Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THOA TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN APAMID GIẢI PHÓNG KÉO DÀ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: 1. TS. Nguyễn Thị Thanh Duyên 2. DS. Nguyễn Xuân Tú Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp Dược Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2015
BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THOA TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN INDAPAMID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI – 2015 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THOA TIẾP TỤC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN INDAPAMID GIẢI PHÓNG KÉO DÀI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Thị Thanh Duyên DS Nguyễn Xuân Tú Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp Dược Trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2015 LỜI CẢM ƠN Với kính trọng lịng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn đến TS Nguyễn Thị Thanh Duyên DS Nguyễn Xuân Tú – người thầy tận tâm hướng dẫn, động viên giúp đỡ tơi q trình học tập, nghiên cứu để hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới tồn thể thầy giáo, anh chị kỹ thuật viên môn Công nghiệp Dược hết lòng quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt q trình tơi làm nghiên cứu môn Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội với tri thức tâm huyết truyền đạt cho kiến thức quý báu suốt thời gian học tập trường Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, cảm ơn người bạn, người anh, chị, em bên, quan tâm, giúp đỡ học tập sống Hà Nội, ngày 14 tháng 05 năm 2015 Sinh viên Nguyễn Thị Thoa MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Trang ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Đại cƣơng thuốc tác dụng kéo dài 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 u nhược điểm c a thuốc tác dụng k o dài .3 1.1.3 Hệ cốt hòa tan ăn mòn 1.1.4 Một số tá dược ảnh hưởng giải phóng dược chất dùng thực nghiệm 1.1.5 Một số mơ hình động học giải phóng dược chất từ dạng thuốc giải phóng kéo dài 1.2 Sơ lƣợc indapamid 10 1.2.1 Công thức cấu tạo, tính chất lý hóa 10 1.2.2 Dược động học 10 1.2.3 Tác dụng chế tác dụng 11 1.2.4 Chỉ định, chống định, tác dụng không mong muốn, liều dùng 11 1.2.5 Các dạng thuốc chứa indapamid thị trường 12 1.3 Một số nghiên cứu indapamid giải phóng kéo dài 13 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .16 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 16 2.1.1 Nguyên vật liệu 16 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 17 2.2 Nội dung nghiên cứu .17 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu .18 2.3.1 Phương pháp bào chế viên nén 18 2.3.2 Phương pháp đánh giá tiêu chuẩn chất lượng viên nén 18 2.3.3 Phương pháp thiết kế thí nghiệm tối ưu hóa cơng thức .22 Chƣơng THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ, BÀN LUẬN .23 3.1 Khảo sát lại số tiêu chí phƣơng pháp đánh giá chất lƣợng viên indapamid giải phóng kéo dài 23 3.1.1 Phương pháp đo độ hấp thụ UV vi sai bước sóng 23 3.1.2 Phương pháp HPLC 24 3.2 Khảo sát độ hòa tan từ viên đối chiếu Natrilix 1,5mg SR 27 3.3 Khảo sát yếu tố thuộc cơng thức ảnh hƣởng tới giải phóng dƣợc chất từ viên thực nghiệm 27 3.3.1 Khảo sát lượng tá dược HPMC K15M tạo cốt kiểm sốt giải phóng dược chất… 28 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng c a Poloxamer lên kiểm sốt giải phóng dược chất 30 3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng c a HPMC E15LV lên kiểm sốt giải phóng dược chất… 32 3.3.4 Khảo sát ảnh hưởng c a dicalci phosphat lên kiểm soát giải phóng dược chất… 33 3.4 Tối ƣu hóa cơng thức 35 3.4.1 Thiết kế thí nghiệm tiến hành tối ưu hóa .35 3.4.2 Phân tích ảnh hưởng c a biến độc lập tới giải phóng dược chất .37 3.4.3 Lựa chọn công thức tối ưu 41 3.4.4 Đề xuất số tiêu chất lượng cho viên indapamid 1,5 mg giải phóng kéo dài 42 3.5 Bàn luận 43 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 45 Kết luận .45 Đề xuất 45 PHỤ LỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CÁC CHỮ VIẾT TẮT CT : Công thức DC : Dược chất DCP : Dicalci phosphat DĐVN : Dược điển Việt Nam DSC : Quét nhiệt lượng vi sai (Differential Scanning Calorimetry) EC : Ethyl cellulose FT-IR : Quang phổ hồng ngoại biến đổi Fourier (Fourier Transform Infrared Spectroscopy) GPDC : Giải phóng dược chất GPKD : Giải phóng kéo dài HPC : Hydroxypropyl cellulose HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao HPMC : Hydroxypropyl methyl cellulose Na CMC : Natri carboxyl methyl cellulose PEO : Polyethylen oxid PVP K30 : Polyvinyl pyrolidon K30 SEM : Kính hiển vi điện tử quét (Scanning Electron Microscopy) SKD : Sinh khả dụng Spic : Diện tích pic TCNSX : Tiêu chuẩn nhà sản xuất TDKD : Tác dụng kéo dài TR : Thời gian lưu USP : Dược điển Mỹ VĐC : Viên đối chiếu VT : Viên tối ưu DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số loại HPMC thường sử dụng Bảng 1.2 Các dạng thuốc chứa indapamid thị trường 12 Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất nghiên cứu 16 Bảng 2.2 Thiết bị nghiên cứu 17 Bảng 2.3 Tương quan số Carr tính chất trơn chảy c a hạt/bột 19 Bảng 3.1 Hiệu mật độ quang ΔD c a dung dịch sau thêm chuẩn 23 Bảng 3.2 Diện tích pic thời gian lưu c a mẫu xác định tính thích 24 hợp Bảng 3.3 Diện tích pic thời gian lưu c a mẫu xác định độ đặc 24 hiệu Bảng 3.4 Diện tích pic thời gian lưu c a mẫu xác định khoảng 25 tuyến tính Bảng 3.5 Độ c a phương pháp HPLC dùng định lượng 26 indapamid Bảng 3.6 Diện tích pic thời gian lưu c a mẫu xác định độ 26 xác Bảng 3.7 % GPDC thời điểm c a viên đối chiếu 27 Bảng 3.8 Phương trình động học viên đối chiếu 27 Bảng 3.9 Công thức viên indapamid với lượng HPMC K15M khác 28 Bảng 3.10 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ HPMC K15M khác 29 Bảng 3.11 Công thức viên indapamid với lượng Poloxamer khác 30 Bảng 3.12 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ Poloxamer khác 30 Bảng 3.13 Công thức viên indapamid với lượng HPMC E15LV khác 32 Bảng 3.14 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ HPMC E15LV khác 32 Bảng 3.15 Công thức viên indapamid với lượng DCP khác 33 Bảng 3.16 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ DCP khác 34 Bảng 3.17 Các biến độc lập khoảng biến thiên 35 Bảng 3.18 Các yêu cầu với biến phụ thuộc 36 Bảng 3.19 Bảng kết thí nghiệm thiết kế theo phần mềm Modde 8.0 36 Bảng 3.20 Kết phân tích phương sai 37 Bảng 3.21 Một số tiêu chất lượng bào chế viên 41 Bảng 3.22 % GPDC c a viên tối ưu (T1, T2, T3) 41 Bảng 3.23 % GPDC c a viên tối ưu viên đối chiếu (VĐC) 42 Bảng 3.24 Tiêu chuẩn đề cho viên nén indapamid 1,5 mg GPKD 42 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1 Đồ thị hấp thu dược chất máu c a dạng thuốc Hình 1.2 Mơ hình hệ cốt hịa tan ăn mịn Hình 1.3 Cấu trúc phân tử HPMC Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo c a indapamid 10 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn mối tương quan hiệu mật độ quang với 23 nồng độ indapamid dung dịch đệm pH 6,8 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn đường tuyến tính phụ thuộc diện tích pic 25 nồng độ dung dịch indapamid Hình 3.3 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ HPMC K15M khác 29 Hình 3.4 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ Poloxamer khác 31 Hình 3.5 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ HPMC E15LV khác 33 Hình 3.6 % GPDC từ mẫu viên với tỷ lệ DCP khác 34 Hình 3.7 Mặt đáp biểu ảnh hưởng c a lượng HPMC K15M HPMC E15LV lên % GPDC thời điểm 4h (a), 8h (b) 16h (c) 38 (Poloxamer không đổi 12 mg) Hình 3.8 Mặt đáp biểu ảnh hưởng c a lượng HPMC E15LV Poloxamer lên % GPDC thời điểm 4h (a), 8h (b) 16h (c) (HPMC K15M không đổi 90 mg) 40 44 Về tối ưu hóa xây dựng cơng thức bào chế viên nén indapamid 1,5 mg GPKD: Viên nén indapamid 1,5 mg tối ưu hóa phần mềm Modde 8.0, bố trí thí nghiệm theo thiết kế mặt hợp tử tâm (CCF) Đánh giá mối quan hệ biến đầu vào (tỷ lệ HPMC K15M, HPMC E15LV, Poloxamer) với biến đầu (% GPDC 4h, 8h, 16h) phương trình bậc cho thấy mơ tả với thực nghiệm, mơ hình có khả dự đốn tốt Cơng thức tối ưu lựa chọn Động học giải phóng: kết thử độ hịa tan c a mẫu viên bào chế theo công thức tối ưu cho % GPDC tương đối đặn, chế kiểm soát theo chế: khuếch tán ăn mịn, chế ăn mịn chính, phù hợp với mơ hình GPKD c a dược chất k m tan nước indapamid Khi đánh giá động học giải phóng c a viên, mơ hình động học bậc cho giá trị R2 cao mô hình Higuchi, vậy, mơ hình động học giải phóng c a viên tn theo mơ hình động học bậc 0, điều thể tương đồng động học giải phóng viên tối ưu viên đối chiếu (Kết động học giải phóng c a viên tối ưu trình bày phụ lục 7) Về phương ph p bào chế viên nén: Từ tài liệu tham khảo [6], [18], [21] thực nghiệm cho thấy phương pháp tạo hạt ướt phương pháp phù hợp để bào chế viên n n indapamid 1,5 mg GPKD Đối chiếu với số nghiên cứu, có số bàn luận sau: - Obaidat A.A [20] dùng phương pháp dập thẳng, nghiên cứu c a dùng phương pháp tạo hạt, làm cho thời gian bào chế k o dài đảm bảo độ đồng cao, với viên có hàm lượng dược chất thấp, điều kiện trang thiết bị quy mơ cịn hạn chế phịng thí nghiệm - So với dùng phương pháp phun sấy c a Gowda D.V cộng [17], tạo hạt ướt thực phương pháp tốt tính thân thiện an tồn với mơi trường, phương pháp đánh giá hạt viên c a phương pháp tạo hạt đơn giản phân tích vi hạt c a phun sấy Tuy nhiên, ưu điểm c a phun sấy trội tiến hành với dược chất k m tan indapamid 45 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận Sau tiến hành nghiên cứu, thu số kết sau: Đã khảo s t số yếu tố thuộc cơng thức ảnh hưởng tới giải phóng dược chất từ viên nén indapamid 1,5 mg GPKD 16 in vitro: - Khảo sát ảnh hưởng c a HPMC K15M, DCP tới % GPDC theo xu hướng tăng lượng HPMC K15M, DCP làm chậm lại tốc độ GPDC - Khảo sát ảnh hưởng c a HPMC E15LV tới % GPDC theo xu hướng tăng lượng HPMC E15LV làm giảm 4h đầu cịn sau tùy vào mức độ phối hợp thích hợp với HPMC K15M làm tăng giảm GPDC - Khảo sát ảnh hưởng c a Poloxamer tới % GPDC theo xu hướng tăng lượng Poloxamer làm chậm giải phóng đầu tăng giải phóng cuối Đã tối ưu hóa, xây dựng cơng thức tối ưu cho viên nén indapamid 1,5 mg GPKD 16 quy mơ phịng thí nghiệm: - Đã tiến hành quy hoạch thực nghiệm, tối ưu hóa viên n n indapamid 1,5 mg GPKD phân tích ảnh hưởng c a biến độc lập: HPMC K15M, HPMC E15LV Poloxamer tới biến phụ thuộc: % GPDC 4h, 8h 16h - Đã xây dựng công thức tối ưu cho viên n n indapamid GPKD quy mô phịng thí nghiệm Viên bào chế đạt u cầu GPDC in vitro có mơ hình giải phóng c a viên thực nghiệm gần với động học giải phóng bậc tương tự viên đối chiếu Natrilix SR 1,5 mg (f2 = 67,90) - Đề xuất số tiêu chuẩn sở cho viên nén bào chế Đề xuất Từ kết thu được, chúng tơi có số đề xuất sau: - Nghiên cứu công thức tối ưu quy mô pilot quy mơ lớn hơn, đạt xây dựng hồ sơ thẩm định quy trình sản xuất - Nghiên cứu màng bao bảo vệ cho viên - Nghiên cứu độ ổn định cho viên tối ưu TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Bộ môn bào chế - Trường đại học Dược Hà Nội (2005), Một s chuyên đề bào chế hi n đại, Nxb Y học, tr 132-156 Bộ Y tế (2006), ược thư qu c gia Vi t Nam, Nxb Y học, bổ sung tr 653- 655 Bộ Y tế (2008), Kỹ thuật bào chế inh dược học dạng thu c, Nxb Y học, tập 2, tr 152-194 Bộ Y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV Bộ Y tế (2009), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm, Nxb Y học, tập 3, tr 52-53, 108110 Đoàn Minh Hải (2012), Nghiên cứu bào chế viên nén indapamid giải phóng kéo dài, Khóa luận tốt nghiệp dược sỹ đại học, trường Đại học Dược Hà Nội Nguyễn Trần Linh (2012), Một s phương pháp thiết kế thí nghi m t i ưu hóa ứng dụng bào chế, trường Đại học Dược Hà Nội Trần Thị Loan (2014), Tiếp tục nghiên cứu bào chế viên nén indapamid giải phóng kéo dài h c t thân nước, Khóa luận tốt nghiệp dược sỹ đại học, trường Đại học Dược Hà Nội Nguyễn Thị Tình (2013), Nghiên cứu bào chế viên nén indapamid 1,5mg giải phóng kéo dài, Khóa luận tốt nghiệp dược sỹ đại học, trường Đại học Dược Hà Nội 10 Nguyễn Lân Việt (2011), Tăng huyết áp - vấn đề cần quan tâm hơn, Viện Tim mạch Việt Nam, Hà Nội Tài liệu tiếng anh 11 Anal A K (2008), “Controlled ‐ Release Dosage Forms”, Pharmaceutical Sciences Encyclopedia: Drug Discovery, Development, and Manufacturing, pp 348-357, 371-376 12 Anwar H et al (2013), “Development and Evaluation of Sustained Release Matrix Tablets of Indapamide using Methocel K15M CR”, Journal of Applied Pharmaceutical Science, Vol 3(05), pp 085-090 13 Aulton M E (2002), “Pharmaceutics: The science of dosage form design”, Churchill Livingstone, London, UK, pp 299-301, 413-417 14 Babu Suresh R et al (1991), “Oral sustained release pharmaceutical formulation and process”, U.S Patent 5073380, issued December 17 15 Costa P and Sousa Lobo J M (2001), “Modeling and comparison of dissolution profiles”, European Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 13(2), pp 123-133 16 Dahan A., Miller J M., and Amidon G L (2009), “Prediction of solubility and permeability class membership: provisional BCS classification of the world's top oral drugs”, Aaps J., Vol 11(4), pp 740-6 17 Gowda D V., Khan M S, and Nagendra R (2010), “Spray dried indapamide microparticles for controlled release - novel approach”, International Journal of Pharma & Bio Sciences, Vol 1(4), pp 459-466 18 Hasanuzzaman et al (2011), “Formulation, evaluation and optimizayion of sustained release tablets of indapamide using hydrophilic matrix system”, International Journal of Pharma & Bio Sciences, Vol 3(3), pp 1831-1836 19 Martindale The Complete Drug Reference – 36th Edition, pp 1314 20 Obaidat A (2012), “Characterization and Evaluation of the Release Kinetics of a Model Poorly Water-Soluble and Low Dose Drug from Matrix Tablets Composed of Blends of Swellable and Erodible Polymers: Implications for Controlled and Complete Release”, Journal of Applied Pharmaceutical Science, Vol 02(04), pp 147-153 21 Rahman et al (2008 ), “Development of indapamide sustained release tablet using methocel K15M CR and a comparative study with a reference product”, Dhaka univ J Pharm Sci, pp 155-159 22 Robinson D M., Wellington K (2006), “Indapamide sustained release: a review of its use in the treatment of hypertension”, Drugs, Vol 66(2), pp 257271 23 Rowe R C., Sheskey P J., Quinn M E (2009), Handbook of pharmaceutical excipients, Pharmaceutical press, London, pp 94-96, 326-329 24 Sandip B et al (2008), “Modulation of drug release from hydrophilic matrices”, Pharmaceutical Technology Europe, pp 1-6 25 Servier Laboratories (2001), “Natrilix SR”, Certificate analysis – finished product, PF.T.CTR.A04.R37.06520.05, pp 56-69 26 Servier Laboratories (2013), “N TRILIX SR – Consumer medicine information”, Servier Laboratories (Australia), pp 1-6 27 Trademark of The Dow Chemical Company (2002), “METHOCEL Cellulose Ethers Technical Handbook”, Dow., pp 1-32 28 Trademark of The Dow Chemical Company (2000), “Using METHOCEL Cellulose Ethers for Controlled Release of Drugs in Hydrophilic Matrix Systems”, Dow., pp 1-36 29 USP 32 – NF 27 (2009), pp 2623-2624 PHỤ LỤC Phụ lục : Quy trình bào chế viên nén indapamid Phụ lục : Cách pha dung dịch chuẩn gốc, dung dịch chuẩn dung dịch chuẩn thêm phương pháp đánh giá GPDC từ mẫu viên Phụ lục : Hình ảnh sắc ký thử độ đặc hiệu c a indapamid với phương pháp HPLC Phụ lục : Cơng thức tính hàm lượng indapamid viên nén Phụ lục : Cơng thức tính % indapamid giải phóng thời điểm thử độ hịa tan Phụ lục : Hình ảnh phổ hấp thụ UV c a dung dịch indapamid µg/ml mơi trường đệm phosphat pH 6,8 Phụ lục : Kết động học giải phóng c a viên tối ưu viên đối chiếu Phụ lục Quy trình bào chế viên nén indapamid 1- Thành phần công thức STT Tên nguyên liệu Khối lượng/viên (mg) tỉ lệ/viên % KL/mẻ 500 viên (g) Indapamid nguyên liệu 1,54 0,77 0,77 PVP K30 10,00 5,00 5,00 Poloxamer 14,65 7,33 7,33 HPMC K15M 97,78 48,89 48,89 HPMC E15LV 10,26 5,13 5,13 Lactose 32,77 16,39 16,39 Dicalci phosphat 30,00 15,00 15,00 Magnesi stearat 2,00 1,00 1,00 Aerosil 1,00 0,50 0,50 10 Ethanol 96% Tổng Dung dịch dính vừa đ 200 mg 100% 100 g Ghi chú: indapamid ngun liệu tính theo indapamid khan theo cơng thức sau: mnguyên liệu = mindapamid 1,5 = =1,54 (mg) 97,4 / 100 a Trong đó: a hàm lượng indapamid nguyên liệu (a = 97,4%) 2- Sơ đồ bào chế (Hình PL1) HPMC K15M, HPMC E15LV, DCP, lactose Nghiền, rây, cân Indapamid, Poloxamer, PVP K30, ethanol Trộn bột kép Tạo khối ẩm, Dung dịch dính 30 phút Xát hạt Sấy Sửa hạt Aerosil, magnesi stearat Rây số 1000 Sấy tĩnh Nhiệt độ: 50-600C Thời gian: 1-2h Rây số 1000 Trộn tá dược trơn Dập viên Hình PL1 Sơ đồ bào chế viên nén indapamid 3- Các lưu ý quy trình bào chế - Các nguyên liệu: HPMC K15M, HPMC E15LV, DCP, lactose: rây qua rây 180; Aerosil magnesi stearat: rây qua rây 125 - Chuẩn bị dung dịch dính: dược chất, PVP K30, Poloxamer ethanol 96% - Nhào ẩm khối bột kép với dung dịch dính, tráng lại nhiều lần ethanol 96% cho khối ẩm đạt yêu cầu đưa hết lượng dược chất vào khối bột Phụ lục Cách pha dung dịch chuẩn gốc, dung dịch chuẩn dung dịch chuẩn thê phƣơng pháp đánh giá GPDC từ mẫu viên Dung dịch chuẩn gốc C0 nồng độ 1000µg/mL ethanol: Cân xác khoảng 25,0 mg indapamid chuẩn cho vào bình định mức 25 ml Thêm 20 ml ethanol 96%, siêu âm cho tan hoàn toàn Bổ sung ethanol 96% vừa đ 25 ml lắc Pha dung dịch chuẩn C2 nồng độ μg/ml đệm: Hút xác 5,0 ml dung dịch chuẩn gốc C0 vào bình định mức 50 ml Pha lỗng dung dịch đệm phosphat pH 6,8 vừa đ dung dịch chuẩn C1 có nồng độ 100 μg/ml Hút xác 2,0 ml dung dịch chuẩn C1 cho vào bình định mức 100 ml Bổ sung dung dịch đệm phosphat pH 6,8 vừa đ lắc Pha dung dịch chuẩn thêm C30 nồng độ 30 μg/ml đệm: Hút xác 3,0 ml dung dịch chuẩn gốc C0 cho vào bình định mức 100 ml Bổ sung dung dịch đệm phosphat pH 6,8 lắc Phụ lục Hình ảnh sắc ký thử độ đặc hiệu c a indapamid với phƣơng pháp HPLC 1//4.842/456972 mAU 55 254nm,4nm (1.00) 50 45 40 35 30 25 20 15 10 -5 -10 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 6.5 Hình PL3.1 Sắc ký indapamid mẫu chuẩn nồng độ µg/ml 1//4.849/454811 mAU 55 254nm,4nm (1.00) 50 45 40 35 30 25 20 15 10 -5 -10 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 Hình PL3.2 Sắc ký indapamid mẫu thử (viên tối ưu) 6.0 65 mAU 254nm,4nm (1.00) 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 -5 -10 -15 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 5.5 6.0 6.5 Hình PL3.3 Sắc ký indapamid mẫu trắng mAU 254nm,4nm (1.00) 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 -5 -10 -15 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 Hình PL3.4 Sắc ký indapamid mẫu placebo Phụ lục 4: Công thức tính h lƣợng indapamid viên nén Cơng thức tính hàm lượng indapamid viên n n thực nghiệm phương pháp HPLC: Hàm lượng % = mC a mtb S th 100% mth 1,5 S C Cơng thức tính hàm lượng indapamid viên nén thực nghiệm phương pháp đo quang: Hàm lượng % = Trong mC a mtb Dth 100% mth 1,5 DC - mC (mg): khối lượng bột indapamid nguyên liệu - a: hàm lượng indapamid nguyên liệu - mth (mg): khối lượng bột viên cân - mtb (mg): khối lượng viên trung bình - Sth, SC (mAU): diện tích pic c a mẫu thử mẫu chuẩn sắc ký đồ - ∆Dth, ∆DC: hiệu mật độ quang c a mẫu thử mẫu chuẩn Phụ lục 5: Cơng thức tính % indapamid giải phóng thời m thử độ hịa tan Tại thời điểm hút mẫu đầu tiên, % GPDC tính theo cơng thức (1), từ thời điểm thứ trở đi, lần hút 12 ml dịch hòa tan bổ sung lại 12 ml mơi trường có nồng độ µg/ml Như vậy, từ mẫu thứ 2, % GPDC tính hiệu chỉnh theo công thức (2): Dt0 1 10 0,5 %G0 100% Cchuân Cthêm Cthêm 10 10 10 a Dc (1) Dtn 1 10 0,5 12 %Gn 100% Gn1 Cchuân Cthêm Cthêm 10 10 10 a 500 Dc (2) Trong đó: G0, Gn-1, Gn: % indapamid giải phóng thời điểm đầu tiên, thời điểm thứ n-1 thời điểm thứ n Cchuẩn, Cthêm: dung dich indapamid chuẩn (~2 µg/ml) dung dịch chuẩn thêm (~30 µg/ml) ΔDt0, ΔDtn, ΔDc: hiệu độ hấp thụ UV bước sóng 240 nm 275 nm c a dung dịch thử hòa tan thời điểm đầu tiên, thời điểm thứ n c a dung dịch chuẩn a: hàm lượng (mg) indapamid có viên thử Phụ lục 6: Hình ảnh phổ hấp thụ UV c a dung dịch indapamid µg/ml trƣờng đệm phosphat pH 6,8 Hình PL6.1 Phổ UV c a dung dịch indapamid µg/ml dung dịch đệm phosphat pH 6,8 Hình PL6.2 Bước sóng hấp thụ cực đại c a indapamid dung dịch đệm phosphat pH 6,8 Phụ lục 7: Kết động học giải phóng c a viên tối ƣu v viên đối chiếu Động học giải phóng c a viên tối ưu viên đối chiếu tổng kết hình sau: VĐC y = 4.9113x + 3.2648 R² = 0.9956 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 VT y = 5.5213x + 0.0818 R² = 0.9973 10 12 14 16 VT VĐC 18 Hình PL7.1 Động học giải phóng c a viên tối ưu viên đối chiếu theo mơ hình động học bậc 100 VT y = 20.668x - 10.176 R² = 0.9370 80 60 VT VĐC VĐC y = 22.849x - 14.122 R² = 0.9077 40 20 0 0.5 1.5 2.5 3.5 4.5 -20 Hình PL7.2 Động học giải phóng c a viên tối ưu viên đối chiếu theo mơ hình động học Higuchi ... nghiên cứu viên nén indapamid 1,5 mg giải phóng k o dài, chưa đưa sản phẩm biệt dược thị trường Vì vậy, chúng tơi tiến hành thực đề tài: ? ?Tiếp tục nghiên cứu bào chế viên nén indapamid giải phóng. .. số nghiên cứu indapamid giải phóng kéo dài Trong nƣớc: Đo n Minh Hải (2012) [6], Nguyễn Thị Tình (2013) [9] Trần Thị Loan (2014) 8: nghiên cứu bào chế viên n n indapamid giải phóng k o dài. .. công thức indapamid giải phóng kéo dài [17] Hasanuzza a v cộng (2011): nghiên cứu bào chế viên n n indapamid 1,5 mg giải phóng k o dài 16h phương pháp xát hạt ướt sử dụng HPMC K15M Viên dập với