| TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) 29 Nghiên cứu được tiến hành vào hai mùa mưa và khô năm 2005 ở khu vực trồng rau sử dụng nước thải và không dùng nước thải ở thành phố Hà Nội nhằm đánh giá mức độ ô nhiễm coliform chòu nhiệt (ThC) và các đơn bào đường ruột (Giardia spp., Cryptosporidium spp., và Cyclospora spp.) trong rau trồng từ ruộng đến chợ. Chúng tôi thu thập 314 mẫu rau muống, rau ăn sống, 36 mẫu nước tưới rau và 46 mẫu nước vẩy rau, đồng thời quan sát và phỏng vấn nông dân, người vận chuyển, bán lẻ và bán buôn tại các chợ ở Hà nội. Mức độ ô nhiễm ThC ở rau trồng bằng nước thải cao hơn rau không trồng bằng nước thải. Các đơn bào đường ruột có mặt ở cả rau trồng bằng nước thải và không nước thải. Số lượng trung bình của Giardia spp. và Cryptosporidium spp. trong các mẫu rau ở vùng nước thải cao hơn vùng không nước thải. Rau bò nhiễm Cyclospora spp. ít hơn so với Giardia spp. và Cryptosporidium spp. với tỉ lệ 4- 5% ở vùng nước thải và không nước thải ở cả hai mùa. Mức độ ô nhiễm ThC trong rau muống tăng dần theo chuỗi từ ruộng đến chợ. Nước (vòi hoặc bể dự trữ) dùng để vẩy rau tại chợ có mức độ ô nhiễm ThC ~ 10 2 - 10 3 /100ml. ThC cũng có mặt ở tất cả các loại rau thu thập được tại chợ với mức độ 10 2 -10 3 CFU/g. Tỷ lệ nhiễm các đơn bào đường ruột trong các mẫu rau tại chợ từ 7-33% với số lượng trung bình dưới 2 bào nang/g. Nghiên cứu cho thấy sự ô nhiễm của ThC và các đơn bào đường ruột vì chúng có mặt trong rau và nước thu thập từ ruộng, trong quá trình vận chuyển từ ruộng đến chợ và tại chợ. Từ khóa: ThC, đơn bào đường ruột, nước thải, rau, Hà Nội. Contamination of protozoan parasites and Thermotolerant Coliforms in wastewater-fed aquatic plants from "field to market" in Hanoi Nguyen Thuy Tram (*), Vuong Tuan Anh (**), Lise T ∅∅ nner Klank (***), Phung Dac Cam (****), Anders Dalsgaard (*****) The study was conducted in 2 seasons of 2005 in a peri-urban area using wastewater and another using non-wastewater in Hanoi to assess contamination level of thermotolerant coliforms (ThC) and Ô nhiễm đơn bào gây bệnh đường ruột và Coliform chòu nhiệt trong rau thủy sinh ở vùng nước thải từ ruộng đến chợ tại Hà Nội Nguyễn Thùy Trâm (*), Vương Tuấn Anh (**), Lise T ∅∅ nner Klank (***), Phùng Đắc Cam (****), Anders Dalsgaard (*****) 30 Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | 1. Đặt vấn đề Sử dụng nước thải trong nông nghiệp và nuôi trồng thủy sản được áp dụng rộng rãi ở nhiều nơi trên thế giới [1,2] vì đem lại giá trò dinh dưỡng cao cho cây trồng và vật nuôi. Tại các nước đang phát triển như Cam-pu-chia, Việt nam, Pakistan và Mexico, nước thải chưa xử lý thường được sử dụng phổ biến để nuôi trồng thủy sản khu vực ven đô [3,4,5,6]. Tuy nhiên, nước thải cũng chứa nhiều mầm bệnh [7], đặc biệt là coliform gây bệnh đường ruột (ThC). Ở Cam-pu-chia, mức độ ô nhiễm ThC trong nước hồ từ 10 4 - 10 7 /100ml [8]. Tại khu vực ven đô thuộc thành phố Hà nội, ThC tìm thấy trong các ao nuôi cá sử dụng nước thải thành phố với mức độ ô nhiễm cao tới 10 6 CFU/100ml [4]. Đã có nhiều bằng chứng cho thấy sử dụng nước thải có thể mang lại nguy cơ về mặt sức khỏe cho người lao động do phơi nhiễm với các tác nhân gây bệnh từ nước thải [9, 10] hoặc cho người tiêu dùng khi ăn các loại rau thủy sinh không nấu chín [11]. protozoan parasites (Giardia spp., Cryptosporidium spp., và Cyclospora spp.) in vegetables from field to market. Vegetable samples including morning glory and other raw eaten vegetables, splashing water were collected, together with interviews were conducted with farmers, transportation men and traders in selected Hanoi markets. Contamination level of ThC in vegetables cultivated in wastewater was higher than those cultivated in non-wastewater. Protozoan parasites were found in vegetables from both wastewater and non- wastewater area. Average numbers of Giardia spp. and Cryptosporidium spp. in vegetable samples from wastewater area were higher than those from non-wastewater. Percentage of vegetable samples contaminated with Cyclospora spp. was lower than that contaminated with Giardia spp. và Cryptosporidium spp. and was about 4-5% in wastewater and non-wastewater area in the 2 seasons. Contamination level of ThC in morning glory samples increased gradually from field to market. Splashing water from tap or storage containers at markets was contaminted with ThC (~ 10 2 - 10 3 CFU/100ml). ThC was also present in all kinds of vegetable samples collected at the selected Hanoi markets (10 2 -10 3 CFU/g). Percentage of vegetable samples at markets contamined with protozoan parasites was from 7-33% and average number of the parasites was found to be less than 2 cysts per gram. In conclusion, the study shows that ThC and protozoan parasites were found in vegetables and splashing water from field, during transportation to market and at market. Keywords: thermotolerant coliforms, protozoan parasites, wastewater, vegetables, Hanoi Tác giả: (*) ThS. Nguyễn Thùy Trâm, Phòng Nghiên cứu các nhiễm khuẩn đường ruột, Khoa Vi khuẩn, Viện Vệ sinh Dòch tễ Trung ương, 1 Yersin, Hà nội. Tel: +84 38219074, email: huongtram07@yahoo.com. (**) TS. BS. Vương Tuấn Anh, Phòng Nghiên cứu các Nhiễm khuẩn Đường ruột, Khoa Vi khuẩn, Viện Vệ sinh Dòch tễ Trung ương, 1 Yersin, Hà nội. Tel: +84 943901375, email: vtanihe@yahoo.co.uk. (***) GS. TS. Phùng Đắc Cam, Phòng Nghiên cứu các nhiễm khuẩn đường ruột, Khoa Vi Khuẩn, Viện VSDT Trung Ương, Hà nội. Tel: +84 38219074, email: cam@fpt.vn. (*****) TS. Lise T∅nner Klank, Khoa Miễn Dòch và Ký Sinh Trùng, Viện Thú Y Quốc Gia, Trường Đại học Kỹ Thuật Đan Mạch. Email: ltj@vet.dtu.dk. (******) GS. TS. Anders Dalsgaard, Khoa Khoa Học Cuộc Sống, ĐH Copenhagen, Đan Mạch. Email: ad@life.ku.dk. | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) 31 Các đơn bào gây bệnh đường ruột (Cryptosporidium spp., Cyclospora spp., and Giardia spp.) là các mầm bệnh có nguồn gốc từ phân. Các loại đơn bào này phần lớn là nguyên nhân gây các dòch bệnh đường ruột lây truyền qua thực phẩm và nước trên thế giới [12,13,14]. Những loại đơn bào này có thể phát hiện ở trong nước tưới [15,16], do đó việc tái sử dụng nước thải sẽ mang đến những nguy cơ sức khỏe tiềm ẩn [10,17]. Ở các nước phát triển, những dòch bệnh đường ruột do vi khuẩn và đơn bào gây bệnh đều liên quan đến việc tiêu thụ các loại rau được nhập khẩu từ các nước đang phát triển [18,19]. Một số dòch bùng phát đều có liên quan đến mức độ ô nhiễm coliform gây bệnh rất cao từ 0.00-6.81 log10 CFU ml -1 [20] hoặc có nhiễm đơn bào trong rau [16]. Hiện nay, ở Việt nam có rất ít thông tin về chất lượng rau và các nguy cơ tiềm ẩn đối với các sản phẩm từ nơi nuôi trồng bằng nước thải đến nơi bán (chợ bán lẻ, chợ đầu mối). Chúng tôi tiến hành nghiên cứu này với mục tiêu nhằm xác đònh và đánh giá mức độ ô nhiễm ở rau thủy sinh nuôi trồng bằng nước thải tại khu vực ven đô, trong khi vận chuyển phân phối đến chợ và trong khi bày bán tại chợ. 2. Phương pháp nghiên cứu 2.1.Đòa điểm nghiên cứu và phương pháp điều tra Nghiên cứu được tiến hành tại khu vực ven đô thành phố Hà nội tại hai điểm trong mùa mưa từ tháng 4-6, mùa khô từ tháng 11-12 năm 2005. Hoàng Liệt là đòa điểm lấy nước thải từ hai con sông chứa nước thải lớn nhất của thành phố (Tô Lòch và Kim Ngưu) thông qua trạm bơm và hệ thống kênh dẫn. Điểm nghiên cứu thứ hai là Long Biên, ở đó nguồn nước tưới chủ yếu là ao chứa nước mưa và nước sông Hồng hoặc nước giếng hộ gia đình. Tại mỗi điểm nghiên cứu, chúng tôi chọn ngẫu nhiên 6 hộ gia đình tham gia trồng rau. Loại rau nghiên cứu là rau muống (tên khoa học: Ipomoea aquatica), loại rau chính được trồng tại hai điểm nghiên cứu trên. Mỗi hộ gia đình lấy 6 mẫu. Trong mùa khô năm 2005, chúng tôi tiến hành lấy mẫu nước từ 6 ruộng rau tại Hoàng Liệt và ao chứa nước mưa tại Long Biên. Qui trình lấy mẫu được mô tả trong Bảng 1. Phần phỏng vấn sử dụng bảng hỏi thiết kế sẵn và quan sát. Chúng tôi theo dõi từ "ruộng đến chợ" để thu thập thêm thông tin về nguồn ô nhiễm có thể xảy ra sau khi rau đã thu hoạch. Cùng thời gian này, chúng tôi tiến hành một nghiên cứu độc lập tại chợ Hoàng Liệt gần với khu vực nuôi trồng rau bằng nước thải và do đó phần lớn rau từ khu vực đó được bày bán ở đây và chợ Hàng Bè ở trung tâm Hà nội. Tại chợ Hàng Bè, rau bày bán có từ nhiều khu vực sản xuất khác nhau. Các loại rau chính được lấy mẫu là rau húng-Ocimum basilicum, rau mùi- Coriandrum sativum, kinh giới-Origanum maiorana, rau muống và rau rút-Oenanthe fluviatilis) từ hai người bán rau tại chợ và bán rong được lựa chọn ngẫu nhiên. Mẫu nước vẩy rau được chúng tôi lấy từ vòi nước và từ các đồ chứa mà người bán hàng thường sử dụng. Thông tin về thói quen bảo quản của người bán hàng cũng được thu thập thông qua phỏng vấn và quan sát. 2.2.Phương pháp lấy mẫu rau và nước Mỗi mẫu rau lấy 10 gram rau gồm cả lá và thân. Đựng mẫu trong túi ni lon sạch và bảo quản lạnh trong khi vận chuyển về phòng thí nghiệm tại Viện Vệ sinh Dòch tễ Trung ương. Thời gian vận chuyển từ lúc lấy mẫu đến khi tới phòng thí nghiệm là khoảng 1h. Tổng cộng có 96 mẫu rau được lấy tại Hoàng Liệt và 118 mẫu từ Long Biên. Trong nghiên cứu độc lập tại hai chợ, chúng tôi tiến hành lấy được 100 mẫu rau. Đối với mỗi mẫu nước, chúng tôi lấy một lít mẫu tổng hợp (lấy vào thời điểm 8, 10, 12h) tại ruộng ở Hoàng Liệt và ao tại Long Biên với tần suất 2 tuần/lần tại Hoàng Liệt và 1 tháng/lần tại Bảng 1. Quy trình thu thập mẫu rau từ ruộng đến chợ và tại chợ Lưu ý: Các mẫu được lấy từ 6 hộ gia đình ở cả hai mùa mưa và mùa khô 32 Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | Long Biên. Tổng số có 33 mẫu nước được thu thập từ 6 ruộng rau tại Hoàng Liệt từ tháng 10-12/2005 trong khi đó chúng tôi chỉ lấy 3 mẫu nước ao tại Long Biên từ tháng 11-12/2005. Tại chợ, chúng tôi thu thập tổng cộng 46 mẫu nước vẩy rau. Trong khi vận chuyển tới phòng thí nghiệm, mẫu nước luôn được bảo quản lạnh ở nhiệt độ 4-8 0 C. 2.3.Phương pháp phân tích mẫu tìm ThC và đơn bào Áp dụng phương pháp MPN [20] để tìm ThC (gọi tắt là coliform) trong mẫu nước và mẫu rau. Việc xử lý mẫu rau theo qui trình sau đây: 10 gram rau được cho vào một cái túi đặc biệt; thêm vào đó 100 ml NaCl 0.9% vô trùng; thêm nước cất cho đến khi ngập hết mẫu và cho túi mẫu vào máy lắc Pulsifier; sau khi lắc 30 giây, lấy 1 ml dung dòch chuyển sang ống nghiệm vô trùng chứa 9ml dung dòch Ringer 1/4; pha loãng 10 lần và đưa ống nghiệm vào tủ ấm 44 0 C (±0.250C) trong 24h. Đọc kết quả dựa trên số ống dương tính (có sinh hơi) ở mỗi nồng độ pha loãng và đối chiếu với bảng MPN. Phương pháp tìm ThC trong mẫu nước cũng được tiến hành tương tự [20]. Phương pháp tìm đơn bào (Giardia spp., Cryptosporidium spp., và Cyclospora spp) chỉ áp dụng trên mẫu rau và được tiến hành như sau: 10 gram rau được rửa bằng máy lắc Pulsifier và nước rửa được quay ly tâm; 200 μl khối lượng cuối cùng được ủ ấm 37 0 C trong 2-3h trên lam kính Teflon và sau đó được nhuộm kháng thể đơn dòng bắt màu huỳnh quang đối với Giardia spp. và Cryptosporidium spp; những bào nang của các loại đơn bào này được soi và đếm dưới kính hiển vi sử dụng ánh sáng huỳnh quang, phóng đại 400 lần; ước tính số lượng trên mỗi gram rau. Cyclospora spp. được tìm trong 22μl (0.11g) thể tích cuối cùng dựa trên nguyên tắc tự bắt màu huỳnh quang dưới kính hiển vi huỳnh quang[8]. 2.4.Phân tích số liệu Số liệu được tiến hành phân tích trên phần mềm phân tích thống kê SPSS. Số lượng coliform được chuyển sang dạng logarithm để bảo đảm phân bố chuẩn. Sử dụng các phép kiểm đònh thống kê sau đây cho nghiên cứu này: i) Student' T-test để so sánh trung bình của ThC giữa các vò trí lấy mẫu; ii) ANOVA test để so sánh trung bình của coliform và tỉ lệ mẫu rau tìm đơn bào giữa các thời điểm lấy mẫu tại từng đòa điểm nghiên cứu; iii) Fisher's exact test để tìm mối liên quan giữa mùa với tỉ lệ mẫu rau có tìm thấy đơn bào đường ruột. Mức ý nghóa thống kê được chọn là p<0,05. 3. Kết quả nghiên cứu 3.1.Chất lượng nước tưới rau và rau từ ruộng đến chợ ở Hà Nội Giữa vùng nước thải và vùng không sử dụng nước thải, hàm lượng coliform trong nước có sự chênh lệch đáng kể. Hàm lượng coliform trong nước thải dùng để tưới rau ở Hoàng Liệt ~10 4 CFU/ 100ml. Ở Long Biên, vùng không sử dụng nước thải, cũng có hàm lượng coliform trung bình khoảng 10 2 - 10 3 CFU/100ml. Hàm lượng coliform trong rau ở mỗi thời điểm lấy mẫu tại hai vùng được thể hiện ở Bảng 2. Trong khi hàm lượng coliform ở rau của vùng nước thải là (10-10 3 CFU/gram), ở vùng không nước thải là 10-10 2 CFU/gram. Số lượng coliform trung bình trong các mẫu vào mùa mưa cao hơn mùa khô (p=0.002). Ở cả hai khu vực, hàm lượng coliform có xu hướng ngày càng cao ở những thời điểm lấy mẫu sau cùng. Tuy nhiên, hàm lượng coliform trung bình có sự khác biệt đáng kể giữa hai vùng (p<0.05) khi rau được thu thập ở ruộng do nghiên cứu viên, người nông dân trước và sau khi rửa rau. Hơn nữa sự khác biệt về hàm lượng coliform giữa các thời điểm lấy mẫu là có ý nghóa thống kê (p<0.001). Đơn bào gây bệnh có mặt trong rau muống theo chuỗi từ "ruộng đến chợ". Nhìn chung, tỉ lệ dương Bảng 2. Số lượng Coliform ở rau muống được thu thập từ ruộng đến chợ ở Hà Nội, Việt Nam Lưu ý: Các chữ cái chỉ ra các loại mẫu khác nhau: A) rau được lấy ở ruộng do nghiên cứu viên; B) rau được lấy ở ruộng do người nông dân trước khi rửa; C) rau được lấy ở ruộng do người nông dân sau khi rửa; CD) rau được lấy ở ruộng do người nông dân và được bảo quản qua đêm tại hộ gia đình và D) rau được lấy do nghiên cứu viên khi rau đến chợ ở Hà nội. | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) 33 tính với Giardia spp. (37/96, 38.5%) và Cryptosporidium spp. (28/96, 29,2%) ở vùng nước thải cao hơn so với vùng không sử dụng nước thải (Giardia spp: 20/118; 16,9% và Cryptosporidium spp.: 16/118, 13,6%). Tỷ lệ dương tính với Cyclospora spp. thấp hơn Giardia spp. và Cryptosporidium spp. nhưng vẫn có mặt trong các mẫu rau với tỷ lệ ở vùng nước thải và vùng không nước thải là 4.2% (1/24) - 12.5% (3/24), xem bảng 3. Số lượng bào nang Giardia nhiều nhất trong rau muống trồng ở vùng nước thải với hàm lượng trung bình 1.6 bào nang/gam (95% CI 0.9-2.4), tiếp theo là Cryptosporidium với hàm lượng 1.2 bào nang/gam (95% CI 0.7-1.7) và ở vùng không dùng nước thải hàm lượng trung bình của Giardia là 0.6 bào nang/gam (95% CI 0.2-1), Cryptosporidium là 0.3 bào nang/gam (95% CI 0.1-0.4). Giữa vùng nước thải và vùng không dùng nước thải có sự khác biệt đáng kể về tỷ lệ có mặt của Giardia spp. đặc biệt tại thời điểm rau được nông dân thu hoạch ở ruộng sau khi đã rửa (p=0.046) và rau được chúng tôi thu thập trước khi đến chợ (p=0.003). Tuy nhiên, tỷ lệ dương tính với Giardia spp., Cryptosporidium spp. và Cyclospora spp. ở cả hai vùng không có sự khác biệt giữa các thời điểm lấy mẫu. Hơn nữa, vào mùa khô 2005, tỷ lệ dương tính với Giardia spp. và Cryptosporidium spp. ở vùng nước thải cao hơn nhiều so với vùng không dùng nước thải (p<0.001). Các đơn bào (Cryptosporidium spp., Giardia spp., Cyclospora spp.) cũng được tìm thấy trong các mẫu rau thu thập tại chợ. Giữa mùa khô và mùa mưa, tỷ lệ dương tính với Giardia trên mẫu rau có sự khác biệt khá lớn. Giardia spp. vẫn là bào nang được tìm thấy nhiều nhất ở cả hai chợ vào mùa mưa trong khi Cryptosporidium spp. and Cyclospora spp. lại phát hiện được nhiều hơn vào mùa khô (p<0.001). Bảng 4 thể hiện kết quả thu thập mẫu rau ăn sống (rau húng, kinh giới, rau mùi) và rau thủy sinh (rau muống, rau rút) ở hai chợ Hoàng Liệt và Hàng Bè. Giardia đều có mặt ở các mẫu rau sống tại hai chợ với hàm lượng trung bình 0.5 bào nang/gam (95% CI 0.2-0.7) và trong mẫu rau thủy sinh là 1.1 bào nang/gam (95% CI 0.5-1.8). Đặc biệt, tỷ lệ dương tính với Giardia trong rau kinh giới và rau muống tại chợ Hoàng Liệt có sự khác biệt đáng kể (p=0.005). Hàm lượng trung bình của Cryptosporidium spp. trong rau an sống là 0.1 bào nang/gam (95% CI 0-0.2) và trong rau thủy sinh là 1.1 bào nang/gam (95% CI 0.2-2.0). Bào nang Cyclospora spp. được phát hiện với số lượng ít nhất ở cả hai loại rau ăn sống và rau thủy sinh. Số lượng coliform ở 46 mẫu nước thu thập được tại chợ Hoàng Liệt là (10 1 -10 4 CFU/100ml), không cao hơn nhiều so với chợ Hàng Bè (10-10 3 CFU/100ml) vào cả hai mùa. Bảng 5 cho thấy hàm lượng coliform khá cao trong mẫu nước đựng ở xô so với mẫu nước thu thập trực tiếp từ vòi ở cả hai chợ (p<0.001). Hàm lượng coliform trong mẫu rau thu được ở cả hai chợ dao động từ 10 2 -10 3 CFU/gam và không có sự khác biệt đáng kể (p=0.09). Bên cạnh đó, hàm lượng coliform giữa hai mùa ở cả hai chợ cũng không có sự khác biệt (p=0.68). Bảng 3. Hiện diện của các đơn bào ở rau muống thu thập từ ruộng ở Hoàng Liệt (N=96) và Long Biên (N=118) đến chợ Lưu ý: Các chữ cái chỉ ra các loại mẫu khác nhau: A) rau được lấy ở ruộng do nghiên cứu viên; B) rau được lấy ở ruộng do người nông dân trước khi rửa; C) rau được lấy ở ruộng do người nông dân sau khi rửa; CD) rau được lấy ở ruộng do người nông dân và được bảo quản qua đêm tại hộ gia đình và D) rau được lấy do nghiên cứu viên khi rau đến chợ ở Hà nội. Nhiễm bẩn coliform và ký sinh trùng đơn bào trong rau và nước vẩy rau tại chợ Bảng 4. Hiện diện của các đơn bào ở rau thu thập tại chợ Hoàng Liệt (N=52) và Hàng Bè (N=48) ở Hà Nội, Việt Nam 34 Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | 4. Bàn luận Nghiên cứu cho thấy hàm lượng coliform trong nước tưới rau ở ruộng nước thải (10 4 /100ml) của vùng ven đô Hà nội cao hơn ở ruộng không dùng nước thải (10 2 - 10 3 /100ml) và không khác biệt nhiều với nước vẩy rau được thu thập ở chợ (10 - 10 4 /100ml). Hàm lượng coliform trung bình trong các mẫu rau muống thu thập theo chuỗi từ ruộng đến chợ ngày càng cao ở những giai đoạn lấy mẫu sau cùng. Các bào nang Giardia tìm thấy nhiều nhất trong mẫu rau thu thập từ ruộng đến chợ và tại chợ với hàm lượng trung bình 0.6-1.6 bào nang/gam ở ruộng và 0.5-1.1 bào nang/gam ở chợ, tiếp theo là Cryptosporidium với 0.3-1.2 bào nang/gam (ở ruộng) và 0.1-1.1 bào nang/gam (ở chợ). Bào nang Cyclospora có mặt trong một số mẫu rau. Số lượng coliform trong nước thải (104/100ml) vượt quá giới hạn cho phép của TTYTTG 2006 đối với nước tưới tiêu (10 2 - 10 3 /100ml). Mặc dù, các kết quả về chất lượng vi sinh trong nước dùng cho sản suất nông nghiệp ở vùng ven đô Hà nội thấp hơn các báo cáo trước đây [4], nguồn nước được dùng trong nghiên cứu này thường không được bảo vệ khỏi sự ô nhiễm từ bề mặt. Chúng tôi cũng tìm thấy rau muống trồng ở vùng dùng nước thải bò nhiễm bẩn với coliform, Giardia spp., và Cryptosporidium spp nhiều hơn ở vùng không dùng nước thải và Cyclospora spp. có mặt ở cả hai vùng của Hà nội. Các kết quả này phù hợp với các nghiên cứu ở Mexico [6], Ghana [7] và Cambodia [8] nơi mà rau bò nhiễm bẩn coliform và đơn bào do tưới bằng nước thải. Hàm lượng coliform (10 1 - 10 3 /gram), ký sinh trùng đơn bào (0.3-1.6 bào nang/gam) trong rau của nghiên cứu này thấp hơn các nghiên cứu khác [8]. Điều này cho thấy phương pháp tưới tiêu đóng vai trò quan trọng trong việc lan truyền các vi sinh vật gây bệnh. Các kết quả của chúng tôi phù hợp với nghiên cứu được Ensink và CS thực hiện [21] với hàm lượng E.coli có mặt trong nước thải dùng trong sản xuất nông nghiệp khá thấp thông qua hệ thống kênh mương và phương pháp này có khả năng làm giảm sự tiếp xúc giữa nước tưới tiêu và rau. Nghiên cứu này cũng cho thấy nhiễm bẩn Coliform, Giardia spp., Cryptosporidium spp cũng như sự có mặt của Cyclospora spp. ở rau muống sau thu hoạch và đưa ra chợ. Từ các kết quả nghiên cứu, chúng tôi thấy rằng có thể do các vi sinh vật này tiếp xúc và bám vào bề mặt rau trong lúc thu hoạch, vận chuyển, chế biến, đóng gói hoặc bảo quản do các vi sinh vật này lan truyền từ nước bể chứa vẩy rau [22] hoặc nước vẩy rau [16]. Điều này phù hợp với quan sát của chúng tôi vì từ 50-83.3% nông dân được phỏng vấn khi tiếp xúc với rau thường không đi găng. Mặc dù 66.7-91.7% nông dân hoặc người vận chuyển không dùng nước để vẩy lên rau trong quá trình vận chuyển hoặc trước khi giao hàng tại chợ nhưng hầu hết người nông dân lại sử dụng nước từ ao, hồ để vảy lên rau trong quá trình bảo quản tại nhà hoặc để rau trên mặt đất qua đêm khiến cho rau dễ bò nhiễm bẩn với các vi sinh vật này. Giardia spp và Cryptosporidium spp. có tỷ lệ dương tính khá cao trong nước thải dùng để tưới cho rau vào mùa khô. Sự xuất hiện của đơn bào trong rau tại ruộng trái ngược với kết quả được tìm thấy trong nước tưới tiêu, đặc biệt vào mùa mưa [23]. Trong thực tế, người ta thấy rằng vi khuẩn và đơn bào ít có khả năng sống sót ngoài cơ thể vật chủ [24,25], do vậy chúng chết khá nhanh khi ở trên bề mặt rau vì bò ảnh hưởng bởi các yếu tố như tiếp xúc với ánh nắng mặt trời vào mùa hè hoặc giữa những lần tưới và thu hoạch rau. Người ta cũng thấy rằng vào mùa khô, khi nồng độ ô nhiễm vi sinh vật trong nước tưới đậm đặc hơn, tần suất tưới khoảng 1 tuần 1 lần cũng làm cho việc nhiễm các đơn bào này trong rau ở ruộng sẽ cao hơn. Mặc dù, rau lấy mẫu ở chợ có số lượng coliform là 10 2 - 10 3 /gram và đơn bào khoảng 0.1-1.1 bào nang/gram, thấp hơn so với mẫu rau thu thập theo chuỗi từ "ruộng đến chợ". Tỷ lệ phát hiện Giardia spp., và Cryptosporidium spp. (32% and 18%) trên mẫu rau ở chợ cũng thấp hơn ở những mẫu thu thập theo chuỗi từ "ruộng đến chợ" ngoại trừ Cyclospora spp. (7%). Các kết quả này khẳng đònh sự có mặt của đơn bào trong rau thu thập được từ những người bán buôn và bán lẻ ở chợ. Bên cạnh đó, các kết quả của chúng tôi cũng chỉ ra rằng sự xuất hiện của Bảng 5. Số lượng (coliform)/100ml từ các nguồn nước dùng làm tươi rau tại chợ (Hoàng Liệt và Hàng Bè) ở Hà Nội, Việt Nam | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) 35 Giardia spp. trong rau là khá phổ biến vào mùa mưa và ẩm ướt. Các nghiên cứu gần đây ở Pakistan [21], Ghana [7] hay ở Việt Nam [16] rau ở ruộng có sử dụng nước thải và rau tại chợ đòa phương (coliform, giun sán và đơn bào) cũng được phân tích về chất lượng trên rau ở ruộng có sử dụng nước thải và rau tại chợ đòa phương trong các nghiên cứu. Mặc dù, chúng tôi không tiến hành tìm đơn bào trong các mẫu nước tưới và nước vẩy rau, hàm lượng coliform ở các mẫu nước đựng trong xô cao hơn đáng kể so với hàm lượng vi sinh vật này trong các mẫu nước vòi tại chợ. Nước do người nông dân sử dụng ít nguy cơ bò nhiễm bẩn hơn so với nước do người bán hàng dùng ở chợ. Do vậy, việc vận chuyển rau sau thu hoạch có thể tăng khả năng nhiễm bẩn rau. Một nghiên cứu do Beuchat tiến hành cho thấy rau dễ bò nhiễm các vi sinh vật gây bệnh ở người hoặc động vật từ nhiều nguồn khác nhau [24]. Điều này cho thấy những hành vi thực hành không hợp vệ sinh là nguồn lây nhiễm chủ yếu, đặc biệt vào mùa mưa khi các bào nang này có thể sống sót khá tốt trong điều kiện ẩm ướt. Những hành vi thực hành này bao gồm: sử dụng nước bò nhiễm bẩn để làm tươi rau tại chợ, môi trường xung quanh mất vệ sinh trong quá trình đóng gói và bảo quản, thói quen không hợp vệ sinh của người bán hàng (không có găng tay), dụng cụ đựng rau và việc nhiễm chéo với các thực phẩm khác hoặc đồ dùng đựng đồ ở chợ. Vì việc rửa tay, đặc biệt sau khi đi vệ sinh và trước khi chuẩn bò thức ăn là nền tảng của vệ sinh thực phẩm. Thói quen không rửa tay hoặc thỉnh thoảng rửa tay với xà phòng trong xô nước sau khi đi vệ sinh của người bán hàng có thể tăng nguy cơ nhiễm coliform và các bệnh đường ruột khác. Trong thực tế, việc cung cấp nước sạch cũng như việc xử lý nước thải là mục tiêu lâu dài nhằm làm giảm sự lan truyền các bệnh lây truyền qua đường nước và thực phẩm. Tuy nhiên, cho đến khi những hạ tầng cần thiết được xây dựng ở những nước phát triển, sự can thiệp vào quá trình khử khuẩn, bảo quản… kết hợp với giáo dục vệ sinh cho những người bán hàng có thể giúp cung cấp những phương pháp bền vững trong việc giảm thiểu nguy cơ lây truyền các bệnh đường ruột từ rau bán ở chợ. 5. Kết luận Rau trồng ở vùng ven nội đô Hà Nội bò nhiễm coliform và các đơn bào gây bệnh đường ruột theo chuỗi từ "ruộng đến chợ" và tại chợ. Rau ăn sống hoặc rau không qua chế biến có thể là những nguồn vi khuẩn và đơn bào gây bệnh. Việc tưới tiêu hoặc làm tươi rau với nước bò nhiễm bẩn là con đường chính khiến rau bò nhiễm các vi sinh vật lây truyền qua thực phẩm. Để giảm thiểu những nguy cơ sức khỏe do nhiễm coliform gây bệnh và đơn bào trong rau, những nguyên tắc vệ sinh liên quan đến chuỗi cung cấp thực phẩm cần được áp dụng từ nơi sản xuất đến lúc tiêu thụ. Trong tương lai, cần những nghiên cứu về sự sống sót của vi sinh vật, đònh danh các loài sẵn có do vậy có thể phân biệt và xác đònh được nguồn lây từ đó đánh giá được những ảnh hưởng đối với sức khỏe con người qua tiêu thụ thực phẩm bò nhiễm bẩn dựa vào đánh giá nguy cơ theo chuỗi từ ruộng đến chợ. Tài liệu tham khảo 1.Shuval H, Adin A, Fattal B &Yekutiel P (1986) Wastewater irrigation in Developing countries. Health Effects and Technical Solutions.Washington DC: The World Bank. Technical paper no, 51. 2.Asano T & Levine DA (1995) Wastewater reclamation, recycling and reuse: past, present and future. Water Science and Technology 33, 1-14. 3. Kuong K, Daream S & Borin C (2005) Peri urban aquatic food production systems in Phnom Penh. Urban Aquaculture Magazine 14, 13-15. 4. Lan NTP, Dalsgaards A, Cam PD & Mara D (2007) Microbiological quality of fish grown in wastewater-fed and non wastewater-fed fish ponds in Hanoi, Vietnam: influence of hygiene practices in local retail markets. Journal of Water and Health 5, 209-218. 5. Van der Hoek W, Hassan MU, Ensink JHJ et al. (2002) Urban wastewater: a valuable resource for agriculture - a case study from Haroonabad, Pakistan. Research Report 63. International Water Management Institute, Colombo, Srilanka. 6. Rosas I, Báez A & Coutino M (1984) Bacteriological quality of crops irrigated with wastewater in the Xochimilco 36 Tạp chí Y tế Công cộng, 11.2011, Số 22 (22) | TỔNG QUAN & NGHIÊN CỨU | plots, Mexico City, Mexico. Applied and Environmental Microbiology 47, 1074-1079. 7. Amoah P, Drechsel P & Abaidoo RC (2005). Irrigation urban vegetable production in Ghana: sources of pathogen contamination and health risk elimination. Irrigation and Drainage 54 (Suppl.), 49-61. 8. Anh VT, Tram NT, Klank LT, Cam PD & Dalsgaard A (2007b) Faecal and protozoan parasite contamination of water spinach (Ipomoea aquatica) cultivated in urban wastewater in Phnom Penh, Cambodia. Tropical Medicine and International Health 12 (Suppl.2), 73-81 9. Blumenthal UJ, Cifuentes E, Bennette S, Quiqley M & Ruiz-Palacios G (2001) The risk of enteric infections associated with wastewater reuse: the effect of season and degree of storage of wastewater. Transaction of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene 95, 131-137 10. Trang DT, Hien BTT, M ∅lbak K, Cam PD & Dalsgaard A (2007b) The epidemiology and eatiology of diarrhoeal diseases in adults engaged in wastewater-fed agriculture and aquaculture in Hanoi, Vietnam. Tropical Medicine and International Health 12 (Suppl.2), 22-32 11. Blumenthal UJ, Peasey A, Quiqley M & Ruiz-Palacios G (2003). Risk of enteric infections through consumption of vegetables with contaminated river water. London School of Hygiene and Tropical Medicine, London. 12. Fayer R, Trout JM & Jenkins MC 1998. Infectivity of Cryptosporidium oocysts stored in water at environmental temperature. Journal of Parasitology 84, 1165-9. 13. Smith H, Caccio SM, Cook N, Nichols RAB & Tait A (2007) Cryptosporidum and Giardia as foodborne zoonoses. Veterinary Parasitology 149, 29-40 14. Ortega YR, Sterling CR, Gilman RH, Cama VA & Diaz F (1993) Cyclospora species a new protozoan pathogen of humans. New England Journal of Medicine 328, 1308-12. 15. Chauret C, Springthorpe S & Sattar S (1999) Fate of Cryptosporidium oocysts, Giardia cysts and microbial indicators during waterwater treatment and anaerobic sludge digestion. Canadian Journal of Microbiology 45, 257-262 16. Tram TN, Hoang LM.N, Cam PD, Chung TP, Fyfe W, Issac-Renton J & Ong C (2008) Cyclospora spp. in herbs and water collected from markets and farms in Hanoi, Vietnam. Tropical Medicine and International Health 13(11), 1415- 1420. 17. Anh VT, van der Hoek W, Ersboll A, Thuong NV, Tuan ND, Cam PD & Dalsgaard A (2007a) Dermatitis among farmers enagaged in peri-urban aquatic food production in Hanoi, Vietnam. Tropical Medicine and International Health 12 (Suppl.2), 59-65. 18. Hoang LM, Fyfe M, Ong C et al. (2005) Outbreak of cyclosporiasis in British Columbia associated with imported Thai basil. Epidemiology and Infection 133, 23-7. 19. Singh BR, Singh P, Verma A, Agrawal S, Babu N, Chandra M & Agrwal RK (2006) A study on prevalence of multi-drug resistant (MDR) Salmonella in water sprinkled on fresh vegetables in Bareilly, Moradabad and Kanpur (northern India cities) Journal of Public Health 14, 125-131 20. Ayres RM & Mara DD (1996) Analysis of Wastewater for Use in Agriculture - A Laboratory Manual of Parasitological and Bacteriological Techniques. World Health Organization, Geneva, Switzerland 21. Ensink, JHJ, Mahmood, T, Dalsgaard, A (2007) Wastewater-irrigated vegetables: market handling versus irrigation water quality. Tropical Medicine and International Health, 12(Suppl. 2), 2-7. 22. Chaidez C, Soto M, Gortares P & Mena K (2005) Occurrence of Cryptosporidium and Giardia in irrigation water and its impact on the fresh produce industry. International Journal of Environmental Health Research 15, 339-345. 23. Keiraita B, Konradsen F, Drechsel P & Abaidoo RC (2007). Effect of low-cost irrigation methods on microbial contamination of lettuce irrigated with untreated wastewater. Tropical Medicine and International Health 12 (Suppl.2), 15-22 24. Beuchat, LR (1999) Food Safety Issues: Surface decontamination of fruits and vegetables eaten raw: A Review of Food Safety Unit, WHO, Geneva 25. Fayer R (2004) Cryptosporidium: a water-borne zoonotic parasite. Veterinary Parasatology 126, 37-56. . các bệnh đường ruột từ rau bán ở chợ. 5. Kết luận Rau trồng ở vùng ven nội ô Hà Nội bò nhiễm coliform và các đơn bào gây bệnh đường ruột theo chuỗi từ " ;ruộng đến chợ& quot; và tại chợ. Rau. ô nhiễm của ThC và các đơn bào đường ruột vì chúng có mặt trong rau và nước thu thập từ ruộng, trong quá trình vận chuyển từ ruộng đến chợ và tại chợ. Từ khóa: ThC, đơn bào đường ruột, nước thải, . contamination level of thermotolerant coliforms (ThC) and Ô nhiễm đơn bào gây bệnh đường ruột và Coliform chòu nhiệt trong rau thủy sinh ở vùng nước thải từ ruộng đến chợ tại Hà Nội Nguyễn Thùy Trâm (*),