Bộ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI NGHIÊN CỨU CẢI TIẾN PHƯƠNG PHÁP BÁN TỔNG HỢP ACID ARTELINIC (KHOÁ LUẬN TỐT iNGHIỆP Dược SỸ ĐẠI HỌC KHOÁ 1995-2000) N sười thực hiện: N guyễn T h ị Thảo Người hướng dẫn: P G S.T SK H P h a n Đ ìn h C hâu D S T hái N g u yễn H ù n g T h u Nơi thực hiện: B M C ông nghiệp dược Thời gian thực hiện: 3-5.2000 HÀ NỘI - 5.2000 // ' / ' LỜI CẢM ƠN Được giúp đỡ thầy cô giáo với cố gắng, nỗ lực thân hoàn thành khoá luận tốt nghiệp thời hạn Tôi xin chân thành bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS.TSKH.Phan Đình Châu, DS.Thái Nguyễn Hùng Thu tận tình hướng dẫn , giúp đỡ hoàn thành khoẩ ỉuận tốt nghiệp Nhân dịp xin bày tỏ lòng cẩm ơn tới thầy cô giáo môn Công nghiệp Dược môn Tin học tạo điêu kiện thuận lợi giúp hoàn thành khoá luận tốt nghiệp thời hạn Cuối xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo trường cung cấp cho kiến thức giúp hoàn thành khoá luận tốt nghiệp Hà nội, ngày 20-05-2000 Sinh viên Nguyễn Thị Thảo MỤC LỤC ■ ■ Phần I - Đặt vấn đề Phần II - Tổng quan 2.1 Các phản ứng hóa học artemisinin: 2.2 Các dẫn chất bán tổng hợp artemisinin 2.2.1 Liên quan cấu trúc tác dụng dược lý: 2.2.2 Bán tổng họp dẫn chất artemisinin Trans 3 5 Phần III - Thực nghiệm kết 3.1 Nguyên vật liệu phương pháp nghiên cứu 3.1.1 Nguyên vật liệu dụng cụ: 3.1.2 Phương pháp nghiên cứu: 3.2 Thực nghiệm 3.2.1 Điều chế dihydroartemisinin: 3.2.2 Cải tiến phương pháp bán tổng họp acid artelinic 3.2.3 Khảo sát ảnh hưởng dung môi xúc tác đến phản ứng ete hóa 15 15 15 15 17 17 17 22 Phần IV- Kết luận 26 Tài liệu tham khảo 27 PHẦN I ĐẶT VẤN ĐỂ Trong năm gần đây, artemisinin hoạt chất cao hoa vàng nhà nghiên cứu sản xuất dược phẩm nhiều nước giới đặc biệt quan tâm hoạt chất trị bệnh sốt rét Thuốc vừa độc vừa có tác dụng đặc trị với ký sinh trùng sốt rét p.falciparum p.vivax Thuốc có công hiệu tốt trường hợp ký sinh trùng kháng lại thuốc sốt rét tổng hợp dùng như: cloroquin, meũoquin, fancidar Qua kinh nghiệm hàng chục năm nghiên cứu sử dụng artemisinin điều trị sốt rét, nhiều chuyên gia nhận định nhóm hợp chất có nhiều triển vọng điều trị sốt rét-căn bệnh mang tính chất toàn cầu - số bệnh khác vào thập niên đầu kỷ XXI Tuy nhiên khả hòa tan nước dầu artemisinin liều dùng tỷ lệ tái phát sau dùng cao mà khả sử dụng phần hạn chế Vì nhà khoa học nhiều nước giới nghiên cứu bán tổng hợp hợp chất nhằm sàng lọc tìm hoạt chất có hiệu lực cao hơn, đặc tính điều trị tốt artemisinin để đưa vào phục vụ cho điều trị Kết nhiều hợp chất trở thành thuốc như: artesunat, artemether, arteether Nhiều hợp chất khác thử nghiệm động vật lâm sàng, số có acid artelinic - dẫn xuất ,của dihydroartemisinin - vừa có hiệu lực mạnh artemisinin, vừa có khả hòa tan nước lại vừa tương đối bền vững dung dịch kiềm yếu Kết bước đầu cho thấy hoạt chất có triển vọng chống tái phát động vật thực nghiệm [6] Acid artelinic AJ.Lin [18] bán tổng hợp thử kv sinh trùng sốt rét vào năm 1987 Quá trình bán tổng hợp xuất phát từ artemisinin qua ba bước phản ứng với hiệu suất tổng hợp 36,72% (75%, 89% 55%) Hiệu suất thấp đặt vấn đề nghiên cứu cải tiến phương pháp bán tổng hợp acid artelinic nhằm nâng cao hiệu suất trình điều chế Khoá luận thực nhằm giải vấn đề sau: o Nghiên cứu cải tiến phương pháp nhằm đơn giản hoá trình điều chế acỉd artelỉnỉc nâng cao hiệu suất © Khảo sát sơ ảnh hưởng xúc tác dung môi sở phương pháp cải tiến PH ẦN II TỐNG QUAN 2.1 CÁC PHẢN ÚNG HÓA HỌC CỦA ARTEMISININ: Qinghaosu (artemisinin) lacton sesquitecpen, có chứa liên kết peroxid (-0-0-) mối liên kết tương đối dễ bị phá huỷ Dưới ảnh hưởng tác nhân hoá học artemisinin dễ bị biến đổi thành nhiều hợp chất khác mà cấu trúc đa số hợp chất khác hẳn với khung ban đầu Khi hydro hoá artemisinin (1) với hydrogen có xúc tác Pd/CaC03 làm nguyên tử oxy liên kết peroxyd phân tử cho ta deoxyartemisinin (2) [22] o Khi thực việc khử hoá artemisinin với LĨA1H4 ta nhận hai hợp chất sản phẩm khung qinghaosu bị phá huỷ [29] - 3- Khi khử hoá artemisinin bằnc NaBH4 dung môi methanol cho ta dihydroartemisinin( 5) dạng bán acetal [12] H ch3 H CH: ÓH Ó Khi khuấy artemisinin với hỗn hợp dung dịch acid sulíuric 10% acid acetic băng nhiệt độ phòng khoảng ta nhận hợp chất có cấu trúc hoàn toàn khác hẳn với Qinghaosu liên kết peroxyd nhóm formaldehyd bị hẳn [15] CH ch3 Ồ o Qinghaosu tác dụng với kali carbonat methanol nhiệt độ phòng cho ta hợp chất 8, dung dịch cồn etylic KOH ta nhận hợp chất [26] Trong dung dịch NaOH loãng artemisinin bị mở vòng lacton để tạo thành hợp chất 10 [16] Chất có đỉnh hấp phụ đặc trưng phổ tử ngoại 292 nm Đây sở cho phép định lượng Qinghaosu đo phổ tử ngoại Khi hồi lưu artemisinin xylen thời gian dài (22 g iờ ) phần Qinghaosu (15%) bị biến đổi thành acetat 11 bán acetal 12 [23] Dưới tác dụng nhiệt độ (200°C) vòng 2,5 phút Qinghaosu bị biến đổi thành chất 11,13,14 [19] CH, ; CH, 12 14 2.2 CÁC DẪN CHẤT BÁN TổNG HỢP CỦA ARTEMISININ 2.2.1 Liên quan cấu trúc tác dụng dược lý: Mặc dù artemisinin có tác dụng tốt tới ký sinh trùng p.falciparum p.vivax, không độc với người dùng nhược điểm tỷ lệ tái phát cao khả hòa tan nước lẫn dầu nó, nên tác dụng điều trị bị hạn chế Để hoàn thiện khả điều trị artemisinin người ta bán tổng hợp tổng họp hàng loạt dẫn chất khác đưa thử lâm sàng Qua thực tế thử dược lý, lâm sàng chất tổng hợp, bán tổng hợp thành phần khác chiết từ hao hoa vàng người ta thấy rằng: Sự diện liên kết peroxyd (-0-0-) khung có liên kết mật thiết đến tác dụng trị sốt rét, thiếu hợp chất không tác dụng cắt sốt (Ví dụ dạng deoxy vòng lacton phân tử artemisinin bị mở hợp chất tác dụng đối vói ký sinh trùng sốt rét 2.2.2 Bán tổng hợp dẫn chất artemisinin Để khắc phục nhược điểm artemisinin khả hòa tan nước lẫn dầu nó, làm giảm khả tái phát tăng hiệu lực điều trị người ta bán tổng hợp hàng loạt dẫn chất khác mang nhóm háo nước, háo dầu từ artemisinin Với xu hướng người ta tạo khối lượng lớn dẫn xuất artemisinin, sàng lọc để tìm thuốc Trong số thuốc mớinày phải kể đến hợp chất thuộc dẫn chất dihydroartemisinin (5) artesunat, artemether, arteether đặc biệt acid artelinic Vì chất vừa hòa tan nước dạng muối, vừa bền vững dung dịch kiềm nên làm thuốc tiêm theo nhà khoa học chất có nhiều hứa hẹn điều trị 2.2.2.I Bán tổng hợp dỉhydroartemisinin (DHA): Hợp chất tìm thấy có tác dụng dược lý mạnh gấp lần so với artemisinin dihydroartemisinin (5) Dihydroartemisinin sản phẩm khử hoá artemisinin Để khử hoá chọn lọc nhóm c o lacton artemisinin ( ) thành bán acetal dihydroartemisinin, người ta thử nhiều phương pháp khác phương pháp có hiệu phương pháp dùng tác nhân NaBH4 methanol điều kiện nhiệt độ thấp (0-5°C) [3, 16, 18, 26] Trên sở này, số nhà khoa học giới điều chế DHA, sau tinh chế thu hỗn hợp đồng phân a Ị3 DHA với hiệu suất đạt khoảng 75-79% [ 18] Tại Việt Nam, số nhà khoa học nghiên cứu cải tiến trình hydro hoá với nguyên tắc nêu nhằm giảm chất khử dung môi xuống mà thu hiệu suất cao Phạm Hoàng Ngọc cộng giảm lượng dung môi thu hiệu suất 79% [4] Phan Đình Châu cộng với việc cho thêm chất làm tăng hoạt lực NaBH4 giảm lượng dung môi tác nhân khử NaBH4 xuống mức đáng kể đưa hiệu suất trình điều chế DHA lên tới 92-95% [3] Do DHA có đặc tính tan nước, dầu nên việc sử dụng bị hạn chế Vì cần phải đưa vào phân tử DHA nhóm làm tăng khả hoà tan nước dầu Chính từ DHA với việc thay hydro nhóm OH bán acetal gốc khác nhau, người ta tổng hợp nhiều dẫn chất có khả hoà tan dầu nước tốt để thử dược lý lâm sàng kết thu nhiều thuốc có tác dụng tốt artemisinin lẫn DHA Các dẫn chất thuộc dẫn chất dạng ete este DHA PHẦN III THỰC NG H IỆM VÀ KẾT QUẢ 3.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 3.1.1.Nguyên vật liệu dụng cụ: - Bản mỏng sắc ký Merck art-5554-Alufolien kieselgen 60 F,54 - Máy đo nhiệt độ nóng chảy BOETUS-HMK-Đức - Máy đo phổ hổng ngoại PERKIN ELMER - Artemisinin - Acid p-hydroxy metyl benzoic 3.1.2 Phương pháp nghiên cứu: 3.1.2.1 Nghiên cứu cải tiến phương pháp điều chếacid artelỉnỉc: Dihydroartemisinin (5) điều chế từ artemisinin (1) với chất khử NaBH4 Tiếp để điều chế ete DHA thông thường tác giả cho DHA tác dụng với ancol tương ứng triíloboro eterat [ 3, 17, 18] Quá trình tổng hợp tóm tắt sơ đồ II R= ankyl, arakyl Sơ đổ II Còn để thu ete có chứa nhóm carboxylic- sản phẩm có khả hoà tan nước- người ta cho DHA (5) tác dụng với este acid hydroxy-carboxylic để este-ete 28, thực việc thuỷ phàn cắt nhóm chức este để tạo acid-ete 29 [18 21] (sơ đồ III) Sơ đổ III Với phương pháp nêu A.J.Lin hiệu suất tổng gộp hai giai đoạn 41,19%( 78,3% 52,6%) Như hiệu suất điều chế acid artelinic tính từ DHA tương đối thấp Cho nên thử nghiệm cải tiến phương pháp ete hóa nhằm nâng cao hiệu suất điều chế acid artelinic cách cho ete hóa DHA trực tiếp với acid p-hydroxy-metylbenzoic với xúc tác BF3-eterat dung môi dietyl ete Quá trình phản ứng thực theo sơ đồ sau: Sơ đổ V Kết thúc phản ứng, xử lý hỗn hợp phản ứng dung môi thích hợp, tinh chế sản phẩm tính hiệu suất Sản phẩm sau tinh chế kiểm tra so sánh với sản phẩm mà nhóm nghiên cứu Phan Đình Châu thu theo phương pháp A.J Lin [2] sắc ký lớp mỏng, nhiệt độ nóng chảy, phổ IR, ‘H-NMR l3C-NMR - 16- 3.12.2 Khảo sát ảnh hưởng dung môi xúc tác đến phấn ứng ete hóa Trên sở phản ứng ete hóa trực tiếp DHA acid p-hydroxy metyi benzoic, tiến hành khảo sát định tính ảnh hưởng đun môi xúc tác đến trình phản ứng Các dung môi thử nghiệm là: dietyl ete, aceton, n-hexan, diclometan, etyl acetat với xúc tác là: trifloboeterat, acid hydrocloric, acid p-toluensulfonic Phản ứng thực nhiệt độ 25-30°C theo dõi sắc ký lớp mỏng 3.2 THỰC NGHIỆM 3.2.1 Điều chế dihydroartemisinin: [25] 14,lg (0,05mol) artemisinin (1) hoà tan 240ml methanol, cho vào l,5g MgCL 6H20 lml nước Làm lạnh hỗn hợp xuống -50°c Duy trì lạnh cho 2,85g (0,075mol) NaBH4 vào hỗn hợp phản ứng vòng khoảng Sau khuấy thêm 30 phút nhiệt độ 0-5°C Trung hoà hỗn hợp phản ứng với 10 ml acid acetic Đổ hỗn hợp phản ứng vào 700ml nước cất lạnh Để lạnh giờ, lọc lấy tủa, rửa lại tủa nước cất lạnh lần Sấy khô 50-60°C thu 12,87g hợp chất (hiệu suất 90,63%) Độ chảy 151-153°c 3.2.2 Cải tiến phương pháp bán tổng hợp acid artelinic Cho 5,7g (0,020 mol) DHA hoà tan vào 300ml ete etylic cho thêm 4,0g (0,026 mol) acid 4-hydroxymetyl benzoic Khuấy kỹ nhiệt độ phòng 15 phút Thêm vào hỗn hợp phản ứng 2ml BF3.0(C2H5)2 Khuấy 24 nhiệt độ 25-28°C Theo dõi phản ứng bằns sầc ký lớp mỏng với mỏng silicagei đế nhôm có tẩm chất phát huỳnh quang 254 am với hệ dung môi khai triển toluen: etyl acetat (6 : 4) Vết phát kết hợp soi đèn tử ngoại bước sóng 254nm (đánh dấu bút chì kim) màu phun dung dịch p-dimetylamino benzaldehyd hỗn hợp acid acetic, acid phosphoric nước ( 100 : 10 : 90), sấy nhẹ Vì phản ứng không hoàn toàn nên phản ứng kết thúc vết DHA không đáng kể không giảm Sau kết thúc phản ứng, lọc bỏ phần cắn không tan Chiết dịch lọc với dung dịch NaHC03 5% Rửa dịch chiết ete etylic Acid artelinic tách từ dịch nước điều chỉnh pH=l-2 dung dịch HC1 20% chiết sang cloroíorm Do khả hoà tan acid phydroxymetyl benzoic cloroíòrm acid artelinic nên đa phần loại khỏi dịch chiết Kiểm tra sắc ký lớp mỏng Dịch chiết cloroíorm rửa lại nước cất lần, làm khan bay dung môi áp suất giảm để thu sản phẩm Sản phẩm kết tinh lại hỗn hợp cloroform-hexan Lọc, rửa tinh thể n-hexan lạnh Kết thu 5.55g sản phẩm Hiệu suất phản ứng đạt 66,15% (tính theo DHA) Độ chảy 141-144°c Sản phẩm kiểm tra so sánh với sản phẩm thu theo phương pháp [2] sắc ký lớp mỏng, nhiệt độ nóng chảy, phổ IR, 'H-NMR 13C-NMR, kết hoàn toàn trùng với sản phẩm IR ( vmaKcm'J): 3423 (OH); 1706 (acid c=0); 826, 876 (-0-0-) ‘H-NMR (ỗ:ppm): 0,8-ỉ,05(m, 7H); 1,20-L75(m, 9H); l,75-l,95(m, 2H); 1,952,15(m, 2H); 2,30-2,50(ddd, 1H); 2,60-2,80(m, 1H); 4,61(d , ỈH, J=ỉ3Hz,OCH2A); 4,94(d, ỈH, J=3,5Hz , 10-H); 4,99(d, ỈH, J=13Hz, OCH2B); ,47 ( s , 1H, 12-H); 7,42(d,2H, J=8Hz 2'-H+6’-H); 8,ỈO(d, 2H.J=8,0Hz,3'-H+5'-H); i3C-NMR: 104,16(C-3); 36,29(C-4); 24.44(C-5); 52A3(C-5a); 37,28(C-Ố); 34,37(C-7); 24,56(0-8); 44,24(C-8a); 30,82(C-9); Ỉ01,57(C-Ỉ0); 87,97(C-12); 81,00(C-12a); 26,01(3-CH3); lO.lOịổ-CH,); 12,99(9CH,); 171,53(-COOH); Ố9,Ỉ3(-0CH:-); 144.49 ( ỉ ’); 130,18 (3'+5'); 128,35 (4'); 126,79 (2'+6') PERKINELMER 3.30-1 >;T 'tó Sè I 4000 :!! - < í ' •ílỉl' , ■Ũ -1 1— 3500 3000 250 1000 1500 2000 500 cm_l 500 cm*1 ':'0/0:3/ie 10 00 Phong TNTT DH Ouoc Y: scan, 4.Qom-l hau HL L296- 99 Thu PERKINELMER rìị !ik M \ ; ìí í 3000 El/lĩ' ì' lí: 09 Phong 2500 2000 1500 ;Ị| Ji,Ỉ! ]! Mi í! ! |.''1 ■I I SP [...]... phẩm PHẦN IV KẾT LUẬN Sau một thời gian nghiên cứu chúng tòi thu được một số kết quả sau: *l* Đã bán tổng hợp thành công acid artelinic bằng phương pháp ete hóa trực tiếp DHA với acid p-hydroxymetyl benzoic Hiệu suất của quá trình điều chế này đạt được 66,15% Với phương pháp này đã nâng cao được hiệu suất lên 24,96% so với phương pháp của A.J Lin ❖ Phương pháp cải tiến này đã giúp cho quá trình tinh chế... Trung hoà hỗn hợp phản ứng với 10 ml acid acetic Đổ hỗn hợp phản ứng vào 700ml nước cất lạnh Để lạnh trong 2 giờ, lọc lấy tủa, rửa lại tủa bằng nước cất lạnh 2 lần Sấy khô ở dưới 50-60°C thu được 12,87g hợp chất 5 (hiệu suất 90,63%) Độ chảy 151-153°c 3.2.2 Cải tiến phương pháp bán tổng hợp acid artelinic Cho 5,7g (0,020 mol) DHA hoà tan vào 300ml ete etylic và cho thêm 4,0g (0,026 mol) acid 4-hydroxymetyl... PERKIN ELMER - Artemisinin - Acid p-hydroxy metyl benzoic 3.1.2 Phương pháp nghiên cứu: 3.1.2.1 Nghiên cứu cải tiến phương pháp điều ch acid artelỉnỉc: Dihydroartemisinin (5) được điều chế từ artemisinin (1) với chất khử NaBH4 Tiếp đó để điều chế các ete của DHA thông thường các tác giả cho DHA tác dụng với ancol tương ứng trong triíloboro eterat [ 3, 17, 18] Quá trình tổng hợp được tóm tắt trong sơ đồ... xúc tác nên sử dụng Cần tiếp tục nghiên cứu áp dụng phương pháp này với các acid- ancol khác như m-hydroxymetyl benzoic, o-hydroxymetyl benzoic TÀI LIÊU THAM KHẢO 1 Trần Mạnh Bình , Nguyễn Gia Chấn, Đặng Ngọc Bích Nghiên cứu bán tổna hợp p dihydroartemisinin (arteether) Tạp chí Dược học, 1995,7+8,36 2 Phan Đình Châu , Phan Lệ Thủy Bán tổng hợp hoạt chất trị sốt rét acid artelinic dẫn chất có khả năng... :Y = C H = 7 ^ 0 ) * acid arteìinic— Sơ đ ổ I ơ Việt Nam Phan Đình Châu và cộng sự [2, 10] đã nghiên cứu bán tổng hợp hoạt chất kiểu này là acid artelinic, acid metaartelinic Kết quả thử tác dụng trên ký sinh trùng sốt rét bước đầu cho thấy chúng rất khả quan trong chống tái phát trên động vật thực nghiệm [6] PHẦN III THỰC NG H IỆM VÀ KẾT QUẢ 3.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 3.1.1.Nguyên... đã có một số nghiên cứu về dẫn xuất chứa acid amin của artemisinin Trương Đình Thạc, Trương Thanh Nga, Phạm Ngọc Hà [8] nghiên cứu về tổng hợp dẫn chất chứa flo của artemisinin làm thuốc chữa sốt rét Mai Văn Tri, Nguyễn Văn Tuyến và cộng sự [11] có nghiên cứu về tổng hợp các dẫn chất mới của artemisinin chứa liên kết C-C ở vị trí C12, các dẫn chất chứa nitơ của 12-deoxy artemisinin Các hợp chất này... este của acid hydroxy-carboxylic để được các este-ete 28, tiếp theo đó là thực hiện việc thuỷ phàn cắt nhóm chức este để tạo ra các acid- ete 29 [18 21] (sơ đồ III) Sơ đổ III Với phương pháp nêu trên của A.J.Lin hiệu suất tổng gộp cả hai giai đoạn là 41,19%( 78,3% và 52,6%) Như vậy hiệu suất điều chế acid artelinic tính từ DHA còn tương đối thấp Cho nên chúng tôi thử nghiệm cải tiến phương pháp ete... lần III, 1998,456-459 _ ' 10 Thái Nguyễn Hùng Thu ■, Trần Bích Vân, Phan Đình Châu, Trương Văn Như Nghiên cứu bán tổng hợp và các yếu tố ảnh hưởng lên quá trình điều chế acid artelinic và acid meta artelinic Tạp chí Dược học, 1999, 6, 12- 14 11 Mai Văn T r í, Nguyễn Văn Tuy.ến, Phạm Văn Cường Tổng hợp các dẫn chất mới của artemisinin chứa liên kết C- c ở vị trí C12 Các dẫn chất chứa ni tơ của 12-... phươns pháp thồng dụng này, nsười ta đã điều chế ra rất nhiều ete của DHA Nói chung các ete của DHA tổng hợp được đều có tác dụng trên ký sinh trùng sốt rét tốt hơn DHA hoặc artemisinin Trong số các ete này có hai chất đã được đưa vào sử dụng trong điều trị là đồng phân p của metyl ete (artemether) và etyl ete (arteether) ở Việt Nam, nhóm nghiên cứu của Trường Đại học Dược cũng đã nghiên cứu bán tổng hợp. .. rét như artemisinin 2.2.2.7 Bán tổng hợp acid artelỉnỉc và một sô ete thơm có khả năng hòa tan trong nước của DHA Tận dụng sự bền vững của liên kết ete trong các dẫn chất của DHA, Lin.A.J., Klayman D.L và cộng sự [21] đã điều chế ra các họp chất vừa mang liên kết ete của DHA vừa mang nhóm acid có khả năng tạo muối có thể hòa tan trong nước Một trong số các hợp chất đó là acid artelinic Muối artelinat ... thấp đặt vấn đề nghiên cứu cải tiến phương pháp bán tổng hợp acid artelinic nhằm nâng cao hiệu suất trình điều chế Khoá luận thực nhằm giải vấn đề sau: o Nghiên cứu cải tiến phương pháp nhằm đơn... liệu phương pháp nghiên cứu 3.1.1 Nguyên vật liệu dụng cụ: 3.1.2 Phương pháp nghiên cứu: 3.2 Thực nghiệm 3.2.1 Điều chế dihydroartemisinin: 3.2.2 Cải tiến phương pháp bán tổng họp acid artelinic. .. phổ hổng ngoại PERKIN ELMER - Artemisinin - Acid p-hydroxy metyl benzoic 3.1.2 Phương pháp nghiên cứu: 3.1.2.1 Nghiên cứu cải tiến phương pháp điều ch acid artelỉnỉc: Dihydroartemisinin (5) điều