nhiên, phƣơng pháp này thƣờng đòi hỏi kỹ thuật xử lý mẫu phức tạp và/ hoặc tiêu tốn thời gian Trong nghiên cứu này, kỹ thuật phổ đạo hàm. .. tăng bậc đạo hàm (n) mối tƣơng quan tuyến tính giữa đạo hàm T và nồng độ C chỉ có đƣợc trong các điều kiện đặc biệt trong khi giá trị đạo hàm của A luôn tỷ lệ với C dù n vô cùng lớn (phƣơng trình (3)) Đạo hàm bậc n của A: (3) 8 Hình 1.1 Phổ hấp thụ và đạo hàm của dải phổ tuân theo định luật phân bố Gauss [3] Hình 1.1 biểu diễn phổ hấp thụ và các phổ đạo hàm tƣơng ứng của một dải phổ tuân theo định luật... thuật quang phổ đƣợc ứng dụng nhiều trong công tác kiểm nghiệm thuốc Trong số các kỹ thuật này, phƣơng pháp quang phổ đạo hàm và đạo hàm tỉ đối đƣợc biết đến với ƣu điểm nổi bật cho phép định lƣợng đồng thời và trực tiếp, không đòi hỏi quá trình tách chiết hoặc tinh chế đối với hỗn hợp đa thành phần, giúp giảm thiểu thời gian và chi phí [18, 22, 26] Do vậy, nghiên cứu ứng dụng quang phổ để định lƣợng đồng. .. cứu sử dụng phổ đạo hàm bậc nhất [7, 14, 17, 8, 9, 11] và đạo hàm bậc nhất phổ tỷ đối [15, 10, 12] để định lƣợng các chế phẩm hai thành phần Có thể nhận thấy, định lƣợng lƣợng bằng quang phổ đạo hàm đều có qui trình xử lý mẫu đơn giản, sử dụng dung môi thân thiện với môi trƣờng, tiết kiệm chi phí và thời gian, có độ đúng và độ lặp lại cao Tuy nhiên, phổ đồ và trình tự tối ƣu hóa phép lấy đạo hàm đƣợc... + Kiểm tra độ đúng của phƣơng pháp 2.3.2 Ứng dụng để định lƣợng đồng thời AMO và CLO trong viên nang Faclacin 2 - Tiến hành định lƣợng AMO và CLO trong cùng một mẫu bằng các phƣơng pháp: + Quang phổ tử ngoại UV-VIS (phổ đạo hàm, phổ đạo hàm tỉ đối) + Sắc ký lỏng hiệu năng cao - So sánh kết quả của các phƣơng pháp đo quang đối với phƣơng pháp HPLC và rút ra nhận xét 2.3.3 Xử lý kết quả thực nghiệm [3]... TỔNG QUAN VỀ PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 1.2.1 Các phƣơng pháp định lƣợng amoxicillin và cloxacillin trong chế phẩm Để định lƣợng Amoxicillin và Cloxacillin trong các chế phẩm đơn thành phần, phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao thƣờng đƣợc sử dụng hiện nay tại Việt Nam Theo qui định của các dƣợc điển quốc tế, các hoạt chất này đƣợc tách ra khỏi nền mẫu bằng cột pha đảo cột C18 và phát hiện bằng detector tử... ra, có thể định lƣợng amoxicillin trong chế phẩm bằng phép chuẩn độ đo thế Theo phƣơng pháp này, hàm lƣợng phần trăm của amoxicillin đƣợc tính bằng hàm lƣợng phần trăm của penicillin toàn phần trừ đi hàm lƣợng phần trăm của sản phẩm phân huỷ Chế phẩm đƣợc hòa tan vào dung dịch đệm boric pH 9,0 và anhydrid acetic, trƣớc khi tiến hành phản ứng thuỷ phân trong môi trƣờng kiềm và chuẩn độ bằng bằng Hg(NO)2 ... 1: Nng Cloxacillin 60mg/L vi s chia Amoxicillin 60mg/L ng 2: Nng Cloxacillin 80mg/L vi s chia Amoxicillin 60mg/L ng 3: Nng Cloxacillin 100mg/L vi s chia Amoxicillin 60mg/L ng 4: Nng Cloxacillin. .. trihydrat v Cloxacillin Mt s c im húa lý ca Amoxicilin trihydrat v Cloxacillin c túm tt bng 1.1: Bng 1.1 Mt s c im hoỏ lý ca AMOXICILLIN TRIHYDRAT v CLOXACILLIN NATRI AMOXICILLIN TRIHYDRAT CLOXACILLIN. .. sau: + Cloxacillin (dng cloxacillin natri) : 250 mg + Amoxicillin (dng Amoxicillin trihydrat) : 250 mg + Tỏ dc: tinh bt sn, bt talc, magnesi stearat va cho viờn - Cht chun nghiờn cu + Amoxicillin