TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG -oOo- NGÔ KIM PHƯỢNG PHÂN LẬP, ĐỊNH DANH VÀ KIỂM TRA TÍNH NHẠY CẢM VỚI KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN ENTEROTOXIGENIC ESCHERICHIA COLI GÂY BỆNH TIÊU CHẢY Ở HEO CON TẠI HUYỆN CỜ ĐỎ VÀ THỚI LAI, THÀNH PHỐ CẦN THƠ Luận văn tốt nghiệp Ngành: THÚ Y Cần Thơ, 2013 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG -oOo- Luận văn tốt nghiệp Ngành: THÚ Y PHÂN LẬP, ĐỊNH DANH VÀ KIỂM TRA TÍNH NHẠY CẢM VỚI KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN ENTEROTOXIGENIC ESCHERICHIA COLI GÂY BỆNH TIÊU CHẢY Ở HEO CON TẠI HUYỆN CỜ ĐỎ VÀ THỚI LAI, THÀNH PHỐ CẦN THƠ Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS. LÝ THỊ LIÊN KHAI NGÔ KIM PHƯỢNG MSSV: 3092632 LỚP: THÚ Y K35 Cần Thơ, 2013 TR NG I H C C N TH KHOA NÔNG NGHI P VÀ SINH H C NG D NG MÔN THÚ Y tài: “Phân l p, nh danh ki m tra tính nh y c m v i kháng sinh a vi khu n Enterotoxigenic Escherichia coli gây b nh tiêu ch y heo t i huy n C Th i Lai, thành ph C n Th ” sinh viên Ngô Kim Ph ng, th c hi n t i phòng thí nghi m V sinh th c ph m, B môn Thú Y, Khoa Nông nghi p Sinh h c ng d ng, Tr ng i h c C n Th , t tháng 08/2013 n tháng 11/2013. n Th , ngày tháng n m 20… Duy t B môn C n Th , ngày ….tháng n m 20… Cán b h ng d n TS. LÝ TH LIÊN KHAI n Th , ngày .tháng .n m 20… Duy t Khoa Nông Nghi p & SH D I CAM OAN Tôi xin cam oan ây công trình nghiên c u c a b n thân. Các s li u, k t qu trình bày lu n v n trung th c ch a t ng c công b t k công trình lu n v n tr c ây. Sinh viên th c hi n Ngô Kim Ph ii ng IC MT Qua n m tháng khó nh c, cha m ã sinh nuôi khôn n nên ng i. Trong trái tim v n c m th y may m n t hào c sinh c a cha m . Cùng v i lòng yêu th ng bao la, ch che vun p cho t t c nh ng u t t p nh t, cha m ã cho ngu n ng l c th c hi n nh ng khát v ng cu c s ng h c t p t t. Xin kính dâng n cha m , t m lòng bi t n sâu s c t trái tim con. Chân thành bày t lòng bi t n Cô Lý Th Liên Khai – ng i ã h ng d n t n y, t o u ki n thu n l i hoàn thành lu n v n t t nghi p ch d y cho nh ng u b ích làm hành trang cho cu c s ng sau này. m n Cô Nguy n Th Thu Tâm ã giúp kho ng th i gian b ng v i vi c h c t p c a tân sinh viên. u Tôi xin g i l i tri ân n quý Th y Cô thu c B môn Thú Y Ch n Nuôi, Khoa Nông Nghi p Sinh h c ng d ng, Tr ng i h c C n Th ã truy n th ki n th c sâu r ng su t th i gian qua. Trân tr ng c m n Ban lãnh o, cán b Thú Y Tr m Thú Y huy n C Tr m Thú Y huy n Th i Lai cô t i tr i ch n nuôi ã t o ki n t t giúp r t nhi u vi c l y m u. , u Xin c m n ch Nguy n Th H nh Chi, anh ch Cao h c Thú Y K18, K19; anh ch Thú Y K32, K33, K34 em sinh viên h c vi c t i phòng thí nghi m t t c b n bè l p Thú Y K35 ã truy n t nh ng kinh nghi m quý báu giúp trình th c hi n tài. Tôi s ghi nh nh ng k ni m t i p bên m i ng i su t th i gian h c i h c th c hi n tài v a qua. Ngô Kim Ph iii ng DANH M C CH VI T T T Ch vi t t t Di n gi i E. coli Escherichia coli ETEC Enterotoxigenic Escherichia coli EPEC Enteropathogenic Escherichia coli EIEC Enteroinvasive Escherichia coli EHEC Enterohaemorrhagic Escherichia coli EAEC Enteroaggregative Escherichia coli DAEC Diffusely adhering Escherichia coli ST Heat stable toxin LT Heat labile toxin TGE Transmissible gastroenteritis PRRS Porcine reproductive and respiratory syndrome PED Porcine epidemic diarrhea PPV Porcine parvovirus PCV Porcine circovirus FMD Foot and mouth disease TP. Thành ph ctv ng tác viên iv CL C Trang bìa Trang t i i cam oan ii i c m t iii Danh m c ch vi t t t iv c l c v Danh sách hình . viii Danh sách b ng ix Tóm l c . x CH NG 1: CH NG 2: C TV N S . LÝ LU N . 2.1 Tình hình nghiên c u n c v vi khu n E. coli gây nh tiêu ch y heo . 2.1.1 Tình hình nghiên c u n c 2.1.2 Tình hình nghiên c u n c . 2.2 M t s nguyên nhân gây tiêu ch y heo . 2.2.1 Nguyên nhân truy n nhi m 2.2.2 Nguyên nhân không truy n nhi m . 2.3 Vi khu n Escherichia coli 2.3.1 Vi khu n Enterotoxigenic E. coli (ETEC) gây tiêu ch y heo .10 2.3.2 c m hình thái .11 2.3.3 c tính nuôi c y c tính sinh hóa c a E. coli .12 2.3.4 C u trúc kháng nguyên c a vi khu n E. coli 13 2.3.5 c t gây b nh c a vi khu n E. coli .16 2.3.6 S c kháng c a vi khu n E. coli .16 2.3.7 Kh n ng gây b nh c a vi khu n E. coli 17 2.4 B nh tiêu ch y heo E. coli 17 v 2.4.1 C ch gây b nh tiêu ch y .18 2.4.2 Tri u ch ng b nh tích .18 2.4.3 Ch n oán ch n oán phân bi t .19 2.4.4 Phòng u tr b nh .21 2.4.5 S d ng kháng sinh u tr b nh tiêu ch y E. coli gây heo 22 CH NG 3: PH 3.1 Th i gian, a 3.1.1 Th i gian NG TI N VÀ PH m a it NG PHÁP THÍ NGHI M 23 ng nghiên c u 23 m th c hi n .23 3.1.2 it ng nghiên c u 23 3.2 Ph ng ti n nghiên c u 23 3.2.1 D ng c trang thi t b thí nghi m 23 3.2.2 Hóa ch t, môi tr 3.2.3 Thu c 3.3 Ph ng .23 u tr b nh tiêu ch y cho heo .24 ng pháp ti n hành thí nghi m 25 3.3.1 Ph ng pháp l y m u 25 3.3.2 Ph ng pháp nuôi c y phân l p vi khu n E. coli 26 3.3.3 Ph ng pháp nh danh ch ng vi khu n E. coli b ng ph n ng huy t h c .28 3.3.4 Ph ng pháp ki m tra tính nh y c m i v i kháng sinh c a vi khu n E. coli phân l p c .29 3.3.5 Ph ng pháp b trí phác u tr b nh tiêu ch y cho heo 31 3.3.6 Ch tiêu theo dõi 32 3.3.7 Ph CH ng pháp x lý s li u .32 NG 4: K T QU VÀ TH O LU N .33 4.1 K t qu kh o sát t l heo tiêu ch y m t s tr i ch n nuôi heo i thành ph C n Th 33 4.2 K t qu phân l p vi khu n E. coli phân heo tiêu ch y t i huy n C Th i Lai, thành ph C n Th .36 vi 4.3 t qu xác nh t l nhi m vi khu n E. coli heo theo m heo cai s a t i TP. C n Th .37 4.4 l d ng tính vi khu n E. coli môi tr ng chu ng tr i t i t s tr i ch n nuôi heo thành ph C n Th 39 4.5 K t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88, K99, 987P phân heo tiêu ch y theo a m .41 4.6 t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88, K99, 987P phân heo tiêu ch y theo lo i heo 42 4.7 K t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88, K99, 98P môi tr ng chu ng tr i t i m t s tr i ch n nuôi heo thành ph C n Th 44 4.8 K t qu kh o sát tính nh y c m c a ch ng E. coli phân l p c i m t s lo i kháng sinh 46 4.9 K t qu u tr b nh tiêu ch y heo nghi vi khu n E. coli gây t i thành ph C n Th 48 CH NG 5: K T LU N VÀ NGH 50 5.1 K t lu n 50 5.2 ngh .50 TÀI LI U THAM KH O 51 PH CH NG 55 vii DANH SÁCH HÌNH Hình Tên hình 2.1 Vi khu n E. coli d 2.2 Khu n l c vi khu n E. coli môi tr Trang i kính hi n vi 12 ng MC 13 3.1 o pH phân heo tiêu ch y 25 3.2 L y m u phân heo tiêu ch y 25 3.3 Quy trình phân l p vi khu n E. coli 26 3.4 Ph ng pháp nh danh ch ng vi khu n E. coli b ng ph n ng ng ng k t nhanh phi n kính 28 3.5 a kháng sinh môi tr 4.1 Chu ng tr i c , xu ng c p 34 4.2 Chu ng tr i m i, thoáng mát 34 4.3 ng th ch MHA pH phân heo tiêu ch y nghi E. coli gây 30 36 4.4 Heo b nh tiêu ch y 38 4.5 Heo b phân tiêu ch y b t 38 4.6 Heo úm lót r m r 40 4.7 Heo úm che ch n s sài 40 4.8 Heo ki u chu ng sàn 45 4.9 Heo ki u chu ng xi m ng 45 4.10 N n chu ng sàn không 45 4.11 N n chu ng xi m ng s d ng lâu n m b xu ng c p c v sinh viii 45 4.8 K t qu kh o sát tính nh y c m c a ch ng E. coli phân l p i m t s lo i kháng sinh c Hi n t ng kháng v i kháng sinh c a vi khu n ngày t ng, c bi t vi khu n ng ru t Escherichia coli. ây c ng lý gi i thích cho vi c t i k t qu u tr b ng kháng sinh i v i b nh tiêu ch y th i gian g n ây mang l i hi u qu không cao. Vì v y, l a ch n lo i kháng sinh phù h p giúp cho vi c u tr b nh tiêu ch y E. coli gây heo thành ph C n Th có k t qu t t, ti n hành ki m tra tính nh y c m v i kháng sinh c a 35 ch ng E. coli phân l p phân heo b nh tiêu ch y tr i ch n nuôi heo thu c thành ph C n Th v i lo i kháng sinh. K t qu c trình bày B ng 4.8. ng 4.8: K t qu kh o sát tính nh y c m c a ch ng E. coli phân l p v i t s lo i kháng sinh Nh y Lo i kháng sinh Kháng Kí hi u SL TL (%) SL TL (%) Ceftazidime Cz 32 91,42 5,71 Norfloxacin Nr 27 77,14 14,28 Amoxicillin/clavulanic acid Ac 25 71,42 11,42 Gentamicin Ge 20 57,14 15 42,85 Colistin Co 12 34,28 13 37,14 Bactrim Bt 11 31,42 22 62,85 Ampicillin Am 5,71 31 88,57 t qu B ng 4.8 cho th y m c nh y c m c a vi khu n E. coli v i ceftazidime cao nh t, v i 32/35 ch ng E. coli c ki m tra, chi m t l 91,42%. K n norfloxacin 77,14%, amoxicillin/clavulanic acid 71,42%, gentamicin 57,14% v i m c nh y c m trung bình. Trong kháng sinh ó ceftazidime lo i kháng sinh m i i v i tr i mà kh o sát, norfloxacin, amoxicillin/clavulanic acid gentamicin c ng không c d ng ph bi n u tr heo tiêu ch y nghi E. coli. Do ó m c nh y c m c a vi khu n E. coli i v i kháng sinh cao, có 46 th s d ng lo i kháng sinh coli gây t hi u qu cao. u tr b nh tiêu ch y heo E. kháng v i ampicillin bactrim c a 35 ch ng E. coli qua ki m tra chi m t l l n l t 88,57% 62,85%. u có th vi khu n E. coli ang d n bi n i tr nên kháng m nh h n v i kháng sinh. M t nh ng nguyên nhân c a s kháng ó vi c s d ng kháng sinh u tr phòng b nh tr i ch n nuôi hi n ch y u d a vào kinh nghi m c a ng i ch n nuôi, c bi t h gia ình vi c l a ch n kháng sinh phù h p, li u l ng s d ng, li u trình u tr tuân theo nguyên t c phác c th . H n n a, vi c s d ng kháng sinh tr n vào th c n, n c u ng hàng ngày phòng b nh cho heo ngày ph bi n, ng th i s d ng lo i kháng sinh ph r ng ph i h p th tr ng u tr làm cho vi khu n E. coli ngày tr nên kháng m nh h n i v i kháng sinh, công tác u tr b nh tiêu ch y vi khu n gây khó kh n h n. K t qu phù h p v i Nguy n V n Ngh a (2011), t l kháng a E. coli v i ampicillin 87,18% bactrim 66,67%. Khi ki m tra tính nh y c m c a 41 ch ng E. coli phân heo tiêu ch y t i Sóc Tr ng, tác gi Lê Hoài Linh (2011) c ng cho th y t l kháng v i ampicillin bactrim 87,8% 75.61%. i v i colistin, k t qu ki m tra có 12/35 ch ng E. coli nh y c m chi m t l 34,28%, th p h n so v i nghiên c u c a Tr n Th M Nhân (2012), kh o sát tính nh y c m v i kháng sinh c a 61 ch ng E. coli C n Th colistin có nh y c m cao (62,30%), t l nh y c m n 100% theo nh nghiên c u c a Lê Th Bích H nh (2013), a bàn t nh nh Long. Nh ng c ng có nhi u tác gi khác ghi nh n r ng m c kháng a vi khu n E. coli v i colistin cao, theo Lâm Th Thu H ng ng Chi Mai (2011), có t i 16/20 ch ng E. coli t i m t s tr i ch n nuôi thành ph H Chí Minh kháng v i colistin chi m t l 80%. Nghiên c u a Nguy n Th Minh Trang ctv. (2011), c ng xác nh t l kháng c a E. coli v i colistin 86,51%. Nh v y có th k t lu n r ng tùy vào th i gian, a m l y m u khác n n kh n ng nh y c m i v i kháng sinh c a vi khu n E. coli c ng khác nhau. H n n a, s khác bi t có th ch s d ng kháng sinh phòng tr b nh khác gi a h ch n nuôi. 47 4.9 K t qu u tr b nh tiêu ch y heo nghi vi khu n E. coli gây t i thành ph C n Th Trên c s nghiên c u, xác nh vai trò gây b nh c a vi khu n E. coli heo con, thu th p m u ki m tra tính nh y c m v i kháng sinh c a ch ng E. coli phân l p c, k t h p v i s d ng kháng sinh heo con. K t qu ng 4.9: K t qu u tr b nh tiêu ch y c ghi nh n qua B ng 4.9. u tr b nh tiêu ch y heo nghi vi khu n E. coli gây t i thành ph C n Th Phác heo u tr (con) Heo kh i (1 – ngày) Heo kh i (4 – ngày) ng s heo kh i SL (con) TL (%) SL (con) TL (%) SL (con) TL (%) I 75,00 25,00 100,00 II 62,50 37,50 100,00 P = 0,751 Ghi chú: SL: s l ng, TL: t l Qua B ng 4.9 cho th y t t c heo c u tr v i phác I phác II u kh i b nh 100%. Tuy nhiên hi u qu u tr ngày c a phác I 75%, cao h n hi u qu u tr c a phác II có t l 62,5%, s khác bi t ý ngh a th ng kê v i P > 0,05. K t qu có ph n khác bi t so v i k t qu kháng sinh B ng 4.8. S k t h p c a kháng sinh colistin v i ampicillin (phác I) colistin v i gentamicin (phác II) cho hi u qu khác bi t so v i m c nh y c m c a vi khu n E. coli i v i t ng lo i kháng sinh phác . C th nh sau: ch ng vi khu n E. coli ki m tra có t nh y c m v i kháng sinh gentamicin, colistin, ampicillin l n l t 57,14%, 34,28% 5,71%. T l kháng c ng cao, c bi t ampicillin (88,57%), cao h n s kháng v i gentamicin (42,85%). Phác II có hi u qu u tr 62,5%, th p h n so v i k t qu c a Lý Th Liên Khai ctv. (2003), s d ng Coli - Norgent u tr cho 73 heo tiêu ch y t l kh i b nh 83,56%. S khác bi t có th khác th i gian, tính ch t d ch t , t p quán ph ng th c ch n nuôi. M t khác, colistin lo i kháng sinh c ng i ch n nuôi s d ng th ng xuyên u tr b nh tiêu ch y cho heo nên u tr hi u qu . 48 Phác I có hi u qu u tr ngày 75%, cao h n phác II. u có th tâm lý c a ng i ch n nuôi ch y u mu n s d ng kháng sinh có ph r ng, d a vào kinh nghi m mà không tr ng n vi c tìm lo i kháng sinh phù h p hi u qu . Kháng sinh ampicillin ã c s d ng ph bi n t lâu, có nhi u nghiên c u, kh o sát c ng cho r ng t l khu n v i kháng sinh r t cao nh kháng c a vi ã nêu M c 4.8. Nh ng theo Hu nh Kim Di u (2010), có s tái nh y c m kháng sinh c a vi khu n, tác gi cho r ng vi khu n kháng thu c n u tái s n th i gian dài môi tr ng kháng sinh s t bi n ng thu c, tái l p l i quân bình qu n th nh tr cl i t o dòng vi khu n nh y c s d ng kháng sinh. H n a, vi c k t h p gi a kháng sinh di t khu n c ng có th có tác d ng hi p ng s áp ng c a t ng c th v i kháng sinh s d ng c ng khác (Bùi Th Tho, 2003). Th i gian u tr c a phác kéo dài, nh ng hi u qu 100%. Có th trình u tr k t h p s d ng kháng sinh v i lo i thu c nh men tiêu hóa b t n gi i h tr cho trình tiêu hóa c a heo n nh h n, bù p l ng n c ion m t i tiêu ch y. Do ó có th d ng phác u tr b nh tiêu ch y E. coli gây heo con, ng th i c ng nên gi m cho heo n n chu ng khô thoáng trình u tr . 49 CH NG T LU N VÀ NGH 5.1 K t lu n Qua th i gian th c hi n tài “Phân l p, nh danh ki m tra tính nh y m v i kháng sinh c a vi khu n Enterotoxigenic Escherichia coli gây tiêu ch y heo t i huy n C Th i Lai, thành ph C n Th ”. Chúng rút c m t s k t lu n nh sau: Tình hình heo m c b nh tiêu ch y t i m t s tr i ch n nuôi heo thu c TP. n Th chi m t l cao 33,11%. l nhi m vi khu n E. coli heo tiêu ch y Th i Lai 100%. c hai huy n C Các ch ng E. coli K88, K99, 987P nguyên nhân gây tiêu ch y cho heo theo m heo cai s a. Ch ng K88 ph bi n nh t, chi m t l 36,06%, k n K99 chi m 26,22% th p nh t 987P chi m 13,11%. Vi khu n E. coli phân l p c nh y c m t t v i kháng sinh ceftazidim, norfloxacin amoxicilin/clavulanic acid, kháng m nh v i ampicillin bactrim. Heo h t tiêu ch y ngày u tr v i phác s d ng Multibio (phác I) Coli - Norgent (phác II). Khi so sánh hi u qu u tr ngày phác I (75%), cao h n phác II (62,5%). 5.2 ngh Nên ti p t c nghiên c u v tình hình tiêu ch y heo E. coli vào mùa khác n m có th so sánh xác nh cm c nhi m theo mùa. Th ng xuyên ki m tra s nh y c m c a vi khu n E. coli v i kháng sinh ng a bàn, nghiên c u thêm tính kháng thu c c a E. coli l a ch n kháng sinh u tr phù h p hi u qu h n. Có th d a vào ch ng vi khu n E. coli phân l p n xu t vaccine phòng b nh tiêu ch y E. coli. ct i a ph ng Th nghi m thêm kháng sinh khác u tr b nh tiêu ch y cho heo t i thành ph C n Th , c bi t vi c ph i h p kháng sinh v i u tr . 50 TÀI LI U THAM KH O 1. Blood, D. C. et al. (2000), Veterinary medicine, a text book of the diseases of cattle, sheep, pigs,goats and horse, 9th Edition. Bailliere Tindal, London, England. 2. Bùi Th Tho (2003), Thu c kháng sinh nguyên t c s d ng ch n nuôi, NXB Hà N i. 3. Tr ng t, Phan Thanh Ph ng, Lê Ng c M Hu nh V n Kháng (1999), nh l n nái l n con, NXB Nông Nghi p, trang – 57 - 71. 4. Fairbrother J.M., and Gyles C.L. (2006), Escherichia coli infection, In: Disease of swine (9th edition). Editor: Straw, B.E., Jimmerman, J.J., D’Allaire, S., Taylor, D.T., Blackwell publishing, pp 639 – 662. 5. Fairbrother, J.M. 1992. Enteric colibacillosis. Chapter 39: Escherichia coli infections Disease of swine, edition, pp 487 - 497. 6. Guerrant R. L. (1985), Microbial toxins and diarrhoeal disease: introduction and overview, Ciba found symp, (112), pp 1- 13. 7. Gyles C. L. and J. M. Fairbrother (2010), Pathogenesis of Bacterial infection in animals, Blackwell publishing, pp 267 – 299. 8. Gyles C.L. (1994), Escherichia coli enterotoxin. In: E. coli in domestic animals and human, Editor: Gyles, C.L. CBA international, Wallingford, Oxon, UK, pp 337 - 364. 9. Th Vi t Thu, Nguy n nhi m gia súc gia c m, NXB c Hi n (2012), Giáo trình b nh truy n i h c C n Th , trang 187 – 190. 10. Hu nh Kim Di u (2010), Thú y c s d nghi p, trang 212 – 237. c lý u tr , NXB Nông 11. Lâm Th Thu H ng, ng Chi Mai (2011), l nhi m Rotavirus Escherichia coli K88 heo tiêu ch y, t p chí Khoa h c k thu t thú y, t p 13, s 6, trang 31 – 35. 12. Lê Th Bích H nh (2013), Xác nh t l b nh tiêu ch y vi khu n Escherichia coli K88, K99, 987P gây heo theo m t i huy n Long H t nh V nh Long, lu n v n t t nghi p Khoa Nông Nghi p & SH D, i h c C n Th . 51 13. Lê Th Hoài (2008), Xác nh vai trò gây b nh c a vi khu n E. coli, C. perfringens h i ch ng tiêu ch y heo t s sinh n 60 ngày tu i i t nh H ng Yên th nghi m phác u tr , lu n v n th c s khoa c nông nghi p Thái Nguyên. 14. Lý Th Liên Khai (2001), Phân l p, xác nh c t ru t c a ch ng E. coli gây b nh tiêu ch y cho heo , T p chí Khoa h c k thu t thú y, 8, trang 13-18. 15. Lý Th Liên Khai, Ph m Qu c V ng, Hideki Kobayashi, Tr n Th Ph n, Châu Bá L c, Seishi Yamasaki, Toshiaki Taniguchi (2003), Phân p, nh danh u tr b nh tiêu ch y cho heo gây enterotoxigenic Escherichia coli K88, K99, 897P chí khoa h c i h c C n Th , tr ng t nh C n Th , p i h c C n Th , trang 212-214. 16. Moon, H.W., B. Nagy, R.E. Isaacson and I. Orskov (1977), Occurrence of K99 antigen on E. coli isolated from pigs and colonization of pig ileum by K99+ Enterotoxigenic E. coli from calves and pigs, Infection and Immunity, 15, pp 614 – 620. 17. Nagy A. (1986), Vaccine againstoxigens Escherichia coli disease in animals. Development of Drugs and Vaccine againts diarrhea, 11th Nobel Conf Stockhlm 1985. Stdentlitteratur, Lund, pp 53. 18. Nataro J.P., and Kaper J.B. (1998), Diarrheagenic Escherichia coli, Clin. Microbiol, Rev, 11(1), pp 142 - 201. 19. Nguy n C nh D ng, Cù H u Phú (2011), Xác nh vai trò gây b nh c a vi khu n E. coli, Salmonella h i ch ng tiêu ch y l n sau cai at im ts a ph ng t nh Lâm ng, T p chí Khoa h c k thu t thú y, t p 18 s 01, trang 47 – 53. 20. Nguy n Nh Pho, Võ Th Trà An (2003), Bài gi ng d c Nông Lâm, Thành Ph H Chí Minh. 21. Nguy n Nh Thanh, Nguy n Bá Hiên, Tr n Th Lan H sinh v t thú y, NXB Nông nghi p. c lý thú y, i ng (1997), Vi 22. Nguy n Th Kim B y (2012), Kh o sát s l u hành c a Enterotoxigenic Escherichia coli gây tiêu ch y heo t nh B n Tre Sóc Tr ng, lu n v n th c s khoa h c, Khoa Nông Nghi p & SH D, ih cC n Th . 52 23. Nguy n Th Minh Trang, Nguy n Hu nh Nga, Nguy n Th Kim Quyên (2011), Tình hình nhi m s nh y c m kháng sinh c a vi khu n E. coli gây b nh tiêu ch y heo t 60 ngày tu i t i t nh Trà Vinh, t p chí Khoa h c công ngh , s 01, trang 46 – 49. 24. Nguy n V n Ngh a (2011), Xác nh t l b nh tiêu ch y heo vi khu n Escherichia coli Coccidia t i thành ph C n Th , lu n v n t nghi p, Khoa Nông Nghi p & SH D, i h c C n Th . 25. Nguy n V nh Ph c (1970), Vi sinh v t h c thú y, t p II, NXB trung h c chuyên nghi p, Hà N i. 26. Ph m S L ng (2006), Các b nh truy n nhi m th pháp phòng tr , NXB Nông Nghi p. ng g p ih c l n bi n 27. Sarmiento J. L. (1983), Enviromental temperatre: Am predispoising factor in the Enterotogenic Escherichia coli - induced diarrhea of the newborn pigs M. S. Thsis, Univ of Guelph, Otario. 28. Tr n C (1972), s sinh lý c a nuôi d Khoa h c k thu t Hà N i. ng l n con, Nhà xu t b n 29. Tr n Th Dân (2003), Sinh s n heo nái sinh lý heo con, NXB Nông nghi p TP. H Chí Minh. 30. Tr n Th Di m Châu (2010), Phân l p vi khu n Escherichia coli K88, K99, 987P th nh y c a vi khu n v i kháng sinh t phân heo theo m b tiêu ch y t i m t s huy n thu c t nh Trà Vinh, lu n v n t t nghi p Khoa Nông Nghi p & SH D, i h c C n Th . 31. Tr n Th M Nhân (2012), Kh o sát s l u hành c a Enterotoxigenic Escherichia coli gây b nh tiêu ch y heo t i thành ph C n Th t nh V nh Long, lu n v n th c s khoa h c, Khoa Nông Nghi p & SH D, i h c C n Th . 32. Vidotto M.C., de Lima N.C.S., Fritzen J.T.T., de Freitas J.C., Venancio M.J., 2009. “Frequency of virulence genes in Escherichia coli strains isolated from piglets diarrhea in the North Parana State, Brasil”, Brazilian Journal of Microbiolgy, 40, pp 199 - 204. 33. Võ V n Ninh (2007), – 98. Thu t Ch n Nuôi Heo, NXB N ng, trang 92 53 34. 35. ình Tôn, Tr n Th Thu n (2005), Giáo trình ch n nuôi l n, NXB Hà N i, trang 130 – 147. Kh c Hùng Pilipcinec (2003), Nghiên c u so sánh y u t c l c c a nh ng ch ng E. coli phân l p t l n b b nh tiêu ch y ng hòa Slovakia, báo cáo khoa h c ch n nuôi thú y, 2004, Ph n thú y, NXB Nông Nghi p. 36. Wang J., Jiang S. W., Chen X. H., Liu Z. L. and Peng J., 2006. Prevalence of Fimbrial Antigen (K88 variants, K99 and 987P) of Enterotoxigenic Escherichia Coli from Neonatal and Post - weaning Piglets with Diarrhea in Central China. Asian - Aust. Anim J. Sci. Vol. 19, No. 9. pp 1342 - 1346. 54 PH CH Ph l c 1: CÁC S LI U NG C X LÝ THEO PH TH NG KÊ ng 4.1: K t qu kh o sát t l heo tiêu ch y i thành ph C n Th a m NG PHÁP m t s tr i ch n nuôi heo Heo b nh Heo kh e 484 867 436 991 Th i Lai Chi-Square Test: Heo Khoe, Heo Benh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Heo Khoe Heo Benh Total 484 867 1351 447.42 903.58 2.991 1.481 436 991 472.58 954.42 2.832 1.402 920 1858 Total 1427 2778 Chi-Sq = 8.707, DF = 1, P-Value = 0.003 ng 4.4: T l d ng tính vi khu n E. coli môi tr t s tr i ch n nuôi heo thành ph C n Th Lo i m u ng chu ng tr i t i ng tính Âm tính n chu ng 20 c u ng 28 Chi-Square Test: Duong Tinh, Am Tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts 55 Duong Tinh Am Tinh Total 20 26 11.51 14.49 6.266 4.976 28 15.49 19.51 4.655 3.696 27 34 Total 35 61 Chi-Sq = 19.593, DF = 1, P-Value = 0.000 ng 4.5: K t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88, K99, 987P phân heo tiêu ch y theo a m t qu m a nh danh ch ng E. coli K88 phân heo tiêu ch y theo m ng Tính Âm tính 13 18 21 Th i Lai Chi-Square Test: Duong tinh, Am tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Duong Total tinh Am tinh Total 13 18 31 11.18 19.82 0.296 0.167 21 10.82 19.18 0.306 0.173 22 39 a 30 61 Chi-Sq = 0.942, DF = 1, P-Value = 0.332 56 t qu m a nh danh ch ng E. coli K99 phân heo tiêu ch y theo m a ng Tính Âm tính 24 21 Th i Lai Chi-Square Test: Duong tinh, Am tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Duong tinh Am tinh Total 24 31 8.13 22.87 0.157 0.056 21 7.87 22.13 0.163 0.058 16 45 Total 30 61 Chi-Sq = 0.434, DF = 1, P-Value = 0.510 t qu m a nh danh ch ng E. coli 987P phân heo tiêu ch y theo m Th i Lai m= Tr s Chi Bình Ph ng T P (Ho) = n= 0.13489 0.71341 NS 57 a ng Tính Âm tính 26 27 ng 4.6: K t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88, K99, 987P phân heo tiêu ch y theo lo i heo Ch ng vi khu n E. coli ng Tính Âm tính K88 22 39 K99 16 45 987P 53 Chi-Square Test: Duong Tinh, Am Tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Duong Tinh Am Tinh Total 22 39 61 15.33 45.67 2.899 0.973 16 45 15.33 45.67 0.029 0.010 53 15.33 45.67 3.507 1.178 46 137 Total 61 61 183 Chi-Sq = 8.595, DF = 2, P-Value = 0.014 t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88 phân heo tiêu ch y theo lo i heo Lo i heo ng Tính Âm tính Theo m 16 24 Cai s a 15 Chi-Square Test: Duong tinh, Am tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts 58 Duong tinh Am tinh Total 16 24 40 14.43 25.57 0.172 0.097 15 7.57 13.43 0.327 0.184 22 39 Total 21 61 Chi-Sq = 0.780, DF = 1, P-Value = 0.377 t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K99 phân heo tiêu ch y theo lo i heo Lo i heo ng Tính Âm tính Theo m 13 27 Cai s a 18 Chi-Square Test: Duong tinh, Am tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Duong Total tinh Am tinh Total 13 27 40 10.49 29.51 0.600 0.213 18 5.51 15.49 1.142 0.406 16 45 21 61 Chi-Sq = 2.361, DF = 1, P-Value = 0.124 59 t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli 987P phân heo tiêu ch y theo lo i heo Lo i heo ng Tính Âm tính Theo m 35 Cai s a 18 m= n= Tr s Chi Bình Ph ng T 0.04092 P (Ho) = 0.83969 NS ng 4.7: K t qu nh danh ch ng vi khu n E. coli K88, K99, 987P môi tr ng chu ng tr i t i m t s tr i ch n nuôi heo thành ph C n Th Ch ng E. coli ng tính Âm tính K88 56 K99 12 49 987P 55 Chi-Square Test: Duong Tinh, Am Tinh Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Duong Tinh Am Tinh Total 56 61 7.67 53.33 0.928 0.133 12 49 7.67 53.33 2.449 0.352 55 7.67 53.33 0.362 0.052 61 61 60 Total 23 160 183 Chi-Sq = 4.277, DF = 2, P-Value = 0.118 ng 4.9: K t qu u tr b nh tiêu ch y heo nghi vi khu n E. coli gây t i thành ph C n Th t qu u tr heo tiêu ch y t Phác n ngày heo kh i b nh heo ch a kh i I II m= n= Tr s Chi Bình Ph ng T P (Ho) = 0.1 0.75183 NS 61 [...]... t l nhi m vi khu n E coli trên heo con theo m và heo cai s a t i TP C n Th 37 4.4 T l d ng tính vi khu n E coli trong môi tr ng chu ng tr i t i m t s tr i ch n nuôi heo thành ph C n Th 39 4.5 K t qu nh danh các ch ng vi khu n E coli K88, K99, 987P trên phân heo con tiêu ch y theo a m 41 4.6 K t qu nh danh các ch ng vi khu n E coli K88, K99, 987P trên phân heo con tiêu ch y theo lo i heo con 42 4.7... ” c tiêu tài: Xác nh t l b nh tiêu ch y trên heo con t i huy n C n Th và Th i Lai, TP Xác nh t l b nh tiêu ch y do E coli và các ch ng E coli K88, K99, 987P gây tiêu ch y cho heo con Xác nh tính nh y c m c a vi khu n E coli phân l p c v i m t s lo i kháng sinh và u tr b nh tiêu ch y nghi do E coli gây ra heo con 2 CH NG 2 S LÝ LU N 2.1 Tình hình nghiên c u trong và ngoài n nh tiêu ch y trên heo con. .. ch u tra m c gây nhi m, còn các y u t nh ch ng gây b nh, kháng sinh 1 u tr hay vi c ki m tra tính nh y c m c a các ch ng E coli trên t ng a m c th thì ch a c quan tâm i kháng sinh Xu t phát t nh ng lý do trên, chúng tôi ti n hành th c hi n tài Phân l p, nh danh và ki m tra tính nh y c m v i kháng sinh c a vi khu n Enterotoxigenic Escherichia coli gây b nh tiêu ch y heo con t i huy n và Th i Lai, thành. .. và huy n Th i Lai, thành ph C n Th B ng ph ng pháp kh o sát, phân l p, nh danh các ch ng vi khu n E coli và ki m tra tính nh y c m c a vi khu n E coli v i kháng sinh b ng ph ng pháp khu ch tán trên th ch Ti n hành kh o sát trên 2.778 heo con theo m và heo cai s a, t l tiêu ch y là 33,11%, trong ó tiêu ch y do E coli chi m t l 100% K t qu nh danh các ch ng E coli K88, K99, 987P gây tiêu ch y trên heo. . .DANH SÁCH B NG ng Tên b ng Trang 3.1 Các ph n ng sinh hóa nh danh vi khu n E coli 3.2 B ng tiêu chu n ng kính vòng vô khu n c a m t s lo i kháng sinh (CLSI, 2011) 30 3.3 Phác 31 4.1 K t qu kh o sát t l heo con tiêu ch y nuôi heo t i thành ph C n Th m t s tr i ch n 33 4.2 K t qu phân l p vi khu n E coli trên phân heo con tiêu ch y t i huy n C và Th i Lai, thành ph C n Th 35 4.3... 4.7 K t qu nh danh các ch ng vi khu n E coli K88, K99, 987P trong môi tr ng chu ng tr i t i m t s tr i ch n nuôi heo thành ph C n Th 44 4.8 K t qu kh o sát tính nh y c m c a các ch ng E coli phân p v i m t s lo i kháng sinh 46 4.9 K t qu u tr b nh tiêu ch y trên heo con nghi do vi khu n E coli gây ra t i thành ph C n Th 48 u tr b nh tiêu ch y nghi do E coli trên heo con ix 27 TÓM L C nh tiêu ch y là... nh ng ch ng ph bi n gây tiêu ch y cho heo con (Moon et al., 1990) Bên c nh ó, vi c s d ng kháng sinh trong phòng và u tr b nh tiêu ch y c a heo con c ng tr nên áng lo ng i vì E coli là vi khu n có s c kháng nhanh, hi n t ng a kháng v i nhi u lo i thu c có t l khá cao S d ng kháng sinh tràn lan, không tuân theo nguyên c và phác c th c ng s gây khó kh n v sau cho vi c u tr d t b nh thành ph C n Th , trong... không tiêu hóa cs o u ki n kích thích vi khu n phát tri n và nh h ng t i hi u ng th m th u và h p thu kém d n t i tiêu ch y c m b nh: tiêu ch y phân vàng v i nhi u b t và ch t nh y, b nh r t n ng trên heo con theo m và nh h n trên heo con sau cai s a B nh lây truy n ch u qua ng tiêu hoá v B nh do ký sinh trùng Ký sinh trùng ký sinh trong c th heo là m t trong nh ng y u t gây t n th t cho ch n nuôi heo. .. m t s b nh heo nái nh : vi m vú, vi m t cung, s t cao… Làm thay i ch t l ng s a gây tiêu ch y cho heo con ( ào Tr ng t và ctv., 1996) Do heo con c m sinh lý c a heo con c ng là m t trong nh ng nguyên nhân làm cho heo con b tiêu ch y Không cung c p y s a u cho heo con trong giai n s sinh Ngu a u i v i heo con r t quan tr ng vì ó là ngu n th c n, ngu n cung c c trong th i gian u sau khi c sinh ra, cung... lo i vi khu n có kh n ng t ng s c kháng i v i kháng sinh nhanh nh t, kháng thu c m nh và tràn lan, hi n t ng a kháng và t o kháng chéo c a E coli i i kháng sinh c ng r t ph bi n C ng theo tác gi này cho bi t, kháng sinh nào càng c dùng nhi u và r ng rãi thì vi khu n kháng l i nó càng cao, s kháng thu c có liên quan m t thi t n các m c ích s d ng thu c và cách dùng thu c, do ó v n s d ng kháng sinh . Th, t tháng 08 /201 3 n tháng 11 /201 3. n Th, ngày tháng nm 20 Cn Th, ngày ….tháng nm 20 Duyt B môn Cán b hng dn TS. LÝ TH LIÊN KHAI n Th, ngày tháng nm 20 Duyt Khoa Nông. thng kê TP. Cn Th, 201 2). Tuy ã có t vài tác gi nghiên cu v bnh tiêu chy  heo con do E. coli gây ra  TP. n Th nh Nguyn Minh Lc (200 7), Nguyn Vn Ngha (201 1), nhng ch u. Yên là 56%, trong ó t l mang kháng nguyên K88 là 80% và K99 là 20% (Phm Th Sn và ctv., 200 8). Nghiên cu  Chí Hng (201 2), kt qu phân lp E. coli trên mu phân heo con sau cai sa