Đang tải... (xem toàn văn)
PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH TĂNG TRƯỞNG, CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN AZOTOBACTER
BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐH CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP. HCM KHOA CNSH & KTMT PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH TĂNG TRƯỞNG, CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN AZOTOBACTER GVHD: NGUYỄN THÀNH LUÂN 1. MỞ ĐẦU 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP 4. KẾT QUẢ 5. KẾT LUẬN - ĐỀ NGHỊ NỘI DUNG BÁO CÁO MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU N2 NH4+ VK CĐ Nitơ Khí quyển, 80% v/v (Azotobacter) MỞ ĐẦU PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH TĂNG TRƯỞNG, CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN AZOTOBACTER N2 NH3 tO, P cao Xúc tác HÓA HỌC SINH HỌC 1. Phân lập chủng Azotobacter từ các mẫu đất ở Hà Nội, Lâm Đồng, Đông Nai, Long An, Tiền Giang, Bến Tre. 2. Nghiên cứu các đặc điểm hình thái, sinh lý và sinh hóa của các chủng phân lập. 3. Tuyển chọn chủng có hoạt tính cố định đạm cao. 4. Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng lên khả năng tăng trưởng và cố định nitơ của chủng chọn lọc. MỞ ĐẦU NỘI DUNG NGHIÊN CỨU TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. CHU TRÌNH NITƠ TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.2. VI KHUẨN CỐ ĐỊNH NITƠ TỔNG QUAN TÀI LIỆU Dựa vào mối liên hệ của vi khuẩn cố định nitơ với thực vật, người ta chia thành 3 nhóm nhỏ: a. Vi khuẩn cố định nitơ sống cộng sinh. (Rhizobium, Sinorhizobium, Mesorhizobium, Bradyrhizobium…) b. Vi khuẩn cố định nitơ tự do. (Azotobacter, Clostridium, Pseudomonas…) c. Vi khuẩn cố định nitơ tương tác. (Azospirillum, Herbasspirillum, Gluconoacetobacter, Klebsiella…) 1.3. VAI TRÒ CỦA VI KHUẨN CỐ ĐỊNH NITƠ TỔNG QUAN TÀI LIỆU • Cố định nitơ phân tử thành dạng NH4+ giúp cây trồng hấp thu một cách hiệu quả. • Kích thích sự tăng trưởng của thực vật bằng cách tạo ra các phytohormon (auxin, cytokinin và gibberillin). • Giảm tác động có hại của mần bệnh. • Giúp cây trồng hấp thu hiệu quả các ion như sắt, kẽm và các nguyên tố vi lượng khác. 1.4. ĐẶC ĐIỂM VI KHUẨN AZOTOBACTER TỔNG QUAN TÀI LIỆU • Gram âm • Không sinh bào tử • Tạo bao nhầy • Tạo bào xác • Hình cầu hay hình que • Khuẩn lạc nhầy, bóng, lồi, đôi khi nhăn nheo, có màu trắng đục, vàng hoặc màu nâu đen. • Nhiệt độ tối ưu: 30oC • pH tối ưu: 7,2 - 8,2 • Ẩm độ tối ưu: 75 - 80 % [...]... pháp định lượng vi sinh vật bằng phương pháp đo độ đục • Định lượng nitơ tổng số bằng phương pháp Kjeldahl • Các phương pháp nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh lý và sinh hóa • Phương pháp nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng lên sự tăng trưởng và cố định đạm của chủng vi khuẩn SƠ ĐỒ THÍ NGHIỆM NGUỒN PHÂN LẬP Phân lập và làm thuần NHỮNG CHỦNG THUẦN N/C ĐĐ HÌNH THÁI, SINH LÝ, SINH HÓA CỦA CÁC CHỦNG PHÂN... sinh Cố định nitơ Tăng sinh Cố định nitơ 2.5 2.5 3 3 KẾT LUẬN • Nguồn đạm urea, NH4Cl và cao nấm men: kích thích sự tăng trưởng của Az 03 và Az 07, nhưng gây ức chế khả năng cố định nitơ • Urea (0.01%): thích hợp nhất cho sự tăng trưởng của Az 03 • NH4Cl (0.005%): thì thích hợp nhất cho sự tăng trưởng của Az 07 ĐỀ NGHỊ 4.2 ĐỀ NGHỊ • Nghiên cứu khả năng tạo bào xác của hai chủng chọn lọc nhằm tăng. .. CÁC CHỦNG PHÂN LẬP TUYỂN CHỌN CHỦNG CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH NITƠ CAO N/C A/H CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ LÊN K/N TĂNG TRƯỞNG VÀ CỐ ĐỊNH NITƠ KẾT QUẢ KẾT QUẢ 3.1 PHÂN LẬP VÀ LÀM THUẦN Từ 16 mẫu đất thu được ở Hà Nội, Lâm Đồng, Đồng Nai, Long An, Tiền Giang, Bến Tre, sau khi phân lập và làm thuần trên môi trường Ashby agar, chúng tôi thu được 20 chủng vi khuẩn có đặc điểm khuẩn lạc đặc trưng của chi Azotobacter được... + + + + + + + + + Đặc tính Ghi chú: (+): dương tính (-): âm tính KẾT QUẢ 3.3 CHỌN LỌC CHỦNG CÓ KHẢ NĂNG CỐ ĐỊNH NITƠ CAO MT: Ashby lỏng, tốc độ lắc 150v/p, tgian: 5 ngày 177.66 187.90 Biểu đồ 3.1 Hàm lượng nitơ tổng của 20 chủng Azotobacter cố định được trên môi trường Ashby KẾT QUẢ 3.5 ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ LÊN KHẢ NĂNG TĂNG TRƯỞNG VÀ CỐ ĐỊNH NITƠ CỦA Az 03 VÀ Az 07 3.5.1 CHỌN MÔI TRƯỜNG NUÔI... LIỆU • Các mẫu đất thu thập ở Hà Nội, Lâm Đồng, Đồng Nai, Long An, Tiền Giang, Bến Tre • Các môi trường dùng cho thí nghiệm Môi trường Phân lập Giữ giống Nhân sinh khối Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến khả năng cố định đạm và tăng sinh khối Azotobacter Ashby Ashby Fedorow Fedorow VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU • Phân lập, làm thuần trên môi trường chọn lọc Ashby • Tăng sinh vi khuẩn. .. Nguồn đạm urea NH4Cl Nồng độ đạm (%) 0.010 0.005 Điều kiện KẾT LUẬN - ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN 4.1 KẾT LUẬN Phân lập, làm thuần được 20 chủng vk thuộc chi Azotobacter • Hai chủng có khả năng cố định cao nhất là Az 03 và Az 07 • MT tối ưu cho sự tăng trưởng và cố định nitơ của chủng Az 03 và Az 07 là MT2 • Một số ĐK nuôi cấy thích hợp của Az 03 và Az 07 là: • Az 03 Điều kiện nuôi cấy Nồng độ sucrose (%) Az 07 Tăng. .. ngày, với các nguồn đường ở các nồng độ khác nhau: Az 03 189.96 41.40 Đồ thị 3.3 Ảnh hưởng của nguồn đường Đồ thị 3.4 Ảnh hưởng của nguồn đường và nồng độ đường lên khả năng tăng và nồng độ đường lên khả năng cố định nitơ trưởng của chủng Az 03 của chủng Az 03 KẾT QUẢ 3.5.3 ẢNH HƯỞNG NGUỒN ĐƯỜNG Az 07 42.11 208.99 208.99 Đồ thị 3.5 Ảnh hưởng của nguồn đường Đồ thị 3.6 Ảnh hưởng của nguồn đường và nồng... chọn lọc nhằm tăng thời gian quản chế phẩm • Nghiên cứu nuôi cấy bán rắn để thu nhận sinh khối dạng bột thuận tiện cho vi c bảo quản và vận chuyển • Thử nghiệm hai chủng Az 03 và Az 07 trên quy mô đồng ruộng • Nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp các phytohormon (auxin, gibberellin và cytokinin) của các chủng phân lập XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN QUÝ THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE! ... HƯỞNG NGUỒN ĐƯỜNG 3.5.3 ẢNH HƯỞNG NGUỒN ĐẠM KẾT QUẢ 3.5.1 CHỌN MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY THÍCH HỢP Nuôi Az 03 và Az 07 trên các MT khác nhau, tg nuôi cấy: 5 ngày, tốc độ lắc 150v/p 30.70 34.72 Biểu đồ 3.2 Khả năng tăng trưởng của chủng Az 03 và Az 07 trên các môi trường nuôi cấy khác nhau 170.21 181.29 Biểu đồ 3.3 Khả năng cố định nitơ của chủng Az 03 và Az 07 trên các môi trường nuôi cấy khác nhau KẾT QUẢ... khả năng tăng và nồng độ đường lên khả năng cố định nitơ trưởng của chủng Az 07 của chủng Az 07 KẾT QUẢ 3.5.6 ẢNH HƯỞNG NGUỒN ĐẠM MT: MT2; pH: 7.5; nguồn đường: sucrose; tgian nuôi cấy: 5 ngày, ion Mn2+: 0.015% (Az 07); với tốc độ lắc: 250v/p Az 03 233.21 62.61 Đồ thị 3.13 Ảnh hưởng nồng độ của mỗi loại đạm lên khả năng tăng trưởng của chủng Az 03 Đồ thị 3.14 Ảnh hưởng nồng độ của mỗi loại đạm lên . v/v (Azotobacter) MỞ ĐẦU PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH TĂNG TRƯỞNG, CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN AZOTOBACTER N2 NH3 tO, P cao Xúc tác HÓA HỌC SINH HỌC 1. Phân lập chủng Azotobacter. CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP. HCM KHOA CNSH & KTMT PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN VÀ NGHIÊN CỨU CÁC ĐẶC TÍNH TĂNG TRƯỞNG, CỐ ĐỊNH ĐẠM CỦA VI KHUẨN AZOTOBACTER GVHD: NGUYỄN THÀNH LUÂN 1. MỞ ĐẦU 2. TỔNG. trưởng và cố định đạm của chủng vi khuẩn. 2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU NGUỒN PHÂN LẬP N/C ĐĐ HÌNH THÁI, SINH LÝ, SINH HÓA CỦA CÁC CHỦNG PHÂN LẬP Phân lập và làm thuần NHỮNG CHỦNG THUẦN TUYỂN CHỌN CHỦNG