BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI  ĐẶNG TUẤN ANH NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ TỰ NHŨ HÓA CHỨA ARTESUNAT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SỸ HÀ NỘI – 2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI  ĐẶNG TUẤN ANH NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ TỰ NHŨ HÓA CHỨA ARTESUNAT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SỸ Người hướng dẫn: ThS. Nguyễn Hạnh Thủy Nơi thực hiện: Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc gia Bộ môn Công Nghiệp Dược HÀ NỘI – 2014 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: ThS. Nguyễn Hạnh Thủy Là cô giáo đã trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo em tận tình trong suốt thời gian thực hiện khóa luận tốt nghiệp. Em cũng xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGS.TS Nguyễn Ngọc Chiến, cùng toàn thể các thầy cô giáo, các anh chị nghiên cứu viên, kĩ thuật viên, các bạn sinh viên đang nghiên cứu khoa học và thực hiện khóa luận tốt nghiệp tại Viện Công nghệ dược phẩm Quốc gia, Bộ môn Công Nghiệp Dược, Bộ môn Bào Chế, Bộ môn Vật Lý – Hóa Lý đã giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp. Em xin chân thành cảm ơn các thầy cô trong Ban giám hiệu Nhà trường và phòng Đào tạo đã giúp đỡ tạo điều kiện cho em trong suốt thời gian học tập tại trường. Cuối cùng em xin cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè đã dành cho em sự giúp đỡ, ủng hộ, động viên trong suốt thời gian học tập và thực hiện khóa luận. Hà Nội, tháng 5 năm 2014 Sinh viên Đặng Tuấn Anh MỤC LỤC Trang Trang bìa phụ Lời cảm ơn Mục lục Danh mục các kí hiệu, các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình vẽ, đồ thị ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2 1.1. ĐẠI CƯƠNG VỀ ARTESUNAT 2 1.1.1. Cấu trúc phân tử - tính chất lý hóa 2 1.1.2. Đặc tính dược động học 2 1.1.3. Tác dụng dược lý 3 1.1.4. Chỉ định, chống chỉ định và liều dùng 3 1.1.5. Tác dụng không mong muốn 5 1.1.6. Các biện pháp cải thiện sinh khả dụng 5 1.1.7. Các phương pháp định lượng artesunat 5 1.1.8. Các nghiên cứu về vi tiểu phân artesunat 6 1.1.9. Một số chế phẩm chứa artesunat trên thị trường 7 1.2. ĐẠI CƯƠNG VỀ HỆ TỰ NHŨ HÓA 7 1.2.1. Khái niệm 7 1.2.2. Phân loại 8 1.2.3. Thành phần 8 1.2.4. Cơ chế tự nhũ hóa 11 1.2.5. Một số đặc tính của hệ tự nhũ hóa 11 1.2.6. Ưu, nhược điểm và ứng dụng của hệ tự nhũ hóa 12 1.2.7. Một số nghiên cứu về hệ tự nhũ hóa 13 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1. NGUYÊN LIỆU, DUNG MÔI, HÓA CHẤT 16 2.2. THIẾT BỊ THÍ NGHIỆM 16 2.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 17 2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.4.1. Phương pháp bào chế hệ tự nhũ hóa 17 2.4.2. Phương pháp đánh giá hệ tự nhũ hóa 19 2.4.3. Phương pháp kiểm nghiệm, đánh giá 20 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1. CÁC KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 22 3.1.1. Xây dựng đường chuẩn artesunat 22 3.1.2. Độ tan của artesunat trong các chất mang 23 3.1.3. Giản đồ pha các hệ chất mang 24 3.1.4. Độ ổn định và khả năng tự nhũ hóa của các hệ chất mang 25 3.1.5. Độ tan của artesunat trong hệ chất mang 38 3.1.6. Ảnh hưởng của hàm lượng dược chất đưa vào hệ chất mang đến nhũ tương 29 3.1.7. Độ ổn định của dược chất trong hệ chất mang 31 3.1.8. Ảnh hưởng của lượng nước đến nhũ tương 32 3.1.9. Đánh giá một số đặc tính của nhũ tương artesunat 32 3.1.10. Khả năng rắn hóa hệ tự nhũ hóa 34 3.1.11. Một số chỉ tiêu chất lượng hệ tự nhũ hóa 34 3.2. MỘT SỐ BÀN LUẬN 37 3.2.1. Về giản đồ pha 35 3.2.2. Về hệ chất mang 35 3.2.3. Về độ ổn định của dược chất trong nhũ tương 36 3.2.4. Sử dụng và ứng dụng của nhũ tương 37 3.2.5. Khả năng rắn hóa hệ tự nhũ hóa 37 KẾT LUẬN 39 ĐỀ XUẤT 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 1: Kết quả đo kích thước tiểu phân PHỤ LỤC 2: Sắc kí đồ các mẫu định lượng artesunat DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ART Artesunat Co.S Cosurfactant – chất đồng diện hoạt EP European Pharmacopoiea – Dược điển Châu Âu HLB Hydrophilic Lipophilic Balance – chỉ số cần bằng dầu nước HPLC High-performance liquid chromatography – sắc kí lỏng hiệu năng cao IP International Pharmacopoiea – Dược điển Quốc tế ISP Isopropanol KTTP Kích thước tiểu phân KTTP TB Kích thước tiểu phân trung bình O Oil – pha dầu S Surfactant – chất diện hoạt SEDDS Self-emulsifying drug delivery systems – hệ tự nhũ hóa tạo nhũ tương SMEDDS Self-microemulsifying drug delivery systems – hệ tự nhũ hóa tạo vi nhũ tương TCCS Tiêu chuẩn cơ sở TNH Tự nhũ hóa NT Nhũ tương PDI Polydispersity index – chỉ số đa phân tán DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1: Thuốc sốt rét theo nhóm người bệnh và chủng loại ký sinh trùng sốt rét 4 Bảng 1.2: Giá trị HLB của một số chất 10 Bảng 1.3: Một số biệt dược sử dụng hệ tự nhũ hóa 14 Bảng 2.1: Các điểm trong giản đồ pha hệ 3 thành phần O – S – Co.S 19 Bảng 3.1: Phụ thuộc giữa nồng độ artesunat và diện tích pic 22 Bảng 3.2: Độ tan của artesunat trong các đơn chất mang 23 Bảng 3.3: Vai trò các thành phần sử dụng trong hệ tự nhũ hóa 24 Bảng 3.4: Độ ổn định và khả năng tự nhũ hóa của hệ M1 (Labrasol – Transcutol HP – Labrafil M1944 CS) 26 Bảng 3.5: Độ ổn định và khả năng tự nhũ hóa của hệ M2 (Cremophor RH40 – Transcutol HP – Labrafil M1944 CS) 26 Bảng 3.6: Độ ổn định và khả năng tự nhũ hóa của hệ M3 (Tween 80 – Transcutol HP – Labrafil M1944 CS) 27 Bảng 3.7: Độ tan của artesunat trong hệ chất mang M1 28 Bảng 3.8 : Kích thước tiểu phân trung bình của nhũ tương với lượng dược chất khác nhau 30 Bảng 3.9: Độ ổn định của dược chất trong hệ G8 31 Bảng 3.10: Kích thước tiểu phân trung bình của nhũ tương với lượng nước khác nhau 32 Bảng 3.11: Một số đặc tính của nhũ tương sau các khoảng thời gian bảo quản 33 Bảng 3.12: Một số đặc điểm hệ tự nhũ hóa dạng rắn 34 Bảng 3.13: Một số chỉ tiêu cơ sở của hệ tự nhũ hóa 35 Bảng PL1: Kích thước tiểu phân trung bình các điểm của hệ M1 PL1 Bảng PL2: Kích thước tiểu phân trung bình các điểm của hệ M2 PL1 Bảng PL3: Kích thước tiểu phân trung bình các điểm của hệ M3 PL1 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình 1.1. Cấu trúc phân tử artesunat 2 Hình 2.1. Sơ đồ quy trình bào chế hệ TNH và tự nhũ hóa hệ vào nước 18 Hình 3.1. Tương quan nồng độ artesunat và diện tích pic 22 Hình 3.2. Giản đồ pha các hệ tự nhũ hóa M1, M2, M3 25 Hình PL1. Sắc kí đồ chất chuẩn artesunat PL2 Hình PL2. Sắc kí đồ các chất mang (không chứa dược chất) PL2 Hình PL3. Sắc kí đồ artesunat trong hệ chất mang PL2 Hình PL4. Sắc kí đồ artesunat trong nhũ tương PL2 [...]... tiêu: 1 Xây dựng được công thức hệ tự nhũ hóa chứa artesunat 2 Đánh giá một số đặc tính của hệ tự nhũ chứa artesunat và nhũ tương tạo thành từ hệ tự nhũ hóa chứa artesunat 2 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ ARTESUNAT 1.1.1 Cấu trúc phân tử, tính chất lý hóa Công thức: C19H28O8 Khối lượng phân tử: 384,4 g/mol Hình 1.1 Cấu trúc phân tử của artesunat Artesunat (ART) có tên khoa học là (3R,5aS,6R,8aS,9R,10S,12R,12aR)... Xiao và Zong-Guo Hong đã có những nghiên cứu đầu tiên về kĩ thuật vi kết tinh trong việc tạo ra hệ nano mang artesunat Kết quả của nghiên cứu đã đề ra 7 được một phương pháp để xây dựng hệ nano, ảnh hưởng của một số yếu tố như dung môi hữu cơ, nồng độ fomaldehyd, lượng artesunat hòa tan, nhiệt độ, tỉ lệ khối lượng của gelatin và artesunate trong tiểu phân nano đã được nghiên cứu và xác định Bằng phương... + Chuẩn artesunat pha trong acetonitril với nồng động chính xác khoảng 4 mg/ml  Trần Đại Lâm và các cộng sự trong nghiên cứu bào chế hệ nano chitosan chứa artesunat đã tiến hành xác định làm lượng artesunat với các điều kiện sắc kí: Pha động: H2O - Methanol (30 : 70) với tốc độ dòng là 1ml/phút, sử dụng cột RP C18 (250 x 4mm, 10μm), tiêm mẫu 20μl, bước sóng phát hiện 240 nm [5] 1.1.8 Các nghiên cứu... của artesunat nhiều nghiên cứu đã được tiến hành như: sử dụng hệ chất mang đưa dược chất, giảm kích thước tiểu phân dược chất để tăng độ tan, sử dụng hệ phân tán rắn, bào chế hệ nano chứa artesunat, trong đó việc sử dụng hệ chất mang đưa dược chất vừa có khả năng làm tăng độ tan tốt, vừa tăng khả năng hấp thu và bảo vệ được dược chất, do đó đề tài tiến hành Nghiên cứu bào chế hệ tự nhũ hóa chứa artesunat ... nano đơn giản hơn với kích thước hạt thu được là 76nm đồng thời tăng cao khả năng hòa tan của artesunat và các dược chất sơ nước [28] Zhao Chun-xia và các cộng sự đã tiến hành nghiên cứu tác dụng chống tạo mạch của nano artesunat – liposome trên tế bào ung thư gan HepG2 Kết quả nghiên cứu cho thấy rằng nano artesunat – liposome có thể ức chế sự hình thành các mạch máu tươi, ngăn chặn sự hình thành và... 1.2 1.4 Nồng độ artesunat (mg/ml) Hình 3.1: Mối tương quan giữa diện tích pic và nồng độ artesunat Kết quả cho thấy rằng, trong khoảng nồng độ khảo sát (0,0265mg/ml – 1,35mg/ml) có sự phụ thuộc tuyến tính chặt chẽ giữa diện tích pic và nồng độ 23 artesunat Khoảng tuyến tính này phù hợp để xác định hàm lượng ART trong các mẫu thử (chất mang, hệ chất mang, nhũ tương) 3.1.2 Độ tan của artesunat trong... [5] 1.1.8 Các nghiên cứu về vi tiểu phân artesunat Với mục tiêu cải thiện đặc tính điều trị sốt rét (khắc phục nhược điểm về sinh khả dụng) và việc phát hiện ra tác dụng chống tế bào ung thư của các thuốc nhóm artemisinin đã tạo ra tiền đề cho việc nghiên cứu bào chế các hệ chứa ART có kích thước nano nhằm tạo ra đặc tính hướng đích cho dược chất ART Nhiều nghiên cứu trên thế giới và Việt Nam đã được... cho thấy việc giải phóng dược chất từ hệ nano chitosan-tripolyphosphat có kiểm soát và kéo dài hơn [5] 1.1.9 Một số chế phẩm chứa artesunat trên thị trường Hiện nay, trên thị trường chỉ còn 2 dạng chế phẩm chứa ART là viên nén phối hợp artesunat – piperaquin và bột tiêm artesunat lọ 60mg 1.2 ĐẠI CƯƠNG VỀ HỆ TỰ NHŨ HÓA 1.2.1 Khái niệm Hệ tự nhũ hóa (TNH) là hỗn hợp đẳng hướng của dầu, chất diện hoạt,... công thức có nồng độ 3 thành phần khác nhau - Bào chế hệ tự nhũ hóa dạng lỏng 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.4.1 Phương pháp bào chế hệ tự nhũ hóa a Phương pháp xác định độ tan của artesunat trong các chất mang/ hệ chất mang: Phương pháp xác định độ tan của dược chất trong các chất mang được tham khảo theo nghiên cứu của Setthacheewakul và các cộng sự [31] Trong điều kiện phòng thí nghiệm, nhiệt độ 250C... Dung dịch chuẩn artesunat: dung dịch chuẩn ART trong hỗn hợp đồng thể tích ethanol và acetonitril có nồng độ chính xác khoảng 1mg/ml Dung dịch thử: 21 - Mẫu thử là artesunat trong chất mang/ hỗn hợp chất mang: cân chính xác một lượng mẫu tương đương với 10mg ART, hoà tan bằng hỗn hợp đồng thể tích ethanol và acetonitril trong bình định mức 10ml Lọc dung dịch qua màng 0,45µm - Mẫu thử là artesunat trong . sinh khả dụng 5 1.1.7. Các phương pháp định lượng artesunat 5 1.1.8. Các nghiên cứu về vi tiểu phân artesunat 6 1.1.9. Một số chế phẩm chứa artesunat trên thị trường 7 1.2. ĐẠI CƯƠNG VỀ HỆ. tiến hành Nghiên cứu bào chế hệ tự nhũ hóa chứa artesunat với các mục tiêu: 1. Xây dựng được công thức hệ tự nhũ hóa chứa artesunat. 2. Đánh giá một số đặc tính của hệ tự nhũ chứa artesunat. artesunat và các dược chất sơ nước [28]. Zhao Chun-xia và các cộng sự đã tiến hành nghiên cứu tác dụng chống tạo mạch của nano artesunat – liposome trên tế bào ung thư gan HepG2. Kết quả nghiên