KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG BẢN CHẤT CỦA CÁC SAI SỐ TRONG QUÁ TRÌNH LÀM XÉT NGHIỆM Tiến hành làm một XN hóa sinh thường có những bước sau: - Đo thể tích nước cất hoặc dung dịch nước muối sinh lý để pha loãng mẫu bệnh phẩm - Đo thể tích mẫu bệnh phẩm - Đo thể tích thuốc thử dùng trong phản ứng làm XN. - Trộn đều - Đợi thời gian nhất định cho phản ứng thực hiện - Đo mật độ quang của dung dịch làm XN - Tính kết quả bằng cách đối chiếu với mật độ quang của một mẫu chuẩn có nồng độ biết trước Với những thiết bị phân tích tự động, những giai đoạn XN và thao tác XN được đơn giản hóa và rút ngắn đi nhiều. Trong quá trình làm XN ở mỗi bước đều có thể có những sai số không thể tránh khỏi mặc dù người làm XN thao tác rất cẩn thận, nhất là trong 3 bước ban đầu khi đo thể tích. Mục tiêu chính của việc kiểm tra chất lượng là phát hiện những sai số xảy ra trong quá trình làm xét nghiệm và hạn chế đến mức thấp nhất những sai số, vì vậy công tác kiểm tra chất lượng dựa vào lý thuyết của những sai số xảy ra trong quá trình làm xét nghiệm, tức là những sai số kỹ thuật I. CÁC SAI SỐ 1. Sai số thô bạo hay bất thường - Không thực hiện đúng thủ tục XN - Nhầm lẫn thuốc thử, dụng cụ đo lường, bước sóng - Tính sai kết quả Sai số này có thể tránh được do phụ thuộc vào chất lượng của người làm XN quá trình đào tạo họ, vì vậy có thể tránh được những sai số bất thường bằng cách làm việc thận trọng, tập trung và cần tổ chức tốt phòng XN. Một số yếu tố ngoại cảnh như vệ sinh, trật tự ngăn nắp của nơi làm việc, ánh sáng, thông gió, tiếng ồn trong phòng XN cũng tác động một phần đến chất lượngXN. Khối lượng công tác XN quá nhiều so với khả năng cũng ảnh hưởng tới kết quả XN. 2. Sai số bất ngờ hay ngẫu nhiên Thường xảy ra ngẫu nhiên, bất ngờ, khó tránh khỏi - Do thuốc thử hỏng - Dụng cụ thủy tinh không chuẩn xác - Dòng điện không ổn định - Thao tác người làm XN chưa thuần thục - Thiết bị làm XN không ổn định 3. Sai số hệ thống - Do chất lượng thuốc thử xấu - Chuẩn sai, không chính xác - Kỹ thuật XN không đặc hiệu Loại sai số này chỉ tránh được khi tìm được nguyên nhân. Sai số này làm kết quả chuyển dịch theo cùng một hướng. II. NGUYÊN LIỆU KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG 1. Mẫu chuẩn: Là một dd chứa một lượng nhất định chất chuẩn (thực ra là một hóa chất có độ tinh khiết xác định, biết trước thường trên 99%) dùng để chuẩn hóa một kỹ thuật phân tích và thiết lập biểu đồ chuẩn cho kỹ thuật phân tích đó 2. Mẫu kiểm tra: Dùng để kiểm tra độ chính xác và xác thực của kết quả phân tích Mẫu kiểm tra làm như mẫu bệnh phẩm khi tiến hành phân tích Chú ý: Một dd chuẩn đã được dùng để chuẩn hóa một kỹ thuật phân tích thì dd chuẩn này không được dùng như một mẫu kiểm tra. Ngược lại một mẫu kiểm tra không bao giờ được dùng làm dd chuẩn để thiết lập biểu đồ chuẩn III. CÁC THÔNG SỐ THỐNG KÊ 1. Trị số trung bình - X trung bình bằng tổng các giá trị đo chia cho số lần đo. - Trị số tb cộng này đặc trưng cho kq phép đo tuân theo luật Gauss 2. Độ lệch chuẩn - SD: standard deviation - Giá trị đo tuân theo phân bố chuẩn Gauss - X ± SD : Chiếm 68,2% - X ± 2SD: Chiếm 95,5% - X ± 3SD: Chiếm 99,7% Thông thưường lấy ± 2SD là vùng của các trị số binh thường trong một quần thể gọi là chuẩn 3. Hệ số phân tán CV (coeficient of variation) Là tỷ số biểu thị dưới dạng phần trăm của độ lệch chuẩn trên trị số trung bình: IV. ĐỘ CHÍNH XÁC VÀ XÁC THỰC 1. Định nghĩa độ chính xác - Xét nghiệm được coi là chính xác khi những kết quả xét nghiệm thu được phân tán ít xung quanh trị số trung bình - Sự phân tán của xét nghiệm thu được càng nhỏ (tức độ lệch chuẩn thấp) thì độ chính xác càng cao. - Sự thiếu chính xác có thể do sai số bất ngờ khó tránh do thao tác hoặc do máy móc. Độ chính xác kém chủ yếu do thiếu cẩn thận trong quá trình làm xét nghiệm - Sai có thể do sai số bất thường do người làm xét nghiệm mắc phải như nhầm thuốc thử, nhầm bước sóng … . Chú ý trong làm việc có thể tránh được sai số này. 2. Khái niệm về độ lặp lại Độ lặp lại là độ chính xác của các kết quả XN được thực hiện trong thời gian ngắn bởi cùng một người làm trên cùng một phương tiện với cùng một kỹ thuật XN 3. Nguyên tắc kiểm tra độ chính xác Để kiểm tra độ chính xác loại trừ ảnh hưởng của những sai số bất ngờ, chỉ có PP làm nhiều lần XN với cùng kỹ thuật XN của cùng một mẫu XN. Người ta thường xen vào một loạt XN một hoặc nhiều mẫu huyết thanh kiểm tra độ chính xác mà nồng độ không được biết trước. Huyết thanh này gọi là huyết thanh kiểm tra độ chính xác. Tiêu chuẩn đánh giá độ chính xácc của một KQ là kết quả có tính lặp lại các kết quả XN trên cùng một mẫu trong cùng một điều kiện. Nếu không giống nhau thì chỉ phân tán trong một giới hạn nhất định. Sự lặp lại có thể được thực hiện trong một loạt xét nghiệm trong một ngày hoặc trong nhiều ngày và được thống kê lại để tính toán và đánh giá. - Huyết thanh kiểm tra độ chính xác Có thể tự pha bằng dồn các huyết thanh thừa hàng ngày (bỏ vỡ hồng cầu, đục, bilirubin cao), ly tâm, lọc và bảo quản ở – 20 0 C. Khi dùng phải làm tan và chú ý trộn đều huyết thanh kiểm tra. Biểu đồ kiểm tra độ chính xác là biểu đồ Levey- Jennings Đường ngang ở giữa tương ứng với trị số trung bình Hai đường ngang trên dưới trị số trung bình tương ứng với với đường giới hạn tin cậy ± 2 SD. Hai đường ngang trên dưới đường giới hạn tin cậy là đường giới hạn báo động tương ứng với ± 3SD - Chấp nhận khi kết quả nằm trong khoảng tin cậy ± 2 SD - Thận trọng: nếu 1 hay 2 kết quả nằm trong báo động ± 3SD - Không chấp nhận khi kết quả nằm ngoài khoảng báo động hoặc 7 giá trị kiểm tra liên tiếp nằm một phía của giá trị trung bình hay 7 giá trị có xu hướng tăng hoặc giảm xuống liên tục - Đánh giá độ chính xác Dựa vào độ lệch chuẩn tức sai số tuyệt đối hoặc hệ số phân tán CV (sai số tương đối). Độ lệch chuẩn và CV càng nhỏ thì độ chính xác càng cao. CV = 100 x Thông thường kết quả tốt CV khoảng 2%, với đa số XN không quá 5%. Riêng Enzym, creatin, cholesterol và bilirubin CV có thể từ 5 – 10% 4. Định nghĩa độ xác thực (hay đúng) Một phương pháp xét nghiệm được coi là xác thực khi những kết quả xét nghiệm thu được xấp xỉ bằng trị số thực. - Kiểm tra độ xác thực để phát hiện các sai số hệ thống, khó khăn khi xác định trị số thực trong mẫu huyết thanh kiểm tra. - Thiếu xác thực khi máy không chuẩn xác, thuốc thử xấu và đặc biệt là kỹ thuật xét nghiệm không đặc hiệu Để xác định trị số thực cần bằng phương pháp chuẩn như hấp thụ nguyên tử với Canxi hoặc hexokinase với glucose. Cũng tiến hành kiểm tra xen với các mẫu xét nghiệm như làm với độ chính xác. 5. Đánh giá độ xác thực d là khoảng cách giữa trị số thực của mẫu kiểm tra và trị số trung bình của nhiều kết quả xét nghiệm Có d tuyệt đối và D tương đối (<5%) - Tiêu chuẩn đánh giá độ xác thực: về nguyên tắc khi độ xác thực có giá trị càng tin cậy khi hiệu số d nhỏ và tỷ số d/x càng nhỏ. Kết quả xét nghiệm chỉ được phép chênh lệch so với trị số thực trong những giới hạn nhất định. Thông thường độ xác thực chấp nhận được khi D < 5%. Với một số kỹ thuật ít đặc hiệu D chấp nhận được có khi tới 10% Các thông số đo độ chính xác và độ xác thực 6. Nội kiểm tra chất lượng Mỗi phòng XN cần được theo dõi và đánh giá thường xuyên chất lượng của các XN. Phải làm hàng ngày, đối với kiểm tra độ chính xác đặt một mẫu ở đầu loạt XN và một mẫu ở cuối loạt XN. Với độ xác thực phải nằm trong khoảng tin cậy đã biết rõ nồng độ do một số labo quy chiếu xác định 7. Ngoại kiểm tra chất lượng Thực hiện với hàng loạt phòng xét nghiệm đặc biệt là nhằm so sánh với phòng XN quy chiếu với cùng một mẫu XN và cùng một kỹ thuật XN. Kết quả chỉ đánh giá [...]... dõi, các phòng xét nghiệm quá trình cải thiện chất lượng XN của mình theo thời gian và so sánh với các phòng XN khác Nên nhớ công tác ngoại kiểm tra hỗ trợ cho kiểm tra chất lượng nhưng không thay thế cho nội kiểm tra * Mục đích của ngoại kiểm tra: - Đảm bảo sự tin cậy cho người sử dụng, cả thầy thuốc và bệnh nhân rằng kết quả XN là chính xác và tin cậy - Đánh giá và so sánh chất lượng xét nghiệm của các. ..nhất thời đúng thời điểm kiểm tra Ngoại kiểm tra chất lượng được thực hiện bởi một trung tâm kiểm chuẩn, trung tâm này phân phối mẫu XN đồng nhất cho các phòng XN tham gia chương trình ngoại kiểm để làm xét nghiệm Sau đó thu thập số liệu kết quả XN để so sánh và đánh gía chất lượng của phòng xét nghiệm Trung tâm sẽ phân tích, phân loại mức độ chưa đạt yêu cầu, đạt yêu cầu chất lượng tùy theo kỹ thuật... phía của giá trị trung bình Luật 1:3S Luật 1:2S Luật 2:2S Luật R:4S Luật 4:1S Luật 10: means Ở trong mỗi trường hợp không được chấp nhận trên, phải loại trừ những kết quả XN của lô XN tương ứng, tìm nguyên nhân gây sai số, loại trừ các nguyên nhân gây sai số trước khi làm lại lô XN mới với cùng một mẫu kiểm tra độ chính xác mới a Hiện tượng Shift (lệch) Khi huyết thanh kiểm tra ngoài giới hạn 1S trong. .. vực, quốc gia và quốc tế - Xác định được những sai số về kết quả xét nghiệm và đề xuất những biện pháp khắc phục, sửa chữa - Khuyến khích việc sử dụng những phương pháp chuẩn, những thuốc thử và máy móc XN chất lượng tốt - Khuyến khích áp dụng thường xuyên công tác nội kiểm tra - Tốt nhất dùng một mẫu kiểm tra khách quan (Biorad) cho cả nội và ngoại kiểm do không sản xuất cùng nguyên liệu với chuẩn... tiếp trên cùng một phía của số trung bình * Nguyên nhân - Điện cực bị hỏng hoặc vỡ - Máy bẩn, bọt khí, thay đổi nhiệt độ - Chất lượng chất chuẩn không tốt - Máy kém nhậy - Đặt số 0 cho blank không đúng - Thể tích thuốc thử hoặc bệnh phẩm không đúng - Biến thiên kỹ thuật hoặc biến thiên của bệnh nhân b Hiện tượng Trend (trượt) Xảy ra khi giá trị huyết thanh kiểm tra tăng hoặc giảm trong 6 ngày liên tiếp... sai V LUẬT WESTGARD Luật Westgard đánh giá độ chính xác có 5 trường hợp không chấp nhận kết quả - Luật 1:3S : Một kết quả vượt ± 3 SD - Luật 2:2S: Hai kết quả liên tục cùng vượt quá giới hạn - 2 SD hoặc cùng vượt + 2 SD - Luật R:4S: Một kết quả vượt + 2 SD và một kết quả vượt - 2 SD - Luật 4: 1S: kết quả kiểm tra liên tiếp cùng vượt quá + 1SD hoặc cùng vượt quá 1SD - Luật 10:mean: 10 kết quả kiểm tra . việc kiểm tra chất lượng là phát hiện những sai số xảy ra trong quá trình làm xét nghiệm và hạn chế đến mức thấp nhất những sai số, vì vậy công tác kiểm tra chất lượng dựa vào lý thuyết của. KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG BẢN CHẤT CỦA CÁC SAI SỐ TRONG QUÁ TRÌNH LÀM XÉT NGHIỆM Tiến hành làm một XN hóa sinh thường có những bước sau: - Đo thể. kiểm tra chất lượng dựa vào lý thuyết của những sai số xảy ra trong quá trình làm xét nghiệm, tức là những sai số kỹ thuật I. CÁC SAI SỐ 1. Sai số thô bạo hay bất thường - Không thực hiện đúng