BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  NGUYỄN THỊ HOÀI THU NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG DO TRYPANOSOMA EVANSI GÂY BỆNH THỰC NGHIỆM TRÊN CHÓ LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI – 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM  NGUYỄN THỊ HOÀI THU NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG DO TRYPANOSOMA EVANSI GÂY BỆNH THỰC NGHIỆM TRÊN CHÓ CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y MÃ NGÀNH : 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : PGS.TS. PHẠM NGỌC THẠCH HÀ NỘI – 2014 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Tôi xin cam đoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõ nguồn gốc. Mọi sự giúp đỡ đã được cảm ơn. Hà Nội, ngày tháng năm 2014. Tác giả luận văn Nguyễn Thị Hoài Thu Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, trước hết tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: PGS.TS. Phạm Ngọc Thạch, Bộ môn Nội - Chẩn - Dược - Độc chất, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam, người đã tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực tập và hoàn thành luận văn này. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Chủ nhiệm Khoa Thú y, các thầy, các cô giảng dạy và nghiên cứu trong Khoa Thú y; Bộ môn Nội - Chẩn - Dược - Độc chất, Khoa Thú y, Học viện Nông nghiệp Việt Nam đã tận tình giúp đỡ tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn này. Qua đây cho tôi được gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè và đồng nghiệp đã động viên, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài. Một lần nữa tôi xin chân thành cảm ơn mọi sự giúp đỡ quý báu trên! Hà Nội, ngày tháng năm 2014. Tác giả luận văn Nguyễn Thị Hoài Thu Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC VIẾT TẮT………………………………………………………….viii MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Sơ lược lịch sử nghiên cứu Tiên mao trùng 3 1.1.1. Sơ lược lịch sử nghiên cứu Tiên mao trùng trên thế giới 3 1.1.2. Sơ lược lịch sử nghiên cứu Tiên mao trùng ở Việt Nam 4 1.2. Một số đặc điểm và phân loại Tiên mao trùng 5 1.2.1. Vị trí của Tiên mao trùng trong hệ thống phân loại động vật 5 1.2.2. Đặc điểm hình thái của Trypanosoma evansi 6 1.2.3. Một số đặc điểm sinh học của Trypanosoma evansi 8 1.2.4. Đặc điểm cấu trúc của Trypanosoma evansi 9 1.3. Những nghiên cứu về bệnh lý lâm sàng của trâu bò mắc bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi 10 1.3.1. Triệu chứng bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây bệnh trên trâu bò 10 1.3.2. Bệnh tích bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây bệnh trên trâu bò 12 1.4. Một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa trâu bò mắc bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi 13 1.5. Những nghiên cứu về miễn dịch của Trypanosoma evansi 15 CHƯƠNG 2. NỘI DUNG – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1. Địa điểm và đối tượng nghiên cứu 25 2.1.1. Địa điểm nghiên cứu 25 2.1.2. Đối tượng nghiên cứu 25 2.2. Nội dung nghiên cứu 25 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v 2.3. Nguyên liệu nghiên cứu 25 2.3.1. Động vật thí nghiệm 25 2.3.2. Giống Trypanosoma evansi 26 2.4. Phương pháp nghiên cứu 26 2.4.1. Phương pháp gây nhiễm thực nghiệm Trypanosoma evansi trên động vật thí nghiệm 26 2.4.2. Phương pháp phát hiện Tiên mao trùng 26 2.5. Một số chỉ tiêu lâm sàng và huyết học 27 2.5.1. Các chỉ tiêu lâm sàng 27 2.5.2. Các chỉ tiêu huyết học 27 2.6. Phương pháp xử lý số liệu 28 CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30 3.1. Theo dõi đặc tính gây bệnh của Trypanosoma evansi trong máu chó được gây nhiễm 30 3.2. Thân nhiệt của chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi 32 3.3. Tần số hô hấp của chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi 33 3.4. Tần số tim của chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi 34 3.5. Biểu hiện lâm sàng của chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi 35 3.6. Một số chỉ tiêu huyết học của chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi 38 3.6.1. Số lượng hồng câu 39 3.6.2. Tỷ khối huyết cầu 40 3.6.3. Thể tích trung bình của hồng cầu 42 3.6.4.Hàm lượng huyết sắc tố 42 3.6.5. Lượng huyết sắc tố trung bình của hồng cầu 43 3.6.6. Số lượng bạch cầu 44 3.6.7. Công thức bạch cầu 45 3.6.8. Hàm lượng đường huyết 50 3.6.9. Độ dự trữ kiềm 52 3.6.10. Protein tổng số và các tiểu phần trong huyết thanh 53 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1. Đặc tính gây bệnh của Tiên mao trùng do Trypanososma evansi trong máu chó sau khi được gây nhiễm T.evansi 31 Bảng 3.2. Nhiệt độ, tần số hô hấp và tần số tim mạch của chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi (n=10) 33 Bảng 3.3. Biểu hiện lâm sàng ở chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi (%) (n = 10) 36 Bảng 3.4. Số lượng hồng cầu, tỷ khối huyết cầu, thể tích bình quân của hồng cầu ở chó được gây nhiễm T.evansi (n=10) 41 Bảng 3.5. Hàm lượng huyết sắc tố và lượng huyết sắc tố bình quân của hồng cầu ở chó được gây nhiễm T.evansi (n=10) 44 Bảng 3.6. Số lượng bạch cầu của máu chó được gây nhiễm Trypanosoma evansi 47 Bảng 3.7. Hàm lượng đường huyết và độ dự trữ kiềm trong máu của chó được gây nhiễm T.evansi (n=10) 51 Bảng 3.8. Protein tổng số và các tiểu phần protein trong huyết thanh của chó được gây nhiễm T.evansi (n=10) 54 Bảng 3.9. Bệnh tích đại thể của chó được gây nhiễm Tiên mao trùng T.evansi (%) (n=10) 56 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii DANH MỤC HÌNH Hình 3.1. Niêm mạc nhợt nhạt (chó nhiễm T.evansi) 37 Hình 3.2. Mắt bị viêm giác mạc (chó nhiễm T.evansi) 37 Hình 3.3. Chó nhiễm T.evansi mệt mỏi ủ rũ rũ, gầy gò, lông xù 37 Hình 3.4. Biểu hiện triệu chứng thần kinh (chó nhiễm T.evansi) 37 Hình 3.5. Chó nhiễm T.evansi có biểu hiện phù nề 38 Hình 3.6. Manh tràng xuất huyết………………………………………… ……59 Hình 3.7. Hạch màng treo treo ruột sưng 57 Hình 3.8. Hạch dưới hàm sưng …………………………………… …… ……….59 Hình 3.9. Những cục máu đông trong tim 57 Hình 3.10. Phổi xuất huyết ……………………………………………………….…59 Hình 3.11. Trong phế nang chứa đầy bọt khí 57 Hình 3.12. Thanh quản chứa đầy bọt khí…………………………………………….60 Hình 3.13. Xuất huyết rìa gan 58 Hình 3.14. Lách xuất huyết ……………………………………………… ……… 60 Hình 3.15. Thận xuất huyết, sưng to 58 Hình 3.16. Thận hoại tử …………………………………………………………….60 Hình 3.17. Xuất huyết ở trong thận 58 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CATT Card Agglutination Test for Trypanosomiasis cs Cộng sự EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay IFAT Indirect Fluorescent Antibody Test LATEX Latex agglutination test MI Mouse Inoculation SAT Slide Agglutination test T. evansi Trypanosoma evansi TMT Tiên mao trùng VAT Variant Antigennic Types Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 1 MỞ ĐẦU 1. Đặt vấn đề Trong những năm qua Việt Nam đã tiến hành thực hiện nhiều chính sách, đổi mới nhằm phát triển ngành nông nghiệp nước nhà. Trong đó ngành chăn nuôi ngày càng có vị trí quan trọng đối với nền kinh tế quốc dân. Đặc biệt chăn nuôi trâu bò được xác định là một trong những chương trình phát triển nông nghiệp trọng điểm đem lại hiệu quả cao với các giá trị kinh tế đem lại từ sản phẩm như thịt, sữa, da, sừng,… Tuy nhiên, việc đẩy mạnh phát triển chăn nuôi đàn trâu bò ở nước ta vẫn còn gặp nhiều khó khăn và một trong những thách thức của Việt Nam chính là tình hình dịch bệnh phức tạp. Bên cạnh các bệnh truyền nhiễm vẫn luôn được chú ý thì thực trạng bệnh ký sinh trùng tồn tại trên đàn trâu bò lại ít được quan tâm và gây tác động xấu tới súc vật nuôi. Chúng thường làm giảm khả năng sinh trưởng và phát triển, giảm chất lượng thực phẩm, phẩm chất da lông, giảm sức cày kéo, giảm sản lượng sữa, Phần lớn các ký sinh trùng gây bệnh cho vật nuôi ở thể mạn tính, tác hại của chúng là âm thầm và dai dẳng nên ở nhiều địa phương, các cấp chính quyền cũng như người chăn nuôi chưa quan tâm đúng mức tới việc phòng trị bệnh ký sinh trùng cho gia súc. Một trong những bệnh ký sinh trùng gây thiệt hại lớn trong chăn nuôi đó là bệnh Tiên mao trùng trâu, bò (Trypanosomiasis). Đây là bệnh ký sinh trùng do loài Trypanosoma evansi (T.evansi) gây ra. Chúng tiết độc tố Trypanotoxin vào máu. Loài ruồi, mòng là các môi giới trung gian truyền mầm bệnh Trypanosoma evansi, khi vào cơ thể gia súc chúng sinh sản nhanh, làm vỡ hồng cầu, con vật bị thiếu máu trầm trọng, làm thay đổi một số chỉ tiêu huyết học, ảnh hưởng đến chức năng sinh lý. Chúng làm mức tăng trưởng giảm, sức đề kháng của cơ thể yếu đi tạo cơ hội cho một số bệnh truyền nhiễm kế phát. [...]... một số đặc điểm bệnh lý bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây bệnh thực nghiệm trên chó 2 Mục tiêu của đề tài - Xác định được đặc tính gây bệnh của Trypanosoma evansi trên chó gây bệnh thực nghiệm - Xác định được sự biến đổi bệnh lý của chó được gây nhiễm T .evansi Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 2 CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược lịch sử nghiên. .. thương bệnh lý ở chó sau khi gây nhiễm Trypanosoma evansi thực nghiệm 2.3 Nguyên liệu nghiên cứu 2.3.1 Động vật thí nghiệm Chó được gây bệnh là chó khỏe mạnh, không nhiễm Tiên mao trùng (T .evansi) Trước khi gây bệnh chúng tôi tiến hành kiểm tra Tiên mao trùng (T .evansi) trong máu chó (xem tươi, gây nhiễm trên chuột nhắt trắng, ) và cho kết quả âm tính Chó thí nghiệm: chúng tôi tiến hành nghiên cứu trên. .. Trypanosoma evansi trên chó gây bệnh thực nghiệm 2.2 Nội dung nghiên cứu - Xác định đặc tính gây bệnh của Trypanosoma evansi trên chó gây bệnh thực nghiệm - Theo dõi triệu chứng lâm sàng ở chó sau khi gây nhiễm Trypanosoma evansi (sau gây nhiễm 6h, 12h, 24h, 36h, 48h, 72h, 84h, 96h,…360h) - Khảo sát sự biến đổi một số chỉ tiêu huyết học của chó sau khi gây nhiễm Trypanosoma evansi (sau gây nhiễm 6h, 12h,... các đặc điểm sinh lý, sinh hóa máu và tác động của Trypanosoma evansi gây ra trên chó tại phòng thí nghiệm nhằm bổ sung tư liệu khoa học về bệnh ký sinh trung đường máu do Trypanosoma evansi gây ra Qua đó đề xuất một số phương pháp nghiên cứu bệnh ký sinh trung đường máu do Trypanosoma evansi lưu hành trên trâu, bò Xuất phát từ những yêu cầu khoa học nói trên, chúng tôi tiến hành đề tài: Nghiên cứu một. .. điều kiện để Tiên mao trùng phát triển gây tác hại cho trâu, bò Qua quá trình nghiên cứu bệnh Tiên mao trùng, Trịnh Văn Thịnh (1982), Đoàn Văn Phúc (1965), Phạm Sỹ Lăng (1982) đã đi đến kết luận: Trypanosoma evansi là tác nhân gây bệnh Tiên mao trùng, là một trong những tác nhân gây thiệt hại cho đàn trâu, bò ở nước ta Trypanosoma evansi là nguyên nhân chủ yếu gây bệnh, kết hợp với một số nguyên nhân... gambiense, Trypanosoma simiae, Trypanosoma cruzi Trong số các loài kể trên thì Trypanosoma evansi là loài phổ biến nhất, phân bố ở khắp nơi trên thế giới, gây bệnh cho hầu hết các loài động vật có vú trừ người, chiếm ưu thế ở vùng cận đông, châu Á và châu Mĩ la tinh 1.1.2 Sơ lược lịch sử nghiên cứu Tiên mao trùng ở Việt Nam Ở nước ta, bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây nên được phát hiện đầu tiên. .. chọn lọc Chính vì nhứng lý do trên, việc chẩn đoán Tiên mao trùng còn gặp nhiều khó khăn nhất là trong thời kỳ Tiên mao trùng không xuất hiện ở mạch máu ngoại vi Bởi vậy việc tìm ra một phương pháp chẩn đoán chính xác, nhanh nhạy đang là một vấn đề được các nhà khoa học quan tâm đến Đối với bệnh Tiên mao trùng do T .evansi gây ra từ lâu một số nhà khoa học có nhận xét: sau một cơn bệnh cấp tính Học viện... vật học của Tiên mao trùng trên đã đi đến kết luận: " Tất cả các loài Tiên mao trùng đều có những chủng gốc châu Âu, châu Phi, châu Á, châu Mỹ của một loài duy nhất là Trypanosoma evansi" Tổ chức dịch tễ thế giới (OIE) đã thông báo hiện nay có 7 loài Tiên mao trùng gây bệnh cho động vật có vú và người là: Trypanosoma evansi, Trypanosoma vivax, Trypanosoma brucei, Trypanosoma congolence, Trypanosoma. .. 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Sơ lược lịch sử nghiên cứu Tiên mao trùng 1.1.1 Sơ lược lịch sử nghiên cứu Tiên mao trùng trên thế giới Trypanosoma đã được các nhà khoa học phát hiện rất sớm: năm 1837, Done phát hiện một loài Trypanosoma trong ruột người, năm 1841 Valetin tìm ra trùng roi (Trypanosoma) đầu tiên trong máu một loài cá Sau đó nhiều loài Tiên mao trùng khác đã được phát hiện trong máu nhiều loài... 2.3.2 Giống Trypanosoma evansi Trypanosoma evansi được tìm thấy ở máu trâu Bắc Kạn và được giữ giống qua chuột bạch được cấy truyền T .evansi 2.4 Phương pháp nghiên cứu 2.4.1 Phương pháp gây nhiễm thực nghiệm Trypanosoma evansi trên động vật thí nghiệm Gây nhiễm T .evansi cho chuột nhắt trắng Qua điều tra trâu, bò nhiễm Tiên mao trùng tại tỉnh Bắc Kạn bằng cách soi tươi trên kính hiển vi tìm T .evansi Những . cứu một số đặc điểm bệnh lý bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây bệnh thực nghiệm trên chó . 2. Mục tiêu của đề tài - Xác định được đặc tính gây bệnh của Trypanosoma evansi trên chó. NAM  NGUYỄN THỊ HOÀI THU NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG DO TRYPANOSOMA EVANSI GÂY BỆNH THỰC NGHIỆM TRÊN CHÓ CHUYÊN NGÀNH : THÚ Y MÃ NGÀNH. do Trypanosoma evansi gây bệnh trên trâu bò 10 1.3.2. Bệnh tích bệnh Tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây bệnh trên trâu bò 12 1.4. Một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hóa trâu bò mắc bệnh Tiên