BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ---------- LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC PHÂN LẬP VÀ KHẢO SÁT ĐẶC TÍNH VI KHUẨN NỘI SINH CÂY LÚA TRỒNG TRÊN ĐẤT CỦA HUYỆN PHÚ HÒA, TỈNH PHÚ YÊN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN GS.TS. CAO NGỌC ĐIỆP SINH VIÊN THỰC HIỆN NGUYỄN THỊ NGỌC THIÊN MSSV: 3092441 LỚP: CNSH TT K35 Cần Thơ, Tháng 11/2013 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN (ký tên) SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) GS.TS. Cao Ngọc Điệp Nguyễn Thị Ngọc Thiên XÉT DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………. Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Để hoàn thành luận văn “Phân lập khảo sát đặc tính vi khuẩn nội sinh lúa trồng huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên”, bên cạnh nổ lực thân, em nhận giúp đỡ tận tình quý thầy cô chia sẻ từ phía gia đình bạn bè. Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn: Quý thầy cô thuộc viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học truyền đạt cho em kiến thức quý báu thời gian học tập; Thầy Giáo sư-Tiến sĩ Cao Ngọc Điệp tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi thời gian em thực luận văn; Cán phòng thí nghiệm Vi sinh vật, thuộc viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học hỗ trợ em hoàn thành đề tài; Gia đình bạn bè động viên em suốt trình thực luận văn. Tuy em cố gắng hoàn thiện luận văn, với thời gian khả hạn chế, luận văn tránh khỏi thiếu sót. Em mong nhận góp ý chân thành từ quý thầy cô bạn. Sau cùng, em xin gửi lời chúc sức khỏe thành công đến gia đình, quý thầy cô tất bạn. Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ TÓM LƯỢC Lúa (Oryza sativa) giữ vị trí thay loại trồng hóa lương thực quan trọng trồng giải trình tự đầy đủ. Từ mẫu rễ thân lúa trồng huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên, hai mươi lăm dòng vi khuẩn nội sinh phân lập. Tất dòng vi khuẩn thuộc nhóm Gram âm, tế bào có hình que có khả chuyển động. Chín mươi hai phần trăm khuẩn lạc hai mươi lăm dòng vi khuẩn tạo thành có dạng tròn, mô bìa nguyên. Các dòng vi khuẩn có khả cố định đạm, hòa tan lân khó tan sinh tổng hợp Indole-3-acetic acid (IAA); dòng PH4 dòng vi khuẩn tốt với khả tổng hợp lượng NH4+cao (7,70 μg/ml ngày thứ tư sau chủng), lượng lân hòa tan cao (181,54 μg/ml sau mười ngày chủng) dòng PH13 sinh tổng hợp lượng IAA cao (31,64 μg/ml) sau sáu ngày chủng. Từ khóa: cố định đạm, lúa, hòa tan lân, huyện Phú Hòa, sinh tổng hợp IAA, vi khuẩn nội sinh Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ MỤC LỤC Trang TÓM LƯỢC .i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG .iv DANH SÁCH HÌNH . v TỪ VIẾT TẮT .vi CHƯƠNG 1. GIỚI THIỆU 1.1. Giới thiệu 1.2. Mục tiêu đề tài . 1.3. Nội dung nghiên cứu CHƯƠNG 2. LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU . 2.1. Huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên . 2.2. Sơ lược lúa (Oryza sativa) . 2.2.1. Nguồn gốc . 2.2.2. Đặc điểm hình thái sinh thái . 2.2.3. Nhu cầu dinh dưỡng 2.2.4. Giá trị dinh dưỡng vị trí kinh tế 2.3. Vi khuẩn nội sinh . 2.3.1. Các nhóm vi khuẩn nội sinh 2.3.2. Một số đặc tính vi khuẩn nội sinh 11 2.3.2.1. Khả cố định đạm 11 2.3.2.2. Khả hòa tan lân khó tan . 12 2.3.2.3. Khả tổng hợp Indole-3-acetic aicd (IAA) 13 CHƯƠNG 3. PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 15 3.1. Địa điểm thời gian thực 15 3.2. Phương tiện nghiên cứu . 15 3.2.1. Vật liệu thí nghiệm 15 3.2.2. Hóa chất 15 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ 3.2.3. Thiết bị dụng cụ thí nghiệm . 17 3.3. Phương pháp nghiên cứu 17 3.3.1. Thu thập xử lý mẫu 17 3.3.2. Phân lập . 18 3.3.3. Quan sát hình thái, đo kích thước khuẩn lạc . 18 3.3.4. Quan sát hình dạng khả chuyển động vi khuẩn 19 3.3.5. Khảo sát khả tổng hợp NH4+ phương pháp Indolephenol Blue . 21 3.3.6. Khảo sát khả hòa tan lân khó tan 22 3.3.7. Định lượng IAA phương pháp Salkowski 23 3.3.8. Xử lý số liệu 24 CHƯƠNG 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN . 25 4.1. Kết phân lập vi khuẩn 25 4.1.1. Phân lập vi khuẩn 25 4.1.2. Đặc điểm khuẩn lạc đặc tính sinh học dòng vi khuẩn phân lập 26 4.2. Khả cố định đạm dòng vi khuẩn . 28 4.3. Khả hòa tan lân . 31 4.4. Khả tổng hợp IAA 33 CHƯƠNG 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ . 35 5.1. Kết luận . 35 5.2. Đề nghị 35 PHỤ LỤC Phụ lục: Phân tích ANOVA Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 1: Thành phần dinh dưỡng 100 g gạo Bảng 2: Thành phần môi trường NFb (Kireg Dobereiner, 1984) 15 Bảng 3: Công thức môi trường Burk (Park et al, 2005) . 16 Bảng 4: Công thức môi trường NBRIP lỏng (Nautiyal, 1999) 16 Bảng 5: Đường chuẩn NH4+ . 22 Bảng 6: Đường chuẩn P2O5 23 Bảng 7: Đường chuẩn IAA . 24 Bảng 8: Nguồn gốc dòng vi khuẩn phân lập môi trường NFb 25 Bảng 9: Đặc điểm khuẩn lạc dòng vi khuẩn phân lập 28 Bảng 10: Khả tổng hợp NH4+ dòng vi khuẩn nội sinh 30 Bảng 11: Khả hòa tan lân dòng vi khuẩn nội sinh phân lập 32 Bảng 12: Khả tổng hợp IAA dòng vi khuẩn phân lập . 34 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1. Lúa (Oryza sativa) . Hình 2. Vi khuẩn Gluconacetobacter diazotrophicus Burkholderia ambifaria 10 Hình 3. Sơ đồ lộ trình tổng hợp IAA Enterobacter cloacae . 14 Hình 4. Cấu trúc màng tế bào vi khuẩn Gram âm Gram dương . 19 Hình 5. Vòng pellicle xuất sau 2-3 ngày chủng . 26 Hình 6. Khuẩn lạc tròn, mô, bìa nguyên màu trắng đục (trái) màu vàng nhạt (phải) 27 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ TỪ VIẾT TẮT Bp Base pair FAO Food and Agriculture Organization ATP Adenosin triphosphate NADP Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate IAA Indole-3-acetic acid EDTA Ethylenediamine tetraacetic acid OD Optical density Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ CHƯƠNG 1. GIỚI THIỆU 1.1. Giới thiệu Lúa lương thực quan trọng, giữ vị trí thay loại trồng hóa. Hiện nay, diện tích trồng lúa bao phủ 110 vùng lãnh thổ, thích nghi rộng với nhiều điều kiện sinh thái khác từ vĩ độ 350 Nam – 530 Bắc. Theo thống kê năm 2004: Trong loại lương thực lấy hạt Việt Nam lúa ngô hai loại lương thực chính, song so với tổng sản lượng hai loại sản lượng ngô vào khoảng 10%, vậy, lúa lương thực mục tiêu phát triển nông nghiệp Việt Nam để đảm bảo vững an ninh lương thực quốc gia xuất khẩu. Hiện diện tích trồng lúa nước từ 7,3 dến 7,5 triệu ha, suất trung bình 46 ha, sản lượng dao động khoảng 34,5 triệu tấn/năm, xuất từ 2,5 triệu đến triệu tấn/năm. Việt Nam có bờ biển dài 3000 km, sông núi nhiều, địa hình phức tạp nên hình thành nhiều vùng trồng lúa khác nhau, có vùng đồng ven biển miền Trung. Tại đây, cánh đồng lúa thuộc huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên xem có diện tích lớn. Cây lúa thích hợp với đất thịt hay đất thịt pha sét, chua trung tính (pH 5,57,5). Trong thực tế, lúa thích nghi điều kiện đất đai khắc nghiệt phèn, mặn, khô hạn, ngập úng. Tuy nhiên, suất sản lượng lúa tùy thuộc vào phân bón hóa học mà nông dân sử dụng. Để tạo tạ thóc, lúa cần kg N, 0,7- 0,9 kg P, 3,2 kg K kg Si. Vì vậy, để đạt suất hạt 6-7 tấn/ha vụ, lúa cần 8-10 phân chuồng, 100-120 kg N, 100-120 kg P 30-60 kg K. Tuy nhiên, năm gần đây, nhiều người lo ngại ảnh hưởng phân bón đến môi trường sức khỏe người. Đối tượng độc hại nguồn nước đất, mà tác nhân dư lượng nitrat, dẫn đến ngộ độc nitrat, ảnh hưởng xấu đến hệ sinh thái. Bên cạnh đó, dư lượng phân bón lương thực gây hại cho sức khỏe người tiêu dùng gia súc, ảnh hưởng đến sức khỏe cộng đồng. Có lợi phủ nhận tiến vượt bậc khoa học, đặc biệt lĩnh vực công nghệ sinh học vi sinh vật, tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 16: Hàm lượng đạm dòng vi khuẩn ngày S T NT T Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 4,47 4,45 4,43 13,35 4,45 20,01 19,77 19,64 178,25 PH2 5,83 5,86 5,81 17,50 5,83 33,96 34,28 33,81 306,16 PH3 6,10 6,10 6,13 18,32 6,11 37,20 37,20 37,53 335,76 PH4 7,56 7,62 7,55 22,73 7,58 57,19 58,01 56,98 516,55 PH5 3,93 3,92 3,93 11,78 3,93 15,45 15,35 15,45 138,75 PH6 3,82 3,86 3,88 11,56 3,85 14,61 14,92 15,03 133,69 PH7 1,82 1,86 1,82 5,49 1,83 3,30 3,45 3,30 30,16 PH8 2,03 2,02 2,06 6,12 2,04 4,14 4,08 4,25 37,40 PH9 5,34 5,38 5,37 16,09 5,36 28,52 28,95 28,81 258,83 10 PH10 6,91 6,90 6,87 20,68 6,89 47,77 47,59 47,21 427,73 11 PH11 6,91 6,88 6,88 20,68 6,89 47,77 47,40 47,40 427,73 12 PH12 3,44 3,44 3,46 10,34 3,45 11,85 11,85 11,95 106,97 13 PH13 3,77 3,75 3,78 11,30 3,77 14,20 14,10 14,30 127,80 14 PH14 1,38 1,41 1,44 4,23 1,41 1,91 1,99 2,07 17,91 15 PH15 2,09 2,13 2,10 6,32 2,11 4,36 4,53 4,42 39,92 16 PH16 0,62 0,60 0,64 1,86 0,62 0,39 0,36 0,41 3,46 17 PH17 1,33 1,32 1,30 3,95 1,32 1,77 1,73 1,70 15,58 18 PH18 3,06 3,03 3,08 9,17 3,06 9,39 9,16 9,47 84,05 19 PH19 4,69 4,35 0,46 9,50 3,17 21,99 18,92 0,21 90,28 20 PH20 2,96 2,93 2,94 8,83 2,94 8,73 8,57 8,65 77,88 21 PH21 3,39 3,42 3,46 10,26 3,42 11,48 11,67 11,95 105,30 22 PH22 1,00 1,02 1,04 3,07 1,02 1,01 1,04 1,09 9,40 23 PH23 1,00 1,04 1,03 3,08 1,03 1,01 1,09 1,06 9,49 24 PH24 0,57 0,61 0,64 1,82 0,61 0,33 0,37 0,41 3,31 25 PH25 0,79 0,77 0,73 2,29 0,76 0,62 0,60 0,54 5,26 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 17: Hàm lượng đạm dòng vi khuẩn ngày S T NT T Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 7,10 7,07 7,15 21,32 7,11 50,43 50,01 51,07 454,50 PH2 4,60 4,60 4,61 13,81 4,60 21,14 21,14 21,28 190,65 PH3 4,66 4,64 4,60 13,90 4,63 21,69 21,55 21,14 193,13 PH4 7,70 7,74 7,67 23,11 7,70 59,25 59,94 58,79 533,95 PH5 3,91 3,94 3,87 11,72 3,91 15,30 15,54 14,96 137,39 PH6 3,94 4,02 4,00 11,96 3,99 15,54 16,13 16,01 143,04 PH7 2,12 2,15 2,20 6,48 2,16 4,51 4,64 4,83 41,93 PH8 2,81 2,82 2,79 8,43 2,81 7,89 7,98 7,81 71,03 PH9 3,11 3,12 3,12 9,35 3,12 9,66 9,75 9,75 87,45 10 PH10 6,89 6,85 6,92 20,66 6,89 47,51 46,89 47,92 426,97 11 PH11 6,21 6,25 6,22 18,68 6,23 38,53 39,09 38,71 348,98 12 PH12 3,73 3,70 3,72 11,15 3,72 13,94 13,72 13,83 124,43 13 PH13 4,66 4,61 4,64 13,91 4,64 21,69 21,28 21,55 193,55 14 PH14 1,92 1,96 1,93 5,80 1,93 3,67 3,84 3,72 33,70 15 PH15 3,23 3,27 3,26 9,75 3,25 10,41 10,70 10,60 95,14 16 PH16 1,59 1,62 1,63 4,84 1,61 2,52 2,61 2,66 23,39 17 PH17 1,65 1,66 1,68 4,99 1,66 2,71 2,76 2,81 24,85 18 PH18 3,23 3,26 3,27 9,75 3,25 10,41 10,60 10,70 95,14 19 PH19 4,78 4,76 4,79 14,33 4,78 22,81 22,67 22,96 205,33 20 PH20 3,00 2,97 2,99 8,96 2,99 9,02 8,84 8,93 80,36 21 PH21 4,06 4,09 4,03 12,18 4,06 16,49 16,74 16,25 148,43 22 PH22 2,27 2,27 2,30 6,85 2,28 5,17 5,17 5,30 46,89 23 PH23 2,33 2,38 2,35 7,06 2,35 5,44 5,65 5,51 49,80 24 PH24 0,60 0,60 0,63 1,84 0,61 0,36 0,36 0,40 3,39 25 PH25 1,62 1,65 1,63 4,90 1,63 2,61 2,71 2,66 23,97 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 18: Hàm lượng đạm dòng vi khuẩn ngày S T NT T Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 5,56 5,61 5,59 16,76 5,59 30,89 31,50 31,20 280,76 PH2 4,06 4,03 4,04 12,13 4,04 16,46 16,24 16,35 147,16 PH3 2,58 2,61 2,68 7,87 2,62 6,68 6,82 7,18 62,01 PH4 5,04 5,07 5,07 15,17 5,06 25,40 25,67 25,67 230,23 PH5 3,68 3,70 3,73 11,11 3,70 13,51 13,71 13,91 123,38 PH6 4,17 4,19 4,18 12,54 4,18 17,36 17,59 17,47 157,26 PH7 1,55 1,59 1,62 4,75 1,58 2,39 2,52 2,61 22,57 PH8 2,04 2,07 2,00 6,10 2,03 4,15 4,27 3,99 37,22 PH9 1,41 1,45 1,44 4,30 1,43 1,99 2,11 2,07 18,49 10 PH10 4,28 4,30 4,32 12,89 4,30 18,28 18,51 18,63 166,28 11 PH11 3,73 3,77 3,74 11,24 3,75 13,91 14,22 14,01 126,43 12 PH12 1,49 1,48 1,52 4,49 1,50 2,23 2,19 2,31 20,17 13 PH13 1,44 1,45 1,47 4,35 1,45 2,07 2,11 2,15 18,96 14 PH14 2,15 2,20 2,15 6,50 2,17 4,61 4,85 4,61 42,21 15 PH15 1,38 1,45 1,42 4,26 1,42 1,91 2,11 2,03 18,14 16 PH16 1,33 1,30 1,33 3,96 1,32 1,77 1,69 1,77 15,67 17 PH17 1,38 1,42 1,45 4,26 1,42 1,91 2,03 2,11 18,14 18 PH18 3,73 3,76 3,77 11,26 3,75 13,91 14,12 14,22 126,74 19 PH19 2,97 2,95 2,98 8,90 2,97 8,80 8,72 8,88 79,17 20 PH20 1,87 1,86 1,90 5,64 1,88 3,51 3,46 3,62 31,78 21 PH21 2,97 2,99 2,96 8,92 2,97 8,80 8,96 8,74 79,48 22 PH22 2,31 2,30 2,27 6,88 2,29 5,34 5,28 5,15 47,31 23 PH23 2,97 2,99 2,97 8,92 2,97 8,80 8,96 8,80 79,66 24 PH24 1,77 1,74 1,72 5,23 1,74 3,12 3,02 2,97 27,33 25 PH25 2,58 2,61 2,64 7,83 2,61 6,68 6,82 6,96 61,36 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 19: Hàm lượng đạm dòng vi khuẩn ngày S T NT T Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 2,82 2,87 2,80 8,49 2,83 7,94 8,22 7,86 72,07 PH2 1,75 1,72 1,79 5,26 1,75 3,06 2,97 3,20 27,69 PH3 1,44 1,47 1,50 4,41 1,47 2,09 2,16 2,24 19,45 PH4 3,17 3,16 3,19 9,52 3,17 10,07 9,99 10,15 90,60 PH5 1,37 1,38 1,41 4,16 1,39 1,87 1,91 1,98 17,27 PH6 2,97 2,94 2,93 8,84 2,95 8,82 8,67 8,59 78,23 PH7 1,19 1,22 1,22 3,62 1,21 1,42 1,48 1,48 13,12 PH8 1,65 1,66 1,66 4,97 1,66 2,72 2,76 2,76 24,70 PH9 1,43 1,47 1,44 4,35 1,45 2,05 2,16 2,09 18,90 10 PH10 2,97 2,93 2,96 8,86 2,95 8,82 8,59 8,74 78,46 11 PH11 1,95 1,98 1,98 5,91 1,97 3,81 3,91 3,91 34,93 12 PH12 0,94 0,96 0,96 2,86 0,95 0,88 0,93 0,93 8,18 13 PH13 1,44 1,47 1,43 4,35 1,45 2,09 2,16 2,05 18,90 14 PH14 3,02 3,05 3,06 9,12 3,04 9,12 9,28 9,35 83,26 15 PH15 0,94 0,96 0,96 2,86 0,95 0,88 0,93 0,93 8,18 16 PH16 1,39 1,41 1,41 4,21 1,40 1,94 1,98 1,98 17,70 17 PH17 1,50 1,53 1,48 4,51 1,50 2,24 2,35 2,20 20,36 18 PH18 1,55 1,58 1,56 4,69 1,56 2,39 2,51 2,43 22,00 19 PH19 0,17 0,16 0,16 0,50 0,17 0,03 0,03 0,03 0,25 20 PH20 1,50 1,51 1,53 4,54 1,51 2,24 2,27 2,35 20,59 21 PH21 1,44 1,44 1,47 4,36 1,45 2,09 2,09 2,16 19,01 22 PH22 1,39 1,41 1,39 4,19 1,40 1,94 1,98 1,94 17,59 23 PH23 1,80 1,83 1,80 5,43 1,81 3,24 3,33 3,24 29,45 24 PH24 1,80 1,80 1,85 5,45 1,82 3,24 3,24 3,43 29,73 25 PH25 1,39 1,42 1,41 4,22 1,41 1,94 2,01 1,98 17,81 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 20: ANOVA hàm lượng lân hòa tan Độ Tổng Trung bình tự bình phương bình phương Nghiệm thức 99 494584,90 4995,81 Vi khuẩn 24 237614,59 Thời điểm Vi khuẩn*thời điểm 72 Sai số 200 Tổng cộng 299 Nguồn CF = 135023,00 F tính F bảng 5% 1% 44935,08 1,32 1,48 9900,61 89051,61 1,57 1,88 112528,60 37509,53 337381,73 2,65 3,88 144441,71 1,84 16,56 1,35 1,63 22,24 CV = 0,49% 0,11 LSD.01 (tương tác) = 0,70 Bảng 21: Hàm lượng lân hòa tan trung bình thời điểm Tổng cộng Bình phương tổng cộng Trung bình Ngày 2636,05 6948782,91 35,15 Ngày 10 6032,25 36388060,04 80,43 Ngày 15 6318,10 39918369,81 84,24 Ngày 20 5249,87 27561145,18 70,00 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 22: Hàm lượng lân hòa tan trung bình dòng vi khuẩn STT Dòng PH1 Tổng 1324,77 Bình phương 1755019,27 Trung bình 110,40 PH2 796,44 634310,82 66,37 PH3 885,01 783246,74 73,75 PH4 1536,61 2361165,48 128,05 PH5 1293,04 1671957,72 107,75 PH6 1204,68 1451247,61 100,39 PH7 854,40 729996,13 71,20 PH8 722,81 522454,33 60,23 PH9 1116,96 1247591,04 93,08 10 PH10 810,89 657537,34 67,57 11 PH11 1093,11 1194889,18 91,09 12 PH12 370,15 137011,97 30,85 13 PH13 411,09 168997,48 34,26 14 PH14 525,22 275856,71 43,77 15 PH15 383,33 146939,58 31,94 16 PH16 1006,48 1012992,15 83,87 17 PH17 320,80 102915,41 26,73 18 PH18 531,47 282463,74 44,29 19 PH19 1051,76 1106203,86 87,65 20 PH20 604,28 365148,70 50,36 21 PH21 994,12 988281,64 82,84 22 PH22 626,62 392651,00 52,22 23 PH23 272,92 74483,13 22,74 24 PH24 898,49 807282,35 74,87 25 PH25 600,84 361005,75 50,07 LSD.01 = 0,35 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 23: Hàm lượng lân hòa tan dòng vi khuẩn ngày S T NT T Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 32,79 32,79 32,52 98,10 32,70 1075,13 1075,13 1057,36 9622,68 PH2 12,11 11,97 12,38 36,46 12,15 146,62 143,35 153,29 1329,52 PH3 37,96 37,82 37,69 113,47 37,82 1440,90 1430,59 1420,32 12875,30 PH4 35,78 36,33 36,19 108,30 36,10 1280,37 1319,62 1309,75 11728,74 PH5 74,69 74,56 74,29 223,54 74,51 5579,18 5558,87 5518,37 49968,98 PH6 70,34 70,34 70,75 211,43 70,48 4947,73 4947,73 5005,32 44702,04 PH7 45,58 45,99 45,99 137,55 45,85 2077,38 2114,75 2114,75 18920,28 PH8 11,56 11,70 11,43 34,69 11,56 133,74 136,91 130,61 1203,67 PH9 41,63 45,58 45,44 132,65 44,22 1733,28 2077,38 2064,99 17596,83 10 PH10 35,51 PH11 18,64 35,10 35,37 105,99 35,33 1260,97 1232,15 1251,33 11233,12 18,78 18,64 56,05 18,68 347,43 352,52 347,43 3142,10 PH12 19,73 PH13 5,85 19,86 20,14 59,73 19,91 389,19 394,58 405,46 3567,42 6,12 5,99 17,96 5,99 34,23 37,48 35,84 322,53 PH14 46,12 PH15 31,97 45,99 45,99 138,10 46,03 2127,28 2114,75 2114,75 19070,29 31,70 31,70 95,37 31,79 1022,26 1004,93 1004,93 9096,23 PH16 80,68 PH17 23,54 81,36 81,09 243,13 81,04 6509,31 6619,54 6575,33 59111,83 23,95 23,81 71,29 23,76 554,01 573,39 566,89 5082,62 PH18 21,36 PH19 15,92 21,63 21,22 64,22 21,41 456,27 467,97 450,48 4123,91 16,05 15,92 47,89 15,96 253,39 257,74 253,39 2293,56 PH20 45,03 PH21 16,46 44,63 44,63 134,29 44,76 2028,06 1991,47 1991,47 18032,65 16,05 16,33 48,84 16,28 271,02 257,74 266,56 2385,69 PH22 37,41 PH23 10,75 37,14 37,69 112,24 37,41 1399,88 1379,59 1420,32 12598,92 10,88 10,61 32,24 10,75 115,53 118,47 112,62 1039,73 PH24 69,25 PH25 35,24 69,12 68,98 207,35 69,12 4795,80 4776,97 4758,18 42992,75 35,10 34,83 105,17 35,06 1241,72 1232,15 1213,12 11060,74 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 24: Hàm lượng lân hòa tan dòng vi khuẩn ngày 10 S TT NT Lặp lại Lặp lại Lặp lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 156,73 156,33 156,60 469,66 156,55 24563,82 24439,42 24522,32 220576,41 PH2 92,89 92,49 92,62 278,00 92,67 8628,07 8554,41 8578,93 77284,00 PH3 39,38 39,77 40,04 119,19 39,73 1550,59 1582,04 1603,18 14206,75 PH4 181,36 181,36 181,89 544,62 181,54 32892,99 32892,99 33085,44 296613,69 PH5 95,27 95,40 95,80 286,48 95,49 9076,66 9101,92 9177,89 82068,97 PH6 74,61 74,21 74,61 223,43 74,48 5566,54 5507,41 5566,54 49921,17 PH7 129,18 129,58 129,18 387,93 129,31 16687,16 16789,98 16687,16 150492,61 PH8 85,21 84,94 84,68 254,82 84,94 7259,94 7214,87 7169,94 64933,84 PH9 115,93 116,33 116,60 348,86 116,29 13440,64 13532,93 13594,63 121703,95 10 PH10 86,79 86,93 87,19 260,91 86,97 7533,32 7556,33 7602,45 68076,07 11 PH11 87,59 87,72 87,46 262,77 87,59 7671,90 7695,12 7648,72 69047,13 12 PH12 49,44 49,05 49,05 147,54 49,18 2444,68 2405,55 2405,55 21767,00 13 PH13 22,16 21,89 21,89 65,95 21,98 491,02 479,35 479,35 4349,01 14 PH14 51,03 51,56 51,30 153,89 51,30 2604,38 2658,73 2631,49 23683,38 15 PH15 39,38 39,11 39,51 118,00 39,33 1550,59 1529,79 1561,03 13924,00 16 PH16 83,09 83,09 83,48 249,66 83,22 6903,30 6903,30 6969,49 62327,93 17 PH17 29,58 29,18 29,44 88,20 29,40 874,75 851,40 866,93 7779,01 18 PH18 32,75 33,15 32,89 98,79 32,93 1072,89 1099,08 1081,58 9760,39 19 PH19 151,70 152,09 151,96 455,75 151,92 23011,48 23132,19 23091,92 207706,55 20 PH20 56,33 56,73 56,33 169,39 56,46 3173,20 3218,12 3173,20 28693,22 21 PH21 128,25 128,12 127,99 384,36 128,12 16448,49 16414,53 16380,61 147730,78 22 PH22 61,36 61,63 60,97 183,96 61,32 3765,57 3798,15 3716,96 33841,38 23 PH23 13,15 13,55 13,28 39,99 13,33 172,98 183,59 176,49 1598,94 24 PH24 80,97 80,83 80,83 242,64 80,88 6555,64 6534,21 6534,21 58872,11 25 PH25 65,87 65,60 66,00 197,47 65,82 4338,53 4303,71 4356,00 38994,48 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 25: Hàm lượng lân hòa tan dòng vi khuẩn ngày 15 S T NT T Lặp lại Lặp lại Lặp lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 136,86 136,44 136,72 410,01 136,67 18730,43 18614,95 18691,90 168111,55 PH2 85,31 85,03 84,89 255,23 85,08 7277,77 7229,79 7205,86 65139,98 PH3 129,25 129,68 129,25 388,18 129,39 16706,47 16815,88 16706,47 150686,12 PH4 172,07 171,65 171,93 515,65 171,88 29608,23 29463,00 29559,78 265892,74 PH5 137,42 137,14 137,85 412,41 137,47 18884,95 18807,61 19001,26 170080,73 PH6 136,86 137,00 136,44 410,30 136,77 18730,43 18769,00 18614,95 168342,62 PH7 56,01 55,45 55,73 167,20 55,73 3137,58 3074,78 3106,10 27954,90 PH8 72,35 72,49 73,06 217,90 72,63 5234,83 5255,23 5337,23 47481,02 PH9 106,58 106,15 106,15 318,89 106,30 11358,76 11268,87 11268,87 101689,13 10 PH10 75,59 75,45 75,87 226,92 75,64 5714,08 5692,81 5756,75 51490,64 11 PH11 142,77 143,62 143,34 429,73 143,24 20384,60 20626,62 20545,79 184669,93 12 PH12 30,94 30,80 30,52 92,27 30,76 957,51 948,81 931,54 8513,31 13 PH13 81,08 81,23 81,23 243,54 81,18 6574,70 6597,56 6597,56 59309,40 14 PH14 42,77 43,48 43,20 129,45 43,15 1829,67 1890,41 1866,00 16757,48 15 PH15 33,20 32,92 33,48 99,59 33,20 1102,05 1083,43 1120,83 9918,48 16 PH16 83,62 84,18 84,04 251,85 83,95 6992,26 7086,79 7063,10 63425,94 17 PH17 29,82 29,68 29,39 88,89 29,63 889,05 880,67 864,03 7900,96 18 PH18 98,83 98,41 98,41 295,65 98,55 9767,56 9684,22 9684,22 87407,67 19 PH19 106,72 106,44 106,15 319,31 106,44 11388,80 11328,75 11268,87 101958,79 20 PH20 50,10 50,52 50,52 151,14 50,38 2509,87 2552,38 2552,38 22843,56 21 PH21 100,52 100,94 101,23 302,69 100,90 10104,50 10189,62 10246,57 91621,32 22 PH22 55,17 54,75 55,17 165,08 55,03 3043,62 2997,18 3043,62 27252,89 23 PH23 12,07 12,49 12,21 36,77 12,26 145,70 156,07 149,12 1352,37 24 PH24 77,70 77,99 77,42 233,11 77,70 6037,95 6081,80 5994,25 54341,52 25 PH25 52,07 51,93 52,35 156,35 52,12 2711,33 2696,68 2740,74 24445,98 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 26: Hàm lượng lân hòa tan dòng vi khuẩn ngày 20 S T NT T Lặp lại Lặp lại Lặp lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng PH1 115,63 115,37 116,01 347,01 115,67 13369,33 13309,72 13458,99 120413,48 PH2 75,63 75,37 75,75 226,75 75,58 5719,26 5680,30 5738,80 51414,83 PH3 88,01 88,27 87,88 264,17 88,06 7746,27 7791,76 7723,57 69784,60 PH4 122,59 122,98 122,46 368,04 122,68 15029,18 15124,24 14997,56 135452,49 PH5 123,11 123,75 123,75 370,62 123,54 15155,99 15315,26 15315,26 137358,71 PH6 119,50 119,88 120,14 359,52 119,84 14279,48 14372,14 14434,08 129256,49 PH7 53,69 54,08 53,95 161,72 53,91 2882,65 2924,37 2910,43 26152,11 PH8 71,75 71,50 72,14 215,39 71,80 5148,76 5111,79 5204,46 46394,38 PH9 105,30 105,82 105,43 316,55 105,52 11088,77 11197,74 11115,96 100206,97 10 PH10 72,27 72,40 72,40 217,07 72,36 5223,09 5241,76 5241,76 47119,81 11 PH11 115,11 114,85 114,59 344,55 114,85 13250,24 13190,89 13131,68 118718,04 12 PH12 23,24 23,63 23,75 70,62 23,54 540,04 558,18 564,29 4987,09 13 PH13 27,63 28,27 27,75 83,65 27,88 763,19 799,25 770,33 6997,59 14 PH14 34,59 34,72 34,46 103,78 34,59 1196,71 1205,66 1187,80 10770,42 15 PH15 23,24 23,75 23,37 70,36 23,45 540,04 564,29 546,05 4950,71 16 PH16 87,24 86,98 87,63 261,85 87,28 7610,59 7565,63 7678,28 68562,89 17 PH17 23,75 24,40 24,27 72,43 24,14 564,29 595,36 589,08 5245,50 18 PH18 24,01 24,66 24,14 72,81 24,27 576,62 608,02 582,83 5301,72 19 PH19 76,14 76,01 76,66 228,81 76,27 5797,59 5777,96 5876,46 52355,34 20 PH20 50,08 49,56 49,82 149,46 49,82 2507,75 2456,32 2481,97 22337,71 21 PH21 86,21 85,69 86,34 258,23 86,08 7431,55 7342,83 7453,82 66683,90 22 PH22 54,98 55,37 54,98 165,33 55,11 3022,87 3065,59 3022,87 27333,69 23 PH23 54,46 54,72 54,72 163,91 54,64 2966,38 2994,56 2994,56 26866,38 24 PH24 71,75 71,50 72,14 215,39 71,80 5148,76 5111,79 5204,46 46394,38 25 PH25 47,37 46,98 47,50 141,85 47,28 2243,70 2207,18 2255,94 20120,05 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 27: ANOVA hàm lượng IAA Độ Tổng Trung bình tự bình phương bình phương Nghiệm thức 99 16509,80 166,77 Vi khuẩn 24 3630,36 Thời điểm Vi khuẩn*thời điểm 72 Nguồn F tính F bảng 5% 1% 2027,93 1,32 1,48 151,27 1839,44 1,57 1,88 9350,40 3116,80 37901,45 2,65 3,88 3529,03 1,84 22,39 1,35 1,63 Sai số Tổng cộng 200 CF = 97066,42 16,45 CV = 1,59% 0,08 LSD.01 (tương tác) = 0,60 Bảng 28: Hàm lượng IAA trung bình thời điểm Tổng cộng Bình phương tổng cộng Trung bình Ngày 723,59 523582,12 9,65 Ngày 1844,90 3403640,64 24,60 Ngày 1580,94 2499377,70 21,08 Ngày 1246,86 1554661,02 16,62 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 29: Hàm lượng IAA trung bình dòng vi khuẩn STT Dòng PH1 Tổng 221,75 Bình phương 49171,70 Trung bình 18,48 PH2 217,07 47119,81 18,09 PH3 188,68 35600,35 15,72 PH4 212,00 44944,10 17,67 PH5 165,85 27505,51 13,82 PH6 189,43 35885,47 15,79 PH7 285,52 81519,67 23,79 PH8 247,02 61017,61 20,58 PH9 108,20 11706,85 9,02 10 PH10 227,42 51719,95 18,95 11 PH11 248,47 61735,74 20,71 12 PH12 242,47 58790,83 20,21 13 PH13 314,24 98744,63 26,19 14 PH14 164,74 27140,90 13,73 15 PH15 215,35 46377,20 17,95 16 PH16 198,22 39289,48 16,52 17 PH17 195,24 38117,87 16,27 18 PH18 221,86 49219,66 18,49 19 PH19 271,53 73729,37 22,63 20 PH20 230,73 53234,57 19,23 21 PH21 180,63 32627,34 15,05 22 PH22 249,73 62365,51 20,81 23 PH23 221,79 49190,52 18,48 24 PH24 192,78 37162,23 16,06 25 PH25 185,59 LSD.01 = 0,30 34444,50 15,47 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 30: Hàm lượng IAA dòng vi khuẩn ngày S T NT T PH1 PH2 PH3 PH4 PH5 PH6 PH7 PH8 PH9 10 PH10 11 PH11 12 PH12 13 PH13 14 PH14 15 PH15 16 PH16 17 PH17 18 PH18 19 PH19 20 PH20 21 PH21 22 PH22 23 PH23 24 PH24 25 PH25 Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng 10,90 11,03 10,77 32,69 10,90 118,75 121,56 115,98 1068,79 10,77 10,45 10,71 31,92 10,64 115,98 109,18 114,60 1019,08 9,17 9,42 9,36 27,95 9,32 84,03 88,79 87,59 781,13 6,92 6,92 6,86 20,71 6,90 47,93 47,93 47,05 428,70 2,76 2,63 2,69 8,08 2,69 7,60 6,91 7,25 65,24 8,14 8,21 8,21 24,55 8,18 66,28 67,32 67,32 602,77 12,05 11,99 36,22 12,07 148,34 145,23 143,69 1311,74 12,18 8,08 7,95 8,14 24,17 8,06 65,24 63,18 66,28 584,03 6,41 6,28 6,15 18,85 6,28 41,09 39,46 37,87 355,18 3,72 3,91 3,85 11,47 3,82 13,82 15,29 14,79 131,66 12,63 12,88 12,69 38,21 12,74 159,47 166,01 161,09 1459,63 12,37 12,50 12,63 37,50 12,50 153,06 156,25 159,47 1406,25 12,63 12,76 12,69 38,08 12,69 159,47 162,73 161,09 1449,85 10,13 10,26 10,26 30,64 10,21 102,58 105,19 105,19 938,87 12,12 12,05 12,24 36,41 12,14 146,78 145,23 149,91 1325,71 12,76 12,82 12,69 38,27 12,76 162,73 164,37 161,09 1464,53 12,82 12,69 12,76 38,27 12,76 164,37 161,09 162,73 1464,53 13,40 13,21 13,01 39,62 13,21 179,49 174,38 169,33 1569,38 10,26 10,13 10,32 30,71 10,24 105,19 102,58 106,51 942,80 6,92 6,60 6,73 20,26 6,75 47,93 43,59 45,30 410,32 7,88 7,95 8,01 23,85 7,95 62,17 63,18 64,21 568,64 10,71 10,45 10,58 31,73 10,58 114,60 109,18 111,87 1006,84 10,00 10,13 9,94 30,06 10,02 100,00 102,58 98,72 903,85 10,77 10,45 10,38 31,60 10,53 115,98 109,18 107,84 998,72 21,79 7,26 51,55 52,47 54,34 475,02 7,18 7,24 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 7,37 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 31: Hàm lượng IAA dòng vi khuẩn ngày S T NT T PH1 PH2 PH3 PH4 PH5 PH6 PH7 PH8 PH9 10 PH10 11 PH11 12 PH12 13 PH13 14 PH14 15 PH15 16 PH16 17 PH17 18 PH18 19 PH19 20 PH20 21 PH21 22 PH22 23 PH23 24 PH24 25 PH25 Lặp Lặp Bình Bình Bình Bình lại lại phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng 28,19 28,81 27,77 84,77 28,26 794,54 830,16 771,22 7186,09 23,19 23,19 22,98 69,35 23,12 537,66 537,66 528,04 4810,00 18,60 18,40 18,19 55,19 18,40 346,12 338,41 330,79 3045,66 29,44 29,02 28,81 87,27 29,09 866,57 842,21 830,16 7616,20 21,31 21,10 21,10 63,52 21,17 454,22 445,39 445,39 4034,90 25,06 24,65 24,65 74,35 24,78 628,13 607,42 607,42 5528,54 29,44 28,81 29,44 87,69 29,23 866,57 830,16 866,57 7689,10 28,81 29,65 28,19 86,65 28,88 830,16 878,88 794,54 7507,50 6,94 7,98 7,35 22,27 7,42 48,13 63,67 54,08 495,99 27,98 28,81 28,40 85,19 28,40 782,83 830,16 806,32 7256,91 17,35 18,19 17,98 53,52 17,84 301,17 330,79 323,25 2864,48 29,23 29,44 28,81 87,48 29,16 854,34 866,57 830,16 7652,60 31,10 30,90 30,48 92,48 30,83 967,47 954,55 928,98 8552,40 15,27 15,90 15,69 46,85 15,62 233,20 252,68 246,10 2195,31 20,69 20,27 20,48 61,44 20,48 427,97 410,91 419,40 3774,57 23,40 22,56 22,56 68,52 22,84 547,37 509,07 509,07 4695,10 26,94 26,73 26,52 80,19 26,73 725,63 714,45 703,35 6430,04 27,98 27,77 29,02 84,77 28,26 782,83 771,22 842,21 7186,09 29,44 30,27 29,85 89,56 29,85 866,57 916,32 891,27 8021,44 26,52 26,73 26,10 79,35 26,45 703,35 714,45 681,43 6297,08 29,85 30,48 30,69 91,02 30,34 891,27 928,98 941,72 8284,79 22,15 22,56 22,15 66,85 22,28 490,44 509,07 490,44 4469,48 25,27 24,44 24,65 74,35 24,78 638,62 597,19 607,42 5528,54 23,40 23,60 24,02 71,02 23,67 547,37 557,16 577,00 5043,96 27,35 27,15 26,73 81,23 27,08 748,25 736,90 714,45 6598,18 Lặp lại Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Tổng Trung cộng bình Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 32: Hàm lượng IAA dòng vi khuẩn ngày S T NT T PH1 PH2 PH3 PH4 PH5 PH6 PH7 PH8 PH9 10 PH10 11 PH11 12 PH12 13 PH13 14 PH14 15 PH15 16 PH16 17 PH17 18 PH18 19 PH19 20 PH20 21 PH21 22 PH22 23 PH23 24 PH24 25 PH25 Lặp lại Lặp Lặp lại lại Tổng Trung cộng bình Bình Bình Bình Bình phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng 19,17 19,46 18,74 57,38 19,13 367,64 378,84 351,16 3292,10 22,80 22,36 22,80 67,96 22,65 519,71 500,07 519,71 4618,09 20,91 21,20 21,64 63,75 21,25 437,36 449,56 468,19 4064,52 19,03 18,88 18,74 56,65 18,88 362,10 356,61 351,16 3209,47 19,75 19,46 19,75 58,97 19,66 390,21 378,84 390,21 3477,58 19,61 19,90 19,46 58,97 19,66 384,50 395,95 378,84 3477,58 29,03 28,88 28,88 86,80 28,93 842,68 834,29 834,29 7533,74 25,26 25,55 25,70 76,51 25,50 638,11 652,84 660,27 5853,36 11,93 11,49 11,64 35,06 11,69 142,27 132,08 135,44 1229,06 23,67 23,38 23,09 70,13 23,38 560,11 546,48 533,01 4918,28 27,58 27,43 27,14 82,16 27,39 760,64 752,67 736,85 6750,17 21,93 21,35 21,49 64,77 21,59 480,82 455,73 461,94 4194,91 31,49 31,64 31,78 94,91 31,64 991,79 1000,94 1010,13 9008,49 15,99 15,41 15,70 47,09 15,70 255,54 237,34 246,35 2217,18 19,75 19,46 19,75 58,97 19,66 390,21 378,84 390,21 3477,58 16,86 16,57 17,14 50,57 16,86 284,09 274,41 293,95 2556,84 16,13 16,28 15,84 48,25 16,08 260,19 264,89 250,92 2327,71 17,43 17,29 17,00 51,72 17,24 303,97 298,94 289,00 2675,44 25,41 25,26 25,55 76,22 25,41 645,45 638,11 652,84 5809,09 22,22 22,65 22,36 67,23 22,41 493,61 513,12 500,07 4520,13 12,65 12,94 12,80 38,39 12,80 160,08 167,50 163,77 1473,89 25,26 25,84 25,70 76,80 25,60 638,11 667,74 660,27 5897,79 28,74 28,45 28,16 85,35 28,45 825,94 809,36 792,95 7284,25 19,61 19,46 19,75 58,83 19,61 384,50 378,84 390,21 3460,51 15,70 15,99 15,84 47,52 15,84 246,35 255,54 250,92 2258,32 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 33: Hàm lượng IAA dòng vi khuẩn ngày S T NT T PH1 PH2 PH3 PH4 PH5 PH6 PH7 PH8 PH9 10 PH10 11 PH11 12 PH12 13 PH13 14 PH14 15 PH15 16 PH16 17 PH17 18 PH18 19 PH19 20 PH20 21 PH21 22 PH22 23 PH23 24 PH24 25 PH25 Lặp Lặp Bình Bình Bình Bình lại lại phương phương phương phương lặp lại lặp lại lặp lại tổng cộng 15,33 16,02 15,56 46,91 15,64 234,87 256,74 242,06 2200,26 16,02 15,56 16,26 47,84 15,95 256,74 242,06 264,25 2288,40 13,93 13,70 14,16 41,79 13,93 194,05 187,63 200,58 1746,46 16,02 15,56 15,79 47,37 15,79 256,74 242,06 249,35 2244,12 12,30 11,37 11,60 35,28 11,76 151,35 129,32 134,67 1244,61 10,67 10,67 10,21 31,56 10,52 113,94 113,94 104,23 995,92 24,86 24,63 25,33 74,81 24,94 618,04 606,53 641,39 5597,13 20,21 19,98 19,51 59,70 19,90 408,42 399,07 380,70 3563,81 10,67 11,14 10,21 32,02 10,67 113,94 124,09 104,23 1025,49 20,44 19,98 20,21 60,63 20,21 417,87 399,07 408,42 3675,74 25,09 24,63 24,86 74,58 24,86 629,66 606,53 618,04 5562,38 17,65 17,88 17,19 52,72 17,57 311,56 319,83 295,36 2779,50 29,51 29,28 29,98 88,77 29,59 870,94 857,26 898,61 7879,66 13,70 13,00 13,47 40,16 13,39 187,63 169,00 181,31 1613,05 19,74 19,51 19,28 58,53 19,51 389,83 380,70 371,68 3426,33 13,93 13,23 13,70 40,86 13,62 194,05 175,10 187,63 1669,58 9,98 9,05 9,51 28,53 9,51 99,54 81,84 90,47 814,24 15,33 15,56 14,86 45,74 15,25 234,87 242,06 220,83 2092,53 24,86 25,33 24,86 75,05 25,02 618,04 641,39 618,04 5631,98 21,60 20,91 21,37 63,88 21,29 466,76 437,10 456,77 4081,13 9,05 8,81 9,51 27,37 9,12 81,84 77,69 90,47 749,23 24,86 24,63 24,86 74,35 24,78 618,04 606,53 618,04 5527,75 10,91 10,67 10,44 32,02 10,67 118,96 113,94 109,03 1025,49 10,67 10,44 10,21 31,33 10,44 113,94 109,03 104,23 981,29 12,07 11,37 11,60 35,05 11,68 145,68 129,32 134,67 1228,26 Lặp lại Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Tổng Trung cộng bình Viện NC&PT Công nghệ Sinh học [...]... những đặc điểm và cơ chế tương tác với thực vật cũng như những đặc tính của vi khuẩn nội sinh rất cần thiết để đạt được hiệu quả tối ưu trong sự áp dụng tương tác giữa thực vật và vi khuẩn vào vi c giải quyết trình trạng phụ thuộc phân bón hóa học của nền nông nghiệp 1.2 Mục tiêu của đề tài Phân lập và tuyển chọn những dòng vi khuẩn nội sinh có đặc tính tốt trong cây lúa ở huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên. .. mươi lăm dòng vi khuẩn nội sinh đã được phân lập từ rễ và thân của các mẫu lúa thu thập từ một số cánh đồng trên đại bàn huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên trên môi trường NFb Nguồn gốc và ký hiệu của các dòng vi khuẩn phân lập được trình bày trong Bảng 8 Hình 5 Vòng pellicle xuất hiện sau 2-3 ngày chủng Các dòng vi khuẩn phân lập được đều có chung đặc tính sinh trưởng va phát triển ở điều kiện vi hiếu khí... 1.3 Nội dung nghiên cứu - Phân lập một số dòng vi khuẩn nội sinh trong cây lúa trồng ở huyện Phú Hòa, tỉnh Phú Yên; - Khảo sát khả năng cố định đạm, hòa tan lân và tổng hợp Indole-3-acetic acid (IAA) của những dòng vi khuẩn này Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 2 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ CHƯƠNG 2 LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Huyện Phú Hòa,. .. trung bình của các nghiệm thức được đánh giá sự khác biệt bằng LSD.01 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 24 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết quả phân lập vi khuẩn 4.1.1 Phân lập vi khuẩn Bảng 8: Nguồn gốc các dòng vi khuẩn được phân lập trên môi trường NFb STT Dòng vi khuẩn Giống lúa Vị trí phân lập Địa điểm... sự hiện diện của những vi khuẩn này trong mô của thực vật khỏe mạnh lần đầu tiên được báo cáo vào năm 1926 Thuật ngữ vi sinh vật nội sinh được dùng để chỉ sự phát triển của vi khuẩn hoặc vi nấm bên trong cây Vi khuẩn nội sinh được định nghĩa theo nhiều cách và những định nghĩa này được sửa đổi ngày một hoàn thiện hơn Vi khuẩn nội sinh có thể sống bắt buộc trong mô thực vật suốt dòng đời của nó hoặc... Trường Đại học Cần Thơ cứu hệ vi sinh vật sống nội sinh trong cây lúa, từ đó tìm ra giải pháp hợp lý để cải thiện tình trạng phụ thuộc phân hóa học với nhiều rủi ro nêu trên Vi khuẩn nội sinh là vi khuẩn sống nội bào hoặc liên bào bên trong các mô khỏe mạnh của cây chủ toàn bộ hoặc một phần vòng đời của nó, thường không gây triệu chứng bệnh (Wilson, 1995) Vi khuẩn nội sinh có thể có lợi cho thực vật... lọc tự nhiên Vi khuẩn nội sinh có thể thúc đẩy tăng trưởng và năng suất cho cây chủ và được xem như tác nhân kiểm soát sinh học (Ryan, 2008) vì chúng có khả năng chống lại mầm bệnh như nấm, vi khuẩn, tuyến trùng,… gây bênh cho cây trồng (Cao Ngọc Điệp, 2010) 2.3.1 Các nhóm vi khuẩn nội sinh Vi khuẩn nội sinh tồn tại trong cây chủ không bị giới hạn bởi một loài duy nhất mà bao gồm nhiều chi và loài (Ryan... bán đặc Khi tăng trưởng, vi khuẩn phát triển hình thành vòng sáng màu trắng (vòng pellicle) cách bề mặt môi trường 2-5 mm sau 2-3 ngày nuôi và đồng thời làm đổi màu môi trường NFb từ xanh lá cây (pH 6,8) sang màu xanh dương do trong môi trường có chứa chất chỉ thị màu Bromothymol Blue 4.1.2 Đặc điểm khuẩn lạc và đặc tính sinh học của các dòng vi khuẩn phân lập Hai mười lăm dòng vi khuẩn phân lập với khuẩn. .. nổi và dạng bìa khuẩn lạc bằng mắt thường Đối với những khuẩn lạc có kích thước quá nhỏ thì sử dụng kính lúp để quan sát 3.3.4 Quan sát hình dạng và khả năng chuyển động của vi khuẩn Sau khi phân lập, tiến hành quan sát hình dạng và sự chuyển động của vi khuẩn bằng phương pháp nhỏ giọt ép dưới kính hiển vi quang học ở độ phóng đại 400 lần theo Cao Ngọc Điệp và Nguyễn Hữu Hiệp (2002) Chuẩn bị mẫu vi khuẩn: ... giới Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 8 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường Đại học Cần Thơ 2.3 Vi khuẩn nội sinh Vi khuẩn nội sinh được định nghĩa là vi khuẩn được phát hiện bên trong thực vật mà bề mặt đã được khử trùng hoặc dịch trích thực vật và không có những tác động gây hại trên thực vật (Mano và Morisaki, 2008) Vi khuẩn nội sinh được biết đến từ hơn . NC&PT Công nghệ Sinh học 3.2.3. Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 17 3.3. Phương pháp nghiên cứu 17 3.3.1. Thu thập và xử lý mẫu 17 3.3.2. Phân lập 18 3.3.3. Quan sát hình thái, đo kích thước