Trường ĐHSP Hà Nội Cao Thanh Tùng Khóa luận tốt nghiệp K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp trường đại học sư phạm hà nội khoa hoá học cao tùng nghiên cứu Phân lập hợp chất hữu chiết xuất từ dịch mâm xôi (rubus alceaefolius Poir) khoá luận tốt nghiệp đại học chuyên ngành : hoá hữu Hà Nội - 2010 Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp trường đại học sư phạm hà nội khoa hoá học cao tùng nghiên cứu Phân lập hợp chất hữu chiết xuất từ dịch mâm xôi (rubus alceaefolius Poir) khoá luận tốt nghiệp đại học chuyên ngành : hoá hữu Người hướng dẫn khoa học TS Nguyễn văn Hà Nội - 2010 Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp mục lục Trang Lời cảm ơn Lời cam đoan Danh muc chữ viết tắt danh mục hình vẽ danh mục bảng biểu sơ đồ mở đầu .1 chương tổng quan I.1.Tổng quan Mâm xôi I.1.1 Thực vật học .4 I.1.2 Phân bố, sinh thái .5 I.1.3 Công dụng I.1.4 Thành phần hoá học 1.2 Vài nét lignan I.2.1 Đại cương phân loại I.2.2 Các dẫn xuất quan trọng Lignan 10 I.2.3 Tổng hợp Lignan 12 Chương II đối tượng phương pháp nghiên cứu 21 II.1 Mẫu thực vật 21 II.2 Phương pháp phân lập hợp chất 21 II.2.1 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 21 II.2.2 Sắc ký lớp mỏng điều chế .21 II.2.3 Sắc ký cột (CC) 21 II.3 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 22 II.3.1 Điểm nóng chảy (Mp) .22 II.3.2 Phổ khối lượng (ESI-MS) 22 Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp II.3.3 Phổ cộng hưởng từ nhân (NMR) .22 Chương III Thực nghiệm kết 23 III.1 Thu mẫu thực vật xử lý mẫu 23 III.2 Phân lập hợp chất 23 III.3 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất .25 Chương IV Thảo luận 26 IV.1 Hợp chất RA21.6 .26 (Axít-3-O-methylellagic7--D-Rhamnopyranoside) (7) IV.2 Hợp chất RA13.3 (Icariside E4) (2) 32 v kết luận Tài liệu tham khảo Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp mở đầu Việt Nam nằm vùng lục điạ Đông Nam thuộc khu vực nhiệt đới hệ thực vật Việt Nam vô phong phú, đa dạng, đặc biệt tài nguyên rừng Rừng Việt Nam có thảm thực vật phong phú vào loại bậc giới với khoảng 12000 loài, có 4000 loài [1] nhân dân ta dùng làm thảo dược Đây thực tài sản vô quý báu mà thiên nhiên ban tặng cho đất nước ta Ngoài giá trị to lớn kinh tế mà thực vật đem lại, có ý nghĩa vô quan trọng việc cải tạo môi trường đất, nước không khí Những năm gần với phát triển số ngành khoa học công nghệ sinh học, công nghệ gen làm tăng thêm không số lượng mà làm tăng thêm giá trị mà thực vật đóng góp cho kinh tế đất nước với phát nhiều chất có hoạt tính sinh học cao nguồn gốc tự nhiên, nhà khoa học lại đầu việc tạo loại thuốc đặc trị giúp điều trị bệnh hiểm nghèo cho người, cải thiện chất lượng sống kéo dài tuổi thọ Cây mâm xôi (Rubus alceaefolius ) thuộc họ Hoa hồng hay có tên gọi khác đùm đũm loài sử dụng từ lâu dân gian làm thuốc chữa bệnh Quả mâm xôi chữa bệnh đường tiêu hoá, đau thận, tinh ứ, liệt dương đái són hoạt tinh Cành rễ dùng chữa viêm gan cấp mãn tính, viêm loét miệng, dùng cho phụ nữ sinh đẻ uống làm thông máu, tiêu cơm Cây sử dụng làm trà uống giúp nhiệt lợi tiểu Theo nghiên cứu nhà nghiên cứu thuộc trường đại học Kentucky (ohio- Hoa Kỳ) trái mâm xôi đen ngăn chặn khối u phát triển trường hợp ung thư miệng Chỉ cho thấy tầm quan trọng Mâm xôi việc chữa trị số bệnh thường gặp người Tuy nhiên cho Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp tới chưa có tài liệu thức xác định thành phần hợp chất hữu có chứa dịch mâm xôi Xuất phát từ ý nghĩa thực tiễn mà chọn đề tài khóa luận tốt nghiệp là: " Nghiên cứu phân lập hợp chất hữu chiết xuất từ dịch mâm xôi " Việc nghiên cứu tìm hiểu nhằm tìm chất giúp tăng thêm giá trị mâm xôi đời sống Nhiệm vụ khóa luận Phân lập số hợp chất từ dịch chiết nước mâm xôi Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Chương Tổng Quan 1.1 Giới thiệu mâm xôi 1.1.1 Thực vật học Cây Mâm xôi hay gọi đùm đũm có tên khoa học Rubus alceaefolius Poir., thuộc họ Hoa hồng - Rosaceae Đây loài bụi nhỏ, thân leo có gai to dẹt Cành mọc vươn dài, có nhiều lông Lá đơn, mọc so le, hình bầu dục, hình trứng gần tròn, chia thùy nông, không đều, gân chân vịt, mép khía răng, mặt màu lục sẫm phủ lông lởm chởm, mặt có nhiều lông mềm, mịn màu trắng xỉn; cuống dài có gai; kèm sớm rụng Cụm hoa mọc kẽ đầu cành thành chùm ngắn; bắc giống kèm, hoa màu trắng; cánh hoa 5, mỏng hình tròn, nhị nhiều thường dài cánh hoa, nhị dẹt, noãn nhiều Quả hình cầu, gồm nhiều hạch tụ họp lại dáng mâm xôi, chín màu đỏ tươi, ăn Cây hoa tháng 2-3, tháng 5-7 [1, 2] Hình 1.1.1 Cây mâm xôi Rubus alceaefolius Poir Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp 1.1.2 Phân bố, sinh thái Theo Đỗ Huy Bích cộng [1], giới chi Rubus có khoảng 400 loài, hầu hết bụi, mọc thẳng hay bụi trườn, phân bố chủ yếu vùng ôn đới, cận nhiệt đới vùng nhiệt đới Bắc bán cầu Một vài loài trồng lấy Việt Nam, chi có 51 loài, thứ, mâm xôi loài phân bố tương đối rộng rãi khắp tỉnh vùng núi thấp, trung du đồng Cây ưa sáng ẩm, thường mọc trùm lên bụi leo khác ven rừng ẩm, rừng núi đá vôi, đồi, trảng bụi ưa sáng đất sau nương rẫy vùng đồng bằng, mâm xôi mọc lẫn lùm bụi quanh làng, hai bên đường Cây sinh trưởng, phát triển nhanh Những bị chặt phá hoa nhiều hàng năm Cây có khả tái sinh mạnh sau bị chặt phá 1.1.3 Công dụng Lá, cành rễ mâm xôi có vị nhạt, tính bình, có tác dụng nhiệt, tán ứ, tiêu viêm, huyết, kích thích tiêu hóa, giúp ăn ngon miệng Cành phơi khô, nấu nước uống thay chè, dùng cho phụ nữ sau đẻ sức người ăn không tiêu, đầy bụng Ngoài cành mâm xôi dùng phối hợp với Mộc thông, Ô rô để chữa viêm tuyến vú, viêm gan cấp mạn tính Quả có vị ngọt, tính bình, dùng thay vị Phúc bồn tử y học cổ truyền, có tác dụng bổ gan thận, giữ tinh khí, làm tráng dương, mạnh sức Quả dùng chữa thận hư, liệt dương, di tinh, đái són, đái buốt [1, 2] ấn Độ người ta dùng mâm xôi làm thuốc chữa bệnh đái dầm trẻ em Nước sắc vỏ thân dùng làm thuốc điều kinh, chữa tiêu chảy Trung Quốc, mâm xôi sử dụng y học cổ truyền để chữa albumin niệu, viêm tuyến vú viêm gan mạn tính số vùng Trung Quốc, sử dụng để chữa số bệnh ung thư định Theo kết nghiên cứu Cui C -B cộng sự, rễ mâm xôi thể hoạt tính ức chế Cao Thanh Tùng K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp mạnh chu kỳ tế bào pha G0/G1 dòng tế bào tsFT210 (Chu kỳ tế bào, đường để tế bào sinh sôi, trình sinh học kiểm soát chặt chẽ thực tế ung thư tăng sinh vô hạn độ không mong muốn tế bào ung thư với thoái hóa chu kỳ tế bào Do đó, chất ức chế chu kỳ tế bào có khả tiềm tàng điều trị ung thư) [5] 1.1.4 Thành phần hoá học Theo sách thuốc Việt Nam [1, 2], Mâm xôi chứa axit hữu (chủ yếu axit citric, malic, salycilic), đường, pectin Lá chứa tanin Tuy nhiên, công trình nghiên cứu công bố loài Rubus alceaefolius Mới có nhà khoa học Trung Quốc nghiên cứu loài nghiên cứu thuốc mọc Trung Quốc Còn Việt Nam hoàn toàn chưa có nghiên cứu thuốc quí Theo tra cứu chúng tôi, từ R alceaefolius mọc Trung Quốc, năm 1998 Gan L đồng nghiệp phân lập được: axit corosolic (1), axit tormentic (2), niga-inchigoside F1 (3), trachelosperoside E-1 (4) suavissimoside R1 (5) [4] Năm 2000, Gan L đồng nghiệp lại công bố phân lập alcesefoliside (6), hyperoside (7), vomifoliol (8), õ-sitosterol (9), daucosterol (10) dotriacontyl alcohol (11) [5] Năm 2002, nhóm nghiên cứu Cui C -B công bố phân lập rubuphenol (12) sanguiin H-2 ethyl ester (13), axit ellagic (14), ethyl gallate (15), 1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-õ-Dglucopyranose (16) 1,2,3,6-tetra-O-galloyl-õ-D-glucopyranose (17) [3] Dưới dẫn cấu trúc số hợp chất phân lập từ loài R alceaefolius Cao Thanh Tùng 10 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp tín hiệu 21 cacbon, tín hiệu phân tử đường rhamnozơ ( 100,10, 71,76, 70,55, 69,91, 69,84, 17,83), nhóm metoxi ( 60,88) hai cacbon CH vòng thơm  111,45 x2 lại 13 cacbon bậc bốn Điều cho thấy cấu trúc phân tử (1) có nhiều vòng thơm ghép với Sự gợi ý đến cấu trúc axit 3-O-methylellagic 7--DRhamnopyranoside ( 1) O HO O 1' O O OH 8a 3b 3' 4' 3a OH 5a 2' H3C 10a 5b 5' 6' 10 O OCH3 O HO OH Hình 3.4.1.b Cấu trúc hoá học (1) Hình 3.4 1.c Phổ 13C-NMR (1) Cao Thanh Tùng 43 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hình 3.4.1.d Phổ 13C-NMR phổ DEPT (1) Hình 3.4.1.e Phổ HSQC (1) Bảng 3.4.1 Kết phổ NMR ( 1) Cao Thanh Tùng 44 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp C a,b 111,45 (d) H a,c (J, Hz) 7,49 (1H, s) 152,60 (s) - 3a 3b 140,03 (s) 141,66 (s) 111,15 (s) - 5a 158,56 (s) 107,07 (s) - 5b 114,11 (s) 111,45 (d) 7,72 (1H, s) 146,38 (s) - 8a 141,11 (s) 136,00 (s) - 10 10a 1’ 158,52 (s) 112,84 (s) 100,10 (d) 5,50 (1H, d, 1,5 Hz) 2’ 69,91 (d) 3,55 (1H, m) 3’ 4’ 5’ 70,55 (d) 71,76 (d) 69,84 (d) 3,87 (1H, br d, 8,5) 3,33 (1H*) 4,04 (1H, br d) 6’ OCH3 8-OH 2-OH 17,83 (q) 60,88 (q) 1,45 (3H, d, 6,5) 4,05 (3H, s) 11,01 (1H, br s) 10,87 (1H, br s) C a Đo DMSO, b500MHz, c125MHz Trên phổ 13C-NMR tín hiệu hai nhóm este nội vòng  158,52 158,56 điển hình cho hợp chất có khung axit ellagic [6,7] Thông thường nhóm cacbonyl este nội vòng có độ dịch chuyển hoá học cao (từ 168-172 ppm), tức tín hiệu tương ứng cộng hưởng vùng trường thấp Để xác định xác cấu trúc phân tử (1), phổ hai chiều đo bao gồm phổ HSQC HMBC Dựa vào phổ HSQC, Cao Thanh Tùng 45 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp liên kết H-C trực tiếp xác định Trên phổ HMBC, tương tác H-C chủ yếu mô tả Hình 3.4.1.e Phân tử đường xác định nối với C-4 nhờ tương tác HMBC H-2” ( 5,50) với C-4 ( 146,38) Tương tác HMBC proton methoxyl  4,05 với C-3’ ( 140,03) khẳng định nhóm methoxyl nối với C-3’ Ngoài ra, xuất hai tín hiệu hai proton hai nhóm hydroxyl  11,01 10,87 chứng tỏ phân tử hai nhóm hydroxyl Những phân tích nêu cho ta công thức cộng C21H18O12 ( 1) Kết lại kiểm tra phổ khối lượng Trên phổ khối lượng phun mù điện tử ESI-MS, xuất píc m/z 463 [M+H]+ hoàn toàn phù hợp với công thức phân tử C21H18O12 (1) Như vậy, hợp chất (1) xác định axit 3-O-methylellagic 7--D-Rhamnopyranoside, hợp chất lần đầu phân lập từ mâm xôi O 1'' O O O OCH 3' 2' OH 1' OH 2'' 7' 5'' HO 6'' 10 O 3'' H3C 4'' O HO OH Hình 3.4.1.f Một số tương tác phổ HMBC (1) Cao Thanh Tùng 46 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hình 3.4.1.g Phổ ESI-MS ( 1) Hình 3.4.1.h Phổ HMBC của( 1) Cao Thanh Tùng 47 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp 3.4.2 Hợp chất RA13-3 (Icariside E4) (2) Hợp chất (2) nhận dạng chất bột không màu Các phổ NMR (2) có dạng phổ hợp chất liglan-glycozit Trên phổ 1H-NMR xuất tín hiệu proton vòng thơm  7,04, 7,10, 6,94, 6,75, 6,74 Phân tử đường rhamnozơ xác định tín hiệu H-1”  5,35 (d, J = 1,5 Hz), 3,90, 4,08, 3,47 3,83 (4H) tín hiệu H-6” 1,23 (d, J = 6,5 Hz) Hai nhóm metoxi  3,82 3,88 Ngoài có hai nhóm oximetylen  3,58 (2H, t, J = 2,5 Hz)  3,91 (1H)/3,74 (1H), proton gắn với nhóm oximetin  5,58 (1H, d, J = 6,0 Hz) Hình 3.4.2.a Phổ 1H-NMR (2) OH 6' 5' 1' 1" 5" O 4' OH 2" O 6" H3C O 3' H3CO 9' CH2OH 7' 8' 2' H3CO 3" OH 4" OH Hình 3.4.2.b Cấu trúc hoá học (2) Cao Thanh Tùng 48 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hình 3.4.2.c Phổ 13C-NMR (2) Cao Thanh Tùng 49 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Bảng 3.4.2 Kết phổ NMR ( 2) C* [8] Pyridin-d5 138,0 (s) C (125 MHz) MeOD-d4 138,82 (s) 111,3 (d) 111,31 (d) 147,3 (s) 151,4 (s) 119,0 (d) 152,12 (s) 146,58 (s) 119,61 (d) 119,0 (d) 88,0 (d) 119,12 (d) 88,54 (d) 6,94 (1H, dd, 8,0, 2,0) 5,58 (1H, d, 6,0) 1’ 2’ 3’ 4’ 55,2 (d) 64,5 (t) 55,63 (d) 65,09 (t) 129,9 (s) 113,9 (d) 144,7 (s) 146,4 (s) 137,09 (s) 114,21 (d) 145,23 (s) 147,49 (s) 3,44 (1H, m) 3,91 (dd*)/3,74 (dd*) 6,75 (1H, br s) - 5’ 6’ 7’ 8’ 9’ 1” 136,4 (s) 117,6 (d) 32,7 (t) 36,0 (t) 61,5 (t) 101,6 (d) 129,62 (s) 117,94 (d) 32,88 (t) 35,78 (t) 62,22 (t) 101,40 (d) 6,74 (1H, br s) 2,64 (2H, t, 8,0) 1,83 (2H, m) 3,58 (2H, t, 2,5) 5,35 (1H, d, 1,5) 2” 3” 4” 72,7 (d) 72,1 (d) 73,8 (d) 72,20 (d) 72,04 (d) 73,83 (d) 3,90 (1H, m*) 4,08 (1H, m*) 3,47 (1H, m*) 5” 6” 3-OCH3 3’-OCH3 71,0 (d) 18,6 (q) 56,0 (q) 56,4 (q) 70,82 (d) 17,93 (q) 56,47 (q) 56,80 (q) 3,83 (1H, m) 1,23 (3H, d, 6,5) 3,82 (3H, s) 3,88 (3H, s) C H (500 MHz; J, Hz) MeOD-d4 7,04 (1H, d, 2,0) 7,10 (1H, d, 8,0) *C Icariside E4 [8], Cao Thanh Tùng 50 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp OH 9' CH2OH 5' 1' O 1" 4' OH O O 3' H3CO H3CO OH OH H3C Hình 3.4.2.d Các tương tác phổ HMBC (2) Trên phổ 13 C-NMR xuất tín hiệu 26 cacbon, có 12 cabon thuộc vào hai vòng thơm  152,12 (s), 147,49 (s), 146,58 (s), 145,23 (s), 138,82 (s), 137,09 (s), 129,62, 119,61 (d), 119,12 (d), 117,94, 114,21 (d), (s), (d) 111,31 (d), hai nhóm metoxi  56,47 56,80, hai nhóm oximetylen  62,22 65,09, cacbon CH nối với oxi  88,54 Ngoài có tín hiệu phân tử đường rhamnozơ  101,40, 72,20, 72,04, 73,83, 70,82 17,93 Những phân tích chi tiết phổ NMR cho thấy công thức phân tử dự đoán (2) C26H34O10 với khối lượng phân tử 506 Kết dự đoán kiểm chứng xuất pic ion m/z 529 [M+Na] + phổ ESI-MS (positive) Ngoài phổ hai chiều HSQC HMBC thực để xác định xác cấu trúc phân tử (2) Với kiện phổ nêu trên, hợp chất (2) dự đoán Icariside E4, liglan-glycozit [8] Cao Thanh Tùng 51 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hỡnh 3.4.2.e Phổ ESI-MS ( 2) Tuy nhiên so sánh giá trị phổ (2) với Icariside E4 (Bảng 3.4.2) kiểm tra tương tác phổ hai chiều HSQC HMBC thấy số vị trí cần phải gán lại giá trị độ dịch chuyển hoá học Các tương tác chi tiết phổ HMBC mô tả Hình 3.4.2.d, tương tác H-8’ với C-1’ ( 137,09) với tương tác H-7’ với C1’/C-6’ tương tác H-8 với C-4’ C-5’ (129,62) chứng tỏ hai giá trị  137,09 129,62 phải gán tương ứng cho C-1’ C-5’ Cũng tương tự vậy, tương tác H-1” phân tử đường tương tác HMBC với C-4 ( 146,58) tương tác proton metoxi  3,82 với cacbon C-3 ( 152,12) chứng tỏ hai vị trí phải gán lại độ dịch chuyển hoá học Từ kết phổ nêu trên, hợp chất (2) xác định Icariside E4 Tuy nhiên giá trị độ dịch chuyển hoá học hợp chất xác định lại cách xác Đây lần hợp chất Icariside E4 (2) phân lập từ mâm xôi Cao Thanh Tùng 52 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hình 3.4.2.f Phổ HSQC (2) Hình 3.4.2.g Phổ HMBC (2) Cao Thanh Tùng 53 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Hình 3.4.2.h Phổ HMBC dãn rộng ( 2) Hình 3.4.2.i Phổ HMBC dãn rộng ( 2) Cao Thanh Tùng 54 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Kết luận Đã thu thập mẫu lượng lớn mâm xôi loài TS Trần Huy Thái (Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật) xác định Rubus alceaefolius Poir (Rosaceae) Bằng phương pháp sắc ký kết hợp, hợp chất phân lập từ dịch chiết nước mâm xôi (Rubus alceaefolius poir) Các hợp chất là: - 3-O-methylellagic 7--D-Rhamnopyranoside (1) - Icariside E4 (2) Cấu trúc hợp chất xác định nhờ vào phương pháp phổ đại phổ cộng hưởng từ hạt nhân chiều ( 1H-NMR, 13CNMR, DEPT 135 DEPT 90), hai chiều (HSQC, HMBC), Phổ khối lượng phun mù điện tử (ESI) Cấu trúc hóa học ( 1) (2) O HO O 1' O O 8a OH 10 5b 3a 5a 2' O OCH3 3' H3C 4' OH 3b 5' 6' 10a O HO OH 3-O-methylellagic 7--D-Rhamnopyranoside (1) OH 6' 5' 1' 1" 5" O 4' OH 2" O 6" H3C O 3' H3CO 9' CH2OH 7' 8' 2' H3CO 3" OH 4" OH Icariside E4 (2) Cao Thanh Tùng 55 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp Tài liệu tham khảo Tài liệu tiếng Việt Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập Trần Toàn (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam (tập I), Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật Hà Nội, tr 827-828 Võ Văn Chi(1997), Từ điển Cây thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 728 Tài liệu tiếng Anh Cui C -B., Zhao Q., Cai B., Yao X and Ossadsa H, (2002) Two new and four known polyphenolics obtained as new cell-cycle inhibitors from Rubus aleaefolius Poir, Journal of Asian Natural Products Research, Vol 4(4), pp 243–252 Gan L., Zhao Y., Zhang J., and Jiang F(1998) Isolation and identification of triterpenoids from Rubus alceaefolius Poir, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, Vol 23(6), pp 361-362 Gan L., Wang B., Liang H., Zhao Y, and Jiang F(2000), Chemical constituents from Rubus alceaefolius Poir., Journal of Beijing Medical University, Vol 32(3), pp 226-228 Yoshikazu Y and Edwin W H.(1976)., Polyphenols of Eucalyptus globulus, E regnans and E deglupta, Phytochemistry, Vol 15(7), pp 1180-1182 Duc D K., Sung T V., Angela M C., Jean Y L and Marcel F.(1990), Ellagic acid compounds from Diplopanax stachyanthus, Phytochemistry, Vol 29(1), pp 251-256 Toshio M., Akira U., Nobuo T., Hiromi K and Hiroko O.(1989), Ionone and lignan glycosides from Epimedium diphyllum, Phytochemistry, Vol 28(12), pp 3483-3485 Cao Thanh Tùng 56 K32B - Hóa học Trường ĐHSP Hà Nội Cao Thanh Tùng Khóa luận tốt nghiệp 57 K32B - Hóa học [...]... xác định cấu trúc của các hợp chất hữu cơ Cấu trúc hóa học của hợp chất hữu cơ được xác định nhờ vào các phương pháp phổ kết hợp Tùy thuộc vào cấu trúc hóa học của từng chất mà người ta sử dụng phương pháp phổ cụ thể nào Cấu trúc càng phức tạp thì yêu cầu phối hợp các phương pháp phổ càng cao Trong một số trường hợp, để xác định chính xác cấu trúc của các hợp chất người ta phải dựa vào các phương pháp... như Dragendorff và tác nhân Mayer Cũng vậy các flavonoid thường là những hợp chất màu bởi vậy khi dịch chảy ra mà không có màu sẽ đánh dấu là đã rửa hết những chất này trong quá trình chiết Khi chiết các chất béo nồng độ trong các phần của dịch chiết ra và sự xuất hiện của các cặn tiếp theo đó sẽ biểu hiện sự kết thúc quá trình chiết Trong trường hợp các lacton của sesquitecpen và glicozid trợ tim, phản... dụng biểu thị sự xuất hiện của chúng hoặc khi cho phản ứng với anilin axetat sẽ cho biết sự xuất hiện của các hydrat cacbon và từ đó có thể cho biết khi nào quá trình chiết kết thúc Như vậy tùy thuộc vào mục đích cần chiết lấy chất gì để chọn dung môi thích hợp và lựa chọn quá trình chiết hợp lí nhằm đạt kết quả cao Ngoài ra có thể dựa vào mối quan hệ của dung môi và chất tan của các hợp chất mà ta có... số hợp chất ngay trong quá trình chiết 1.4 Tổng quan về phương pháp sắc kí Phương pháp sắc kí (chromoatography) là một trong những phương pháp phổ biến và hữu hiệu nhất hiện nay, được sử dụng rộng rãi trong việc phân lập các hợp chất hữu cơ nói chung và các hợp chất thiên nhiên nói riêng 1.4.1 Đặc điểm chung của phương pháp sắc kí Sắc kí là phương pháp tách các chất dựa vào sự khác nhau về bản chất. .. trong những phương pháp phổ hiện đại và hữu hiệu nhất hiện nay Với việc sử dụng kết hợp các kĩ thuật phổ NMR một chiều và hai chiều, các nhà nghiên cứu có thể xác định cấu trúc của hợp chất, kể cả cấu trúc lập thể của phân tử Nguyên lý chung của các phương pháp phổ NMR (phổ proton và cacbon) là sự cộng hưởng khác nhau của các hạt nhân từ (1H và 13C) dưới tác dụng của từ trường ngoài Sự cộng hưởng khác nhau... hơn các hidrocacbon thế clo Người ta cho rằng các dung môi thuộc nhóm rượu sẽ thấm tốt hơn qua màng tế bào nên quá trình chiết với các dung môi này sẽ thu được lượng lớn các thành phần trong tế bào Trái lại clorofoc khả năng phân cực thấp hơn có thể rửa giải các chất nằm ngoài tế bào Các ancol phần lớn là các chất chuyển hóa phân cực cùng với các hợp chất phân cực trung bình và thấp vì vậy khi chiết. .. hoặc bis-2-etylhexyl-phtalat] Chất này làm sai lệch kết quả phân lập trong quá trình nghiên cứu hóa thực vật Chất này còn thể hiện hoạt tính trong quá trình thử nghiệm sinh học và có thể làm bẩn dịch chiết của cây Clorofoc, metylen clorit và metanol là những dung môi thường được lựa chọn trong quá trình chiết sơ bộ một phần của cây (như lá, rễ, thân, củ) Những tạp chất của clorofoc như CH2Cl2, CH2ClBr... là các chất có ái lực lớn với pha tĩnh sẽ chuyển động chậm hơn qua hệ thống sắc kí so với các chất tương tác yếu hơn với pha này Nhờ đặc điểm này mà người ta có thể tách các chất qua quá trình sắc kí 1.4.2 Cơ sở của phương pháp sắc kí Phương pháp sắc kí dựa vào sự phân bố khác nhau của các chất giữa hai pha động và pha tĩnh Ở điều kiện nhiệt độ không đổi, định luật mô tả sự phụ thuộc của lượng chất. .. dung dịch ( hoặc với chất khí là áp suất riêng phần ) gọi là định luật hấp phụ đơn phân tử đẳng nhiệt Langmuir : n= n  bC 1+bC n : lượng chất bị hấp phụ lên pha tĩnh lúc đạt cân bằng n∞ : lượng cực đại của chất có thể bị hấp phụ lên một chất hấp phụ nào đó b : hằng số C : nồng độ của chất bị hấp thụ 1.4.3 Phân loại các phương pháp sắc kí Trong phương pháp sắc kí pha động là các lưu thể (các chất ở... Khóa luận tốt nghiệp chiết dưới điều kiện axit hoặc bazơ thường được sử dụng đối với quá trình phân tách đặc trưng, cũng có khi sử dụng các dịch chiết bằng axit, bazơ có thể tạo ra các sản phẩm mong muốn Sự hiểu biết về những đặc tính của những chất chuyển hóa thứ cấp trong cây được chiết sẽ rất quan trọng để từ đó lựa chọn dung môi thích hợp cho quá trình chiết tránh được sự phân hủy chất bởi dung môi ... 3.3.2 Hợp chất RA13-3 (Icariside E4) (2) Chất bột vô định hình ESI-MS, m/z: 507[M+H]+, 529 [M+Na]+, C26H34O10 H-NMR (500 MHz, MeOD-d4), H (ppm): 7,04 (1H, d, J = 2,0 Hz, H- 2), 7,10 (1H, d, J = 8,0... Hỡnh 1.1.1 Cõy mõm xụi Rubus alceaefolius Poir Cao Thanh Tựng K32B - Húa hc Trng HSP H Ni Khúa lun tt nghip 1.1.2 Phõn b, sinh thỏi Theo Huy Bớch v cng s [1], trờn th gii chi Rubus cú khong hn 400... Gii thiu v cõy mõm xụi 1.1.1 Thc vt hc Cõy Mõm xụi hay cũn c gi l ựm m cú tờn khoa hc l Rubus alceaefolius Poir. , thuc h Hoa hng - Rosaceae õy l loi cõy bi nh, thõn leo cú gai to v dt Cnh mc di,