B GIO DC & O TO VIN HN LM KHOA HC & CễNG NGH VN VIN HểA SINH BIN NGUYN TH DIU THUN NGHIấN CU THNH PHN HểA HC V KHO ST HOT TNH SINH HC CA LOI XO LEO (PARAMIGNYA SCANDENS (GRIFF.) CRAIB) LM NG LUN N TIN S HểA HC H NI - 2015 B GIO DC & O TO VIN HN LM KHOA HC & CễNG NGH VN VIN HểA SINH BIN NGUYN TH DIU THUN NGHIấN CU THNH PHN HểA HC V KHO ST HOT TNH SINH HC CA LOI XO LEO (PARAMIGNYA SCANDENS (GRIFF.) CRAIB) LM NG CHUYấN NGNH: HểA HC HU C M S: 62.44.01.14 LUN N TIN S HểA HC Ngi hng dn khoa hc 1: GS.VS. Chõu Vn Minh Ngi hng dn khoa hc 2: TS. Nguyn Hu Ton Phan H NI - 2015 LI CM N Tụi xin by t lũng bit n sõu sc n GS.VS. Chõu Vn Minh v TS. Nguyn Hu Ton Phan - nhng ngi Thy ó dnh cho tụi s hng dn, ch bo tn tỡnh sut quỏ trỡnh thc hin lun ỏn. hon thnh lun ỏn ny, tụi ó nhn c s giỳp ht sc nhit tỡnh ca: - Cỏc Thy Cụ giỏo, cỏc anh ch v cỏc bn ng nghip ti Vin Húa sinh bin - Vin Hn lõm Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam. - Cỏc anh ch v cỏc bn ng nghip ti Vin Nghiờn cu Khoa hc Tõy Nguyờn - Vin Hn lõm Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam. - Ban Ch nhim Chng trỡnh Khoa hc v Cụng ngh phc v phỏt trin Kinh t - Xó hi vựng Tõy Nguyờn v Ch nhim ti TN3/T14. Tụi xin chõn thnh cỏm n nhng s giỳp quý bỏu ú! Nguyn Th Diu Thun LI CAM OAN Tụi xin cam oan õy l cụng trỡnh nghiờn cu ca riờng tụi. Cỏc s liu, kt qu nờu lun ỏn l trung thc v cha tng c cụng b bt k cụng trỡnh no khỏc. Nguyn Th Diu Thun MC LC Trang Li cỏm n Li cam oan Mc lc Danh mc cỏc ký hiu, cỏc ch vit tt Danh mc cỏc bng Danh mc cỏc hỡnh nh, th M U . CHNG I: TNG QUAN TI LIU 1.1. Ngun ti nguyờn dc liu ti Lõm ng 1.1.1. Khỏi quỏt v tim nng cõy thuc ca Lõm ng . 1.1.2. Tỡnh hỡnh nghiờn cu thnh phn húa hc v hot tớnh sinh hc Vit Nam ca mt s loi thc vt tng t ti Lõm ng . 1.1.3. Mt s kt qu nghiờn cu trờn th gii v thnh phn húa hc ca mt s loi thc vt (tng t loi Lõm ng) 1.2. Gii thiu chung v chi Paramignya (Rutaceae): 1.2.1 c im sinh hc ca chi Paramignya (Rutaceae): 1.2.2 Hot tớnh sinh hc ca chi Paramignya (Rutaceae): 11 1.2.2.1 Hot tớnh sinh hc ca cỏc hp cht flavonoit . 11 1.2.2.2. Hot tớnh sinh hc ca cỏc hp cht coumarin 14 1.2.2.3. Hot tớnh sinh hc ca cỏc hp cht triterpen dng khung tirucallan . 15 1.2.2.4. Hot tớnh sinh hc ca chi Paramignya 16 1.3. Thnh phn húa hc ca cỏc loi thuc chi Paramignya (Rutaceae) . 18 1.3.1. Tng quan cỏc kt qu v ngoi nc 18 1.3.1.1. Cỏc cụng trỡnh ó cụng b trờn th gii 18 1.3.1.2. Cỏc cụng trỡnh ó cụng b nc: . 21 1.4. Cỏc hp cht Tirucallan 23 1.4.1. Ph 1H-NMR ca cỏc hp cht tirucallan 24 1.4.2. Ph 13C-NMR ca cỏc hp cht tirucallan . 27 CHNG I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 28 2.1. i tng nghiờn cu . 28 2.2. Phng phỏp phõn lp cỏc hp cht . 28 2.2.1. Sc ký lp mng (TLC) . 28 2.2.2. Sc ký lp mng iu ch 29 2.2.3. Sc ký ct (CC) 29 2.3. Phng phỏp xỏc nh cu trỳc cỏc hp cht . 29 2.3.1. Phng phỏp quang ph t ngoi (UV) . 29 2.3.2. Phng phỏp quang ph hng ngoi (IR) 29 2.3.3. Phng phỏp cng hng t ht nhõn (NMR) 30 2.3.4. Phng phỏp ph (MS) 30 2.3.5. Thit b phõn tớch . 31 2.4. Phng phỏp nghiờn cu hot tớnh gõy c t bo . 31 2.4.1. Mc tiờu v c s lý thuyt 31 2.4.2. Vt liu . 32 2.4.3. Phng phỏp tin hnh . 32 2.5. Phng phỏp ỏnh giỏ kh nng kớch hot enzym caspase 3/7 34 2.6. Phng phỏp th hot tớnh khỏng viờm: 35 2.6.1. Nuụi cy t bo 35 2.6.2. o Cytokine . 35 CHNG 3. THC NGHIM 36 3.1. iu ch cỏc dch chit t Paramignya scandens: . 36 3.2. Nghiờn cu hot tớnh sinh hc dch chit . 37 3.3. Nghiờn cu húa hc cõy P. scandens . 37 3.3.1. Quy trỡnh phõn lp 37 3.3.2. Hng s vt lý v d kin ph ca cỏc hp cht phõn lp c: . 40 3.3.2.1. Hp cht 01 (PS16): Paramignyol A (Cht mi) 40 3.3.2.2. Hp cht 02 (PS15): Paramignyol B (Cht mi) 40 3.3.2.3. Hp cht 03 (PS31): Paramignyoside A (Cht mi) . 41 3.3.2.4. Hp cht 04 (PS32): Paramignyoside B (Cht mi) . 42 3.3.2.5. Hp cht 05 (PS28): Paramignyoside C (Cht mi) . 43 3.3.2.6. Hp cht 06 (PS30): Paramignyoside D (Cht mi) . 44 3.3.2.7. Hp cht 07 (PS29): Paramignyoside E (Cht mi) . 45 3.3.2.8. Hp cht 08 (PS01): Methyl isolimonate 46 3.3.2.9. Hp cht 09 (PS02): (6R,9S)-roseoside 46 3.3.2.10. Hp cht 10 (PS03): -D-glucopyranoside methyl salicylate . 47 3.3.2.11. Hp cht 11 (PS05): Adenosine 47 3.3.2.12. Hp cht 12 (PS09): 1,1-Dimethylprop-2-enyl 1-O--Dglucopyranoside 47 3.3.2.13. Hp cht 13 (PS10): Syrigin . 48 3.3.2.14. Hp cht 14 (PS13): Atripliside B 48 3.3.2.15. Hp cht 15 (PS18): trans-N-p-coumaroyl tyramine 49 3.3.2.16. Hp cht 16 (PS20): 2,6-dimethoxy-4[(1E)-prop-1-enyl]phenyl O-L-rhamno- pyranosyl-(16)--D-glucopyranoside 49 3.3.2.17. Hp cht 17 (PS21): Gusanlungionoside C 50 3.3.2.18. Hp cht 18 (PS23): Betulalbuside B . 50 3.3.2.19. Hp cht 19 (PS25): Syringaresinol di-O--D-glucopyranoside 51 CHNG 4. KT QU V THO LUN 52 4.1. Quy trỡnh phõn lp 52 4.2. Xỏc nh cu trỳc ca cỏc hp cht 54 4.2.1. Hp cht 01: Paramignyol A (Cht mi) . 54 4.2.2. Hp cht 02: Paramignyol B (Cht mi) . 59 4.2.3. Hp cht 03: Paramignyoside A (Cht mi) 63 4.2.4. Hp cht 04: Paramignyoside B (Cht mi) 69 4.2.5. Hp cht 05: Paramignyoside C (Cht mi) 72 4.2.6. Hp cht 06: Paramignyoside D (Cht mi) 75 4.2.7. Hp cht 07: Paramignyoside E (Cht mi) 79 4.2.8. Hp cht 08: Methyl isolimonate . 82 4.2.9. Hp cht 09: (6R,9S)-roseoside . 86 4.2.10. Hp cht 10: -D-glucopyranoside methyl salicylate . 89 4.2.11. Hp cht 11: Adenosine . 91 4.2.12. Hp cht 12: 1,1-Dimethylprop-2-enyl 1-O--D-glucopyranoside . 93 4.2.13. Hp cht 13: Syrigin 95 4.2.14. Hp cht 14: Atripliside B . 97 4.2.15. Hp cht 15: trans-N-p-coumaroyl tyramine 100 4.2.16. Hp cht 16: 2,6-dimethoxy-4[(1E)-prop-1-enyl]phenyl O--Lrhamnopyranosyl-(16)--D-glucopyranoside 102 4.2.17. Hp cht 17: Gusanlungionoside C . 105 4.2.18. Hp cht 18: Betulalbuside B 108 4.2.19. Hp cht 19: syringaresinol di-O--D-glucopyranoside . 111 4.3. Kt qu th hot tớnh 114 4.3.1. Hot tớnh gõy c t bo 114 4.3.2. Hot tớnh khỏng viờm . 117 4.4. Tng hp cỏc hp cht phõn lp t cõy xỏo leo P. scandens 117 KT LUN V KIN NGH . 120 DANH MC CễNG TRèNH CA TC GI 121 TI LIU THAM KHO . 122 PH LC . 128 DANH MC Kí HIU CC CH VIT TT Ký hiu 13 C-NMR H-NMR BMDC Ting Anh Din gii Carbon-13 nuclear magnetic Ph cng hng t ht nhõn resonance spectroscopy cacbon 13 Proton nuclear magnetic Ph cng hng t ht nhõn resonance spectroscopy proton Bone marrow-derived dendritic T bo uụi gai t ty xng cells CC Column chromatography Sc kớ ct COSY Correlation spectroscopy Ph tng tỏc chiu ng ht nhõn 1H-1H Cụng thc phõn t CTPT DEPT Distortionless enhancement by Ph DEPT polarisation transfer DMSO Dimethyl sulfoxide ESI-MS Electron spray ionization mass Ph lng ion húa phun mự spectra in t Fl Fibril sarcoma of Uteus Ung th mng t cung Glc Glucopyranoside HeLa Henrietta lacks Hep-G2 Human hepatocellular carcinoma Ung th gan ngi HL-60 Human leukemia 60 Ung th bch cu HMBC Heteronuclear mutiple bond Ph tng tỏc d ht nhõn qua connectivity nhiu liờn kt High resolution electronspray Ph lng phõn gii cao ionization mass spectrum phun mự in t Heteronuclear single-quantum Ph tng tỏc d ht nhõn qua coherence liờn kt HR-ESI-MS HSQC Ung th c t cung IC50 Inhibitory concentration at 50% Nng c ch 50% i tng th nghim IR Infrared spectroscopy Ph hng ngoi KB Human epidemoid carcinoma Ung th biu mụ ngi LNCaP Human prostatic carcinoma Ung th tin lit tuyn ngi LU Human lung carcinoma Ung th phi ngi MCF7 Michigan cancer foundation-7 Ung th vỳ ngi NF-B Nuclear factor kappa-light- Yu t nhõn kappa B chain-enhancer of activated B cells NOESY Nuclear overhauser effect Ph NOESY Spectroscopy Mt quang hc OD Optical density Rha Rhamnopyranoside RD Rhabdo sarcoma Ung th mng tim ROESY Rotating frame nuclear Ph ROESY overhauser effect spectroscopy Silica gel pha o RP-18 RP18 Reserve phase C-18 SRB Sulphorhodamine B TCA Trichloracetic acid Trichloracetic acid TLC Thin layer chromatography Sc ký lp mng TMS Tetramethylsilane Tetramethyl silan TNF- Tumor necrosis factor Yu t hoi t u Xyl Xylopyranoside 114 Bng 4.19. S liu ph 1H- v 13C-NMR ca hp cht 19 a C Aglycon 1(5) 2(6) 4(8) 1'(1'') 2'(2'') 3'(3'') 4'(4'') 5'(5'') 6'(6'') 3',5'(3'',5'')-OMe Glucose 1'''(1'''') 2'''(2'''') 3'''(3'''') 4'''(4'''') 5'''(5'''') 6'''(6'''') C Cb,c 53,7 85,1 71,4 53,58 85,03 71,32 134,1 104,5 152,6 137,2 152,6 104,5 56,6 133,72 104,22 152,60 137,08 152,60 104,22 56,41 102,9 74,3 76,7 70,0 77,2 61,1 102,65 74,14 76,48 69,91 77,16 60,89 H b,d dng pic (J = Hz) 3,09 m 4,67 d (3.5) 3,83 dd (3,0, 9,0) 4,20 dd (7,0, 9,0) 6,66 s 6,66 s 3,76 s 4,88 d (7,5) 3,20* 3,20* 3,13* 3,04 m 3,41 dd (4,5, 12,0) 3,60 dd (1,5, 12,0) C ca syringaresinol di-O--D-glucopyranoside [58], bo DMSO-d6, c125 MHz, d 500 MHz, *tớn hiu b chng lp a 4.3. Kt qu th hot tớnh 4.3.1. Hot tớnh gõy c t bo T kt qu trờn Bng 3.1 cho thy dch chit methanol ca cõy xỏo leo (P. scandens) cú hot tớnh gõy c t bo trờn c dũng t bo ung th Hep-G2 v RD vi IC50 ln lt l 6,45 v 13,88 g/ml, c bit trờn dũng t bo ung th gan HepG2 cú hot tớnh mnh hn. Kt qu th hot tớnh dit t bo ung th in vitro ca hai hp cht tirucallan mi paramignyol A v paramignyol B bng phng phỏp th SRB c th hin bng 4.20: 115 Bng 4.20. Kt qu hot tớnh khỏng t bo ung th in vitro ca Paramignyol A v Paramignyol B Giỏ tr IC50 (àM) Dũng t bo ung th ngi Paramignyol A Paramignyol B Ellipticine KB (biu mụ) 6,430,17 5,250,17 2,070,28 SK-Mel-2 (hc t) 6,020,17 3,550,15 1,090,24 LU-1 (phi) 10,500,17 6,480,17 1,750,24 MCF7 (vỳ) 7,220,23 5,980,09 1,870,20 Nh vy hai hp cht mi l Paramignyol A v Paramignyol B u cú hot tớnh khỏng t bo ung th trờn c dũng ung th biu mụ - KB, ung th hc t SKMel-2, ung th phi LU-1 v ung th vỳ MCF7, ú hp cht Paramignyol B cú hot tớnh mnh hn Paramignyol A. Tuy nhiờn, nng 100 àg/ml, 05 dn xut tirucallan glycosit mi, Paramignyoside AE, khụng cú biu hin hot tớnh gõy c t bo trờn 04 dũng t bo ung th c th nghim l KB, SK-Mel2, LU-1 v MCF7. Trờn c s kt qu hot tớnh gõy c t bo, hai hp cht Paramignyol A v B c la chn ỏnh giỏ tip theo v kh nng kớch hot enzyme caspase 3/7 trờn dũng t bo ung th LU-1. 25000 g /m l C a s p a s e a c t iv it y ( R F U ) .2 g /m l .4 g /m l 20000 .0 g /m l g /m l 15000 10000 5000 T a m o x if e n P a r a m ig n y o l A P a g r a m ig n y o l B Hỡnh 4.69. Kh nng kớch hot enzyme caspase 3/7 ca Paramignyol A v B 116 Kt qu thu c cho thy, hp cht Paramignyol A th hin kh nng kớch hot enzyme caspase 3/7 mnh cỏc nng th nghim so vi cht i chng dng Tamoxifen. Hp cht Paramignyol B cng th hin hot tớnh kớch hot enzyme caspase nhiờn kh nng ny yu hn Paramignyol A v ch th hin rừ nng th nghim l àg/ml. Apoptosis l mt quỏ trỡnh t cht ca t bo c lp trỡnh (programmed cell death - PCD) xy cỏc sinh vt a bo. S c ch apoptosis cú th dn n nhiu loi bnh ung th, bnh t dch, bnh sng viờm v bnh nhim virỳt. Ban u vic s lng cỏc t bo tng bt thng v to u c cho l vic sinh sụi ny n ca t bo tng sinh mnh; nhiờn hin cỏc nghiờn cu cho thy vic suy gim tc cht ca t bo cng l nguyờn nhõn ca hin tng ny. Loi bnh ph bin nht nhúm ny l ung th, mt cn bnh ú t bo sn sinh quỏ mc, thụng thng c mụ t nh l s biu hin quỏ mc ca h protein c ch apoptosis ca t bo (IAP). Do vy cỏc nh khoa hc hin cng ang theo hng sng lc cỏc hot cht cú kh nng iu tr ung th theo c ch cm ng v kớch hot quỏ trỡnh apoptosis. Nhiu nghiờn cu cho thy h enzyme caspase úng vai trũ trung tõm vic truyn tớn hiu apoptosis. Cho n ó cú 15 loi caspase c chia thnh nhúm chớnh l caspase gõy viờm v caspase liờn quan n apoptosis (bao gm caspase 2, 3, 6, 7, 8, 10, 15). Trong ú caspase 3, tham gia vo quỏ trỡnh ct cỏc protein khỏc t bo, m u cho quỏ trỡnh apoptosis. Cỏc caspase ny s thc hin quỏ trỡnh cht t bo theo chu trỡnh apoptosis. Vic xỏc nh kh nng kớch hot enzyme caspase cú th cho ta bit c ch tỏc ng ca mt s hot cht cú tim nng iu tr ung th. Kt qu thu c cho thy, hp cht tirucallan mi Paramignyol A th hin hot tớnh gõy c t bo mnh trờn 04 dũng t bo ung th c th nghim l KB, SK-Mel2, LU-1 v MCF7 ng thi th hin kh nng kớch thớch mnh enzyme caspase 3/7 t bo LU-1. Nh vy, hp cht ny cú nhiu tim nng cho cỏc nghiờn cu tip tc theo nh hng khỏng ung th. 117 4.3.2. Hot tớnh khỏng viờm Nm hp cht tirucallan glycosit mi Paramignyoside AE ó c th hot tớnh khỏng viờm v thc nghim c tin hnh ti Khoa Dc, i hc quc gia Chungnam, Hn Quc. Kt qu th hin trờn Bng 4.21. Bng 4.21. Hot tớnh khỏng viờm ca cỏc hp cht Paramignyoside A-E Hp cht Paramignyoside A Paramignyoside B Paramignyoside C Paramignyoside D Paramignyoside E Chng dng SB203580 Giỏ tr IC50 (àM) IL-12 p40 48,68 29,15 5,03 19,59 14,09 5,00 IL-6 >50 >50 >50 >50 >50 3,50 TNF- >50 >50 >50 >50 >50 7,20 T kt qu trờn cho thy c hp cht u cú hot tớnh c ch quỏ trỡnh to IL-12 p40 ú hp cht paramignyoside C cú hot tớnh tng ng cht chun dng SB203580. Do ú cn nghiờn cu tip theo v c ch khỏng viờm cng nh hot tớnh in vivo thi gian ti ca cỏc hp cht ny, c bit l hp cht paramignyoside C. 4.4. Tng hp cỏc hp cht phõn lp t cõy xỏo leo P. scandens Bng cỏc phng phỏp sc ký, t cõy xỏo leo P. scandens ó phõn lp c 19 hp cht, ú cú hp cht mi v 12 hp cht ó bit. Kt qu tng hp cu trỳc v tờn gi ca 19 hp cht ny c trỡnh by bng 4.22. Bng 4.22. Tng hp cỏc hp cht phõn lp t cõy xỏo leo P. scandens Paramignyol A (01) (Cht mi) Paramignyol B (02) (Cht mi) 118 Paramignyoside A (03) (Cht mi): R = H Paramignyoside B (04) (Cht mi): R = Ac Paramignyoside C (05) (Cht mi) Paramignyoside D (06) (Cht mi): R = H Paramignyoside E (07) (Cht mi): R = Ac Methyl isolimonate (08) 6R,9S-Roseoside (09) 119 -D-glucopyranoside methyl salicylate (10) 1,1-Dimethylprop-2-enyl 1-O--Dglucopyranoside (12) Adenosine (11) Syringin (13) trans-N-p-coumaroyl tyramine (15) Atripliside B (14) Betulalbuside B (18) Gusanlungionoside C (17) 2,6-dimethoxy-4[(1E)-prop-1enyl]phenyl O--L-rhamno-pyranosyl(16)--D-glucopyranoside (16) Syringaresinol di-O--Dglucopyranoside (19) 120 KT LUN V KIN NGH T cõy xỏo leo Paramignya scandens (Griff.) Craib. (Rutaceae) thu Lõm ng, bng cỏc phng phỏp sc ký ó tỏch chit v xỏc nh cu trỳc ca 19 hp cht, ú cú hp cht mi u thuc dng khung tirucallan: Paramignyol A, Paramignyol B, Paramignyoside A, Paramignyoside B, Paramignyoside C, Paramignyoside D, Paramignyoside E v 12 hp cht ó c phõn lp t cỏc loi thc vt khỏc: Methyl isolimonate, 6R,9S-Roseoside, -D-glucopyranoside methyl salicylate, Adenosine, 1,1-Dimethylprop-2-enyl 1-O--D-glucopyranoside, Syringin, Atripliside B, Betulalbuside B, trans-N-p-coumaroyl tyramine, 2,6dimethoxy-4[(1E)-prop-1-enyl]phenyl O--L-rhamno-pyranosyl-(16)--D- glucopyranoside, Gusanlun-gionoside C, Syringaresinol di-O--D-glucopyranoside. Hai hp cht mi Paramignyol A v Paramignyol B cú hot tớnh gõy c t bo trờn dũng ung th biu mụ - KB, ung th hc t SK-Mel-2, ung th phi LU1 v ung th vỳ MCF7, ú hp cht Paramignyol B cú hot tớnh mnh hn Paramignyol A. Ngoi ra, Paramignyol A th hin kh nng kớch thớch mnh enzyme caspase 3/7 t bo LU-1. Nm hp cht mi Paramignyoside A-E cú hot tớnh khỏng viờm, ú hp cht Paramignyoside C cú hot tớnh mnh nht. õy l nghiờn cu u tiờn v thnh phn húa hc v hot tớnh sinh hc ca loi P. scandens Vit Nam v trờn th gii. Da trờn cỏc kt qu thu c cho thy cõy Xỏo leo cú kh nng phỏt trin thnh nguyờn liu cho ngnh cụng nghip dc nc ta. Cho nờn cn cú k hoch bo tn v phỏt trin loi cõy ny. 121 DANH MC CễNG TRèNH CA TC GI Cể LIấN QUAN N LUN N 1. Nguyen Huu Toan Phan, Nguyen Thi Dieu Thuan, Ninh Thi Ngoc, Pham Thi Mai Huong, Nguyen Phuong Thao, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Van Thanh, Nguyen Hoai Nam, Phan Van Kiem, Chau Van Minh (2014), Two tirucallane derivatives from Paramignya scandens and their cytotoxic activity, Phytochemistry Letters, 9, pp. 7881. 2. Nguyen Huu Toan Phan, Nguyen Thi Dieu Thuan, Ninh Thi Ngoc, Nguyen Phuong Thao, Sohyun Kim, Young Sang Koh, Nguyen Van Thanh, Nguyen Xuan Cuong, Nguyen Hoai Nam, Phan Van Kiem, Young Ho Kim, Chau Van Minh (2015), Anti-inflammatory tirucallane saponins from Paramignya scandens, Chem. Pharm. Bull., 63(7), ang ch in. 3. Nguyn Th Diu Thun, Nguyn Hu Ton Phan, Nụng Vn Duy, Ninh Th Ngc, Nguyn Vn Thanh, Nguyn Xuõn Cng, Nguyn Hoi Nam, Phan Vn Kim, Chõu Vn Minh (2014), Cỏc hp cht glycosit phõn lp t cõy Xỏo leo Paramignya scandens, Tp Khoa hc v Cụng ngh, 52(5A), tr. 69-75. 4. Nguyn Th Diu Thun, Nguyn Hu Ton Phan, Nụng Vn Duy, Ninh Th Ngc, Nguyn Vn Thanh, Nguyn Xuõn Cng, Nguyn Hoi Nam, Phan Vn Kim, Chõu Vn Minh (2015), Nghiờn cu thnh phn húa hc ca cõy xỏo leo - Paramignya scandens, Tp Húa hc, 53(1), tr. 84-89. 122 TI LIU THAM KHO 1. Phan Vn , Trn Cụng Lun, iu tra, ỏnh giỏ ngun ti nguyờn dc liu tnh Lõm ng v nh hng phỏt trin mt s loi c hu cú giỏ tr kinh t cao, Bỏo cỏo kt qu nghiờn cu ti KHCN, S KH-CN tnh Lõm ng, 2011, 60-62. 2. Th Tho, Trnh Th Thanh Võn, Nguyn Quyt Chin, Nguyn Vn Hựng, Khc Hiu, Nghiờn cu in vitro hot cht khỏng ung th ca cõy bỏn liờn chi (Scutellaria barbata D. Don), Tp Dc hc, 2005, 355 10-13. 3. Nam, N.H., H.M. Kim, K.H. Bae, and B.Z. Ahn, Inhibitory effects of Vietnamese medicinal plants on tube-like formation of human umbilical venous cells, Phytother Res, 2003, 17 (2), 107-111. 4. Giang, P.M., P.T. Son, Y. Hamada, and H. Otsuka, Cytotoxic Diterpenoids from Vietnamese Medicinal Plant Croton tonkinensis Gagnep, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 2005, 53 (3), 296-300. 5. Nguyn Hu Ton Phan, Nghiờn cu hoỏ hc mt s cõy thuc chn lc Vit Nam cú hot tớnh chng ung th, 2009. 6. Sung, T.V., T.V. Loc, T.D. Quan, T.V. Chien, N.T. Anh, T.T. Thuy, N.T.H. Anh, P.T. Ninh, N.H.T. Phan, and N.T.D. Thuan. Study on Taxol and Taxotere synthesis using 10-deacetylbaccatin III isolated from Taxus wallichiana growing in Lamdong province, Vietnam, in The First VAST - KOGI Workshop on Science and Technology R&D Cooperation. 2007, NXB Khoa hc v Cụng ngh, Hanoi. 7. Yang, Q.X. and C.R. Yang, Cytotoxic steroidal saponins from Polygonatum punctatum, Chem Biodivers, 2006, (12), 1349-1355. 8. Wu, J.J., K.W. Cheng, X.F. Zuo, M.F. Wang, P. Li, L.Y. Zhang, H. Wang, and W.C. Ye, Steroidal saponins and ecdysterone from Asparagus filicinus and their cytotoxic activities, Steroids, 2010, 75 (10), 734-739. 123 9. Zhang, D.X., T.G. Hartley, and D.J. Mabberley., Rutaceae, Flora of China, 2008, 11 88. 10. Vin Sinh thỏi & Ti nguyờn Sinh vt Trung tõm Khoa hc t nhiờn v Cụng ngh quc gia, Danh lc cỏc loi thc vt Vit Nam, Tp 2. 2003, Nxb Nụng nghip. 11. Phm Hong H, Cõy c Vit Nam, Quyn 2. 2003, Nxb. Tr. 12. Vừ Vn Chi, T.H., Cõy c cú ớch Vit Nam. 1999, Nxb. Giỏo dc, H Ni. 13. Cheng, J.T., Y.Q. Han, J. He, X. De Wu, L.B. Dong, L.Y. Peng, Y. Li, and Q.S. Zhao, Two new tirucallane triterpenoids from the leaves of Aquilaria sinensis, Arch Pharm Res, 2013, 36 (9), 1084-1089. 14. Ntalli, N.G., F. Cottiglia, C.A. Bueno, L.E. Alche, M. Leonti, S. Vargiu, E. Bifulco, U. Menkissoglu-Spiroudi, and P. Caboni, Cytotoxic tirucallane triterpenoids from Melia azedarach fruits, Molecules, 2010, 15 (9), 5866-5877. 15. Yang, S.-M., Q.-S. Song, C. Qing, D.-G. Wu, and X.-K. Liu, Anticancer Activity of Tirucallane Triterpenoids from Amoora dasyclada, Z. Naturforsch, 2006, 61c, 193-195. 16. Chen, H., S.G. Ma, Z.F. Fang, J. Bai, S.S. Yu, X.G. Chen, Q. Hou, S.P. Yuan, and X. Chen, Tirucallane triterpenoids from the stems of Brucea mollis, Chem Biodivers, 2013, 10 (4), 695-702. 17. Hu, J., Y. Song, H. Li, B. Yang, X. Mao, Y. Zhao, and X. Shi, Cytotoxic and anti-inflammatory tirucallane triterpenoids from Dysoxylum binectariferum, Fitoterapia, 2014, 99 86-91. 18. Kumar, V., N.M.M. Niyaz, S. Saminathan, and D.B.M. Wickramaratne, Coumarins from Paramignya monophylla root bark, Phytochemistry, 1998, 49 (1), 215-218. 19. A., J.D.M., Medicinal Plants (Indigenous and Exotic) Used in Ceylon, Part V. Colombo, A publication of the National Science Council of Sri Lanka, 1982. 20. Kumar, V., N.M.M. Niyaz, and D.B.M. Wickramaratne, Coumarins from stem bark of Paramignya monophylla, Phytochemistry, 1995, 38 (3), 805-806. 124 21. Kumar, V., N.M.M. Niyaz, D.B.M. Wickramaratne, and S. Balasubramaniam, Tirucallane derivatives from Paramignya monophylla fruits, Phytochemistry, 1991, 30 (4), 1231-1233. 22. Wattanapiromsakul, C. and P.G. Waterman, Flavanone, triterpene and chromene derivatives from the stems of Paramignya griffithii, Phytochemistry, 2000, 55 (3), 269-273. 23. Wiart, C., Medicinal Plant of Asia-Pacific-Drugs for the Future. Vol. Library Cataloguing-in-Publication Data, 2006, World Scientific Publishing Co. Pte. Ltd., British, 380. 24. Nguyn Minh Khi, Phm Th Nguyt Hng, Th Phng, Nghiờn cu c tớnh cp tỏc dng bo v gan v tỏc dng gõy c t bo ung th ca xỏo tam phõn, Tp Dc liu, 2013, 18 (1), 14 - 20. 25. Phm Huy Bớch, Nguyn Th Bớch Thu, Nguyn Minh Khi, Phõn lp v nh lng Ostruthin dc liu xỏo tam phn thu hỏi ti Vit Nam, Tp Dc liu, 2013, 18 (3), 173 - 179. 26. Trn Th Thỳy Qunh, Lờ Th Kim Thoa, Phm ụng Phng, Phõn lp mt s hp cht coumarin r xỏo tam phõn (Paramignya trimera (Oliv.) Burkill), Tp Dc hc, 2014, 457, 11. 27. Trn Th Thỳy Qunh, Nguyn Trung Dng, Phm ụng Phng, Phõn lp mt vi hp cht acridon alkaloid r xỏo tam phõn (Paramignya trimera (Oliv.) Burkill), Tp Dc hc, 2014, 458, 60-64. 28. Liu, Y. and P. Abreu, Tirucallane triterpenes from the roots of Ozoroa insignis, Phytochemistry, 2006, 67 (13), 1309-1315. 29. Liu, H.B., C.R. Zhang, S.H. Dong, L. Dong, Y. Wu, and J.M. Yue, Limonoids and triterpenoids from the seeds of Melia azedarach, Chem Pharm Bull (Tokyo), 2011, 59 (8), 1003-1007. 30. Luo, X.-D., S.-H. Wu, Y.-B. Ma, and D.-G. Wu, Tirucallane triterpenoids from Dysoxylum hainanense, Phytochemistry, 2000, 54 (8), 801-805. 125 31. Xie, B.J., S.P. Yang, H.D. Chen, and J.M. Yue, Agladupols A-E, triterpenoids from Aglaia duperreana, J Nat Prod, 2007, 70 (9), 1532-1535. 32. Yang, S.-M., L. Ding, Shao-HuaWu, Y.-B. Ma, X.-D. Luo, and Da-GangWu, Two New Tirucallane Triterpenes with Six-Membered Hemiacetal from Amoora dasyclada, Z. Naturforsch., 2004, 59b 1067-1069. 33. Koo, J.E., H.J. Hong, A. Dearth, K.S. Kobayashi, and Y.S. Koh, Intracellular invasion of Orientia tsutsugamushi activates inflammasome in asc-dependent manner, PLoS One, 2012, (6), e39042. 34. Bowen, I.H. and Y.N. Patel, Phytochemical analysis of the leaves and stems of Paramignya monophylla Wight (Rutaceae), Journal of Pharmacy and Pharmacology, 1998, 50 (S9), 232-232. 35. Liu, J., S.P. Yang, G. Ni, Y.C. Gu, and J.M. Yue, Triterpenoids from Aglaia odorata var. microphyllina, J Asian Nat Prod Res, 2012, 14 (10), 929-939. 36. Zi, J., S. Li, M. Liu, M. Gan, S. Lin, W. Song, Y. Zhang, X. Fan, Y. Yang, J. Zhang, J. Shi, and D. Di, Glycosidic constituents of the tubers of Gymnadenia conopsea, J Nat Prod, 2008, 71 (5), 799-805. 37. Yuan, C.M., Y. Zhang, G.H. Tang, Y. Li, H.P. He, S.F. Li, L. Hou, X.Y. Li, Y.T. Di, S.L. Li, H.M. Hua, and X.J. Hao, Cytotoxic limonoids from Melia azedarach, Planta Med, 2013, 79 (2), 163-168. 38. Kurimoto, S., Y. Takaishi, F.A. Ahmed, and Y. Kashiwada, Triterpenoids from the fruits of Azadirachta indica (Meliaceae), Fitoterapia, 2014, 92 200-205. 39. O'Neill, M.J., J.A. Lewis, H.M. Noble, S. Holland, C. Mansat, J.E. Farthing, G. Foster, D. Noble, S.J. Lane, P.J. Sidebottom, S.M. Lynn, M.V. Hayes, and C.J. Dix, Isolation of translactone-containing triterpenes with thrombin inhibitory activities from the leaves of Lantana camara, J Nat Prod, 1998, 61 (11), 13281331. 40. Swinny, E.E., A novel acetylated 3-deoxyanthocyanidin laminaribioside from the fern Blechnum novae-zelandiae, Z Naturforsch C, 2001, 56 (3-4), 177-180. 126 41. Han, M.L., Y. Shen, G.C. Wang, Y. Leng, H. Zhang, and J.M. Yue, 11betaHSD1 inhibitors from Walsura cochinchinensis, J Nat Prod, 2013, 76 (7), 13191327. 42. Corea, G., E. Fattorusso, and V. Lanzotti, Saponins and flavonoids of Allium triquetrum, J Nat Prod, 2003, 66 (11), 1405-1411. 43. Cheplogoi, P.K., D.A. Mulholland, P.H. Coombes, and M. Randrianarivelojosia, An azole, an amide and a limonoid from Vepris uguenensis (Rutaceae), Phytochemistry, 2008, 69 (6), 1384-1388. 44. Bennett, R.D. and S. Hasegawa, Isolimonic acid, a new citrus limonoid, Phytochemistry, 1980, 19 (11), 2417-2419. 45. Yamano, Y. and M. Ito, Synthesis of optically active vomifoliol and roseoside stereoisomers, Chem Pharm Bull (Tokyo), 2005, 53 (5), 541-546. 46. Chassagne, D., J. Crouzet, C.L. Bayonove, and R.L. Baumes, Glycosidically Bound Eugenol and Methyl Salicylate in the Fruit of Edible Passiflora Species, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1997, 45 (7), 2685-2689. 47. Domondon, D.L., W. He, N. De Kimpe, M. Hofte, and J. Poppe, Betaadenosine, a bioactive compound in grass chaff stimulating mushroom production, Phytochemistry, 2004, 65 (2), 181-187. 48. Agrawal, P.K., NMR spectroscopy in the structural elucidation of oligosaccharides and glycosides, Phytochemistry, 1992, 31 (10), 3307-3330. 49. Ahmed, A.A., M.H. Abd el-Razek, E.A. Abu Mostafa, H.J. Williams, A.I. Scott, J.H. Reibenspies, and T.J. Mabry, A new derivative of glucose and 2-C-methylD-erythritol from Ferula sinaica, J Nat Prod, 1996, 59 (12), 1171-1173. 50. Sugiyama, M., E. Nagayama, and M. Kikuchi, Lignan and phenylpropanoid glycosides from Osmanthus asiaticus, Phytochemistry, 1993, 33 (5), 1215-1219. 51. Perveen, S., A. Malik, B. Tareen Rasool, N. Afza, and L. Iqbal, Atriplisides A And B, Two New Glycosides From Perovskia Atriplicifolia, Zeitschrift fỹr Naturforschung B, 2007, 863. 127 52. Kim, D.K. and K. Lee, Inhibitory effect of trans-N-p-coumaroyl tryamine from the twigs of Celtis chinensis on the acetylcholinesterase, Arch Pharm Res, 2003, 26 (9), 735-738. 53. Bai, H. and L. Hu, Study on the Chemical Constituents of Daphniphyllum angustifolium, Helvetica Chimica Acta, 2006, 89 (5), 884-894. 54. Yu, L.L., W.C. Hu, G. Ding, R.T. Li, J.H. Wei, Z.M. Zou, and M.H. Wang, Gusanlungionosides A-D, potential tyrosinase inhibitors from Arcangelisia gusanlung, J Nat Prod, 2011, 74 (5), 1009-1014. 55. Morikawa, H., R. Kasai, H. Otsuka, E. Hirata, T. Shinzato, M. Aramoto, and Y. Takeda, Terpenic and Phenolic Glycosides from Leaves of Breynia officinalis Hemsl, Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 2004, 52 (9), 1086-1090. 56. ầali, I., A. Yỹrỹker, H. Rỹegger, A.D. Wright, and O. Sticher, Anatolioside E: A New Acyclic Monoterpene Glycoside from Viburnum orientale, Helvetica Chimica Acta, 1993, 76 (7), 2563-2569. 57. Wang, C. and Z. Jia, Lignan, phenylpropanoid and iridoid glycosides from Pedicularis torta, Phytochemistry, 1997, 45 (1), 159-166. 58. Vermes, B., O. Seligmann, and H. Wagner, Synthesis of biologically active tetrahydro-furofuranlignan-(syringin, pinoresinol)- mono- and bis-glucosides, Phytochemistry, 1991, 30 (9), 3087-3089. 128 PH LC Hỡnh PL1. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 01 .130 Hỡnh PL2. Ph COSY ca hp cht 01 .130 Hỡnh PL3. Ph HSQC ca hp cht 01 .131 Hỡnh PL4. Ph HMBC ca hp cht 01 132 Hỡnh PL5. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 02 .133 Hỡnh PL6. Ph COSY ca hp cht 02 .133 Hỡnh PL7. Ph HSQC ca hp cht 02 .134 Hỡnh PL8. Ph HMBC ca hp cht 02 135 Hỡnh PL9. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 03 .136 Hỡnh PL10. Ph HSQC ca hp cht 03 .137 Hỡnh PL11. Ph HMBC ca hp cht 03 138 Hỡnh PL12. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 04 .139 Hỡnh PL13. Ph COSY ca hp cht 04 .139 Hỡnh PL14. Ph HSQC ca hp cht 04 .140 Hỡnh PL15. Ph HMBC ca hp cht 04 141 Hỡnh PL16. Ph ROESY ca hp cht 04 142 Hỡnh PL17. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 05 .142 Hỡnh PL18. Ph COSY ca hp cht 05 .143 Hỡnh PL19. Ph HSQC ca hp cht 05 .144 Hỡnh PL20. Ph HMBC ca hp cht 05 145 Hỡnh PL21. Ph ROESY ca hp cht 05 146 Hỡnh PL22. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 06 .146 Hỡnh PL23. Ph COSY ca hp cht 06 .147 Hỡnh PL24. Ph HSQC ca hp cht 06 .148 Hỡnh PL25. Ph HMBC ca hp cht 06 149 Hỡnh PL26. Ph ROESY ca hp cht 06 150 Hỡnh PL27. Ph HR-ESI-MS ca hp cht 07 .150 129 Hỡnh PL28. Ph COSY ca hp cht 07 .151 Hỡnh PL29. Ph HSQC ca hp cht 07 .152 Hỡnh PL30. Ph HMBC ca hp cht 07 153 Hỡnh PL31. Ph ROESY ca hp cht 07 154 Hỡnh PL32. Ph HSQC ca hp cht 08 .155 Hỡnh PL33. Ph HMBC ca hp cht 08 156 Hỡnh PL34. Ph HSQC ca hp cht 09 .157 Hỡnh PL35. Ph HMBC ca hp cht 09 158 Hỡnh PL36. Ph HSQC ca hp cht 10 .159 Hỡnh PL37. Ph HMBC ca hp cht 10 160 Hỡnh PL38. Ph DEPT ca hp cht 11 .161 Hỡnh PL39. Ph HSQC ca hp cht 12 .162 Hỡnh PL40. Ph HMBC ca hp cht 12 163 Hỡnh PL41. Ph HSQC ca hp cht 13 .164 Hỡnh PL42. Ph HMBC ca hp cht 13 165 Hỡnh PL43. Ph HSQC ca hp cht 14 .166 Hỡnh PL44. Ph HMBC ca hp cht 14 167 Hỡnh PL45. Ph HSQC ca hp cht 15 .168 Hỡnh PL46. Ph HMBC ca hp cht 15 169 Hỡnh PL47. Ph HSQC ca hp cht 16 .170 Hỡnh PL48. Ph HMBC ca hp cht 16 171 Hỡnh PL49. Ph HSQC ca hp cht 17 .172 Hỡnh PL50. Ph HMBC ca hp cht 17 173 Hỡnh PL51. Ph HSQC ca hp cht 18 .174 Hỡnh PL52. Ph HMBC ca hp cht 18 175 Hỡnh PL53. Ph HSQC ca hp cht 19 .176 Hỡnh PL54. Ph HMBC ca hp cht 19 177 [...]... Nghiên cứu thành phần hóa học và khảo sát hoạt tính sinh học của 2 loài Xáo leo (Paramignya scandens (Griff.) Craib) ở Lâm Đồng nhằm nâng cao giá trị sử dụng và góp phần vào kho tàng cây thuốc đặc hữu của Lâm Đồng nói riêng và Việt Nam nói chung Theo hướng nghiên cứu này, luận án có các nhiệm vụ sau: - Nghiên cứu được thành phần hóa học của loài Xáo leo (Paramignya scandens (Griff.) Craib) ở Lâm Đồng. .. rất nhiều loài chưa được nghiên cứu về hóa học cũng như về hoạt tính sinh học ở trong nước và nước ngoài nên việc tập trung sàng lọc theo định hướng hoạt tính sinh học để chọn lọc các loài có hoạt tính cao tiến hành nghiên cứu sâu hơn về hóa học là cần thiết và có cơ sở 8 1.2 Giới thiệu chung về chi Paramignya (Rutaceae): 1.2.1 Đặc điểm sinh học của chi Paramignya (Rutaceae): Chi Cựa gà, Xáo (Paramignya... được nghiên cứu về hóa học ở Việt Nam và trên thế giới, đây là cơ sở quan trọng cho việc định hướng chọn lọc đối tượng nghiên cứu của luận án Trên cơ sở sàng lọc một số loài thực vật ở Lâm Đồng theo định hướng hoạt tính gây độc tế bào, chúng tôi đã phát hiện dịch chiết methanol của loài Xáo leo (Paramignya scandens Craib) có hoạt tính mạnh, trong khi loài này chưa được nghiên cứu hóa học ở Việt Nam và. .. trung bộ của Việt Nam Tuy nhiên một số loài như xáo tam phân còn tìm thấy ở những nơi khác như Khánh Hòa và loài Xáo leo đã được tìm thấy ở Lâm Đồng 1.2.2 Hoạt tính sinh học của chi Paramignya (Rutaceae): Hiện nay chưa có nhiều các công trình nghiên cứu công bố về các loài thuộc chi Paramignya Một số nghiên cứu đã được tiến hành cho thấy, thành phần hóa học chính là các hợp chất flavonoit, coumarin và triterpen... ung thư và một số bệnh khác từ cây xáo tam phân (Paramignya trimera (Oliv.) Guillaum) nên loài này mới bắt đầu được nghiên cứu về hóa học, hoạt tính sinh học, dược học tại Viện Dược liệu, Viện Hóa học các hợp chất thiên nhiên… Loài xáo tam phân là cây gỗ nhỏ, dạng dây trườn, vỏ màu nâu vàng; thân dài trên 4 m; đường kính khoảng 10 cm; gỗ hơi cứng có màu vàng, phần rễ có màu vàng đậm hơn Thân và cành... 1.1.2 Tình hình nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học ở Việt Nam của một số loài thực vật tương tự tại Lâm Đồng: Trong giai đoạn 1996-2005, Viện Hóa học các Hợp chất thiên nhiên đã tiến hành chương trình sàng lọc trên một nghìn mẫu dịch chiết thô của các thực vật thu hái ở một số khu vực của Việt Nam, cơ sở lựa chọn dựa vào các kinh nghiệm dân gian trong điều trị kháng u và kháng viêm,... quả nghiên cứu của một số đề tài trước đây cho thấy sự có mặt của các dược liệu như thông đỏ Taxus wallichiana Zucc, nhân sâm Panax vietnamensis, dừa cạn Catharanthus roseus, Coptis japonica, Coscinium usitatum, Crinum latifolium 7 1.1.3 Một số kết quả nghiên cứu trên thế giới về thành phần hóa học của một số loài thực vật (tương tự loài ở Lâm Đồng) Một số loài thực vật có ở Lâm Đồng chưa được nghiên. .. phổi A549 và dòng BGC-823 với giá trị IC50 tương ứng 1,16 và 3,01 μM [16] Bốn triterpen tirucallan được tách từ vỏ rễ cây Dysoxylum binectariferum có hoạt tính kháng viêm và kháng 8 dòng tế bào ung thư Đặc biệt là ung thư gan HepG2 với giá trị IC50 là 7.5–9.5 μM [17] 1.2.2.4 Hoạt tính sinh học của chi Paramignya Hầu hết dược tính của chi Paramignya được biết đến thông qua các nghiên cứu trên loài Paramignya... 400 MHz) của hợp chất 1-3 .25 Bảng 1.2 Một số dữ liệu phổ 1H-NMR của hợp chất 4-6 .26 Bảng 3.1 Kết quả thử hoạt tính gây độc tế bào trên cao toàn phần của cây Xáo leo 37 Bảng 4.1 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 01 58 Bảng 4.2 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 02 62 Bảng 4.3 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 03 67 Bảng 4.4 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất... liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 05 74 Bảng 4.6 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất PS30 77 Bảng 4.7 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 07 81 Bảng 4.8 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 08 85 Bảng 4.9 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 09 88 Bảng 4.10 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất 10 90 Bảng 4.11 Số liệu phổ 1H- và 13C-NMR của hợp chất . đề tài Nghiên cứu thành phần hóa học và khảo sát hoạt tính sinh học của 2 loài Xáo leo (Paramignya scandens (Griff.) Craib) ở Lâm Đồng nhằm nâng cao giá trị sử dụng và góp phần vào kho. CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI XÁO LEO (PARAMIGNYA SCANDENS (GRIFF.) CRAIB) Ở LÂM ĐỒNG CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỌC HỮU CƠ MÃ SỐ: 62.44.01.14 LUẬN ÁN TIẾN SỸ HÓA. VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ VN VIỆN HÓA SINH BIỂN NGUYỄN THỊ DIỆU THUẦN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI XÁO LEO (PARAMIGNYA