TRƯỜNG ĐẠI HỌC sư PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ===8dBŨIcs=== HÀ THỊ KHUYÊN ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG Độ NaCl TỚI Sự TÍCH LŨY PROLIN, GLYXIN BETAIN YÀ AXIT ASCOBIC Ở MẦM ĐẬU TƯƠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC • ••• Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật HÀ NỘI, 2015 TRƯỜNG ĐẠI HỌC sư PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN HÀ THỊ KHUYÊN ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG Độ NaCl TỚI Sự TÍCH LŨY PROLIN, GLYXIN BETAIN YÀ AXIT ASCOBIC Ở MẦM ĐẬU TƯƠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC • ••• Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật Người hướng dẫn khoa học PGS. TS. NGUYỄN VĂN MÃ HÀ NỘI, 2015 Đe hoàn thảnh khóa luận này, em xin bày tỏ lòng biết ơn, kính ừọng sâu sắc tới PGS.TS. Nguyễn Văn Mã tận tình hướng dẫn giúp đỡ em thời gian thực đề tài. Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới khoa Sinh -KTNN Trung tâm Hỗ trợ Nghiên cứu Khoa học Chuyển giao Công nghệ - Trường Đại Học Sư Phạm Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện cho em thực đề tài này. Lần đầu làm quen với việc nghiên cứu khoa học, đề tài em không tránh khỏi thiếu sót, mong bảo đóng góp ý kiến thầy cô bạn sinh viên để đề tài em hoàn thiện Hà Nội, tháng năm 2015 Sinh viên Hà Thị Khuyên HÀ NỘI, 2015 Tôi xin cam đoan đề tài thực sở nghiên cứu tài liệu tham khảo thực nghiệm, không trùng với kết tác giả công bố. Hà nội, tháng năm 2015 Sinh viên thực Hà Thị Khuyên HÀ NỘI, 2015 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẤT • cDNA • y : Complementary DNA ( DNA bổ sung) ĐBSCL : Đồng sông cửu long. ĐBSH : Đồng sông hồng. ĐC : Đối chứng. NaCl : Natri clorua. Nxb : Nhà xuất bản. P5CS : Pyrolin - - cacboxilate - synthetase . TN : Thí nghiệm. MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1. 2. 3. MỞ ĐẦU 1. Lý chọn đề tài. 4. Đậu tương hay đỗ tương, đậu nành ( t ê n khoa học g l y c i n e m a x ) loại họ đậu, loài địa Đông Á có giá tri dinh dưỡng, giá trị kinh tế cao giữ vị trí quan tong cấu trồng nay. Cây đậu tương trồng chủ yếu lấy hạt để chế biến thức ăn cho người gia súc. Sản phẩm từ đậu tương sử dụng đa dạng dùng trực tiếp hạt thô chế biến thành đậu phụ, ép thành đậu nành, nước tương, làm bánh kẹo, sữa đậu nành, okara.[4] 5. Hạt đậu tương có thành phàn dinh dưỡng phong phú gồm protein(40%), lipit (12-25%), gluxit (10-15%), có muối khoáng ca, Fe, Mg, P,Na,S;các vitamin A,B1, B2, E, D, F, enzime, sáp, nhựa, cellulose Đậu tương xem thứ dược liệu có tác dụng ức chế 7. phân hủy protein, điều hòa ngũ tạng, phòng bệnh chữa bệnh cho người. Hạt đậu tương mặt hàng nông sản xuất có giá trị. [4] 8. Ngoài ý nghĩa mặt dinh dưỡng, kinh tế đậu tương có tác dụng cao cải tạo đất hệ rễ có nốt sàn chứa vi khuẩn cố định đạm. Hiện đậu tương gieo trồng ngày rộng rãi nước ta giới. 9. Hiện trước tình trạng biển ngày xâm lấn, diện tích đất nhiễm mặn ngày gia tăng. Việc nghiên cứu tìm hiểu ảnh hưởng mặn tới thực vật ngày trở nên thiết để ứng dụng cải tạo sử dụng loài thực vật có khả thích nghi với vùng nhiễm mặn khác nhau. Ở Việt Nam có khí hậu nhiệt đới, gió mùa nóng ẩm thích họp cho việc trồng đậu tương. Tuy nhiên, đậu tương lại nhạy cảm với điều kiện bất lợi môi trường đặc biệt giai đoạn nảy mầm, việc sừess muối ảnh hưởng lớn tới suất đậu tương. 10. Thực vật gặp điều kiện stress muối có phản ứng mặt hình thái, sinh lý, sinh hóa để thích nghi với điều kiện bất lợi môi trường thay đổi số đặc điểm hình thái giải phẫu phù họp gia tăng số chất có khả bảo vệ điều hòa áp suất thẩm thấu, quan ừọng prolin, glyxin betain axit ascobic. 11. Qua nghiên cứu nhà nghiên cứu người ta nhận thấy, prolin tham gia vào nhiều phản ứng thực vật, có vai trò quan trọng thực vật đặc biệt điều kiện stress. Prolin axit ưa nước thể thực vật, tổng họp từ glutamin enzim cảm ứng stress P5CS. Nhiều nghiên cứu prolin đóng vai trò nhân tố bảo vệ màng tế bào, chống lại tác động có hại nồng độ muối cao, làm tăng khả thẩm thấu tế bào. Sự tập trung prolin để phản ứng lại stress muối diễn chủ yếu dịch bào. Prolin có chức protein thẩm thấu ưa nước gốc hydroxyl. Do tích lũy prolin coi phản ứng thích nghi thông thường thực vật bậc cao ừong điều kiện khô hạn. Prolin xem chất thị khả chịu hạn thực vật số tốt thực vật có khả chịu mặn. [14] 12. Glyxin betain sản phẩm trình oxy hóa choline trình tổng hợp methionien. Sự tích lũy glyxin betain ừong tác động stress muối đề xuất đóng vai trò quan trọng điều chinh áp suất thẩm thấu, nhiều nhà khoa học xem phản ứng thích nghi để chống lại stress nước độ mặn [19],[22], glyxin betain chất tan tương thích giúp bảo vệ điều kiện bất lợi. 13. Vitamin c hay axit ascorbic có tác động trực tiếp loại bỏ gốc superoxit, anion H202.[21] 14. Thời gian vừa qua, nước nước có nhiều nghiên cứu prolin ảnh hưởng mặn tới hàm lượng prolin glyxin betain như: Nguyễn Thị Minh Ngọc (2007) [7]. Kim Thị Duyên (2011) [2], Bùi Bá Đạt (2009) [3], Nguyễn Minh Hồng (2008; [ 8], PGS.TS Nguyễn Văn Mã hướng dẫn nghiên cứu. Ngoài nhiều nghiên cứu khác Ngô Thị Anh (2014) [1]. Trong đó, nghiên cứu prolin, glyxin betain vitamin с trồng khác nhiều [15] ,[16],[17],[18]. Trong đó, nghiên cứu tích lũy chất nêu điều kiện mặn ít. Chính vậy, tiến hành nghiên cứu " ảnh hưởng nồng độ NaCl tới tích lũy prolin, glyxỉn betaỉn axỉt ascobic mầm đậu tương”, để làm sở cho nghiên cứu vai trò chúng việc bảo vệ đậu tương vùng bị nhiễm mặn, góp phàn đảm bảo phát triển loại trồng có giá trị này. 2. Mục đích nghiên cứu 15. Nghiên cứu hàm lượng prolin, glyxin betain axit ascorbic mầm đậu tương bị nhiễm mặn 3. Nhiệm vụ nghiên cứu - Xác định hàm lượng Prolin, glyxin betain axit ascorbic mầm đậu tương điều kiện strees nhiễm mặn nồng độ khác nhau. - Xác định tỉ lệ nảy mầm hạt dung dịch NaCl với nồng độ khác 4. Ý nghĩa lý luận thực tiễn 16. Tìm hiểu sâu tích lũy prolin, glyxin betain axit ascobic mầm đậu tương gặp stress mặn, góp phàn bổ sung nguồn tài liệu nghiên cứu, làm sở cho nghiên cứu vai trò sinh học chúng ừong phản ứng bảo vệ trồng gặp sừess. Kết nghiên cứu làm sở khoa học cho việc chọn giống đậu tương chịu mặn. 17. NỘI DUNG CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Sự nảy mầm sinh trưởng mầm đậu tưong 18. Sự sinh trưởng phát triển đậu tương chia làm giai đoạn sau: nảy mầm, con, hoa, hình thành quả, chín. 19. Trong yếu tố ngoại cảnh nước yếu tố ngoại cảnh ảnh hưởng lớn đến sinh trưởng phát triển suất đậu tương. Đậu tương đánh giá trồng chịu hạn song chịu hạn mức độ định. Các giai đoạn khác mẫn cảm với thiếu hụt nước khác nhau. Thời kì hoa hình thành cần nhiều nước nhất. Thời kì yêu cầu nước thấp tò sau nảy mầm lúc bắt đầu hoa. Thời kì chùi yêu cầu nước thấp thời kì hoa. [4] 20. Ở giai đoạn nảy mầm, sau trồng hạt đậu tương hút nước nhanh trừ vài giống đặc biệt loại hoang dại khả hút nước chậm hơn, ừong điều kiện thuận lợi rễ xuất sau trồng 1-2 ngày. Rễ gọi rễ phát triển nhanh xuống phía dưới, đến ngày thứ 4-5 rễ phụ bắt đàu xuất hiện. Sau 3-4 ngày mầm xuất đẩy lên khỏi mặt đất, sinh trưởng mạnh phần trụ mầm lúc đàu mầm có màu vàng nhạt, sau có màu xanh sau chuyển sang màu vàng rụng xuống. 21. Thực chất trình nảy mầm trình biến đổi sinh lí, sinh hoá mạnh mẽ diễn hạt, chuẩn bị cho hình thành non. Đậu tương thuộc hai mầm nên nảy mầm gồm pha nảy mầm hai mầm là: 1, Pha trương hạt: tính tò bắt đàu nảy mầm, hạt hút nước mạnh làm trương hạt. 2, Pha hình thảnh hoạt hoá enzym: hạt có lượng enzym định chủ yếu dạng liên kết hạt hút nước enzym giải phóng dạng tự bắt đầu hoạt động mạnh. 3, Pha tích luỹ chất dinh dưỡng: phút đầu ngâm ừong nước, độ hấp thụ oxi hạt tăng lên đặc biệt chu trình hexozomonophotphat tăng lên nhiều lần, vây lượng ATP tích luỹ nhiều hơn. áp suất thẩm thấu prolin, giúp mầm tăng khả quang họp, bảo vệ mầm trước tác động bất lợi môi trường. Khi nồng độ muối cao tích lũy prolin tăng đến MI ,2 lên tới nồng độ cao (Ml,5 Ml,8) tích lũy lại giảm . ■ ■ ngày ■ ngày2 ■ ngày3 ■ ngày4 ■ ngày5 ■ ngàyỏ 439. 440. ĐC ■ M0,3MO,6 MO,9 Ml,5 MI,8 Hình 4. Sự biến đổi hàm lượng glyxin betaỉn mầm đậu tương 441. 442. MI,2 ngày sinh trưởng. Các ngày tiếp theo, tích lũy hàm lượng glyxin betain lúc lại có nhiều biến động. Ở lô ĐC hàm lượng glyxin betain tích lũy ừong mầm đậu tương lúc có xu hướng giảm dàn tò M0,3 đến Ml,2 giảm rõ rệt, Ml,5 Ml ,8 không rõ ràng. Ở lô thí nghiệm có nồng độ thấp tác động muối NaCl đến mầm đậu tương làm tăng tích lũy glyxin betain mầm giúp mầm đảm bảo chế bảo vệ tế bào, tăng áp suất thẩm thấu chất nguyên sinh dịch bào đảm bảo sinh trưởng phát triển bình thường mầm. Ở nồng độ cao (Ml,5 Ml,8) áp lực muối tác động lên mầm làm cho mầm có phản ứng thích ứng với stress muối, nhiên 443. thòi gian kéo dài mầm bị tổn thương dẫn tới làm giảm dần phản ứng chống lại tác hại stress mặn. 444. Từ kết ừên, ta có nhận xét: hàm lượng glyxin betain tăng rõ rệt ( trừ Ml,8) ngày từ ngày lại giảm. Với nồng độ NaCl cao tích lũy glyxin betain tăng đến Ml,2, nồng độ giảm. 445. Nguyên nhân: Do ảnh hưởng muối NaCl tới sinh trưởng phát triển mầm đậu tương, cụ thể ảnh hưởng trực tiếp tới áp suất thẩm thấu tế bào, nồng độ muối thấp ảnh hưởng muối NaCl đến đậu tương chưa đáng kể hạt có khả lấy đủ nước giảm dần tích lũy hàm lượng glyxin betain hạt bắt đầu vào trình sinh trưởng phát triển sau nảy mầm. Ở lô thí nghiệm có nồng độ muối cao áp lực stress muối tác động lên mạnh nên đậu tương có phản ứng tương thích để đảm bảo phát triển tế bào nhiên áp lực muối NaCl cao thời gian dài làm hạn bị tổn thương trình tích lũy glyxin betain bảo vệ tế bào giảm. 3.3. Ảnh hưởng muối NaCỈ đến biến đổi hàm lượng axit ascobic mầm đậu tương. 446. Bảng 8. Ảnh hưởng muối NaCl đến hàm lượng axit ascobỉc 447. gieo hạt. 448. 449. 453. 457. 461. 465. 469. 473. 477. MẩuTN ĐC M0,3 MO,6 MO,9 Ml,2 Ml,5 Ml,8 450. Sau ( X ± m) 454. 0,072+0,044 458. 0,083+0,030 462. 0,089+0,015 466. 0,093+0,020 470. 0,103+0,010 474. 0,085+0,018 478. 0,073+0,010 451. Sau ( X ± m ) 455. 0,079+0,037 459. 0,091+0,021 463. 0,093+0,020 467. 0,097+0,034 471. 0,105+0,010 475. 0,088+0,015 479. 0,080+0,010 ĐV: % 452. Sau (X + m) 456. 0,081+0,030 460. 0,096+0,030 464. 0,097+0,027 468. 0,098+0,010 472. 0,106+0,010 476. 0,091+0,025 480. 0,083+0,020 481. 482.0.1 483. 0.08 484. 0.06 485. 486. 0.04 487. 0.02 488. 489. 490. 491. 493. _ri ri m ■ ■ ■ ■ ĐC M0,3 MO,6 MO,9 Ml,2 Ml,5 Ml,8 Hình 5. Ảnh hưởng muối NaCỈ tói hàm lượng axit ascobic 492. gieo hạt. Ngày đầu tiên, tích lũy hàm lượng axit ascobic mầm đậu tương ít, hàm lượng cao đạt 0.106% sau M 1,2 thấp đạt 0,072% (ở ĐC) 0,073% (ở Ml,8). Sự biến động hàm lượng axit ascobic ngày nhỏ chênh lệch hàm lượng ngày nhỏ thấp đạt mức 1, 001fig/g cao đạt 0,008%. 494. Trong ngày sau giờ, tích lũy hàm lượng axit ascobic có tăng nhẹ theo chiều tăng thời gian, nhiên hàm lượng đạt không đáng kể. mặt khác, xét theo chiều tăng nồng độ muối NaCl ttong môi trường ta thấy lượng axit ascobic tăng từ M0,3 tới Ml,2 bắt đầu giảm dàn M 1,5 M 1,8. Do nhu càu tích lũy axit ascobic giai đoạn để bảo vệ tế bào thông qua chế chống oxi hóa. Mặt khác, lúc hạt trạng thái trương nước chuẩn bị cho trình sinh trưởng phát triển mầm nên trình tổng họp axit ascobic hạn chế. 495. Mâ496. Ngàyl u 497. (X±m) ĐV: % Ngày2 Ngày Ngày Ngày (X±m) (X±m) (X±m) (X±m) 0,089+0,00 0,110+0,0 0,134+0,00 0.102+0,00 0,095+0,00 0,064+0,00 0,148+0,00 0.153+0,00 498. ĐC499. 0,072+0,04 0,082+0,01 Ngày (X±m) 500. MO, 0,083+0,03 0,088+0,00 0,101+0,00 0,089+0,00 2 501. 502. MO, 0,089+0,01 0,094+0,00 0,113+0,00 0,107+0,00 503. 6 3 MO, 0,093+0,02 0,122+0,01 0,161+0,00 0,162+0,00 0,154+0,00 0,143+0,00 504. 505. Ml, 0,103+0,01 0,127+0,00 0,149+0,00 0,173+0,00 0,147+0,00 0.140+0,00 506. 2 3 507. Ml, 0,085+0,01 0,091+0,00 0,124+0.00 0,125+0,00 0,101+0,00 0,093+0,00 8 508. 8 Ml,509. 0,073+0,01 0,083+0,00 0,102+0,0 0,099+0,00 0,089+0,00 0,075+0,00 3 510. 511. 512. 0.2 0.18 513. 0.16 514. 0.14 ngày 515.0,12 ngày 0.1 ngày 516. 0.08 ngày 517. 0.06 ngày 518. 0.04 ngày 519. 0.02 520. M0,3 MO,6 MO,9 MI,2 Ml,5 MI,8 ĐC 521. 522. 523. 524. Hình 6. Sự ảnh hưởng muối NaCl tói hàm lượng axit ascobỉc mầm đậu tương J WT 1 1 525. r I r r 11 1 r 1 1 1 1 i ngày sinh trưởng. 526. Kết bảng hình cho thấy ảnh hưởng rõ rệt muối NaCl đến hàm lượng axit ascobic. Có biến động hàm lượng axit ascobic nồng độ muối NaCl khác qua ngày tiến hành thí nghiệm, cụ thể là: 527. Xét theo thời gian thí nghiệm, hàm lượng axit ascobic ngày thí nghiệm tăng từ ngày rõ vào ngày 3, biến động từ 0,064% đến 1, 173%. Ngày thứ 5, tích lũy hàm lượng axit ascobic giảm rõ rệt. Ngày ngày tiến hành nghiệm tích lũy hàm lượng axit ascobic tăng mạnh tăng lên tới 0,173% ( Ml,2 ngày 4), nồng độ MO,9 Ml,2 hàm lượng axit ascobic tích lũy mức cao so với nồng độ khác. Khả chống oxi hóa hạt đảm bảo giúp hạt chống lại tác hại stress mặn. Bước sang ngày ngày 6, tích lũy axit ascobic bắt đàu giảm dần sau ngày thí ngiệm hàm lượng axit ascobic tích lũy giảm 0,064% (ở ĐC), 0,075% ( Ml,8) 0,089% (ở M0,3), ta thấy ảnh hưởng muối NaCl đến tích lũy axit ascobic rõ ràng. 528. Xét theo chiều tăng nồng độ muối NaCl ừong môi trường: Từ kết thu ta thấy theo chiều tăng dần nồng độ từ M0,3 đến Ml,8 có nhiều biến động. Từ M0,3 đến Ml,2 hàm lượng axit ascobic tích lũy tăng dần tăng mạnh tới nồng độ Ml,2 cụ thể ngày tăng từ 0,088% (ở M0,3) đến 0,127 % (ở Ml,2), đó, hàm lượng axit ascobic tất mẫu thí nghiệm cao ĐC tất ngày. Hàm lượng axit ascobic tăng theo nồng độ ( từ M0,3 đến Ml,2), nhiên, tăng rõ rệt M0,6 M0,9, Ml,2 có nhiều thay đổi. Từ Ml,5 đến Ml,8 hàm lượng axit ascobic tích lũy giảm. 529. Nguyên nhân: lô có nồng độ muối NaCl thấp (M0,3 đến Ml,2) phản ứng lại tác động muối diễn rõ nét, tăng mạnh hàm lượng axit ascobic tích lũy M0,9 Ml,2 cho ta thấy với áp lực sừess môi trường thực vật hay cụ thể đậu tương có có phản ứng sinh 530. tổng hợp chất để bảo vệ chống oxi hóa nhằm giảm tới mức tối đa tác hại môi trường. Ở lô nghiệm có nồng độ muối cao Ml,5 M 1,8 hàm lượng axit ascobic tích lũy so với lô thí nghiệm nồng độ muối thấp, tác động nồng độ muối lúc lên hạt đậu tương mạnh dẫn tới trình sinh lí, sinh hóa hạt diễn khỏ khăn so với lô có nồng độ thấp. Mặt khác, lúc tác động stress mặn thời gian dài nồng độ cao làm cho trạng thái sinh trưởng hạt bị tác động, làm cho hạt dần khả tổng hợp chất để bảo vệ tế bào phát triển bình thường. 3.4. Ảnh hưởng muối NaCỈ đến khả nảy mầm giống đậu tương ĐT22 ngày sinh trưởng. 531. Tỉ lệ nảy mầm hạt đậu tương qua ngày đàu thể qua bảng: Bảng 10. Ảnh hưởng muối NaCl tới khả nảy mầm 532. đậu tương. 533. % 534. TN 538. 542. 3546. 550. 9554. 558. 562. Mâu ĐC M0, MO, MO, Ml,2 Ml,5 Ml, 535. 539. 543. 547. 551. 555. 559. 563. Ngày 80,00 26.00 2,00 - - - - 536. Ngày 540. 100,00 544. 548. 552. 556. 560. 564. 90,00 73,33 40,00 6.00 2,00 - 566. 537. 541. 545. 549. Ngày 100,00 100,00 100,00 553. 70,00 557. 48,33 561. 26.66 565. - ĐV: 567. Hạt nảy mầm mạnh tò ĐC đến nồng độM 0,9, từ nồng độ M 1,2 đến Ml,8 nảy mầm hàu không nảy mầm Ml,8. Ngày thứ 2, hạt nảy mầm ĐC, M0,3 MO,6. Ngày thứ nảy mầm đến nồng độ Ml,5 tới ngày thứ hạt nảy mầm đến nồng độ Ml,5 tới Ml ,8 hạt không nảy mầm. 568. 569. 100 80 120 te 60 40 20 ngày6 ĐC M0,3MO,6 MO,9 Ml,2 Ml,5 Ml,8 571. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. 570. Hình 7: Sự ảnh hưởng muối NaCl đến khả nảy mầm đậu tương ngày đầu sinh trưởng. 572. Khi nồng độ muối dung dịch cao khả nảy mầm hạt giảm. Điều chứng tỏ stress muối có ảnh hưởng lớn tới khả nảy mầm hạt. Khi nồng độ muối dung dịch tăng khả hút nước tế bào giảm, để đảm bảo cho hạt nảy mầm, tế bào phải tăng cường tích lũy số chất phản ứng chống lại điều kiện stress môi trường, làm chậm tốc độ tỉ lệ nảy mầm hạt. Đặc biệt, nồng độ 1,8 hạt không lấy nước, enzim không hoạt hóa dẫn tới lượng cho hạt nảy mầm. 573. Khối lượng tươi khô kết sinh tổng họp giai đoạn đàu sinh trưởng mầm đậu tương. Khối lượng tươi biểu khả hút nước đồng thời đóng vai ừò định khối lượng khô mầm. Khối lượng khô mầm thể hàm lượng chất mà chúng tích lũy giai đoạn nảy mầm. Do khối lượng tươi khối lượng khô số tiêu sinh lí quan trọng phản ánh sinh trưởng mầm. 574. Chứng tiến hành xác định khối lượng tươi khối lượng khô lúc hạt nảy mầm ngày ngày sau gieo. 575. 576. ĐV: g/màm. MâuTN 579. ĐC 577. Ngày 578. Ngày (X±m) 580. 0,24 ± 0,03 (X±m) 581. 0,49 ± 0,02 582. M0,3 583. 0,23 + 0,04 584. 0,35 + 0,02 585. MO,6 586. 0,22 ± 0,02 587. 0,30 ± 0,02 588. MO,9 589. 0,22 + 0,01 590. 0,29 + 0,02 591. Ml,2 592. 0,17 + 0,03 593. 0,27 ± 0,01 594. Ml,5 595. 0,17 + 0,02 596. 0,25 + 0,03 597. Ml,8 598. 0,17 + 0,01 599. 0,23 + 0,02 600. 601. Ngày 1, không chịu áp lực stress muối lô ĐC mầm có trương nước mạnh nhất, nên có khối lượng tươi cao cả. Theo chiều tăng lên nồng độ muối NaCl khối lượng tươi ngày giảm chịu áp lực stress muối, nồng độ cao áp lực lớn dẫn tới khả hút nước giảm. Tuy nhiên, khác biệt mẫu thí nghiệm không rõ rệt. 602. Ngày thứ 6, khối lượng tươi có tăng rõ rệt so với ngày 1, theo chiều tăng dần nồng độ muối NaCl khối lượng tươi giảm dần giảm nhiều nồng độ Ml,5 Ml,8. Sự biến động khối lượng tươi cho ta thấy ảnh hưởng muối NaCl đến khả hút nước hạt. nồng độ muối NaCl môi trường cao tạo áp lực lên hạt làm giảm khả lấy nước từ môi trường. 603. I I I I rrr 111 111 I 604. Hình 8. Ảnh hưởng muối NaCl đến khối lượng tưoi 605. mầm đậu tương. 606. Như vậy, ừong ngày đàu tiên hạt trương nước để bắt đầu trình nảy mầm, khối lượng tươi biến động, sau ngày khối lượng tươi lại có giảm mạnh đặc biệt từ nồng độ Ml,5 đến Ml,8. 607. Điều chứng tỏ nồng độ NaCl có ảnh hưởng rõ rệt tới khả hút nước, lấy nước hạt để đáp ứng nhu càu cho hạt động chuyển hóa vật chất tạo lượng cho hạt nảy mầm, đồng thời ảnh hưởng trực tiếp tới enzym chuyển hóa (tổng hợp, phân hủy) mầm. 608. Bảng 12. Ảnh hưởng muối NaCl đến khối lưọng khô 609. mầm đậu tương. 610. ĐV: g/mầm 611. MâuTN 612. Ngày ( X ± m ) 613. Ngày ( X ± m ) 614. ĐC 617. M0,3 620. MO,6 623. MO,9 626. Ml,2 629. Ml,5 632. Ml,8 635. 615. 618. 621. 624. 627. 630. 633. 616. 619. 622. 625. 628. 631. 634. 0,066 ± 0,005 0,060 ± 0,001 0,052 ± 0,001 0,050 ± 0,001 0,048 ± 0,001 0,046 ± 0,001 0,043 ± 0,002 0,106 + 0,001 0,111+0,012 0,115+0,001 0,115+0,002 0,117+0,001 0,120 + 0,001 0,125+0,003 636.0.14 637. 0.12 638. 639.0.1 640.0.08 641.0.06 642.0.04 643. lllllll - - - ngày Ngày б - 0.02 - о - 644. 646. 645. DC M0,3 MO,9 Ml,2 Ml,5 Ml,s Hình 9. Sự ảnh hưởng muối NaCl đến khối lượng khô 647. 648. MO,б mầm đậu tương. Kết cho thấy, ngày khối lượng khô giảm dần có biến động không rõ rệt tăng. Ngày ta thấy khối lượng khô có xu hướng tăng dần theo nồng độ dàn, hay nói cách khác khối lượng khô tỉ lệ thuận với nồng độ muối ừong môi trường. Sự chênh lệch khối lượng khô nồng độ ĐC so với nồng độ 1,8 0,019. 649. Nguyên nhân: áp lực stress muối lên mầm đậu tương làm chúng phản ứng lại tác hại môi trường cách tổng họp nên họp chất có tác dụng bảo vệ tế bào, tăng áp suất thẩm thấu chống phản ứng oxi hóa có hại. 650. KẾT LUẬN 651. ■ 652. Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ NaCl tới tích luỹ prolin, glyxin betain axit ascorbic mầm đậu tương điều kiện stress muối rút kết luận sau: 1. Muối NaCl gây ảnh hưởng rõ rệt tới tích lũy prolin ừong mầm đậu tương. Theo nồng độ, hàm lượng prolin tích lũy tăng theo nồng độ đạt giá tri cao xử lí 1,2% NaCl, nồng độ muối cao (Ml,5 Ml,8) hàm lượng prolin tích lũy giảm sút. Theo thời gian, ngày hàm lượng prolin tích lũy thay đổi nhiều, ngày sau biến động rõ. Khi thời gian xử lí mặn dài tích lũy hàm lượng prolin tăng lên. 2. Muối NaCl gây ảnh hưởng rõ rệt tới tích lũy glyxin betain mầm đậu tượng. Theo nồng độ, nồng độ muối cao hàm lượng glyxin betain tích lũy mầm lớn đạt giá trị cao Ml,2, nồng độ trình tích lũy giảm. Theo thời gian, ngày đầu ảnh hưởng muối NaCl, hàm lượng glyxin betain tích lũy chưa có thay đổi rõ rệt tới ngày sau hàm lượng glyxin betain tích lũy mầm tăng thể rõ ngày nhiên từ ngày tích lũy lại bắt đầu giảm. 3. Muối NaCl gây ảnh hưởng rõ rệt tới tích lũy axit ascobic mầm đậu tương. Theo nồng độ, từ nồng độ M0,3 đến Ml,2 hàm lượng axit ascobic tích lũy tăng tăng cao MO ,6 MO,9. Ở nồng độ Ml,5 Ml,8 hàm lượng axit ascobic tích lũy giảm. Theo thời gian, hàm lượng axit ascobic tích lũy cao ĐC tất ngày. Từ nồng độ M0,3 đến Ml,2 bắt đàu tăng từ ngày 2, rõ vào ngày đến ngày hàm lượng bắt đầu giảm rõ rệt. 4 4. Muối NaCl gây ảnh hưởng rõ đến khả nảy mầm đậu tương. Theo chiều tăng nồng độ khả nảy mầm hạt giảm, cụ thể tới Ml,8 hạt nảy mầm không nảy mầm. Đen ngày 6, khả nảy mầm giống đậu tương ĐT22 đạt 100% M0,3 MO,6. Với khối lượng khô tươi, theo tăng dàn nồng độ , khối lượng tươi giảm dần, khối lượng khô lại tăng dần. Theo thời gian, sau ngày sinh trưởng khối lượng tươi khối lượng khô tăng so với ngày 653. TÀI 654. LIỆU THAM KHẢO ■ 655. Tài liệu tiếng việt 1. Ngô Thị Anh (2014), tương quan hàm lượng prolin glycin betain đậu tương vào giai đoạn hoa điều kiện nhiệt độ thấp, mặn hạn, khóa luận tốt nghiệp đại học. 2. Kim Thị Duyên (2011), Phản ứng đậu tương DT2008 điều kiện áp suất thẩm thấu khác nhau, luận văn thạc sĩ sinh học. 3. Bùi Bá Đạt (2009), Sự biến động huỳnh quang diệp lục hàm lượng prolin đậu tương trình gây hạn, luận văn thạc sĩ sinh học. 4. Tràn Văn Điền (2007), G i o t r ì n h c â y đ ậ u t n g , Nxb Nông Nghiệp Hà Nội 5. Nguyễn Văn Mã, Phan Hồng Quân, (2000), “Nghiên cứu số tiêu sinh lí, sinh hóa đậu tương điều kiện gây hạn”, T p c h ỉ s i n h h ọ c , số 4, tr 47 - 52. 6. Nguyễn Văn Mã (2002), Nghiên cứu phản ứng đậu xanh thiếu nước giai đoạn hoa,Tạp chí sinh học. 7. Nguyễn Văn Mã, Nguyễn Thị Minh Ngọc (2007), “Hàm lượng prolin trình sinh trưởng đậu tương”, N h ữ n g nghiên cứu khoa học vẩn đề sổng. Tuyển tập báo cáo Hội nghị khoa học toàn quốc, Quy Nhơn- 2007, Nxb. Khoa học Kỹ thuật, 342. 8. Nguyễn Minh Hồng (2008), Nghiên cứu hàm lượng diệp lục tổng số hàm lượng prolin đậu tương điều kiện gây hạn, khóa luận tốt nghiệp đại học. 9. Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), p h n g pháp nghiên cửu sinh ỉỷ học thực vật Method ỉ n p l a n t p h y s ỉ o l o g y , Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội. 10. Nguyễn Văn Mùi ( 0 ) , T h ự c h n h H o s i n h h ọ c , Nxb KH & KT, Hà Nội 11. Điêu Thị Mai Hoa, Tràn Thị Thanh Huyền,Trường ĐHSP Hà Nội 1, “ Sự biến đổi hàm lượng amino axit prolin rễ đậu xanh tác động [...]... triển của mầm đậu tương, cụ thể là ảnh hưởng trực tiếp tới áp suất thẩm thấu của tế bào, ở các nồng độ muối còn thấp thì sự ảnh hưởng của muối NaCl đến đậu tương còn chưa đáng kể vì vậy hạt vẫn có khả năng lấy đủ nước và giảm dần sự tích lũy hàm lượng glyxin betain khi hạt bắt đầu vào các quá trình sinh trưởng và phát triển sau nảy mầm Ở các lô thí nghiệm có nồng độ muối cao do áp lực stress muối tác động... lượng axit ascobic trong các ngày thí nghiệm tăng từ ngày 2 và rõ nhất vào ngày 3, sự biến động từ 0,064% đến 1, 173% Ngày thứ 5, sự tích lũy hàm lượng axit ascobic giảm rõ rệt Ngày 3 và ngày 4 tiến hành thì nghiệm sự tích lũy hàm lượng axit ascobic tăng mạnh và tăng lên tới 0,173% ( ở Ml,2 của ngày 4), ở các nồng độ MO,9 và Ml,2 hàm lượng axit ascobic được tích lũy ở mức cao hơn cả so với ở các nồng độ. .. chống oxi hóa của hạt được đảm bảo giúp hạt chống lại các tác hại của stress mặn Bước sang ngày 5 và ngày 6, sự tích lũy axit ascobic bắt đàu giảm dần và sau 6 ngày thí ngiệm hàm lượng axit ascobic được tích lũy giảm còn 0,064% (ở ĐC), 0,075% ( ở Ml,8) và 0,089% (ở M0,3), ta thấy sự ảnh hưởng của muối NaCl đến sự tích lũy axit ascobic khá rõ ràng 528 Xét theo chiều tăng của nồng độ muối NaCl ừong môi... rõ rệt, Ml,5 và Ml ,8 không rõ ràng Ở các lô thí nghiệm có nồng độ thấp tác động của muối NaCl đến mầm đậu tương làm tăng sự tích lũy glyxin betain trong mầm giúp mầm đảm bảo các cơ chế bảo vệ tế bào, tăng áp suất thẩm thấu giữa chất nguyên sinh và dịch bào đảm bảo sự sinh trưởng và phát triển bình thường của mầm Ở các nồng độ cao (Ml,5 và Ml,8) thì áp lực muối tác động lên mầm làm cho mầm có các phản... muối tác động lên mạnh nên ở đậu tương cũng có các phản ứng tương thích để đảm bảo sự phát triển của tế bào tuy nhiên áp lực muối NaCl cao và trong thời gian dài làm hạn bị tổn thương vì vậy quá trình tích lũy glyxin betain bảo vệ tế bào cũng giảm 3.3 Ảnh hưởng của muối NaCỈ đến sự biến đổi hàm lượng axit ascobic ở mầm đậu tương 446 Bảng 8 Ảnh hưởng của muối NaCl đến hàm lượng axit ascobỉc trong 447 6... lên tới các nồng độ cao hơn (Ml,5 và Ml,8) thì sự tích lũy này lại giảm ■ ■ ngày 1 ■ ngày2 ■ ngày3 ■ ngày4 ■ ngày5 ■ ngàyỏ 439 440 ĐC ■ M0,3MO,6 MO,9 Ml,5 MI,8 Hình 4 Sự biến đổi hàm lượng glyxin betaỉn của mầm đậu tương trong 441 442 MI,2 6 ngày sinh trưởng Các ngày tiếp theo, sự tích lũy hàm lượng glyxin betain lúc này lại có nhiều biến động Ở lô ĐC hàm lượng glyxin betain tích lũy ừong mầm đậu tương. .. MI,2 Ml,5 MI,8 ĐC 521 522 523 524 Hình 6 Sự ảnh hưởng của muối NaCl tói hàm lượng axit ascobỉc ở mầm đậu tương J WT 1 1 1 1 525 1 r I r r 11 1 1 r 1 1 1 1 1 1 1 1 1 i trong 6 ngày sinh trưởng 526 Kết quả bảng 9 và hình 6 cho thấy ảnh hưởng rõ rệt của muối NaCl đến hàm lượng axit ascobic Có biến động hàm lượng axit ascobic ở các nồng độ muối NaCl khác nhau và qua các ngày tiến hành thí nghiệm, cụ thể... chịu của thực vật như các nghiên cứu của các tác giả: Barnet N.M, Naylor A.W (1996) [19], Zhao và cộng sự 112 (2000), nghiên cứu về tính chịu hạn, chịu mặn và chịu lạnh ở lúa, lúa mì 113 và thực vật nói chung 1 4 114 Ảnh hưởng của mặn liên quan đến các giai đoạn của cây chịu ảnh hưởng của mặn như: độ mặn của muối, tính chất của muối và thời gian chịu mặn Vì vậy để biết được sự ảnh hưởng của nồng độ. .. động rõ rệt Từ ngày 2 trở đi, nồng độ càng cao ảnh hưởng càng lớn, sự tích lũy prolin đạt giá ừị cao nhất ở Ml,2 sau đó giảm dàn Với thời gian xử lí mặn càng dài, hàm lượng prolin càng tăng, riêng ở các nồng độ cao ( Ml,5 và M 1,8) đến ngày thứ 6 lại giảm sút 3.2 Ảnh hưởng của muối NaCỈ tói sự biến đổi hàm lượng glyxin betaỉn của mầm đậu tương 328 Glyxin betain là một chất tương thích giúp cây thích... Ml,8 Hình 5 Ảnh hưởng của muối NaCỈ tói hàm lượng axit ascobic trong 492 6 giờ gieo hạt Ngày đầu tiên, sự tích lũy hàm lượng axit ascobic ở mầm đậu tương rất ít, hàm lượng cao nhất đạt 0.106% sau 6 giờ ở M 1,2 và thấp nhất đạt 0,072% (ở ĐC) và 0,073% (ở Ml,8) Sự biến động hàm lượng axit ascobic ở ngày đầu tiên khá nhỏ sự chênh lệch hàm lượng trong ngày khá nhỏ thấp nhất đạt mức 1, 001fig/g và cao nhất . " ảnh hưởng của nồng độ NaCl tới sự tích lũy prolin, glyxỉn betaỉn và axỉt ascobic ở mầm đậu tương , để làm cơ sở cho các nghiên cứu tiếp theo về vai trò của chúng trong việc bảo vệ cây đậu tương ở. chung. 1 4 114. Ảnh hưởng của mặn liên quan đến các giai đoạn của cây chịu ảnh hưởng của mặn như: độ mặn của muối, tính chất của muối và thời gian chịu mặn. Vì vậy để biết được sự ảnh hưởng của nồng độ muối. NỘI 2 KHOA SINH - KTNN ===8dBŨIcs=== HÀ THỊ KHUYÊN ẢNH HƯỞNG CỦA NỒNG Độ NaCl TỚI Sự TÍCH LŨY PROLIN, GLYXIN BETAIN YÀ AXIT ASCOBIC Ở MẦM ĐẬU TƯƠNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC • • • • Chuyên