Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Trƣờng Đại học sƣ phạm hà Nội Khoa hoá học dƣơng phƣơng thảo xác định hàm lƣợng vitamin c thuốc beplex c juvit c phƣơng pháp vôn ampe Tóm tắt Khoá luận tốt nghiệp đại học Chuyên ngành: Hoá phân tích Người hướng dẫn khoa học ths phí văn hải Hà Nội - 2010 Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Trƣờng Đại học sƣ phạm hà Nội Khoa hoá học dƣơng phƣơng thảo xác định hàm lƣợng vitamin c thuốc beplex c juvit c phƣơng pháp vôn ampe Khoá luận tốt nghiệp đại học Chuyên ngành: Hoá phân tích Người hướng dẫn khoa học ths phí văn hải Hà Nội - 2010 Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Trƣờng Đại học sƣ phạm hà Nội Khoa hoá học dƣơng phƣơng thảo xác định hàm lƣợng vitamin c thuốc beplex c juvit c phƣơng pháp vôn ampe Khoá luận tốt nghiệp đại học Chuyên ngành: Hoá phân tích Hà Nội – 2010 Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN! Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Phí Văn Hải hướng dẫn, bảo em tận tình, giúp em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Qua đây, em xin gửi lời cảm ơn tới thầy giáo, cô giáo khoa Hóa học Trường Đại học Sư phạm Hà Nội tận tình dạy dỗ em trình học tập Do thời gian có hạn nên vấn đề trình bày khóa luận không tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận góp ý thầy giáo, cô giáo bạn sinh viên để khóa luận em đầy đủ hoàn thiện Hà Nội, năm 2010 Sinh viên thực viên Dương Phương Thảo Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp LỜI CAM ĐOAN Khóa luận “Xác định hàm lƣợng vitamin C thuốc Beplex C Juvit C phƣơng pháp vôn-ampe” hoàn thành hướng dẫn trực tiếp ThS Phí Văn Hải Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết nêu khóa luận trung thực, không trùng với khóa luận khác công bố Hà Nội, năm 2010 Sinh viên thực Dƣơng Phƣơng Thảo Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp MỤC LỤC MỞ ĐẦU LÝ DO CHỌN ĐỀ TÀI CHƢƠNG TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU 1.1 Đại cương vitamin C 1.1.1 Công thức nhận định 1.1.2 Tính chất hóa học 10 1.1.3 Tính chất sinh lý 14 1.1.4 Các nguồn cung cấp vitamin C 14 1.2 Các phương pháp xác định Vit.C 16 1.2.1 Phương pháp phân tích hóa học 16 1.2.2 Nhóm phương pháp phân tích công cụ 18 CHƢƠNG 29 THỰC NGHIỆM 29 2.1 Dụng cụ hóa chất 29 2.1.1 Dụng cụ 30 2.1.2 Thiết bị, máy móc 30 2.1.3 Hóa chất 30 2.2 Các vấn đề nghiên cứu 30 2.2.1 Nghiên cứu 30 2.2.2 Ứng dụng xác định Vit.C mẫu thực tế 40 Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp CHƢƠNG 42 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 3.1 Điều kiện tối ưu xác định Vit.C phương pháp von-ampe 42 3.1.1 Chọn 42 3.1.2 Ảnh hưởng oxi hòa tan 45 3.1.3 pH đệm axetat 48 3.1.4 Nồng độ dung dịch đệm axetat 50 3.1.5 Khoảng nồng độ tối ưu 52 3.1.6 Khảo sát chất ảnh hưởng 57 3.1.7 Độ bền Vit.C môi trường khác 60 3.2 Xác định Vit.C mẫu thực tế 64 3.2.1 Mẫu thuốc 64 KẾT LUẬN 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Vitamin C (Vit.C) hay gọi axit ascobic, chất dinh dưỡng cần thiết cho sống sinh vật Nó giữ vai trò quan trọng cho trình chuyển hóa protein cụ thể oxi hóa nhiều axit amin thơm Tyrozin, phenylalinin Có khả chống oxi hóa: Vit.C đóng vai trò quan trọng việc ngăn chặn trình sản xuất gốc tự do, bảo vệ axit béo không no màng tế bào, đồng thời bảo vệ vitamin E chất chống oxi hóa màng tế bào Kích thích trình tổng hợp trì chất keo, kết tăng sức đề kháng mô Sự thiếu hụt vitamin C dù hàm lượng nhỏ gây nhiều ảnh hưởng xấu đến sức khỏe, gây bệnh scorbut biểu ban đầu: mệt mỏi, đau cơ, xương khớp, chán ăn, da khô ráp, chảy máu nước răng, thiếu máu… Nếu không điều trị kịp thời bị phù tiểu cầu thần kinh bị kích thích xuất huyết não chết Vitamin C tìm thấy trái cây, rau quả, dược phẩm, đồ đóng hộp, nước uống trái cây… Có nhiều phương pháp để xác định hàm lượng Vit.C phương pháp von-ampe phương pháp sử dụng phát triển nhanh thành phương pháp phân tích Hóa Lý chủ yếu Với mong muốn hiểu biết sâu phương pháp von-ampe áp dụng phương pháp để xác định vitamin C dược phẩm Chính chọn đề tài: “Xác định hàm lượng Vitamin C thuốc Beplex C Juvit C phương pháp vôn-ampe” CHƢƠNG TỔNG QUAN VỀ TÀI LIỆU Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp 1.1 Đại cƣơng vitamin C 1.1.1 Công thức nhận định Vitamin C tên thường gọi axit L-ascobic, có tên quốc tế là: 2oxo-L-threo-hexono-1,4-lactone-2,3-enediol (R)-3,4-đyhydroxy-5-((S)1,2-dihydroxylethyl)furan-2(5H)-one Công thức phân tử C6H8O6 Khối lượng phân tử 176,1 Nhiệt độ nóng chảy 193°C Công thức cấu tạo CH2OH OH O O HO pK1 ( C3 OH ) 4,2 pK2 ( C2 OH ) 11,6 OH (*) Trong công thức cấu tạo axit ascobic, C4*, C5* cacbon bất đối, tồn đồng phân quang học: axit L-ascobic, axit izo L-ascobic, axit Dascobic, axit izo D-ascobic Trong đồng phân có axit L-ascobic izo L-ascobic có tác dụng chữa bệnh, đồng phân D izo D antivitamin, tức chất ức chế tác dụng vitamin Trong thiên nhiên tồn dạng axit L-ascobic, đồng phân khác thu đường tổng hợp Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Axit ascobic rắn tinh thể đơn tà, không màu, không mùi, có vị chua, nóng chảy 193°C Axit ascobic dễ tan nước, tan rượu không tan dung môi hữu không phân cực Axit ascobic dễ bị phân hủy tác dụng ánh sáng, nhiệt độ cần bảo quản axit ascobic bóng tối nhiệt độ thấp 1.1.2 Tính chất hóa học a, Tính khử Axit ascobic chất khử mạnh, có bán phản ứng sau: CH2OH CH2OH OH OH O O O O OH HO O Axit L-ascobic + 2H+ + 2e- O Axit L-đehidroascobic Thế khử phụ thuộc nhiều vào pH môi trường Axit ascobic dạng khan bền vững phân tử có nhóm OH- đính vào C chưa no (C2, C3) nên bị ẩm ướt dung dịch dễ bị oxi hóa, oxi không khí, có mặt ion kim loại đồng, sắt, magie theo phản ứng sau: CH2OH CH2OH OH OH O O O HO O + 1/2 O2 OH O + H2O O Sản phẩm tạo axit L-đehidroascobic, chất có hoạt tính sinh học tương tự axit L-ascobic, không bền, dễ bị thủy phân phá vòng tạo axit 2,3-đixetogulonic CH2OH‒ (CHOH)2‒ CO‒ CO ‒ COOH, chất tác dụng sinh lý Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp giới hạn phát thay đổi Tuy nhiên, mục đích khóa luận tăng độ nhạy mà cần xác định khoảng nồng độ tối ưu xác định Vit.C điều kiện đo cố định chọn Kết định hướng cho nghiên cứu mẫu thực tế 3.1.6 Khảo sát chất ảnh hƣởng Nghiên cứu tài liệu cho thấy, đối tượng thực tế thuốc, số chất thường xuất với Vit.C Đặc biệt vitamin nhóm B thuốc, hay axit hữu rau, quả, có hàm lượng tương đối lớn, nhiều lượng Vit.C Tuy nhiên, vitamin có thuốc với Vit.C tính chất cực phổ vùng nghiên cứu, vitamin không ảnh hưởng đến phép đo 3.1.6.1 Khảo sát ảnh hƣởng axit hữu Axit oxalic, axit tactric, axit xitric, axit hữu nhiều loại rau Công thức cấu tạo pKa tương ứng là: COOH HO HOOCH2C C CH2COOH HOOC C CH COOH OH H OH Axit xitric Axit D- tactric pKa1 = 3,128 pKa1=3,036 pKa1=1,27 pKa2 =4,761 pKa2=4,366 pKa2=4,25 HOOC COOH Axit oxalic pKa3=6,396 Tiến hành thực nghiệm khảo sát ảnh hưởng chúng lên píc Vit.C Đo đường cực phổ Vit.C mg/L có mặt axit với tỷ lệ khối lượng gấp k lần Kết đưa bảng 3.7 Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Bảng 3.7 Kết khảo sát ảnh hƣởng axit oxalic, axit xitric, axit tactric lên sóng cực phổ Vit.C Axit Tactric Axit Xitric Axit Oxalic Ca/Co ip (nA) % ip/iop Ca/Co ip (nA) % ip/iop Ca/Co ip (nA) % ip/iop 115 0,00 114 0,00 115 0,00 25 109 5,50 25 103 9,65 50 112 2,61 50 108 6,48 50 103 9,65 100 107 6,96 200 102 12,75 100 102 10,53 150 105 8,70 400 99,5 15,58 200 101 11,4 200 103 10,43 500 98 17,35 300 101 11,4 250 102 11,30 400 98,3 13,77 300 98,8 14,09 500 97,8 14,21 Nhận xét: Kết cho thấy có mặt axit hữu khác gấp đến hàng trăm lần khối lượng, píc Vit.C nồng độ mg/L cho kết tốt, píc cân đối, dịch chuyển phía dương Chiều cao píc có bị giảm Trường hợp có mặt axit oxalic gấp 200 lần khối lượng chiều cao píc giảm 10%, axit tactric khoảng 150 lần axit xitric 100 lần Píc Vit.C bị giảm hàm lượng axit oxalic, axit xitric axit tactric lớn, độ nhớt dung dịch tăng làm giảm hệ số khuyếch tán Phân tử chúng kồng kềnh, độ linh động dung dịch Do đó, ảnh hưởng mạnh đến chiều cao Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp píc, thấy axit xitric kồng kềnh axit oxalic nên cần hàm lượng gấp 100 lần làm giảm píc 10% axit oxalic phải đến 200 lần Tuy nhiên, việc giảm chiều cao píc không gây khó khăn cho phân tích phân tích nồng độ 10-5M, mục đích sóng cực phổ Vit.C xuất với chất lượng tốt Hơn nữa, ta thấy axit không chứa nhóm chức dễ bị oxi hóa Vit.C Do vậy, chúng hoạt tính cực phổ khoảng Vit.C Đây ưu điểm phương pháp phân tích cực phổ có độ chọn lọc cao Có thể phân tích chất có mặt lượng lớn chất khác Kết phù hợp với kết đưa phương pháp phân tích Vit.C điện cực biến tính điện cực sinh học 3.1.6.2 Khảo sát ảnh hƣởng ion clorua Trong loại thực phẩm thường chứa lượng định ion clorua Ion có mặt nồng độ lớn gây cản trở trình phân tích Vì vậy, tiến hành khảo sát giới hạn nồng độ cho phép ion clorua phương pháp phân tích cực phổ Vit.C Theo tài liệu nghiên cứu ion clorua ảnh hưởng chủ yếu đến oxi hóa giọt thủy ngân, nồng độ lớn oxi hóa Hg chuyển vùng âm hơn, nghĩa chuyển dịch píc Vit.C Đến nồng độ đó, đường cực phổ Hg bao trùm lên píc Vit.C Tiến hành đo đường cực phổ Vit.C 2mg/L, thay đổi nồng độ ion clorua theo hàm lượng: 5, 10, 50, 100, 250, 500 mg/L tương ứng 1,4.10 M; 2,8.10-4M; 1,4.10-3M; 7.10-3M; 1,4.10-2M Kết cho hình 3.8: Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Hình 3.8 Sóng cực phổ Vit.C có mặt ion clorua với nồng độ tăng dần Nhận xét: Khi hàm lượng ion clorua dung dịch tăng dần, giá trị đỉnh píc Vit.C không thay đổi nhiều (từ -47,6 mV Cl̄ chuyển dịch theo chiều dương đến -41,7 mV nồng độ Cl̄ lớn 100 mg/L) Trong oxi hóa Hg chuyển dịch theo chiều âm, gần píc Vit.C Do vậy, nồng độ lớn 10 -2M, xuất píc Vit.C máy tính xác định chiều cao píc Có thể kết luận nồng độ ion clorua nhỏ 10 -2M có khả phân tích Vit.C cực phổ Trong trường hợp hàm lượng ion clorua lớn, phải xử lý với bạc nitrat lọc bỏ kết tủa 3.1.7 Độ bền Vit.C môi trƣờng khác Vit.C chất dễ bị phân hủy, dung dịch, nên luôn phải pha mẫu chuẩn theo ngày Tuy nhiên, ngày dung dịch Vit.C phân hủy lượng nhỏ Để giảm tối đa hiệu ứng này, cần chọn dung dịch pha Vit.C, hay dung dịch dùng để chiết Vit.C mẫu thực tế Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp cho độ bền Vit.C lớn Nghĩa môi trường phải hòa tan oxi hơn, kĩm hãm tốc độ oxi hóa axit ascobic… Theo tài liệu cho biết, Vit.C bền môi trường pH thấp, đồng thời môi trường axit oxi hòa tan Có thể pha dung dịch đệm photphat, dung dịch hỗn hợp axit metaphotphat axit axetic hay đơn giản nước Tuy nhiên, chế phân hủy Vit.C oxi phức tạp tiến hành khảo sát độ bền Vit.C môi trường khác Do quy trình phân tích cực phổ Vit.C axetat nên chọn môi trường dung dịch axit axetic 0,1M (pH=2,76), dung dịch đệm axetat 0,1M (pH=4,66), nước Tất dung dịch pha nước cất hai lần, đuổi oxi hòa tan trước pha mẫu Pha loãng lần dung dịch Vit.C gốc 1g/L dung dịch đuổi oxi: a, dung dịch axit axetic 0,1M b, dung dịch đệm axetat 0,1M (5:5) c, nước cất hai lần Để dung dịch vừa pha tiếp xúc với không khí Theo dõi nồng độ Vit.C dung dịch theo thời gian, sau t phút, lấy 0,1 mL dung dịch, đo sóng cực phổ Vit.C 10 mL dung dịch đệm axetat theo quy trình ghi bảng 2.1, ghi lại chiều cao píc sau lần đo t = 0, 30, 60, 180, 240 phút Kết thu bảng 3.8 Bảng 3.8: Chiều cao píc Vit.C theo thời gian môi trƣờng khác Thời gian (phút) Dương Phương Thảo Vit.C 200 mg/L HAx đệm Ax nước K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp 69,5 66,9 69,7 30 70,8 67,1 68,6 60 70,7 64,7 68,9 180 70,9 57,8 69,2 240 69,7 54,0 68,0 Nhận xét: Từ thực nghiệm cho thấy, sau 240 phút, Vit.C dung dịch axit axetic nước không thay đổi, để không khí, dung dịch đệm axetat (5:5, pH=4,7) chiều cao píc giảm 5% sau 60 phút Vì vậy, pha dung dịch Vit.C gốc dung dịch chuẩn pha loãng từ dung dịch gốc nước dung dịch axit axetic loại oxi đảm bảo độ bền suốt thời gian làm việc Tuy nhiên, để đơn giản chọn dung môi nước để pha chế dung dịch chuẩn Khi xử lý mẫu dùng dung dịch axit axetic 0,1M có pH=2,76 để chiết Vit.C, đồng thời dịch chiết chứa Vit.C thu bền trình đo Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Hình 3.9 Đồ thị biểu diễn độ bền dung dịch Vit.C theo thời gian môi trƣờng khác a.Vit.C pha axit axetic 0,1M b Vit.C pha dung dịch đệm axetat 0,1M c.Vit.C pha nƣớc Tóm tắt điều kiện tối ƣu xác định Vit.C Qua khảo sát chọn điều kiện tối ưu xác định Vit.C phương pháp von-ampe • Đo sóng cực phổ Vit.C đệm axetat 0,1M có pH=4,66 tương ứng tỷ lệ CHAc=CAx, thời gian đuổi khí oxi hòa tan trước cho Vit.C vào bình đo 90s • Khoảng nồng độ tối ưu phân tích rộng, từ 0,5 đến 30 mg/L, tương đương 2,84.10-6M ÷ 1,70.10-4M • Chương trình đo máy tính chọn tối ưu theo gợi ý nhà sản xuất, theo tài liệu tham khảo, theo kinh nghiệm thực tế - Thời gian cân trước quét thế: 10s, đủ để giúp cho dung dịch trở lại trạng thái tĩnh, ổn định sau khuấy trộn - Khoảng quét từ -250 mV đến +100 mV: khoảng thu từ kinh nghiệm thực tế, không nên hẹp không quét hết chân phổ Tuy nhiên, không nên rộng tốn thời gian đo - Biên độ xung: 50 mV - Bước nhảy thế: mV - Thời gian cho xung: 40 ms - Thời gian bước nhảy thế: 0,4s - Tốc độ quét: 15 mV/s Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp • Dung dịch Vit.C gốc dung dịch chuẩn pha loãng từ dung dịch gốc phải pha theo ngày pha nước cất hai lần loại oxi hòa tan Các dung dịch đảm bảo độ bền thời gian phân tích • Các axit hữu axit oxalic, axit xitric, axit tactric ion clorua không ảnh hưởng sóng cực phổ Vit.C khoảng nồng độ cho phép Dựa kết phần nghiên cứu bản, tiến hành định lượng Vit.C mẫu thực tế Với loại đối tượng khảo sát sơ để đưa quy trình xử lý riêng phù hợp với phương pháp phân tích 3.2 Xác định Vit.C mẫu thực tế 3.2.1 Mẫu thuốc 3.2.1.1 Thuốc Beplex C Thành phần thuốc Beplex C Vitamin B1 15 mg Vitamin PP 50 mg Vitamin B2 10 mg Vitamin C 200 mg Vitamin B6 10 mg Hòa tan hoàn toàn viên mẫu thuốc Beplex C vào nước, định mức thành 50 mL dung dịch, pha loãng 20 lần dung dịch vừa pha mẫu (BL2) Xác định Vit.C mẫu (BL2) theo phương pháp thêm chuẩn Hút 10 mL dung dịch đệm axetat 0,1M pH=4,66 vào bình đo; đuổi khí 90s; thêm 0,1 mL dung dịch mẫu BL2; đo sóng cực phổ giá trị y0k; thêm lần 0,1 mL dung dịch Vit.C chuẩn 100 mg/L, đo sóng cực phổ giá trị y1k; y2k, y3k; k số lần lặp, k = Số liệu đo bảng 3.9 Bảng 3.9: Số liệu xác định Vit.C mẫu thuốc Beplex C theo pp thêm chuẩn STT xi mg/L yik, nA 0,00 90.2 Dương Phương Thảo yik, nA 87.9 90.1 89.5 89.4 K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp 0,98 136 134 135 133 135 1,94 178 177 179 177 178 2,88 219 219 222 220 220 xi giá trị nồng độ Vit.C thêm vào, sau hiệu chỉnh thể tích theo công thức (2.16) Xử lý đường thêm chuẩn theo phương pháp hồ quy tuyến tính Excel: y = (45,2 ± 0,4)x + (89,7 ± 0,9) Hệ số tương quan r = 1,000 Đường thêm chuẩn cắt trục hoành xm, giá trị xm xác định theo định luật lan truyền sai số (công thức 2.17) xm = (1,9841 ± 0,0404) mg/L Nồng độ Vit.C mẫu BL2, Cm tính theo công thức 2.18 Cm = = = 200,38 = 4,08 Vì viên thuốc pha thành 50 mL dung dịch sau pha loãng 20 lần dung dịch mẫu BL2 nên hàm lượng Vit.C viên thuốc (200,4 ± 4,1) mg/viên Độ lệch khỏi giá trị trung bình là: 2,05 % So sánh với giá trị nhà sản xuất 200 mg/viên sai lệch 0,2% (Số liệu tính toán Excel) Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Hình 3.10 Đƣờng thêm chuẩn xác định Vit.C thuốc Beplex C 3.2.1.2 Thuốc Juvit C dạng thuốc nƣớc Thành phần mL thuốc: Vitamin C 100 mg Natri 0,5 mg Glyxerin 86% Hút mL dung dịch thuốc, định mức thành 50 mL dung dịch J1, pha loãng 10 lần dung dịch J1 dung dịch mẫu J2 Số liệu đo đường cực phổ xác định Vit.C mẫu (J2) theo phương pháp thêm chuẩn tương tự mẫu thuốc Beplex C, dung dịch chuẩn 200 mg/L, thêm lần, lặp lần cho kết bảng 3.11 Bảng 3.11: Số liệu xác định Vit.C thuốc Juvit theo phƣơng pháp thêm chuẩn STT xi, mg/L 0,00 108 108 108 107 108 1,96 216 214 215 215 215 Dương Phương Thảo yik, nA , nA K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội 2 3,88 Khoá luận tốt nghiệp 318 319 317 318 318 Xử lý số liệu tương tự mẫu thuốc Beplex C thu được: Đường thêm chuẩn: y = (54,1 ± 0,7)x + (108 ± 2) Hệ số tương quan: r = 0,99998 Đường thêm chuẩn cắt trục hoành tại: xm = (1,998 ± 0,069) mg/L Nồng độ Vit.C mẫu J2 là: Cm = (201,8 ± 7,0) mg/L Vì lấy mL thuốc pha loãng 50 lần, sau lại pha loãng 10 lần mẫu J2 nên hàm lượng Vit.C thuốc Juvit là: (101 ± 4) mg/mL Độ lệch khỏi giá trị trung bình là: 3,96% So sánh với giá trị nhà sản xuất 100 mg/L, sai khác 1% Nhận xét: Hàm lượng Vit.C thuốc thường lớn, cần pha loãng dung dịch mẫu cho nồng độ nằm khoảng 50 ÷ 1000 mg/L Để xác định Vit.C phương pháp cực phổ theo phương pháp thêm chuẩn (thêm 0,1 mL mẫu vào 10 mL dung dịch đệm, nghĩa pha loãng thêm 100 lần) nồng độ Vit.C dung dịch nằm khoảng 0,5 ÷ 10 mg/L Tính hàm lượng Vit.C thêm chuẩn nằm khoảng tối ưu (≤ 30 mg/L) Kết xác định Vit.C mẫu thuốc có độ lặp lại tốt, sai số tương đối q < 5% Với thuốc Beplex C thuốc Juvit C bảo quản tốt bao bì tối màu nên hàm lượng Vit.C xác định sai khác so với hàm lượng ghi nhãn (< 1%) Tôi áp dụng kết nghiên cứu xác định hàm lượng Vit.C thuốc cho kết bảng 3.12 Bảng 3.12: Kết xác định Vit.C mẫu thuốc Tên mẫu Tìm Dương Phương Thảo Độ lệch q Hàm lượng Sai khác so với K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội thuốc Khoá luận tốt nghiệp % ghi giá trị ghi nhãn nhãn % Beplex C (200,4 ± 4,1)a 2,05 200a 0,2 Juvit C (101 ± 4)b 3,96 100b 1,0 a : mg/viên b : mg/L Nhận xét chung: Các mẫu thuốc: Đường cực phổ khoảng quét (-250 mV đến 100 mV) có đường thấp, ổn định, chất khác có mặt thuốc không ảnh hưởng đến việc xác định Vit.C Do hàm lượng Vit.C thuốc thường lớn nên cần pha loãng mẫu cho có nồng độ Vit.C nằm khoảng tối ưu Có thể xác định hàng loạt mẫu đường chuẩn Vì vậy, cần xây dựng đường chuẩn trước đo mẫu điều kiện Kết có độ lặp tốt, độ xác cao KẾT LUẬN Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Sau thời gian nghiên cứu tài liệu, tiến hành thực nghiệm, phân tích số liệu thu đƣợc số kết nhƣ sau: Xây dựng quy trình xác định hàm lượng Vit.C phương pháp vonampe với điều kiện tối ưu: • Đo sóng cực phổ Vit.C đệm axetat có nồng độ CHAc = CAc = 0,05M; pH = 4,66 • Loại ảnh hưởng oxi hòa tan sau 90s • Quét từ -250 mV đến 100 mV • Tốc độ quét 15 mV/s • Biên độ xung 50 mV • Píc Vit.C xuất khoảng -41,7 đến -37,5 mV Đo máy phân tích điện hóa đa VA757 computrace Metrohm, điện cực giọt thủy ngân treo, điện cực so sánh Ag/AgCl Chất lượng sóng cực phổ tốt ổn định Xây dựng đường chuẩn phụ thuộc chiều cao píc vào nồng độ Vit.C: ip(nA) = (24,754 ± 0,007)CVit.C(mg/L) + (10 ± 2), r = 0,9999; khoảng tuyến tính rộng từ 0,5 mg/L đến 30 mg/L Kiểm tra đường chuẩn hai nồng độ 1,2 mg/L 4,8 mg/L có sai số tương đối tương ứng 1,05% 0,84% Giới hạn phát phương pháp tính theo đường chuẩn 0,2589 mg/L, phù hợp với thực nghiệm 0,25 mg/L Khảo sát axit oxalic, axit xitric, axit tactric giới hạn nồng độ gấp 300 lần không ảnh hưởng đến sóng cực phổ Vit.C Hàm lượng ion clorua dung dịch nhỏ 10-2M không gây ảnh hưởng đến tín hiệu cực phổ Vit.C Pha dung dịch Vit.C gốc dung dịch chuẩn nước cất hai lần loại oxi đảm bảo độ bền Vit.C khoảng thời gian ngày Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Ứng dụng xác định Vit.C mẫu thực tế • Các mẫu thuốc không cần xử lý mẫu trước, cần pha loãng dung dịch mẫu cho nồng độ nằm khoảng tối ưu Phân tích đơn giản, dễ dàng, không bị ảnh hưởng chất mẫu cho kết tốt • Kết xác định hàm lượng Vit.C mẫu thực tế (bảng 3.13) sau: Bảng 3.13: Kết xác định Vit.C mẫu thuốc Tên mẫu Tìm thuốc Beplex C (200,4 ± Độ lệch q Hàm lượng Sai khác so với % ghi giá trị ghi nhãn nhãn % 2,05 200a 0,2 3,96 100b 1,0 4,1)a Juvit C (101 ± 4)b a : mg/viên b : mg/L Do thời gian có hạn dừng lại phương pháp von-ampe để xác định Vit.C mẫu thuốc Tuy nhiên, thấy phương pháp áp dụng cho nhiều đối tượng từ tự nhiên đến sản phẩm công nghiệp, nhiều khoảng nồng độ khác cho kết tin cậy TÀI LIỆU THAM KHẢO Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học Trường ĐHSP Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Duy Ái, Nguyễn Tinh Dung, Trần Thành Huế, Trần Quốc Sơn, Nguyễn Văn Tòng, Một số vấn đề chọn lọc hóa học, Tập 3, NXBGD 2002 Nguyễn Tinh Dung, Hóa học phân tích, phần II, NXB Giáo dục, 2000 Trần Tứ Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn Văn Ri, Nguyễn Xuân Trung, Hóa học Phân tích, Phần 2, Các phương pháp Phân tích Công cụ, ĐHQG-ĐHKHTN, Hà Nội 2003 Lê Đức Ngọc, xử lý số liệu kế hoạch hóa thực nghiệm, ĐHQGĐHKHTN, Hà Nội 1999 Dương Phương Thảo K32 C – Hoá học [...]... 2CH 3COCH 3 CH 2OH Vitamin C H 3C O C C O H H 3C H O O H CH 3 C CH 2 O CH 3 1.2 C c phƣơng pháp x c định Vit .C Có thể chia c c phương pháp x c định Vit .C thành 2 nhóm lớn: - Nhóm c c phương pháp phân tích hóa h c - Nhóm c c phương pháp phân tích c ng c 1.2.1 Phƣơng pháp phân tích hóa h c Trong c c phương pháp phân tích hóa h c, phương pháp chuẩn độ oxi hóa khử đư c sử dụng nhiều nhất, dựa vào tính chất... s c mà c thời gian cho xã hội Với sự hỗ trợ c a c c phương pháp phân tích c ng c và những thiết bị hiện đại, vi c x c định Vit .C cũng đã đạt đư c những yêu c u đó Đặt biệt, qui trình phân tích nhanh và đa số trường hợp không phải xử lý mẫu trư c đã giảm thiểu đư c sự mất mát Vit .C trong quá trình định lượng C c phương pháp c ng c c thể x c định Vit .C gồm c c nhóm phương pháp phân tích quang h c và. .. c pH thích hợp Điểm cuối chuẩn độ đư c nhận ra khi c sự xuất hiện màu c a giọt dung dịch thu c thử dư đầu tiên Phương pháp này c thể đư c áp dụng tr c tiếp để x c định Vit .C trong dư c phẩm Tuy nhiên, trong c c đối tượng kh c nhau như rau quả, lương th c, th c phẩm thường chứa c c chất khử kh c nhau nữa và dung dịch nghiên c u thường c màu và đ c, gây khó khăn cho vi c x c định điểm cuối chuẩn độ... đĩa C thể thấy c c phương pháp phân tích điện hóa rất phong phú và đa dạng Phạm vi đối tượng nghiên c u rộng, c hợp chất vô c và hàng nghìn hợp chất hữu c c c loại Trong đó, Vit .C là một trong những hợp chất hữu c đư c nghiên c u ứng dụng x c định theo nhiều c ch kh c nhau dưới lý thuyết c a c c phương pháp phân tích điện hóa 1.2.2.2.2 Ứng dụng c c phƣơng pháp phân tích điện hóa x c định Vit .C Phương. .. ascobic COOH C O O HO CH 2OH CH 2OH C HO HO HO C O CH 2OH COOH [ O] HO C O OH [ O] HO [ O] HO CH 2OH CH 2OH CH 2OH C HO CH 2OH CH 2OH [ O] C O C HO OH CH 2OH C OOH CH 2OH C O H 2O Axit 2,3- dixetogulonic [ O] CH 2OH COOH CH 2OH Axit L- dehidroascobic COOH OH [ O] COOH [ O] COOH COOH [ O] COOH [ O] C O CH 2OH C thể thấy, axit L-ascobic đầu tiên bị oxi hóa thành axit Lđehiđroascobic Dưới t c dụng c a... khí hay c c chất khử kh c cũng c thể phản ứng với c c chất oxi hóa đó 1.2.2.2 Nhóm c c phƣơng pháp phân tích điện hóa 1.2.2.2.1 Sơ lƣ c về phƣơng pháp von -ampe • Nguyên t c của phương pháp Phương pháp phân tích von -ampe (c c phổ) là phương pháp quan trọng nhất trong số c c phương pháp phân tích điện hóa Phương pháp này đều dựa trên lý thuyết về quá trình điện c c, phụ thu c chủ yếu vào vi c đưa chất... nhằm c c m c đích kh c nhau C c chế phẩm dư c chỉ chứa Vit .C, hay c c viên Vitamin tổng hợp trong đó c Vit .C dùng m c đích chữa bệnh, tăng c ờng s c đề kháng cho người ốm C c loại nư c hoa quả giải khát, bột dinh dưỡng trẻ em, sữa…chứa một lượng nhỏ Vit .C, là một tiêu trí quảng c o cho sản phẩm Một lượng lớn Vit .C làm chất bảo quản th c phẩm Trong c ng nghiệp dư c phẩm, Vit .C đư c tổng hợp qua c c giai... ph c tạp, tránh đư c sự mất mát Vit .C do sự oxi hóa c a không khí Trư c năm 1950, phương pháp c c phổ c điển đã đư c x c định hàm lượng Vit C trong nhiều mẫu thu c, rau, quả Nhiều c ng trình nghiên c u đã tìm đư c điều kiện thích hợp cho phép x c định Vit .C Tuy nhiên, do giới hạn c a phương pháp c c phổ c điển, mà vi c định lượng Vit .C vẫn bị gây c n trở bởi một số chất c thể khử gần với thế khử c a... c ng đư c kết hợp để tăng độ chính x c, độ nhạy và độ chọn l c của phương pháp phân tích C thể kể đến kỹ thuật s c ký, gồm s c ký khí (GC), s c ký lỏng cao áp (HPLC), kỹ thuật tiêm mẫu phân tích vào dòng chảy (FIA) 1.2.2.1 C c phƣơng pháp phân tích quang h c Vit .C là chất rắn dạng tinh thể không màu, dung dịch Vit .C cũng trong suốt nhưng nó dễ bị oxi hóa và c t c dụng c chế hay x c t c cho c c phản... chuẩn độ Người ta c ng c thể chuẩn độ axit ascobic bằng dung dịch iot, với chất chỉ thị hồ tinh bột để x c định Vit .C trong bắp c i, ho c chuẩn độ gián tiếp, x c định Vit .C trong mật ong, bằng c ch thêm lượng dư dung dịch KBr vào dung dịch mẫu đã đư c axit hóa bằng dung dịch H 2SO4 1:1 Hỗn hợp này đư c chuẩn độ bằng dung dịch KBrO3 cho đến khi xuất hiện màu vàng c a Br2 dư Th c chất đã xảy ra phản ... mát Vit .C trình định lượng C c phương pháp c ng c x c định Vit .C gồm nhóm phương pháp phân tích quang h c nhóm phương pháp phân tích điện hóa Trong hầu hết phương pháp x c định Vit .C cách gián... CH O CH 1.2 C c phƣơng pháp x c định Vit .C Có thể chia phương pháp x c định Vit .C thành nhóm lớn: - Nhóm phương pháp phân tích hóa h c - Nhóm phương pháp phân tích c ng c 1.2.1 Phƣơng pháp phân... O D- Sobozo D- glucozo D- Sobitol CH CH [ O] HO C O HO C H HO H COOH CO CO H+ T automehóa CH 2OH C O O HO H H HO H + 2H 2O, H + - 2CH 3COCH CH 2OH Vitamin C H 3C O C C O H H 3C H O O H CH C CH