BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ THỊ ANH ĐÀO XÁC ĐỊNH VIRUS HẠI CÂY HỌ BẦU BÍ TẠI TỈNH HÒA BÌNH, THỬ NGHIỆM PHÒNG CHỐNG BỆNH BẰNG MỘT SỐ THUỐC HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH MÃ SỐ : BẢO VỆ THỰC VẬT : 60.62.01,12 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC TS. HÀ VIẾT CƯỜNG HÀ NỘI, NĂM 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tôi. Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố công trình khác. Tôi xin cam đoan thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Vũ Thị Anh Đào Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn hướng dẫn tận tình, với tinh thần trách nhiệm cao Tiến sĩ Hà Viết Cường, Phó trưởng khoa Nông Học, Học Viện Nông nghiệp Việt Nam. Trân trọng cảm ơn Giảng viên môn Bệnh cây, Khoa Nông học, Học Viện Nông nghiệp Việt Nam; cán bộ, học viên Trung tâm bệnh nhiệt đới giúp đỡ hoàn thành luận văn này. Trân trọng cảm ơn Lãnh đạo cán Chi cục Bảo vệ thực vật tỉnh Hòa Bình tạo điều kiện giúp đỡ thời gian, điều kiện thí nghiệm. Trân trọng cảm ơn cán bộ, nhân viên Trạm Bảo vệ thực vật huyện, thành phố tỉnh Hòa Bình hỗ trợ điều tra đồng ruộng, phối hợp đánh giá thực trạng trình thực đề tài. Tác giả luận văn Vũ Thị Anh Đào Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Danh mục viết tắt ix MỞ ĐẦU 1. Đặt vấn đề 2. Mục đích, yêu cầu 2.1. Mục đích 2.2. Yêu cầu CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Cây họ bầu bí Cucurbitaceae 1.1.1. Cây dưa hấu 1.1.2. Cây dưa chuột 1.1.3. Cây bầu 1.1.4. Cây bí ngô 1.1.5. Cây bí xanh (bí đao) 1.1.6. Cây dưa bở 1.2. Sản xuất bầu bí Hòa Bình 1.2.1. Thuận lợi 1.2.2. Khó khăn 1.3. Một số bệnh virus họ bầu bí 11 1.3.1. CMV (Cucumber mosaic virus) 11 1.3.2. PRSV (Papaya ring spot virus) 12 1.3.3. ZYMV (Zucchini yellow mosaic virus) 14 1.3.4. SLCCNV (Squash leaf curl china virus) 15 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii 1.3.5. SLCV (Squash leaf curl virus) 16 1.3.6. SqMV (Squash mosaic virus) 16 1.4. Phương pháp PCR 17 1.4.1. Nguyên lý 17 1.4.2. Ứng dụng 18 1.5. Phương pháp ELISA 18 1.5.1. Nguyên lý 18 1.5.2. Ứng dụng 20 1.5.3. Các kỹ thuật ELISA 20 1.6. Ribavirin ứng dụng 21 1.6.1. Thuốc ribavirin 21 1.6.2. Đặc điểm chế tác động ribavirin tới virus thực vật 22 1.7. Nhóm chất kích kháng chống virus dựa chế SAR (systemic acquired resistance – tính kháng tập nhiễm hệ thống) 22 1.7.1. Chất kích kháng Dufulin 23 1.7.2. Chất kích kháng Bion 23 CHƯƠNG 2. NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1. Nội dung nghiên cứu 25 2.2. Địa điểm, thời gian vật liệu nghiên cứu 25 2.2.1. Địa điểm nghiên cứu 25 2.2.2. Thời gian nghiên cứu 25 2.2.3. Vật liệu nghiên cứu 25 2.3. Phương pháp nghiên cứu 26 2.3.1. Phương pháp điều tra đồng 26 2.3.2. Phương pháp ELISA 27 2.3.3. Phương pháp kiểm tra virus PCR 28 2.3.4. Phương pháp lây nhiễm PRSV tiếp xúc học 30 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 2.3.5. Thử nghiệm phòng trừ bệnh PRSV bầu bí số chế phẩm hóa học (thí nghiệm thực nhà lưới) 31 2.3.6. Phương pháp tính xử lý số liệu 32 CHƯƠNG 3.KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1. Điều tra, xác định thành phần virus bầu bí tỉnh Hòa Bình 33 3.1.1. Bệnh virus họ bầu bí Hòa Bình năm 2014 33 3.1.2. PCR phát begomovirrus bầu bí Hòa Bình 51 3.2. Đánh giá tính gây bệnh virus PRSV 52 3.2.1. Kết lây nhiễm PRSV từ đu đủ sang đu đủ, bí ngô, bí xanh, dưa bở 53 3.2.2. Kết lây nhiễm PRSV từ bí ngô sang đu đủ, bí ngô, bí xanh, dưa bở 55 3.3. Kết thử nghiệm số thuốc hóa học phòng chống virus PRSV 60 3.3.1. Đánh giá hiệu lực ức chế virus PRSV thuốc kích kháng (bion, dufulin) bí xanh 62 3.3.2. Đánh giá hiệu lực ức chế thuốc RIBAVIRIN trừ virus PRSV bí xanh KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 65 72 1. Kết luận 72 2. Đề nghị 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO 73 PHỤ LỤC 76 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH MỤC BẢNG STT Tên bảng Trang 1.1 Diện tích, suất, sản lượng số trồng họ bầu bí tỉnh Hòa Bình năm 2010-2014 10 1.2 Kết thí nghiệm ELISA xác định virus hại họ bầu bí 11 2.1 Các mồi sử dụng nghiên cứu 29 3.1 Kết điều tra bệnh virus gây hại bí xanh Hòa Bình năm 2014 37 3.2 Kết kiểm tra virus ELISA bí xanh Hòa Bình 38 3.3 Kết điều tra bệnh virus gây hại bí ngô Hòa Bình năm 2014 43 3.4 Kết kiểm tra virus ELISA bí ngô 44 3.5 Kết điều tra bệnh virus gây hại dưa chuột Hòa Bình năm 2014 47 3.6 Kết kiểm tra virus ELISA dưa chuột 48 3.7 Kết điều tra bệnh virus dưa bở Hòa Bình vụ xuân 2015 49 3.8 Kết kiểm tra virus ELISA dưa bở 50 3.9 Phát begomovirus PCR bầu bí Hòa Bình 51 3.10 Kết lây nhiễm nhân tạo PRSV từ đu đủ sang bí ngô, bí xanh, dưa bở đu đủ 54 3.11 Kết lây nhiễm nhân tạo PRSV từ bí ngô sang bí ngô, bí xanh, dưa bở đu đủ 58 3.12 Kết thử nghiệm phòng chống PRSV bí xanh thuốc kích kháng bion, dufulin 63 3.13 Một số tiêu sinh trưởng bí xanh sau thử nghiệm phòng chống kích kháng Bion, Dufulin sau 28 ngày lây nhiễm 65 3.14 Kết thử nghiệm phòng chống bệnh virus bí xanh thuốc trừ virus Ribavirin 67 3.15 Một số tiêu sinh trưởng bí xanh sau thử nghiệm phòng chống thuốc Ribavirin sau 28 ngày lây nhiễm 3.16 Kết phòng trừ bệnh virus thuốc Ribavirin Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 68 70 Page vi DANH MỤC HÌNH STT Tên hình Trang 1.1 Triệu chứng bệnh (CMV) Zitter and Murphy (2009) 12 1.2 Triệu chứng bệnh (PRSV) bí ngô (ảnh trái) bí xanh (ảnh phải) 14 1.3 Triệu chứng bệnh (ZYMV) dưa chuột 15 3.1 Triệu chứng khảm bí xanh Hòa Bình năm 2014 34 3.2 Triệu chứng khảm biến dạng bí xanh Hòa Bình năm 2014 35 3.3 Triệu chứng khảm nhăn bí xanh Hòa Bình năm 2014 35 3.4 Triệu chứng khảm vàng bí xanh Hòa Bình năm 2014 36 3.5 Chuẩn bị mẫu bầu bí để kiểm tra ELISA 39 3.6 Kết kiểm tra ELISA virus PRSV mẫu bầu bí 39 3.7 Triệu chứng khảm, khảm bí ngô Hòa Bình năm 2014 40 3.8 Triệu chứng khảm nhăn (ảnh trái) khảm vàng (ảnh phải) bí ngô Hòa Bình năm 2014 41 3.9 Triệu chứng bệnh virus Dưa chuột Hòa Bình năm 2014 46 3.10 Triệu chứng bệnh virus dưa bở Hòa Bình vụ xuân năm 2015 49 3.11 Kết PCR phát begomovirus 52 3.12 Nghiền mẫu 53 3.13 Lây nhiễm 53 3.14 Khu thí nghiệm 53 3.15 Kết sau lây nhiễm tuần (nguồn PRSV từ đu đủ) 55 3.16 Kết sau lây nhiễm 28 ngày (nguồn PRSV từ bí ngô): 57 3.17 Triệu chứng điển hình sau 28 ngày lây nhiễm 59 3.18 Phun thuốc 61 3.19 Toàn khu thí nghiệm 61 3.20 Thí nghiệm đánh giá tính kháng Bion nồng độ 0,1g/lít 64 3.21 Thí nghiệm đánh giá khả phòng chống PRSV bí xanh Dufulin nồng độ xử lý 0,5g/lít Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 64 Page vii 3.22 Kết thí nghiệm phòng chống thuốc Ribavirrin nồng độ 0,25 g/lít, 0,5g/lít, 0,75g/lít, đối chứng (-), đối chứng (+) 66 3.23 Bản chạy ELISA trước phun thuốc 69 3.24 Bản chạy ELISA sau ngày phun thuốc 70 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii DANH MỤC VIẾT TẮT BVTV : Bảo vệ thực vật CGMMV : Cucumber green mild motle virus CMV : Cucuber mosaic virus CNSH : Công nghệ sinh học ELISA : Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay KN : Antigen KT : Antibody PCR : Polymerase Chain Reaction PRSV : Papaya ringspot virus PRSV-p : Papaya ringspot virus type p PRSV-w : Papaya ringspot virus type w PTNT : Phát triển nông thôn RT-PCR : Reverse transcription – PCR SLCCNV : Squash leaf curl china virus SLCV : Squash leaf curl virus SqMV : Squash mosaic virus TRSV : Tobacco ringspot virus WMV : Watermelon mosaic virus WMV-1 : Water melon mosaic virus – WMV-2 : Water melon mosaic virus – ZYMV : Zucchini yellow mosaic virus Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ix Hình 3.22. Kết thí nghiệm phòng chống thuốc Ribavirrin nồng độ 0,25 g/lít, 0,5g/lít, 0,75g/lít, đối chứng (-), đối chứng (+) Từ kết thí nghiệm cho thấy sau phun thuốc ngày, công thức chưa biểu triệu chứng bệnh virus, kể công thức đối chứng (+). Với công thức phun ribavirin nồng độ 0,25/lít không thấy ảnh hưởng đến sinh trưởng cây, nhiên nồng độ 0,5/lít 0,75g/lít có ảnh hưởng đến sinh trưởng cây, thật có biểu diệp lục, công thức 0,75g/lít mức độ thể rõ dàng công thức 0,5g/lít. Sau 14 ngày theo dõi công thức 0,5 g/lít mức độ ảnh hưởng không rõ dàng, nhiên công thức 0,75g/lít biểu ngộ độc thuốc rõ dàng cũ, không biểu ngộ độc thuốc. Sau 14 ngày công thức lây nhiễm bắt đầu biểu triệu chứng. Tỷ lệ nhiễm công thức 0,25g/lít, 0,5g/lít, 0,75g/lít 35%, 30% 28% số cây. Sau tuần tỷ lệ nhiễm 55%, 55% 50%. Sau 28 ngày lây nhiễm 100% số công thức lây nhiễm biểu triệu chứng nhiễm virus. Từ nhiễm virus sau 28 ngày xử lý thuốc chọn có biểu triệu chứng dội để kiểm tra ELISA. Kết trình bày Bảng 3.14. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 66 Bảng 3.14. Kết thử nghiệm phòng chống bệnh virus bí xanh thuốc trừ virus Ribavirin Kết sau xử lý thuốc (ngày) Nồng độ thuốc thử nghiệm 0,25g/lít Công thức 14 21 Tỷ lệ (%) Triệu chứng Phun sau lây nhiễm 24 Phun không lây nhiễm Phun sau lây nhiễm 24 28 Tỷ lệ (%) Triệu chứng Tỷ lệ (%) Triệu chứng 35 Gân sáng, khảm nhẹ 55 Gân sáng, khảm TB 100 Khảm nặng Cây phát triển tốt 100 Khảm nặng Cây phát triển bình thường 100 Khảm nặng Cây phát triển bình thường 55 Gân sáng, khảm nhẹ Các bình thường Gân sáng, khảm nhẹ Các bình thường OD OD mẫu ngưỡng dương >3 0.176 2.984 0.176 30 Gân sáng Phun không lây nhiễm Mất màu diệp lục cũ Phun sau lây nhiễm 24 28 Gân sáng 50 Mất màu diệp lục cũ Đối chứng (-) 0.176 Đối chứng (+) 50 Khảm nhẹ 75 Khảm TB 100 Khảm nặng >3 0,5g/lít 0,75g/lít Phun không lây nhiễm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 0.549 Page 67 Kết kiểm tra ELISA cho thấy công thức phun ribavirin nồng độ 0,25g/lít 0,5g/lít, hàm lượng virus cao. Tuy nhiên, nồng độ 0,75g/lít hàm lượng virus thấp công thức đối chứng, chứng tỏ Ribavirin nồng độ 0,75g/lít có hiệu ức chế tái sinh virus cây. Để đánh giá ảnh hưởng thuốc Ribavirin nồng độ khác đến sinh trưởng cây, đo số tiêu sinh trưởng tất công thức xử lý thuốc, công thức đối chứng. Kết trình bày Bảng 3.15. Tiến hành đo tiêu sinh trưởng sau 28 ngày lây nhiễm. Bảng 3.15. Một số tiêu sinh trưởng bí xanh sau thử nghiệm phòng chống thuốc Ribavirin sau 28 ngày lây nhiễm Công thức Phun Ribavirin 0,25g/lít + lây nhiễm PRSV Phun Ribavirin 0,25g/lít không lây PRSV Phun Ribavirin 0,5g/lít + lây nhiễm PRSV Phun Ribavirin 0,5g/lít không lây PRSV Phun Ribavirin 0,75g/lít + lây nhiễm PRSV Phun Ribavirin 0,75g/lít không lây PRSV Đ/C âm (Không phun, không lây) Đ/C dương (Không phun, lây nhiễm) Chiều cao Lá lớn Chiều dài Chiều rộng Chiều dài (cm) (cm) cuống (cm) 24,20±0,68 9,07±0,59 8,80±0,77 8,87±0,52 30,27±0,46 10,27±0,70 10,47±0,52 9,40±0,51 23,67±0,62 8,73±0,59 8,53±0,52 8,60±0,51 24,93±0,70 9,93±0,70 9,40±0,51 9,33±0,49 22,8±0,68 8,53±0,52 8,60±0,51 8,40±0,51 26,60±0,74 8,73±0,46 8,67±0,49 8,47±0,52 30,67±0,62 10,40±0,63 10,47±0,64 8,80±0,68 23,07±0,70 8,67±0,49 8,47±0,52 8,07±0,46 (cm) Nhìn chung, tiêu liên quan đến kích thước chiều dài cuống lá, chiều dài chiều rộng không khác rõ rệt công thức xử lý phun Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 68 + lây nhiễm so với đối chứng dương. Nhưng có khác công thức đối chứng âm, phun kích kháng không lây. Để có sở khẳng định xác khả ức chế virus thuốc ribavirin tiến hành bố trí thí nghiệm với nhiễm virus PRSV, trước xử lý thuốc ribavirin để phòng trừ bệnh virus chạy ELISA để khẳng định có nhiễm virus xác định nồng độ virus (lượng mẫu lấy tất cách dùng ống falcon ép vào lá), sau tiến hành phun thuốc ribavirin nồng độ 0,5g/lít 0,75g/lít. Tiếp tục quan sát theo dõi, sau tuần theo dõi tiếp tục lấy mẫu ban đầu để xác định hàm lượng virus có xử lý thuốc để phòng chống virus. Kết trình bày Bảng 3.16 hình 3.23, hình 3.24. Từ kết theo dõi cho thấy nhiễm virus không thấy có ảnh hưởng thuốc ribavirin lên nồng độ xử lý 0,5g/lit 0,75g/lít. Chứng tỏ thuốc gây ảnh hưởng bất lợi với chưa nhiễm virus. Qua theo dõi nhận thấy sau phun thuốc, triệu chứng bệnh virus không biểu rõ ràng trước phun thuốc. Đặc biệt đu đủ, triệu chứng bệnh giảm rõ rệt gần biểu triệu chứng nhiễm virus. Trên bí xanh bí đỏ biểu triệu chứng bệnh giảm rõ rệt. Hình 3.23. Bản chạy ELISA trước phun thuốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69 Hình 3.24. Bản chạy ELISA sau ngày phun thuốc Kết chạy ELISA cho thấy nồng độ virus giảm so với trước phun thuốc nồng độ. Một số cho kết (-) tính với virus sau phun thuốc. Với bầu bí thuốc Ribavin thể có khả ức chế virus, đề tài thử nghiệm nồng độ 0,5g/lít 0,75g/lít chưa xác định nồng độ xác để ức chế virus nhiễm mức cao. Nhưng với biểu triệu chứng với nồng độ nêu có khả ức chế nồng độ virus cây. Bảng 3.16. Kết phòng trừ bệnh virus thuốc Ribavirin Công thức 0,5g/lít 0,75/lít OD trước phun thuốc OD sau ngày sau phun thuốc Bí ngô 0.311 0.149 Bí xanh 1.705 1.233 Đu đủ 2.882 0.765 Bí đỏ 0.202 0.166 Bí xanh 1.591 0.993 Đu đủ 2.982 0.157 Cây trồng Ghi chú: OD ngưỡng: 0.176 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70 Đặc biệt đu đủ quan sát triệu chứng kết test ELISA ban đầu biểu triệu chứng rội, co hẹp lại, thùy. Sau phun thuốc ngày sau không biểu triệu chứng bệnh virus, kết test ELISA cho kết (-) với virus, điều chứng tỏ thuốc Ribavirin nồng độ 0,75g/lít có khả ức chế virus PRSV đu đủ, nhiên nghiên cứu việc sử dụng Ribavirin để phòng chống virus đu đủ, nghiên cứu trước chưa đề cập. Trong nghiên cứu ghi nhận phun ribavirin đu đủ không thấy có biểu ngộ độc thuốc, phun bion đu đủ nghiên cứu trước đó, Nguyễn Hải Yến (2011). Do cần tiếp tục thực nghiên cứu để khẳng định xác nữa. Trong thí nghiệm quan tâm đến nồng độ virus nhiễm mà chưa thực việc so sánh đối chứng, có khẳng định phun Ribavinrin nồng độ 0,5g/lít, 0,75/lít lên bầu bí, đu đủ nhiễm virus biểu việc ngộ độc thuốc. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 71 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 1. Kết luận 1. Qua điều tra đồng ruộng họ bầu bí (bí ngô, bí xanh, dưa chuột) Hòa Bình năm 2014-2015, phát dạng triệu chứng bệnh virus, bao gồm: biến dạng, khảm nhăn, khảm vàng, khảm. 2. Tỷ lệ bệnh virus gây họ bầu bí cao từ thu hoạch rộ. Trên bí xanh tỷ lệ nhiễm bệnh cao giai đoạn thu hoạch rộ 68% số cây; Trên bí bí ngô tỷ lệ bệnh cao vào cuối giai đoạn thu hoạch 56%; Trên dưa bở dưa chuột có tỷ lệ virus thấp bí xanh, bí ngô 17 16%. 3. Các mẫu bệnh giống triệu chứng virus kiểm tra bẳng ELISA phát virus PRSV, CMV, ZYMV, virus PRSV nguyên nhân gây nên triệu chứng bệnh virus. 4. Năm 2014 vụ xuân năm 2015 chưa phát bệnh virus thuốc nhóm begomovirus gây hại bầu bí Hòa Bình 5. Các chất kích kháng bion dufulin khả ức chế virus PRSV bí xanh. 6. Thuốc ribavirin nồng độ 0,5g/lít 0,75 g/lít có khả ức chế sinh trưởng virus PRSV bí xanh. 2. Đề nghị - Tiếp tục nghiên cứu xác định thành phần bệnh virus bầu bí. - Tiếp tục có nghiên cứu sâu khả lây nhiễm type PRSV lên họ bầu bí đu đủ. - Tiếp tục nghiên cứu biện pháp phòng trừ PRSV bầu bí đu đủ biện pháp khác để đạt hiệu phòng trừ cao nhất. - Tiếp tục nghiên cứu sâu khả phòng trừ virus thuốc ribavirin bầu bí, đu đủ số trồng khác điều kiện thực tế đồng ruộng để có kết xác khả phòng trừ virus thuốc ribavirin. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO I. Tài liệu tiếng Việt 1. Viện Bảo vệ thực vật (1997, 2000), Phương pháp điều tra phát sâu bệnh hại trồng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội. 2. Cục Thống kê Hòa Bình, Niên giám thống kê tỉnh Hòa Bình 2010-2014. 3. Nguyễn Hải Yến (2011), Nghiên cứu bệnh virus đu đủ bầu bí Papaya ringspot virus (PRSV), Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp, Đại học nông nghiệp, Hà Nội. 4. Nguyễn Hồng Yến (2009), Điều tra thành phần côn trùng nhện hại dưa hấu, mức độ gây hại loài biện pháp quản lý chúng theo hướng tổng hợp, vụ đông xuân 2009 tỉnh Hòa Bình, Luận văn thạc sỹ Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp, Hà Nội. 5. Tạ Thu Cúc (2005), Giáo trình rau, NXB Nông nghiệp, Hà Nội. 6. Tạ Thu Cúc (2007), Giáo trình rau, NXB Nông nghiệp, Hà Nội. 7. Sở Nông nghiệp Phát triển nông thôn tỉnh Hòa Bình, Báo cáo kết sản xuất trồng trọt-BVTV năm 2012-2014. 8. Vũ Triệu Mân (1995), Một số bệnh virus hại họ bầu bí vùng đồng sông hồng miền bắc Việt Nam, Tạp chí Bảo vệ thực vật, số 5, Tr 30-33. II. Tài liệu tiếng Anh 9. Brunt, A., Crabtree.K, Dallwitz M.J, Gibbs.A.J, Watson L. (1996), Papaya ringspot potyvirus, Virus of plant, Descriptions and lists from the VIDE Database, CABI, p.871-876. 10. CABI, 2015. 11. Cassells, A.C.a.L., R.D. . 1982. The elimination of potato virusof potato viruses X, Y, S nad M in meristem and explant cultures of potato in the presence of virazole. Potato Res.: 165-173. 12. Chen Z, Z.M., Song B, Hou C, Hu D, et al. ((5):e37944. Doi:10.1371/.2012. Dufulin Activates HrBP1to Produce Antiviral Responses in Tobaco. PloS ONE 7. Journal.pone.0037944. 13. Dale, J.L, Bateson, M.F., Chaleeprom, W. Mahon, R., Henderson, J., and Burns, T. (1997), Generation of transgenic Papaya resistant to Papaya ringspot virus type P, Papaya ringspot virus workshop, Brisbane, Australia, 6-7 October 1997. 14. Davis, M.J., and Z. Ying. 2004. Development of papaya breeding lines with transgenic resistance to Papaya ringspot virrus. Plant Disease. 88:352-358. 15. Dawson, W.O.a.L-S., H. 1984. Examination of the mode of action of ribavirin against tobaco mosaic virus.77-84. 16. Gonsalves, D., S. Tripathi, J. B. Carr, and J. Y. Suzuki. 2010. Papaya Ringspot virus. The Plant Health Instructor. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 73 17. Huffman, J.H., Sidwell, R.W., Khare, G.P., Witkowsk, J.T., Allen, L.B. and Robins, R.K. 1973. In vitro effect of 1-13-D-ribofuranosyl-1,2,4-trizole-3-carboxamide (Virazole, ICN 1229) on deoxy-ribonucleeic and ribonucleic acid viruses. Antimicrob. Agents Chemother: 235-241. 18. Lozoya-Saldana, H., Dawson, W.O. and Murashige, T. 1984. Effects of ribavirin and adenine ar-abinoside on tobacco mosaic virus in Nicotiana tabacum L. Var. Xanthi tissue cultures. Plant Cell Tissue Organ Culture. 41-48. 19. Mowat, W., and S. Dawson. 1987. Detection and identification of plant viruses by ELISA using crude sap extracts and unfractionated abtisera. Journal of virological methods. 15:233-247. 20. Nelson, M. R. and Knuhtsen, H. K. 1973. Squash mosaic virus variability: review and serological comparisons of six biotypes. Phytopathology 63:920–926. 21. Nolan, P. A. and Campbell, R. N. 1984. Squash mosaic virus detection in individual seeds and seed lots of cucurbits by enzyme-linked immunosorbent assay. Plant Disease 68:971–975. 22. PCR Troubleshooting: The Essential Guide/Book, Michael L. Altshuler Moscow Research Institute of Medical Ecology (2006). 23. Provvidenti, R. 1993. Resistance to viral diseases of cucurbits. Pages 8–43 in: Resistance to Viral Diseases of Vegetables: Genetics and Breeding. M. M. Kyle, editor. Timber Press, Portland, Oregon. 24. Provvidenti, R., (1986a). Reactions of PI accessions of Citrullus colocynthis to Zucchini yellow mosaic virus and other viruses. Cucurbit Genet. Coop. Rep. 9, 82–83. 25. Provvidenti, R., Gonsalves, D., and Humaydan, H. S. 1984. Occurrence of Zucchini yellow mosaic virus in cucurbits from Connecticut, New York, Florida, and California. Plant Dis. 68:443-446. 26. Provvidenti, R., (1986b). Viral disease of cucurbits and source of resistance. Food and Fertilizer Technology Center Technical Bulletin No. 93. 27. Provvidenti, R., (1993). In: Kyle, M.M. (Ed.), Resistance to Viral Diseases of Vegetables. Timber Press, Portland, OR. 28. Provvidenti, R. 1993. Resistance to viral diseases of cucurbits. Pages 8–43 in: Resistance to Viral Diseases of Vegetables: Genetics and Breeding. M. M. Kyle, editor. Timber Press, Portland, Oregon. 29. Shepard, J.F. 1977. Regeneration of plants from protoplasts of potato virus X-infected tobacco leaves. II. Influence of virazole on the frequency of infetion. Virology 261-266. 30. Sidwell, R. W., Huffman, J.H., Khare, G.P., Allen, L.B., Witkowski, J.T. and Robins, R.K. .1972. Broad-Spectrum antiviral activity of virazole:1-13-D-ribofuranosyl1,2,4- triazole-3-carboxamide. Science 177,.705-706. 31. Simpkins, I., Walkey, D.G.A. and Neely, H.A. 1981. Chemical suppression of virus in cultured plant tissues. Ann. Apph Biol. 116-161. Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 74 32. Song BA, Y., J.Y., Jin LH, Bhadury S.2009. Environment friendly anti-plant viral agent. Berlin: Springer press.:234-253. 33. SYNGENTA, AG. 2000. Bion, Reg. No. L6512 Act No. 36 of 1947. 34. Zitter, T. A., and J. F. Murphy. 2009. Cucumber mosaic. The Plant Health Instructor. DOI: 10.1094/PHI-I-2009-0518-01 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 75 PHỤ LỤC Phụ lục 1: ELISA phát PRSV bí xanh Hòa Bình năm 2014 Mẫu M3-K-KB M1-K-KB M2-K-KB M3-BD-KB M2-BD-KB M1-BD-KB M3-BV-KB M1-BV-KB M2-BV-KB M1-N-KB M2-N-KB M3-N-KB M2-N-HB M1-N-HB M3-N-HB M3-K-HB M2-K-HB M1-K-HB BX1-LS BX2-LS BX-3LS BX1-YT BX2-YT BX3-YT BX4-YT BX1-LT BX2-LT BX3-LT BX4-LT BX1-TL BX2-TL BX3-TL BX4-TL BX5-TL Địa điểm thu mẫu (huyện) Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình Lạc Sơn Lạc Sơn Lạc Sơn Yên Thủy Yên Thủy Yên Thủy Yên Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Triệu chứng Khảm Khảm Khảm Biến dạng Biến dạng Biến dạng Biến vàng Biến vàng Biến vàng Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Khảm Khảm Khảm Khảm Khảm vàng Khảm vàng Khảm vàng Khảm Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm Khảm vàng Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm Khảm nhăn Khảm Khảm Trị số OD 1.995 1.227 1.682 1.452 1.719 2.253 -0.141 -0.134 2.215 -0.113 0.961 0.073 0.396 0.715 0.627 0.515 0.763 0.795 -0.057 -0.044 -0.081 -0.032 0.871 0.844 1.255 0.117 0.490 0.629 0.514 0.650 0.495 -0.092 0.301 -0.089 Kết luận + + + + + + + - + + + + + + + + + + + + + + + + + + - Cây khỏe 1: 0.147 Cây khỏe 2: 0.135 TB khỏe: 0.141 Ngưỡng: 0.282 Tổng: 34 25/34 73,53% Phụ lục 2: ELISA phát CMV bí xanh Hòa Bình năm 2014 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 76 Mẫu M3-K-KB M1-K-KB M2-K-KB M3-BD-KB M2-BD-KB M1-BD-KB M3-BV-KB M1-BV-KB M2-BV-KB M1-N-KB M2-N-KB M3-N-KB M2-N-HB M1-N-HB M3-N-HB M3-K-HB M2-K-HB M1-K-HB BX1-LS BX2-LS BX-3LS BX1-YT BX2-YT BX3-YT BX4-YT BX1-LT BX2-LT BX3-LT BX4-LT BX1-TL BX2-TL BX3-TL BX4-TL BX5-TL Địa điểm Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình Lạc Sơn Lạc Sơn Lạc Sơn Yên Thủy Yên Thủy Yên Thủy Yên Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Triệu chứng Khảm Khảm Khảm Biến dạng Biến dạng Biến dạng Biến vàng Biến vàng Biến vàng Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Khảm Khảm Khảm Khảm Khảm vàng Khảm vàng Khảm vàng Khảm Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm Khảm vàng Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm Khảm nhăn Khảm Khảm OD 0.129 0.126 0.136 0.127 0.132 0.146 0.158 0.142 0.121 0.124 0.138 0.132 0.156 0.125 0.148 0.161 0.123 0.127 0.131 0.299 0.141 0.175 0.183 0.301 0.086 0.099 0.258 0.113 0.139 0.124 0.227 0.220 0.357 Cây khỏe 1: 0.081 Cây khỏe 2: 0.088 TB khỏe: 0.0845 Ngưỡng: 0.0.169 Tổng: 34 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 8/34 Kết luận + + + + + + + + 23,53% Page 77 Phụ lục 3: ELISA phát ZYMV bí xanh Hòa Bình năm 2014 Mẫu M3-K-KB M1-K-KB M2-K-KB M3-BD-KB M2-BD-KB M1-BD-KB M3-BV-KB M1-BV-KB M2-BV-KB M1-N-KB M2-N-KB M3-N-KB M2-N-HB M1-N-HB M3-N-HB M3-K-HB M2-K-HB M1-K-HB BX1-LS BX2-LS BX-3LS BX1-YT BX2-YT BX3-YT BX4-YT BX1-LT BX2-LT BX3-LT BX4-LT BX1-TL BX2-TL BX3-TL BX4-TL BX5-TL Địa điểm Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi Kim Bôi TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình TP. Hòa Bình Lạc Sơn Lạc Sơn Lạc Sơn Yên Thủy Yên Thủy Yên Thủy Yên Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Lạc Thủy Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Tân Lạc Triệu chứng Khảm Khảm Khảm Biến dạng Biến dạng Biến dạng Biến vàng Biến vàng Biến vàng Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Nhăn Khảm Khảm Khảm Khảm Khảm vàng Khảm vàng Khảm vàng Khảm Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm Khảm vàng Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm nhăn Khảm Khảm nhăn Khảm Khảm OD 0.122 0.130 0.145 0.210 0.142 0.302 0.127 0.137 0.141 0.144 0.147 0.233 0.151 0.152 0.170 0.149 0.078 0.164 0.113 0.107 0.092 0.107 0.076 0.095 0.089 0.083 0.092 0.094 0.091 0.087 0.105 0.065 0.095 0.070 Cây khỏe 1: 0.139 Cây khỏe 2: 0.215 TB khỏe: 0.177 Ngưỡng: 0.354 Tổng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 34 Kết luận - - Page 78 Phụ lục 4: ELISA phát PRSV bí ngô Hòa Bình năm 2014 Mẫu Địa điểm Triệu chứng OD BĐ1-KB Kim Bôi Khảm 1.615 + BĐ2-KB Kim Bôi Khảm vàng 0.119 - BĐ3-KB Kim Bôi Khảm nhăn 0.072 - BĐ4-KB Kim Bôi Khảm vàng 0.077 - BĐ1-LS Lạc Sơn Khảm vàng 0.079 - BĐ2-LS Lạc Sơn Khảm 0.074 - BĐ3-LS Lạc Sơn Khảm 0.093 - BĐ4-LS Lạc Sơn Khảm quăn 0.070 - BĐ1-TPHB TP. Hòa Bình Khảm 1.132 + BĐ2-TPHB TP. Hòa Bình Khảm 1.866 + BĐ3-TPHB TP. Hòa Bình Khảm vàng 0.075 - BĐ1-KS Kỳ Sơn Khảm vàng 0.610 + BĐ2-KS Kỳ Sơn Khảm 0.149 - BĐ3-KS Kỳ Sơn Khảm 0.078 - BĐ1-YT Yên Thủy Khảm vàng 2.320 + BĐ2-YT Yên Thủy Khảm 0.066 - BĐ3-YT Yên Thủy Khảm vàng 0.065 - BĐ1-LT Lạc Thủy Khảm 0.070 - BĐ2-LT Lạc Thủy Khảm vàng 0.107 - Kết luận Cây khỏe 1: 0.075 Cây khỏe 2: 0.088 TB khỏe: 0.0815 Ngưỡng: 0.163 Tổng: 19 5/19 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 26,32% Page 79 Phụ lục 5: ELISA phát CMV bí ngô Hòa Bình năm 2014 Mẫu Địa điểm Triệu chứng OD BĐ1-KB Kim Bôi Khảm 0.107 - BĐ2-KB Kim Bôi Khảm vàng 0.080 - BĐ3-KB Kim Bôi Khảm nhăn 0.083 - BĐ4-KB Kim Bôi Khảm vàng 0.089 - BĐ1-LS Lạc Sơn Khảm vàng 0.075 - BĐ2-LS Lạc Sơn Khảm 0.088 - BĐ3-LS Lạc Sơn Khảm 0.204 + BĐ4-LS Lạc Sơn Khảm quăn 0.127 - BĐ1-TPHB TP. Hòa Bình Khảm 0.085 - BĐ2-TPHB TP. Hòa Bình Khảm 0.080 - BĐ3-TPHB TP. Hòa Bình Khảm vàng 0.091 - BĐ1-KS Kỳ Sơn Khảm vàng 0.080 - BĐ2-KS Kỳ Sơn Khảm 0.078 - BĐ3-KS Kỳ Sơn Khảm 0.101 - BĐ1-YT Yên Thủy Khảm vàng 0.216 + BĐ2-YT Yên Thủy Khảm 0.078 - BĐ3-YT Yên Thủy Khảm vàng 0.092 - BĐ1-LT Lạc Thủy Khảm 0.095 - BĐ2-LT Lạc Thủy Khảm vàng 0.075 - Kết luận Cây khỏe 1: 0.081 Cây khỏe 2: 0.088 TB khỏe: 0.0845 Ngưỡng: 0.169 Tổng: 34 2/19 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 10,53% Page 80 Phụ lục 6: ELISA phát ZYMV bí ngô Hòa Bình năm 2014 Mẫu Địa điểm Triệu chứng OD Kết luận BĐ1-KB Kim Bôi Khảm 0.074 - BĐ2-KB Kim Bôi Khảm vàng 0.061 - BĐ3-KB Kim Bôi Khảm nhăn 0.063 - BĐ4-KB Kim Bôi Khảm vàng 0.069 - BĐ1-LS Lạc Sơn Khảm vàng 0.068 - BĐ2-LS Lạc Sơn Khảm 0.072 - BĐ3-LS Lạc Sơn Khảm 0.088 - BĐ4-LS Lạc Sơn Khảm quăn 0.070 - BĐ1-TPHB TP. Hòa Bình Khảm 0.079 - BĐ2-TPHB TP. Hòa Bình Khảm 0.067 - BĐ3-TPHB TP. Hòa Bình Khảm vàng 0.062 - BĐ1-KS Kỳ Sơn Khảm vàng 0.063 - BĐ2-KS Kỳ Sơn Khảm 0.064 - BĐ3-KS Kỳ Sơn Khảm 0.068 - BĐ1-YT Yên Thủy Khảm vàng 0.101 - BĐ2-YT Yên Thủy Khảm 0.063 - BĐ3-YT Yên Thủy Khảm vàng 0.075 - BĐ1-LT Lạc Thủy Khảm 0.060 - BĐ2-LT Lạc Thủy Khảm vàng 0.061 - Cây khỏe 1: 0.067 Cây khỏe 2: 0.063 TB khỏe: 0.065 Ngưỡng: 0.130 Tổng: 19 - Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp - Page 81 [...]... phần bệnh virus, tỷ lệ các loại bệnh virus hại cây họ bầu bí tại tỉnh Hòa Bình năm 2014, bằng ELISA, PCR - Xác định được hiệu quả phòng chống bệnh virus chính hại cây họ bầu bí bằng chất kích kháng và thuốc trừ virus 2.2 Yêu cầu - Đánh giá tình hình bệnh virus hại cây họ bầu bí tại Hòa Bình - Xác định thành phần bệnh virus bằng phương pháp PCR, ELISA - Xác định tính gây bệnh của virus PRSV bằng lây bệnh. .. hơn nữa các thuốc trên thị trường hiện nay hầu hết chưa có khả năng phòng ngừa bệnh virus gây hại Xuất phát từ yêu cầu của thực tế, với mong muốn áp dụng những kiến thức đã được học vào phục vụ sản xuất, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Xác định virus hại cây họ bầu bí tại tỉnh Hòa Bình, thử nghiệm phòng chống bệnh bằng một số loại thuốc hóa học 2 Mục đích, yêu cầu 2.1 Mục đích - Xác định được... PRSV bằng lây bệnh nhân tạo Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 2 - Đánh giá hiệu quả phòng chống virus chính hại bầu bí bằng một số thuốc kích kháng và thuốc trừ virus Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 3 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cây họ bầu bí Cucurbitaceae Phần lớn các cây trong họ bầu bí có nguồn gốc từ vùng nhiệt... Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 1 Hiện nay sâu bệnh hại trên cây họ bầu bí rất phong phú và đa dạng Một trong các dịch hại quan trọng và phổ biến trên cây họ bầu bí là các bệnh virus Theo Trung tâm nghiên cứu phát triển rau châu Á các virus gây hại trên cây họ bầu bí ở châu Á gồm: virus khảm lá dưa chuột (Cucuber mosaic virus, CMV), virus đốm hình nhẫn đu đủ (Papaya ringspot virus, PRSV), virus khảm... Xác định tỷ lệ bệnh virus hại cây họ bầu bí trên địa bàn tỉnh Hòa Bình năm 2014 - Chẩn đoán bệnh bằng phương pháp PCR, ELISA - Lây bệnh nhân tạo bệnh đốm hình nhẫn do virus PRSV trên cây bí ngô, bí xanh, dưa bở, đu đủ - Thử nghiệm phòng chống bằng kích kháng Bion, Dufulin và thuốc trừ virus Ribavirin 2.2 Địa điểm, thời gian và vật liệu nghiên cứu 2.2.1 Địa điểm nghiên cứu - Tại 06 huyện, TP: Huyện Yên... ty thuốc BVTV An Giang cung cấp Bion 50WP có hoạt chất là acybenzolar-S-methyl (BTH), một chất kích kháng tạo tính kháng tập nhiễm hệ thống thực sự, Sygenta (2000) Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 24 CHƯƠNG 2 NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu - Xác định bệnh virus hại cây họ bầu bí tại tỉnh Hòa Bình - Xác định tỷ lệ bệnh virus. .. các virus khác được truyền đi bởi một số loài rệp một cách không bền vững 1.3.1 CMV (Cucumber mosaic virus) Cucumber mosaic virus là một virus phân bố rộng rãi trên thế giới gây hại hầu hết những cây trồng họ bầu bí nhưng hiếm khi gây hại trên dưa hấu làm giảm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 11 năng suất và chất lượng nông sản Bệnh còn gây hại trên nhiều họ. .. họ bầu bí Ở Việt Nam, cây bầu bí bị rất nhiều loại virus tấn công với nhiều triệu chứng khác nhau do vậy khó có thể phân biệt được virus gây bệnh nếu chỉ dựa vào triệu chứng Theo kết quả nghiên cứu của Vũ Triệu Mân (1995) có nhiều loài virus cùng gây hại trên bầu bí, trong đó điển hình là những loài sau (bảng 1.2) Bảng 1.2 Kết quả thí nghiệm ELISA xác định virus hại cây họ bầu bí Cây trồng Kết quả ELISA... melon mosaic virus – 2, WMV-2, virus khảm vàng bí ngồi (Zucchini yellow mosaic virus, ZYMV), virus cuốn lá dưa (Squash leaf curl virus, SLCV), virus khảm lá dưa (Squash leaf curl virus, SqMV), virus đốm vòng thuốc lá (Tobacco ringspot virus, TRSV) và virus khảm đốm xanh dưa chuột (Cucumber green mild motle virus, CGMMV) Việc chẩn đoán, nhận biết bệnh virus nói chung, virus gây hại trên cây bầu bí nói riêng... sativas) 3 Bí xanh (Benincasa hispida) 4 Bí đỏ (Cucurbita pepo L) 5 Bầu (Lagenaria sicerraria) 6 Mướp (Luffa aegupliaca) 7 Su su (Sechium edule) 8 Lặc lày (Luffa sp.) 130 3.393 9 Dưa bở (Cucumis melo) 178 3.275 10 Bầu bí khác 1.162 20.549 Nguồn Cục thống kê tỉnh Hòa Bình 2010-2014 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 10 1.3 Một số bệnh virus trên cây họ bầu bí Ở Việt . NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM VŨ THỊ ANH ĐÀO XÁC ĐỊNH VIRUS HẠI CÂY HỌ BẦU BÍ TẠI TỈNH HÒA BÌNH, THỬ NGHIỆM PHÒNG CHỐNG BỆNH BẰNG MỘT SỐ THUỐC HÓA HỌC CHUYÊN. định virus hại cây họ bầu bí tại tỉnh Hòa Bình, thử nghiệm phòng chống bệnh bằng một số loại thuốc hóa học . 2. Mục đích, yêu cầu 2.1. Mục đích - Xác định được thành phần bệnh virus, tỷ lệ. loại bệnh virus hại cây họ bầu bí tại tỉnh Hòa Bình năm 2014, bằng ELISA, PCR. - Xác định được hiệu quả phòng chống bệnh virus chính hại cây họ bầu bí bằng chất kích kháng và thuốc trừ virus.