BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC XỬ LÝ NƯỚC THẢI TỪ NHÀ MÁY CỦA CÔNG TY CỔ PHẨN THUỐC SÁT TRÙNG CẦN THƠ BẰNG DÒNG VI TẢO Chlorella sp. VÀ Scenedesmus sp. CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN PGS. TS. NGUYỄN HỮU HIỆP BÙI HOÀNG KHANG MSSV: 3092477 LỚP: CNSH TT K35 Cần Thơ, 12/2013 Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN (ký tên) SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) PGS. TS. Nguyễn Hữu Hiệp Bùi Hoàng Khang DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình thực luận văn tốt nghiệp, em nhận hỗ trợ động viên giúp đỡ tận tình cha mẹ, quý thầy cô, anh chị bạn để em hoàn thành tốt luận văn này. Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cám ơn chân thành đến: PGS. TS. Nguyễn Hữu Hiệp tận tình bảo, truyền đạt kiến thức tạo điều kiện thuận lợi từ việc định hướng luận văn, theo dõi tiến trình thí nghiệm, giải vấn đề phát sinh lúc làm thí nghiệm lúc viết luận văn. Quý Thầy Cô Viện NC PT Công nghệ Sinh học quan tâm tạo điều kiện tốt cho em nghiên cứu hoàn thành luận văn. Quý thầy cô, anh, chị quản lý phòng thí nghiệm Viện NC PT Công nghệ Sinh học dự án AKIZ bạn lớp Công nghệ Sinh học Tiên Tiến Khóa 35 hỗ trợ thực quy trình cách thức sử dụng trang thiết bị phục vụ cho đề tài. Tôi xin gửi lời tri ân đến gia đình, người thân bạn bè ủng hộ mặt vật chất tinh thần để an tâm hoàn thành tốt đề tài mình. Xin kính chúc quý Thầy cô, ba mẹ, anh chị dồi sức khỏe chúc bạn lớp Công nghệ Sinh học Tiên Tiến Khóa 35 báo cáo luận văn thành công tốt đẹp. Tôi xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 Bùi Hoàng Khang Chuyên ngành Công nghệ Sinh học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT TÓM TẮT Hiện nay, vấn đề ô nhiễm môi trường nhận nhiều quan tâm xã hội. Đặc biệt, nhiều nhà máy sản xuất thuốc trừ sâu gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng trực tiếp đến đời sống sinh hoạt sức khỏe người dân. Trong đó, Chlorella sp. Scenedesmus sp. hai dòng vi tảo ứng dụng để xử lý nhiều dạng nước thải từ lâu có tiềm xử lý nước thải công nghiệp lớn. Kết đề tài cho thấy trình xử lý phương pháp oxy hóa làm giảm độc tính số COD hàm lượng số kim loại nặng đồng, niken kẽm lại tăng lên. Tuy nhiên, kết hợp với phương pháp xử lý sử dụng vi tảo Chlorella sp. loại trừ kim loại nặng kim loại nặng tồn đọng khác nhôm sắt. Ngược lại, vi tảo cần bước xử lý phương pháp oxy hóa làm giảm độc tính để phát triển làm giảm số COD thấp nữa. Kết hợp phương pháp xử lý hóa học ban đầu sau phương pháp sinh học đánh giá phù hợp để xử lý nước thải từ nhà máy công ty thuốc sát trùng Cần Thơ. Từ khóa: Chlorella sp., COD, kim loại nặng, Scenedesmus sp. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT MỤC LỤC LỜI CẢM TẠ . ii TÓM TẮT . iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH BẢNG .vi DANH SÁCH HÌNH vii CÁC TỪ VIẾT TẮT . viii CHƯƠNG I. GIỚI THIỆU 1.1. Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu CHƯƠNG II. LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược tảo .2 2.1.1 Ứng dụng tảo 2.1.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến tăng trưởng vi tảo 2.1.3 Phương pháp nuôi vi tảo .4 2.1.4 Một số phương pháp xác định trình sinh trưởng vi tảo .5 2.2 Sơ lược Scenedesmus sp. .6 2.3 Sơ lược Chlorella sp. . 2.4 Khả xử lý nước thải độc hại tảo . 2.4.1 Khả xử lý kim loại nặng tảo .9 2.4.2 Khả xử lý hợp chất phenol tảo .10 2.4.3 Khả xử lý thuốc trừ sâu tảo 12 2.5 Giới thiệu tiêu nước thải từ nhà máy thuốc trừ sâu. 13 2.5.1 LUMIStox .13 2.5.1 Nitritox 14 2.5.1 Phương pháp quang phổ khối plasma cảm ứng (ICP-MS) .14 CHƯƠNG III. PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT 3.1 Phương tiện nghiên cứu . 16 3.1.1 Thời gian địa điểm 16 3.1.2 Dụng cụ, thiết bị 16 3.1.3 Vật liệu 17 3.2 Phương pháp nghiên cứu 17 CHƯƠNG IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 4.1 Khảo sát phát triển hai dòng vi tảo hai loại nước thải từ nhà máy sản xuất thuốc sát trùng Cần Thơ 19 4.2 Khảo sát số Nitritox nghiệm thức .21 4.3 Khảo sát số Lumistox nghiệm thức 22 4.4 Khả làm giảm số số COD dòng vi tảo . 23 4.5 Khảo sát khả xử lý kim loại nặng hai dòng vi tảo 24 4.5.1 Nhôm .24 4.5.2 Đồng 25 4.5.3 Sắt 26 4.5.4 Niken .27 4.5.4 Kẽm .28 CHƯƠNG V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 5.1 Kết luận .29 5.2 Đề nghị 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 PHỤ LỤC Chuyên ngành Công nghệ Sinh học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Bảng 1. Tóm tắt ưu điểm nhược điểm phương pháp nuôi tảo .5 Bảng 2. Chỉ số Lumistox nghiệm thức nước thải loại 2. 22 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Hình 1. Tảo Scenedesmus sp. Hình 2. Tảo Chlorella sp. Hình 3. Mật số hai dòng vi tảo hai loại nước thải .19 Hình 4. Bố trí thí nghiệm ngày thứ nhất. 20 Hình 5. Bố trí thí nghiệm ngày thứ hai. 20 Hình 6. Bố trí thí nghiệm ngày thứ năm. 20 Hình 7. Chỉ số Nitritox nghiệm thức 21 Hình 8. Chỉ số Lumistox nghiệm thức nước thải loại 2. 22 Hình 9. Chỉ số COD nghiệm thức 23 Hình 10. Hàm lượng nhôm nghiệm thức .24 Hình 11. Hàm lượng đồng nghiệm thức 25 Hình 12. Hàm lượng sắt nghiệm thức 26 Hình 13. Hàm lượng niken nghiệm thức .27 Hình 14. Hàm lượng kẽm nghiệm thức .28 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT CÁC TỪ VIẾT TẮT AKIZ: IntegriertesAbwasserkonzept für Industriezonen BBM: bold-basal medium COD: chemical oxygen demand TEM: transmission electron microscopy EC: effective concentration TAG: triacylglyceride Chuyên ngành Công nghệ Sinh học viii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT CHƯƠNG I. GIỚI THIỆU 1.1. Đặt vấn đề Hiện nay, vấn đề ô nhiễm môi trường nhận nhiều quan tâm xã hội. Nhiều điều luật môi trường soạn thảo thông qua với điều kiện ngày khắt khe hơn. Vì thế, chiến với ô nhiễm bắt đầu với mục tiêu bảo vệ sức khỏe, môi trường phát triển bền vững. Ngày nay, tầm quan trọng chiến lược nước công nhận rộng rãi, vấn đề liên quan đến chiến lược quản lý nước bền vững nhận thấy hoạt động khoa học, xã hội trị, tài nguyên nước gặp phải khó khăn nghiêm trọng số lượng chất lượng. Đi kèm với công nghiệp hóa phát triển kinh tế tình trạng ô nhiễm môi trường nặng nề nhận thấy nhiều nơi giới. Chất lượng nước vấn đề sống Đồng Sông Cửu Long. Chất lượng nước đo đạc khác tùy theo vị trí yếu tố bao gồm mật độ dân cư, mức độ công nghiệp hóa phát triển kinh tế,… Ô nhiễm môi trường chủ yếu tác động người, xảy nồng độ chất có tự nhiên tăng đột biến loại hóa chất tổng hợp bị thải môi trường. Đặc biệt, nhiều nhà máy sản xuất thuốc trừ sâu gây ô nhiễm môi trường, ảnh hưởng trực tiếp đến đời sống sinh hoạt sức khỏe người dân. Trong đó, Chlorella sp. Scenedesmus sp. hai dòng vi tảo ứng dụng để xử lý nhiều dạng nước thải từ lâu có tiềm xử lý nước thải công nghiệp lớn. 1.2 Mục tiêu Xác định khả sử dụng dòng vi tảo Chlorella sp. Scenedesmus sp. để xử lý nước thải qua bước tiền xử lý hóa lý. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT c/ Số liệu thống kê số Lumistox nghiệm thức W2-10% Summary Statistics for Concentration EC Count Average Variance 20 30 40 50 60 70 80 Total 3 3 3 21 1.951 3.661 6.123 10.1503 15.748 26.357 49.4303 16.203 0.018187 0.048853 0.071343 0.283902 0.659701 1.43459 8.17521 256.974 Standard deviation 0.134859 0.221027 0.267101 0.532825 0.81222 1.19774 2.85923 16.0304 Coeff. of variation 6.91231% 6.03734% 4.36226% 5.24933% 5.15761% 4.54431% 5.78437% 98.935% Standard error 0.077861 0.12761 0.154211 0.307627 0.468935 0.691517 1.65078 3.49812 Range 0.251 0.442 0.525 1.051 1.621 2.083 5.704 50.311 ANOVA Table for Concentration by EC Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 5118.09 853.014 0.0000 Within groups 21.3836 14 1.5274 Total (Corr.) 5139.47 20 558.48 Multiple Range Tests for Concentration by EC Method: 95.0 percent LSD EC Count Mean Homogeneous Groups 20 30 40 50 60 70 80 3 3 3 1.951 3.661 6.123 10.1503 15.748 26.357 49.4303 X X Chuyên ngành Công nghệ Sinh học X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT d/ Số liệu thống kê số Lumistox nghiệm thức W2-C Summary Statistics for Concentration EC Count Average Variance 20 30 40 50 60 70 80 Total 3 3 3 21 0.000961 0.015727 0.806148 0.165412 2.16587 7.08478 0.546481 517.851 3.24 5.989 9.395 14.859 27.209 44.387 68.399 24.7826 Standard deviation 0.031 0.125407 0.897857 0.406709 1.47169 2.66173 0.739244 22.7563 Coeff. of variation 0.95679% 2.09396% 9.55676% 2.73712% 5.40883% 5.99663% 1.08078% 91.824% Standard error 0.0178979 0.072404 0.518378 0.234813 0.84968 1.53675 0.426802 4.96584 Range 0.062 0.245 1.668 0.766 2.942 4.823 1.457 65.991 ANOVA Table for Concentration by EC Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 10335.4 1722.57 1118.00 0.0000 Within groups 21.5708 14 1.54077 Total (Corr.) 10357.0 20 Multiple Range Tests for Concentration by EC Method: 95.0 percent LSD EC Count Mean Homogeneous Groups 20 30 40 50 60 70 80 3 3 3 3.24 5.989 9.395 14.859 27.209 44.387 68.399 X Chuyên ngành Công nghệ Sinh học X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT e/ Số liệu thống kê số Lumistox nghiệm thức W2-S Summary Statistics for Concentration EC Count Average Variance 20 30 40 50 60 70 80 Total 3 3 3 21 0.0296583 0.0065323 0.0281363 1.34338 0.670636 6.53223 6.09505 239.355 1.89733 3.76733 5.93567 10.0037 15.3457 23.9243 48.2197 15.5848 Standard deviation 0.172216 0.0808229 0.167739 1.15904 0.818924 2.55582 2.46882 15.4711 Coeff. of variation 9.07674% 2.14536% 2.82595% 11.5862% 5.33652% 10.6829% 5.11994% 99.2703% Standard error 0.0994289 0.0466631 0.0968441 0.669174 0.472806 1.4756 1.42537 3.37607 Range 0.31 0.161 0.323 2.284 1.468 4.475 4.922 49.095 ANOVA Table for Concentration by EC Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 4757.68 792.947 377.45 0.0000 Within groups 29.4112 14 2.1008 Total (Corr.) 4787.09 20 Multiple Range Tests for Concentration by EC Method: 95.0 percent LSD EC Count Mean Homogeneous Groups 20 30 40 50 60 70 80 3 3 3 1.89733 3.76733 5.93567 10.0037 15.3457 23.9243 48.2197 X XX X X Chuyên ngành Công nghệ Sinh học X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT f/ Số liệu thống kê số Nitritox nghiệm thức Summary Statistics for Percentage Sample Count Average Variance W1-100% W1-50% W1-A W1-C W1-S W2-10% W2-100% W2-A W2-C W2-S Total 3 3 3 3 3 30 15.6667 7.1 6.1 5.56667 7.43333 23.3 77.5333 23.2 17.1 27.6 21.06 2.57333 0.28 0.39 0.423333 0.003333 1.99 1.80333 0.31 3.87 1.89 428.256 Standard deviation 1.60416 0.52915 0.6245 0.650641 0.057735 1.41067 1.34288 0.556776 1.96723 1.37477 20.6944 Coeff. of variation 10.2393% 7.45282% 10.2377% 11.6882% 0.776704% 6.05439% 1.73201% 2.3999% 11.5043% 4.98106% 98.2638% Standard error 0.926163 0.305505 0.360555 0.375648 0.033333 0.814453 0.775314 0.321455 1.13578 0.793725 3.77825 Range 3.2 1.0 1.2 1.3 0.1 2.8 2.5 1.1 3.9 2.7 73.6 ANOVA Table for Percentage by Sample Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 12392.4 1376.93 1017.44 0.0000 Within groups 27.0667 20 1.35333 Total (Corr.) 12419.4 29 Multiple Range Tests for Percentage by Sample Method: 95.0 percent LSD Sample W1-C W1-A W1-50% W1-S W1-100% W2-C W2-A W2-10% W2-S W2-100% Count 3 3 3 3 3 Mean 5.56667 6.1 7.1 7.43333 15.6667 17.1 23.2 23.3 27.6 77.5333 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT g/ Số liệu thống kê hàm lượng nhôm nghiệm thức Summary Statistics for Aluminum Sample Count Average Variance W1-100% W1-50% W1-A W1-C W1-S W2-10% W2-100% W2-A W2-C W2-S Total 3 3 3 3 3 30 0.0001421 0.0000799 0.0000522 0.000172 0.000031 0.0000141 0.0003514 0.0000012 0.0000156 0.0000065 0.0102686 0.28133 0.1455 0.14553 0.11113 0.13317 0.03957 0.33027 0.03657 0.0362 0.03447 0.12937 Standard deviation 0.0119215 0.00894036 0.00722795 0.0131154 0.00565361 0.00375544 0.018745 0.00107858 0.00395095 0.00254231 0.101334 Coeff. of variation 4.238% 6.145% 4.967% 11.802% 4.246% 9.491% 5.676% 2.95% 10.914% 7.376% 78.327% Standard error 0.0068829 0.0051617 0.0041731 0.0075722 0.0032641 0.0021682 0.0108224 0.0006227 0.0022811 0.0014678 0.018501 Range 0.0221 0.017 0.0144 0.0258 0.0108 0.0075 0.0342 0.002 0.0074 0.0045 0.3201 ANOVA Table for Aluminum by Sample Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.296055 0.032895 379.42 0.0000 Within groups 0.00173397 20 0.0000866987 Total (Corr.) 0.297789 29 Multiple Range Tests for Aluminum by Sample Method: 95.0 percent LSD Sample W2-S W2-C W2-A W2-10% W1-C W1-S W1-50% W1-A W1-100% W2-100% Count 3 3 3 3 3 Mean 0.0344667 0.0362 0.0365667 0.0395667 0.111133 0.133167 0.1455 0.145533 0.281333 0.330267 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT h/ Số liệu thống kê hàm lượng đồng nghiệm thức Summary Statistics for Copper Sample Count Average Variance W1-100% W1-50% W1-A W1-C W1-S W2-10% W2-100% W2-A W2-C W2-S Total 3 3 3 3 3 30 0.00045733 0.00036885 0.00025264 0.00003265 0.00017872 0.00002161 0.00043887 0 0.0592532 0.78203 0.34053 0.3223 0.07463 0.1101 0.0405 0.3705 0 0.20406 Standard deviation 0.0213854 0.0192056 0.0158947 0.0057143 0.0133686 0.0046487 0.0209492 0 0.24342 Coeff. of variation 2.73458% 5.63985% 4.93163% 7.65651% 12.1423% 11.4782% 5.65431% % % % 119.288% Standard error 0.0123468 0.0110883 0.0091768 0.0032992 0.0077184 0.0026839 0.012095 0 0.0444422 Range 0.042 0.0384 0.0316 0.0114 0.026 0.0091 0.0411 0 0.8007 ANOVA Table for Copper by Sample Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.71484 0.190538 1088.37 0.0000 Within groups 0.00350136 20 0.000175068 Total (Corr.) 1.71834 29 Multiple Range Tests for Copper by Sample Method: 95.0 percent LSD Sample W2-A W2-C W2-S W2-10% W1-C W1-S W1-A W1-50% W2-100% W1-100% Count 3 3 3 3 3 Mean 0 0.0405 0.0746333 0.1101 0.3223 0.340533 0.3705 0.782033 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT i/ Số liệu thống kê hàm lượng sắt nghiệm thức Summary Statistics for Iron Sample Count Average W1-100% W1-50% W1-A W1-C W1-S W2-10% W2-100% W2-A W2-C W2-S Total 3 3 3 3 3 30 0.129633 0.061233 0.052 0.015167 0.049133 0.037967 0.3552 0.036367 0.0266 0.0318 0.07951 Variance Standard deviation 0.0002356 0.0153494 0.0000984 0.00992085 0.0000094 0.00306105 0.0000036 0.00190088 0.0000396 0.0062963 0.0000018 0.00135769 0.0008245 0.0287146 0.0000016 0.00126623 7.9E-7 0.00088882 9.1E-7 0.00095394 0.00973911 0.0986869 Coeff. of variation 11.84% 16.2% 5.89% 12.53% 12.81% 3.58% 8.08% 3.4% 3.34% 3% 124.12% Standard error 0.00886197 0.00572781 0.0017673 0.00109747 0.00363517 0.00078387 0.0165784 0.00073106 0.00051316 0.00055076 0.0180177 ANOVA Table for Iron by Sample Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.280002 0.0311113 255.78 0.0000 Within groups 0.00243266 20 0.000121633 Total (Corr.) 0.282434 29 Multiple Range Tests for Iron by Sample Method: 95.0 percent LSD Sample W1-C W2-C W2-S W2-A W2-10% W1-S W1-A W1-50% W1-100% W2-100% Count 3 3 3 3 3 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Mean 0.0151667 0.0266 0.0318 0.0363667 0.0379667 0.0491333 0.052 0.0612333 0.129633 0.3552 Homogeneous Groups X XX XXX XXX XXX XXX XX X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Range 0.0304 0.0197 0.0061 0.0038 0.0111 0.0027 0.0547 0.0024 0.0017 0.0017 0.3743 Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT j/ Số liệu thống kê hàm lượng niken nghiệm thức Summary Statistics for Nickel Sample Count Average Variance W1-100% W1-50% W1-A W1-C W1-S W2-10% W2-100% W2-A W2-C W2-S Total 3 3 3 3 3 30 0.00025737 0.00013588 0.00003241 0.00007294 0.00000994 0 0 0.00523058 0.2268 0.1179 0.0936 0.0616 0.0664 0 0 0.0566 Standard deviation 0.0160429 0.0116568 0.005693 0.0085407 0.0031533 0 0 0.0723227 Coeff. of variation 7.0746% 9.887% 6.0822% 13.857% 4.7466% % % % % % 127.7% Standard error 0.00926235 0.00673003 0.00328684 0.00493097 0.00182056 0 0 0.0132043 Range 0.0318 0.023 0.0109 0.0169 0.0062 0 0 0.2439 ANOVA Table for Nickel by Sample Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.15067 0.0167411 329.19 0.0000 Within groups 0.0010171 20 0.000050855 Total (Corr.) 0.151687 29 Multiple Range Tests for Nickel by Sample Method: 95.0 percent LSD Sample W2-100% W2-C W2-A W2-S W2-10% W1-C W1-S W1-A W1-50% W1-100% Count 3 3 3 3 3 Mean 0 0 0.0616333 0.0664333 0.0936 0.1179 0.226767 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT k/ Số liệu thống kê hàm lượng kẽm nghiệm thức Summary Statistics for Zinc Sample Count Average W1-100% W1-50% W1-A W1-C W1-S W2-10% W2-100% W2-A W2-C W2-S Total 3 3 3 3 3 30 0.67007 0.332 0.2911 0.12857 0.02557 0.02307 0.2483 0.0244 0.01833 0.0178 0.17792 Variance Standard deviation 0.0021022 0.0458498 0.0001624 0.0127424 0.0004448 0.02109 0.0006104 0.0247067 0.0000156 0.0039514 0.0000032 0.0017954 0.0002172 0.0147391 0.0000057 0.0023896 8.03333E-7 0.0008963 0.0000055 0.0023516 0.0424544 0.206045 Coeff. of variation 6.8426% 3.8381% 7.244% 19.217% 15.455% 7.7834% 5.935% 9.7933% 4.8889% 13.211% 115.81% Standard error 0.0264714 0.00735686 0.0121763 0.0142644 0.00228133 0.00103655 0.0085096 0.00137961 0.00051747 0.00135769 0.0376184 Range 0.0916 0.0254 0.0421 0.0494 0.0078 0.0034 0.0262 0.0047 0.0016 0.0043 0.702 ANOVA Table for Zinc by Sample Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.22404 0.136005 381.19 0.0000 Within groups 0.00713581 20 0.000356791 Total (Corr.) 1.23118 29 Multiple Range Tests for Zinc by Sample Method: 95.0 percent LSD Sample W2-S W2-C W2-10% W2-A W1-S W1-C W2-100% W1-A W1-50% W1-100% Count 3 3 3 3 3 Mean 0.0178 0.0183333 0.0230667 0.0244 0.0255667 0.128567 0.2483 0.2911 0.332 0.670067 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT m/ Số liệu thống kê mật số tảo nghiệm thức W1-C Summary Statistics for Density Day Count Average Variance Day Day Day Day Day Total 3 3 15 105.333 127.0 169.333 154633. 40300.0 6.50787E6 143.667 174.0 208.333 5296.67 5090.0 2182.53 Standard deviation 10.2632 11.2694 13.0128 393.234 200.749 2551.05 Coeff. of variation 7.14376% 6.47668% 6.24615% 7.42419% 3.94398% 116.885% Standard error 5.92546 6.50641 7.51295 227.034 115.902 658.679 Range 20.0 20.0 26.0 750.0 370.0 5605.0 ANOVA Table for Density by Day Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 9.07195E7 2.26799E7 580.54 0.0000 Within groups 390670. 10 39067.0 Total (Corr.) 9.11102E7 14 Multiple Range Tests for Density by Day Method: 95.0 percent LSD Day Day Day Day Day Day Count 3 3 Mean 143.667 174.0 208.333 5090.0 5296.67 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT n/ Số liệu thống kê mật số tảo nghiệm thức W2-C Summary Statistics for Density Day Count Average Variance Day Day Day Day Day Total 3 3 15 67.0 10.3333 1.0 9.0 6.33333 2762.17 147.0 21.3333 17.0 24.0 19.6667 45.8 Standard deviation 8.18535 3.21455 1.0 3.0 2.51661 52.5564 Coeff. of variation 5.56827% 15.0682% 5.88235% 12.5% 12.7963% 114.752% Standard error 4.72582 1.85592 0.57735 1.73205 1.45297 13.57 Range 16.0 6.0 2.0 6.0 5.0 138.0 ANOVA Table for Density by Day Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 38483.1 9620.77 513.56 0.0000 Within groups 187.333 10 18.7333 Total (Corr.) 38670.4 14 Multiple Range Tests for Density by Day Method: 95.0 percent LSD Day Count Mean Homogeneous Groups Day Day Day Day Day 3 3 17.0 19.6667 21.3333 24.0 147.0 X X X X Chuyên ngành Công nghệ Sinh học X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT o/ Số liệu thống kê mật số tảo nghiệm thức W1-S Summary Statistics for Density Day Count Average Variance Day Day Day Day Day Total 3 3 15 26.3333 11.3333 1.33333 1.33333 8.06667 6.33333 4.33333 0.333333 2.33333 109.067 Standard deviation 2.51661 2.08167 0.57735 1.52753 10.4435 Coeff. of variation 9.55675% 18.3676% 43.3013% 114.564% % 129.465% Standard error 1.45297 1.20185 0.333333 0.881917 2.6965 Range 5.0 4.0 1.0 3.0 29.0 ANOVA Table for Density by Day Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1500.27 375.067 0.0000 Within groups 26.6667 10 2.66667 Total (Corr.) 1526.93 14 140.65 Multiple Range Tests for Density by Day Method: 95.0 percent LSD Day Count Mean Homogeneous Groups Day Day Day Day Day 3 3 1.33333 1.33333 11.3333 26.3333 X X X Chuyên ngành Công nghệ Sinh học X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT p/ Số liệu thống kê mật số tảo nghiệm thức W2-S Summary Statistics for Density Day Count Average Variance Day Day Day Day Day Total 3 3 15 26.0 9.0 1.33333 1.0 7.46667 3.0 1.0 0.333333 1.0 103.838 Standard deviation 1.73205 1.0 0.57735 1.0 10.1901 Coeff. of variation 6.66173% 11.1111% 43.3013% 100.0% % 136.475% Standard error 1.0 0.57735 0.333333 0.57735 2.63107 Range 3.0 2.0 1.0 2.0 28.0 ANOVA Table for Density by Day Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1443.07 360.767 338.22 0.0000 Within groups 10.6667 10 1.06667 Total (Corr.) 1453.73 14 Multiple Range Tests for Density by Day Method: 95.0 percent LSD Day Day Day Day Day Day Count 3 3 Mean 1.0 1.33333 9.0 26.0 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT 3/ Phương pháp đếm mật số - Pha loãng huyền phù tế bào vi sinh vật cho ô lớn từ 10-15 tế bào. - Lắc mạnh dịch huyền phù tế bào, dùng pippet Pasteur để hút dịch huyền phù - Đậy buồng đếm phiến kính mỏng. - Nhẹ nhàng dùng đầu col (chứa 10 μl tế bào vi sinh vật), đặt vào cạnh buồng đếm (nơi tiếp giáp với phiến kính mỏng). Dịch huyền phù vào buồng đếm nhờ chế mao dẫn. Buồng đếm chuẩn bị có vùng không gian nằm kính buồng đếm phủ dịch huyền phù tế bào, rãnh chung quanh không bị dính ướt. - Di chuyển nhẹ nhàng khung đếm để dịch huyền phù tràn đầy khoang. Khi đó, dịch nằm khoang có độ dày khoảng 0,1mm. - Đặt buồng đếm lên kính hiển vi, sử dụng vật kính X10 để tìm buồng đếm. Chỉnh thật rõ, sau chuyển qua vật kính X40 để đếm. - Điều chỉnh cường độ ánh sáng để quan sát rõ ràng tế bào lẫn đường kẻ. Tùy vào số lượng tế bào mà chọn cách đếm tất tế bào có ô trung tâm hay đếm tế bào có ô vuông lớn đại diện. Thông thường, chọn ô trung tâm bốn ô nằm bìa (có đánh dấu X) ô theo đường chéo. - Bắt đầu đếm tế bào sau nhỏ giọt dịch từ 3-5 phút; phải đếm tế bào nằm hai đường kẻ bên trái trên, đường kẻ bên phải không đếm. Đếm Không đếm Hình 15. Buồng đếm hồng cầu Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT Đếm tất tế bào ô vuông đỏ (16x5 ô nhỏ) đếm đại diện, mật số thấp ta đếm hết 25 ô. Công thức tính cho đếm 25 ô N 4000.a .k .10  10 4.a.k 16.25 Trong N mật số tế bào/ml. k hệ số pha loãng. a số tế bào đếm 16x25 ô vuông nhỏ. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 2013 Trường ĐHCT 4/ Thành phần môi trường nuôi tảo BBM Bảng 8. Thành phần môi trường nuôi tảo BBM (Stein, 1973) Dung dịch stock (g/L) Thể tích sử dụng cho lít môi trường (mL) 1. KH2PO4 17,5 10 2. CaCl2.2H2O 2,5 10 3. MgSO4.7H2O 7,5 10 4. NaNO3 25 10 5. K2HPO4 7,5 10 6. NaCl 2,5 10 7. Na2EDTA 10 KOH 6,2 8. FeSO4.7H2O 4,98 H2SO4 đặc mL 9. Dung dịch siêu vi lượng H3BO3 2,86 MnCl2.4H2O 1,81 ZnSO4.7H2O 0,222 Na2MoO4.5H2O 0,390 CuSO4.5H2O 0,079 Co(NO3)2.6H2O 0,0494 10. H3BO3 8,05 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học [...]... chủng tảo Chlorella sp W2-100%: Nước thải loại 2 đầu vào không pha loãng W2-10%: Nước thải loại 2 đầu vào pha loãng 10% Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 17 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 20 13 W2-A: Trường ĐHCT Nước thải loại 2 pha loãng 10% không chủng tảo nhưng vẫn sục khí và chiếu sáng W2-S: Nước thải loại 2 pha loãng 10% sau khi được chủng tảo Scenedesmus sp W2-C:... vi tảo được nuôi trong hai loại nước thải có bổ sung chất dinh dưỡng để đánh giá ảnh hưởng của nước thải lên khả năng sinh trưởng và khả năng xử lý nước thải của hai dòng vi tảo Kết quả thí nghiệm cho thấy chỉ có nghiệm thức tảo Chlorella sp nuôi trong môi trường nước thải đã qua quá trình xử lý oxy hóa là có sự gia tăng mật số và đạt giá trị cao nhất vào ngày thứ tư Hình 3 Mật số của hai dòng vi tảo. .. W2-100% W2-10% W2-A W2-S W2-C EC20 0. 523 1.951 2. 004 1.897 3 .24 0 EC30 0.881 3.661 3.6 92 3.767 5.989 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học EC40 1.350 6. 123 5.456 5.936 9.395 EC50 1.997 10.150 9.676 10.004 14.859 22 EC60 2. 956 15.748 15 .22 9 15.346 27 .20 9 EC70 4.531 26 .357 24 .500 23 . 924 44.387 EC80 7.6 32 49.430 48.155 48 .22 0 68.399 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 20 13 Trường... chỉ số COD của 2 dòng vi tảo Kết quả thí nghiệm trên cho thấy với độ độc rất cao trong nước thải loại 2 nên vi tảo không phát triển và không làm giảm chỉ số COD trong môi trường nước thải loại 2, khác biệt giữa các nghiệm thức nước thải đầu vào, chủng tảo và đối chứng không có ý nghĩa thống kê Ngược lại, với sự phát triển mạnh trong môi trường nước thải loại 1, dòng vi tảo Chlorella sp đã xử lý được 80%... Chlorella sp và Scenedesmus sp từ Vi n Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Cần Thơ -Hai loại nước thải: -Loại 1: đã qua quá trình xử lý bằng phương pháp oxy hóa được pha loãng 50% với nước cất (50% nước thải + 50% nước cất) -Loại 2: chưa qua quá trình xử lý bằng phương pháp oxy hóa được pha loãng 10% với nước cất (10% nước thải + 90% nước cất) Nước thải loại 2 được pha loãng nhiều hơn... TP2 – dự án AKIZ Dùng phần mềm Microsoft Excel để nhập số liệu và phân tích kết quả bằng phần mềm thống kê STATGRAPHIC 16 .2. 04 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 18 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 20 13 Trường ĐHCT CHƯƠNG IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Khảo sát sự phát triển của hai dòng vi tảo trong hai loại nước thải từ nhà máy sản xuất thuốc sát trùng Cần Thơ Hai dòng. .. Thời gian và địa điểm Thời gian: từ tháng 08 /20 13 – 11 /20 13 Địa điểm: Phòng thí nghiệm Vi sinh vật, Vi n Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, Đại học Cần Thơ; các phòng thí nghiệm của tiểu dự án TP2, TP5 thuộc dự án AKIZ 3.1 .2 Dụng cụ, thiết bị Mẫu tảo: Chlorella sp và Scenedesmus sp từ Vi n Nghiên cứu và Phát triển Công nghệ Sinh học, Trường Đại học Cần Thơ + Thiết bị thí nghiệm Máy sục khí,... phẩm, xử lý nước thải và nhiên liệu sinh học (Aslan và Kapdan, 20 06; Becker, 1994; Feng et al., 20 11; Gellenbeck, 20 12) 2. 1 .2 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự tăng trưởng của vi tảo Sự tăng trưởng và thành phần hóa học của vi tảo chủ yếu được điều khiển bằng ánh sáng, nhiệt độ, lượng khí CO2 có sẵn, pH, và các chất dinh dưỡng (Tzovenis et al., 1997, Zhu et al., 1997) Nhiệt độ tác động lên phản ứng sinh hóa và. .. Tủ cấy vô trùng, tủ ủ tảo Nồi khử trùng nhiệt ướt Máy ly tâm Cân điện tử Kính hiển vi + Dụng cụ thí nghiệm Micropippet Ống nghiệm, erlen (500 -20 00ml) Ống đong Đèn cồn, kẹp Buồng đếm hồng cầu Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 16 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 20 13 Trường ĐHCT 3.1.3 Vật liệu Hai loại nước thải từ nhà máy Công ty cổ phần Thuốc sát trùng Cần Thơ: -Mẫu... pho, kali, magiê, canxi và sắt) và nguyên tố vi lượng, vì đó là một phần của khu phức hợp enzyme và vitamin Những yếu tố này cũng bao gồm cũng mangan, kẽm, molypden, đồng và coban 2. 4 Khả năng xử lý nước thải độc hại của tảo Vi tảo tham gia vào quá trình xử lý loại trừ các chất dinh dưỡng, chất độc hữu cơ, kim loại nặng và mầm bệnh từ nước thải công nghiệp và tạo ra một nguồn nguyên liệu thô để sản xuất . HỮU HIỆP SINH VIÊN THỰC HIỆN BÙI HOÀNG KHANG MSSV: 30 92 477 LỚP: CNSH TT K35 Cần Thơ, 12/20 13 Luân văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 TT - 20 13 Trường ĐHCT Chuyên ngành Công nghệ Sinh học. Đại học Khóa 35 TT - 20 13 Trường ĐHCT Chuyên ngành Công nghệ Sinh học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học 3. 1 Phương tiện nghiên cứu 16 3. 1.1 Thời gian và địa điểm 16 3. 1.2 Dụng cụ,. nghiên cứu 16 3. 1.1 Thời gian và địa điểm 16 3. 1.2 Dụng cụ, thiết bị 16 3. 1 .3 Vật liệu 17 3. 2 Phương pháp nghiên cứu 17 CHƯƠNG IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 4.1 Khảo sát sự phát triển của hai