Đang tải... (xem toàn văn)
Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid Tổng hợp và thăm dò tác dụng sinh học một số dẫn chất của isoniazid
BỘYTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI ea ***** DƯƠNG HỔNG DIỆP TỔNG HỢP VÀ THẢM DÒ TẮC DỤNG % % SINH HỌC MỘT SỐ DÂN CHẤT CỦA ISONIAZID (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DU3C s ĩ KHOÁ 2001-2005) Người hướng dẫn : PGS. TS. NGUYỄN QUANG ĐẠT ThS. VŨ TRẦN ANH Nơi thực hiện : BỘ MÔN HOÁ HỮU c ơ Thời gian thực hiện ; 28/3 - 27/5/2005 HÀ NỘI, THÁNG 5 - 2005 c Ä r r t / ư n / vớỉ IÒH0 biết ơn õấu eắc tôi xin chân thành clm ơn: PỔ5. T5. N^uyấn Quaii0 Đạt, Th5. Vữ Trl'n Anh âầ tận tình hưốn^ dẫn tôi tron^ quá trình thực hiện luân văn này. Tôi xin chân thành clm ơn T5. Đỗ Ngọc Thanh (Phồn^ thí nghiệm trun0 tâm - Trường £)ại học Dược Hà Nội); T5. Cao Văn Thu (Bộ môn Vi sinh học - Trường 9ại học Dược Hà Nội); Phòng ỡinh học thực nghiệm ('/iện hoá học các hợp chất thiên nhiềti); Phòng khổi phổ (V'iên hoá học). Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô ^iáo, kỹ thuệt viên môn Hoá hữu cơ - Trường Đạ\ học Dược Hà Nội âầ giúp ¿íố tôi tron^ ữ^uá trình thực hiện luận vẩn tại Bộ môn. Hà Nội, ngày 50 tháii^ 5 năm 2005 Sinh viên: Dương Hổri0 Diệp MỤC LỤC Đặt vấn đề 1 Phần 1: TỔNG QUAN 2 1.1 Bệnh lao và thuốc điều trị 2 1.2 Isoniazid: Cấu tạo hóa học, khả năng phản ứng và tác dụng sinh học 4 1.3 Tác dụng sinh học của dẫn chất hydrazon 5 1.4 Các phương pháp tổng hợp dẫn chất hydrazon 11 Phần 2: THực NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 13 2.1 Hoá chất, phương tiện và phưofng pháp thực nghiệm 13 2.2 Tổng hợp hoá học 14 2.2.1 Sơ đồ tổng hợp hoá học 14 2.2.2 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon của benzaldehyd 15 2.2.3 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon của 4-clorobenzaldehyd 16 2.2.4 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon của 3-nitrobenzaldehyd 17 2.2.5 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon của salicylíittkỄv^L 18 2.2.6 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon của vaniù^n 18 2.2.7 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon của furfural 19 2.2.8 Tổng hợp isonicotinoyl hydrazon cuanitrofurfural 20 2.3 Kiểm tra độ tinh khiết và xác định cấu trúc 23 2.4 Thử tác dụng sinh học 28 2.4.1 Thử tác dụng kháng khuẩn 28 2.4.2 Thử tác dụng kháng tế bào ung thư 31 2.5 Bàn luận 34 2.5.1 Tổng hợp hoá học 34 2.5.2 Thử tác dụng sinh học 35 Phần 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 36 Tài liệu tham khảo. Phu luc. CÁC CHỮ VIẾT TẮT DMF ; Dimethylformamid DMKT : Dung môi khai triển DMSO : Dimethylsulfoxyd Hep - 2 : Tế bào ung thư gan người IR : Infrared spectroscopy (Phổ hồng ngoại) MS : Mass spectrometry (Phổ khối lượng) PAS : Acid paraamino salicylic SKLM : Sắc ký lớp mỏng UV : Ultraviolet spectroscopy (Phổ tử ngoại) vsv : Vi sinh vật ĐẶT VẤN ĐỂ Thuốc được sử dụng trong cồng tác phòng và chữa bệnh có nhiều nguồn gốc khác nhau. Trong đó các thuốc được tạo ra bằng phương pháp tổng hợp và bán tổng hợp giữ một vai trò quan trọng. Trong lĩnh vực tổng hợp thuốc, để nhanh chóng tạo ra các thuốc mới, các nhà nghiên cứu thường dựa trên cấu trúc của các chất đang được dùng làm thuốc hoặc các chất có tác dụng dược lý để tạo ra các chất mới dự đoán có tác dụng tốt hơn, ít độc hơn, hiệu quả cao hơn trong điều trị. Nhiều năm qua các nhà nghiên cứu trên thế giới và trong nước tiếp tục nghiên cứu, tổng hợp và thử tác dụng kháng lao của các dãy chất hữu cơ khác nhau[5] [9] [12] [16] [17].Trong giai đoạn hiện nay, điều trị bệnh lao trở lên khó khăn hơn do sự phát triển của lao kháng thuốc và do mối liên quan giữa bệnh lao và bệnh AIDS , vì thế việc tìm ra các dẫn chất chống lao mới sẽ góp phần vào việc điều trị bệnh lao có hiệu quả hơn. Trong số các loại thuốc được dùng để điều trị lao hiện nay, isoniazid vãn được coi là thuốc hàng đầu [6 ]. Từ isoniazid người ta điều chế ra được nhiều dẫn chất có tác dụng với vi khuẩn lao [5] [16], trong đó có các dẫn chất hydrazon. Sự đa dạng về hoạt tính sinh học của dẫn chất hydrazon như tác dụng kháng khuẩn, kháng viêm, kháng tế bào ung thư, chống virut đã hướng chúng tôi nghiên cứu tổng hợp một số dẫn chất hydrazon của isoniazid với những mục tiêu nghiên cứu sau: 1. Tổng hợp một số dẫn chất hydrazon của isoniazid. 2. Thử tác dụng sinh học của các dẫn chất này với hy vọng tìm được các chất hoạt tính sinh học cao, hướng tới nghiên cứu sâu hơn về khả năng ứng dụng thực tế. Với mục tiêu trên chúng tôi hy vọng đề tài này là một đóng góp nhỏ vào việc nghiên cứu tìm kiếm các dẫn chất mới của isoniazid có tác dụng kháng lao và các hoạt tính sinh học khác. PHẦNl TỔNG QUAN 1.1. BỆNH LAO VÀ THUỐC ĐlỂU TRỊ. Bệnh lao đang là vấn đề khẩn cấp của toàn cầu và là nỗi lo của nhiều quốc gia . Trong những năm gần đây bệnh lao có chiều hướng gia tăng, nhất là ở những nước đang phát triển, bệnh lao là nguyên nhân hàng đầu gây tử vong trong số những người trẻ tuổi và trưởng thành trên thế giới [6 ]. Trên thế giới hiện có khoảng 2 tỷ người nhiễm lao. Mỗi năm có khoảng 8 triệu người mắc mới và 2 triệu người chết vì lao. Tại Việt Nam, theo ước tính chính thức của Chương trình chống lao quốc gia, khoảng 44% dân số Việt Nam nhiễm lao, số bệnh nhân nhiễm lao mới các thể hàng năm là 145.000 người. Tình hình lao kháng thuốc ngày càng diễn biến phức tạp. Theo tư liệu của Chương trình chống lao quốc gia, sau 6 năm (1996-2002) tỷ lê kháng thuốc đơn lẻ giảm nhưng tỷ lệ kháng đa thuốc lại tăng, làm cho nguy cơ lây lan loại vi khuẩn kháng thuốc này trong cộng đồng là một vấn đề nan giải [6 J[8 ]. Các thuốc điều trị lao cho đến nay vẫn là biện pháp chính trong điều trị và ngăn chặn bệnh lao [8].[13]Í18]. Điều trị lao bằng tmiốc ngày nay có 2 mục đích, nhằm vào 2 nhóm trực khuẩn lao trong cơ thể; nhóm sinh sản nhanh, phát triển mạnh trong các tổn thương viêm, nhóm phát triển chậm nằm trong các đại thực bào và chất bã đậu. Ngày nay bệnh lao được điều trị bằng thuốc theo nguyên tắc [6 ]^ [8 ]: - Phối hợp các loại thuốc để hạn chế khả năng kháng thuốc của VI khuẩn - Điều trị theo 2 giai đoạn: + Giai đoạn tấn công: phải phối hợp ba thuốc trở lên và dùng hàng ngày + Giai đoạn duy trì: Phối hợp hai thuốc trở lên và có thể dùng ngắt quãng 2- 3 lần / tuần. Các thuốc chống lao hiện nay được chia làm 2 loại: -Thuốc chống lao thiết yếu (thuốc chống lao hạng 1) : isoniazid, rifampicin, pyrazinamid, streptomycin và ethambutol. -Thuốc chống lao hạng 2: thiacetazon, ethionamid, kanamycin, capreomycin, PAS. Liều tối ưu của các thuốc chống lao thiết yếu (theo khuyến cáo của TCYTTG năm 1997) Tên thuốc Liều lương hàng ngày mg/kg Liều cách quãng 3 lần/tuần mg/kg 2 lần/tuần mg/kg Isoniazid (H) Rifampicin (R) Pyrazinamid (Z) Ethambutol (E) Streptomycin (S) 5(4 - 6 ) 1 0 ( 8 -1 2 ) 25 (20 - 30) 15 (15 - 20) 15(12-18) 1 0 (8 -1 2 ) 1 0 ( 8 - 1 2 ) 35 (30 -40) 30 (25- 35) 15(12-18) 15(13-17) 1 0 ( 8 -1 2 ) 50 (40 - 60) 45 (40 -50) 15(12-18) * Phần viết trong ngoặc là khoảng liều được phép điều chỉnh Tại Việt Nam Chương trình chống lao quốc gia đề xuất phác đồ điều trị và chỉ định như sau: - Phác đồ điều trị bệnh nhân lao mới: + Công thức: 2 SHRZ/6 HE Sử dụng loại thuốc streptomycin, isoniazid, rifampicin và pyrazinamid hàng ngày trong 2 tháng đầu, 6 tháng tiếp theo dùng 2 loại thuốc isoniazid và ethambutol hàng ngày. + Chỉ định: Tất cả các trường hợp bệnh nhân lao mới. - Phác đồ điều trị lại: + Công thức: 2 SHRZE / 1HRZE / 5 H3 R3 E3 Sử dụng 5 loại thuốc Streptom ycin,isoniazid,rifampicin, pyrazinamid, ethambutol liên tục trong 2 tháng đầu, tháng thứ 3 dùng 4 loại isoniazid, rifampicin, pyrazinamid, ethambutol hàng ngày, 5 tháng tiếp theo dùng 3 lần 1 tuần với 3 loại isoniazid, rifampicin, ethambutol. + Chỉ định: cho tất cả các trường hợp điều trị thất bại hoặc tái phát của công thức điều trị bệnh nhân lao mới. - Phác đồ điều trị lao cho trẻ em: + Côngthức:2HRZ/4HR Sử dụng 3 loại thuốc isoniazid, rifampicin, pyrazinamid hàng ngày trong 2 tháng đầu, 4 tháng tiếp theo với 2 loại isoniazid, rifampicin. + Chỉ định: tất cả các trường hợp lao trẻ em. Trên đây là một vài nét tổng quát về bệnh lao và các phưoỉng pháp điều trị bệnh lao. Trong số các thuốc điều tri lao, isoniazid là thuốc có tác dụng mạnh , diệt được cả vi khuẩn trong và ngoài tế bào. Sau đây là một vài nét về cấu tạo hoá học cũng như tác dụng sinh học của isoniazid. 1.2. ISONIAZID : CẤU TẠO HOÁ HỌC, KHẢ NĂNG PHẢN ÚNG VÀ TÁC DmG SINH HỌC. 1.2.1. Cấu tạo hoá học, khả năng phản ứng của isoniazid. Isoniazid là hydrazid của acid isonicotinic có công thức. 0 =C-N H -N H 2 N Isoniazid có khả năng tham gia vào phản ứng hoá học do các yếu tố cấu trúc là nhân pyrirín và nhóm hydrazin. - Phản ứng của nhân pyridin. + Đun chế phẩm vói nat^cbonat khan giải phóng pyridin có mùi đặc biệt. +Dung dịch chế phẩm trong nước, tác dụng với đồng Sulfat tạo phức màu xanh da trời. - Phản ứng của nhóm chức hydrazin. + Tác dụng với dung dịch bạc nitrat và đun nóng tạo tủa đen của bạc kim loại. 0 = C -N H -N H 2 - Q ị + 4AgN03 ^ N COOH + 4Agị + Nít + N 4HNO, + Phản ứng ngưng tụ với aldehyd, ceton tạo hydrazon ít tan trong nước, có điểm chảy xác định^ản ứng này được ứng dụng để tạo ra nhiều dẫn xuất của isoniazid. 0=C-NH-NH2 N 0 - C Rj ¿ 2 0=C -N H -N =C-R2 ¿ 1 N H,0 1.2.2.Tác dụng sinh học của ỉsonỉadd. Isoniazid vừa có tác dụng kìm khuẩn, vừa có tác dụng diệt khuẩn. Nồng độ ức chế tối thiểu đối với trực khuẩn lao từ 0,025- 0,05 I^g/ml. Thuốc ức chế tổng hợp acid mycolic, thành phần chủ yếu tạo nên lófp vỏ phospholipid của vi khuẩn lao. Khi vào cơ thể thuốc được hấp thu gần như hoàn toàn, thuốc có thể khuyếch tán tốt tới tất cả các cơ quan và dịch cơ thể,, kể cả dịch não tuỷ. Trong điều trị người ta thường phối hợp isoniazid với thuốc chữa lao khác để làm tăng tác dụng, giảm liều các thuốc phối hợp và làm chậm sự kháng thuốc của trực khuẩn lao. 1.3. TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA DẪN CHẤT HYDRAZON. 1.3.1. Tác dụng kháng khuẩn của dẫn chất hydrazon. Đây là tác dụng quan trọng nhất của các dẫn chất hydrazon, đáng chú ý nhất là dẫn chất hydrazon của 5- nitrofurfural có công thức chung: Năm 194j| G. Domagk [17] đã tổ^ hợMược Tibion (Thiosemicarbazon của aldehyd pai!ar acetylaminobenzS[sj^9 ^ dụng chống lao và đã áp dụng vào thực tế lâm sàng với kết quả tốt với các tên biệt dược như TBI, Corteben, Livazon. o >— . s H3C - C - H N - / '^ C H = N -N H -C -N H 2 Thông thường người ta hay phối hcfp Tibion với PAS ( acid pỉ^^amino salicylic) để làm tăng tác dụng của PAS trong điều trị lao màng nhầy, lao da, lao khoang miệng. Năm 1948 MN. Soulina và E.Michina [17] đã tổng hợp được 1 dẫn chất khác của Thiosemicarbazon có tác dụng chống lao lấy tên là Cutizon có công thức như sau: H3C-C— > -C H = N -N H -C -N H 2 H Dãy có tác dụng chống lao mạnh thứ hai là dẫn chất isonicotinoyl hydrazon với các dãn chất như: Saluzid(isonicotinoylhydrazon của 2- carboxy- 3,4 - dimetoxybenzaldehyd) [...]... Phtivazid(Vanizit)(isonicotinoylhydrazon của 3 - metoxy - 4 -hydroxybenzaldehyd) Năm 1999 các tác giả Maria T Cocco và cộng sự [16], đã tổng hợp một số dẫn chất isonicotinoyl hydrazon bằng cách cho isoniazid tác dụng với một vài acyloxyacetonitril Sau đó các chất thu được lại cho tác dụng với pyridin^ carboxaldehyd tạo thành các dẫn chất mới Các tác giả đã thu được 34 dẫn chất của isoniazid và tiến hành thử tác dụng trên vi khuẩn... thấy hầu hết các chất đều có tác dụng trên vi khuẩn lao, một số chất có tác dụng tốt với vi khuẩn lao kháng thuốc [16] Năm 2000 các tác giả Trần Viết Hùng, Nguyễn Quang Đạt, Lê Ngọc Vân [9], đã nghiên cứu tổng hợp và thử tác dụng của một số dẫn chất thiosemicarbazon và isonicotinoyl hydrazon của isatin và 5 -halogen0 5 atin Kết quả cho thấy tất cả các chất tổng hợp được đều có tác dụng mạnh trên chủng... vọng được sử dụng làm thuốc, chúng tôi tiến hành thử tác dụng sinh học của các chất tổng hợp được 2.4.1 Thử tác dụng kháng khuẩn Tại bộ môn Vi sinh trường Đại học Dược Hà Nội, chúng tôi tiến hành thử tác dụng kháng khuẩn của các chất tổng hợp được với 10 chủng vi khuẩn kiểm định Nguyên tắc : Dựa trên sự khuếch tán của chất thử vào môi trường dinh dưỡng có chứa vi sinh vật kiểm định Nếu chất thử có hoạt... 6 dẫn chất của 3-isonicotinoyl hydrazon của isatin và 5- halogencảsatin có tác dụng trên cả chủng vi khuẩn lao đã kháng isoniazid Năm 2001 các tác giả Ngô Mai Anh, Vũ Trần Anh, PhạmvMinh Thuỷ [5 ] đã nghiên cứu tổng hợp và thử tác dụng chống lao của một số dẫn chất isonicotinoyl hydrazon của vaniùịn và các vanil\in thay thế 0 =C -N H -N =C H 0 N R=H = NƠ2 =I =C 1 0 CH1 Kết quả cho thấy các chất tổng. .. khiết của sản phẩm tổng hợp được bằng SKLM, đo nhiệt độ nóng chảy Xác nhận cấu trúc của các chất tổng hợp được dựa trên phân tích phổ u v , IR, MS Thử tác dụng kháng khuẩn của các chất tổng hợp được dựa theo phương pháp khuyếch tán thạch theo quy định của Dược điển Việt Nam Thử tác dụng kháng tế bào ung thư được tiến hành theo mô hình thử nghiệm hoạt tính kháng tế bào ung thư hiện đang lưu hành và áp dụng. .. tổng hợp được đều thể hiện tác dụng trên vi khuẩn lao tuy ở mức độ khác nhau 1.3.2 .Tác dụng chống khối u của dẫn chất hydrazon [20] Trong vài thập niên trở lại đây do sự gia tăng của bệnh ung thư người ta chú ý đặc biệt vào việc nghiên cứu ra các loai thuốc mới để thanh toán căn bệnh nan y này Trong quá trình nghiên cứu bước đầu người ta phát hiện ra một số dẫn chất có cấu trúc hydrazon có tác dụng. .. kháng khuẩn, trong đó chất V có tác dụng rất yếu đối với 2 chủng vi khuẩn {Bacillus cereus , Bacillus subtilỉs), riêng với chất VII có tác dụng khá rõ rệt với khuẩn, 4 chất còn lại (I-IV) không có tác dụng 6 chủng vi Bảng 7: Kết quả thử tác dụng kháng khuẩn của các chất tổng hợp được ị Nồng độ chất thử: 4 mg/mỉ (dung môi DMF) Đường kính vòng vô khuẩn tính theo mm Không có tác dụng: - ) Chủng v sv ~ Bacillus... vùng tử ngoại của các chất tổng hợp được do cấu trúc phân tử có cácnhóm mang màu như ỵv >c=0, -NO2, và các hệ liên hợp (nhân pyridin, nhân bezen) Bảng 5: Giá trị của các chất tổng hợp được ^ EtOH /L'max Số chất I 204 333 II 207 305 III 207 282 IV 214 288 332 V 214 275 333 VI 210 VII 211 316 285 351 -Phổ tử ngoại của 7 chất (I-VII) cổ 2 hoặc 3 cực đại ờ các vùng 204-214 nm, 275-288 nm và 305-351 nm... 2.2.TỔNG HỢP HÓA HỌC 2.2.1 Sơ đồ tổng hợp hóa học Trong khóa luận này chúng tôi tiến hành tổng hợp các chất theo sơ đồ phản ứng sau: 0 0=C-NH-NH2 Ọ + 0=HC-Ar -HoO =C-NH-N-C-Ar H Ọ Với: Ar Chất Ar (I) HO Chất (V ) H3 CO' (V I) (II) (III) NO, O0 N (V II) (I V ) OH Tất cả các phản ứng trên được tiến hành trong dung môi ethanol tuyệt đ ố i, xúc tác acid acetic đặc 2.2.2 Tổng hợp ỉsonỉcotỉnoyl hydrazon của. .. trình bày ở phụ lục 1-7 Kết quả phân tích số liệu phổ hồng ngoại được ghi ở bảng 4 Qua nghiên cứu phổ đồ của các chất chúng tôi nhận biết được các dải hấp thụ đặc trưng của các nhóm chức và các liên kết của các chất tổng hợp được, kết quả biện giải cụ thể đã ghi từng chất, sau đây là một số nhận xét chung - Phổ hồng ngoại của 7 chất (I-V có các dải hấp thụ của các yếu tố chung n) như nhân thofm (vòng . Bệnh lao và thuốc điều trị 2 1.2 Isoniazid: Cấu tạo hóa học, khả năng phản ứng và tác dụng sinh học 4 1.3 Tác dụng sinh học của dẫn chất hydrazon 5 1.4 Các phương pháp tổng hợp dẫn chất hydrazon. sự kháng thuốc của trực khuẩn lao. 1.3. TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA DẪN CHẤT HYDRAZON. 1.3.1. Tác dụng kháng khuẩn của dẫn chất hydrazon. Đây là tác dụng quan trọng nhất của các dẫn chất hydrazon,. cứu tổng hợp và thử tác dụng của một số dẫn chất thiosemicarbazon và isonicotinoyl hydrazon của isatin và 5 -halogen0 5 atin . Kết quả cho thấy tất cả các chất tổng hợp được đều có tác dụng